JPH05505189A - ３―グアニジノプロピオン酸の代謝障害の治療用組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ３−グアニジノプロピオン酸の代謝障害の治療および予防のための使用 発明の分野 本発明は公知化合物の新しい使用を提供する。さらに詳しくは、本発明は、３− グアニジノプロピオン酸（３−ＧＰＡ）の投与によって、ヒトおよび動物の代謝 のある種の代謝障害、例えば、高血糖症、耐糖能障害、高インスリン血症、イン スリン不感性、高アミリン血症、脂肪過多症または高脂血症を治療または予防す る方法を提供する。

発明の背景 ヒトおよび動物代謝のいくつかの代謝障害、例えば、高血糖症、耐糖能障害、高 インスリン血症、インスリン不感性、高アミリン血症、脂肪過多症または高詣血 脂がある。前記障害のいくつかあるいは全ては以下の病気状管、インスワン非依 存性糖尿病（Ｎｌｌ）ＤＭ）、肥満、高血圧およびアテローム性動脈硬化症で起 こり得る。

高血糖症は血中グルコース濃度が飢餓状聾において、食事の摂取後において、あ るいは誘発診断法、例えば、耐糖能テストの間において、正常濃度を超える疾患 である。それはＮＩＤＤ〜１ならびに肥満で起こり得る。高血糖症はＮ　ｉ　Ｄ 　ＤＭと診断されることなく起こり得る。この疾患は耐糖能障害または前糖尿病 と呼ばれる。耐糖能障害は、グルコースの血液からの代謝クリアランス速度が、 標準的なグルツース用量を経口または非経口投与した後に、一般的集団で通常起 こるのを下回る場合に起こる。それは、ＮＩＤＤＭ、ならびに肥満、前糖尿病お よび妊娠期糖尿病で起こり得る。

高イノスリン血症は、飢餓状帖において、食事摂取後において、または誘発診断 法の開において、正常ａ度を超える血中インスワン濃度を有することと定義され る。それは、ＮＩＤＤＭまたは肥満で観察でき、高血圧またはアテローム性動脈 硬化症と関連し得るし、また不規則であり得る。高インスワン血症は糖尿病の診 断なくして起こり得る。それはＮＩＤＤＭの開始に先立って起こり得る。インス ワン抵抗性とも呼ばれるインスリン不感性は、インスリ７依存性グルフースクリ アランス速度が、高インスリン血症クランプのごとき診断法の間に［例えば、デ フロンノオ・アール・エイら（ＤｅＦｒｏｎｚｏ、　Ｒ，Ａ、　＋　ｅｔ　ａｌ ）、アメリカン・ジャーナル・オブ・フィジオロノー（Ａｍ、Ｊ、Ｐｈｙｓｉｏ ｌ、）２３２：Ｅ２１４−Ｅ２３３．　（１９７９）参照コあるいは最小モデル テストの開に一般的な集団で通常起こるのを下回る場合に起こる。例えば、ベル ブマン・アール・エヌら（Ｂｅｒｇｍａｎ、　Ｒ，Ｎ、　ｅｔ　ａｌ）、ジャー ナル・オブ・クリニカル・インベスティゲーシ３ン（Ｊ、　Ｃ１１ｎ、１ｎｖｅ ｓｔ、）６８　：１４：）６−１４７９（１９８１）弁明。インスリン不感性は 、また、血中グルコース濃度がインスリンの静脈内投与（インスリン耐性テスト ）後における一般的集団で通常起こるよりも高い場合、あるいは血清インスリン ｖｓグルコース濃度の比が１０〜１６時間の絶食後の一般的集団で通常起こるの を超える場合に起こると考えられる。インスリン不感性はＮＩＤＤＭまたは肥満 で見い出すことができ、それは高血圧またはアテローム性動脈硬化症と関連があ るかまたはその原因となり得る。

高アミリン血症は高血中アミリン濃度を有することと定義される。

また、アミリンは糖尿病関連ペプチド（ＤＡＰ）およびインスリン血症関連ポリ ペプチド（ｌＡ、Ｐ）としても公知である。高アミリン血症はＮＩＤＤＭまたは 肥満で観察し得る。

脂肪過多症は肥満を伴うＮＩＤＤＭならびにＮ　Ｉ　Ｄ　ＤＭを伴わない肥満で 観察できる。それは、全身体比重または他の一般的に受け入れられている手段に よって測定された一般的集団で通常起こるよりも高い脂肪体体重−脂肪無し体重 比と定義される。

高脂血症は血液に異常濃度脂肪を有することと定義される。高脂血症は、合計コ レステロールまたは合計トリグリセリドの血清濃度マタはＬＤＬ−ヒレステロー ル／ＨＤＬ−コレステロールの血清濃度が一般的集団で通常起こるよりも高い場 合に存在する。それは、ＮＩＤＤＭまたはアテローム性動脈硬化症でし察される 。

前記病気状態は代謝および生物化学的障害を改善または予防することによって治 療され得る。加えて、前記病気状態のうちの１つを有するが前記障害のいくつか または全てを示すヒトおよび動物は現在認識された病気状態の発生を予防するこ とによって改善され得る。

従って、高血糖症、耐糖能障害、高インスリン血症、インスリン不感性、高アミ リン血症、脂肪過多症または高脂血症の治療に有用な化合物もまたＮＩＤＤＭ、 肥満、高血圧またはアテローム性動脈硬化症を治療または予防するのに使用し得 る。

