JPH0477730B2 - - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

本発明は、抗インフルエンザウイルス剤に関す
るものであり、更に詳しくは、下記式（） ［式中、Ｒは、水素原子であるか、もしくはカ
フエオイル基：

【式】である］ で表わされる化合物を有効成分とする抗インフル
エンザウイルス剤に関する。 感冒の流行は、毎年、都市部、地方を問わず発
生している。しかし、感冒の主たる原因であるイ
ンフルエンザウイルスの感染の予防は、ワクチン
に頼らざるをえず、その場合には、流行ウイルス
種の把握無しにそれを行うことは難しい。又、発
症後の治療に際してもインフルエンザウイルスに
よる感冒に有効かつ安全な薬剤は未だ提供されて
おらず、解熱消炎鎮痛剤による対症療法、抗生物
質による二次感染の治療のみが行なわれている現
状である。そこで、真に感冒に有効かつ安全な薬
剤の開発が望まれている。 本発明者らは、かかる実情に鑑み、感冒治療に
使用しうる物質を、長年にわたり使用されてきた
和漢薬の成分中から見い出すこと、特にインフル
エンザウイルス類に対して有効な薬効を示す化合
物を見い出すことを目的として鋭意研究を重ねて
きた。その結果、上述した式（）で表わされる
化合物が抗インフルエンザウイルス作用を有する
ことを発見し、安全性等を調査、検討した結果、
抗インフルエンザウイルス剤として感冒に対し、
顕著な薬効を示すことを確認し、本発明を完成し
た。 前掲の式（）においてＲが水素原子であるク
ロロゲン酸、およびＲがカフエオイル基である
３，５，−ジカフエオイルキナ酸は、下記の文献
に記されているように既知の化合物であり、和漢
薬中に限らず植物界に広く存在している物質であ
る。 クロロゲン酸（chlorogenic acid）：THE
MERCK、INDEX・TENTH EDITION，page
301 ３，５，−ジカフエオイルキナ酸（３，５，−
dicaffeoylquinic acid）：中葯大辞典・附編 化
学成分索引442ページ クロロゲン酸は、現在、市販されている化合物
であり、このものは、例えばアメリカ合衆国のア
ルドリツチ社（Aldrich）から購入することがで
きる。また、３，５，−ジカフエオイルキナ酸は、
ヒマワリ（Helianthus annuus）種子のメタノー
ル抽出エキスに向流分配操作を施し精製すること
により得られることが知られている｛K.L.
Mikolajczak，C.R.Smith，Jr.，and I.A.Wolff
Jpirnal of Agricultural and Food Chemistry.
Vol.18，NO1，27〜32，（1970）｝。また、３，
５，−ジカフエオイルキナ酸の別の製造方法とし
ては次の具体例に示す如き方法がある。 具体例 スイカズラ科（Caprifoliaceae）のスイカズラ
（Lonicera Japonica THUNB.）の花蕾である
金銀花（LONICERAE FSOS）粉末３Kgにメタ
ノール20を加え、６時間加熱還流抽出し、冷却
後抽出液を過した。残渣に更にメタノール15
を加え４時間加熱還流抽出し、冷却後抽出液を
過した。同様の操作を更にもう一度繰り返し、合
計３回の抽出により得られた抽出液を合せ、メタ
ノールを減圧留去しメタノールエキス1.13Kgを得
た。次にこのメタノールエキスを350〜400ｇずつ
３回に分け、それぞれを1.5の水に溶解し、1.5
のエーテルで３回分配した後、水層を更に１
のｎ−ブタノールで３回分配した。このｎ−ブタ
ノール層からｎ−ブタノールを留去しｎ−ブタノ
ールエキスを合計221.7ｇを得た。このｎ−ブタ
ノールエキスのうち97.4ｇを分取高速液体クロマ
トグラフイー〔装置：Waters prep LC／
System 500A，カラム：ウオーターズ社製
Prep PAK−500／C18（５×30cm）２本，検出
器：示差屈折計（RI），移動相溶媒：水−メタノ
ール（２：１），移動相流速：150ml／min〕に付
し、ｎ−ブタノールエキスを移動層溶媒100mlに
溶解したものを２回に分けて注入した後、40分〜
50分で溶出した部分（分画名：LBu3）を分取し
溶媒留去し、LBu3を18.9ｇ得た。 このLBu3を再度分取高速液体クロマトグラフ
イー（使用カラム数を１本とした以外は、装置、
条件等は前述と同様である）に付し、注入後12分
〜30分で溶出した部分（分画名：LBu33）を分取
し、溶媒留去し、LBu33を9.4ｇ得た。 次にLBu33を約2.3ｇ〜2.5ｇづつ４回に分け、
それぞれを、フアルマシア製セフアデツクスLH
−20を用いたカラムクロマトグラフイー（カラム
サイズ：27mmφ×85mm）に付し、水−エタノール
（７：３）で溶出させ、溶媒を約２流した後に
溶出した分画を１分取し、溶媒を留去して、白
色粉末合計6.1ｇを得た。 ここで得られた物質の性状をFD−MAS，UV
吸収，IR吸収，¹H−NMR，¹³C−NMRスペクト
ルにより確認し、３，５，−ジカフエオイルキナ
酸と同定した。 以下に、その物性値を示す。 ３，５，−ジカフエオイルキナ酸 性状：白色粉末 比旋光度〔α〕²⁰ _D（ｃ＝0.55，MeOH）：−
158.2゜FD−MASスペクトル（ｍ／ｚ）：517
（M⁺＋１）UV吸収スペクトルλ^MeOH _nax：332nm
（ε＝28700）IR吸収スペクトルνmax（cm^-1） 3100〜3600，1700，1690，1600，1520 ¹H−NMRスペクトル（in C₅D₅N） δppm：3.02（4H，ｍ），4.68（1H，dd，Ｊ＝6.3
Hz），6.18（2H，ｍ），6.48（2H，ｄ，Ｊ＝
16Hz），6.8〜7.4（6H），7.86（1H，ｄ，Ｊ
＝16Hz），7.94（1H，ｄ，Ｊ＝16Hz） ¹³C−NMRスペクトル（in CD₃OD） δppm：36.0（ｔ），37.8（ｔ），70.9（ｄ），72.0
（ｄ），72.6（ｄ），74.8（ｓ），115.1（ｄ），
115.3（ｄ），115.4（ｄ），115.6（ｄ），116.6
（ｄ），123.0（ｄ），123.1（ｄ），127.8（ｓ），
127.9（ｓ），146.6（ｓ），147.0（ｄ），147.1
（ｄ），149.3（ｓ），149.4（ｓ），168.5（ｓ），
168.9（ｓ），177.4（ｓ） 次に、前掲の式（）の化合物が抗ウイルス作
用を示すことについて実験例を示すとともにその
安全性について述べる。 実験例１（インフルエンザウイルス感染動物の生
存率に及ぼす影響について） ddY系SPFマウス（♀：１群20匹）に、インフ
ルエンザウイルス（Ａ／PR／８／34／HON1株）
のLD₈₀に相当する量を経鼻感染させた。前掲式
（）の化合物を、感染１日前から、１日１回５
日間連続経口投与し、マウスの生存を指標に14日
間状態を観察した。その結果を表１及び第１図、
第２図に示す。なお、クロロゲン酸は、市販の物
を、滅菌精製水に溶解して用い。コントロールと
しては滅菌精製水を投与した。また、３，５，−
ジカフエオイルキナ酸は、具体例と同様の方法に
より製造した物を、0.5％エタノールに溶解した
ものを用い、コントロールとしては0.5％エタノ
ールを投与した。

