JPH0481435B2 - - Google Patents
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- Publication number
- JPH0481435B2 JPH0481435B2 JP62024596A JP2459687A JPH0481435B2 JP H0481435 B2 JPH0481435 B2 JP H0481435B2 JP 62024596 A JP62024596 A JP 62024596A JP 2459687 A JP2459687 A JP 2459687A JP H0481435 B2 JPH0481435 B2 JP H0481435B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- dione
- pregnene
- trihydroxy
- progesterone
- present
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
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- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
Description
産業上の利用分野
本発明は、種々の黄体ホルモンを製造するため
の中間体として有用な物質である6β，11α，17α
−トリヒドロキシ−４−プレグネン−３，20−ジ
オンを微生物を利用して有利に製造する方法に関
する。 技術的背景 ４−プレグネン−３，20−ジオンはプロゲステ
ロンと称せられ黄体ホルモンとして知られてお
り、また、その誘導体は、排卵阻止作用、麻酔作
用並びに分化誘導作用などを有することが知らさ
れている。さらに、プロゲステロンの誘導体はス
テロイド系ホルモンの生合成における前駆物質と
しての意義も大きい。 従来、プロゲステロンの誘導体である6β，
11α，17α−トリヒドロキシ−４−プレグネン−
３，20−ジオンはプロゲステロンの６位、11位及
び17位の炭素原子に３個の水酸基が導入された化
合物であるが、プロゲステロンを出発物質として
それに微生物を利用して一度に上記３個の水酸基
を選択的に導入することは困難であり、未だその
方法については報告はみられない。 因に、従来、6β，11α，17α−トリヒドロキシ
−４−プレグネン−３，20−ジオンの製造は、予
め、化学合成的又は微生物を用いて製造した
11α，17α−ジヒドロキシ−４−プレグネン−３，
20−ジオンを用い、さらに微生物（リゾープス
アリズス、Rhizopus arrhizus）を用いて、6β位
に水酸基を導入して行つていた［ジャーナル オ
ブ ステロイド バイオケミストリイ（J.
Steroid Biochem.、５p9〜13 1974）］。 本発明者は、プロゲステロンに上記水酸基を導
入した6β，11α，17α−トリヒドロキシ−４−プ
レグネン−３，20−ジオンが生物学的活性を有す
る種々のプロゲステロン誘導体を製造するための
中間体として極めて有用であることから、その有
利な製造方法について研究を行つた結果、アクレ
モニウム属（Acremonjum）に属する特定な微
生物を利用してプロゲステロンの６位、11位及び
17位の炭素原子に選択的に水酸基を導入し得るこ
とを見出し、本発明をなすに至つた。 発明が解決しようとする課題 したがつて、本発明は、プロゲステロンを基質
とし、これに糸状菌であるアクレモニウム・スト
リクタム（Acremonium strictum）を作用させ
ることにより生物学的活性を有する有用な種々の
プロゲステロン誘導体を製造するための中間体と
して利用される6β，11α，17α−トリヒドロキシ
−４−プレグネン−３，20−ジオンを有利に製造
するための方法を提供することを課題とする。 以下本発明を詳しく説明する。 発明の構成 本発明の特徴は、４−プレグネン−３，20−ジ
オンを基質として含む培養液中でアクレモニウ
ム・ストリクタムを反応させて6β，11α，17α−
トリヒドロキシ−４−プレグネン−３，20−ジオ
ンを産生して採取することにある。 6β，11α，17α−トリヒドロキシ−４−プレグ
ネン−３，20−ジオンは下記式（Ｉ）を有する公
