JPH05219984A

JPH05219984A - （ｒ）−１−フェニル−１，３−プロパンジオ−ルの製造方法

Info

Publication number: JPH05219984A
Application number: JP2246692A
Authority: JP
Inventors: Ikuo Kira; 郁夫吉良; Takayuki Suzuki; 孝之鈴木; Eiji Nakanishi; 英二中西; Ikumasa Onishi; 幾正大西
Original assignee: Ajinomoto Co Inc
Current assignee: Ajinomoto Co Inc
Priority date: 1992-02-07
Filing date: 1992-02-07
Publication date: 1993-08-31

Abstract

(57)【要約】【構成】１−フェニルプロパン−３−オール−１−オ
ンを微生物の培養物、該培養物より分離した微生物菌体
もしくは該微生物菌体の処理物を用いて不斉的に還元す
ることにより（Ｒ）−１−フェニル−１，３−プロパン
ジオールに変換し、これを採取することを特徴とする
（Ｒ）−１−フェニル−１，３−プロパンジオールの製
造方法。【効果】本発明の方法によると、光学純度の高い
（Ｒ）−１−フェニル−１，３−プロパンジオールを高
い反応収率で簡便に製造することができる。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は（Ｒ）−１−フェニル−
１，３−プロパンジオールの製造方法に関する。（Ｒ）
−１−フェニル−１，３−プロパンジオールは種々の医
薬品の合成原料として有用である。

【０００２】

【従来の技術】従来、（Ｒ）−１−フェニル−１，３−
プロパンジオールを製造する方法としては、化学的に合
成されたラセミ体の３−フェニル−３−ヒドロキシプロ
ピオン酸エチルをリパーゼにより不斉水解し、得られた
（Ｒ）−３−フェニル−３−ヒドロキシプロピオン酸を
化学的に還元する方法（米国特許第４９２１７９８号）
が知られている。しかしこの方法では、原料が高価であ
りかつその５０％しか生産物に変換できず、また工程が
煩雑であるという問題点を有していた。

【０００３】

【発明を解決しようとする課題】本発明の目的は、安価
かつ簡便に光学純度の高い（Ｒ）−１−フェニル−１，
３−プロパンジオールを製造する方法を提供することで
ある。

【０００４】

【問題を解決するための手段】本発明者らは上述の事情
に鑑み検討を重ねた結果、１−フェニルプロパン−３−
オール−１−オンを（Ｒ）−１−フェニル−１，３−プ
ロパンジオールに不斉的に還元する能力を有する微生物
が存在することを見出し、本発明を完成するに至った。

【０００５】すなわち、本発明は、１−フェニルプロパ
ン−３−オール−１−オンを（Ｒ）−１−フェニル−
１，３−プロパンジオールに不斉的に還元する能力を有
する微生物の培養物、該培養物より分離した微生物菌体
もしくは該微生物菌体の処理物を１−フェニルプロパン
−３−オール−１−オンに作用せしめ、生成する（Ｒ）
−１−フェニル−１，３−プロパンジオールを採取する
ことを特徴とする（Ｒ）−１−フェニル−１，３−プロ
パンジオールの製造方法を提供するものである。

【０００６】本発明に使用する微生物としては、１−フ
ェニルプロパン−３−オール−１−オンを（Ｒ）−１−
フェニル−１，３−プロパンジオールに不斉的に還元す
る能力を有する微生物であればいずれを用いてもよい
が、具体的には以下のものが挙げられる。キャンディダ・グロペンギエセリ（Candida gropengies
seri）ＩＦＯ０６５９トリコスポロン・ファーメンタンス（Trichosporon fer
mentans）ＩＦＯ１１９９アスペルギルス・オリゼ・バラエティー・ミクロ−ベシ
キュローサス（Aspergillus oryzae var. micro-vesicu
losus）ＩＦＯ４２６１

【０００７】これらの微生物は、野生株または変異株の
いずれでもよいし、また、細胞融合もしくは遺伝子操作
法等の遺伝学的手法により誘導される組み換え株等も用
いることができる。

【０００８】本発明に用いる微生物を培養するための培
地は、その微生物が増殖し得るものであれば特に制限は
ない。例えば、炭素源、窒素源、無機塩類、有機栄養素
等を含有する通常の液体栄養培地を使用することができ
る。

【０００９】炭素源としては、上記微生物の利用可能な
ものであればいずれも使用でき、具体的には、グルコー
ス、フルクトース、シュクロース、デキストリン等の糖
類、ソルビトール、エタノール、グリセロール等のアル
コール類、フマル酸、クエン酸、酢酸、プロピオン酸等
の有機酸類またはその塩類、パラフィン等の炭化水素
類、あるいはこれらの混合物を使用することができる。

