JPH05507685A - リン脂質で被覆した微細結晶である水不溶性薬剤の注射可能な製剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 発明の名称 リン脂質で被覆した微細結晶である水不溶性薬剤の注射可能な製剤技術分野 本発明は、高濃度の水不溶性薬剤の哺乳類宿主への注射を可能にし、且つ、注射 された薬剤の持続放出をもたらす、注射可能な搬送形態に関する。

本発明は、微細結晶である水不溶性薬剤をサブミクロン寸法にまで縮小させるこ とが出来、且つ、膜形成性脂質で被覆することにより医薬的に精密で簡潔な注射 可能形態において高濃度で水性溶媒中に懸濁させることが出来ることを示す。こ の被覆は、一般的にはリン脂質であるが、任意の膜形成性脂質から作成すること 力咄来る。微結晶を疎水性と親水性の両方の相互作用により安定化させる膜形成 性脂質の層により、その微結晶を被覆する。

リン脂質の脂肪性アシル鎖は、疎水性相互作用により微結晶を安定化させ、更に 、リン脂質の極性先端基が溶媒水との相互作用を通して被覆しである微細結晶を 安定化させる。

２重層型での脂質による包被により、且つ、小胞の形態での懸濁媒体中の余剰な 膜形成性脂質の包含により、被覆しである微結晶を更に安定化させることが出来 る。この調製物は組織適合性であり、且つ、筋肉内（ＩＭ）、皮下（Ｓｕｂ−Ｑ ）、皮内への注射、あるいは、他の限定された組織又は空間（腹腔内、関節内、 硬膜外等）への注射の際の持続性放出を生じる。この調製物は、血液中に即ち広 範囲で余り限定されていない分画中に注射される場合に迅速な放出を与えること が出来、そこでこの調製物は迅速な希釈を受ける。この調製物を病変内に注射し て、残りの系を巻き添えにすることなく、局所的な高用量を与えることが出来る 。

本発明は、その注射可能性、組織適合性、小さな粒子サイズ、高荷重、注射針通 過性、保存における安定性、単一の被覆物質としてのリン脂質の使用、及び、非 抗原性により、現存する薬剤搬送系から区別される。

背景技術 水溶性薬剤は容易に注射可能であるが、水不溶性の薬剤はそうではない。

水不溶性（又は油溶性）薬剤については、注射可能形態の作成は実質的な問題で ある。薬局方は、経口的に服用する必要のある水不溶性薬剤の多くの例を含んで いる。その理由は、それらについては適切な注射可能形態が存在しないためであ る。

現在の技術は、注射出来る薬剤濃度及び総容量の点で限定されている。その適用 は、局所炎症、組織破壊等（ＩＭ注射の場合）、及び、血栓性静脈炎、血栓塞栓 症、肺虫細血管系遮断等（ＩＶ投与の場合）の問題により限定されている。

従来の技術を論する前段階としては、注射可能な調製物に要求される基準を考慮 することが有用である。臨床診療及び製薬産業の一般的な計画概要に応するため には、注射可能な産物は以下に示すＡ−Ｆの基準を満たす必要がある。

Ａ０組織適合性 調製物及びその賦形剤は組織適合性でなければならない。この必要条件は、組織 内へ及び血液循環内への注射について同等に重要である。筋肉への有害な試薬の 注射は、痛み、刺激（炎症）、組織破壊、細胞反応、繊維症、又は、化膿反応を 引き起こし得る。血液循環内への有毒試薬の注射は、動脈又は静脈への損傷、動 脈又は静脈中での凝塊形成、及び、組織又は肺への血液循環の遮断を含む、血栓 性静脈炎を結果として生じ得る。有機溶媒、極端なｐｕ及び界面活性剤の使用を 含む現在実施されている可溶化法は、これらの問題により著しく制限されている 。

Ｂ、１０μｍ以下のサイズ性 製剤は直径が１０□ｍを超える粒子を含んでいてはならない。１０μｍを超える 大きさの粒子は血液の毛細血管系を遮断することが考えられる。動脈内（Ｉ　Ａ ）に投与する場合、それらはその組織の毛細血管内に堆積して局所的虚血を引き 起こすことが考えられる。静脈内（Ｉ　Ｖ）に投与する場合、それらは肺の毛細 血管内に堆積して呼吸困難を引き起こすことが考えられる。

安全のために、１０μｍ以下の基準は、偶然のＩＶ又はＩＡ注射の危険性のため 、意図した他の注射経路（例えば、筋肉内、ＩＭ）についても満たす必要がある 。経口投与に関する有効な調整的放出技術の大半は、それがこの基準を満たさな いという理由で、注射可能な形態に応用することが出来ない。

Ｃ０注射可能量 製剤は薬剤の充分量の注射を可能にしなければならない。この製剤は高濃度の薬 剤を保持しなければならない。−例として、ある薬剤について利用出来る最も高 い濃度が２％（ｗ　／　ｖ　）又は２０ｍｇ／ｍｌであり、且つ、ヒトへのＩＭ 注射のための最も大きい実施容量が５ｍｌである場合、−回の注射はその薬剤の １００ｍｇＬか供給することが出来ない。その薬剤が充分な効力を有する場合に は、これは問題にはならない。

しかしながら、薬剤の１〜２ｇを体内へ導入しなければならない事例も数多く存 在する。これには１０倍又は２０倍大きい容量（非実用的又は不可能）、あるい は、１０ないし２０倍の濃度（これまでには達成されていなレリ、のいずれかが 必要である。

Ｄ、非抗原性 製剤はアレルギー反応を誘導し得る成分に依存していてはならない。このことは 、皮膚及び筋肉内への注射についての特有な問題である。外来性蛋白質又は巨大 分子類の繰り返し行われる注射は免疫反応を誘導し得る。調節された放出におけ る現行の技術の大半は、「プラスティック」、交叉結合させた血清アルブミン、 あるいは、ポリ（Ｄ、　Ｌ）乳酸のようなポリマー類に依存している。

Ｅ、荷重性 広く有効であるためには、搬送系が高い「荷重」を有さなければならない。

荷重とは、担体又は封入用物質の重量に対する放出される薬剤重量の比率として 定義することが出来る。例えば、ある搬送系が１０ｇの蝋質又はポリマーを使用 して２ｇの薬剤を封入する場合、その荷重は０．２となる。低い荷重を有する搬 送系は、大量の不移入月物質を必要とする。この物質を代謝又は除去する組織又 は血管分画の能力は良性のものではありながら、投与することが出来る薬剤の量 を制限する。

Ｆ、物理的安定性 製剤は、安定であり、全体として均質であり、注射針通過性であり、且つ、医薬 的に精密で簡潔であり、更に、これらの特性を合理的な貯蔵期間の間維持しなけ ればならない。

本明細書に開示しであるリン脂質被覆した微細結晶は、それがこれらの基準の全 てを満たすという点において特有である。先の基準を満たしながらも、水不溶性 薬剤を４０％（ｗ／ｖ）　という高濃度で注射することを可能にするという点に おいても特有である。

上記の６種類の基準を基にした、最近の医薬的及び臨床的慣例及び特許及び科学 文献の見地の双方に代表される従来の技術の調査により、現存する系は、次の工 及びＩＩに記載するように、水不溶性薬剤の注射可能形態のための先の６種類の 基準の全てを満たしてはいないということが示されている。

■、市販物として入手可能な形態 （１）市販物として入手可能な形態の説明書には、ドイツにおいて入手可能な産 物を記述している「ロチ　リスト（Ｒｏｔｅ　Ｌｉ５ｔｅ）Ｊ　（ブンデスフェ ルバント　デル　）７−マシユーテイツシエン　インドウストリー社、ｅ、Ｖ、 　、６０００　フランクフルト、ａ、Ｍ、、ドイツ）、及び、アメリカ合衆国に おいて入手可能な製品を記載している「フィジシャンズ　ディスク　レファレン ス（Ｐｈｙｓｉｃｉａｎ’　ｓ　Ｄｅｓｋ　Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ）Ｊ　（ＰＤＲ ，メディカル　エコノミックス　カンパニー社、オーラブル、ニューシャーシー 州）のような編集物がある。

（２）水不溶性薬剤を可溶化させる問題に対する一つの解決策は、非生理学的ｐ Ｈを使用してそれをイオン化することである。ある産物においては、チオベンタ ールをナトリウム塩として補足するが、それによって滅菌水の添加の際に、ＩＶ 注射することが出来る０、２〜５％の薬剤のアルカリ性溶液が作成される。表記 されている不利な反応は、注射の部位から広がる静脈性血栓症又は静脈炎を含む （Ａｂｂｏｔｔ、１９８８年、ＰＤＲ，５５６−５５９ページ）。

（３）ＩＭ注射にのみ応用出来る他の解決策は、植物性池内に溶解している化合 物の溶液を注射することであった。植物性油中のトリグリセリドは組織適合性で はあるものの、大量の油は身体により容易に吸収又は代謝されない。波状の巨塊 は、封入組織の成長により、壁に隔てられ、且つ、何が月もの間存続する。油性 肉芽腫の問題及び偶然のＩＶ又はＩＡ注射に関与する重大な危険性のため、この 解決策はほぼ無効にされている。残りの例は、胡麻油中に溶解しているハロベリ ドールデカノエートの７．０５％溶液である（ＭｃＮｅｉｌ、ＰＤＲ，１２４０ −１２４１ページ）。

（４）上記の問題に対する他の解決策は、有機溶媒中に薬剤を可溶化させること である。−例として、ジアゼパム（バリウム：Ｖａ　ｌ　ｉｕｍＲ）は、４０％ のプロピレングリコール、１０％のエチルアルコール、水及び防腐剤の溶液中に 、５ｍｇ／ｍｌ　（０，５％）の濃度で可溶化される。ＩＶ利用については、不 利な反応として報告されている静脈性血栓症、静脈炎、局所炎症等の可能性を低 減するように警告が発せられている。この調合物は水中における希釈に対して安 定ではない（Ｒｏｃｈｅ、１９８８年、ＰＤＲ，１７６４−１７６６ページ）。

有機溶媒の局所的反応のため、それらのヒトでの利用はかなり限定されている。

食用動切における獣医学的利用における実情はこうではなく、これらの動物にお いては、注射筒（２０ｍｌ）の容量制限及び他の実際的な考慮事項のために、高 い薬剤濃度が必要である。−例は、畜牛におけるＩＭ注射用の市販品である、プ ロピレングリコール中に溶解しているオキシテトラサイクリンの１０％（Ｗ／Ｖ ）アルカリ化溶液である。これは注射時の痛みと局所的損傷を産生ずる。

（５）別の解決策は、薬剤を非イオン性洗剤によって可溶化又は懸濁させること である。この−例は、等張の食塩水中に溶解している２５ｍｇ／ｍｌ又は５０ｍ ｇ／ｍｌのコルチゾンアセテート、４ｍｇ／ｍｌのポリソルベー）８０．５ｍｇ ／ｍｌのカルボキシメチルセルロースナトリウム及び防腐剤から成るコルチゾン アセテート懸濁液である（メルク　シャープ＆ドーム、１９８８年　ＰＤＲ，１ ２９７−１２９９ページ）。適用は、経口療法が適していない場合には、筋肉内 利用のみということである。ある事例においては、有機溶媒と界面活性剤が組み 合わされる。プロピレングリコール中に溶解している２ｍｇ／ｍｌ又は４ｍｇ／ ｍｌのロラゼバム及び０．１８ｍ１／ｍｌのポリエチレングリコール４００　（ 非イオン性界面活性剤）を含む予備麻酔鎮静剤は、希釈後、ＩＭ注射又はＩＶ注 射に有効である。ＩＭ注射では１７％の発生率で痛み及びひりひり感を生じるこ とが報告されている（Ｗｙｅｔｈ、１９８８年　ＰＤＲ，２２５８−２２５９ペ ージ）。

Ｉｌ、特許及び科学文献に記載されている形態この範鴫における数多くの系が、 脂肪酸、脂質、リン脂質、及び、非イオン性の界面活性剤を利用している。読者 の便宜のために、本段落の残りの部分に上記の物質の化学的及び物理学的性質を 簡単に記載することとする。