知物質であつて、下記の理化学的性質を有する。 理化学的性質： 外観 白色粉末 分子量 362 分子式 C21H3005 融点 油状となるため測定できない 比旋光度 ［α］D＝＋24.2° EIマススペクトル 第１図参照 赤外吸収スペクトル （KBr法）
第２図参照 プロトン核磁気共鳴スペクトル 第３図参照 13C−核磁気共鳴スペクトル 第４図参照 課題を解決するための手段 本発明では、アクレモニウム・ストリクタムを
利用して基質としての４−プレグネン−３，20−
ジオンに反応させることにより、その６位、11位
及び17位の炭素原子に選択的にしかも同時的に３
個の水酸基を導入するものであつて、下記の手順
により反応を行うことによつて、本物質を製造で
きる。 アクレモニウム・ストリクタム
（Acremonium strictum）ハンガリー国立衛生研
究所保存株NN106株（微工研菌寄第9143号）を、
麦芽エキスのような炭素源、ペプトン、大豆粉の
ような窒素源及び無機塩類を含む培地中で振盪培
養を行う。培養終了後、４−プレグネン−３，20
−ジオンを基質とし、これを一定濃度になるよう
にジメチルホルムアミドで溶解した液を、上記培
養液に添加して、上記と同様な条件で反応（培
養）を行う。反応終了後、濾過又は遠心分離によ
り、得られた反応混合液（培養液）から固形分及
び菌体成分を除去し、次いで得られた上澄から酢
酸エチルで抽出を行い、それから溶媒成分を除去
して粗精製画分を得る。 次に、この画分を少量のクロロホルム又はメタ
ノールで溶解し、シリカゲルカラム及び溶出溶媒
（クロロホルム：メタノール＝98：２）を用い、
高速液体クロマトグラフイ−により6β，11α，
17α−トリヒドロキシ−４−プレグネン−３，20
−ジオンを溶出して分取する。 なお。本物質と同時に7β，15α，17α−トリヒ
ドロキシ−４−プレグネン−３，20−ジオンが併
産されるが、両者は、高速液体クロマトグラフイ
−を用いて各溶出時間の差に基づいて分離、採取
することができる。 発明の有用性 本発明によると、6β，11α，17α−トリヒドロ
キシ−４−プレグネン−３，20−ジオンを微生物
を利用することにより、４−プレグネン−３，20
−ジオンを基質として容易に製造することができ
る。 したがつて、このようにして得られる6β，
11α，17α−トリヒドロキシ−４−プレグネン−
３，20−ジオンを中間体として用いることによ
り、種々の黄体ホルモンを有利に製造し得る利点
がある。 次に、6β，11α，17α−トリヒドロキシ−４−
プレグネン−３，20−ジオンを中間体とする黄体
ホルモンの合成について例示する。 6β，11α−ジアセチル−17α−ヒドロキシ−４−
プレグネン−３，20−ジオンの合成： 本物質を中間体として用いて、これをピリジン
中で無水酢酸と反応させると94％の収率で上記ジ
アセチル体が得られる。 以下に実施例を示して本発明を具体的に説明す
る。 実施例 アクレモニウム・ストリクタムNN 106株（寄
託番号FERM Ｐ−9143）を表１に示した組成の
培地100mlに接種し、500ml容三角フラスコ中で24
℃の温度に48時間、振盪培養（200rpm、ロータ
リー式振盪培養機）を行つた。
の中間体として有用な物質である6β，11α，17α
−トリヒドロキシ−４−プレグネン−３，20−ジ
オンを微生物を利用して有利に製造する方法に関
する。 技術的背景 ４−プレグネン−３，20−ジオンはプロゲステ
ロンと称せられ黄体ホルモンとして知られてお
り、また、その誘導体は、排卵阻止作用、麻酔作
用並びに分化誘導作用などを有することが知らさ
れている。さらに、プロゲステロンの誘導体はス
テロイド系ホルモンの生合成における前駆物質と
しての意義も大きい。 従来、プロゲステロンの誘導体である6β，
11α，17α−トリヒドロキシ−４−プレグネン−
３，20−ジオンはプロゲステロンの６位、11位及
び17位の炭素原子に３個の水酸基が導入された化
合物であるが、プロゲステロンを出発物質として
それに微生物を利用して一度に上記３個の水酸基
を選択的に導入することは困難であり、未だその
方法については報告はみられない。 因に、従来、6β，11α，17α−トリヒドロキシ
−４−プレグネン−３，20−ジオンの製造は、予
め、化学合成的又は微生物を用いて製造した
11α，17α−ジヒドロキシ−４−プレグネン−３，
20−ジオンを用い、さらに微生物（リゾープス
アリズス、Rhizopus arrhizus）を用いて、6β位
に水酸基を導入して行つていた［ジャーナル オ
ブ ステロイド バイオケミストリイ（J.