３−グアニジノプロピオン酸（３−ＧＰＡ）は動物およびヒトで発見されている 内因性代謝産物である。例えば、ヒラガ・シイら（Ｈｉｒａｇａ、　Ｙ、　ｅｔ 　ａｌ）、ジャーナル・オブ・クロマトグラフィー（Ｊ、　Ｃｈｒｏｍａｔｏｇ ｒａｐｈｙ）３４２　：　２６９−２７５　（１９８５）およびワタナベ・シイ ら（ｌａｔａｎａｂｅ、　Ｙ、　ｅｔ　ａｌ）、グアニジン類（Ｇｕａｎｉｄｉ ｎｅｓ）、モリら（Ｍｏｒｉ　ｅｔ　ａｔ）編、プレナム（Ｐｌｅｎｕｍ）、ニ ューヨーク、４９〜５８頁（１９８３）　参照。シグマ・ケミカル・カンパニー （ＳｉｇＩＩＩａ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｃｏ、）から入手可能な化合物はある種 の代謝［ウォーカー・ジェイ・ビイ　（ｔａｌｋｅｒ、　Ｊ、　Ｂ、　）、アド ブ・エンザイモル（Ａｄｖ、　Ｅｎｚｙｍｏｌ、　）、５０：１７７〜２４２　 （１９７９）］および］ガンマーアミノ酪酸レセプター機の研究で広く使用され ている。例えば、ボウエリ・アールら（Ｂｏｗｅｒｙ、　Ｒ，ｅｔ　ａｌ）、ブ リテインユ・ジャーナル・オブ・ファルマコロジ−（Ｂｒ、　Ｊ、　Ｐｈａｒｍ ａｃｏｌ、　）　５０　：　２０５〜２１８　（１９７４）参照。以下の注記を 除き、これらの研究はヒトまたは動物の病気の治療における３−ＧＰＡの利用に 関するものではない。

グアニジン、モノグアニジンおよびジグアニジン化合物は高脂血症を生じること が示されている。例えば、ワタナベ・シイ（Ｗａｔａｎａｂｅ、　Ｃ，）、ジャ ーナル・オブ・バイオロジカル・ケミストリ（Ｊ、Ｂｉｏｌ、Ｃｈｅｔ）３３　 ：　２５３〜２６５　（１９１８）　：ビショフ・エフら（Ｂｉｓｅｈｏｆｒ、 Ｆ、ｅｔ　ａｌ）、グアニジン構造および高脂血症（Ｇｕａｎｉｄｉｎｅ　５ｔ ｒｕｃｔｕｒｅ　ａｎｄ　ｈｙｐｅｒｇｌｙｃｅｍｉａ）８　１　：　３　２　 ５　３　４　９（１９２９）参照。しかしながら、これらの化合物は毒性である ことが観察されている。１９５７年、ビグアニジン誘導体、例えば、フェンホル ミンおよびメトフォルミンは臨床的に抗糖尿病薬剤として用いられていた。この クラスのいくつかのメン／　（−は今日継続して使用されており、一方、他のも のは米国およびほとんどの西欧諸国では市場から姿を消し、あるいは禁止されて いる。例えば、／ヤファー・シイ（ＳｃｈａｌＴｅｒ、Ｇ、）、ダイアベート・ メタポル（１）ｉ３ｂｅｔｅＭｅｔａｂｏ１．　）、　（パリ）９　：　１４８ 〜１６３　（１９８３）＃照。

ガンマ−グアニジノブチラミドは、また、ティフォルミン（Ｔｙ４ｏｒｍｉｎ） として知られており、オーグメンチン（Ａｕｇｍｅｎｔ　ｉｎ）として知られて いるティフォルミン塩酸塩は１９６０年代半ばから１９７０年代半ばに至るまで 有力な抗−糖尿病薬剤として研究されてきた。オーグメンチンは高脂血症を生じ るが、イヌで高血圧を［例えば、マライセ・ダブリューら（Ｍａｌａｉｓｓｅ、 １．ｅｔ　ａｌ）、ホルム・メタブ・レス（Ｈｏｒｔ）ｌｅｔａｂ、Ｒｅｓ、） １　：　２５８〜２６５　（１９６９）　］、およびラットおよびウサギで呼吸 系および循環系の衰弱を生じることが報告されている。例えば、ブクル・エイら （Ｂｕｃｋｌｅ、Ａ、ｅｔ　ａｌ）、ホルム・メタブ・レス（ＨｏｒｔＭｅｔａ ｂ、Ｒｅｓ、）３　：　７６〜８１　（１９７１）弁照。該アミドの遊離酸は高 脂血症活性を欠くと言われていたＬｆｌＩえば、ビー７ン・エムら（Ｂｅｅｓｏ ｎ、Ｍ、　ｅｔ　ａｌ）、ホルム・メタブ・レス（Ｈｏｒｍ、ｋｌｅｔａｂ、Ｒ ｅｓ、）３　：　１８８〜１９２（１９７１）参照］。

英国特許第１１５３４２４号は、高尿素血症が存在する糖尿病の治療におけるグ アニジノ−脂肪族酸のある種のエステルおよびアミドの使用を開示している。該 特許は、これらの化合物は高脂血症または糖尿病に関係する他の兆候もしくは病 理状態に対して効果を有することを開示していない。カナダ特許第８９１５０９ 号には、糖尿病における高尿素血症および高脂血症の治療用のグアニジノ脂肪族 酸のエステルおよびアミドの使用が開示されている。前記したごとく、グアニジ ノアルカン酸の生物学的活性は異なりかつ好都合で−はなくて、高脂血症を治療 するそのアミドと比較して効果的な化合物ではないことが知られていた。

英国特許第１１９５１９９号は、糖尿病で起こる高脂血症の治療用につき、含イ ノスリン非経口投与組成物にグアニジ／アルカン酸またはそのアミドもしくはエ ステルを使用することを開示している。

この特許によると、グアニジ／アルカン、アミドまたはエステルをインスリンと 組み合わせると、インスリン単独と比較して、低血糖症の危険を減少化させる。

英国特許第１１９５２００号は、糖尿病で起こる高脂血症の治療につき、グアニ ジノアルカン酸アミドもしくはエステル誘導体を含有する組成物に、グアニジノ アルカン酸を使用することが開示されている。続いての英国特許第１５５２１７ ９号では、高脂血症の治療につき、グアニジノアルカン酸、その塩、アミドまた はエステルを糖新生抑制剤と組み合わせて使用することが開示されている。メト フォルミンは糖新生の抑制剤として引用されていた。生物学的データは、好まし いグアニジノアルカン酸誘導体であるＨＬ５２３は、血中グルコース濃度がアロ キサン糖尿病マウスで測定された７の実験のうち６において単一の薬剤としては 不活性であり、第７日には弱い活性を示したに過ぎないことを示していた。最も 注目すべきは、英国特許第１１９５１９９号、第１１９５２００号および第１５ ５２１７９号は、糖尿病における高脂血症兆候を治療する組成物において、グア ニジ／アルカン酸の単独活性成分としての用途をクレームしていない。テストし たグアニジ／アルカン酸のうち、いくつかは単一の薬剤として不活性であった。

