JPH0479352B2 - - Google Patents

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JPH0479352B2
JPH0479352B2 JP60201872A JP20187285A JPH0479352B2 JP H0479352 B2 JPH0479352 B2 JP H0479352B2 JP 60201872 A JP60201872 A JP 60201872A JP 20187285 A JP20187285 A JP 20187285A JP H0479352 B2 JPH0479352 B2 JP H0479352B2
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lower alkyl
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hydroxy
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Furai Gyuntaa
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Boehringer Mannheim GmbH
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Description

【発明の詳細な説明】
産業上の利用分野 本発明は色原体の酸化性カツプリングによりレ
ドツクス−系を検出する薬剤及び検出法に使用さ
れる化合物に関する。 従来の技術 分析化学にとつても医学診断にとつても、適当
な色原体物質を用い、ペルオキシダーゼ又は過酸
化性作用物質の触媒作用下に過酸化水素量を検出
することは非常に重要である。このことは特に、
基質と相応する基質オキシダーゼ及び酸素との反
応の中間体として過酸化水素を形成し引続き適当
な色原体物質の存在で、有利に触媒としてのペル
オキシダーゼ（POD）の存在下に、光学的に確
認可能で、生じた過酸化水素に対して定量的関係
にある化合物に変じる多くの検出法にあてはま
る。更に、ペルオキシダーゼは、免疫テストにお
いて屡々酵素−マーカーとして使用され、過酸化
水素及び前記色原体物質の添加により検出され
る。 例としては、次の化合物が挙げられ、ここで括
弧内に存在する相応するオキシダーゼは過酸化水
素形成系である： グルコース（グルコースオキシダーゼ）、ガラ
クトース（ガラクトースオキシダーゼ）、Ｌ−ア
ミノ酸（Ｌ−アミノ酸オキシダーゼ）、コレステ
リン（コレステリンオキシダーゼ）、尿酸（ウリ
カーゼ）、サルコシン（サルコシンオキシダー
ゼ）、グリセリン（グリセリンオキシダーゼ）、グ
リセリンホスフエート（グリセリンホスフエート
オキシダーゼ）、ピルベート（ピルベートオキシ
ダーゼ）。 過酸化水素／ペルオキシダーゼの検出のため
に、既に多くの色原体もしくは指示薬系は挙げら
れており、使用されている。最も公知なものの１
つは、トリンダー（Trinder）によりアン・クリ
ニ・ビオケム（Ann.Clin.Biochem.）６巻（1969
年）24〜27頁に記載されているものであり、これ
では、これではフエノールがPODの存在でH2O2
酸化性の作用下に４−アミノアンチピリンとカツ
プリングして色素になる。この際カツプリング成
分としてのフエノールの代りにフエノール誘導
体、アニリン誘導体、ナフトール、ナフトール誘
導体、ナフチルアミン、ナフチルアミン誘導体又
は類似の反応性物質が使用できる。カツプリング
成分としての４−アミノアンチピリンは、例えば
アミノアンチピリン誘導体、バニリンジアミンス
ルホン酸、メチルベンズチアゾリノンヒドラゾン
（MBTH）、スルホン化されたメチルベンズチア
ゾリノンヒドラゾン（SMBTH）、ど置換されて
いてよい。 更に、例えば酵素反応時に遊離する芳香族アミ
ンを測定するために、酸化性カツプリングが使用
される。γ−グルタミルトランスペプチダーゼ
（γ−GT）及びロイシンアミノペプチダーゼ
（LAP）の検出並びにトロンビンの検出は、診断
の目的にとつて特に重要である。この場合に、ア
ミノ酸配列がそれぞれの酵素に一致し、そのアミ
ド部分は芳香アミン殊にフエニレンジアミン又は
アミノフエノール又はその誘導体であるペプチド
アミド（これは前記反応のカツプリング成分とし
て使用できる）を、まず酵素で分解し、次いで、
カツプリング成分としてのフエノール又はアニリ
ンを用い、酸化剤により酸化して色素にする（西
ドイツ特許公開DE−A3331588号及び欧州特許公
開EP−A76042号明細書参照）。 この検出反応は、キユベツト中でも乾燥試薬担
持材上でも実施できる。この際その定量は光度計
で、透過率測定、反射光度計で、反射測定又は比
色を用いて眼により比較することにより行なう。 文献中には、４−アミノアンチピリンもしくは
置換されたベンゾチアゾリノンヒドラゾンの縮合
による、過酸化水素に関する敏感な検出系を製造
することのできる多くのアニリン誘導体が記載さ
れている（西ドイツ特許DE−Ｃ−2833612号、欧
州特許EP−Ａ−7787号、西ドイツ特許DE−Ａ−
3037342号）。こうして形成されたカツプリング生
成物は、高いモル吸光係数を有し、これは、相応
する過酸化水素形成化合物の検出のために好適で
あることを示している。このカツプリング生成物
の血清成分に対する高い障害性が欠点として挙げ
られ、30％より高い純粋な水溶液に比べた吸光度
差は、部分的に、化合物又はカツプリング生成物
の不充分な安定性を示している。 発明が解決しようとする問題点 従つて、本発明の課題は、殊に過酸化水素もし
くは過酸化性作用物質及び血清中に含まれる障害
物質と反応しない芳香族のカツプリングしうるア
ミンの検出のために、弱酸性〜弱アルカリ性領域
で安定であり、従つてキユベツトテストでも、乾
燥試薬担持材を得るために使用可能なマトリツク
ス中でも使用することのできる色形成剤としての
フエノール−又はアニリン誘導体を見つけること
であつた。 問題点を解決する手段 ところで、意外にも、次の式のアニリン誘導
体中に、前記要求をみたす化合物が見付けられ
た。 一般式： ［式中R1は水素、低級アルキル及びアリール
であつてよく、R2は水素、低級アルキル基であ
り、これはヒドロキシ−、アミノ−、カルボキシ
−、低級アルコキシカルボニル−、低級アルカノ
イルアミド基、アリール低級アルキル及びアリー
ル及び構造：
【式】 （R5は水素又は低級アルキル基であつてよく、
R6はヒドロキシ−、低級アルコキシ、低級アル
キル又はアリール基である）の基で置換されてい
てよく、R3は水素、カルボキシ又はハロゲンで
あつてよく、R4及びR4′は水素、ハロゲン、カル
ボキシ、低級アルコキシ又は有利にｍ−位に存在
する低級アルキル基であり、R1とR2もしくはR2
とR4もしくはR4とR4′は双方の基が相互にオルト
位に存在する場合に、一緒になつてＣ−原子数２
〜６の飽和又は不飽和の炭化水素基を形成してよ
く、これらは、ヒドロキシ又はオキソ基で置換さ
れていてよい］のアニリン誘導体又は酸又は塩基
とのその塩をトリンダー反応の色形成剤として使
用するができる。 明細書に使用されている「低級アルキル」と
は、Ｃ−原子数１〜６有利に１〜３の直鎖又は分
子数のアルキル基である。その例は、メチル−、
エチル−、イソプロピル−、イソブチル−又はｔ
−ブチル基である。 用語「アリール」とは、有利に、付加的に低級
アルキル又はアルコキシ又はハロゲンにより置換
されていてよいフエニル基及び部分水素化されて
いてよいナフチル基である。ハロゲンには、弗
素、塩素、臭素及び沃素が包含され、この際弗素
及び塩素が有利である。 R1とR4もしくはR2とR4もしくはR4とR4′は一
緒になつて飽和又は不飽和の炭化水素を形成して
よい。このような基は、Ｃ−原子２〜６有利に２
〜４を包含してよい。その例は、 −（CH2）2−、−（CH2）3−、−CH＝CH−、 −CH2−CH＝CH−である。ヒドロキシ又はオ
キソ基で置換された飽和又は不飽和の炭化水素鎖
の例は、−CH（OH）−（CH2）2−、CO−（CH2）2−
CH＝CH−Ｃ＝Ｏである。 低級アルカノイル基はＣ−原子数１〜６の脂肪
族カルボン酸例えば、ホルミル、アセチル、プロ
ピオニル、ピバロイル、イソブチリルである。低
級アルコキシ基は、Ｃ−原子数１〜６有利に１〜
４を有する基例えばメトキシ、エトキシ、プロポ
キシ、イソプロポキシ、ｔ−ブトキシである。 特にR3が低級アルキルでR6が低級アルコキシ
である一般式の化合物は、部分的に文献に記載
されている〔例えばズルナール・オブシユケイ・
キミイイ・（Zn.Obshch.Khim.）47、2741（1977）、
イスベスチヤ・アカデミイ・ナウク・SSSR、セ
リヤ・ケミスカヤ（Izv.Akad.Nauk.SSSR，Ser.
