JPH0481593B2

JPH0481593B2 -

Info

Publication number: JPH0481593B2
Application number: JP14172184A
Authority: JP
Inventors: Masahiro Taguchi; Mikya Kitamura; Koji Inai; Mikio Tonomura; Goro Tsukamoto
Original assignee: Kanebo Ltd
Current assignee: Kanebo Ltd
Priority date: 1984-07-09
Filing date: 1984-07-09
Publication date: 1992-12-24
Also published as: JPS6122090A

Description

【発明の詳細な説明】産業上の利用分野本発明は下式〔〕（式中、ＲはＮ−メチルイソブチルアミノ基であ
る。）で示される新規なアミナ置換フエノチアジン型リ
フアマイシンおよびその抗結核剤としての用途に
関する。従来の技術従来多くの抗結核剤が知られているが、下式で
示されるリフアンピシンもその１つであつて、強
い抗結核菌作用を有し実用に供されている〔A.
Kucers、N.Mck.Bennett共著、The Use of
Antibiotics、第３版、Willam、Heinemann
Medical Books、Ltd.、ロンドン、552〜584頁
（1979）〕。またリフアンピシンは他の抗結核剤（カナマイ
シン、イソニアジド、エタンブトール）とは異な
つて、分裂休止状態の結核菌に対しても殺菌的に
働くという優れた性質を有することが明らかにさ
れている（結核、54、89、1979；結核、53、557、
1978）。一方、リフアマイシン誘導体に関しては、これ
まで数多くの報告および特許が知られているが、
特開昭58−225093号公報には下式で示されるフエ
ノチアジン型リフアイマイシン（化合物Ａ）が開
示されている。発明が解決しようとする問題点結核菌（分裂休止状態の結核菌をも含む）に対
する抗菌力に優れ、また経口投与時に結核症の好
発部位である肺組織へと移行性が良好で、しかも
低毒性であるという優れた特性を有する新しいタ
イプの抗結核剤を見い出すべく種々検討を重ね
た。問題点を解決するための手段本発明者等は上記の観点に立つて種々検討した
結果、特に、前記式〔〕で示される新規なアミ
ノ置換フエノチアジン型リフアマイシンが上記の
目的に合致するものであることを見い出して本発
明を完成させた。本発明のアミノ置換フエノチアジン型リフアマ
イシンは、例えば前記フエノチアジン型リフアマ
イシン（化合物Ａ）に、Ｎ−メチルイソブチルア
ミンを例えばＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド等の
極性溶媒中で通常０〜40℃付近で10時間から10日
間反応させることによつて製造することができ
る。化合物Ａに対するＮ−メチルイソブチルアミン
の使用量は、通常１対１〜2.2モルである。上記反応によつて生成した該目的化合物は、カ
ラムクロマトグラフイー例えばシリカゲルカラム
クロマトグラフイーによつて単離精製される。本発明の化合物は、人型結核菌に対して強い発
育阻止作用を示すと共に、分裂休止状態の結核菌
に対しても極めて強い殺菌作用を有する。さらに
リフアンピシンに耐性の結核菌に対しても有効で
ある。また体内動態に優れ、しかも低毒性であ
り、抗結核剤として有用である（後記試験例参
照）。本発明の化合物を結核症の治療に使用するに
は、好ましくは散剤、顆粒剤、カプセル剤等の剤
型で経口投与する。これら各製剤は通常の賦形
剤、結合剤、安定剤、香料、色素等を用いて、通
常の製剤技術によつて製造される。本発明の化合物を抗結核剤として投与する場合
の投与量は通常１日当り0.01〜100mg／Kg体重好
ましくは0.1〜50mg／Kg体重であつて、これを通
常１日１回、要すれば２〜３回に分けて投与す
る。発明の効果本発明の化合物は、以下に示す試験結果のとお
り人型結核菌に対して強い発育阻止作用を示す
（第１表）と共に、分裂休止状態の結核菌に対し
