JPH0515707B2

JPH0515707B2 -

Info

Publication number: JPH0515707B2
Application number: JP27987286A
Authority: JP
Inventors: Toshio Wakabayashi; Hirokazu Hasegawa; Akihiro Oota
Original assignee: Terumo Corp
Current assignee: Terumo Corp
Priority date: 1986-03-07
Filing date: 1986-11-26
Publication date: 1993-03-02
Also published as: JPS6310768A

Description

【発明の詳細な説明】発明の背景技術分野本発明は新規なピラジン誘導体およびこれを含
有する血小板凝集抑制剤に関する。本発明のピラジン誘導体は強力な血小板凝集抑
制作用を有するので、血小板凝集に起因する疾患
即ち血栓症等の予防に有効である。また、一般に
シクロオキシゲナーゼ阻害作用を有する化合物
は、抗炎症作用を有することが知られており、本
発明のピラジン誘導体は上記阻害作用を有するの
で、抗炎症剤としての使用も期待される。先行技術抗血小板凝集作用を有する物質は種々知られて
いるが、作用が弱いものであり、より改善された
薬剤の出現が望まれている。また、心筋梗塞や脳
血栓といつた血栓症は、近年成人病の中で大きな
割合を占めるに至つており、これを有効に予防す
る抗血栓症剤の出現が強く望まれている。従来種々のピラジン誘導体が知られており、例
えばジヤーナル・オブ・ヘテロサイクリツク・ケ
ミストリー、第21巻、第103〜106頁には２，３−
ジフエニルピラジンが記載されている。しかしな
がらこれらのピラジン誘導体が抗血小板凝集抑制
作用を有することはこれまで知られていない。発明の目的本発明者等は多くの新規なピラジン誘導体を合
成し、それらの薬理活性を鋭意研究した結果、特
定のピラジン誘導体が優れた血小板凝集抑制作用
を有することを見い出し、本発明を完成させた。したがつて本発明は血小板凝集抑制剤として有
用な新規なピラジン誘導体を提供することを目的
とする。さらに本発明は有効成分としてピラジン誘導体
を含有する血小板凝集抑制剤を提供することを目
的とする。かかる目的を達成するため本発明は下記の構成
を有する。１式〔式中Ｘは水素原子、ハロゲン原子、低級ア
ルキル基、低級アルコキシ基またはジ低級アル
キルアミノ基を示し、R¹は水素原子または低
級アルキル基を示し、R²は低級アルキル基、
ベンジル基、置換分として低級アルキル基、低
級アルコキシ基またはメチレンジオキシ基を有
する置換ベンジル基、チエニルメチル基または
置換分として低級アルキル基、低級アルコキシ
基またはメチレンジオキシ基を有する置換チエ
ニルメチル基を示す。但しR¹が水素原子を示
し、R²がメチル基を示す場合を除く。〕を有するピラジン誘導体。２Ｘが水素原子、ハロゲン原子、低級アルキル
基または低級アルコキシ基を示し、R¹が水素
原子または低級アルキル基を示し、そしてR²
が低級アルキル基、ベンジル基、置換分として
低級アルコキシ基を有する置換ベンジル基また
はチエニルメチル基を示す化合物（但しR¹が
水素原子を示し、R²がメチル基を示す場合を
