JPH0532399B2 - - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

〔産業上の利用分野〕 本発明の化合物は抗腫瘍剤として期待されるも
のである。 〔従来の技術〕 4′−デメチル−エピポドフイロトキシン−β−
Ｄ−４，６−ｏ−エチリデングリコシドは抗腫瘍
作用を有する化合物として特公昭45−38258など
により公知である。 〔発明が解決しようとする問題点〕 従来抗腫瘍剤として使用されている4′−デメチ
ル−エピポドフイロトキシン−β−Ｄ−４，６−
ｏ−エチリデングリコシドは水に対して極めて難
溶性であるために、通常の注射剤として調製する
ことが困難であり、ポリエチレングリコール溶液
などとして用いられてきた。 しかしながら注射時の疼痛を伴うなどの欠点を
有し、水溶液製剤が望まれている。 〔問題点を解決するための手段〕 そこで本発明者らは水溶性を高めた4′−デメチ
ル−エピポドフイロトキシン誘導体につき種々検
討した。 その結果、一般式（） （式中、R₁、R₂およびR₃はそれぞれ水酸基、硫
酸基あるいはリン酸基を示し、少なくともそれら
の１つは水酸基以外の基を示す。） で表わされる4′−デメチル−エピポドフイロトキ
シン誘導体の新規エステル又はその薬理学的に許
容される塩が高い水溶性をもつことを見出し、本
発明を完成した。 本発明の一般式（）の化合物としては例え
ば、次の表に示す化合物があげられる。

〔効果〕

本発明によつて得られる一般式（）の代表的
化合物のナトリウム塩の水に対する溶解性を表２
に示す。 なお、対照化合物としてR₁＝R₂＝R₃＝OHで
ある化合物を挙げた。

〔作用〕

次に一般式（）で表わされる本発明の代表的
化合物のナトリウム塩の抗腫瘍活性を実験例によ
り示す。 (1) 実験方法 L1210白血病細胞を１×10⁵／0.2mlとなるよ
うにHank's balancedに懸濁し、CDF₁マウス
（６週齢）に腹腔内移植した。薬剤は翌日より
５日間連日腹腔内投与した。薬剤は生理食塩水
で溶解、希釈し、0.1ml／10ｇ体重の割合で投
与した。観察期日は60日とした。 評価判定は各マウスの生存日数より、各群の
平均生存日数を求め、コントロール群の平均生
存日数に対する比率、Ｔ／Ｃ（％）として求め
た。 (2) 本発明化合物代表例の抗腫瘍活性を表３に示
す。なお、対照としてはR₁＝R₂＝R₃＝OHで
ある一般式（）で表わされる化合物をあげ
た。