かくして、種々のグアニジ／アルカン酸は有意な抗−糖尿病活性を欠き、これら の化合物の公知の抗−糖尿病活性薬剤、例えば、メトフォルミンとの組合せは有 効な活性を示すことが必要である。

アイ／スリー−グリーンおよびアルヘルテイ（Ａｙｎｓｌｅｙ−Ｇｒｅｅｎ　ａ ｎｄ＾１ｂｅｒｔｉ）は、ラットに３−ＧＰＡ、アルキニン、グアニジン、４− グアニジノブチラミン、および４−グアニジノ酪酸を静脈内投与した。アルギニ ンおよび３−ＧＰＡはインスリン分泌を一時的に刺激したか血中グルコース濃度 には影響を与えず、一方、他の化合物はインスリン分泌を刺激したが血中グルコ ース濃度を上昇させた。

例えば、アインスリーーーグリーンーエイら（Ａｙｎｓｌｅｙ−Ｇｒｅｅｎ、　 Ａ、　ｅｔａｌ）、ホルム・メタブ・レス（Ｒｏｒｍ、Ｍｅｔａｂ、Ｒｅｓ、） ６　：　１１５〜１２０（１９７４）参照。ブランエら（Ｂｌａｃｈｉｅｒ、ｅ ｔ　ａｌ）は、１０ｍＭの３−　Ｇ　Ｐ　Ａが単離したラット膵臓細胞でｉｎ　 ｖｉｔｒｏにてインスリン分泌を刺激したことを観察している。例えば、ブラフ 工・エフら（Ｂｌａｃｈｉｅｒ、Ｆ、ｅｔ　ａｌ）、エンドクリノロジー（Ｅｎ ｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ）　１２４１３４〜１４１　（１９８９）参照。３−Ｇ ＰＡにより誘導されたインスリン応答は、アルギニンを同濃度でテストした場合 に起こる応答の５５％であった。ｌｏｍｇ／ｇ　３−ＧＰＡを補足した飼料を３ ０〜６０日間給口したう、トでは、心臓グリコーゲン含有量は増加した。例えば 、ロノ・−ノ・ジエイら（Ｒｏｂｅｒｔｓ、　Ｊ、　ｅｔ　ａｌ）、アメリカン ・ジャーナル・オブ・フイジオロジ−（Ａｔ　Ｊ、　Ｐｈｙｓｉｏｌ、　）　２ ４３：Ｈ９１１−Ｈ９１６（１９８２）参照。同様に１０ｍｇ／ｇの３−ＧＰＡ を補足した飼料を６〜１０週間給餌したラットでは、骨格筋グリコーゲン含有量 が増加した。７〜１２週間、２０ｍｇ／ｇで３−ＧＰＡを補足した飼料を給餌し 、かつ５ｍｇ／ｒｒ＋＋２の３−ＧＰＡを含有する水を飲水させたマウスは、非 補足飼料および水を摂取させたマウスと有意に異ならない血清グルコース濃度を 有していた。例えば、モールランド・ティら（ｋｌｏｅｒｌａｎｄ、　Ｔ、　ｅ ｔ　ａｌ）、アメリカン・ジャーナル・オブ・フイジオロジー（Ａ■Ｊ、　Ｐｈ ｙｓｉｏｌ、　）２５７：Ｃ３１０−Ｃ８１６（１９８９）参照。

脂肪過多症に関しては、１０〜２０ｍｇ／ｇの３−ＧＰＡを含む飼料の補足の結 果、体重が減少した場合があるが、常にはそうはならないことが知られている［ 例えば、ショウブリッジ・イーら（Ｓｈｏｕｂｒｉｄｇｅ、　Ｅ、　ｅｔ　ａｌ ）、バイオケミカル・ジャーナル（Ｂｉｏｃｈｅａ、　Ｊ、　）２３２：　１２ ５−１３１　（１９８５）参照］。例えば、モールランド（前掲）およびマハン ナ・ディら（Ｍａｈａｎｎａ、Ｄ、ｅｔ　ａｌ）、イクスペリメンタル・ニュー ロロジー（Ｅｘｐｅｒ、Ｎｅｕｒｏｌ、）６８　：　１１４−１２＋、（１９８ ０）参照。この効果は骨格筋重量の減少に帰せられており、脂肪過多症または脂 肪貯蔵の減少には帰せられていない。例えば、マハンナ（前掲）およびンールズ ・アール（Ｓｈｉｅｌｄｓ、　Ｒ，ｅｔ　ａｌ）、ラボラトリ−・インベステイ ゲーション（Ｌａｂ、　１ｎｖｅｓｔ、）３３　：　１５１−１５８　（１９７ ５）参照。