脂肪酸のアルカリ性カチオン塩は、水と混合した場合に、５ｎｍ以下の膜構造を 被覆することも出来る。

グ’）　セロール（ＣＨ０Ｈ−ＣＨＯＨ−ＣＨ２−ＯＨ）　でｆ）脂肪酸ノエス テル化により、それぞれの脂肪酸銀の長さ及び温度に依存して、純粋状態で油状 又は固体のいずれかであるモノグリセリド類（例えば、グリセロールモノオレエ ート）が産生される。ある種の環境下においては、それらは、余剰な水の存在中 で膜様構造を形成するか又はそれに関与することが出来る。グリセロールの２ケ 所又は３ケ所のＯＨ部位のエステル化（それぞれ、ジグリセリド類及びトリグリ セリド類）でこの性質が失われる。

トリグリセリド類は脂肪及び植物注油の主要成分である。それらは、膜を形成し たり、あるいは、膜構造に関与したりはしない。

リン脂質は、リン酸で３位がエステル化されている、グリセロールの１゜２ジア シルエステルである。リン脂質は、生物学的な膜の主要な構築用プロツクであり 、且つ、非常に組織適合性である。重要かつ豊富な例はレシチン（）オスファチ ジルコリン）であり、この物質においては、リン酸基がコリンでエステル化され て両性イオン性の極性先端基を産生ずる。過剰な水の存在中においては、リン脂 質は２分子分の厚みの膜を形成する。この極性先端基は水に対して配向し、脂肪 性アシル鎖は、それらの末端が膜の中心に沿って、槽構造を形成する。

薬剤処方において使用される非イオン性界面活性剤（又は洗剤）は、疎水性及び 親水性セグメントカ咬互に配列している高分子量ポリマーである。頻繁に用いら れ且つ引用される例はポリエチレングリコールであり、これは、構造：Ｈ（○− ＣＨ２−ＣＨ２，）　ｎＯＨを有する。非イオン性界面活性剤は、水性媒体中で 疎水性の油及び固体を被覆及び可溶化し得る。これらは膜を形成しない。これら は生物学的な膜を溶解し、且つ、そのために組織適合性ではない。

（１）Ｗｒｅ　ｔ　１　ｉｎｄ他（米国特許第４，０７３，９４３号、１９７８ 年）は、水不溶性薬剤の静脈内投与のための担体として、静脈内栄養補給用に使 用される種類の、脂肪乳化物類の使用を記載している。この系は、低い荷重（薬 剤重量（ｇ）／脂肪重量（ｇ）を有し、これが、投与することが出来る薬剤の量 を制限している（上述の基準Ｅ参照）。

（２）Ｈａｙｎｅｓ　（米国特許第４，７２５，４４２号、１９８８年）は、水 不溶性薬剤の、リン脂質で被覆した微細小滴の、注射可能な水性懸濁液を記載し ている。この薬剤は、それ自身が油状物であるか（例えば、吸入麻酔剤）、又は 、医薬的に許容可能な油に溶解した。本発明は、結晶性の、水不溶性薬剤のため の改良された荷重を提供する。

（３）レシチンのような膜形成性のリン脂質から形成される小胞であるリポソー ムは、最初に、ＢａｎｇｈａｍＳＳｔａｎｃｌｉｓｈ及びＷａｔｋｉｎｓ　（Ｊ 、Ｍｏ１．Ｂｉｏｌ、１３巻、２３８ページ、１９６５年）により発表された。

均質化により作成されるリポソームは、同中心の２重層膜を有する多重層状であ る。超音波処理により産生されるリポソームは、Ｈａｕｎｇ（Ｂｉ。

ｃｈｅｍ、８巻、３４４ページ、１９６９年）により記載されているように、小 さな、単層状のリン脂質小胞である。リポソームは、それの水性内部に、極性で あり且つ高度に荷ｔされている分子を捕獲する能力を有する。リポソームが非抗 原性の搬送系（基準Ｄ）である事実は広ぐ認められている。水溶性薬剤の捕獲及 び搬送のそれらの性質に関する美大な数の特許が存在する。

数少ない特許においては、リポソームは油溶性薬剤を取り込むことが出来ること が示されているが、しかし、その荷重は低いということが示されている。

その例は、５ｃｈｒａｎｋ　（米国特許第４，４１１，８９４号、１９８３年） 、Ｍ　ｅ　ｚ　ｅ　ｉ及びＮｕｇｅｎｔ　（米国特許第４，４８５，０５４号、 １９８４年）、Ｄｉｎｇｌｅ他（米国特許第４，４２７，６４９号、１９８４年 ）、又は、Ａｂｒａ及び５ｚｏｋａ　（米国特許第４，７６６．０４６号、１９ ８８年）を含む。

上述の例における薬剤の大半は、２重層構造内に取り込まれることが予想される 膜活性試薬である。典型的な荷重は０．１ｇ／ｇを下回っていた。上限は０−２ ｇ／ｇであると思われ、この価は、２重層中のリン脂質の槽構造の破壊を伴わな ければ超えられない。この制限についての一つの例外は、薬剤自体が脂質様構造 を有し、且つ、リン脂質との特異的かつ好ましい相互作用を受けることが出来る 場合である（Ｂａｕｒａｉｎ及びＴｒｏｕｅｔに対する米国特許第４，９７３， ４６５号参照）。

本発明は、リン脂質を利用して水不溶性薬剤を懸濁させるが、但し、上述のリポ ソームの特許において記載されているものとは完全に異なる方法において行う。

脂質２重層中に薬剤を溶解させることを試みるというよりはむしろ、本発明は、 薬剤を機側結晶形態に保持し、且つ、リン脂質をその結晶を被覆するのに利用す る。リン脂質小胞はレシチンで被覆した微細結晶の絶対必要な部分ではない。

（４）特許文献は、蝋質又は「脂肪性物質」で被覆した薬剤の例を挙げている。

しかしながら、その例は経口投与に関しており、更に、幾つかの場合においては 、局所投与に関する。例えば、トリステアリン（グリセロールとステアリン酸の トリグリセリド）は錠剤の一般的な成分である。特に小さい結晶を含む形態をマ イクロカプセルと名付けられている。被覆に使用しであるトリグリセリド又は蝋 質は、一般的に防水性であることが認められており、更に、蝋質被覆は水性懸濁 液には適さない。蝋質被覆したマイクロカプセルは、根本的には、水性媒体中に おける安定な懸濁液、注射可能性、及び、組織との適合性、又は、小さいサイズ を要求しない（上述の基ｍＡ、Ｂ、及びＦ）　、経口使用を目的としている。

（５）特許文献は、グリセリルモノオレエート（Ｒｅｌｌｅｒ、米国特許第４， ２１９，５４８号、１９８８年）のようなグリセロール脂質と混合しである結晶 薬剤を含む、局所使用を目的とした調製物の美大な数の例を含む。

化粧品の文献も、結晶薬剤を混合することが出来る高水含量のクリーム（Ｎｉｅ ｐｅｒ及びＭｅｌｓｕｎｇｅｎ、米国特許第３，２７４，０６３号、１９６６年 、参照）の美大な数を提供している。これらのクリームは注射可能であるとは見 なすことが出来ない。その理由は、それらは、解離して毛細血管を通過するのに 充分小さい分子（基準Ｂ）を生じることのない自己粘着性の塊を構成するためで ある。更に、これらの局所用調製物により示される表面の組織及び血液適合性が 証明されていない（基準Ａ）。遊離の結晶を含む製剤（Ｍｅｚｅｉ、米国特許第 ４，７６１，２２８号、１９８８年、参照）は、組織適合性でも注射可能なでも なさそうである。

（６）熱硬化させた血清アルブミンの１〜２００μｍ直径の球の内に取り込まれ た薬剤から成り、沈殿化している薬剤をその中に取り込んでいるミクロ球が、Ｚ ｏｌｌｅ（米国特許第３，９３７，６６８号、１９７６年）により記載されてい る。これについての変法が、Ｗｉｄｄｅ　ｒ及び５ｅｎｙｅ　ｉ（米国特許第４ ，３４５，５８８号、１９８２年号）、Ｍｏ５ｉｅｒ（米国特許第４，４９２， ７２０号、１９８５年）、及び、Ｍｏｒｒｉｓ（米国特許第４，３３１，６５４ 号、１９８２年）により記載されている。幾つかの例は、脂肪酸と非イオン性界 面活性剤の固体化した混合物を含んでいる。これらの調製物及び組織適合性、再 懸濁性及び安定性は、証明されていない。

（７）Ｏｐｐｅｎｈｅ　ｉｍ他（米国特許第４，１０７，２８８号、１９７８年 ）により記載されているナノ粒子は、低荷重０．００６７〜０．０９７９ｇ／ｇ で薬剤を含む、グルタルアルデヒドで固定化したゼラチンを形成する１２０〜６ ６０ｎｍ直径の粒子から成る。Ｃｏｕｖｒｅｕｒ他（米国特許第４，３２９，３ ３２号、１９８２年）は、低荷重０．００１２−０．０６２で薬剤を含み且つ界 面活性剤により明らかに安定化させられている、アルキルシアノアクリレートの 、５００ｎｍ以下の直径の粒子を記載している。

発明の開示 本発明は、高濃度の水不溶性薬剤の、注射可能な組織適合性懸濁液を作成するた めの方法を提供する。これにより、薬剤の非経口的（注射）投与が可能になる。

本発明は、一般的に、３７℃において結晶状態である任意の水不溶性薬剤に対し て応用することが出来る。リン脂質で被覆した微細結晶としての製剤により、薬 剤を注射、あるいは、非経口的に投与出来るようになる。この製剤は、最大限に 有効な注射可能形態についての６つの基準（組織適合性、ｌＯｐｍ以下のサイズ 性、注射可能量、非抗原性、荷重性、及び、物理的安定性）の全てを満たしてい る点において特有である。

図１は、微細結晶と被覆用リン脂質との間の関連を図式的に描いている。

本発明の中心と成る点は、一般的にはリン脂質の、更に、特にはレシチンの両親 媒性（ａｍｐｈｉｐａｔｈｉｃ＝ａｍｐｈｉｐｈｉ　１ｉｅ）特性の利用である 。Ｗｅｂｓｔｅｒの医学辞典（メリアンーウェブスター社、スプリングフィール ド、メリーランド州、１９８６年）は、両親媒性（ａｍｐｈｉｐａｔｈｉｃ／ａ ｍｐｈｉｐｈｉｌ　ｉｃ）にライて、「水不溶性の炭化水素鎖に結合している極 性の水溶性末端基を有する分子から成る００．」と定義している。

図１においては、リン脂質の極性先端基を円によって示し、更に、疎水性の炭化 水素鎖を「棒Ｊにより示している。多くの物質が両親媒性であり、例えば、石鹸 、界面活性剤、及び、洗剤が挙げられる。

本発明の特有な点は、結晶薬剤の疎水性表面を覆うため、且つ、結晶の再会合に 対する膜状の追加的障壁を提供するための、リン脂質の利用である。

石鹸、界面活性剤及び洗剤のような他の両親媒性分子は、このように安定かつ組 織適合性の構造を提供することが出来ない。

更に本発明に特有な点は、これらの安定な、リン脂質被覆した機側結晶構造を形 成する方法である。

上記の方法について以下の（ａ）〜（ｐ）に記載する。

（ａ）微細化及び１次被覆 本明細書中に記載しであるように、超音波処理又は強い剪断力の関わる他単位に までノＪＸさくする。超音波処理中に存在するレシチン（又は他の膜形成性脂質 ）は、それ自身が、露出した疎水性表面に対し高度の反応性を有する断片へと破 壊される。これらの断片は、サブミクロン結晶を被覆（ｃｏａｔ）且つ包被（ｅ ｎｖｅ　１ａｐ）して、１次被覆を形成する。この過程における必要条件は、超 音波処理又はその代わりの高エネルギー分散過程中にレシチンと薬剤とが同時に 存在することである（薬剤結晶の超音波処理と、それに続く、予め形成されてい るリン脂質小胞の迅速な混合によっては、薬剤の安定なサブミクロン水性懸濁液 は生じない）。