Khim.）424（1967）、同178（1982）、米国特許US
−A3816428号、ツアイトシユリフト・ナトウア
フオルシユング（Z.Naturforsch.）36c、242
（1981）ケミカル・アブストラクツ（C.A.）99：
22914K.ケミカル・アブストラクツ91：157812t、
ビユレチン・ソシエテ・シミク・フランス・Pt
（Bull.Soc.Chim.Fr.pt.）2343（1979）、テトラヘド
ロン（Tetrahedron）37、2297（1981）、ジヤーナ
ル・オブ・アメリカン・ケミカル・ソサエテイ
（J.Amer.Chem.Soc.）74、1528（1952）、チエコス
ロバキア発明者証CS−Ａ−190240参照〕。ここに
記載の化合物は、例えば植物成長調節剤、流動化
助剤、ケレート形成剤及び腐食防止剤として使用
することができる。H2O2もしくはペルオキシダ
ーゼ又は過酸化性作用物質の呈色反応検出のため
の酸化性カツプリング反応における成分として使
用することは従来記載されていなかつた。 ところで、本発明の目的は、次の′式： 〔式中R1、R2、R3、R4及びR4′は式に記載
と同じものを表わし、R6′はヒドロキシ、低級ア
ルコキシ、低級アルキル又はアリール基を表わ
す、但し、R6′がヒドロキシ基、Ｃ−原子数１〜
６のアルキル基又はフエニル基である場合には、
R3、R4及びR4′が同時に水素を表わすことはな
く、R2は水素であり得ないかもしくは、R6′がヒ
ドロキシ基である場合にR1はハロゲンで置換さ
れているフエニルではあり得ない〕の新規化合物
又は酸又は塩基とのその塩及び公知方法によるそ
の製法である。 式及び′式の前記化合物は安定な物質であ
り、これらはそれ自体良好な水溶性であるか又は
慣用の酸（鉱酸、例えば塩酸、硫酸、燐酸、等又
は有機酸例えば酢酸、クエン酸、蓚酸等）又は塩
基（苛性ソーダ、苛性カリ、アンモニア、アミ
ン、炭酸アルカリ等）との反応により、易溶性塩
に変じることができる。 一般式の化合物の合成は、公知方法で行なう
ことができる。＞Ｎ−Ｃ−Ｐ−系の形成のための
可能な反応の一般的概要は、トピツクス・イン・
ホスホラウス・ケミストリイ（Topics in
Phosphorous Chemistry）８巻、515f（1976）に
存在する。次に式の化合物の合成に特に使用で
きる個々の例を挙げる： １ ジヤーナル・オブ・ゼ・アメリカン・ケミカ
ル・ソサエテイ（J.Amer.Chem.Soc.）74、
1528（1952）に記載のように１級又は２級アミ
ンとアルデヒド及び亜燐酸ジアルキル又は亜ホ
スホン酸ジアルキルエステルと反応させて、
式の化合物にする： 出発物質１級アミン及びアルデヒドの代りに
これから製造しうるシツフの塩基を使用するこ
ともできる。 ２ 式の構造（R7＝低級アルキル）のＮ，Ｏ
−アセタールをH+−触媒の存在下に亜燐酸ト
リアルキル（：R6＝低級アルコキシ）と反
応させて、式の構造（R2＝Ｈ）を有するホ
スホン酸エステルを形成させる（イズベスチ
ヤ・アカデミイ・ナウク・SSSR.セリヤ・キミ
ケスカヤ424（1967）参照）： この反応は、亜ホスホン酸ジアルキルエステ
ル（：R6＝低級アルキル又はアリール）を
用いても実施できる。 同様な方法で、環状Ｎ，Ｏ−アセタール例え
ばＮ−アリールオキサソリジン（）と亜燐酸
トリアルキルもしくは亜ホスホン酸ジアルキル
エステルと反応させることもできる。この際、
特にオキサゾリジンから出発し、分子内エステ
ル交換のもとに、ホスホン酸もしくはホスフイ
ン酸の環状エステルが生じる。 出発物質として必要なＮ，Ｏ−アセタール
は、文献記載（ジヤーナル・アメリカン・ケミ
カル・ソサエテイ 54、4176（1932））と類似法
で、２級アニリンとホルムアルデヒド及びアル
コールとの反応により得ることができる。出発
物質としてＮ，Ｎ−ジメチルアニリンを使用す
ることができる場合は、ホルムアルデヒドの相
応するＮ，Ｏアセタール〔ジヤーナル・オブ・
オルガニツク・ケミストリイ（J.Org.
Chem.31、4058（1966）に記載〕をメタノール
性KOH中での陽極酸化により製造することが
できる。相応する長い電気分解時間で、次の構
造： のビス−Ｎ，Ｏ−アセタールも入手でき、これ
は、亜燐酸トリアルキルもしくは亜ホスホン酸
ジアルキルエステル２モルと反応して相応する
イミノジメタンホスホン酸に変えることができ
る。 環状Ｎ，Ｏ−アセタールは閉鎖状化合物と同
様に製造できる。例えば、Ｎ−アリールオキサ
ゾリジンは、Ｎ−ヒドロキシエチルアニリンと
アルデヒド例えばホルムアルデヒドとの反応に
より製造できる。 ３ アニリンを構造（ここでＸはBr、Ｉ、ト
シロキシ、ベンゾールスルホニルオキシ、メタ
ンスルホニルであつてよい）のホスホン酸エス
テルを用いてアルキル化することも文献に公知
である〔ジヤーナル・ド・レヒエルヒエ（J.
Recherches）C.N.R.S.119（1956）、ズルナー
ル・オブシユケイ・キミイ（Zh.Obshch.