当該分野で要求されているのは、これらの疾患における代謝障害を受けているの を治療または予防するための唯一の治療である。

情報開示の一籾 以下の特許はグアニジノ−脂肪族酸またはそのアミドもしくはエステルの、イン スリン−依存性糖尿病のための使用を開示している・英国特許第１１５３４２４ 号、カナダ特許第８９１５０９号、英国特許第１１９５１９９号：英国特許第１ １９５２００号、英国特許第１１５２１７９号。これらの特許いずれも、３−Ｇ ＰＡの唯一の治療としての使用、あるいは医薬組成物における唯一の有効成分と しての使用を開示していない。３−ＧＰＡは血中グルコースを低下させることな くインスリン分泌を刺激すること［例えば、アンスレイ−グリー’ｙ−ｘイら（ Ａｎｓｌｅｙ−Ｇｒｅｅｎ、Ａ、　ｅｔ　ａｌ）、ホルモン・アンド・メタポリ ツク・リサーチ（Ｈｏｒｎ、　Ｍｅｔａｂ、　Ｒｅｓ、　）６　：　１１５〜１ ２０　（１９７４）およびブランエ・エフ（Ｂｌａｃｈｉｅｒ、　Ｆ、　）、エ ンドクリノロジー（Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ）ｌ　２４　：　ｌ　３４−１ ４１　（１９８９）寥照コおよび心臓グリコーゲン含有量を増加させることが示 されている。例えば、ロバーツ・ジェイ（Ｒｏｂｅｒｔｓ、Ｊ、）　、アメリカ ン・ジャーナル・オブ・フィジオロジ−（Ａｔ　Ｊ、　Ｐｈｙｓｉｏｌ、　）２ ４３　：　Ｈ９１１−Ｈ９１６（１９８２）およびモランド・ティ（Ｍｏｅｌａ ｎｄ、Ｔ、）、アメリカン・ジャーナル・オブ・フィジオロジー（八ｍ、　Ｊ、 　Ｐｈｙｓｉｏｌ、　）　２５７：Ｃ３１０−Ｃ８１６（１９８９）参照。また 、３−ＧＰＡを含む飼料の補足の結果、体重が減少することも公知である。例え ば、ショウブリッジ・イー・エイら（Ｓｈｏｕｂｒｉｄｇｅ、　Ｅ、　Ａ、　ｅ ｔ　ａｌ）、バイオケミカル・ジャーナル（Ｂｉｏｃｈｅｍ、Ｊ、）２３２：　 １２５−１３１　（１９８５）；モランド、前掲：マハンナ・ディーｘイら（Ｍ ａｈａｎｎａ、　Ｄ。

ｔｅｔ　ａｔ）、イクスペリメンタル・ニューロロジー（ｅｘｐｅｒ、　Ｎｅｕ ｒｏｌ、　）６８：１１４−１２１　（１９８０）；およびシールズ・アール・ ビイら（Ｓｈｉｅｌｄｓ、Ｒ，Ｐ、　ｅｔ　ａｌ）、ラボラトリ−・インベステ ィゲーション（Ｌａｂ、１ｎｖｅｓｔ、）３３：１５１　１５８（１９７５）参 照。この章で引用したすべての文献は前記にて議論した。

発明の概要 本発明ハ、３−グアニジノプロピオン酸またはその医薬上許容される塩を全身投 与することを特徴とする高血糖症、耐糖能障害、高インスワン血症、高アミリン 血症、脂肪過多症および／または高脂血症よりなる群から選択される代謝障害に 罹り易いあるいは罹った患者において該障害を治療または予防する方法を提供す る。

インスリン−依存性糖尿病の唯一の治療として効果的ではないとの文献における 多くの示唆にも拘わらず、驚くべくことにかつ予期せぬことに、３−ＧＰＡはヒ ト疾患の治療にお０て有益である℃）つくかの生物学的効果を引き起こすことが 判明した。それ（ま、血漿グルコース濃度、インスリン感性、血漿アミリン濃度 、脂肪過多症および血漿脂肪ａ度を改善する。これらの効果のうちすべて（よ、 ＮＩＤＤＭを治療するのに有益である。３−ＧＰＡｉよ現在ＮＩＤＤＭの治療に 用いられているメトフォルミンよりも治療上の利、轡、１こ優れている。例えば 、ビグ不り・アールら（Ｖｉｇｎｅｒｉ、Ｒ，ｅｔ　ａｌ）、ダイアベーテス・ ケア（Ｄｉａｂｅｔｅｓ　Ｃａｒｅ）１０　：１１Ｂ−１２２（１９８７）参照 。ＫＫＡ’（アップジョン（Ｕｐｊｏｈｎ））糖尿病マウス↓こ投与した場合、 ３−ＧＰＡはより優れており、血漿グルコース濃度を犬（１（こ減少させる。

３−ＧＰＡはインスリン−依存性糖尿病と同様の状態の１ｆつ書類に投与した場 合に効果的である。３−ＧＰＡｉよ、飼料中２ｍｇ／ｇ混合物として１３日間投 与した場合、脂肪分の少なへ１血糖正常Ｃ５７ＢＬ６Ｊｏｂ／？マウス（ジャク ソン・ラボラド「ノー（ＪａｃｋｓｏｎＬａｂｏｒａｔｏｒｙ）において非絶食 血漿グルコース濃度を変イヒさせな力１つた。より高濃度１０ｍｇ／ｇでは３− ＧＰＡはＣ５７ＢＬ６Ｊｏｂ／？マウスに４日間投与した場合、血漿グルツース 濃度に影響しなかったが、１３日間の投与の後には、血漿グルコース濃度は減少 した。

Ｃ５７ＢＬ６Ｊｏｂ／？マウスで血漿グルコース濃度を低下させた３−ＧＰＡの 用量は＞６ｇ／ｋｇ体重／日であった。それに対し、より少量の用量（１３０ｍ ｇ／ｋｇ／日）では、糖尿病ＫＫＡ’？ニスで抗−高血糖症効果が生じた。３− ＧＰＡは上昇された血漿グルコースａ度を減少させるが正常な血漿グルコース濃 度ではほとんど影響しないので、３−ＧＰＡは高血糖症を改善し、過鞠ｊ用量の 場合に低血糖症反応の危険もほとんど伴わないという大きな治療上の利点を有す る。

ＮＩＤＤＭはグルコース溶液の経口または非経口投与の後での絶食または食後状 態および耐糖能障害における高血糖症によって特徴付けられる。ＫＫＡ’マウス 、ＮｒＤＤＭのげっ歯頚モデル、に投与された３−ＧＰＡは非絶食血漿グルコー ス［を減少させ、耐糖能を改善する。げっ歯頚飼料中の混合物として投与する場 合、ＫＫＡ’マウスにおける最小有効用量は１３０ｍｇ／ｋｇ／日である。より 高用量では比例的に大きな効果が生じる。ＫＫＡ’マウスにおける該最小有効用 量未満の用量は他の種、例えば、ヒトにおいて血中グルコース濃度を減少させる のに効果的であり得る。というのは、排出はげっ歯頚では迅速で、池の種ではよ り遅く起こり得るからである。