後述する調製方法（ｆ）には、インフライト蒸発による被覆及び溶媒希釈を含む 代わりの方法を明記している。これらの調製法の全ての共通な特徴は、被覆過程 中にリン脂質の脂肪酸銀が微細結晶に直接接近しなければならないことである。

本発明において、リン脂質の両親媒性特性は、水の親木性特性と結晶表面の疎水 性特性との両方を満たす。また、リン脂質膜表面は、巨視的結晶の再形成に対す る固定的な障壁として働く。１次被覆の第２の有効な特性は、溶解過程の速度の 調節である。リン脂質−微細結晶相互作用の可能な構造的特徴を図１に図式化し て示す。

（ｂ）２次被覆二周辺リン脂質 本発明においては、被覆及び包被用物質としてレシチン及び他の膜形成性脂質を 利用することに加え、機械的緩衝材、水容量の編制剤、及び薬剤の再結晶化の減 速剤として膜形成性脂質を新規に利用する。これは、懸濁された微細結晶の２次 的な被覆を形成する単層性又は多層性のリン脂質小胞の形態の余剰のリン脂質に よって行われる。超音波処理及び１次被覆過程の副産物として主に単層性の小胞 が形成される。調製物中にそれらを保持させることにより、製剤の長期安定性が 改善されることが発見された。更に、予め形成しである多層性小胞（均質化によ り作成した）又は単層性小胞を調製物に添加して、調製物の安定性又は薬動態を 改善することも出来る（実施例５）。

２次被覆は、被覆されている微小結晶に対して弛く結合している。周辺小胞は、 調製物中で継続的に会合及び解離する。この２次被覆は、調製物の遠心処理及び 再懸濁を繰す返し行うことにより除去することが出来る（実施例３及び１１）。

２次被覆を形成している周辺／Ｊ１胞は調製物を安定化させる。任意の特定の理 論又は反応様式に縛られるものではないが、詳細な考察により、以下に記載する 反応機構が示唆されている。

周辺小胞は、１次被覆した微細結晶の間に挿入された容量緩衝材として作用する 。その結晶及び微細結晶薬剤は、しばしば、リン脂質よりも密度が大きく、また 、このリン脂質は、水よりも密度が大きい。このため、それらは、重力の影響下 において沈殿する傾向にあり、且つ、他の２種類の成分よりもより強い長距離相 互作用（ファン・デル・ワールス引力）を受ける。

２次被覆は、微細結晶性薬剤の核の最短接近距離を増大させ、それにより、ファ ン・デル・ワールス引力を減少させる。恐らく、２次被覆の推進力の一部は、１ 次被覆した微細結晶とリン脂質小胞との間のファン・デル・ワールス引力である と思われる。リン脂質（特にレシチンを指す）は、１次及び２次被覆用として理 想的である。その理由は、それらが強力に水和されており、且つ、完全に証明さ れている短距離の反発的相互作用に携わっているためであり、リン脂質はこの相 互作用により凝集及び融合に対して極度に耐性である。

周辺リン脂質が２０％（ｗ／ｖ）で存在する場合、調製物の水性容量の大半がリ ン脂質膜内に封入されている。これは、長期保存中のＷＲ製貨物内の薬剤の再結 晶化に対する位相学的な障壁として働く。再形成された結晶物は、小胞の直径又 はそれぞれの間の距離よりも大きくなることは出来ず、この両方ともを小さい価 に保つことが出来る。

（ｃ）製剤の物理的特性 超音波処理は、５％（ｗ／ｖ）又はそれを下回る濃度での薬剤、及び、５％又は それを超える濃度の膜形成性脂質を用いて、最も都合よく行うことが出来る。こ の結果、主にサブミクロン寸法である、被覆処理された微細結晶の注射針通過性 （ｓｙｒｉｎｇａｂｌｅ）懸濁液を生じ、その粒子はブラウン運動を示す（実施 例２．３及び１１）。１〜２日の期間を過ぎると、微細結晶は沈殿し、薬剤濃度 が２０〜４０％（ｗ／ｖ）である明瞭な区域を生じる。最終の濃度及び容量は、 薬剤の選択及び周辺リン脂質の濃度に依存する。

大半の調製物においては、数か月の期間の後でも、この底辺区域を反転させて再 懸濁させることが出来、均質で且つ注射針通過性の懸濁液を生じる。そうでない 場合の調製物については、周辺リン脂質濃度を増大させることにより再懸濁性が 獲得された。

調製物を濃縮する手段とじて緩和な沈降処理を使用すること力咄来る。１〜２日 後に沈降周辺の上部の容積を除去すると、薬剤が２０〜４０％（ｗ／Ｖ）である 調製物を生じる。長期保存でも、これ以上の沈殿を生じることはない。

調製物は、数箇月もの間、均質であり、注射針通過性であり、且つ、医薬的に許 容され得る（実施例参照ン。これらの調製物の顕微鏡的調査により、その薬剤の 、ミクロン及びサブミクロン直径の結晶が（それぞれ）分離していることが明ら かにされている。これらの、薬剤の微細結晶間の容積は、はぼ完全にリン脂質小 胞で充填されており、ニールレッド染色により可視化されている（実施例２．３ 及び１１参照）。

上記の濃縮形態においては、薬剤の微細結晶は限定されたブラウン運動のみを示 す。顕微鏡下では、それらが互いに関連しあって位置を変えているようには観察 されていない。それらは、それらの中心位置周辺で、振動するか又は一定の場所 で揺れている。この運動の部分的制限は、恐らく、調製物の長期安定性における 一つの重要な因子であるものと思われる。保存され且つａ縮されている調製物を 薬剤で飽和させた水に対して何千倍にも希釈した場合、微細結晶は、それらのミ クロン又はサブミクロンサイズを維持している。

（ｄ）投与の方法 上述したように、被覆した微細結晶の第１の効果はその注射可能性である。

適用出来る注射部位は任意の組織又は体腔である。それらは、静脈内（Ｉ　Ｖ＞ 、動脈内（ＩＡ）、筋肉内ＯＭ）、皮膚内、皮下（Ｓｕｂ−Ｑ）、関節内、脳を 髄、表皮、肋骨内、腹腔内、腫瘍内、膀胱内、病変内、結膜下等を含むが、これ らに限定はされない。更に、調製物のリン脂質被覆及びサブミクロンサイズは、 水性懸濁液として及び凍結乾燥製品としての両方での経口利用に都合がよいとい うことが判明するであろう。同様に、この水性懸濁液は、局所適用、すなわち、 目への点眼剤として都合がよいことが明らかになるであろう。この調製物は、水 性懸濁液又は凍結乾燥した粉末のいずれかの形態において、吸入経路により薬剤 を搬送することが出来る。この調製物は、飲料水中の薬剤の懸濁液により例証さ れているように、駆虫剤の投与のため及び高価値の生物適合性製品を作成するの に有効である（実施例１５〉。

（ｅ）放出の速度 薬剤の放出速度の最も重要な決定要因は注射部位の選択である。その製剤を静脈 注射する場合、それは微細結晶から極めて迅速に放出され得る。筋肉のような限 定された場所内へ製剤を大容量で注射する場合、放出の正味の速度は非常に緩慢 になり得る。静脈内の場合が１番速いと考えられている。

血液は、調製物を約１分以内に１，０００，０００倍に希釈することが出来る液 体媒体である。濃縮された、レシチン被覆した微細結晶調製物が血液中で希釈さ れる場合、他の方法で被覆された微細結晶、周辺脂質及び薬剤飽和した水から成 る環境内に初めに存在する個々の微細結晶は、血清蛋白質、血清リボ蛋白質及び 細胞性血液成分から成る環境へと移送される。

インビトロでの分画実験（実施例３及び１１）により、２次被覆は迅速に消失す ることが示唆されている。血液成分の全ては、好脂性分子に結合することが出来 、且つ、それは、微細結晶が溶解出来るのと同じ位迅速に起こる。

薬剤が充分水溶性である場合には、血液の水性部分内への溶解により薬剤は充分 に分散することが出来る。水溶解度が不充分である場合には、薬剤の溶解及び血 液成分への結合の連続的な過程がその薬剤を微細結晶から除去するように働く。

微細結晶の溶解速度は、その１次被覆の厚さ及び安定性、その薬剤の水溶解度、 及び、他の物理化学的変数に依存する。実施例１０は、そのＩＶ注射の１０秒以 内に、麻酔薬であるアルファキサロンが鎖結晶を脱離し且つ脳へ達することが出 来ることを示している。

１次被覆の厚さを変化させることにより、又は、調製物中に水不溶性油（ビタミ ンＥのような）を少量含ませることにより、ＩＶ投与後の放出速度を低減するこ とが出来る。

筋肉のような組織内への注射では、調製物は迅速な希釈を受けない。一般的にそ の調製物は、注射によって作成された容量の初期成分のままである。

これらは一般的には肉眼で見ることが出来、且つ、流動又は攪拌はほとんど存在 しない。比較的長い距離を必要とするため、この容積外への薬剤の拡散は緩慢で あり、更に、薬剤の低い水溶性により更に緩慢化される。

注射した容量が多くなればなるほど、そして、水溶解度が低ければ低いほど、薬 剤の除去速度もより緩慢となる（実施例７）。極端な場合には、放出過程が１４ 日以上を必要とすることがある。大きく且つ固定された容量及び薬剤濃度につい ては、２次被覆の小胞中に高張のグルコース又はカルボキシセルロースの取り込 ませることにより除去速度を増大させることが出来る。

これは、注射された調製物を固体化する傾向がある組織の機械的圧力に抵抗する （実施例５）。

ＩＭ注射は、薬剤の蓄積質を作成し、且つ、数日の期間以上の血液への持続的放 出を得るのに有効である。残りの系を巻き込むことなく、その薬剤を標的組織又 は病変内への直接的な注射は有効である。

（ｆ）調製方法 １、超音波処理 超音波処理プロセスは、キャビテーションの過程により、大きな分子構造体のサ イズを小さくする。このプロセスは、小さな泡を生じさせ、これにより、物質を 同時に高速度でプロベリングし、その結果、粉砕と剪断が生じる。

このプロセスは、薬剤の結晶及びリン脂質層を同時にサブミクロン断片へと破壊 する。リン脂質膜は、それらの水平面に対して平行及び直角の両方の方向で粉砕 され、それぞれ、微細結晶の疎水性表面を被覆することが出来、且つ、再会合し てそれを包被することが出来る表面を生成する。

従って、リン脂質濃度は、被覆及び包被の速度が破壊された結晶の再会合の速度 を越えるのに充分な濃度でなければならない。薬剤濃度が５％（ｗ／■）又はそ れを下回る場合で、且つ、リン脂質濃度が５％又はそれを上回る場合には、通常 、超音波処理は十分に作用することが観察されている。

リン脂質小胞の２次被覆の役割を以下に記載した。

薬剤及び脂質を別々に超音波処理して合体させる場合には、満足な被覆は行われ ない。事実、膜形成性リン脂質が存在しない場合には、短時間では薬剤をサブミ クロンにまで小さくすることはほとんど成功しない。既に調製して被覆しである 微細結晶に超音波処理した又は均質化した脂質を添加して、それらの周辺脂質の 含有量を増大又は修正することが出来る。上述したように、調製物を沈殿させる ことにより、それを２０％〜４０％（Ｗ／Ｖ）にまで濃縮することが出来る。

後に再構成することが出来る粉末を産生ずるための凍結乾燥化により産物を乾燥 形態にすることが出来る（実施例６）。これは、水性の環境において、封入され るべき薬剤の長期的な化学安定性が不十分である場合に有効である。

２、高度の圧力及び剪断を含む方法 高速度の均質化（ワーリング　ブレンダー等を用いる）により結晶薬剤及びリン 脂質を予備混合しておく。

「マイクロフルイダイゼーションＲ」　（マイクロフルイディックス社、ニュー トン、マサチューセッツ州’０２１６４）の方法により、更に進んだ微細化及び 被覆を行うことが出来る。この方法は、液体の相反する噴流の衝突により作成さ れる高度の剪断に依存している。装置については、ＭａｙｈｅＷ他により、ｒＢ ｉｏｃｈｅｍ、Ｂｉｏｐｈｙｓ、Ａｃｔａ　７７５巻、１６９−１７４ページ、 １９８４年」に記載されている。