Khim.）47、2741（1977）参照〕： ４ 一般式のアミノアルキルホスホン酸エステ
ル（R5＝低級アルキル、R6＝低級アルコキシ、
有利にR1＝Ｈ）は、強塩基例えばｎ−ブチル
リチウムを用いてα−Ｃ−原子の所で金属化
し、アルキル化剤例えば沃化メチルでアルキル
化することができる〔シンセシス（Synthesis）
336、（1977）〕： 式の化合物（R5＝低級アルキル、R6＝低級
アルキル及び低級アルコキシ）は、沸騰加熱時の
濃鉱酸例えばHclの作用により又はトリメチルシ
リルハロゲニド特にトリメチルシリルブロミド又
は−ヨージドとの反応でかつ引続く水での処理に
より鹸化することができる。ナトリウムアルコレ
ート又はアルカリ金属塩例えば沃化ナトリウムで
の処理により式の化合物（R5＝低級アルキル、
R6＝低級アルコキシ）から公知方法で相応する
ホスホン酸半エステルを製造することができる。 式の化合物は、遊離塩基の形で又は強酸例え
ばHcl、HF、HBrとの塩として単離することが
できる。R5＝Ｈに関して、式の化合物は、分
子内塩、アルカリ金属塩又はアンモニウム−もし
くはアミン塩としても包含される。 本発明は特許請求の範囲に詳述されている。 本発明のアニリン誘導体には、通例、酸性基も
塩基性基も含有するので、分子内塩として存在す
る。 アミン窒素に対して３位にアルキル基殊にメチ
ル基を有する化合物は、高い吸光度を有するので
有利である。 H2O2／PODの検出用の酸化可能なカツプリン
グ成分としては、４−アミノアンチピリン（４−
AAP）、２−ヒドラゾノ−２，３−ジヒドロ−３
−メチルベンズチアゾロン（MBTH）殊に２−
ヒドラゾノ−２，３−ジヒドロ−３−メチルベン
ズチアゾロン−スルホン酸−６（SMBTH）が有
利であるが、他の、酸化性カツプリング可能性に
関して公知の物質も同様に使用できる。 芳香族アミン即ち、殊にｐ−フエニレンジアミ
ン−又はｐ−アミノフエノール誘導体の検出のた
めに、式のアニリン誘導体は、障害が起こら
ず、酸化性カツプリングの際に良好な安定性及び
高い吸光度の色素を生じるので、同様に極めて好
適である。酵素検出に好適な基質は式に相当す
る： 〔式中R1″〜R4″は水素、ハロゲン、Ｃ−原子
数１〜６のアルキル、Ｃ−原子数１〜６のアルコ
キシ、カルボキシ−又はスルホニル基であるか又
はR1″とR2″又はR3″とR4″は１個のアルキル−又
はアルキレン橋を形成していてもよく、Ｘはヒド
ロキシ基又はアミノ基を表わし、これは１個又は
２個のアルキルで置換されていてよくＹは場合に
より保護されたアミノ酸又はペプチド基を表わ
す〕。 ロイシルアミノペプチダーゼの検出のためにＹ
はＬ−ロイシルであり、γ−GTの検出のために
γ−Ｌ−グルタミルであり、トロンビンの検出の
ためには例えばトシル−Gly−Pro−Arg−であ
る。 酸化剤としてはH2O2／POD以外にペルオキシ
ド例えば過硫酸塩又は過酢酸塩並びに過沃素酸
塩、クロラミンＴ及び殊にシアノフエリー錯体例
えばK3Fe（CN）6もこれに該当する。西ドイツ特
許DE−A3331588号明細書によればオキシダーゼ
も使用できる。 前記のように、本発明による系は、過酸化水素
もしくは過酸化水素生成系並びにペルオキシダー
ゼ又は過酸化性作用化合物の検出のために使用さ
れる。過酸化水素形成系とは、殊に、臨床診断に
重要な基質／基質オキシダーゼ対であり、ここで
基質は空気酸素の存在で酸化され、H2O2が形成
される。従つて、試薬にいかなる成分を添加する
かに応じて、基質又は基質オキシダーゼが検出で
きる。更に、本発明の物質は、カツプリング可能
な芳香族アミンの検出のために使用でき、この際
前者は酸化剤の存在で後者と接触される。例とし
ては、先に記載の系が参照される。 試薬組成物を用いて、キユベツト中で測定され
るテストが製造できる。このために、式の本発
明の物質１種をそれぞれのパラメーター検出に必
要な酵素又は他の試薬、緩衝剤並びに場合によつ
ては湿潤剤、活性剤及び他の助剤と混合して粉末
とするか又は圧縮して錠剤とするか又は水中に溶
かし、再び乾燥させるか又は凍結乾燥させる。こ
うして得た試薬混合物を使用前に水中又は他の好
適な溶剤中に溶かして試薬溶液を調製する。試料
（基質溶液、酵素溶液、血清又は血漿）と部分量
の試薬混合物との混合の後に、生じる色を光度計
で測定し、モル吸光係数及び添加された試薬もし
くは試料量から、それぞれの濃度もしくは基質濃
度を算出する。これは速度論的にも最終点測定で
も可能である。 同様に式の物質は、酸化可能なカツプリング
成分と組合せて、ペルオキシダーゼ、その都度の
パラメータ検出に必要な試薬もしくは他の酵素、
緩衝系、場合によつては湿潤剤及び活性剤並びに
他の助剤と共に吸収性試薬担持材例えば紙、フリ
ース等上に含浸することができる。このために、
試薬又は助剤を溶かす水又は有機もしくは混合溶
液の形の１種以上の含浸溶液を製造することがで
きる。この溶液を、吸収性又は膨潤性担持剤有利
に濾紙又は吸収性ガラス−又はプラスチツクフリ
ースに含浸させるか又はスプレーする。引続き、
乾燥させる。このように製造した試薬担持材は、
迅速診断材として、液体（例えば体液例えば血
液、尿又は唾液又は食料品例えば果実液、牛乳
等）の内容物の直接測定のために使用できる。こ
の際、液体を直接試薬担持材上に施与するか又は
これを短時間液体中に浸漬する。半定量的測定も
可能であり、この際、こうして得た色を比色す
る。定量評価は、反射光度法で実施することがで
きる。吸収性担持材からの水もしくは緩衝液又は
血清を用いる前記試薬の溶離により、試薬溶液を
製造することができ、これを用いて、キユベツト
中の前記の基質又は酵素を光度計で測定すること
ができる。拡散反射光度法評価による定量的測定
は、指示薬を残りの必要試薬及び助剤及び膜形成
性プラスチツクと共に西ドイツ特許DE−Ｃ−
1598153号明細書の記載のように加工して試薬フ
イルムにする際に、特に良好に実施することがで
きる。この種のフイルムの平らな表面は、慣用の
紙よりも少ない反射障害及びより均質な呈色を示
す。 本発明における緩衝液は、PH６〜10殊に6.5〜
7.5を有する。アルカリ−又はアンモニウム逆イ
オンを有する燐酸塩−、クエン酸塩−、ホウ酸
塩、GOOD−緩衝液が最も頻繁に使用されるが、
他の系も同様に使用可能である。 湿潤剤は、殊に、本発明の化合物の双性イオン
とイオン交換作用をするアニオン性及びカチオン
性湿潤剤である。しかしながら、酵素を活性化す
る非イオン性湿潤剤も同様に使用可能である。ラ
ウリル硫酸ナトリウム、ジオクチルナトリウムス
ルホサクシネート及びアルキルアリールポリエー
テルアルコールが有利である。 活性剤としては、それぞれの基質反応にとつて
公知のものを使用する。トリンダー反応そのもの
は、付加的活性化を必要としない程度に迅速であ
る。 その他の助剤としては、他の色原体を用いる相
応するテスト中におけると同様に、慣用の濃稠化
剤、乳化剤、光学的明化剤、コントラスト剤等が
有意義である。 カツプリング反応は、通例、室温で行なうが直
ちに、例えば先の酵素反応の反応速度にとつて有
利である場合には、より高い温度、例えば37℃で
実施することができる。 基質もしくは酵素との通例提案される反応にと
つてはテスト溶液の次の濃度が有効である：
【表】 前記濃度範囲は、下部範囲はキユベツト中での
光度法によるテストに対して、かつ上部範囲は固
体担持材上の迅速テストに対して有利であると理
解すべきである。 アミダーゼ作用酵素の検出のためには、カツプ
リング成分の前記規定を相応する量のペプチドア