Steroid Biochem.、５p9〜13 1974）］。 本発明者は、プロゲステロンに上記水酸基を導
入した6β，11α，17α−トリヒドロキシ−４−プ
レグネン−３，20−ジオンが生物学的活性を有す
る種々のプロゲステロン誘導体を製造するための
中間体として極めて有用であることから、その有
利な製造方法について研究を行つた結果、アクレ
モニウム属（Acremonjum）に属する特定な微
生物を利用してプロゲステロンの６位、11位及び
17位の炭素原子に選択的に水酸基を導入し得るこ
とを見出し、本発明をなすに至つた。 発明が解決しようとする課題 したがつて、本発明は、プロゲステロンを基質
とし、これに糸状菌であるアクレモニウム・スト
リクタム（Acremonium strictum）を作用させ
ることにより生物学的活性を有する有用な種々の
プロゲステロン誘導体を製造するための中間体と
して利用される6β，11α，17α−トリヒドロキシ
−４−プレグネン−３，20−ジオンを有利に製造
するための方法を提供することを課題とする。 以下本発明を詳しく説明する。 発明の構成 本発明の特徴は、４−プレグネン−３，20−ジ
オンを基質として含む培養液中でアクレモニウ
ム・ストリクタムを反応させて6β，11α，17α−
トリヒドロキシ−４−プレグネン−３，20−ジオ
ンを産生して採取することにある。 6β，11α，17α−トリヒドロキシ−４−プレグ
ネン−３，20−ジオンは下記式（Ｉ）を有する公
知物質であつて、下記の理化学的性質を有する。 理化学的性質： 外観 白色粉末 分子量 362 分子式 C21H3005 融点 油状となるため測定できない 比旋光度 ［α］D＝＋24.2° EIマススペクトル 第１図参照 赤外吸収スペクトル （KBr法）
第２図参照 プロトン核磁気共鳴スペクトル 第３図参照 13C−核磁気共鳴スペクトル 第４図参照 課題を解決するための手段 本発明では、アクレモニウム・ストリクタムを
利用して基質としての４−プレグネン−３，20−
ジオンに反応させることにより、その６位、11位
及び17位の炭素原子に選択的にしかも同時的に３
個の水酸基を導入するものであつて、下記の手順
により反応を行うことによつて、本物質を製造で
きる。 アクレモニウム・ストリクタム
（Acremonium strictum）ハンガリー国立衛生研
究所保存株NN106株（微工研菌寄第9143号）を、
麦芽エキスのような炭素源、ペプトン、大豆粉の
ような窒素源及び無機塩類を含む培地中で振盪培
養を行う。培養終了後、４−プレグネン−３，20
−ジオンを基質とし、これを一定濃度になるよう
にジメチルホルムアミドで溶解した液を、上記培
養液に添加して、上記と同様な条件で反応（培
養）を行う。反応終了後、濾過又は遠心分離によ
り、得られた反応混合液（培養液）から固形分及
び菌体成分を除去し、次いで得られた上澄から酢
酸エチルで抽出を行い、それから溶媒成分を除去
して粗精製画分を得る。 次に、この画分を少量のクロロホルム又はメタ
ノールで溶解し、シリカゲルカラム及び溶出溶媒
（クロロホルム：メタノール＝98：２）を用い、
高速液体クロマトグラフイ−により6β，11α，
17α−トリヒドロキシ−４−プレグネン−３，20
−ジオンを溶出して分取する。 なお。本物質と同時に7β，15α，17α−トリヒ
ドロキシ−４−プレグネン−３，20−ジオンが併
産されるが、両者は、高速液体クロマトグラフイ
−を用いて各溶出時間の差に基づいて分離、採取
することができる。 発明の有用性 本発明によると、6β，11α，17α−トリヒドロ
キシ−４−プレグネン−３，20−ジオンを微生物
を利用することにより、４−プレグネン−３，20
−ジオンを基質として容易に製造することができ
る。 したがつて、このようにして得られる6β，
11α，17α−トリヒドロキシ−４−プレグネン−
３，20−ジオンを中間体として用いることによ
り、種々の黄体ホルモンを有利に製造し得る利点
がある。 次に、6β，11α，17α−トリヒドロキシ−４−
プレグネン−３，20−ジオンを中間体とする黄体
ホルモンの合成について例示する。 6β，11α−ジアセチル−17α−ヒドロキシ−４−
プレグネン−３，20−ジオンの合成： 本物質を中間体として用いて、これをピリジン
中で無水酢酸と反応させると94％の収率で上記ジ
アセチル体が得られる。 以下に実施例を示して本発明を具体的に説明す
る。 実施例 アクレモニウム・ストリクタムNN 106株（寄
託番号FERM Ｐ−9143）を表１に示した組成の
培地100mlに接種し、500ml容三角フラスコ中で24
℃の温度に48時間、振盪培養（200rpm、ロータ
リー式振盪培養機）を行つた。
【表】
【表】
培養終了後、基質としての４−プレグネン−
３，20−ジオンを予め基質濃度が50mg／mlとなる
ようにジメチルホルムアミドで溶解した液２ml