また、別の方法は、「フレンチ　プレッシャー　セル」又は［フレンチプレスＪ 　（ＳＬＭ　インストルメンツ社、ウルバナ、イリノイ州）の方法による高圧均 質化である。この方法においては、拭料を細い穴を通して高圧力及び高度の剪断 にかけ、更に、常圧にまで迅速に減圧をかける。他の詳細は、上述の＃１中に記 載したのと同様である。

３、揮発性有機溶媒中における超音波処理又は高度の剪断薬剤がほとんど可溶で はない、揮発性で無極性の溶媒中（ジクロロジフルオロメタン又はジクロロテト ラフルオロエタン又はフレオン（例えば、トリクロロトリフルオロエタン）、実 施例６及び８、参照）に、結晶薬剤及び膜形成性脂質を懸濁することにより、微 細結晶を調製することが出来る。この懸濁液を上述した方法（＃１又は＃２）に よる超音波処理又は高速度剪断により微細化する。この溶媒を蒸発により除去す る。結果として生じた粉末は、後に行う水での再構成のために保存することが出 来るか、あるいは、直ぐに再構成することが出来る。

４、空気中での微細化 薬剤結晶は、高速度衝撃により空気中においてもサイズを小さくすることが出来 る。次に、レシチンを含む揮発性溶媒中のリン脂質又はグリセロール脂質の溶液 で上記の微細化した結晶を濡らし、その溶媒を揮発により除去することにより被 覆することが出来る。粉末化した生成物は水に懸濁させるこ″　とが出来る。他 に、レシチンを溶解している水混和性の液体により、微細化した結晶を湿潤化さ せて、更に、水性媒体中に迅速に導入することが出来る。

５、インフライト　（ｉ　ｎ　ｆ　ｌ　ｉｇｈｔ）結晶化揮発性溶媒中の脂質と 薬剤との溶液は噴霧することが出来、滞空している間に揮発により溶媒が除去さ れる。この微細結晶を回収し、更に、平滑な表面上で乾燥させる。この微細結晶 は、後の再構成のために粉末化した形態で保存するか、あるいは、直ちに再構成 することが出来る。

６、溶媒希釈 水混和性の有機溶媒（例えば、エタノール）を使用して脂質と水不溶性薬剤との 溶液を作成する。この溶液を高度の攪拌又は超音波処理下で水性媒体中に速やか に添加する。上記の溶媒は水に溶解し、その結果、脂質で被覆した微細結晶形態 の薬剤が生成する。水に溶解した有機溶媒は、被覆しである微細結晶の濾過又は 沈降化、及び、上溝の除去により、完全に除去することが出来る。

（ｇ）被覆するべき薬剤の選択 ３７℃の温度において結晶又は固体状態である限り、実質的に水不溶性の任意の 薬剤を使用することが出来る。一般的には、この薬剤は、生理学的ｐＨ（６，５ 〜７．４）において５ｍｇ／ｍ１未満の水溶解度を有する。希望する貯蔵期間中 に肉眼で見える結晶へ再編制する傾向が最小限であることが実験により示される 場合には、上記の水溶解度より高い水溶解度を有する薬剤の使用も妨げられない 。一般的に、薬剤の少なくとも８０％が微細結晶形態であるような、薬剤の水溶 解度の４倍を上回る総薬剤濃度を選択することが好ましい。この選択により、被 覆した微細結晶に関連する高荷重及び持続放出特性の点で有利になる。最終的に は、薬剤は本質的には非刺激性であることが好ましい。また、薬剤は、湿潤して いる環境において、化学的に安定であることが好ましい。そうでなければ、凍結 乾燥化した形態を産生ずることが必要になる。

最も常習的な例は、水不溶性でありながら、中から良の程度の油溶性を有する薬 剤である。しかしながら、油溶性それ自体は、リン脂質被覆した微細結晶内への 取り込みには必要ではない。堅固な結晶構造、つまりは高し）融点を有する多く の薬剤が特に水溶性又は油溶性であると１／）うわけて番よなし１゜これらの薬 剤もまた、リン脂質被覆した微細結晶製剤の利益を享受することカイ出来る。同 様に、薬剤にとっては、微細結晶系体内へ取り込まれるため（こ脱荷電されてい る必要はない。薬剤の結晶形態の水溶性が低し１ことのみ力τり・要なのである 。

（ｈ）水溶性薬剤の水不溶化 本質的に水溶性である薬剤を複合化により水不溶性にすること力（出来るとすれ ば、本発明においてその薬剤を使用すること力咄来る。例え番！１作用の持続期 間を５倍に延長するため、局所麻酔剤であるテトラカインの不溶性のヨウ化水素 酸（ＨＩ）塩を使用する（実施例１２）。

薬剤が生理学的ｐＨにおいて荷電されてし）る場合に（よ、Ｌｌｆｌ、ｉｆ、そ の薬剤はより好脂性であるか、又は、構造中に固定化されてしする対イオンで置 換することにより不溶性にすることが出来る。

陽性に荷電している薬剤の溶解性をより低くすること１こつν）ての例（よ、２ −ナフチレンスルフォネート　（ナブシレート）、グルコネート、１．１’　メ チレンビス（２−ヒドロキシ−３−ナフタレン）カルボキシレートくノ（モエー ト）、トリルスルフォネート（トシレート）、メタンスルフォネート（メルシレ ート）、グルコヘプタノエート　（グリセロ−ル）、ビタルタレート、ポリグル タメート、スクシネート、アセテート、又（よ、ベヘネート（蝋質状の脂肪酸の 陰イオン形態）との複合化を含む。脂肪酸の陰イオンを選択する場合には、ミセ ル化への傾向が最小になるように、短し１長さの鎖又（よ非常に長い鎖を有する 分子種を選択するのがよい。幾つかの場合においては、臭素、ヨウ素、リン酸、 又は、硝酸での置換は、充分に薬剤の可溶性をより低くするものである。

陰性に荷電している薬剤の水溶性をより低いものにすることについての例は、カ ルシウム、マグネシウム又はそれらの１：１の脂肪酸塩、及び、ジベンジルエチ レンジアミン（ベンザチン）、Ｎ、Ｎ’（ジヒドロアビエチル）エチレンジアミ ン（ヒドラバミン）を含む様々なアミン類、又は、ポリリシンのようなポリマー 類との複合化を含む。これらの対イオンの選択は、主には経験に基づいて行われ 、由来する結晶の安定性及び水とのそれらの適合性を第１の基準としている。

希釈又は注射後の薬剤の放出は、薬剤とその対イオンの両方の、荷電されたもの と荷電されていないものの両方の形態の除去を伴い得るため、これらの系は、動 態学の複雑さと多様性の両方を提供する。これらの２元塩系の数々のものから作 成されるリン脂質被覆した微細結晶のインビトロにおける作用の充分な研究及び 最も将来性のある例の選択により、希望するインビボでの薬動態を近似すること が出来る。

また、幾つかの応用例においては、イオン化を抑制し、更にこれにより薬剤の溶 解度を低減させるため、より極端なｐＨ（４，０〜６．４又は７．５〜１０．０ ）で微細結晶を調製することが可能である。各々の特有な場合において許容され る極端なｐＨ値は、薬剤の濃度、薬剤が保持している酸又は塩基等個物の数、薬 剤の溶解速度、及び、注射した分画のサイズ、及び、（貯蔵期間の点では）膜形 成用脂質の安定性により決められる。

（ｉ）被覆のための膜形成性脂質の選択第１の必要事項は、被覆用の脂質が膜形 成性であることである。これは。

過剰の水の存在下において、リン脂質の小胞又はリボゾームについて完全に証明 されている種類の２重層栂遺を形成する全ての脂質により満たされる。

この必要事項は、脂肪酸、洗剤、非イオン性界面活性剤（例えば、ポリエチレン グリコール）、又は、トリグリセリド類（植物油、トリステアリン、脂肪）によ っては満たされない。

第２の必要事項は、その脂質はミセル状構造へ変換する傾向を有さないことであ る。これにより、短い長さの鎖のく６以下）のリン脂質又はリンレシチン（単一 の脂肪酸銀を含む）が除外される。

膜形窓における被覆用物質の高い安定性は、薬剤物質が肉眼的結晶へ再編成する のを妨げるのに必要である。これは、非イオン性界面活性剤が、本発明の意図す る目的には、良く作用しないことの一つの理由である。

膜形成性脂質の有用な例を以下（種類Ａ−Ｇ）に記載する。

種類Ａ：以下に記載のものを含む１次リン脂質（純粋な形態において利用出来る ） （１）　レシチン（フォスファチジルコリン）（２）スフィンゴミエリン （３）合成の両性イオン性リン脂質又はリン脂質アナログ上記の種類には、水を 添加した場合に自発的に膜を形成する全てのリン脂質が含まれる。これらのリン 脂質を純粋な形態で使用して被覆した微細結晶を産生ずることが出来る。入手が 容易で安価なため、全てのリン脂質の中でレシチンが最も有効な例である。

種類Ｂ：カルシウム依存的な凝集が可能なリン脂質上記のリン脂質は以下に記載 のものを含む。

（１）フオスファチジン酸 （２）フオスファチジルセリン （３）フオスファチジルイノシトール （４）カルシオリビン（ジフオスファチジルグリセロール）（５）フオスファチ ジルグリセロール 上記の脂質は、中性のｐＨにおいて陰性の荷電を保持している。好ましくは、こ れらのシン脂質をレシチンと混合して、粒子間の反発作用を行う陰性に荷電した 表面を取得することが出来る。２ｍＭのカルシウムを含む媒体中（血液又は間質 組織のようなもの）に導入する場合、これらのリン脂質を含む膜は、細胞膜との より高い反応性と高い凝集化を示すことが予想される。

これは組織内で注射した微細結晶を凝集させるのに有効であり、それにより一層 緩慢な放出速度を生じることが出来る。この種類のものの有効性は、レシチンと 比較してのこれらのリン脂質の高い費用によって制限されている。

種類Ｃ：フオスファチジルエタノールアミン上記のアミンは、カルシウム非依存 的な方法で凝集化を促進する。それを純粋な形態で使用して、ｐＨ９において微 細結晶を被覆することが出来る。

血液又は組織内への注射時のように、Ｈを７にした場合、その膜は活性となり、 粒子を凝集させ且つ細胞膜へ結合させる。これにより、放出速度を緩慢にすると いう有効な特性を有することが出来る。

種類Ｄ：コレステロール及びステロイド類これらは、単一の被覆用物質して使用 することが出来ない。これらは、純粋な状態においては膜を形成しない。これら をレシチン又は他の被覆用物質に添加して、その表面活性、被覆の微細粘性（ｍ ｉｃｒｏｖｉｓｃｏｓｉｔｙ）又は膨張性を変えることが出来る。ステロイドホ ルモン（エストロゲン、アンドロゲン、ミネラロ又はグルココルチコイド）を用 いて、微細結晶に対する局所的組織反応に影響を与え、並びに、それらの物理的 沈着に影響を与えることが出来る。

種類Ｅ：半脂肪性の分子 半脂肪性の分子をリン脂質又はグリセロール脂質の膜内へ取す込マせ、且つ、そ の微細小滴の表面活性を変化させることが出来る。この種類に含まれる分子には 以下に記載のものがある。

（１）　１Ｍ、２Ｍ、３Ｍ、又は４Ｉ＆の置換が可能なステアリルアミン又は他 の長い鎖のアルキルアミン類 上記のアミン等は、微細結晶の被覆に陽性荷電を付与し、更に、細胞膜とそれら を一層反応性にする。塩酸ベンズアルコニウムは特に有効な芳香族物質の例であ り、その理由は、調製物中の微生物増殖に対する防腐剤としても機能するためで ある。

（２）脂肪酸類 脂肪酸類を低濃度（０，０２ｇ／ｇ　（リン脂質）未満）で取り込ませ、リン脂 質の充填度及び反応性を変えることが出来る。

種類Ｆ：表面特性を修正するための膜活性化剤、糖脂質及び糖蛋白質膜活性化試 薬の例は、表面活性化抗生物質である二スタチン、アンフォテリシンＢ及びグラ ミシジンを含む。これらは、リン脂質膜の表面に結合し、且つ、それらの透過性 を変化させることが知られている。