ミド基質に代え、場合によつては、H2O2の代り
に、相応する量の他の酸化剤を添加する。 次の例で本発明を説明するが、本発明はこれら
のみに限定されるものではない。 実施例 例 １ 1.1 Ｎ−メチルアニリン21.4gおよび亜リン酸ジエ
チル27.6gから成る混合物に、90℃で攪拌しなが
らベンズアルデヒド21.6gを加える。反応混合物
を１時間90℃に保ち、最後に真空中で蒸発乾涸さ
せる。 粗生成物をシリカゲル1.5l上、リグロイン／ア
セトン（３：１）を用いてクロマトグラフイーに
かける。生成物含有フラクシヨンを濃縮および蒸
発させる。油状α−（Ｎ−メチルアニリノ）−ベン
ジル−ホスホン酸ジエチルエステル25g（38％）
が得られる。 1.2 α−（Ｎ−メチルアニリノ）−ベンジルホスホン
酸ジエチルエステル3.3gを無水塩化メチレン60ml
中に溶かし、トリメチルシリルブロミド7.92mlを
滴加する。混合物を一晩中放置し、次いで蒸発乾
涸させ、残分をエーテルと攪拌し、その後粗生成
物1.85gを吸引濾過する。これを水および少量の
HCl中に溶かす。水溶液をエーテルで抽出し、活
性炭処理し、蒸発乾涸させる。残分をエーテルと
擦する。沈殿を吸引濾過および乾燥させる。α−
（Ｎ−メチルアニリノ）−ベンジルホスホン酸・臭
化水素酸塩1.1g（31％）が得られる。融点142〜
146℃。 例 ２ 2.1 Ｎ，Ｎ−ジメチルアニリン1.6gを２％水酸化カ
リウムメタノール溶液800ml中に溶かし、ビーカ
ー中で25時間1.5Aで電解する。陽極は白金ネツ
ト（約50cm2）から成り、陰極は特殊鋼ネツトから
成る。反応溶液を蒸発乾涸させ、残分をエーテル
中に入れる。不溶残分を濾去し、エーテル相を蒸
発濃縮させる。残留する油状物を真空中で蒸留す
る。ビグロー塔での２回蒸留の後に沸点88.5〜89
℃のＮ−メトキシメチル−Ｎ−メチルアニリン
24.3g（27％）が７mmHgで得られる。 2.2 撹拌機、蒸留ブリツジを有する滴下ロートを有
する三頸フラスコ中で、Ｎ−メトキシメチル−Ｎ
−メチルアニリン５mlおよび亜リン酸トリメチル
4.6mlを、攪拌しながら135℃（浴温）に加熱す
る。１時間かかつて、酢酸1.4mlを少量宛滴加し、
混合物をさらに１時間攪拌し、反応混合物を高度
真空中で蒸留する。沸点126〜128℃（0.1mmHg）
の油状（Ｎ−メチルアニリノ）−メタンホスホン
酸ジメチルエステル4.4g（58％）が得られる。 2.3 （Ｎ−メチルアニリノ）−メタンホスホン酸ジ
メチルエステル4.2gを濃HCl15mlと共に４時間還
流下に沸騰させる。蒸発乾涸させ、残分を熱いエ
タノール10ml中に溶かし、いくらか冷却された混
合物にエーテルを加える。沈殿した結晶を吸引濾
過し、乾燥させる。（Ｎ−メチルアニリノ）−メタ
ンホスホン酸−塩酸塩3.08g（78％）が得られる。
融点166〜168℃（分解）。 例 ３ 例２と同様に第１表に挙げられたアニリノホス
ホン酸を製造する。第２表は出発生成物として合
成されたＮ−メトキシメチル−Ｎ−メチルアニリ
ンおよび第３表はそれから製造されるアニリノホ
スホン酸エステルを包含する。
【表】
【表】
【表】
【表】
【表】 例 ４ 4.1 Ｎ−エチルアニリン60.5gおよびパラホルムア
ルデヒド15gを、ベンゾール100mlおよびエタノ
ール50ml中に溶かし、水滴分離器を付して４時間
沸騰させる。その後溶液を蒸発濃縮させ、残渣を
分別蒸留する。主フラクシヨンとしてＮ−エチル
−Ｎ−エトキシメチルアニリン49.8g（56％）が得
られる。沸点77〜80°（0.1mmHg）。 4.2 例2.2.と同様に、Ｎ−エチル−Ｎ−エトキシメ
チルアニリンを亜燐酸トリメチルと反応させる。
主に存在するジメチルホスホン酸エステルと共
に、エステル交換によりなお少量のジエチル−な
いしエチルメチルエステルを含有する、エステル
混合物が得られる。沸点139.5〜141.5°（0.2mmHg）。 例2.3と同様に、濃HClを用いる鹸化により、
融点105〜110°（分解）の（Ｎ−エチル−アニリ
ノ）−メタンホスホン酸−塩酸塩が得られる。 例 ５ 例４と同様に、第４表に挙げられたホスホン酸
（Ｒ＝PO（OH）2）が得られる。更に、第４表には
中間生成物として製造されたアルコキシメチルア
ミン（Ｒ＝−CH2−Ｏ−アルキル）およびそれか
ら製造されるホスホン酸ジアルキルエステル（Ｒ
＝PO（Ｏ−アルキル）2）を包含する。個個のホス
ホン酸エステル（第４表４注参照）を例1.2と同
様にトリメチルシリルブロミドを用いて分解し
た。化合物３〜８の製造の際に、亜リン酸トリエ
チルを使用した。
【表】
【表】 例 ６ 例２と同様に、Ｎ，Ｎ−ジメチル−１−ナフチ
ルアミンから、亜リン酸トリメチルとの反応によ
り、油状Ｎ−メチル−１−ナフチルアミノ−メタ
ンホスホン酸ジメチルエステルを形成するＮ−メ
トキシメチル化合物が得られ、該エステルをシリ
カゲルでのクロマトグラフイ−によりリグロイ
ン／アセトン（３：１〜３：２）を用いて精製す
る。濃HClと共に沸騰することによるこのエステ
ルの鹸化により、Ｎ−メチル−１−ナフチルアミ
ノメタンホスホン酸−塩酸塩が得られる。融点78
〜80°（分解）。 例 ７ 7.1 ３−フエニルオキサゾリジン18gを例2.2と同様
に、氷酢酸の存在で亜リン酸トリメチルと反応さ
せる。粗生成物をシリカゲルでのクロマトグラフ
イによりリグロイン／エタノール（80：20〜70：
30）を用いて精製する。次の構造を有する、油状
精製物15gが得られる。 7.2 前記のようにして得られた化合物2.3gを無水塩
化メチレン60ml中に溶かし、攪拌しながらトリメ
チルシリルブロミド7.9mlを加える。一晩中放置
した後、反応混合物に濃NH360mlを加える。１
時間後攪拌し、蒸発乾涸させる。残分を濃HClの
添加下にエタノール中に溶かす。溶液にプロピレ
ンオキシドを加え、生じた沈殿を吸引濾過する。
（Ｎ−（２−アミノエチル）−アニリノ）−メタンホ
スホン酸0.85g（40％）が得られる。融点280〜
285°（分解）。 例 ８ Ｎ−メチル−アニリノ−メタン−ホスホン酸ジ
メチルエステル（例2.2から）18.3gを無水エーテ
ル100ml中に溶かし、−70°に冷却する。窒素下に
ｎ−ブチルリチウム溶液（ヘキサン中15％）54ml
を滴加する。反応混合物を−70℃で２時間攪拌
し、エーテル20ml中のヨウ化メチル4.9mlの溶液
を加え、−70℃でさらに２時間攪拌し、室温で一
晩中放置し、水20mlと振とうする。有機相を分離
し、乾燥させかつ蒸発濃縮させる。残留する油状
物を酢酸エチルエステル／エタノール（98：２）
を用いて、シリカゲルでのクロマトグラフイーに
かける。油状１−（Ｎ−メチルアニリノ）−エタン
−ホスホン酸ジメチルエステル2.15gが得られる。
このエステルを例1.2と同様に、トリメチルブロ
ムシランを用いて分解する。粗生成物を、溶離剤
としてのｎ−プロパノール／水／NH3（６：３：
１）を用いて、シリカゲルでのクロマトグラフイ
ーにかける。生成物含有フラクシヨンを集め、
NH4 +−イオンの除去のために、酸性イオン交換
体ドウエツクス（DOWEX）50H+−形上に与え
る。水を用いる溶離で、蒸発後ガラス状生成物
0.5gを生じ、これを精製するためにアセトン／エ
ーテルから再結晶させる。結局融点103〜106°（分
解）の１−（Ｎ−メチルアニリノ）−エタンホスホ
ン酸0.27gが得られる。 例 ９ 例7.1で得られた化合物3.5gを、濃HCl25mlと共
に、還流下に５時間沸騰する。反応混合物を蒸発
させ、展開剤としてｎ−プロパノール／H2Ｏ／