除く。）である第１項記載のピラジン誘導体。３前記一般式（）を有するピラジン誘導体を
含有する血小板凝集抑制剤。発明の具体的説明本発明によれば前記式（）を有する新規なピ
ラジン誘導体が提供される。前記式（）においてＸは水素原子、ハロゲン
原子（例えば塩素、臭素、弗素原子）、低級アル
キル基（例えばメチル、エチル、プロピル、イソ
プロピル、ブチル、イソブチル）、低級アルコキ
シ基（例えばメトキシ、エトキシ、プロポキシ、
イソプロポキシ、ブトキシ、イソブトキシ）また
はジ低級アルキルアミノ基（例えばジメチルアミ
ノ、ジエチルアミノ、メチルエチルアミノ、メチ
ルプロピルアミノ、エチルプロピルアミノ、ジプ
ロピルアミノ）を示す。R¹は水素原子または低
級アルキル基（例えばメチル、エチル、プロピ
ル、イソプロピル、ブチル）を示す。R²は低級
アルキル基（例えばメチル、エチル、プロピル、
イソプロピル、ブチル、イソブチル）、ベンジル
基、置換分として低級アルキル基、低級アルコキ
シ基もしくはメチレンジオキシ基を有する置換ベ
ンジル基（例えば３−または４−メチルベンジ
ル、３−または４−エチルベンジル、３−または
４−メトキシベンジル、３−または４−エトキシ
ベンジル、３−または４−プロポキシベンジル、
３，４−メチレンジオキシベンジル）、チエニル
メチル基（例えば２−または３−チエニルメチ
ル）、または置換分として低級アルキル基、低級
アルコキシ基またはメチレンジオキシ基を有する
置換チエニルメチル基（例えば４−または５−メ
チル−２−または３−チエニルメチル）を示す。前記式（）を有するピラジン誘導体の好適な
化合物の例としては次のものがあげられる。２，３−ジフエニル−５−エチル（またはｎ−
プロピル）ピラジン、２，３−ビス（ｐ−クロロフエニル）−５−エ
チル（またはイソプロピル）ピラジン、２，３−ビス（ｐ−ブロモフエニル）−５−エ
チル（またはｎ−ブチル）ピラジン、２，３−ビス（ｐ−メチルフエニル）−５−エ
チル（またはｎ−プロピル）ピラジン、２，３−ビス（ｐ−メトキシフエニル）−５−
エチル（またはｎ−ブチル）ピラジン、２，３−ビス（ｐ−ジメチルアミノフエニル）
−５−エチル（またはイソブチル）ピラジン、２，３−ジフエニル−５−ベンジルピラジン、２，３−ジフエニル−５−（ｐ−メチルベンジ
ル）ピラジン、２，３−ジフエニル−５−（ｐ−メトキシベン
ジル）ピラジン、２，３−ジフエニル−５−（ｍ−メトキシベン
ジル）ピラジン、２，３−ビス（ｐ−メトキシフエニル）−５−
ベンジルピラジン、２，３−ビス（ｐ−クロロフエニル）−５−ベ
ンジルピラジン、２，３−ビス（ｐ−メトキシフエニル）−５，
６−ジエチル（またはイソプロピル）ピラジン、２，３−ビス（ｐ−メトキシフエニル）−５，
６−ジ−ｎ−ブチルピラジン、２，３−ビス（ｐ−メトキシフエニル）−５−
（２−チエニルメチル）ピラジン、２，３−ジフエニル−５−（２−チエニルメチ
ル）ピラジン、２，３−ビス（ｐ−クロロフエニル）−５−（２
−チエニルメチル）ピラジン、２，３−ビス（パラクロロフエニル）−５−（４
−メチル−２−チエニルメチル）ピラジン、ピラジン誘導体（）は式〔式中Ｘは前述したものと同一意義を有する〕を有するベンジル誘導体と式〔式中R¹およびR²は前述したものと同一意義
を有する〕を有する１，２−ジアミン誘導体を適当な有機溶
媒（例えばエタノール）中で加熱して式〔式中Ｘ，R¹およびR²は前述したものと同一