表面の反応性を修正する方法として糖脂質又は糖蛋白質を含むことが出来る。同 様に、抗体を膜構成成分に結合させて標的細胞又は組織との微細結晶の会合を指 図又は保持することが出来る。（糖脂質類、糖蛋白質類及び抗体を「生物学的物 質」として分類する。これらは、使眉前に、発熱性、抗原性等についてスクリー ニングする必要があり、更に、このような製剤についての規定認可を得る過程は より複雑である。）種類Ｇ、モノグリセリド類 モノグリセリド類はリン脂質ではないが、デカン体の存在下において、配向性の 単層及び２重層を形成することが出来るということが示されている（Ｂｅｎｚ他 、Ｂｉｏｃｈｅｍ、Ｂｉｏｐｈｙｓ、Ａｃｔａ３９４巻、３２３−３３４ページ 、１９７５年）。そのため、これらは微細結晶のための被覆に利用価値を有する であろう。これらの脂質の例は、以下に記載のものを含むが、これらに限定はさ れない。

（１）１−モノバルミトイル−（ラセミ）−グリセロール（所謂モノバルミチン ） （２）１−モノカブリロール−（ラセミ）−グリセロール（所謂モノカプリリン ） （３）ｌ−モノオレオイル−（ラセミ）−グリセロール（Ｃ１８：Ｌシス−９） 　（所謂モノオレイン） （４）１−モノステアリル−（ラセミ）−グリセロール（所謂モノステアリン） Ｕ）市販品として人手出来る膜形成性脂質レシチンの数々の形態が考えられる。

−例としては、提示しである実施例の全てにおいて卵のレシチン（シグマ　ケミ カル社）が使用されている。卵のレシチンは、その低い価格及び低い不飽和度の ために好ましいものである。

レシチンはウシの心臓からも取得することが出来る。ダイスのレシチンは高価で はないが、より高い不飽和度を有する。４から１９個の炭素までの、鎖の長さが 異なるレシチンの様々な合成変種を入手することが出来る（スペルコ社）。

生物学的範囲（１０〜１８）における鎖の長さを有するレシチンは、様々な応用 に有効であると考えられる。不飽和のレシチン（ジオレオイル、シリルオイル、 ベーターオレオイル、アルファーパルミト　ベーターバルミトイル；アルファー バルミトイル　ベーターパルミトイル及びアルファーオレオイル　ベーターバル ミトイル）もやはり有効である。ジアラキドニルレシチン（高度に不飽和であり 、且つ、プロスタグランジンの前駆体である）もやはり有効である。

フォスファチジン酸は、卵から又は合成化合物（シミリストイル、ジパルミトイ ル又はジステアロイル、カルビオケム社）として入手出来る。ウシのフオスファ チジルセリンが人手出来る（スベルコ社又はカルビオケム社）。

フオスファチジルイノシトールは、植物（スペルコ社）又はウシ（カルビオケム 社）材料から入手出来る。カルシオリピンは、ウシ又は細菌性材料から入手出来 る（スベルコ奸）。フォスファチジルグリセロールは、細菌性材料（スベルコ社 ）から又は合成化合物（シミリストイル又はジパルミトイル、カルビオケム社） として人手出来る。

フォスファチジルエタノールアミンは、卵、細菌性物質、ウシ、又は、ブラスマ ローゲン（スベルコ社）、あるいは、合成化合物であるジオクタデカノイル及び ジオレオイルのアナログ、及び、ジヘキサデシル、ジラウリル、シミリストイル 及びジパルミトイル（スペルコ社及びカルビオケム社）として入手出来る。

モノグリセリドは、「シグマ　ケミカル　カンパニー社」から入手出来る（例え ば、１−モノバルミトイル−（ラセミ）−グリセロール、モノバルミチン；１− モノカブリロール−（ラセミ）−グリセロール、モノカブリリン；１−モノオレ オイル−（ラセミ）−グリセロール（Ｃ１８：１、シス−９）、モノオレイン； １−モノステアリル−（ラセミ）−グリセロール、モノステアリン）。

（ｋ）他の成分 他の成分を微細結晶に添加してその安定性を増大させるか、あるいは、その放出 速度を修正すること力咄来る。例えば、医薬的に許容されう得る油を低重量濃度 添加して、微細結晶とリン脂質又はグリセロール脂質の被覆との間の接触を促進 することが出来る。その油によって結晶性薬剤が溶解せず且つ膜形成性脂質によ る被覆が破壊されないように、油の種類及びその重量濃度を選択する必要がある 。これらの関連性は実験により決定することが出来る。

有効な油は、ビタミンＥ、イソプロピルミリステート、ベンジルベンゾエート、 オレイルアルコール、鉱油、スクアレン及び植物油を含むが、これらに限定はさ れない。実施例６は、エリスロマイシンのレシチン被覆した微細結晶性の調製物 中におけるビタミンＥの取り込みによりその薬剤の溶解速度が低減され、それに より、薬剤による組織刺激が低減されることの証拠を示している。

３７℃において固体である、リン脂質適合性で非抗原性の分子により、微細結晶 を「前被覆」することも可能である。その例は、パラフィン、トリステアリン、 エチルオレエート、セトステアリルアルコール、セチルアルコール、ミリスチル アルコール、ステアリルアルコール及びベトラタムを含む。

例えば、それらの融点以上例１度における超音波処理又は剪断により、１次被覆 内へ上記の物質を取り込むことが出来る。これらの物質が固体化する点に温度を 戻ときのこの過程の間にレシチンを添加することにより安定化を行うことが出来 る。荷重を引き下げないような、つまりは、薬剤の溶解速度を過度に妨げないよ うな低重ｆＩｌｉ：濃度（１０％以下）を使用することが望ましい。

また、生物分解の可能性が更に進んだ制限を課すことがあってよい。実施例１３ は、微粒子形態のパラフィンのレシチン適合性を記載している。

（１）懸濁用媒体 最終調製品において、連続相は一般的には水であり、それは、生理学的に許容可 能なｐＨに緩衝化されており且つ等浸透性濃度の塩化ナトリウム又はグルコース を含む。高濃度における大容量の微細結晶の筋内内注射を含むある種の適用例に おいては、媒体の容量オスモル鼻度（例えば、グルコース濃度）を上昇させて、 筋肉内における物質の拡散を促進することは有効である。

上述したように、これにより、筋肉内注射後の密集化の過程を阻止することが出 来る。差支えない場合には、カルボキシセルロースのような粘性増大用試薬は、 筋肉内注射の後の薬の動態を変化させ、且つ、保存上での微細結晶の沈降速度を 減らすのに有効である。

アルベンダゾールスルフオキシドが水の存在下においては充分な長期安定性を示 さない、ある種の適用例においては、実施例７におけるように、水を極性溶媒に 変えることが有効である（実施例５も参照せよ）。

使用することが出来る非水性の極性溶媒は、以下に記載のものを含むが、それら に限定されることはない。

（１）グリセリン（誘を率４２．５を有する水混和性液体）（２）ポリエチレン グリコール（誘電率３２を有する水混和性液体）。

上記の媒体中で被覆した微細結晶を作成することが出来、あるいは、これらの媒 体内へ沈降させることが出来る。第１の必要条件は、リン脂質又は被覆用物質の 実質的な部分がこの溶媒中で膜形窓をとっていることである。同様に重要な必要 条件は、結晶物質はそれが再結晶する溶媒中に充分に溶解することが出来ないこ とである。

（ｍ）防腐剤 油溶性の防腐剤は、１次相すなわち被覆相中にこの過程に添加することが出来る 。これらは、塩化ベンズアルコニウム、プロビルバラバム、ブチルパラベン及び クロロブタノールを含むがこれらに限定はされない。防腐剤として、仕上げ済み の製品に添加出来る水溶性及び油溶性試薬が数多く存在し、それらは、ベンジル アルコール、フェノール、安息香酸ナトリウム、ＥＤＴＡ等を含む。

（ｎ）任意選択の凍結乾燥化及び再構成水性の微細結晶調製物を凍結乾燥化して 、水で再構成出来る乾燥産物を得ることが出来る（実施例６）。これ１も水性の 環境において長期の安定性を有さない薬剤には特に有効である。また、その微細 結晶薬剤が実質的に可溶化しない揮発性有機溶媒内における超音波処理又はＷ断 過程を行い、溶媒を揮発させることにより乾燥状態の被覆を施した微細結晶を調 製することが出来る（実施例８）。これらの方法により、無水状態のリン脂質の 層に囲まれた微細結晶が生じる。このような形態は、経口投与、あるいは、水で 滓構成した後の注射に適している。

（ｏ）最終製品のデザイン 本明細書中に提供される指示に従う当業者は、以下の項目（１）〜（７）を実験 的に決定するのに何ら支障を来たすことがないであろう。

（１）最も都合の良い調製法 超音波処理、高圧力及び剪断、有機溶媒の関わる方法、空気中での衝撃、インフ ライト結晶化、及び、溶媒希釈の間の比較（２）最も有利な薬剤形態 中性薬剤の結晶、荷電している薬剤の結晶、及び、薬剤のより複雑な固体形態の 間の比較 （３）最適の膜形成性脂質 膜の反応性及び安定性、血液及び組織適合性、並びに、価格に基づく（４）以下 の項目を含む製造の至適条件薬剤と脂質との投入比率；修正用試薬としての少量 の油又は蝋質の混合；超音波処理、剪断等の期間；サイズ選択の方法としての沈 降化の使用；単一層又は多重層形態内へのより多くの周辺脂質の添加；浸透性又 は粘度に影響を与える試薬の添加。

（５）至適粒子サイズ 上記のサイズは、供給される出力、処理する期間、薬剤及びリン脂質の濃度によ り、ある程度まで調整することが出来る。更に、上記のサイズは、沈降速度によ り、５０％ｍと１０μｍとの間で選択すること力咄来る。

（６）希望する貯蔵期間及び薬動態を達成するための最適な組成物上記の組成物 は、注射後の、薬動態についての上述の因子の効果の研究を含む。粒子サイズ、 １次及び２次リン脂質の含有量、及び、注射後の組織内への密集化を回避するた めの添加物が特に重要である。

（７）最も有利な投与法 注射（ＩＶ、ＩＡ、ＩＭ、等）、経口、局所投与、吸入法等を含む。

（ｐ）重量及び尺度 本明細書中に示されている全ての割合及びパーセント率は、重量（Ｗ／Ｗ）又は 重量／容量（ｗ　／　ｖ　）パーセント率によるものであり、分母における重量 又は容量は、その系の総重量又は総容量を示す。

水溶液中の水溶性成分（例えば、グルコース）の濃度は、その系における水の容 量に関するミリモル濃度（ｍＭ＝リットル当たりのミリモル）で示されている。

全ての温度は摂氏温度において示しである。

直径又は寸法は、ミリメーター（ｍｍ＝１０−３メーター）、ミクロメーター（ 、ｃ＋ｍ＝１Ｏ”メーター）、ナノメーター（ｎｍ＝１０−９メーター）、又は 、オングストローム単位（＝Ｏ，ｌｎｍ）において示されている。

本発明の組成物は、前述の物質を含むか、実質的にそれらから成っているか、あ るいは、それらから成っていてもよく、且つ、本発明における過程又は方法が、 そのような物質を用いる前述の段階を含むか、実質的にそれらがらなっているか 、あるいは、それらがら成っていてよい。

発明を実施するための最良の形態 実施例１ オキシテトラサイクリン（ＯＴＣ）のレシチン被覆した微細結晶を以下に記載の 方法において超音波処理により調製した。

１５０ｍ１のガラスビーカー内へ、４．４ｇのオキシテトラサイクリンニ水化物 （シグマ社、０−５７５０）と１６．０ｇの卵のレシチン（卵からのし一アルフ ァーフォスファチジルコリン、タイプＸＶ−Ｅ、シグマ社、ｐ−９６７１）　を 添加し、ガラスの攪拌棒を使用して大まかに混合した。次に、ｐＨを７．４に合 わせた、３００ｍＭのグルコースと１０ｍＭのトリスの水溶液を添加して、８０ ｍ１の最終容量にした。