濃NH3（６：３：１）を用いてシリカゲルでのク
ロマトグラフイーにかける。生成物含有フラクシ
ヨンを集め、蒸発させ、残分をNH4 +−イオンの
除去のために、水を用いてドウエツクス
（DOWEX）50H+−形上のクロマトグラフイーに
かける。相当するフラクシヨンの蒸発後、油状物
が残留し、これは数日後完全に結晶する。Ｎ−ヒ
ドロキシエチルアニリノメタンホスホン酸1.78g
（50％）が得られる。融点120〜121°。 例 10 Ｎ，Ｎ−（ビスメトキシメチル）−アニリンを、
例2.2と同様に、亜リン酸トリメチル２モルと反
応させ、得られたビスホスホン酸ジメチルエステ
ルを、例1.2と同様にトリメチルシリルブロミド
で鹸化する。粗生成物を精製するために、強酸性
イオン交換体の水を用いて（DOWEX50H+−形）
クロマトコグラフイーにかける。生成物含有フラ
クシヨンの蒸発濃縮によりガラス状物が得られ、
これはアセトン、エーテルおよびリグロインから
成る混合物と擦した後結晶する。融点130〜131°
のフエニルイミノ−ジメタンホスホン酸が得られ
る。 例 11 11.1 例2.2と同様に、メタン亜ホスホン酸ジエチル
エステル2.2mlをＮ−メトキシメチル−Ｎ−メチ
ルアニリン2gと、100℃の浴温で反応させる。
（（Ｎ−メチルアニリノ）−メチル）−メチルホスフ
イン酸エチルエステル1.65g（55％）が得られ（沸
点123°（0.1mmHg））。これはなお相当するメチルエ
ステルの少量を含有する。 11.2 上で得られた生成物2gを、濃塩酸８mlと共に
還流下に４時間加熱する。混合物を蒸発乾涸さ
せ、残分をエタノール／エーテルから再結晶させ
る。融点166〜168°（分解）の（（Ｎ−メチルアニ
リノ）−メチル）−メチルホスフイン酸−塩酸塩
1.98g（95％）が得られる。 例 12 （Ｎ−メチルアニリノ）−メタンホスホン酸ジ
メチルエステル4.5gを、メチルエチルケトン20ml
中に溶かし、ヨウ化ナトリウム3gを加える。混
合物を30分間還流下に沸騰させ、冷却させ、エー
テルを加える。生じた沈殿を濾別し、エタノー
ル／エーテルから再結晶させる。さらに精製する
ために、生成物を溶離剤としてエタノールを用い
てシリカゲル上のクロマトグラフイーにかける。
生成物含有フラクシヨンを蒸発濃縮させ、残分を
エタノール／エーテルから再結晶させる。180°よ
り上で加熱することにより分解する（Ｎ−メチル
アニリノ）−メタンホスホン酸モノメチルエステ
ル0.71g（15％）が得られる。 例 13 （Ｎ−（２−アミノエチル）−アニリノ）−メタ
ンホスホン酸（例７から）1.5gを水４mlおよび
2N NaOH6ml中に溶かす。溶液に、濁りが生じ
るまで少量の氷酢酸を加える。その後無水アセト
ン２mlを添加し、混合物を室温で２時間攪拌し、
溶液を濃縮する。残分をドウエツクス
（DOWEX）50H+−形20mlで、水を用いてクロマ
トグラフイーにかける。生成物含有フラクシヨン
を集め、蒸発濃縮させる。残分をエタノール／エ
ーテルから再結晶させる。融点117〜118°（分解）
の（Ｎ−（２−アセトアミドエチル）−アニリノ−
メタンホスホン酸1.25g（71％）が得られる。 例 14 14.1 スクシンイミド19.85g、ホルムアルデヒド水溶
液（37％）16.2mlおよびエタノール150mlを還流
下に45分間沸騰する。混合物をいくらか冷却さ
せ、次いで、エタノール50ml中の３−アミノ安息
香酸メチルエステル30.2gの溶液を添加し、還流
下に６時間沸騰する。反応溶液をいくらか濃縮
し、冷蔵庫内で保存する。生じた結晶を吸引濾過
する。３−スクシンイミドメチルアミノ安息香酸
メチルエステル33.4gが得られ、これをジメチル
スルホキシド90ml中に溶かし、ホウ水素化ナトリ
ウム（錠剤）4.75gを加える。錠剤の溶解の後混
合物をなお20分間100°に加熱する。混合物を氷水
に注ぎ、エーテルで抽出する。エーテル相に水９
ml中の塩化亜鉛9gの溶液を加え、強力に撹拌す
る。水相を分離し、エーテル相を水で洗浄する。
油状の３−Ｎ−メチルアミノ安息香酸メチルエス
テル15.1gが得られる。 14.2 上で得られた安息香酸エステルを、例4.1と同
様に、パラホルムアルデヒドおよびメタノールと
反応させて、相当するＮ，Ｏ−アセタールを形成
させ、これは例2.2と同様に、亜リン酸トリメチ
ルを用いて、油状３−（Ｎ−ジメトキシホスホノ
メチル−Ｎ−メチル）−安息香酸メチルエステル
を生じ、これを展開剤としての酢酸エチルエステ
ル／１％エタノールを用いるシリカゲルでのクロ
マトグラフイーにより精製する。例2.3と同様の、
このエステルの鹸化により、融点189〜191°（分
解）の３−（Ｎ−ジヒドロキシ−ホスホノメチル
−Ｎ−メチル）−安息香酸が得られる。 例 15 水性溶液中のH2O2の測定 試薬溶液
【表】
【表】 １cm−キユベツト中に燐酸塩緩衝液（PH８）
600μlを入れ、アニリン誘導体、ペルオキシダー
ゼ及びカツプラー含有溶液各々100μlを添加する。
エツペンドルフ−ホトメーター（Eppendorf−
Photometer）で盲検値との比較の後に、H2O2−
原液（CH2O2∧＝５×10-5モル／ｌ）100μlを加え、
２分及び５分後に吸光度をλnaxで測定する。次の
吸光度が測定され、ここでアニリン誘導体８〜10
は比較のために挙げた。この表から、アニリノホ
スホン酸誘導体は、従来、本発明の目的に使用さ
れていた他の酸性基を有するアニリンよりも２〜
３倍高い吸光度を有することが明らかである。
【表】 例16 （参考例） 血清障害の測定 試薬溶液
【表】
【表】 例15に記載と同様に溶液Ａを用いて吸光度測定
を実施する。 溶液Ｂでは前記の燐酸塩緩衝液600μlを人血清
を代えた。 双方の場合に測定した２分もしくは５分後の吸
光度値を次表に対比させて示した：
【表】 例17 （参考例） 血清中のトリグリセリドの測定 フイルム被覆物質中に検出に必要な試薬を導入
する： 燐酸塩緩衝液（PH＝８） 0.2モル／ 界面活性剤（脂肪アルコールポリグリコールエ
ーテル 0.5％ SMBTH 0.2mモル／ （Ｎ−エチル−４−フルオルアニリノ）−メタ
ンホスホン酸 1mモル／ グリセリンホスフアトオキシダーゼ 1KU／ グリセリンキナーゼ 3KU／ コレステリンエステラーゼ 3KU／ ペルオキシダーゼ 10KU／ 被覆物質を200μmの厚さでポカロンフイルム
（Pokalonfolie）上にドクタ塗布する。膜形成の
ために、乾燥箱中、45℃で約30分間乾燥させる。 トリグリセリド濃度の測定のために、この膜上
に血清10μを施こす。37℃での２〜３分の反応
時間の後に、光度計で反射を測定する。予め測定
した較正曲線から、トリグリセリド濃度を精確に
計算することができる。 次表にトリグリセリド濃度の測定のための較正
曲線の値を示す：
【表】 例18 （参考例） 血清中のクレアチニンの測定 吸収性担持材〔例えばシエラー・ウント・ヘシ
ユ社の型紙（Schablonenpapier Fa.Schｏ¨
llerund Ｈｏ¨sch）、面重量12g／m2、吸収性50
ml／m2〕に１，２，３，４−テトラヒドロキノリ
ニル−メタンホスホン酸30mモル／、ペルオキ
シダーゼ300KU／を燐酸塩緩衝液（PH７、0.2
モル）中に溶かした溶液で含浸し乾燥させる（試
薬紙Ａ）。前記と同じ担持材にサルコシンオキシ
ダーゼ20KU／、クレアチンアミノヒドロラー
ゼ30KU／、クレアチニンアミドヒドロラーゼ
40KU／、スルホン化されたメチルベンズチア
ゾリノンヒドラゾン（SMBTH）100mモル／
並びに界面活性剤（脂肪アルコールポリグリコー