を、上記フラスコ中の培養液に添加し、さらに24
〜48時間、上記と同様の条件に培養（反応）を行
つた。 培養終了後、濾過（又は遠心分離）により培養
液中から固形分及び菌体成分を除去し、得られた
上澄からその1/3量の酢酸エチルを用いて３回抽
出を行い、ロータリーエバポレーターで溶媒成分
を除去して粗精製画分を得た。 次いで、この画分を少量のクロロホルム（又は
メタノール）で溶解し、シリカゲルカラム（直径
20mm×30mm）及び溶出溶媒（クロロホルム：メタ
ノール＝98：２）を用いて、高速液体クロマトグ
ラフイー（センシュー科学社製）により、6β，
11α，17α−トリヒドロキシ−４−プレグネン−
３，20−ジオンを溶出して分取した。 収量は11.0mg。
３，20−ジオンを予め基質濃度が50mg／mlとなる
ようにジメチルホルムアミドで溶解した液２ml
を、上記フラスコ中の培養液に添加し、さらに24
〜48時間、上記と同様の条件に培養（反応）を行
つた。 培養終了後、濾過（又は遠心分離）により培養
液中から固形分及び菌体成分を除去し、得られた
上澄からその1/3量の酢酸エチルを用いて３回抽
出を行い、ロータリーエバポレーターで溶媒成分
を除去して粗精製画分を得た。 次いで、この画分を少量のクロロホルム（又は
メタノール）で溶解し、シリカゲルカラム（直径
20mm×30mm）及び溶出溶媒（クロロホルム：メタ
ノール＝98：２）を用いて、高速液体クロマトグ
ラフイー（センシュー科学社製）により、6β，
11α，17α−トリヒドロキシ−４−プレグネン−
３，20−ジオンを溶出して分取した。 収量は11.0mg。
第１図は、本発明より得られる物質のEIマス
スペクトルを、第２図は赤外吸収スペクトルを、
第３図はプロトン核磁気共鳴スペクトルを、第４
図は13C−核磁気共鳴スペクトルをそれぞれ示す。
スペクトルを、第２図は赤外吸収スペクトルを、
第３図はプロトン核磁気共鳴スペクトルを、第４
図は13C−核磁気共鳴スペクトルをそれぞれ示す。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ ４−プレグネン−３，20−ジオンを基質とし
て含む培養液中でアクレモニウム・ストリクタム
（Acremonium strictum）を反応させて産生した
6β，11α，17α−トリヒドロキシ−４−プレグネ
ン−３，20−ジオンを分離、最終採取することを
特徴とする6β，11α，17α−トリヒドロキシ−４
−プレグネン−３，20−ジオンの製造方法。 ２ 基質としての４−プレグネン−３，20−ジオ
ンを添加して含有させた培養液中で、アクレモニ
ウム・ストリクタムを反応させる特許請求の範囲
第１項記載の製造方法。 ３ アクレモニウム・ストリクタムは予め培地中
で培養したものである特許請求の範囲第１項又は
第２項記載の製造方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP62024596A JPS63192798A (ja) | 1987-02-06 | 1987-02-06 | ６β，１１α，１７α−トリヒドロキシ−４−プレグネン−３，２０−ジオンの製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP62024596A JPS63192798A (ja) | 1987-02-06 | 1987-02-06 | ６β，１１α，１７α−トリヒドロキシ−４−プレグネン−３，２０−ジオンの製造方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS63192798A JPS63192798A (ja) | 1988-08-10 |
| JPH0481435B2 true JPH0481435B2 (ja) | 1992-12-24 |
Family
ID=12142534
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP62024596A Granted JPS63192798A (ja) | 1987-02-06 | 1987-02-06 | ６β，１１α，１７α−トリヒドロキシ−４−プレグネン−３，２０−ジオンの製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS63192798A (ja) |
-
1987
- 1987-02-06 JP JP62024596A patent/JPS63192798A/ja active Granted
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS63192798A (ja) | 1988-08-10 |
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