「ソニファイアーＲセル　ディスラブター、モデル　Ｗ１８５ＤＪ　（ヒート　 システム　アンド　ウルトラソエックス社、プレインビュー、ニューヨーク州） の１．０ｃｍ直径のプローブをその液体中に浸し、更に、出力段階１０　（通常 では１００〜１５０ワツト）で総計６０分間、混合物を超音波処理した。加熱冷 却装置及び超音波処理を時々中断することにより、混合物の温度を調節し、且つ 、６０℃を越えないようにした。ＭＣＩの添加により５．０のｐＨを維持した。

超音波処理の結果として、不透明な黄みを帯びた薄茶色の懸濁液を生じ、それに 覆いを被せ、更に、２４時間沈殿させた。底の部分の１１ｍｌ中には、ＯＴＣの 目に見える沈殿物が濃度４０％（Ｗ／Ｖ）で含まれていた。上溝はリン脂質小胞 を含んでいた。底の部分の２２ｍ１を回収し、更に、緩やかに震盪して沈殿物を 再懸濁させた。それは、レシチン被覆したＯＴＣの微細結晶を含んでいた。それ は幾分粘性があるが、注射針通過性の液体であった。

蛍光光度分析及び高速液体クロマトグラフィー（）（ＰＬＣ）により、上部の相 は、殆どオキシテトラサイクリンを含んでいないことが示された。底の部分の２ ２ｍ１として採取した底部相は、添加したオキシテトラサイクリンの９８％以上 を含んでいた。それは、ＯＴＣが２０％（Ｗ／Ｖ）であり、且つ、レシチンが２ ０％（Ｗ／Ｖ）であった。

分液を両方の相から採取し、それをＯＴＣで飽和した緩衝液で希釈し、更に、「 クルター　Ｎ４−ＭＤ　サブミクロン　パーティクル　アナライザーＪ（Ｃｏｕ ｌｔｅｒ　Ｎ４−ＭＤ　Ｓｕｂｍｉｃｒｏｎ　Ｐａｒｔｉｃｌｅ’Ａｎａｌｙｚ ｅｒ）を用いて、直径（±ＳＤ）を分析した。

粒子サイズについて分析すると、上部相は、３０．５±８ｎｍ（７７％）の直径 であり、３，０００ｎｍを上回る粒子は、それぞれ、単層及び多重層のリン脂質 小胞に相当することが判明した。この上部相を棄却した。

レシチン被覆されたＯＴＣ微細結晶分画は、以下に記載する重量平均粒子サイズ 分布を有していた。

９８０±４６０　（ＳＤ）ｎｍ、５９％；２，８８０±４００　（ＳＤ）ｎｍ。

４１％。

逆染仏法を用いての電子顕微鏡による、その調製物の分析により、上述の知見が 証明された。

上述したように数々の調製物を作成し、更に、これらをゴム栓をしたガラスアン プル及びガラスビン内へ詰めた。数週間の期間を越える保存で、幾分かの沈殿が 観察されたが、この沈殿物は、３回反転させると均質化させることが出来た。こ の調製物は、サイズ分布、ＯＴＣ濃度、化学的統合性、及び注射針通過性（２０ ゲージ又はそれより細いもの）を含む性質を９箇月間以上保持していた。

以下にレシチン被覆の重要性を証明した。

レシチン不在の状態で、４．４ｇのＯＴＣと７５．６ｍｌのグルコースとの溶液 を上述したように６０分間超音波処理した。

以下に記載する特徴を有するきめの荒い懸濁液が取得された。

（ａ）即時の試料採取及びＯＴＣ飽和水内での１，０００倍希釈により、裸眼で 見ることが出来る粒子種を生じた。「クルター　サブミクロン　パーティクル　 アナライザー」による分析では、この分子種は「範囲外Ｊ（３ｐｍを超える）で あることが示された。この分析によっては、直径３ｐｍ未満の粒子はいずれも示 されなかった。

（ｂ）超音波処理後１０分以内に全てのＯＴＣは底に沈殿した。この底部相は流 動性ではなく、且つ、注射針通過性でもなかった。沈殿後１時間以内に、それは 、震盪では再懸濁できない固体の塊となった。同様に、超音波処理したＯＴＣに 対し、超音波処理中止後直ちに、予め形成しであるリン脂質小胞を添加すること によっても、この調製物を安定化することは出来なかった。このため、レシチン （又は、他の膜形成性脂質）との超音波処理が、調製法における決定的な段階で あることが示された。

実施例２ 以下に記載の変更を加えて実施例１の調製をａり返した。

調製物を５．０ｍｌの総容量に計り分け、微小チップの超音波プローブを使用し 、更に、０．１５ｍｇのニールレッドを脂質と同時に添加した。この染料はリン 脂質に結合し、且つ、レシチンについての蛍光標識として働いた。

２０％（Ｗ　／　Ｖ　）の調製物の小滴をガラススライド上に広げ、更に、蛍光 顕微鏡（ライフ　ウエツラー　ダイアルックス　２０）を用い、高出力下に観察 した。

図２は、局所的な視野の白黒での図である。白色は、強い蛍光を示す。紫外線励 起を用いると、○ＴＣ粒子はそれらの強い黄緑色の蛍光により観察された。図２ の上の図は、ＯＴＣの蛍光像の描写を示している。

直径が約０．２〜約３ｐｍまでの範囲に亘る個別の粒子が観察された。この粒子 の大半は、１μｍ以下の直径であった（数平均）。この粒子は、明確な境界線を 有するが、拡散した黄緑色のハローに囲まれている。

調製物中のレシチンに関連したニールレッド像を示すために、同一の視野を近紫 外線での励起を用いて観察した（下段の図）。このニールレッド像は、レシチン が○ＴＣ粒子の周囲を囲んでいることを示している。ハローをなす赤色の蛍光は 、○ＴＣ微細結晶の境界を越えて０．　３〜３μｍにまで広がり、その粒子を囲 んでいた。

ＯＴＣとレシチンの両方が存在しない空の場所をスメア−の境界付近に位置する 全ての粒子の回りで簡単に識別することが出来る。時折、２つのＯＴＣ粒子がリ ン脂質の単一のハローを共有していることを示唆する形状を確認した。

試料中ではブラウン運動が観察された。ガラススライド上で沈殿した、より大き め（１１ｍを超える直径）の粒子はブラウン運動を示さないか、又は、かなり制 限された運動を示した。１μｍ以下の直径の粒子はブラウン運動を示し、より大 きい粒子の間を移動した。低濃度領域における観察により、ハローが相関する運 動をしなければ、どの粒子も約１／４の直径を上回る距離を移動することは出来 なかった。更に、粒子の直接的な衝突は全く観察されなかった。これらの観察は 、本発明の微細結晶の懸濁液の顕著な安定性を説明する。つまり、このレシチン は微細結晶を被覆して、結晶表面との接触のための疎水性表面、及び、水との接 触のための親水性表面の両方を供給する。

被覆された表面は、ニールレッド染色により明らかにされているように、膜形態 のレシチンの多数の届によって包被されている。この包被の安定性は、それぞれ の蛍光性シグナルにより明らかにされたように、微細結晶は常にレシチンのハロ ー内に留まっているという事実によって示される。外側のレシチン層は、被覆し た微細結晶が、充分融合出来る程近くに接近しないことを保証するものである。

レシチン被覆した微細結晶の溶解挙動は、大容量の蒸留水にその結晶を接触させ てマウントし、更に、カバースリップを被せることにより、蛍光顕微鏡下におい て観察された。より小さい粒子（約０．　２〜１．ＯＩｌｍ）は、水の流れに伴 って動いていた。ニールレッドの蛍光のハローは、蛍光を呈しているＯＴＣ粒子 と共に移動し、更に、２つの蛍光性シグナルの明度は、最初は、一定の比率のま まであった。その粒子が蒸留水中を移動すると、ＯＴＣシグナルは弱くなり、こ のことにより、微細結晶が溶解したことが示唆される。ニールレッド像のごく一 部の分画及び蛍光強度が消失し、このことにより、レシチン被覆は耐久的な構造 であることが示唆された。より強固にスライドに付着しているより大きめの粒子 の溶解挙動は、一般的には、幾分異なるものであった。流勢により、それらの脂 質の大部分の脱落を生じた。より大きめの微細結晶はその後ひびが入り、その各 かけらに二−ルレ・ノドのＡローの一部を付けたまま砕は散ってしまったことが 観察された。

また、「クルター　Ｎ４−ＭＤ　サブミクロン　パーティクル　サイザー」を用 いて解離挙動を研究した。実施例１に記載したように、ＯＴＣで飽和した等張の グルコース緩衝液で調製物を１，０００倍に希釈する場合、この調製物は安定で あり、更に、９８０±４６０ｎｍ及び２，８８０±４００ｎｍの粒子サイズが観 察された。

一方、蒸留水で１，０００倍に希釈した場合、調製物の迅速な変化力で観察され た。溶解が考えられたが、その理由は、ＯＴＣの最終濃度が、薬剤の水溶解度（ 約１ｍｇ／ｍｌ）よりも低い０．２ｍｇ／ｍｌになったためである。

溶解は観察されたものの、３μｍを上回る直径を有する幾つかの粒子の形成を伴 った。

実施例３ ニールレッドで処理した、レシチン被覆したオキシテトラサイクリンの微細結晶 を作成し、更に、その後の分画実験を行って、大直径（１，０〜１゜９μｍ）の 被覆した微細結晶についての１次と２次とのリン脂質被覆の間の関係を調べた◎ オキシテトラサイクリン（２，０ｇ）、レシチン（８，０ｇ）及びニールレッド （１，５ｇ）を４０ｍ１の等張グルコースに添加し、更に、３０分間超音波処理 を施した。この調製物を一晩沈殿させることにより、２０％（Ｗ／ｖ）ＯＴＣに まで濃縮した。この調製物の容量は１０ｍ１であった。ニールレッド濃度の蛍光 光度アッセイ、リン脂質分析（フェロチオシアン酸アンモニウム抽出による）、 及び、蛍光顕微鏡下における観察のために、小分液を採取した。その後、この調 製物を臨床用の遠毛１で中程度のスピードで１５分間遠心した。その結果、２． ０ｍｌの容量の目に見える沈殿を生じた。

上部相を分離し、更に、１つの分液を分析した（１次上清）。底部相は、最終容 量が１０ｍ１になるように等張グルコースを添加して再懸濁させた。この分液を 分析した（第１洗浄物）。これを繰り返し行って、総計５つの洗浄物を生じた。

この操作により、小さい（０，１〜０．３μｍ）直径の被覆されている微細結晶 及び弛く付着していたリン脂質小胞が除去された。これにより、大きい（１〜３ μｍ直径）被覆微細結晶を単離し、更に、それらのリン脂質／薬剤率を評価した 。

上記の観察により、より大きい結晶を繰り返し洗浄すると、それらに会合するレ シチンの大部分の分画が消失することが示された。会合する脂質の量は、第３〜 第５洗浄においては、１０８±８０μｇ／ｍｌ、すなわち、投入量（ニールレッ ド）の約０．４％に安定化する。この被覆の厚みは、ＯＴＣとレシチンのの密度 を等しいとして（約１．４ｇ／ｃｍ３）近似することによる容量の関連性から推 定することが出来る。ニールレッドのデーターから、その層の厚みは、１５オン グストロ一ム単位であると計算された。これは、伸張したレシチン単一層から推 定される価に近似している。リン脂質分析からの推定値はより低いものであるが （約３オングストローム単位）、実験的な不確定さが大きく、且つ、第３から第 ５の試料についての抽出効率が、１よりも著しく低かった可能性がある。包被層 が、遠心力により取り除かれる場合には、上述の方法により、包被層の厚みを小 さく見積ることがあり得る。

小さい（０，１〜０．３μｍ直径）微細結晶については、このニールレッドのハ ローは、ブラウン運動を受けながらも、その微細結晶に強固に会合しているのが 観察されている。これは、その包被層がかなり安定であることを示唆している。