【表】 以下実施例により本発明を具体的に説明する。 なお薄層クロマトグラフイのRf値はメルク社
薄層プレート、ArtNo.5715を用いて測定した。な
お検出は紫外線照射及び希硫酸にて行つた。 実施例 １ 4′−ｏ−ホスホノ−4′−デメチル−エピポドフ
イロトキシン−β−Ｄ−４，６−ｏ−エチリデ
ングルコシド（化合物No.１）のナトリウム塩の
製法 (1) 4′−ｏ−ホスホノ−4′−デメチル−エピポド
フイロトキシン−β−Ｄ−２，３−ジ−ｏ−
β，β，β−トリクロロエトキシカルボニル−
４，６−ｏ−エチリデングルコシドのナトリウ
ム塩 4′−デメチル−エピポドフイロトキシン−β
−Ｄ−２，３−ジ−ｏ−β，β，β−トリクロ
ロエトキシカルボニル−４，６−ｏ−エチリデ
ングルコシド4.70ｇ（5.00ｍmol）に１，２−
ジクロロエタン30mlおよび乾燥ピリジン５mlを
加えて溶解後、−60℃に冷却する。ついで、１，
２−ジクロロエタン20mlに溶解したオキシ塩化
リン0.92ml（10ｍmol）を５分間で適下後、内
温約−15℃で１時間、０℃で１時間撹拌し、つ
いで室温で一夜撹拌する。 反応後、反応液を減圧濃縮し、濃縮残渣に酢
酸エチル、氷および食塩水ついでIN塩酸を加
えて抽出後、酢酸エチル層を食塩水で２回洗浄
し、無水硫酸マグネシウムを用いて脱水する。
硫酸マグネシウムを去後、酢酸エチル溶液を
減圧濃縮後、残渣に酢酸エチル50mlを加えて溶
かした溶液中にイソプロパノール50mlに溶かし
た２−エチルヘキサン酸ナトリウム0.9ｇを加
え、再度10〜20mlまで濃縮したところでイソプ
ロパノール100mlを加えて結晶を過し、減圧
乾燥すると粗結晶4.8ｇ（粗収率92％）が得ら
れる。 Rf＝0.5（展開溶媒 ｎ−ブタノール：酢酸：水
＝４：１：１） (2) 4′−ホスホノ−4′−デメチル−エピポドフイ
ロトキシン−β−Ｄ−４，６−ｏ−エチリデン
グルコシド（化合物No.１）のナトリウム塩 上記(1)で得られた組結晶4.00ｇに酢酸120ml
を加えて溶解後、亜鉛末6.0ｇを加え、室温で
２時間激しく撹拌する。反応終了後、水1000ml
を用いて亜鉛を過し、白濁した液をセルロ
ース過補助剤および水800mlを用いて再度
過する。 ついで、この液（約2000ml）をハイポーラ
スポリマー（三菱化成工業KK、HP−20 ）
200mlのカラムに吸着させ、水洗処理後、30％
アセトン水を用いて溶出を行い、目的物を含む
フラクシヨンを分取する。 分取した溶出液を減圧濃縮し、アセトンを留
去させた後、凍結乾燥すると4′−ホスホノ−
4′−デメチル−エピポドフイロトキシン−β−
Ｄ−４，６−ｏ−エチリデングルコシドのナト
リウム塩1.50ｇ（2.17ｍmol）を得る。 Rf＝0.2（展開溶媒 ｎ−ブタノール：酢酸：水
＝４：１：１） 核磁気共鳴スペクトル（ジメチルスルホキシド−
d₆溶液、内部標準物質テトラメチルシラン） δ＝1.24（3H、ｄ） δ＝2.89（1H、ｍ） δ＝3.0〜3.4（5H、ｍ） δ＝3.50（1H、ｔ） δ＝3.57（6H、ｓ） δ＝4.08（1H、dd） δ＝4.28（2H、ｍ） δ＝4.54（1H、ｄ） δ＝4.58（1H、ｄ） δ＝4.73（1H、ｍ） δ＝4.94（1H、ｄ） δ＝5.24（2H、broad） δ＝6.03（2H、ｓ） δ＝6.20（2H、ｓ） δ＝6.54（1H、ｓ） δ＝7.01（1H、ｓ） 実施例 ２ 4′−デメチル−エピポドフイロトキシン−β−
Ｄ−２，３−ジ−ｏ−ホスホノ−４，６−ｏ−
エチリデングルコシド（化合物No.２）の２ナト
リウム塩の製法 (1) 4′−ｏ−ベンジルオキシカルボニル−4′−デ
メチル−エピポドフイロトキシン−β−Ｄ−
２，３−ジ−ｏ−ホスホノ−４，６−ｏ−エチ
リデングルコシドの２ナトリウム塩 4′−ｏ−ベンジルオキシカルボニル4′−デメ
チル−エピポドフイロトキシン−β−Ｄ−４，