【００１０】窒素源としては、例えば、硫酸アンモニウ
ム、塩化アンモニウム等の無機アンモニウム塩、フマル
酸アンモニウム、クエン酸アンモニウム等の有機酸アン
モニウム塩、硝酸ナトリウム、硝酸カリウム等の硝酸
塩、ペプトン、酵母エキス、肉エキス、コーンスティー
プリカー等の有機窒素化合物、あるいはこれらの混合物
を使用することができる。

【００１１】他に無機塩類、微量金属塩、ビタミン類
等、通常の培養に用いられる栄養源を適宜、混合して用
いることができる。また必要に応じて微生物の増殖を促
進する因子、本発明の目的化合物の生成能力を高める因
子、あるいは培地のｐＨ保持に有効な物質も添加でき
る。

【００１２】培養方法としては、ｐＨは３ないし９．
５、好ましくは４ないし８、培養温度は２０ないし４５
℃、好ましくは２５ないし３７℃で、嫌気的あるいは好
気的にその微生物の生育に適した条件下で、５ないし１
２０時間、好ましくは１２ないし７２時間程度培養す
る。

【００１３】上記微生物を１−フェニルプロパン−３−
オール−１−オンに作用せしめる方法としては、かくし
て得られる微生物培養物に１−フェニルプロパン−３−
オール−１−オンを添加して反応させる方法、遠心分離
等により菌体を分離し、これをそのままもしくは洗浄し
た後、緩衝液、水等に再懸濁したものに、１−フェニル
プロパン−３−オール−１−オンを添加し反応させる方
法等がある。この反応の際、グルコース、フラクトー
ス、シュクロース等の炭素源をエネルギー源として添加
するとさらに好ましい結果が得られる場合もある。ま
た、微生物菌体の処理物としては、菌体破砕物、アセト
ン処理菌体、凍結乾燥菌体等を使用することができ、ま
たポリアクリルアミドゲル法、カラギーナン法、アルギ
ン酸ゲル法等の公知の方法で固定化した菌体も用いるこ
ともできる。更に、微生物菌体処理物として、菌体抽出
物もしくはこれより反応を触媒する不斉還元酵素を分離
精製したものも使用できる。この場合、補酵素としてＮ
ＡＤＨやＮＡＤＰＨを反応系に添加することが好まし
い。

【００１４】１−フェニルプロパン−３−オール−１−
オンはそのまま、あるいは水もしくは反応に影響を与え
ないような有機溶媒に溶解したり、界面活性剤等に分散
させたりして、反応始めから一括してあるいは反応途中
に分割して添加することができる。添加濃度は特に制限
されないが、０．１ないし１０％程度が好ましい。

【００１５】反応はｐＨ３ないし９、好ましくはｐＨ５
ないし８、温度は１０ないし６０℃、好ましくは２０な
いし４０℃の範囲で、攪拌下または静置下で行う。かく
して１ないし１２０時間程度反応させることにより反応
液中に光学純度の高い（Ｒ）−１−フェニル−１，３−
プロパンジオールが生成蓄積する。

【００１６】反応によって生成した（Ｒ）−１−フェニ
ル−１，３−プロパンジオールの採取は、反応液から直
接あるいは菌体分離後、有機溶媒による抽出、蒸留、カ
ラムクロマトグラフィー等の通常の精製方法を用いれば
容易に得ることができる。

【００１７】

【実施例】以下、本発明を実施例にてさらに詳細に説明
する。なお、実施例における１−フェニル−１，３−プ
ロパンジオールの絶対配置、光学純度並びに反応収率の
測定は、高速液体クロマトグラフィー（カラム：ダイセ
ル化学製キラルセルＯＢ、溶離液：ヘキサン／２ープロ
パノール＝８／２、流量：０．７ｍｌ／分、検出：ＵＶ
２１０ｎｍ）により行った（保持時間：（Ｓ）体８．７
５分、（Ｒ）体９．７２分）。