実施例４ レシチン被覆したオキシテトラサイクリンの薬物動態を実験室用のラットで決定 した。

調製物は、主に、実施例１において記載したように作成した。それは２４％（Ｗ ／Ｖ）のＯＴＣ及び２，０％のレシチンを含んでいた。

試料（０，１ｍ１）を実験室用のラットの後ろ定向に深く差し込む筋肉内注射に より投与した。注射は、腓腹筋内へ（抹消から幹部へ）行った。

陽性対照として取り扱ったものは、ＩＭ注射可能なＯＴＣの市販試料（リカマイ シンＲ２００、ファイザー社）のＯ，１ｍｌの注射液であり、これは、両性のＯ ＴＣとして２００ｍｇ／ｍｌ　ｆ）ＯＴＣ塩基、４０％（ｗ／ｖ）の２−ピロリ ドン、５．０％（ｗ／ｖ）のポビドン、１．８％（ｗ／ｖ）の酸化マグネシウム 、０．２％（Ｗ／Ｖ）のホルムアルデヒドスルフオキシル酸ナトリウム、及び、 ｐＨを調製するのに必要なものとして、モノエタノールアミン又はＨＣＩから成 る。指示された時間に、中枢動脈血を採取し、その動物を層殺し、注射を施した 筋肉を解剖し、更に、肉眼的に観察し且つオキシテトラサイクリンの蛍光発色の ために紫外光下において観察した。この血液試料及び筋肉をエタノールで抽出し 、更に、オキシテトラサイクリン濃度を蛍光光度により測定した。

図３は、オキシテトラサイクリンは、レシチン被覆した微細結晶形態で注射する 場合、筋肉から緩慢に放出され、７日後の筋肉中に注射用量の約２０％が残存し ていることを示す。この放出は、実質的に市販のピロリドン溶液より緩慢である 。

図４は、４μｇ／ｍｌから１．５μｇ／ｍｌまでの血中レベルが、７日の期間中 保持されていることを示している。血中レベルが３日以内に０．５μｇ／ｍｌ又 はそれを下回る価に落ちてしまう市販の溶液と、これを比較することが出来る。

実施例５ 上述のように、レシチン被覆したオキシテトラサイクリン微細結晶の多数の調製 物を２０％（ｗ／ｖ）〜４４％（ｗ／ｖ）の濃度で調剤した。

本実施例は、２次被覆（周辺小胞）を最初の超音波処理段階の後に添加する方法 、及び、それが捕獲している水性容積内に高張グルコース及び粘度増大用試薬を 含ませる方法を示す。

２０ｇの卵のレシチン及び５ｇのＯＴＣ二水化物をビーカー内に入れ、更に、１ ２．５　（ｗ／ｙ）　グルコースの水溶液及び１０ｍＭのトリス緩衝液、ｐＨ７ ，４を添加して最終容量を１００ｍ１にした。超音波処理及びｐＨ調整は実施例 １と同様に行った。

４つの別々のバッチを−まとめにし、更に、ねじぶた式の容器に入れて、冷却下 で一晩保存した。その調製物が沈殿した後、上部８７．５％（３５０ｍｌ）を吸 い出し、懸濁液中のレシチン被覆したＯＴＣ微細結晶及び上部相（リン脂質）の ごく一部を残した。

分析により、下部の相は４０％（ｗ／’ｖ）のＯＴＣを含むことが示されたく沈 殿化によりＯＴＣの調製物を４４％（Ｗ／Ｖ）にまで濃縮すること力咄来た）。

周辺リン脂質／Ｊ％胞を個別に調製し、更に、濃縮したレシチン被覆した微細結 晶と混合した。１２．５％のグルコースと５％のカルボキシメチルセルロースの ４５ｍ１の水溶液に５ｇの卵のレシチン及びＯ，１ｇのプロピルパラベン（防腐 剤）を添加し、更に、その混合物を出力レベル８で１５分間超音波処理した。こ れにより、カルボキシメチルセルロース及び高張のグルコースを捕獲しているレ シチン小胞の、濃厚ではあるが注射針通過性の懸濁液を生じた。

調剤を完了させるため、４０％のＯＴＣレシチン被覆した微細結晶調製物の３３ ｍ１を先の周辺脂質調製物の３３ｍ１と混合した。この混合物を封をしたアンプ ル中で保存した。最終濃度は、２０％（ｗ／ｖ）ＯＴＣ，１５％（Ｗ／Ｖ）　レ シチン、０．１％（Ｗ／Ｖ）プロピルパラベンであり、水相は１２．５％（ｗ／ ｖ）のグルコースとｌｏｍＭのトリス、ｐＨ５，０から成る。

ラットにおけるＩＭ注射での実験により、高張のグルコース又はカルボキシメチ ルセルロース中で作成した、あるいは、これらの試薬の存在下において超音波処 理した周辺脂質と混合した調製物は、等張対照に比較して注射部位からのＯＴＣ の除去がより速やかに行われるということが示された。

約３００ボンドの３頭のウシに先の調製物（製剤Ｆと表記する）を９ｍｇ０ＴＣ ／Ｋｇ　（体重）の用量で筋肉内に注射した。

図５は、注射後の時間の関数としての平均（±ＳＥ）血中ＯＴＣ濃度を示してい る。時間に対する血中濃度の［！ＩＩＩ！は平であり、２時間と１２０時間（５ 日）との間の時間範囲においては０．５μｇ／ｍｌと１．０ｇｇ／ｍｌとの間の 濃度が保たれている。適度な高用量を用いれば、繰り返し注射を行う必要なくし て、その動物が５日以上の期間に亘り治療的な濃度を受容することが出来るとい う理由で、この種の持続的放出は有効であり得る。

図５の結果に類似した結果が、以下に示す組成物を使用して得られた。

表２ ２０％　３０％　均質化　２１％　水 ２０％　３０％　均質化　１２％　水 ０％の水 上記の試料の全ては、良好な注射針通過性及び物理的安定性を示した。これらの 薬物動態においては微妙な相異が存在していた。これらは、注射の際の痛みある いは注射部位の腫れを生じなかった。注射時の痛みがないということは特に市販 の溶液に勝る利点である。

実施例６ 極めて低い水溶解度を有する抗生物質であるエリスロマイシンも、やはり、実施 例４の方法に類似した方法で、レシチン被覆した微細不満として調剤した。

エリスロマイシンの水溶解度は、中性のｐＨにおいてはオキシテトラサイクリン よりも高い（２ｍｇ／ｍｌ対１．１ｍｇ／ｍｌ）。エリスロマイシンは、高濃度 では組織に対して刺激的である　（炎症を生じさせる）ことが知られている。こ れは、プロピレングリコール中に懸濁させたエリスロマイシン結晶の懸濁液（２ ０％ｗ　／　ｖ　）を筋肉内（ラット）に注射した実験により立証された。この 結果、注射時の広域に及ぶ痛みと損傷を生じたので、そのラットを直ちに層殺し なければならなかった。

以下に示す実施例は、レシチン被覆の使用により、どのように、薬剤に固有な刺 激が低減されるか〈実施例６も参照せよ）、及び、レシチン被覆した微細結晶に おけろ水不溶性の医薬的に許容可能な油の混合により、どのよう°に、その刺激 が更に低減され得るのかを説明する。

表３は、超音波処理により調製し、且つ、ラットにおけるＩＭ注射によりテスト を行った２種類の組成物についての結果を示す。

表３ 上記のデーターは、ビタミンＥを添加した場合、薬剤誘導性の損傷が容認出来る レベルにまで低減されることを示している。ビタミンＥのこの付加的な保護効果 は、エリスロマイシンの微細結晶とレシチン被覆との間に入り込み、エリスロマ イシンの溶解に対する付加的な緩衝物及び障壁を形成するというビタミンＥの能 力に寄与するものと思われる。これは、脂質の被覆を変更して、取り込まれる薬 剤の有効性を低減する一例である。

エリスロマイシンの製剤を用いた実験により、リン脂質被覆した微細結晶の凍結 乾燥形態が有効である条件も決定した。２０％のエリスロマイシン、１５％のレ シチンの調製物を凍結し更に凍結乾燥機器内に配置して粉末を産生じた。それを １２％（Ｗ／Ｖ）のグルコースと混合し且つ攪拌すると、注射針通過性で且つ物 理的に安定な懸濁液が生成された。

粒子サイズの測定では、平均直径が０．７ｐｍとなり、これは元の調製物と同一 であった。

別の実験により、水を使用しないで等価な凍結乾燥産物を産生ずることが出来る ことが示された。

フッ化炭素フレオン　ＴＦ　（）リクロロトリフルオロエタン）中で超音波処理 を行った。

超音波処理容器内へ、２ｇのエリスロマイシンを０．５ｇの卵のレシチンと共に ガラスの攪拌棒を使用して混ぜ入れた。次に、７．５ｍｌのフレオンＴＸをその 混合物に添加した。その後、この混合物を３０分間超音波処理り、、２５０ｍ１ のエルレンマイヤーフラスコ（三角フラスコ）内に移し入れ、更に、試料に窒素 ガスを吹き付けた。このフラスコを回転させて、底に乾燥用物質を一様に分散さ せた。残存している固体物質を［ラブコンコ　ベンチトップ　リオフィライザ− （モデル　７５０３４）Ｊ内で一晩乾燥させた。

結果として生じた物質は、黄みがかったペレットであり、これを、２０％のレシ チンと５．４％のグルコースを含む予め超音波処理しである水性の懸濁液から成 る希釈剤中に、穏やかに震盪させながら再懸濁させた。この再懸濁させたエリス ロマイシンは、０．７μｍ直径の粒子（クルター　Ｎ４　パーティクル　サイザ ー）形態におけるエリスロマイシンの２０％（Ｗ／Ｖ）の、注射針通過性であり 物理的に安定な懸濁液であった。

上記の方法は、追加的な実験により、抗生物質の溶解度が最小限となるフレオン のような溶媒中での超音波処理を必要とすることが示された。

エリスロマイシンが可溶性であるクロロフォルム又はエタノール中で超音波処理 を行って先の方法を繰り返した。どちらの場合においても、水性媒体に添加した 場合に、適切に再懸濁しない粉末が取得された。これにより、分散及び蒸発過程 中に薬剤が殆ど全く結晶状態のままでいるという必要条件が定義される。

実施例７ レシチン被覆した微細結晶形態も、やはり、駆虫剤の投与に有効であることが証 明されている。これらの適用例については、その薬剤がＩＭ注射部位からその系 内に２日以内に吸収されることが好ましい。

１０％（Ｗ／Ｖ）のアルベンダゾールの（８％）レシチン被覆した微細結晶は、 ４７０ｎｍ直径の粒子（クルター　Ｎ４　パーティクル　サイザー）を生じ、注 射針通過性であり、総体的には６０週間安定であることが判明している。

アルベンダゾール調製物を沈降化により２０％（Ｗ／Ｖ）にまで濃縮することが 出来た。実験室用のラットの後ろ器内へ２５μｌをＩＭ注射した際、以下に記載 する薬動態が結果として得られた。

表４ 庄肚後Ω挫肌　・　亀におをる゛　血吏」ｌ剋Ｌ４時間　２．０±０．７ｍｇ（ ８０％）　１１２．５土庄０μｇ／ｍ１８時間　２．４±０．５ｍｇ（９７％） 　６２．５±７７−８ｐ／ｍ１２４時間　１．７±０．５ｍｇ（６９％）　＜２ ０　ｐ　ｇ　／ｍ　１抽出前の筋肉の総体的な観察により、周囲の組織に対する 観察出来る程の障害を伴わない薬剤沈着が示された。

１０〜２０ｍ１の上記の調製物をヒツジ内へ筋肉内又は皮下注射したところ、優 れた許容度が見られた。７日目の剖検により、沈着物はその薬剤の主要分画に相 当し、周辺組織の刺激はごく僅かであったことが明らかにされた。

血液循環内への薬剤の緩慢な吸収は、恐らく、大容量の注射及びアルベンダゾー ルの低い水溶解度（０，１ｍｇ／ｍ１未満）の結果であると思われる。

こｔＬにｌ、アルベンダゾールについてのレシチン被覆した微細結晶注射形態の 治療的有効性が制限されるが、これは数週間に亘る緩慢な放出が望まれる他の低 い水溶解度の薬剤についての有効性を予示している。

