JPH05262653A - 先天性免疫不全症候群（エイズ）治療用組成物 - Google Patents

先天性免疫不全症候群（エイズ）治療用組成物

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JPH05262653A
JPH05262653A JP4095140A JP9514092A JPH05262653A JP H05262653 A JPH05262653 A JP H05262653A JP 4095140 A JP4095140 A JP 4095140A JP 9514092 A JP9514092 A JP 9514092A JP H05262653 A JPH05262653 A JP H05262653A
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poly
aids
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hiv
treatment
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JP4095140A
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Ara G Hovanessian
アラ・ジエ．オバネシアン
De Paillette Evelyne Deschamps
エヴエリイヌ・デシヤンプ・ド・パイエツト
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Ipsen Pharma SAS
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Societe de Conseils de Recherches et dApplications Scientifiques SCRAS SAS
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Abstract

(57)【要約】 （修正有） 【構成】 ポリ(A).ポリ(U) の複合体 0.1〜 100％と、
場合により、ポリ(A).ポリ(U) の複合体の一つと異なる
機構によって HIVウイルスに作用する抗エイズ剤と、薬
学的に許容される稀釈剤又は担体とからなる先天性免疫
不全症候群（エイズ）及び関連する感染症の処置のため
の治療用組成物。但し、Ａはアデニル酸、Ｕはウリジル
酸を意味し、この複合体に配合される、異なる機構の抗
エイズ剤としては AZT， DDTおよび DDCが例示される。 【効果】 ポリ(A).ポリ(U) 複合体は細胞体内へのウイ
ルス侵入を阻止することによりエイズ治療用の効果を発
揮する。更に AZT， DDI， DDCの如き他のエイズ剤と共
に投与した場合、後者の効果を増強させることにより、
エイズ治療効果は更に向上する。