ても極めて強い殺菌作用を有する（第２表）。さ
らにリフアンピシンに耐性の結核菌に対しても有
効である（第３表）。また、体内動態に優れ（第
４表）、しかも低毒性であることが確認された。試験例抗結核菌作用、体内動態および毒性試験： (a) 被検化合物本発明化合物〔〕……Ｎ−メチルイソブチル
アミノ置換フエノチアジン型リフアマイシ
ン（式〔〕でＲがＮ−メチルイソブチルア
ミノ基である化合物）化合物Ａ（対照化合物…前記特許公報記載の化
合物）リフアピシン（対照化合物） (b) 結核菌に対する発育阻止作用人型結核菌〔Mycobacterium tuberculosis
IID591（H₃₇Rv）〕を結核培地用アルブミン
（“栄研”）を10％含有したデユポス（Dubos）
液体培地（“栄研”）（以下単に液体培地という）
に、37℃で４日間培養し、接種菌液とした
（OD660＝0.35）。該接種菌液を100培量の液体培地に接種し、
試験菌液とした。ついで、該試験菌液1.0mlと、被検化合物の
溶液0.1mlとを混合し、37℃で２週間培養して、
被検化合物の最小発育阻止濃度（MIC、μ
ｇ／ml）を調べた。なお、被検化合物の溶液は、被検化合物を
Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドに溶かして１
mg／mlの原液とし、これを滅菌蒸留水で希釈し
て調製した。結果を第１表に示した。【表】 (c) 分裂休止状態の結核菌に対する殺菌作用分裂休止状態の結核菌〔ストレプトマイシン
（以下SMと略す）依存性結核菌18b株〕を
SM100μｇ／ml含有の液体培地に継代し、均等
発育させたものを接種菌液とした（OD420＝
0.15）。該接種菌液をSMを含まない100倍量の液体
培地に接種して分裂休止状態とし、これを試験
菌液とした。ついで、該試験菌液20mlと、前記(b)に記した
方法で調製した濃度10μｇ／mlの被検化合物の
溶液２mlとを混合し、37℃で培養した。被検化合物の添加直後および２日後の培養液
を採取して、生菌数を測定した。生菌数の測定
は、採取した培養液の10倍希釈系列を作り、こ
れをSM100μｇ／ml含有のキルヒナー
（Kirchner）寒天培地に接種し５週間培養し、生成したコ
ロニー数を測定することにより行つた。（結核、
54、89、1979参照）結果を第２表に示した。【表】 (d) リフアンピシン耐性結核菌に対する発育阻止
作用人型結核菌からリフアンピシン耐性株を採取
し、(b)に記した方法と同様にして、それに対す
る発育阻止作用を調べた。結果を第３表に示した。【表】 (e) 体内動態リフアマイシン誘導体の結核症に対する治療
効果は、薬物の血中濃度よりも、むしろ組織内
濃度に大きく依存することが明らかにされてい
る〔J.Antibiotics、36、1502、（1983）；J.
Antibiotics、33、1193、（1980）〕。そこで、マウスを用いた経口投与実験によ
り、結核症の好発部位である肺組織への移行性
について検討した。即ち、被験化合物を0.5％CMC水溶液に懸濁
して、25mg／Kg体重の割合で、一夜絶食させた
ddY系雄性マウス（５週令、体重21〜23ｇ、１
群３匹）に経口投与し、常法に従つて、肺内濃
度をミクロコツカス・ルテウス菌
（Micrococcus luteus ATCC9341）を検定菌
として生物学的検定法により測定した。その結果を第４表に示した。【表】 (f) 急性毒性試験一夜絶食させたddY系雄性マウス（５週令、
体重21〜23ｇ、１群５匹）を用いて、本発明化
合物〔〕の経口投与時の急性毒性を調べた。なお、本発明化合物〔〕は0.5％CMC水溶
液に懸濁して投与した。その結果、本発明化合物〔〕を2000mg／Kg
投与しても死亡例は認められなかつた。従つて本発明化合物〔〕は低毒性であると
いえる。実施例以下、実施例を挙げて本発明をさらに具体的に
説明する。実施例１Ｎ−メチルイソブチルアミノ置換フエノチアジ
ン型リフアマイシン（式〔〕でＲがＮ−メチ
ルイソブチルアミノ基である化合物）の合成：フエニチアジン型リフアマイシン（化合物Ａ）