意義を有する〕を有するジヒドロピラジンを製造し、ついでこれ
を硫黄とともに100〜180℃で加熱することによつ
て製造される。ピラジン誘導体（）においてR¹が水素原子
であり、R²がベンジル、置換ベンジルまたはチ
エニルメチル基である化合物は、前記ベンジル誘
導体（）と、１，２−ジアミノエタンとを反応
させ、得られるシヒドロピラジン誘導体にベンツ
アルデヒド置換ベンツアルデヒド、チオフエンア
ルデヒドまたは置換チオフエンアルデヒドを反応
させて製造することもできる。上記製法において
該アルデヒドの代りにジアルキルケトンをジヒド
ロピラジン誘導体と反応させるとR²が分枝鎖状
アルキル基であるピラジン誘導体（）を得るこ
とができる。さらに、前記式（）においてR¹が水素原子、
またはR¹およびR²が低級アルキル基であるピラ
ジン誘導体は、２，３−ジフエニルピラジン誘導
体を過マレイン酸（permaleic acid）で酸化し
てモノ−またはジーＮ−オキサイド体を得、つい
でこれをオキシ塩化燐で塩素化して２，３−ジフ
エニル−４（または４，５−）クロロピラジン誘
導体とし、これをトリアルキル硼素と反応させる
ことによつて製造することもできる。本発明のピラジン誘導体（）は、血小板の凝
集を阻害する作用を有するので、血小板凝集抑制
剤として脳血栓等の予防に有効に使用される。さ
らに本発明のピラジン誘導体（）はシクロオキ
シゲナーゼ阻害作用を有し、抗炎症剤としても使
用されうる。投与量は一般に成人１日量約30〜
600mgであり、必要により１〜３回に分けて投与
するのがよい。投与方法は投与に適した任意の形
態をとることができ、特に経口投与が望ましい
が、静注も可能である。本発明の化合物は単独または通常の方法で製剤
担体あるいは賦形剤と混合され、錠剤、散剤、カ
プセル剤、顆粒剤に製剤化される。担体あるいは
賦形剤の例として炭酸カルシウム、リン酸カルシ
ウム、でんぷん、しょ糖、乳糖、タルク、ステア
リン酸マグネシウム等があげられる。本発明の化
合物は、上記の固形剤の他に油性懸濁剤、シロツ
プのような液剤とすることもできる。本発明の化合物をサイクロデキストリンで包接
して安定化することもできる。次に実施例および薬理試験例を示して本発明を
さらに具体的に説明する。実施例１２，３−ジフエニル−５，６−ジヒドロピラジ
ン2.570ｇ、ベンツアルデヒド1.060ｇ、水酸化カ
リウム0.672ｇをメタノール20mlに溶解し、加熱
還流下に１時間反応させた。該反応混液よりメタ
ノールを減圧留去し残渣に水50mlを加えこれより
酢酸エチルにて３回抽出を行なつた。抽出有機層
を水洗し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後溶媒を減
圧留去した。得られた抽出残渣をシリカゲルカラ
ムクロマトグラフイーに付し、ヘキサン、酢酸エ
チル８対１溶出画分より粗生成物を得た。該粗生
成物をヘキサンより再結晶し、無色プリズム晶と
して２，３ジフエニル−５−ベンジルピラジン
2.940ｇを得た。融点118〜119℃。本品の物性デ
ータは下記式（）の構造を支持する。元素分析値（C₂₃H₁₈N₂）計算値：Ｃ，85.68％；Ｈ，5.63％；Ｎ，8.69
％実測値：Ｃ，85.68％；Ｈ，5.53％；Ｎ，8.67
％ MASS（ｍ／ｅ）：322（分子イオンピーク） ¹H−NMR（CDCl₃）δ（ppm）： 4.27（2H，ｓ），8.47（1H，ｓ）実施例２２，３−ジフエニル−５，６−ジヒドロピラジ