組織インスリン感性障害および高インスリン血症はＮＩＤＤＭ［例えば、デフロ ンツ・アール（Ｄｅｆｒｏｎｚｏ、　Ｒ，）、ダイアベーテス（Ｄｉａｂｅｔｅ ｓ）３７　：　６６７−６８７　（１９８８）およびレーベン・シイ（Ｒｅａｖ ｅｎ、　Ｇ、　）、ダイアベーテス（Ｄｉａｂｅｔｅｓ）　３７　：　１５９５ −６０７　（１９８８）参照］、高血圧（例えば、レーベン、前掲、参照）、肥 満（例えばグラス・エイ（Ｇｌａｓｓ＾、）、前掲、参照）、およびアテローム 性動脈硬化症［例えば、レーベン、前掲およびスタウト・アール・ダブリュー（ Ｓｔｏｕｔ、　Ｒ，１，）、ダイアベトロシア（Ｄｉａｂｅｔｏｌｏｇｉａ）ｌ 　６　：　１４１−１５０　（１９７９）参照〕で起こり、これらの疾もの病因 となり得る。３−ＧＰＡはＫＫＡ’マウスで高インスワン血症を改善し、グルコ ース溶液度に対するインス！ノンの血漿中比を減少させ、これは、イノスリン感 性の増加を示す。従って、３−ＧＰＡはＮＩＤＤＭ、高血圧、肥満、およびアテ ローム性動脈硬化症の治療または予防で有用である。

高アミリン血症はＮｒＤＤＭで起こり得、組織グルコース代謝を減少させ「例え ば、レイトン・ビイラ（Ｌｅｉｇｈｔｏｎ、Ｂ、ｅＬ　ａｌ）、不イチ＋　−（ Ｎａｔｕｒｅ）３３５　：　６３２−６３５（１９８８）８５’照；、膵臓ホル モン分ｉ、を変化させる［例えば、クラーク・エイ（Ｃ１ａｒｋ昌、　）、ダイ アベティ、り・メディシ７　（Ｄｉａｂｅｔｉｃ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ）６　：　 ５６１−５６７（１９８９）参照］。３−ＧＰＡは高アミリン血症を改善し、従 って、血漿アミリン濃度が増加した病気状態の治療で有益である。

脂肪過多症はＮＩＤＤＭにおいて、極端がそれ自体病気状態を表す場合、病因で ある。脂肪および肝臓組織に貯蔵された。素質レベルを減少させることによって ３−　Ｇ　Ｐ　Ａは脂肪過多症を減じる。従って、当該化合物は肥満単独または ＮＩＤＤＭが伴うときの治療で有効である。３−ＧＰＡの効果は脂肪豊富組ｗｔ （例えば、ｏｂ１０ｂマウスの精巣上体脂肪または脂肪質肝臓）につき選択的で あり、一方、筋肉重量は影響を受けないか、あるいは最小限影響を受けるに過ぎ ない。

血漿低密度リボ蛋白（ＬＤＬ）コレステロール濃度の増加は冠動脈疾書の病因で ある。３−ＧＰＡは目然発生高脂血症フェスでＬＤＬ−フレステロールａ度を低 下させ、従って、高リポ蛋白血症および冠動脈疾書を治療または予防するのに有 用である。

唯一の活性薬剤とは、ここに特許請求するごとく、投与された３−ＧＰＡ化合物 またはその塩が組成物中でただ１つの薬剤であることをいう。

代謝障害、即ち、高血糖症、耐糖能障害、高インスワン血症、インスリン不感性 、高アミリン血症、脂肪過多症および／または高脂血症に罹り易いまたは罹った 告者とは、当該代謝障害を示し、従って、前記した疾患状態の１またはそれ以上 を示すようなヒトまたは動物を意味する。かかる巴者は通常技量の医師または獣 医により容易に診断される。治療とは本明細書中に記載した代謝障害の改善また は全回避を意味する。予防とは、前記代謝障害のいくつかまたは全部を示す患者 において、本明細書中に記載した現在認識されている疾患状態の回避を意味する 。

これらの目的には、便宜な経路の全身投与、例えば、経口、非経口、鼻孔内また は直腸内投与を使用する。一般に、好ましい投与形態は経口投与である。

前記組成物は徐放性処方で投与できる。徐放とは、遅延した期間にわたり測定速 度にて、薬物が患者に生物学的に利用可能となることを意味する。かかる組成物 は当該分野でよく知られている。

３−ＧＰＡは脂肪分の少ない体重に影響を与えることなく身体の脂肪を減少させ るので、３−ＧＰＡは脂肪分の少ない動物産物を生産することをその目標として 達成するにつき、肉、家禽、および魚産業にとって大きな商業的利点かある。３ −ＧＰＡは農場動物の飼料に混合して、あるいは経口錠剤のたはカプセル剤のご とき医薬製剤として、注射により、または移植可能な徐放性器具によって投与で き、それにより、屠体の蛋白含有量を増加させる一方で脂肪含有量を減少させる 。これは、脂肪分の少ない筋肉組織を生じさせるであろう。また、３−ＧＰＡの この利点は肉、家禽、および魚を消費する公衆に対して、可能な健康にインパク トを与えるであろう。「農場動物」なる語は食品産物のため飼育されてる動物と 定義される。

該語句はウシ、家禽、魚、ブタ、および羊を包含するが、それらの限定されるも のではない。

３−ＧＰＡは通常のマウスにおいて運動耐性を増加させる。かくして、本発明は 、ポリオ後慢性筋肉疲労症候群または筋ジストロフィーのごとき筋肉機能障害を 治療するにおいて、あるいは加齢または運動不足に関係する慢性的筋肉虚弱を治 療するにおいて、あるいは通常のヒトにおいて忍耐および運動を増加させるのに 有用であり得る。