６−ｏ−エチリデングルコシド1.45ｇ（2.00ｍ
mol）、乾燥ピリジン1.08mlおよびテトラヒド
ロフラン10mlの溶液を、オキシ塩化リン0.4ml
（4.4ｍmol）のエチルエーテル10mlの溶解中
に、−60℃冷却下、適下する。 滴下後、同温度で２時間、氷浴中で１時間撹
拌し、ついで室温で一夜撹拌する。 反応後、反応液に酢酸エチルおよび氷水を加
えて、撹拌下、炭酸水素ナトリウムを加え、室
温で３時間撹拌後、一夜静置して水層を分取す
る。 水層の溶存酢酸エチルを減圧濃縮により留去
し、残液に水を加えて150mlとする。次に、ハ
イポーラスポリマー（三菱化工業KK、HP−
20 ）50mlのカラムに吸着させ、水洗処理後、
50％アセトン水を用いて溶出し、目的物を含む
フラクシヨンを分取する。 分取した溶出液を減圧濃縮後、イソプロパノ
ールを加えて結晶化させる。析出した結晶を
過し、減圧乾燥すると4′−ｏ−ベンジルオキシ
カルボニル4′−デメチル−エピポドフイロトキ
シン−β−Ｄ−２，３−ジ−ｏ−ホスホノ−
４，６−ｏ−エチリデングルコシドの２ナトリ
ウム塩0.44ｇ（0.45ｍmol）を得る。 Rf＝0.5（展開溶媒 クロロホルム：メタノール：
酢酸＝75：25：３） 核磁気共鳴スペクトル（ジメチルスルホキシド−
d₆、内部標準物質、テトラメチルシラン） δ＝1.23（3H、ｄ） δ＝2.95（1H、ｍ） δ＝3.20（1H、ｍ） δ＝3.3〜3.7（5H、ｍ） δ＝3.62（6H、ｓ） δ＝3.94（1H、ｔ） δ＝4.03（1H、dd） δ＝4.26（2H、ｄ） δ＝4.63（1H、ｄ） δ＝4.79（1H、ｍ） δ＝4.97（1H、ｄ） δ＝5.23（2H、ｓ） δ＝6.03、6.05（2H、ｓ、ｓ） δ＝6.31（2H、ｓ） δ＝6.55（1H、ｓ） δ＝7.10（1H、ｓ） δ＝7.40（5H、ｍ） (2) 4′−デメチル−エピポドフイロトキシン−β
−Ｄ−２，３−ジ−ｏ−ホスホノ−４，６−ｏ
−エチリデングルコシド（化合物No.２）の２ナ
トリウム塩 上記(1)で得られた4′−ｏ−ベンジルオキシカ
ルボニル−4′−デメチル−エピポドフイロトキ
シン−β−Ｄ−２，３−ジ−ｏ−ホスホノ−
４，６−ｏ−エチリデングルコシドの２ナトリ
ウム塩300mg（0.309ｍmol）に水10ml、アセト
ン10mlおよび５％パラジウム炭素0.1ｇを加え、
常圧、室温で接触還元を２時間行う。 還元後、パラジウム炭素を過し、液を減
圧濃縮して得られた残渣に水20〜30mlを加え、
水不溶物をミリポアフイルター（Millex −
GS、0.22μｍ）を用いて過する。 ついで液を凍結乾燥すると4′−デメチル−
エピポドフイロトキシン−β−Ｄ−２，３−ジ
−ｏ−ホスホノ−４，６−ｏ−エチリデングル
コシドの２ナトリウム塩250mg（0.315ｍmol）
が得られる。 Rf＝0.4（展開溶媒 クロロホルム：メタノー
ル：酢酸＝75：25：３） 核磁気共鳴スペクトル（重水、外部標準、水
（4.80ppm）） δ＝1.36（3H、ｄ） δ＝3.07（1H、ｍ） δ＝3.73（6H、ｓ） δ＝3.96（1H、ｍ） δ＝5.97、5.99（2H、ｓ、ｓ） δ＝6.37（2H、ｓ） δ＝6.58（1H、ｓ） δ＝7.02（1H、ｓ） 実施例 ３ 4′−ヒドキシスルホニル−4′−デメチルエピポ
ドフイロトキシン−β−Ｄ−４，６−ｏ−エチ
リデングルコシド（化合物No.３）の２ナトリウ
ム塩の製法 (1) 4′−ヒドキシスルホニル−4′−デメチルエピ
ポドフイロトキシン−β−Ｄ−２，３−ジ−ｏ
−β，β，β−トリクロロエトキシカルボニル
−４，６−ｏ−エチリデングルコシドのナトリ
ウム塩 4′−デメチルエピポドフイロトキシン−β−
Ｄ−２，３−ジ−ｏ−β，β，β−トリクロロ
エトキシカルボニル−４，６−ｏ−エチリデン
グルコシド（0.47ｇ）にＮ，Ｎ−ジメチルホル
ムアミド（10ml）およびピリジン（10ml）を加