ルエーテル）0.1％を燐酸塩緩衝液（pH8、0.2モ
ル）中に溶かした含浸液で含浸し、乾燥させて、
試薬紙Ｂを作る。 クレアチニンの検出のために双方の紙（Ａ＋
Ｂ）をテストモデル中に装入する（第１図参照）。 配量部上にクレアチニンの検出のために血清
30μlをピペツト施与する。反応を開始させこの
際、１工程で指示紙及び酵素紙を移行部上に押し
付ける。１分間の反応時間（37℃）の後に、生じ
る色を反射光度法で測定する。相応する較正曲線
から、被測定クレアチニン濃度が検知される。 クレアチニン較正曲線値
【表】 クイツク（Quick）による光度計での単相凝固
時間の測定 キユベツト中に次の組成の溶液1200μlをピペツ
ト導入する： トリス／HCl（PH8.1）100mモル／、塩化カ
ルシウム6mモル／、Tos−Gly−Pro−Arg−
ｐ−フエニレンジアミン0.1mモル／、Ｎ−メ
チル−Ｎ−（４−メチルフエニル）−メチレン−ホ
スホン酸5mモル／、ウサギ尿−トロンボプラ
スチン1.2mg／ml。 この溶液を37℃に加温する。同時に、各々クエ
ン酸塩血漿100μl及びK3〔Fe（CN）6〕10モル／
の水溶液100μlをピペツト導入し、十分に混合し、
資料の添加と同時に始動した記録装置で、670mm
の波長で、吸光度の増加を時間に応じて追跡す
る。 測定値として、反応の開始から0.1の吸光度変
化の達成までに経過する時間を採用する。 前記方法で得られた機能曲線値を表に挙げる：
【表】
【表】 【図面の簡単な説明】
添付の第１図は例18における血清中のクレアチ
ニン測定用のテストモデルを示す図である。 １……保護織布、２……分離部、３……移行
部、４……担持シート、５……試薬担持材Ｂ、６
……試薬担持材Ａ、７……被覆シート（透明）。

Claims (1)

  1. 【特許請求の範囲】 １ 式′： ［式中R1は水素、低級アルキル及びアリール
    であつてよく、R2は水素、低級アルキル基であ
    り、これは、ヒドロキシ−、アミノ−、カルボキ
    シ−、低級アルコキシカルボニル−、低級アルカ
    ノイルアミド基、アリール低級アルキル及びアリ
    ール及び構造：【式】の基で置換されてい てよく、R3は水素、カルボキシ又はハロゲンで
    あつてよく、R4及びR4′は水素、ハロゲン、カル
    ボキシ−、低級アルコキシ−又は有利にｍ−位に
    存在する低級アルキル基であり、R1とR2もしく
    はR2とR4もしくはR4とR4′は、双方の置換分が
    相互にオルト位に存在する場合に、一緒になつて
    Ｃ−原子数２〜６の飽和又は不飽和の炭化水素鎖
    を形成していてよく、これらはヒドロキシ−又は
    オキソ基で置換されていてよく、R6′はヒドロキ
    シ、低級アルコキシ、低級アルキル又はアリール
    基である、但し、R6′がヒドロキシ基、Ｃ−原子
    数１〜６のアルキル基又はフエニル基である場合
    には、R3、R4及びR4′が同時に水素を表わすこと
    はなく、R2は水素であり得ないかもしくはR6′が
    ヒドロキシ基である場合に、R1はハロゲンで置
    換されているフエニルではあり得ない］のアニリ
    ン誘導体又は酸又は塩基とのその塩。 ２ 式′： ［式中R1は水素、低級アルキル及びアリール
    であつてよく、R2は水素、低級アルキル基であ
    り、これは、ヒドロキシ−、アミノ−、カルボキ
    シ−、低級アルコキシカルボニル−、低級アルカ
    ノイルアミド基、アリール低級アルキル及びアリ
    ール及び構造：【式】の基で置換されてい てよく、R3は水素、カルボキシ又はハロゲンで
    あつてよく、R4及びR4′は水素、ハロゲン、カル
    ボキシ−、低級アルコキシ−又は有利にｍ−位に
    存在する低級アルキル基であり、R1とR2もしく
    はR2とR4もしくはR4とR4′は、双方の置換分が
    相互にオルト位に存在する場合に、一緒になつて
    Ｃ−原子数２〜６の飽和又は不飽和の炭化水素鎖
    を形成していてよく、これらはヒドロキシ−又は
    オキソ基で置換されていてよく、R6′はヒドロキ
    シ、低級アルコキシ、低級アルキル又はアリール
    基である、但し、R6′がヒドロキシ基、Ｃ−原子
    数１〜６のアルキル基又はフエニル基である場合
    には、R3、R4及びR4′が同時に水素を表わすこと
    はなく、R2は水素であり得ないかもしくはR6′が
    ヒドロキシ基である場合に、R1はハロゲンで置
    換されているフエニルではあり得ない］のアニリ
    ン誘導体又は酸又は塩基とのその塩を製造するた
    め、式： ［式中R2、R3及びR4は前記のものを表わす］
    の１級又は２級のアミン及びアルデヒド又は相応
    するシツフの塩基を亜燐酸ジアルキル又は亜ホス
    ホン酸ジアルキルエステルと反応させ、生じた化
    合物を場合により適当な酸又は塩基でその塩に変
    じるか又は相応するエステルを鹸化することを特
    徴とする、アニリン誘導体の製法。 ３ 式′： ［式中R1は水素であり、R2は水素、低級アル
    キル基であり、これは、ヒドロキシ−、アミノ
    −、カルボキシ−、低級アルコキシカルボニル
    −、低級アルカノイルアミド基、アリール低級ア
    ルキル及びアリール及び構造：【式】の基 で置換されていてよく、R3は水素、カルボキシ
    又はハロゲンであつてよく、R4及びR4′は水素、
    ハロゲン、カルボキシ−、低級アルコキシ−又は
    有利にｍ−位に存在する低級アルキル基であり、
    R1とR2もしくはR2とR4もしくはR4とR4′は、双
    方の置換分が相互にオルト位に存在する場合に、
    一緒になつてＣ−原子数２〜６の飽和又は不飽和
    の炭化水素鎖を形成していてよく、これらはヒド
    ロキシ−又はオキソ基で置換されていてよく、
    R6′はヒドロキシ、低級アルキル又はアリール基
    である、但し、R6′がヒドロキシ基、Ｃ−原子数
    １〜６のアルキル基又はフエニル基である場合に
    は、R3、R4及びR4′が同時に水素を表わすことは
    なく、R2は水素であり得ないかもしくはR6′がヒ
    ドロキシ基である場合に、R1はハロゲンで置換
    されているフエニルではあり得ない］のアニリン
    誘導体又は酸又は塩基とのその塩を製法するた
    め、 構造： ［式中R2、R3、R4及びR4′は前記のものを表
    わし、R7は低級アルキル基を表わす］のＮ，Ｏ
    −アセタール又は式： ［式中R3、R4及びR4′は前記のものを表わす］
    の環状Ｎ，Ｏ−アセタールもしくはＮ−アリール
    オキサゾリジンを亜燐酸トリアルキル又は式： R6Ｐ（OR5）2 （） ［式中R5は低級アルキル基であり、R6は低級
    アルキル又はアリールを表わす］の亜ホスホン酸
    ジアルキルエステル及び酸性触媒と反応させて式
    中のR1が水素であるホスホン酸エステルを形
    成させ、得られた化合物を、場合により、適当な
    酸又は塩基によりその塩に変じるか又は相応する
    エステルを鹸化することを特徴とするアニリン誘
    導体の製法。 ４ 式′ ［式中R1は水素であり、R2は水素、低級アル
    キル基であり、これは、ヒドロキシ−、アミノ
    −、カルボキシ−、低級アルコキシカルボニル
    −、低級アルカノイルアミド基、アリール低級ア