また、３−ＧＰＡは低酸素環境に維持したマウスの生存率を改善し、従って、組 織低酸素症、例えば、糖尿病ヒトにおける末梢波付および運動不耐性、ならびに 糖尿病および通常ヒトにおけるアンギーナ、心筋梗塞および卒中を含めた疾愚症 状を治療または予防するのに有効である。

グルコース−依存性蛋白架橋がいくつかの蛋白の第３次構造を変えてしまうのは 公知である。この蛋白グリコ／ル化は糖尿病合併症ならびに神経障害、腎臓障害 、網膜障害、高血圧、およびアテローム性動脈硬化症のごとき非糖犀病ヒトにお ける加齢の合併症に寄与し得る。３−ＧＰＡは蛋白グリコジル化を阻止するのに 有用であり、従って、その反応を治療または予防するのに有用である。

本発明における３−ＧＰＡについての投与法は体重に依存する。

医薬投与形態において、３−ＧＰＡは１〜５００ｍｇ／　ｋ　ｇ／日の範囲であ る。好ましい用量は５〜１００ｍｇ／ｋｇ／日である。いずれの徐放処方も用い ることができる。

発明の詳細な記載 以下の実施例により本発明をさらに詳しく説明する。

実施例１　血漿グルツース濃度の改善 ＫＫＡ’マウスにおいて３−ＧＰＡが非絶食血漿グルコース濃度に与える効果を テストするために、げつ歯頚飼料に混合して３−ＧＰＡを４日間当該マウスに投 与した。自由に摂食させる状態の意識あるマウスの眼窩後血脈詞に穿刺すること によって採集した血液から血漿を調製する。血液試料は第０日（処理前）および 処理の第４日に得た。血漿グルコースはへキサキナーゼおよびグルコース−６− リン酸デヒドロゲナーゼを用いる酵素カップルドアッセイによって測定する。テ ークは群当たり５匹のマウスについての平均値：標準偏差として示す。血漿グル コースを２０％またはそれを超えて減少させる用量は生物学的に意味のある効果 を有するはずであると考えられる。３−ＧＰＡによる血漿グルコース濃度の百分 率減少は以下の通りである：０．８ｍｇ／ｇ、２０％＋　１．５ｍｇ／ｇ、４８ ％：２ｍｇ／ｇ、５２％；１０ｍｇ／ｇ、７７％。結果を表１にまとめる。３− ＧＰＡは、また、Ｎｌ５５Ｍのモデルであると考えられる肥満、高血糖症Ｃ５７ ＢＬ６Ｊｏｂ１０ｂにおいて非絶食血漿グルコース濃度を減少させる。

ＫＫＡ’マウスにおいて、３−ＧＰ、Ａがグルコース耐性に与える効果をテスト するために、該マウスにｌ　Ｏｍｇ／ｇにてげつ歯類飼料に混合して３−ＧＰＡ を１４日間投与するか、あるいは非補足飼料を摂食させた。血液試料を収集し、 表１の説明に記載したごくグルコースについて血漿を分析する。時間Ｏ（グルコ ース投与に先立って）に血液を収集し、１　、５　ｇ　／　ｋ　ｇグルコースの 腹腔内注射の後間隔を置いて収集する。表Ｈに示したデータは、群当たり５〜６ 匹のマウスについて平均値ご標準偏差として示す。

に奥豊エ　インスリン感性における改善インスリン感性を改善し、および高イン スリン血症を改善するにおける３−Ｃ；ＰＡの有用性を支持するデータは表■に 示す。ＫＫＡ’マウスに１０ｍｇ／ｇの３−ＧＰＡを補足して飼料を１４日間給 餌するか、あるいは非補足飼料を給餌する。血液試料を採取し、表１の説明に記 載ごとくにグルコースについて分析する。単一の抗体ラジオイムノアッセイ技術 を用いて血伊インスリンを測定する。データは５〜６匹マウス／群につき平均値 ：標準偏差として示す。

祖９　血漿アマリンＪ度の改善 ＫＫＡｙ７ウスに飼料に２　ｒｎ　ｇ　／　ｇ　ａ合して３−　Ｇ　Ｐ　Ａを４ 日間摂取させるか、あるいは非補足飼料を摂取させる。ｏ　ｂ　／　ｏ　ｂマウ スに飼料中２または１０ｍｇ／ｇ混合として３−ＧＰＡを３０日間摂取させるか 、あるいは非補足飼料を摂取させる。表Ｉに記載したごとくに血液試料を採取す る。アマリンは二重抗体ラジオイムノアッセイを用いて血漿中にて測定する。結 果を表■に示す。

実施例４　脂肪過多症における改善 ３−ＧＰＡが体重および器官重量に与える効果をｏｂ１０ｂマウスでテストする 。該マウスに２　ｍ　ｇ　／　ｇまたは１０ｍｇ／ｇ混合として試料中にて３− ＧＰＡを摂取させるか、あるいは非補足飼料として給餌する。表■に示すデータ は平均値上標準偏差として示す。

寒寒一旦　血漿脂質濃度における改善 ｏｂ１０ｂｖウスにｘＯｍｇ／ｇ混合として飼料中にて３−ＧＰＡを１３日間摂 取させるか、あるいは非補足飼料を給餌する。リボ蛋白分析について血漿は表Ｉ に記載したごと（に得られる。リポ蛋白連関はＤｅｍａｎｄ　Ａｕｔｏａｎａｌ ｙｚｅｒで測定する。表■に示したデータは群当たり５匹のマウスにつき平均値 士襟準偏差として示す。比較のために、血漿リボ蛋白プロフィールを非処理の４ 匹の非糖尿病Ｃ３７ＢＬ６Ｊｏｂ／？マウスについて示す。