ンとｐ−アニスアルデヒドを用い、実施例１と同
様の操作により融点102〜103℃（メタノール・水
より再結晶）の無色プリズム晶として２，３−ジ
フエニル−５−（ｐ−メトキシベンジル）ピラジ
ンを得た。本品の物性データは下記式（）の構
造を支持する。元素分析値（C₂₄H₂₀N₂Ｏ）計算値：Ｃ，81.79％；Ｈ，5.72％；Ｎ，7.95
％実測値：Ｃ，81.89％；Ｈ，5.70％；Ｎ，8.01
％ MASS（ｍ／ｅ）：352（分子イオンピーク） ¹H−NMR（CDCl₃）δ（ppm）： 3.73（3H，ｓ），4.17（2H，ｓ），
6.83（2H，ｄ，Ｊ＝９Hz），8.37（1H，ｓ）実施例３２，３−ジフエニル−５，６−ジヒドロピラジ
ンとｍ−アニスアルデヒドを用い、実施例１と同
様の操作により融点65〜66℃（メタノール・水よ
り再結晶）の無色プリズム晶として２，３−ジフ
エニル−５−（ｍ−メトキシベンジル）ピラジン
を得た。本品の物性データは下記式（）の構造
を支持する。元素分析値（C₂₄H₂₀N₂Ｏ）計算値：Ｃ，81.79％；Ｈ，5.72％；Ｎ，7.95
％実測値：Ｃ，82.02％；Ｈ，5.74％；Ｎ，7.77
％ MASS（ｍ／ｅ）：352（分子イオンピーク） ¹H−NMR（CDCl₃）δ（ppm）： 3.73（3H，ｓ），4.18（2H，ｓ），8.38（1H，
ｓ）実施例４２，３−ビス（ｐ−メトキシフエニル）−５，
６−ジヒドロピラジンとベンツアルデヒドを用い
実施例１と同様の操作により融点107〜109℃（メ
タノール・水より再結晶）の無色プリズム晶とし
て２，３−ビス（ｐ−メトキシフエニル）−５−
ベンジルピラジンを得た。本品の物性データは下
記式（）の構造を支持する。元素分析値（C₂₅H₂₂N₂O₂）計算値：Ｃ，78.51％；Ｈ，5.80％；Ｎ，7.33
％実測値：Ｃ，78.48％；Ｈ，5.77％；Ｎ，7.29
％ MASS（ｍ／ｅ）：382（分子イオンピーク） ¹H−NMR（CDCl₃）δ（ppm）： 3.77（6H，ｓ），4.22（2H，ｓ），6.80（2H，
ｄ，Ｊ＝９Hz），6.82（2H，ｄ，Ｊ＝９Hz），
8.33（1H，ｓ）実施例５２，３−ビス（ｐ−メトキシフエニル）−５，
６−ジヒドロピラジンとアセトンを用い、実施例
１と同様の操作により沸点211℃（0.15Torr）の
油状物質として２，３−ビス（ｐ−メトキシフエ
ニル）−５−イソプロピルピラジンを得た。本品
の物性データは下記式（）の構造を支持する。元素分析値（C₂₁H₂₂N₂O₂）計算値：Ｃ，75.42％；Ｈ，6.63％；Ｎ，8.38
％実測値：Ｃ，76.19％；Ｈ，6.76％；Ｎ，8.48
％ MASS（ｍ／ｅ）：334（分子イオンピーク） ¹H−NMR（CDCl₃）δ（ppm）： 1.37（6H，ｄ，Ｊ＝７Hz），3.75（6H，ｓ），
6.78（4H，ｄ，Ｊ＝９Hz），7.35（2H，ｄ，Ｊ
＝９Hz），7.41（2H，ｄ，Ｊ＝９Hz），8.37
（1H，ｓ）実施例６２，３−ビス（ｐ−メトキシフエニル）ピラジ
ン１−オキシド3.918ｇをオキシ塩化リン20ml
中に混和し、加熱還流下に30分間反応させた。放
冷後該反応混液を氷水中に注ぎ、つづいて炭酸カ
リウムにて塩基性とすると生成物が析出し、これ
を取して２，３ビス（ｐ−メトキシフエニル）