5.0ｇをＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド80mlに溶
解し、これにＮ−メチルイソブチルアミン0.66ｇ
を加え、室温で７日間反応させた。反応液を酢酸
エチルに注ぎ、１％硫酸、次いで食塩水で洗浄し
た。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧
下に溶媒を留去した。得られた残渣を以下に示す
条件下に中圧シリカゲルカラムクロマトグラフイ
ー（※）に付し、Rf値約0.73〔シリカゲルプレー
ト：シリカゲル60F₂₅₄（厚さ0.25mm、メルク社
製）、クロロホルム−メタノール（10：１）の混
合溶媒で展開〕に青色スポツトを示す溶出液を集
め、減圧下に溶媒を留去した。 ※試料の約120倍量のシリカゲル60（230〜400メ
ツシユ、メルク社製）を中圧カラクロマトグラフ
イー用のカラムに乾式充填し、クロロホルム−メ
タノール（200：１）の混合溶媒を流すことによ
つてカラムを調製した。次いで、試料を少量のク
ロロホルムに溶かして該カラムに加え入れ、クロ
ロホルム−メタノール（200：１）混合溶媒で１
〜３Kg／cm²の圧力下に溶出した。再度同条件でクロマトグラフイーに付し、得ら
れた残渣を酢酸エチルに溶かしてろ過した。ろ液
にｎ−ヘキサンを加え、生じた沈澱をろ取し、乾
燥後標記Ｎ−メチルイソブチルアミノ置換フエノ
チアジン型リフアマイシンを深青色粉末として
2.1ｇ（収率38％）得た。 IR（CDCl₃）（cm^-1）：3470、3370、1710、1665、
1594付近等、MMR（CDCl₃、δ（ppm））：−0.25、
0.42〔各々（ｄ、3H、CHCH₃）〕、0.7〜1.1付近
〔ｍ（イソブチル基由来のプロトンと重なる）、
各々CHCH₃）〕、1.84、2.00、2.16、2.29、3.04お
よび3.15〔各々ｓ、3H、CH₃）〕、0.7〜1.1付近
（ｍ、アンサ・リング上のメチル基由来のプロト
ンと重なる）および3.30(d)等（イソブチル基）、
4.8〜5.1付近（ｍ、2H、25位および28位のプロト
ソ）、5.9〜6.5付近（ｍ、3H、17、19および29位
のプロトソ）、6.5〜7.2付近（ｍ、3H、18位およ
びフエノチアジン環プロトソ）、7.94（ｄ、1H、
フエノチアジン環プロトン）、8.10（1H、アミド
プロトン）、14、67（ｓ、フエノール性プロトン）
等． UV（50％メタノール含有PH7.0リン酸緩衝液）
λmax、nm（E¹%₁cm：274（324）、300（335）、330
（肩、224）、375（138）、660（597）等．実施例２カプセル剤〔処方〕主薬（実施例１と化合物） 150ｇ乳糖 20〃タルク 10〃ステアリン酸マグネシウム３〃 183ｇ〔操作〕上記の成分を充分混合し、１カプセル当たり主
薬150mgを含む様にカプセルを充填してカプセル
剤とする。実施例３顆粒剤〔処方〕主薬（実施例１の化合物） 30ｇ乳糖 40〃トウモロコシデンプン 19〃ヒドロキシプロピルセルロース１〃 90ｇ〔操作〕主薬、乳糖およびトウモロコシデンプンを混合
し、これにヒドロキシプロピルセルロースを水20
mlを溶解して加え充分に練分する。この練合物を
20メツシユの篩を通して造粒し、乾燥した後、整
粒を行つて顆粒剤を得る。実施例４錠剤〔処方〕主薬（実施例１の化合物） 30.0ｇ乳糖 12.0〃トウモロコシデンプン 8.0〃結晶セルロース 8.6〃ヒドロキシプロピルセルロース 0.8〃ステアリン酸マグネシウム 0.6〃 60.6ｇ〔操作〕主薬、乳糖、トウモロコシデンプンおよび結晶
セルロースを混合し、これにヒドロキシプロピル
セルロースを水16mlに溶解して加え充分に練合す
る。この練合物を20メツシユの篩を通して顆粒状
に造粒し、乾燥した後、得られる顆粒にステアリ
ン酸マグネシウムを混合し、一錠300mgに打錠す
る。

Claims

【特許請求の範囲】１下式〔〕（式中、ＲはＮ−メチルイソブチルアミノ基であ
る。）で示されるアミノ置換フエノチアジン型リフアマ
イシン。２下式〔〕（式中、ＲはＮ−メチルイソブチルアミノ基であ
る。）で示されるアミノ置換フエノチアジン型リフアマ
イシンを有効成分とする抗結核剤。