Description

【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明はポリアデニル酸［ポリ
(A) ］とポリウリジル酸［ポリ(U) ］との複合体(compl
ex) と場合により抗エイズ剤(anti-Aids drug)とを含有
する医薬組成物及びかかる複合体の、先天性免疫不全症
候群（エイズ）の処置のための使用に関する。
【０００２】
【従来の技術】英国特許第 2,211,847号明細書にはポリ
ヌクレオチドの単独重合体及び共重合体及びその複合体
の製造方法が記載されている。これらの生成物は新規な
化合物ではないが、従来の方法においては、これらの生
成物を、これを医薬的な用途に使用するのに不適当なも
のにせしめる有毒不純物を伴うことなしに、経済的に許
容される価格で製造することは不可能であった。上記英
国特許明細書に記載される方法によれば、医薬的用途に
使用するのに十分な純度の生成物が得られる；上記英国
特許明細書には医薬的用途として腫瘍の処置が記載され
ている。
【０００３】従来の文献には、ポリ(A).ポリ(U) の複合
体は抗ウイルス剤としては不良なものであると記載され
ている（"Effects of polynucreotides on monky and m
an", CLINICAL ASPECTS OF INTERFERONS ,1988,319 −
331頁参照）；従って、ウイルスとレトロ−ウイルスは
完全に異なる種であると考えられているため、ポリ(A).
ポリ(U) が効果的な抗レトロ−ウイルス剤であり得ると
いうことは明らかではなっかた。
【０００４】
【本発明の特徴及び効果】ポリ(A).ポリ(U) の複合体
は、ウイルスの侵入を阻止することにより、細胞培養体
(cell culture)中において種々のHIV ウイルスに対して
重要な阻止剤として作用することが認められた。本発明
によれば主要な活性成分がポリ(A).ポリ(U)であるエイ
ズ治療用組成物が提供される。ポリ(A).ポリ(U) は英国
特許第 2,111,847号明細書に記載される方法によって調
製することが好ましい。
【０００５】更に、ポリ(A).ポリ(U) は 3'−アジド−
3'−デオキシチミジン(AZT) 、ジデオキシイノシン(DD
I) 又はジデオキシシチジン(DDC) のごとき他の抗エイ
ズ剤と共に投与した場合は効果的であり、後者の効果を
増大させることも認められた。従って、本発明によれ
ば、更に、ポリ(A).ポリ(U) と十分な量の他の抗エイズ
剤と薬学的に許容される稀釈剤とからなる医薬組成物が
提供される。
【０００６】最後に、本発明によれば、有効量のポリ
(A).ポリ(U) を、単独で又は任意の抗エイズ剤と組合せ
て、エイズに罹病している患者に投与することからな
る、エイズの治療方法が提供される。
【０００７】従って、本発明によれば、ポリ(A).ポリ
(U) の複合体 0.1〜 100％と、場合により、ポリ(A).ポ
リ(U) の複合体の一つと異なる機構によってHIV ウイル
スに作用する他の抗エイズ剤と、薬学的に許容される稀
釈剤又は担体とからなる、先天性免疫不全症候群（エイ
ズ）及び関連する感染症の治療用組成物が提供される。
【０００８】前記本発明の治療用組成物は、ポリ(A).ポ
リ(U) の複合体 0.1〜 99 ％と、ポリ(A).ポリ(U) の複
合体の一つと異なる機構によってHIV ウイルスに作用す
る抗エイズ剤と、薬学的に許容される稀釈剤又は担体と
からなることが好ましい。
【０００９】本発明の一つの態様によれば、HIV ウイル
スに作用する抗エイズ剤はAZT ，DDI 及びDDC から選ば
れる。
【００１０】エイズの治療におけるポリ(A).ポリ(U) の
効果を、以下に示す種々の実験結果により明らかにす
る。
【００１１】細胞変性効果(CYTOPATHOLOGY) ヒト免疫不全症ウイルス HIV-Bru(LAI) に感染したCEM
細胞( CD4 リセプターに富む T細胞) の２個の試料を、
感染から24時間後、ポリ(A).ポリ(U) で処理した。HIV
に感染したCEM 細胞の２個の同様の試料を対照として使
用し、これらの試料はポリ(A).ポリ(U) で処理しなかっ
た。細胞培養物(cell culture)を顕微鏡下で定期的に検
査して細胞変性効果(cytopathic effect) （細胞の融合
及び融合細胞の形成) を観察した。
【００１２】実験方法は下記の通りである：5x10６個の
CEM 細胞を1.0x10６cpm の逆転写酵素活性 (reverse tr
anscriptase activitiy)を有する HIVウイルスを含有す
る上澄液 1mlと共にインキュベートした。1 時間後、細
胞を遠心分離し、細胞残渣(細胞数 0.5x 10６個）を、1
0％の胎児血清(fetal serum) と 2μg/mlのポリブレン
を含有するRMPI媒体に懸濁させた。24時間後、ポリ(A).
ポリ(U) を200 μg/mlの濃度で添加した。細胞培養物を
更にポリ(A).ポリ(U) を添加することなしに保持した。
得られた結果は下記の通りである：
【００１３】記号“＋”は細胞変性効果が出現したこと
を示す；かかる記号の数はその概略の出現量(quantific
ation)である。これらの結果から、ポリ(A).ポリ(U) で
処理することにより細胞変性効果が著しく減少すること
が認められる。
【００１４】細胞培養物（cultures) を前記の方法で調
製し、35Ｓ−メチオニンと共に７日から８日の間、イン
キュベートしそして細胞本体(cellular mass) 及び上澄
液中で合成されたウイルスプロテインのSDS の電気泳動
分析を行った。得られた結果は図面に示されている。図
面において、“−”は非処理対照からの試料を示すもの
であり、“＋”はポリ(A).ポリ(U) で処理した細胞培養
物からの試料を示すものである。図面に示されているス
ポットの右側の識別剤（identifier）の意義は次の通り
である： gp120 エンベローププロテイン(envelope protein) p68 逆転写酵素 p55 核プロテイン(core protein)の先駆体 p40 部分的に開裂された(cleaved) 核プロテイン
の先駆体 p32 エンドヌクレアーゼ p25 主核プロテイン 得られた結果は、ポリ(A).ポリ(U) で処理した細胞及び
上澄液においては、ウイルスプロテインの存在が殆ど全
体的に減少していることを示している。
【００１５】感染から８日後、上澄液中のp24/p25 抗原
の量をELISA 試験により測定した。
【００１６】
【００１７】上記の結果はポリ(A).ポリ(U) で処理した
細胞培養物においてはHIV の産生の抑制率は96.5％であ
ることを示している。
【００１８】培養細胞におけるHIV の産生の抑制に対す
るポリ(A).ポリ(U) の作用を以下に示す実験によって確
認した。
【００１９】1. ポリ(A).ポリ(U) の投与量の変化の影
響 CEM 細胞をHIV に感染させた。24時間後、種々の濃度の
ポリ(A).ポリ(U) を添加した。細胞培養物の上澄液中の
ウイルスの産生を、感染から５日後、p24/p25抗原の量
を定量することにより測定した。HIV に感染させたがポ
リ(A).ポリ(U)を添加しなかった対照細胞は、それまで
に破壊されていた。
【００２０】
【００２１】2. 反復処理の影響 ウイルスの感染から24及び96時間後に、ポリ(A).ポリ
(U) を200 μg/mlの濃度で添加したこと以外、試験 1と
同様の操作を行った。非処理対照試験も同様に行った；
前記の試験と同様に、対照試験における細胞は５日目ま
でに破壊された。p24/p25 抗原の濃度( μg/ml）を、非
処理対照細胞においては、感染から 4，5、6 及び 7日
後に測定し、処理細胞においては、感染から1 及び4 日
後に測定した。得られた結果を以下に示す：
【００２２】3.ウイルスの感染の初期段階におけるポリ
(A).ポリ(U) の影響 HIV に感染した細胞を、HIV の感染前、感染時及び感染
後の異なる時期に、200 μg/mlのポリ(A).ポリ(U) で処
理した。感染から６日後、融合細胞の数を数えた。７日
目に培地中のp25 の濃度を測定した。
【００２３】
【００２４】ポリ(A).ポリ(U) とAZT との併用 細胞をHIV に感染させてから24時間後に、下記の処理を
行った： (a) 濃度100 μg/mlのポリ(A).ポリ(U) 単独； (b) 濃度100 、250 、1000、5000又は10000 μg/mlのAZ
T 単独( 試料数 5); (c) 濃度100 、250 、1000、5000又は10000 μg/mlのAZ
T の各々と，濃度100μg/mlのポリ(A).ポリ(U) との組
合せ( 試料数 5）。
【００２５】対照試験（非処理）試験も行った。感染か
ら7 、12及び14日後に上澄液中の抗原p25 の濃度を測定
した。その結果（μg/ml）を以下に示す。
【００２６】
【００２７】これらの結果は、AZT/ポリ(A).ポリ(U) の
組合せを使用することにより、これらを単独で使用した
場合より大きな効果が得られることを示している。
【００２８】考察 前記の試験結果はポリ(A).ポリ(U) はHIV に対する抑制
効果を有することを示している。このことは種々の試験
において観察されている： A: 感染細胞におけるウイルスプロテインの代謝合成 B: 感染細胞の培地における逆転写酵素の活性 C: 感染細胞の培地におけるHIV の主核プロテインp25
の量 D: 細胞融合種々のタイプのHIV 及びHIV 分離物(isolate) に対する
ポリ(A).ポリ(U) の抑制効果 前記した試験の全てにおいて、HIV-1 Bru 分離物(isola
te) ( 以下においては、HIV-1 LAI と称する) を使用し
た。ポリ(A).ポリ(U) の抑制作用が前記試験で使用した
HIV-1 種に限定されないことを示すために、ELI(31) と
称される他の種のHIV-1 及び２種のHIV-2 種 ROD及びEH
O を使用した。ポリ(A).ポリ(U) を添加してから 6時間
後に、CEM 細胞にこれらのウイルスを感染させた場合に
は、ウイルスの産生の抑制率は90％以上であった。
【００２９】これらの試験においては、ポリ(A).ポリ
(U) は200 μg/mlの投与量で85〜90％の抑制効果を示し
た。ヒトの場合には、一回当り、200 〜4000mgを注射す
ることが適当である得る；ヒトの場合には、300 〜1000
mg、好ましくは、400 〜600mgの量を注射により投与す
ることが効果的であり得る；好ましい投与量は500mg で
ある。感染後、可能な限り早い時期に処置を行うことに
より最大の効果が得られるが、感染前又は感染後の処置
も有効である。処置は３日〜５日の間隔で反復し得る。
【００３０】更に、今般、重要な抗レトロウイルス作用
も認められた。AZT は細胞内転写(intra-cellular tran
scription)の段階で作用するのに対し、ポリ(A).ポリ
(U)はレトロウイルスの細胞中への浸透(penetration)
の段階で作用するものと考えられる。ポリ(A).ポリ(U)
と他の抗レトロウイルス剤とを併用することにより、こ
れらを単独で使用したば場合より良好な結果が得られ
る。
【図面の簡単な説明】
【図１】 ウイルスプロテインのSDS の電気泳動分析の
結果を示す図面である。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.5 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ａ６１Ｋ 31:52） 7252−4Ｃ (72)発明者 アラ・ジエ．オバネシアン フランス国．92340・ブール・ラ・レーヌ. アブニユ・ガル・レクレルク．124 (72)発明者 エヴエリイヌ・デシヤンプ・ド・パイエツ ト フランス国．75016・パリ．アブニユ・テ オフイル・ゴーチエ．60