−５−クロロピラジン2.823ｇを得た。アルゴン
雰囲気下該化合物653mg、無水炭酸カリウム414mg
及びテトラキス（トリフエニルホスフイン）パラ
ジウム116mgを、乾燥Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムア
ミド10mlに懸濁しトリエチルボラン・ヘキサン溶
液（15％）２mlを添加した。該反応混液を加熱還
流下に２時間反応させた後、溶媒を減圧留去し
た。得られた残渣に水を加えこれより塩化メチレ
ンにて３回抽出を行なつた。抽出有機層を水洗し
無水硫酸ナトリウムで乾燥後溶媒を減圧留去し抽
出残渣850mgを得た。該残渣をシリカゲルカラム
クロマトグラフイーに付しヘキサン塩化メチレン
１対１溶出画分より２，３−ビス（ｐ−メトキシ
フエニル）−５−エチルピラジン555mgを得た。融
点76.5〜78℃（無色針状晶、エタノールより再結
晶）本品の物性データは下記式（）の構造を支
持する。元素分析値（C₂₀H₂₀N₂O₂）計算値：Ｃ，74.98％；Ｈ，6.29％；Ｎ，8.74
％実測値：Ｃ，75.02％；Ｈ，6.41％；Ｎ，8.73
％ MASS（ｍ／ｅ）：320（分子イオンピーク） ¹H−NMR（CDCl₃）δ（ppm）： 1.37（3H，ｔ，Ｊ＝７Hz），2.87（2H，ｑ，Ｊ
＝７Hz），3.77（6H，ｓ），6.77（4H，ｄ，Ｊ
＝7.5Hz），7.33（2H，ｄ，Ｊ＝7.5Hz），7.37
（2H，ｄ，Ｊ＝7.5Hz），8.33（1H，ｓ）実施例７２，３−ビス（ｐ−メトキシフエニル）−５，
６−ジヒドロピラジンと２−チオフエンアルデヒ
ドを用い実施例１と同様の操作により融点89℃
（メタノールより再結晶）の無色プリズム晶とし
て２，３−ビス（ｐ−メトキシフエニル）−５−
（２−チエニルメチル）ピラジンを得た。本品の
物性データは下記式（）の構造を支持する。元素分析値（C₂₃H₂₀N₂O₂）計算値：Ｃ，71.11％；Ｈ，5.19％；Ｎ，7.21
％実測値：Ｃ，71.19％；Ｈ，5.25％；Ｎ，7.22
％ MASS（ｍ／ｅ）：388（分子イオンピーク） ¹H−NMR（CDCl₃）δ（ppm）： 3.77（6H，ｓ），4.40（2H，ｓ），6.80（2H，
ｑ，Ｊ＝９Hz），6.92（2H，ｄ，Ｊ＝９Hz），
7.37（2H，ｄ，Ｊ＝９Hz），7.43（2H，ｄ，Ｊ
＝９Hz），8.40（1H，ｓ）実施例８２，３−ビス（ｐ−メトキシフエニル）ピラジ
ン１，４−ジオキシド1.800ｇをオキシ塩化リ
ン20ml中に混和し加熱還流下に１時間反応させ
た。該反応混液を放冷後氷水中に注ぎつづいて炭
酸カリウムで塩基性としこれより塩化メチレンで
３回抽出を行なつた。抽出有機層を水洗し無水硫
酸ナトリウムで乾燥後溶媒を減圧留去し抽出残渣
を得た。該残渣をシリカゲルカラムクロマトグラ
フイーに付し２，３−ビス（ｐ−メトキシフエニ
ル）−５，６−ジクロロピラジン1.504ｇを得た。アルゴン雰囲気下、該化合物903mgとテトラキ
ス（トリフエニルホスフイン）パラジウム289mg
を乾燥テトラヒドロフラン10mlに溶解し、さらに
トリメチルアルミニウム・ヘキサン溶液（15％）
1.7mlを添加した。つづいて加熱還流下に４時間
反応させ、放冷後水１mlを加えてから溶媒を減圧
留去した。得られた残渣に再び水１mlを加えこれ
より塩化メチレンで３回抽出を行なつた。抽出有