えて溶解後、無水硫酸・ピリジン複合塩（2.5
ｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（10ml）
溶液を加え、室温で７日間撹拌を行い、反応液
を減圧濃縮する。濃縮残渣にメタノールおよび
２−エチルヘキサン酸ナトリウムを加えて減圧
濃縮後、残渣に酢酸エチルおよび水を加え抽出
する。酢酸エチル層を分取し、減圧濃縮して得
られた残渣にエーテルを加えて、結晶を過、
減圧乾燥すると目的物（0.21ｇ）が得られる。 Rf＝0.46（展開溶媒 ｎ−ブタノール：酢酸：
水＝４：１：１） (2) 4′−ヒドロキシスルホニル−4′−デメチルエ
ピポドフイロトキシン−β−Ｄ−４，６−ｏ−
エチリデングルコシドのナトリウム塩 上記(1)で得られた化合物（0.20ｇ）に酢酸
（４ml）を加えて溶解後、亜鉛末（0.5ｇ）およ
び水（0.4ml）を加え、室温で１時間撹拌を行
う。 反応液に水（100ml）を加えて亜鉛を過し
液を実施例１−(2)と同様に処理することによ
り目的物（66mg）が得られる。 Rf＝0.24（展開溶媒、ｎ−ブタノール：酢
酸：水＝４：１：１） 参考例 (1) 4′−ベンジルオキシカルボニル−4′−デメチ
ルエピポドフイロトキシン−β−Ｄ−２，３−
ジ−ｏ−β，β，β−トリクロロエトキシカル
ボニル−４，６−ｏ−エチリデングルコシドの
製法 4′−ベンジルオキシカルボニル−4′−デメチ
ルエピポドフイロトキシン（72.5ｇ）および
４，６−ｏ−エチリデン−２，３−ジ−ｏ−
β，β，β−トリクロロエトキシカルボニル−
β−Ｄ−グルコピラノース（83ｇ、1.1当量）
を１，２−ジクロロエタン（800ml）に溶解後、
１，２−ジクロロエタン（300ml）に溶解した
三弗化ホウ素エーテレート（29ｇ）を内温−10
〜−15℃に保ち３時間で滴下する。滴下後−10
〜15℃で２時間撹拌する。 ついで反応液にピリジン（21ml）の１，２−
ジクロロエタン（80ml）の溶液を内温−10℃で
ゆつくり滴下後、水（500ml）を加え、有機層
を分液する。この有機層を希塩酸ついで食塩水
で順次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、
減圧濃縮を行い、得られた濃縮残渣をシリカゲ
ルクロマトグラフイーにより精製すると目的物
（121ｇ）が得られる。 Rf＝0.8（展開溶媒 クロロホルム：メタノール
＝10：１） (2) 4′−デメチルエピポドフイロトキシン−β−
Ｄ−２，３−ジ−ｏ−β，β，β−トリクロロ
エトキシカルボニル−４，６−ｏ−エチリデン
グルコシドの製法 参考例(1)で得られた4′−ベンジルロキシカル
ボニル−4′−デメチルエピポドフイロトキシン
−β−Ｄ−２，３−ジ−ｏ−β，β，β−トリ
クロロエトキシカルボニル−４，６−ｏ−エチ
リデングルコシド（20.0ｇ）のアセトン（300
ml）溶液を５％パラジウム炭素（１ｇ）の存在
下、オートクレーブ中、水素圧30Kg／cm²にて室
温で２時間接触還元を行う。 ついで、触媒を除去後、溶液を減圧濃縮して
得られた残渣に酢酸エチルを加え溶解させる。
酢酸エチル溶液を水洗し、無水硫酸マグネシウ
ムで乾燥後、減圧濃縮し、得られた残渣にイソ
プロパノールを加え結晶化を行う。 析出した結晶を過、洗浄後減圧乾燥をする
と目的物（16.2ｇ）が得られる。 Rf＝0.5（展開溶媒 ベンゼン：酢酸エチル＝
２：１）

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ 一般式（） （式中、R₁、R₂およびR₃はそれぞれ水酸基、硫
   酸基あるいはリン酸基を示し、少なくともそれら
   のいづれか１つは水酸基以外の基を示す。） で表わされる4′−デメチル−エピポドフイロトキ
   シン誘導体の新規エステル又はその薬理学的に許
   容される塩。