JPH0526476B2 - - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 発明の背景 技術分野 本発明は、微生物の生化学的性状検査用培地に
関する。さらに詳しくは、本発明は腸内細菌等微
生物の生化学的同定法でアルギニン脱炭酸試験に
用いられる改良された培地に関するものである。 感染症に対して適切な治療を施すためには病原
菌を同定し、感受性試験を行ない、その病原菌に
有効な薬剤を決定することが用である。このよう
な病原菌の同定に際しては多項目にわたる生化学
的性状検査が行なわれ、その項目の１つとしてア
ルギニン脱炭酸試験が行なわれる。本発明の培地
はこのようなアルギニン脱炭酸試験に好適に使用
される。 先行技術および問題点 アルギニン脱炭酸試験は、Ｌ−アルギニンをア
グマチンと炭酸ガスに脱炭酸する菌を検出する試
験であつて現在ではもつとも重要な菌の生化学的
性状検査の一つである。この試験は菌をＬ−アル
ギニン及びPH指示薬を主要組成として含有する培
地で培養することによつて実施される。この試験
で使用する培地としては最近カシトン、グルコー
ス、リン酸二水素一ナトリウム、Ｌ−アルギニン
−塩酸塩、ブロムチモールブルーおよび精製水の
組成からなるものが提案されている（特公昭58−
20263）。この培地は、培養時間が従来のものにく
らべて大巾に短縮されている。即ち、従来の培地
においては培養期間が１〜２日間であつたのち対
してこの培地では培養期間が４〜５時間に短縮さ
れており、即日判定が可能である。しかしながら
この培地においても菌の種類によつては４〜５時
間の培養では反応が不十分で判定が困難なものも
あり、そのような場合には培養時間を長くし、翌
日に判定せざるをえない場合があつた。従つて全
ての菌について４〜５時間の培養で反応の陽性、
陰性を明瞭に判定できる培地が要望されている。 また、早期治療のためには菌の同定はできるだ
け速やかに行なわれるのが望ましいが他方、検査
作業の都合上、判定を翌日に行なわざるを得ない
場合も生ずる。このような場合には培養期間が厳
格に規定されておらず、作業上の都合で培養期間
を延長しても反応過剰になつたりせず正確な判定
が可能な培地が望ましい。 さらに生化学的性状検査は作業の効率上多数の
試験を多穴培養プレートを用いて一度に行なうこ
とが多いので各試験の培養期間をそろえることが
必要となる。このような場合にも培養期間に厳格
な制限のない培地が望ましい。 発明の目的 本発明は培養期間が特に限定されず、即日同定
おび翌日同定が可能なアルギニン脱炭酸試験用培
地を提供することを目的とする。 本発明はさらに呈色反応が明瞭であり判定が容
易なアルギニン脱炭酸試験用培地を提供すること
を目的とする。 本発明によれば、酵母エキス５ｇ；カゼイン−
トリプシン加水分解ペプトン５ｇ；グリコース
0.5ｇ；リン酸二水素一アルカリ金属塩0.7ｇ；Ｌ
−アルギニン鉱酸塩30ｇ；5′−ピリドキサールリ
ン酸エステル0.05ｇ；およびフエノールレツドか
らなるPH指示薬0.06ｇの割合の組成よりなり、水
１に溶解したときのPHが6.0であるアルギニン
脱炭酸試験用培地が提供される。 発明の具体的説明 本発明の培地は、酵母エキス、カゼイン−トリ
プシン加水分解ペプトン、グルコース、リン酸二
水素一アルカリ金属塩、Ｌ−アルギニン鉱酸塩
5′−ピリドキサールリン酸エステルおよびPH指示
薬を水に溶解したものである。5′−ピリドキサー
ルリン酸エステルはアルギニンの脱炭酸反応を促
進する作用があり培養時間を短縮することができ
る。酵母エキスは、酵素反応を促進するためのも
のである。 リン酸二水素一アルカリ金属塩はPH調整剤であ
り、アルカリ金属としてはカリウムまたはナトリ
ウムが好ましい。Ｌ−アルギニン鉱酸塩は基質で
あり鉱酸塩としては塩酸、硫酸、硝酸またはリン
酸塩が好ましい。PH指示薬として特にフエノール
レツドを使用する呈色が明瞭であり、試験試料が
少量でも陽性、陰性の判定がしやすい。 本発明の培地における前述した成分割合は臨界
的であり、特にリン酸二水素一アルカリ金属塩
は、PHが6.0となり、呈色反応が明瞭に現れるよ
うに設定されている。またアルギニンおよび5′−
ピリドキサールの量も培養期間を短縮可能なよう
に設定されている。 フエノールレツドは0.06ｇ使用するのが好まし
い。 本発明の培地は常法に従つて所定量の各成分を
水に溶解することによつて使用される。近年生化
学的性状検査は多数の試験を多穴プレート上で同
時に行うのが普通であり、このような場合には本
発明培地を試験用プレートのウエルに注入し、乾
燥させて乾燥培地とする。試験に際しては該ウエ
ルに試験菌の懸濁水を所定量分注し、所定時間培
養する。培養液の色の変化により、アルギニン脱
炭酸反応の陽性、陰性を判定する。 発明の具体的作用および効果 本発明の培地は、従来のアルギニン脱炭酸試験
用培地と全く同様にして使用される。培養時間は
３〜５時間に短縮可能であるが特に制限はされ
ず、長時間培養も可能であり、即日同定、翌日同
定のいずれにも適している。また呈色が明瞭であ
り、反応の陽性、陰性の判定が容易である。 次に本発明の培地を使用してアルギニン脱炭酸
試験を行なつた実施例を示す。 実施例

【表】

【表】 培養条件 上記の組成の本発明の培地および対照培地を多
穴プレートの各穴に、50μずつ分注し、40℃で
乾燥した。次に観点平板培地上で各種微生物を35
〜37℃で18〜24時間培養し、1.0mlの減菌蒸留水
中に４〜５時間培養の場合は約６〜９×10⁸／ml、
16〜20時間培養の場合は約１〜２×10⁸／mlにな
るように懸濁して各穴に50μずつ接種後蓋を
し、35〜37℃で所定時間培養し、培養液の色の変
化によりアルギニン脱炭酸反応の有無を判定し
た。結果を第１表に示す。

【表】 ＋：陽性色 −：陰性色 ±〜＋：より陽性に
近い中間色
第１表の結果から明らかなように、アルギニン
脱炭酸試験において本発明の培地を使用するとき
は培養時間の長短を問わず正確な菌の同定が可能
である。従つて検査作業の都合により即日同定、
翌日同定のいずれをも選択できる。 これに対して、対照培地を使用した場合には、
例えばEnterobacter cloacaeは４〜５時間の培
養では呈色が不十分であり即日同定は困難であ
る。また、本発明の培地のように培養時間に厳格
な制限を受けないことは多数の生化学的試験を同
時に実施する場合に極めて好都合である。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. １ 酵母エキス５ｇ；カゼイン−トリプシン加水
   分解ヘプトン５ｇ；グルコース0.5ｇ；リン酸二
   水素−アルカリ金属塩0.7ｇ；Ｌ−アルギニン鉱
   酸塩30ｇ；5′−ピリドキサールリン酸エステル
   0.05ｇ；およびフエノールレツドからなるPH指示
   薬0.06ｇの割合の組成よりなり、水１に溶解し
   たときのPHが6.0であるアルギニン脱炭酸試験用
   培地。