機層を水洗し無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒
を減圧留去し抽出残渣1.30ｇを得た。該残渣をシ
リカゲルカラムクロマトグラフイーに付し塩化メ
チレン溶出画分より２，３−ビス（ｐ−メトキシ
フエニル）−５，６−ジメチルピラジン694mgｇを
得た。融点106.5〜108℃（無色針状晶、エタノー
ルより再結晶）本品の物性データは下記式（
）の構造を支持する。元素分析値（C₂₀H₂₀N₂O₂）計算値：Ｃ，74.98％；Ｈ，6.29％；Ｎ，8.74
％実測値：Ｃ，74.89％；Ｈ，6.25％；Ｎ，8.90
％ MASS（ｍ／ｅ）：320（分子イオンピーク） ¹H−NMR（CDCl₃）δ（ppm）： 2.57（6H，ｓ），3.77（6H，ｓ），6.78（4H，
α，Ｊ＝7.5Hz），7.37（4H，ｄ，Ｊ＝7.5Hz）実施例９２，３−ビス（ｐ−メトキシフエニル）−５，
６−ジクロロピラジン（1.08ｇ、3mモル）、無水
炭酸カリウム（1.24ｇ、9mモル）及びテトラキ
ス−（トリフエニルホスフイン）パラジウム（348
mg、0.3mモル）の無水DMF（15ml）溶液に15％
ET₃Ｂ−ヘキサン溶液^*（６ml、6mモル）を室温
下少量ずつ加えた後、アルゴン気流下12時間加熱
還流する。減圧下溶媒を留去し、水（20ml）を加
え、塩化メチレンで抽出し、溶媒を留去すると淡
黄色粘着物質を得る。これを中圧シリカゲルカラ
ムクロマトグラフイー^**（カラム：Kieselgel
60、230〜400メツシユ、メルク社製、20mm×200
mm、溶媒：CH₂Cl₂−ヘキサン＝２：３）に付し、
第一番目の溶出物質として２，３−ビス（ｐ−メ
トキシフエニル）−５，６−ジエチルピラジン
（734mg、70％）を無色透明な液体として得た。
bp188〜194°／0.075mmＨｇ MASS（ｍ／ｚ）：348（m⁺） NMR（CDCl₃）δ（ppm）： 1.25（6H，ｔ，Ｊ＝7.5Hz，２×CH₂ＣＨ ₃），
2.80（4H，ｑ，Ｊ＝7.5Hz，２×ＣＨ ₂CH₃），
3.65（6H，ｓ，２×OCH₃），6.70（4H，ｄ，
Ｊ＝９Hz、ベンゼンＨ），7.32（4H，ｄ，Ｊ
＝９Hz、ベンゼンＨ）＊関東化学株式会社の溶液をそのまま用い
た。＊＊UVILOG.ALPC−100（応用分光機器株式
会社）実施例 10 ２，３−ビス（ｐ−メトキシフエニル）−５，
６−ジクロロピラジン（1.08ｇ、3mモル）、無水
炭酸カリウム（1.24ｇ、9mモル）及びテトラキ
ス−（トリフエニルホスフイン）パラジウム（348
mg、0.3mモル）の無水DMF溶液にBu₄Sn（2.4ml、
6mモル）を加えた後、アルゴン気流下12時間加
熱還流する。減圧下溶媒を留去し、水（20ml）を
加え、塩化メチレンで抽出し、溶媒を留去すると
淡黄色粘着物質を得る。これを中圧シリカゲルカ
ラムクロマトグラフイー^*（カラム：
Kieselgel60、230〜400メツシユ、メルク社製、
20mm×200mm、溶媒：ヘキサン−AcOET＝６：
１）に付し、第一番目の溶出物質として２，３−
ビス（ｐ−メトキシフエニル）−５，６−ジブチ
ルピラジン（360mg、30％）を第二番目溶出物質
として２，３−ビス（ｐ−メトキシフエニル）−
５−ブチルピラジン（553mg、53％）を得た。＊UVILOG.ALPC−100（応用分光機器株式会