    ルキル及びアリール及び構造：【式】の基 で置換されていてよく、R3は水素、カルボキシ
    又はハロゲンであつてよく、R4及びR4′は水素、
    ハロゲン、カルボキシ−、低級アルコキシ−又は
    有利にｍ−位に存在する低級アルキル基であり、
    R1とR2もしくはR2とR4もしくはR4とR4′は双方
    の置換分が相互にオルト位に存在する場合に、一
    緒になつてＣ−原子数２〜６の飽和又は不飽和の
    炭化水素鎖を形成していてよく、これらはヒドロ
    キシ−又はオキソ基で置換されていてよく、
    R6′はヒドロキシ、低級アルコキシである、但
    し、R6′がヒドロキシ基である場合には、R3、R4
    及びR4′が同時に水素を表わすことはなく、R2は
    水素であり得ないかもしくは、R1はハロゲンで
    置換されているフエニルではあり得ない］のアニ
    リン誘導体又は酸又は塩基とのその塩を製法する
    ため、式： ［式中R2、R3、R4及びR4′は前記のものを表
    わす］の１級又は２級アミンと式： ［式中R5は水素又は低級アルキル基を表わし、
    ＸはBr、Ｉ、トシルオキシ、ベンゾールスルホ
    ニルオキシ、メタンスルホニルオキシ基であつて
    よい］のホスホン酸エステルと反応させ、得られ
    た化合物を、場合により、適当な酸又は塩基によ
    りその塩に変じるか又は相応するエステルを鹸化
    することを特徴とするアニリン誘導体の製法。 ５ 式′： ［式中R1は水素、低級アルキル及びアリール
    であつてよく、R2は低級アルキル基であり、こ
    れは、ヒドロキシ−、アミノ−、カルボキシ−、
    低級アルコキシカルボニル−、低級アルカノイル
    アミド基、アリール低級アルキル及びアリール及
    び構造：【式】の基で置換されていてよ く、R3は水素、カルボキシ又はハロゲンであつ
    てよく、R4及びR4′は水素、ハロゲン、カルボキ
    シ−、低級アルコキシ−又は有利にｍ−位に存在
    する低級アルキル基であり、R1とR2もしくはR2
    とR4もしくはR4とR4′は双方の置換分が相互にオ
    ルト位に存在する場合に、一緒になつてＣ−原子
    数２〜６の飽和又は不飽和の炭化水素鎖を形成し
    ていてよくこれらはヒドロキシ−又はオキソ基で
    置換されていてよく、R6′は低級アルキルであ
    る、但し、R3、R4及びR4′が同時に水素を表わす
    ことはない］のアニリン誘導体又は酸又は塩基と
    のその塩を製造するため、一般式： ［式中R1は水素、低級アルキル及びアリール
    であつてよく、R2は水素、低級アルキル基であ
    り、これは、ヒドロキシ−、アミノ−、カルボキ
    シ−、低級アルコキシカルボニル−、低級アルカ
    ノイルアミド基、アリール低級アルキル及びアリ
    ール及び構造：【式】の基で置換されてい てよく、R3は水素、カルボキシ又はハロゲンで
    あつてよく、R4及びR4′は水素、ハロゲン、カル
    ボキシ−、低級アルコキシ−又は有利にｍ−位に
    存在する低級アルキル基であり、R1とR4もしく
    はR2とR4もしくはR4とR4′は、双方の置換分が
    相互にオルト位に存在する場合に、一緒になつて
    Ｃ−原子数２〜６の飽和又は不飽和の炭化水素鎖
    を形成していてよく、これらはヒドロキシ−又は
    オキソ基で置換されていてよい］のアミノアルキ
    ルホスホン酸エステルを強塩基及びアルキル化剤
    と反応させ、得られた化合物を、場合により適当
    な酸又は塩基と反応させてその塩に変じるか又は
    相応するエステルを鹸化することを特徴とするア
    ニリン誘導体の製法。
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Families Citing this family (18)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE3433946A1 (de) * 1984-09-15 1986-03-27 Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim Mittel und verfahren zum nachweis von wasserstoffperoxid
US5432285A (en) * 1988-11-03 1995-07-11 Theodoropulos; Spyros Chromogenic substrate to peroxidase enzymes
US4859607A (en) * 1989-01-17 1989-08-22 Kansas State University Research Foundation Colorimetric detector for ozone and method of preparation
DE3942357A1 (de) * 1989-12-21 1991-06-27 Boehringer Mannheim Gmbh 3-aminopyrazolo-heterocyclen, deren verwendung zur bestimmung von wasserstoffperoxid, wasserstoffperoxid-bildenden systemen, peroxidase, peroxidatisch wirksamen substanzen oder von elektronenreichen aromatischen verbindungen, entsprechende bestimmungsverfahren und hierfuer geeignete mittel
US5518891A (en) * 1993-03-25 1996-05-21 Actimed Laboratories, Inc. Dye forming composition and detection of hydrogen peroxide therewith
US5447868A (en) 1993-09-14 1995-09-05 Propper Manufacturing Co. Inc. Method, reagent and kit for the detection of fecal occult blood
US5563031A (en) * 1994-09-08 1996-10-08 Lifescan, Inc. Highly stable oxidative coupling dye for spectrophotometric determination of analytes
DE19506262A1 (de) * 1995-02-23 1996-08-29 Behringwerke Ag Störungsvermindertes Redox-Nachweissystem
US20020098509A1 (en) * 1995-04-13 2002-07-25 Heike Jurgens Method for the quantitative determination of reversible acting inhibitors of the oxidoreductases
JP3236199B2 (ja) * 1995-08-25 2001-12-10 日本電気株式会社 平面光導波路型バイオケミカルセンサ