【表】

【表】 実験例２（インフルエンザウイルス感染動物の肺
に及ぼす影響について） ddY系SPFマウス（♀：１群10匹）に、インフ
ルエンザウイルス（Ａ／PR／８／34／HON1株）
のLD₈₀に相当する量を経鼻感染させた。前掲式
（）の化合物を、感染１日前から、１日１回５
日間連続経口投与し、感染４日後にマウスを屠殺
し、肺を摘出した。その重量から、肺指数を算出
した。（インフルエンザウイルスは、その感染の
進行に伴い、咽頭気管支炎やウイルス性肺炎等を
併発し、肺にかなりの炎症を引き起し、ガス交換
を困難にし、死に至らしめる。従つて、炎症によ
つて増加した肺湿潤量（肺重量）を減少させると
いうことは、すなわちインフルエンザウイルス感
染症状の改善を意味するものであり、同時に肺重
量に対する体重の比である肺指数の値がコントロ
ールに比べて低いということもインフルエンザウ
イルス感染症状の改善を意味するものである。）
その結果を表２に示す。なお、コントロール群に
は滅菌精製水が投与された。

【表】 〓 薬物投与群の〓

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ 式： （式中、Ｒは、水素原子であるか、もしくはカ
   フエオイル基： 【式】である） で表わされる化合物を有効成分とすることを特徴
   とする抗インフルエンザウイルス剤。