社）２，３−ビス（ｐ−メトキシフエニル）−５，
６−ジブチルピラジン淡黄色透明な液体bp195〜200°／0.06mmＨｇ MASS ｍ／ｚ：404（m⁺） NMR（CDCl₃）δ（ppm）： 0.93（6H，ｔ，Ｊ＝7.5Hz，２×CH₂CH₂CH₂
ＣＨ ₃），1.43（4H，ｍ，２×CH₂CH₂ＣＨ ₂
CH₃），1.77（4H，ｍ，２×CH₂ＣＨ ₂CH₂
CH₃），2.83（4H，ｔ，Ｊ＝7.5Hz，２×ＣＨ ₂
CH₂CH₂CH₃），3.70（6H，ｓ，２×OCH₃），
6.73（4H，ｄ，Ｊ＝９Hz、ベンゼンＨ），7.35
（4H，ｄ，Ｊ＝９Hz、ベンゼンＨ）２，３−ビス（ｐ−メトキシフエニル）−５−
ブチルピラジン淡黄色透明液体bp175〜180°／0.06mmＨｇ MASS ｍ／ｚ：348（m⁺） NMR（CDCl₃）δ（ppm）： 0.93（3H，ｔ，Ｊ＝7.5Hz，CH₂CH₂CH₂ＣＨ
_３），1.38（2H，ｍ，CH₂CH₂ＣＨ ₂CH₃），1.78
（2H，ｍ，CH₂ＣＨ ₂CH₂CH₃），2.85（2H，
ｔ，Ｊ＝7.5Hz，ＣＨ ₂CH₂CH₂CH₃），3.75
（6H，ｓ，２×OCH₃），6.82（4H，ｄ，Ｊ＝
９Hz、ベンゼンＨ），7.42（4H，dd，Ｊ＝２
Hz and Ｊ＝９Hz、ベンゼンＨ），8.38（1H，
ｓ、ピラジンＨ）薬理試験例１血小板凝集抑制作用 3.8％クエン酸ナトリウム溶液（１容）を入れ
た注射器を用いてウサギ頸動脈より９容の血液を
採取する。該血液を遠心分離し、血小板に富む血
漿（PRP：７×10⁵個／μ）を得る。該PRP268μをキユベツトに入れ、37℃恒温
槽で２分間加温し、試験するピラジン誘導体のエ
タノール溶液2μを加え３分間インキユベート
した後、血小板の凝集惹起剤であるアラキドン酸
溶液あるいはコラーゲン溶液を加え血小板凝集を
ボーン（Born）の比濁法〔たとえばジヤーナ
ル・オブ・フイジオロジー（J.Physiol.第168巻、
第178頁、1968年発行）に記載されている〕で測
定した。アラキドン酸（50マイクロモル）または
コラーゲン（10μｇ／ml）によつて惹起される血
小板凝集に対する50％抑制濃度を表１に示す。ア
セチルサリチル酸を比較例として用いた。表１に示す如く本発明のピラジン誘導体は顕著
な抗血小板凝集活性を見出した。また、表１に示
さない本発明に係るピラジン誘導体についても同
様な抗血小板凝集活性を有することが確認され
た。尚、表中50％阻害濃度とは本発明に係るピラ
ジン誘導体を導入しない場合の血小板の凝集能を
100％とした場合、該ピラジン誘導体の導入によ
り前記血小板の凝集能を50％まで抑制する為に要
したピラジン誘導体溶液濃度を意味する。

【表】

【表】試験例２シクロオキシゲナーゼ阻害作用 3.8％クエン酸ナトリウム溶液（１容）を入れ
た注射器を用いてウサギ腹部大動脈より９容の血
液を採取する。遠心分離により多血小板血漿を得
る。多血小板血漿にその1/10容の77mM EDTA
溶液を加えよく混合後、室温にて2500回転／分、
10分間遠心分離操作を行う。上清を捨て洗浄液
（塩化ナトリウム134mM、トリスアミノメタン
15mM EDTA 1mM Ｄ−グルコース5mMを蒸
留水に溶解し、１規定塩化水素でPH7.4に調整し
たもの）約３mlで血小板を再懸濁し、室温にて
2000回転／分、10分間遠心分離する。上清を捨て