実施例６　非糖尿病肥満マウスにおける脂肪過多症および体重の減少 ジャクツ／・ラボラトリーズ（Ｊａｃｋｓｏｎ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）　 （バー・ハーバ−（Ｂａｒ　１（ａｒｂｏｒ）、マイン（Ｍａｉｎｅ））から入 手したＡ’マウスで３−　Ｇ　Ｐ　Ａをテストする。ＫｅｔｏＤｉａＳｔ　ｉｘ ＴＭを用い、給餌状態にて、糖尿の有無につきマウスを測定する。２および５　 ｍ　ｇ　／　ｇ飼料にて粉砕マウス飼料中の混合物として３−ＧＰＡを１４日間 投与するか、あるいは非補足飼料を与える。ベイスおよびラスブン（Ｐａｃｅ　 ａｎｄＲａｔｈｂｕｎ）の方法を用い、脂肪分の少ないあるいは脂肪質の体重を 測定する（ペイス・エヌおよびラスブン・イー・エヌ（Ｐａｃｅ、Ｎ、　ａｎｄ Ｒａｔｈｂｕｎ、　Ｅ、Ｎ、　）、身体組成の研究（Ｓｔｕｄｏｅｓ　ｏｎ　Ｂ ｏｄｙ　Ｃｏｌ１ｐｏｓｉｔｉｏｎ）■、脂肪含有量に対する身体水分および化 学的に結合した窒素含有量（Ｔｈｅ　Ｂｏｄｙ　Ｗａｔｅｒ　ａｎｄ　Ｃｈｅｍ ｉｃａｌｌｙ　Ｃｏｍｂｉｎｅｄ　Ｎｉｔｒｏｇｅｎ　ＣｏｎｔｅｎｔＲｅｌａ ｔｉｏｎ　ｔｏ　Ｆａｔ　Ｃｏｎｔｅｎｔ）、ジャーナル・オブ・バイオロジカ ル・ケミストリー（Ｊ、Ｂｉｏｌ、Ｃｈｅｓ、）１５８　：　６５８−６９１（ １９４５））。

分析的研究室天秤を用い、体重および切り出した器官の重量を重量分析手法にて 測定する。

表７に示すごとく、体重の百分率として、３−ＧＰＡは体重および脂質重量を有 意に減少させ、骨格筋肉の代表的源として選択した隔膜および腓筋肉は３−ＧＰ Ａによって有意に減少する。（第１次的骨格筋肉重量を反映する）合計生脂肪分 体重は体重の百分率として表した場合、同様に３−ＧＰＡによって減少する。

実施例７　成体アカゲザルにおけるインスリン感性および体重に与える３−ＧＰ Ａの効果 ３−ＧＰＡをゼラチンカプセル中にて、１６ｍｇ／ｋｇの用量で１１日間、１日 ３回、経口投与した。ベルブマン・ミニマル・モデル（Ｂｅｒｍａｎ　Ｍｉｎｉ ｍａｌ　Ｍｏｄｅ＋）技術を用い、インスリン感性を測定した（バシニ・シイお よびベルブマン・アール（Ｐａｃｉｎｉ、Ｇ、　ａｎｄ　Ｂｅｒｍａｎ。

Ｒ，）Ｎ　：　Ｍ　Ｉ　ＮＭＯＤ　：頻繁に採取した静脈内グルコース耐性テス トからのインスリン感性および膵臓応答性を計算するためのコンビュ−タープロ グラム（ａ　ｃｏｍｐｕｔｅｒ　ｐｒｏｇｒａｍ　ｔｏ　ｃａｌｃｕｌａｔｅ　 １ｎｓｕｌｉｎｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ　ａｎｄ　ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ　ｒｅ ｓｐｏｎｓｉｖｉｔｙ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｆｒｅｑｕｅｎｔｌｙｓａｍｐｌｅ ｄ　１ｎｔｒａｖｅｎｏｕｓ　ｇｌｕｃｏｓｅ　ｔｏｌｅｒａｎｃｅ　ｔｅｓｔ ）、コンピューター゛メス・プロゲル・バイオメト（Ｃｏｍｐｕｔｅｒ　Ｍｅｔ ｈ、　Ｐｒｏｇｒ、　Ｂｉｏｍｅｄ、　）　２３゜１３３−１２２．１９８８） 。インスリン感性はすべての被験者で改善された。体重は２匹のもつも重いサル で減少したが、低体重サルでは影響を受けなかった。これらの知見は、脂肪分の 少ない組織重量に影響することなく、かつインスリン感性の増加に影響すること なく、身体脂肪重量を選択的に低下させるごとによって３−ＧＰＡが体重を減少 させた肥満げっ歯頚からの前のデータと一致する。

式 非飢餓血漿グルコース ３−ＧＰＡ　（ｍｇ／ｄｉ） 飼料中に　平均用量　処理日 Ｎｉｌ　Ｏ４８１＋５９　６５１＋５２２　０．３２　４４１＋６８　３１３＋ ７５拳１０　１．７４　４６４＋６７　１４８＋５寧寧寧、Ｐ＝０．００６．　 率率、Ｐ＝Ｏ，ＯＯＯ。