【００１８】実施例１グルコース２．０％、（ＮＨ₄）₂ＳＯ₄０．５％、Ｋ₂Ｈ
ＰＯ₄０．３％、ＫＨ₂ＰＯ₄０．１％、ＭｇＳＯ₄・７Ｈ
₂Ｏ０．０５％、ＦｅＳＯ₄・７Ｈ₂Ｏ０．００１％、Ｍ
ｎＳＯ₄・４Ｈ₂Ｏ０．００１％、酵母エキス１．０％、
ポリペプトン１．０％から成る培地（ｐＨ７．０）を試
験管に３ｍｌずつ分注し、加熱殺菌後、予めブイヨン寒
天培地にて３０℃、２４時間培養して得た表１に示す微
生物の菌体をそれぞれ一白金耳量接種し、３０℃で２４
ないし４８時間振とう培養した。ついで培養液に１−フ
ェニルプロパン−３−オール−１−オン３ｍｇ、グルコ
ース１５ｍｇを添加しさらに３０℃、２４時間振とうし
て反応を行った。反応終了後、反応液をエタノールで希
釈した後、遠心分離にて除菌し、得られた上澄を高速液
体クロマトグラフィーに供し、生成した１−フェニル−
１，３−プロパンジオールの絶対配置、光学純度並びに
反応収率を測定した。結果を表１に示す。

【００１９】

【表１】

【００２０】実施例２２ｌ容ミニジャーファーメンターに実施例１に示した組
成の培地１．０ｌを入れ、加熱殺菌後、予め同じ組成の
培地で３０℃、２４時間振とう培養したトリコスポロン
・ファーメンタンスＩＦＯ１１９９の培養液４０ｍｌ
を接種し、通気量１ｖｖｍ、攪拌速度５００ｒｐｍにて
３０℃、２４時間培養を行った。培養終了後、遠心分離
により菌体を集め、培養液と同量の２００ｍＭリン酸緩
衝液（ｐＨ７．５）で洗浄した後、５００ｍｌの同緩衝
液に懸濁した。この懸濁液にグルコース２５ｇ、１−フ
ェニルプロパン−３−オール−１−オンを２．５ｇ添加
し、さらに３０℃で４８時間通気攪拌しつつ反応を行っ
た。反応終了後、生成した１−フェニル−１，３−プロ
パンジオールの絶対配置、光学純度並びに反応収率を測
定したところ、絶対配置は（Ｒ）体、光学純度は８６
％、反応収率は７０％であった。

【００２１】実施例３５００ｍｌ容坂口フラスコに実施例１に示した組成の培
地５０ｍｌを入れ、加熱殺菌後、予めブイヨン寒天培地
にて３０℃、２４時間培養して得たトリコスポロン・フ
ァーメンタンスＩＦＯ１１９９の菌体を一白金耳量接
種し、３０℃で２４時間振とう培養を行なった。培養終
了後、遠心分離により菌体を集め、培養液と同量の５０
ｍＭトリス−塩酸緩衝液（ｐＨ７．５）で洗浄した後、
得られた湿菌体２．６８ｇに同緩衝液１ｍｌを加え菌体
懸濁液とした。この菌体懸濁液を乳鉢で破砕した後、同
緩衝液４ｍｌを加え、遠心分離により菌体残渣を除き、
得られた上清を無細胞抽出液とした。

【００２２】次に、無細胞抽出液０．５ｍｌに補酵素溶
液（ＮＡＤＰＨ１８．１ｍｇ／ｍｌトリス−塩酸緩衝
液）０．５ｍｌ、１−フェニルプロパン−３−オール−
１−オン１．５ｍｇを加え、３０℃で２８時間反応を行
なった。反応終了後、生成した１−フェニル−１，３−
プロパンジオールの絶対配置、光学純度並びに反応収率
を測定したところ、絶対配置は（Ｒ）体、光学純度は８
６％、反応収率は５０％であった。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁵ 識別記号庁内整理番号ＦＩ技術表示箇所 (Ｃ１２Ｐ 41/00 Ｃ１２Ｒ 1:645） (72)発明者大西幾正神奈川県川崎市川崎区鈴木町１−１味の素株式会社中央研究所内

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】１−フェニルプロパン−３−オール−１
−オンを（Ｒ）−１−フェニル−１，３−プロパンジオ
ールに不斉的に還元する能力を有する微生物の培養物、
該培養物より分離した微生物菌体もしくは該微生物菌体
の処理物を１−フェニルプロパン−３−オール−１−オ
ンに作用せしめ、生成する（Ｒ）−１−フェニル−１，
３−プロパンジオールを採取することを特徴とする
（Ｒ）−１−フェニル−１，３−プロパンジオールの製
造方法。
【請求項２】微生物がキャンディダ属、トリコスポロ
ン属またはアスペルギルス属に属する微生物である請求
項１記載の（Ｒ）−１−フェニル−１，３−プロパンジ
オールの製造方法。