沈澱している血小板をPH8.0リン酸緩衝液で再懸
濁し、血小板数を１×10⁶個／μに調整する。こうして得られた洗浄血小板をシクロオキシゲ
ナーゼ酵素源とする。アラキドン酸3μｇ、¹⁴C標識アラキドン酸0.2μCi
（1μｇ）を共栓付試験官に入れ、プロピレングリ
コール／エタノール混合液（１：３容）を１滴加
え窒素ガス下でエタノールを蒸発させる。ここに
検体溶液を50μ加え、さらに洗浄血小板を450μ
加え、37℃で３分間反応させる。氷冷しながら１規定塩素水素１滴を加えPHを２
〜３にする。酢酸エチル２mlを加え10分間振とう
抽出を行い４℃で2500回転／分、10分間遠心分離
を行う。上清をフラスコに移し濃縮後、残渣を100μ
エタノールに溶解しシリカゲル薄層板（メルク社
製60F₂₅₄）に全量スポツトする。展開溶媒（クロロホルム／メタノール／酢酸／
水＝70：８：１：0.8）で約18cm展開後、ラジオ
クロマトスキヤナーでプロスタグランジンF₂〓、
トロンボキサンB₂、プロスタグランジンE₂〓、プ
ロスタグランジンD₂及びHHTの放射活性の和を
測定し、阻害活性をみた。結果を表２に示す。

【表】急性毒性 ICR系雄性マウス（５週令）を用いて、経口投
与による急性毒性試験を行つた。本発明のピラジ
ン誘導体のLD₅₀値はいずれも300mg／Kg以上であ
り、高い安全性が確認された。発明の効果本発明によれば新規なピラジン誘導体およびこ
れを含有する血小板凝集抑制剤が提供される。本発明の上記化合物はアラキドン酸あるいはコ
ラーゲンによつて誘起される血小板凝集作用を顕
著に抑制するので、血小板凝集に起因する疾患、
特に心筋梗塞、脳出血後の虚血性発作、脳梗塞等
血小板凝集の関与する血栓症の予防剤として使用
することができる。

Claims

【特許請求の範囲】１一般式（）〔式中Ｘは水素原子、ハロゲン原子、低級アル
キル基、低級アルコキシ基またはジ低級アルキル
アミノ基を示し、R¹は水素原子または低級アル
キル基を示し、R²は低級アルキル基、ベンジル
基、置換分として低級アルキル基、低級アルコキ
シ基またはメチレンジオキシ基を有する置換ベン
ジル基、チエニルメチル基または置換分として低
級アルキル基、低級アルコキシ基またはメチレン
ジオキシ基を有する置換チエニルメチル基を示
す。但し、R¹が水素原子を示し、R²がメチル基
を示す場合を除く。〕を有するピラジン誘導体。２Ｘが水素原子、ハロゲン原子、低級アルキル
基または低級アルコキシ基を示し、R¹が水素原
子または低級アルキル基を示し、そしてR²が低
級アルキル基、ベンジル基、置換分として低級ア
ルコキシ基を有する置換ベンジル基またはチエニ
ルメチル基を示す化合物（但し、R¹が水素原子
を示し、R²がメチル基を示す場合を除く）であ
る特許請求の範囲第１項記載のピラジン誘導体。３一般式（）〔式中Ｘは水素原子、ハロゲン原子、低級アル
キル基、低級アルコキシ基またはジ低級アルキル
アミノ基を示し、R¹は水素原子または低級アル
キル基を示し、R²は低級アルキル基、ベンジル
基、置換分として低級アルキル基、低級アルコキ
シ基またはメチレンジオキシ基を有する置換ベン
ジル基、チエニルメチル基または置換分として低
級アルキル基、低級アルコキシ基またはメチレン
ジオキシ基を有する置換チエニルメチル基を示
す。但しR¹が水素原子を示し、R²がメチル基を
示す場合を除く。〕を有するピラジン誘導体を含有する血小板凝集抑
制剤。