実験２ Ｎｉｌ　Ｏ６２ｇ＋７７　５３６＋４９０．８　０．１３　６Ｌ７＋５８　４２ ９＋５２寧１．５　０．２１　６２４＋６４　２７９＋４９”事、Ｐ＝０．１７ ．　寧寧、Ｐ＝０．００６表２ 血漿グルコース（ｍｇ／ｃｌｌ） 対照　３−ＧＰＡ　Ｐ−値 時間（分） ４８４−ｉ−１０１１７１＋２１　０．０１４５　８４２＋８３　２３０＋４０ 　０．ＣＸ℃３０　５２７＋８１　２７０＋３１　（１０１４６０４３０＋５１ 　１９０＋１９　０．００２１２０　３２７＋５４　１５３＋１８　０．０１３ 表３ ｍｅインスリ／血漿インスリ／／グルコース（マイクロ鳳ｔｌ／ｍｌ）　（マイ クｏ乾／ｍｇ）対照　３，００９＋４１９　７．３０＋１．５７３−ＧＰＡ　２ ９９＋１１７”　２．０４＋０．８３１Ｉ率−Ｐ＝Ｏ，（Ｘ刃；　”、Ｐ＝Ｏ１ ０１６表４ 株　処理　血漿アミリン（ｎｇ／ｍ１）ＫＫＡｙ　対照　１５．０＋４．１　（ ｎ＝５）３−ＧＰＡ　４．３＋０．６　（ｎ＝３）ｏｂｌｏｂ　対照　１．３＋ ０．２　（ｎ＝６）３−ＧＰＡ　（２ｍｇ／ｇ）　１．８＋０．２　（ｎ＝３） ３−ＧＰＡ　（１０ｍｇ／ｇ）　０．４６＋０．０５　（ｎ＝５）表　５ 実験１　３１日処理　４−６マウス／群飼７４中ｍＷ　：　０　２　ｍｇ／ｇ　 １０　ｍｇ／ｇ体重（ｇ）　５２．３＋０．７　４９．４＋１．１　３６．１＋ １．５肝１１（ｇ）　４．３＋０．２　３．６＋０．１　１．６＋０．２精巣上 体脂肪（ｇ）　３．７＋０．１　３．８＋０．３　２．５＋０．２実験２　１３ 日処理　５マウス／群 飼料中濃度　０　１０　ｍｖｇ 体重（ｇ）　４３．４＋１．３　３６．８＋１．３肝臓（ｇ　）　２．４　＋０ ．２　１．３　＋０．１心臓（ｇ）０．１１＋０．０１　０．１０＋０．００４ 隔１１ｊ（ｇ）　０．０６５＋０．００４　０．０６１＋０．００４腓筋肉（ｇ ）　０．０５０＋０．００１　０．０４７＋０．００３表６ 表現型　ｏｂ／？　ｏｂｌｏｂ　ｏｂｌｏｂ　Ｐ−値３−ＧＰＡ　（−）　（− ）　（＋）　ｏｂｌｏｂ（−）ｖｓ（＋）コレステロール 合計　１１４＋４　２１３＋１２　２１４＋７　０．９３２アルフア　９６＋３ 　１９４＋１５　２０４＋９　０．６６０ベータ　１８＋１　１９＋４　１０＋ ３　０．０４４トリグリセリド 合計　１１２＋１０　１７０＋４１　１４９＋２５　０．６５６アルフア　７０ ＋３　８７＋４　９９＋９　０．０７８ベータ　４２＋７　８３＋３８　５１＋ ２４　０．４６４表７ 体重（ｇ） 脂質重量Ｃｇ）　１３．４５±０．６９　１３Ｊ７±０．３８　１６５±０．８ １”脂肪すＬ（８１（９１ｙ　ＢＷ）　７０−６０＋０．７８　６９．５４＋０ ．５７　７５．４７＋１．５７”隔膜 腓筋肉 表８ 対象　インスリン感性指標　体重（ｋｇ）ブラセボ　−二ビー　ｇ疋■ サル６０６　０．００４０　０．００５８　６．６　６．１サル１１　０．００ ６３　０．００７６　５．５　５．２ｆ　ル１７　０．００７０　０．０１１０ 　４．５　４．６要約書 本発明は３−グアニジ７ブロビオン酸を全身投与することを特徴とするある種の 代謝障害を治療または予防する方法を提供する。

国際調査報告 −一―−ψＡｓｅ４＋５−１−．ＰＣＴ／ＵＳ　９１１０１１０９国際調査報告

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．３−グアニジノプロピオン酸またはその医薬上許容される塩の、脂肪過多症 、高血糖症、耐糖能障害、高インスリン血症、インスリン不感性、高アミリン血 症、および／または高脂血症よりなる群から選択される代謝障害の治療用医薬を 製造するための使用。 ２．３−グアニジノプロピオン酸またはその医薬上許容される塩の、農場動物の 脂肪含有量を減少させ、および筋肉および蛋白含有量を増加させる医薬の製造の ための使用。 ３．３−グアニジノプロピオン酸またはその医薬上許容される塩の脂肪過多症、 高血糖症、耐糖能障害、高インスリン血症、インスリン不感性、高アミリン血症 、および／または高脂血症よりなる群から選択される代謝障害を治療または予防 するのに有効な量を該障害に罹り易いあるいは罹った患者に投与することを特徴 とする該患者において該障害を治療または予防する方法。 ４．３−グアニジノプロピオン酸またはその医薬上許容される塩の脂肪含有量を 減少させ、および筋肉および蛋白含有量を増加させるのに有効な量を農場動物に 投与することを特徴とする該農場動物の脂肪含有量を減少させ、および筋肉およ び蛋白含有量を増加させる方法。 ５．投与モードが経口であって、患者がヒトである請求の範囲第３項記載の方法 。 ６．該障害が脂肪過多症である請求の範囲第３項記載の方法。 ７．該障害が耐糖能障害である請求の範囲第３項記載の方法。 ８．該障害が高インスリン血症である請求の範囲第３項記載の方法。 ９．該障害がインスリン不感性である請求の範囲第３項記載の方法。 １０．該障害が高血糖症である請求の範囲第３項記載の方法。 １１．該障害が高アミリン血症である請求の範囲第３項記載の方法。 １２．該障害が高脂血症である請求の範囲第３項記載の方法。 １３．３−ＧＰＡの該有効量が１〜１００ｍｇ／ｋｇ／日の範囲である請求の範 囲第３項記載の方法。 １４．３−ＧＰＡの該有効量が５〜１００ｍｇ／ｋｇ／日の範囲である請求の範 囲第３項記載の方法。 １６．３−ＧＰＡを飼料に混合して、製剤として、注射により、または移植可能 徐放装置として投与する請求の範囲第４項記載の方法。 １７．唯一の有効薬剤としての３−ＧＰＡまたはその医薬上許容される塩および ヒトに適合する医薬上許容される担体よりなる経口医薬組成物。 １８．処方が徐放性処方である請求の範囲第１７項記載の組成物。