Claims (3)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】 ポリ(A).ポリ(U) の複合体 0.1〜 100％
    と、場合により、ポリ(A).ポリ(U) の複合体の一つと異
    なる機構によって HIVウイルスに作用する他の抗エイズ
    剤と、薬学的に許容される稀釈剤又は担体とからなる、
    先天性免疫不全症候群（エイズ）及び関連する感染症の
    治療用組成物。
  2. 【請求項２】 ポリ(A).ポリ(U) の複合体 0.1〜 99 ％
    と、ポリ(A).ポリ(U)の複合体の一つと異なる機構によ
    って HIVウイルスに作用する他の抗エイズ剤と、薬学的
    に許容される稀釈剤又は担体とからなる、請求項１に記
    載の治療用組成物。
  3. 【請求項３】 ポリ(A).ポリ(U) の複合体の一つと異な
    る機構によって HIVウイルスに作用する抗エイズ剤は、
    AZT 、DDI および DDCから選ばれる、請求項１又は２に
    記載の治療用組成物。
JP4095140A 1991-04-16 1992-04-15 先天性免疫不全症候群（エイズ）治療用組成物 Ceased JPH05262653A (ja)

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GB9108085:3 1991-04-16
GB919108085A GB9108085D0 (en) 1991-04-16 1991-04-16 Complexes of polyadenylic acid with polyuridylic acid

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EP (1) EP0509906A1 (ja)
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AU (1) AU656574B2 (ja)
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CH (1) CH684521A5 (ja)
DK (1) DK51192A (ja)
DZ (1) DZ1570A1 (ja)
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