US5776719A (en) * 1997-07-07 1998-07-07 Mercury Diagnostics, Inc. Diagnostic compositions and devices utilizing same
US6040151A (en) 1998-03-10 2000-03-21 Mercury Diagnostics, Inc. Diagnostic compositions and devices utilizing same
US5989845A (en) 1996-04-05 1999-11-23 Mercury Diagnostics, Inc. Diagnostic compositions and devices utilizing same
CA2582769A1 (en) * 2004-10-12 2006-04-20 F. Hoffmann-La Roche Ag Solid phase peptide sythesis
US20080166792A1 (en) * 2007-01-05 2008-07-10 Attar Amir J Detection of analytes in materials liquids using capillary colorimetric detection
CN106018373B (zh) * 2016-07-19 2018-06-08 济南大学 三维金属增强荧光/比色双模纸芯片的制备及atp检测
CN112161972B (zh) * 2020-08-14 2021-04-20 大连理工大学 一种快速分级定量检测酸性溶液中芳伯胺含量的检测试纸组及其应用
CN113418916A (zh) * 2021-07-02 2021-09-21 安徽惠邦生物工程有限公司 肌酐定量快速检测试纸条及其制备方法

Family Cites Families (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE303734C (ja) *
GB1392044A (en) * 1971-06-26 1975-04-23 Ciba Geigy Ag Corrosion inhibiting composition
GB1392043A (en) * 1971-06-26 1975-04-23 Ciba Geigy Ag Corrosion inhibitor
USRE29498E (en) * 1972-05-12 1977-12-20 Istituto Sieroterapico e Vaccinogeno Toscano "SCLAVO", S.p.A. Process for the enzymatic determination of glucose with a glucose-oxydazed/peroxidazed enzyme system
JPS5425892A (en) * 1977-07-29 1979-02-27 Wako Pure Chem Ind Ltd Quantitative determination of hydrogen peroxide
JPS5520471A (en) * 1978-08-01 1980-02-13 Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd Hydrogen peroxide quantifying method
US4247631A (en) * 1979-01-31 1981-01-27 Millipore Corporation Reagent and method for the analytic determination of hydrogen peroxide
DE3037342A1 (de) * 1980-01-09 1981-07-16 Dojindo Laboratories, Kumamotoshi N-sulfoalkylanilinderivate und ihre verwendung
JPS57142562A (en) * 1981-02-27 1982-09-03 Fuji Photo Film Co Ltd Quantitative analysis film and colorimetric quantitative analysis
DE3124594A1 (de) * 1981-06-23 1983-01-05 Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim Mittel und verfahren zum nachweis von wasserstoffperoxid
JPS5856695A (ja) * 1981-09-28 1983-04-04 Nitto Boseki Co Ltd 新規なトロンビン測定用基質
US4588836A (en) * 1982-09-01 1986-05-13 Toyo Jozo Kabushiki Kaisha Novel synthetic substrate and assay method using the same
DE3234478A1 (de) * 1982-09-17 1984-03-22 Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim Reagenz und verfahren zur bestimmung von (gamma)-glutamyltransferase
DE3433946A1 (de) * 1984-09-15 1986-03-27 Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim Mittel und verfahren zum nachweis von wasserstoffperoxid

Non-Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
CHEMICAL ABSTRACTS=1965 *
CHEMICAL ABSTRACTS=1970 *
CHEMICAL ABSTRACTS=1976 *
CHEMICAL ABSTRACTS=1977 *
CHEMICAL ABSTRACTS=1978 *
CHEMICAL ABSTRACTS=1979 *
CHEMICAL ABSTRACTS=1981 *

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Publication number Publication date
ZA857017B (en) 1986-09-24
JPS6172794A (ja) 1986-04-14
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DE3577580D1 (de) 1990-06-13
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ES8604983A1 (es) 1986-03-16
CA1273634A (en) 1990-09-04
US4820632A (en) 1989-04-11
US5084382A (en) 1992-01-28
KR860002522A (ko) 1986-04-26
JPH05240794A (ja) 1993-09-17
EP0175250A2 (de) 1986-03-26
EP0175250A3 (en) 1987-03-18

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