上述の実験を、その薬剤のより高い水溶性を示すアナログであるアルベンダゾー ルスルフオキシドを用いて繰り返した。血中内へのより迅速な吸収が観察された 。アルベンダゾールスルフオキシドについての溶解度のデーターは、水において は０．４２ｍｇ／ｍｌ、プロピレングリコールにおいては１７．７ｍｇ／ｍｌ及 び、エタノールにおいては１７９．０ｍｇ／ｍＩである。調製物を以下の組成に 従って作成した。

（Ａ）５．４％の緩衝化した等張グルコース水溶液中に溶解している２０％のア ルベンダゾールスルフオキシド、２０％の卵のレシチン（Ｂ）プロピレングリコ ールに溶解している２０％のアルベンダゾールスルフオキシド、５％のレシチン 両方の調製物とも普通に沈殿して２０％（Ｗ／Ｖ）のアルベンダゾールスルフオ キシドを生じた。

両方の調製物の試料（０，１ｍ１）をラットにＩＭ注射し、更に、その筋肉を注 射後２８目の剖検において調査した。両方の調製物とも薬剤の沈着を殆ど示さず 、且つ、周辺の組織の刺激は全く示さなかった。

２つのＯＨ基を有し、且つ、誘電率が３２であるプロピレングリコールは、水に 代わることの出来る極性有機化合物の例である。

本事例において、薬剤の長期的化学安定性及びそれによる調製物の保存期間に対 して有利であることが証明された。

ウシでの実験により、プロピレングリコール中に溶解している１５％（Ｗ／Ｖ） のアルベンダゾールスルフオキシド、３．７５％（Ｗ／Ｖ）レシチンの微細結晶 調製物は特に有効であることが示された。ウシに対してこの調製物の約６ｍｌを 筋肉的注射した結果（用量＝６ｍｇ／Ｋｇ）　、痛みは生じなかったが２４時間 後に僅かに認めることが出来る腫れが生じた。７日後の剖検においては、薬剤の 残存は観察されなかったが微かな筋肉変色のみが観察された。

プロピレングリコールと水の７０／３０の混合物中に懸濁している、５％の卵の レシチン及び１５％（Ｗ／Ｖ）の微細結晶アルベンダゾールスルフオキシドを用 いて、同様の結果が得られている。これらの調製物の両方ともが、獣医学的医薬 品における調製物の有効性についての現行の基準を満たしている。

レシチンを添加していないこれらの調製物の対照実験により、動物の反応、総体 的観察及び組織検査により証明されたように、この薬剤は本質的には刺激性であ ることが示された。このことにより、レシチン被覆は、この薬剤に対する局所的 な反応を低減するのに役立つことが示された。

実施例８ ニトロスカネートは、水不溶性の駆虫剤化合物である。ＩＶ又はＩＭＭ射可能な 形態が望まれるところである。この化合物は、水又は高湿度の存在下においては 、化学的に安定ではない。また、アミン類と化学的に反応性である。

実施例６に記載したように、レシチン被覆した微細結晶をフレオン中で超音波処 理することにより作成し更に粉末形態で保存した。

水性賦形剤を用いた再構成により、注射可能な製品を得る。１２．５％のグルコ ース中に溶解しているＯ、１％のプロピルパラベンを含む２０％（Ｗ／Ｖ）の超 音波処理したレシチンの５．７倍容量でこの製品を再構成すると、ニトロスカネ ート微細結晶の１０％（Ｗ／Ｖ）懸濁液を産生じた。この懸濁液は、注射針通過 性であり更に数時間安定であった。粒子サイズは、顕微鏡的評価により推定した ところ、約５００ｎｍであった。

実施例９ 本実施例は、炎症反応の調節における非ステロイド性の抗炎症性薬剤の搬送系と して、どのように、リン脂質被覆した微細結晶を使用することが出来るかを示す 。この調製物を注射して筋肉内蓄積質を形成すること力咄来、あるいは、保護す る組織内へ注射することが出来る。

インドメサチンを一例として取り上げた。この分子は、４．５のｐＫａを有する カルボキシル酸であるが、ｐＨ７，０におけるその水性溶解度は０゜３７６ｍｇ ／’ｍｌに過ぎない。３％（Ｗ／Ｖ）の溶液を産生ずるためし；（よ、ｐＨを９ ，６にまで引き上げる必要がある。その水溶解度はごく僅かではあるものの、希 釈された状態におけるこの分子は、単に中程度の油／水分配係数を示す。５５／ １、オリーブ油／水；８５／１、ペンタノール／水。

レシチン被覆したインドメサチン微細結晶調製物は、以下に示す方法により作成 した。

インドメサチン（５００ｍｇ）をガラスの撹拌棒を用いて卵のレシチン（２゜０ ｇ）　と混合し、更に、３００ｍＭのグルコース、１０ｍＭのトリス（ｐＨ７， ４）の水溶液を添加して、最終容量を１０ｍ１にした。３０分間の超音波処理の 結果、被覆された微細結晶の均質な懸濁液を生じた。その調製物を沈降化により 濃縮させ、１１００ｎの平均粒子サイズ（クルター　Ｎ−４パーテイクル　サイ ザー）を有する、２０％（Ｗ／Ｖ）インドメサチンと２０％（ｗ／ｖ）　レシチ ンとの最終組成物を生じた。長期安定性は良好であった。更に沈殿化は進んだが 、その調製物を３回反転させて再懸濁させることが出来た。

先の調製物を抗炎症活性のための筋肉内蓄積質として、カラゲーニン［スギノリ ］誘導性の脚の水腫モデルを使用してラットにお１／）てテストした。工Ｍ注射 により後脚内に投与したインドメサチンの用量は５ｍｇであり、それは、その調 製物に対する０、０２５ｍ１、あるいは、ｐＨ１０，５での１５゜４％の溶液の ０．０３２５ｍ１にあたる。脚の水腫阻害の効能は、カラゲーニン攻撃の後、注 射後１．２４．４８及び７２時間目に評価した。時間及び処理群当たり３匹のラ ットを使用した。動物はテストの後層殺し、更に、剖検において筋肉の総体的観 察を行った。注射している間及び注射後の標準的な取り扱いによる、感知出来る 程の音声又は脚の退縮（行為）が見られなかったことにより立証されるように、 微細結晶調製物の注射は痛みを伴わないものであった。それとは対照的に、アル カリ性溶液の注射は、音声、注射した脚における退縮及びびっこを引く行為を結 果として生じたく１２匹の動物中１２匹）。

図６は、この２種類の形態についての、７２時間目のカラゲーニン攻撃の後の脚 の水腫（反対の脚）に対する平均パーセント　（±ＳＤ）予防率の経時変化を示 す。この図は、アルカリ性溶液は３８％のみの予防効果を生じるのに対して、微 細結晶調製物は８９％の予防効果を生じることを示す。２７時間目に攻撃したラ ットを層殺し、更に、注射した筋肉を剖検において調査した。インドメサチン微 細結晶を注射した筋肉は正常に見えた（３匹中３匹）。

それとは対照的に、アルカリ性溶液を注射をした３匹分の筋肉のうち２匹分のも のは、顕著な変色を伴う約３Ｘ６Ｘ１ｍｍ寸法の損傷領域を示した。

先の事柄は、最低限の刺激で高濃度の薬剤を組織内へ導入するというこの微細結 晶製剤の能力を説明している。これは、ＩＭ蓄蓄積性注射び炎症を起こしている 組織又は隙（例えば、関節腔液）内への注射の両方における抗炎症剤のためのベ ヒクルとしての有用性を示している。

実施例１０ 本実施例は、静脈内に注射された場合にリン脂質被覆した微細結晶類はそれらの 内容物の迅速な放出を行うことが出来るということを示す。水不溶性のステロイ ド麻酔剤であるアルファキサロンはこの機構によって搬送され、その静脈内注射 の１０秒以内に脳内で有効となる。

レシチン被覆したアルファキサロン微細結晶調製物は、３００ｍＭのグルコース 、ｌｏｍＭのトリス緩衝液、ｐＨ７，４の水溶液中での２種類の構成要素の同時 超音波処理により作成し、２％（Ｗ／Ｖ）のアルファキサロン、２％（Ｗ／Ｖ） の卵のレシチンを含む調製物を生じた。この微細結晶は５４８±７５ｎｍ直径で あった（クルター　Ｎ４　サブミクロン　パーティクルサイザー）。この調製物 は４か月より長い期間安定であった。それは分離して流動的な沈殿物を生じ、そ の沈殿物は反転すると混ざり合し）、更に、震盪によって完全に懸濁化した。

以下に示すデーターは、この調製物は静脈注射で迅速な全身麻酔を生じることが 示している。先の調製物（０，１１〜０．２５ｍ１）を２００〜２５０ｇのメス のラット　（ハーレン　５−Ｄ）内へ静脈注射（尾静脈）シて、１０．１５、又 は２０ｍｇ／Ｋｇの用量を投与した。１０ｍｇ／Ｋｇの用量では、１０匹ラット のうち６匹が意識不明になった。そのため、この用量をＥＣ５ｏの近似値とした 。１５ｍｇ／Ｋｇ及び２０ｍｇ／Ｋｇの用量では、全ての動物が意識不明になっ た（それぞれ、３／３及び１０／１０）。動物は、注射開始の１０秒以内に意識 不明となった。麻酔は、それ自体が１５秒を必要とする注射と同じくらい迅速で あった。

（ａ）麻酔からの回復に伴う特徴的な自発行動の変化、（ｂ）電気刺激での音声 化についての閾値、および、（Ｃ）腹部切開によりテストした外科的麻酔につい て、４種類の定性的および定量的データーを投与用量レベルの関数として記録し た。

以下、個別に（ａ）〜（Ｃ）について説明する。

（ａ）回復過程が開始したことの１次的兆候は、周期的な痙彎の開始であった。

２０ｍｇ／Ｋｇの用量投与については、この痙彎は３０．６±１６゜８分（±Ｓ Ｄ、ｎ＝１０）に生じた。この後、覚醒及び正向へのもがきが続き、覚醒は５０ ．６±２２．０分、正向反射が５７．９±２２．４分に生じた。動物の正常反応 及び自発的行動は８４．０±２５．５分に回復した。

（ｂ）皮膚内の電極を通じての電気的刺激に対する音声化についての閾値をテス トした（背中の皮膚内に差し込んだ針状の電極、３ｍｍ間隔；グラスＳ４４　ス テイミュレータ−及びステイミュラス　アイソレーション　ユニット；５０Ｈｚ における１、５ミリ秒幅の方形波；刺激期間＝２秒；振幅はｍＡｍｐ単位におい て測定）。音声化閾値が７．０ｍＡｍｐを超えるとは非常に深い麻酔を表現し、 ２．０ｍＡｍｐを超える範囲における閾値は中程度のレベルの麻酔を表現する。

麻酔をかけていないヒトの皮膚（脚における皮内挿入）においては、７ｍＡｍｐ の刺激は耐えられない痛みを引き起こし、更に、２．０ｍＡｍｐの刺激は鋭い痛 みを引き起こす。３種類全ての用量において、意識不明になった全てのラットは 、音声化について測定不可能な程高い閾値を示した。最大限である１５ｍＡｍｐ の刺激について音声化は全く得られなかった。

図７は、個々のラットについての典型的な結果を示す。

以下は、３種類の用量群（群島たり３匹のラット）を使用しての観察結果の要約 である。

測定不可能なほど高い（深い）麻酔は、１０及び１５ｍｇ／Ｋｇの用量で意識不 明になった動物全てについて少なくとも５分間は継続し、更に、２０ｍｇ／Ｋｇ 用量における動物全てについては少なくとも１５分間継続した。

高いレベルの麻酔の期間は、１０ｍｇ／Ｋｇについて２６．７±２０．８分、１ ５ｍｇ／Ｋｇについて３５．０±２０．０分、及び、２０ｍｇ／Ｋｇについて４ １．７±７．６分という時間で用量の関数として増加した。中程度のレベルの麻 酔について対応する時間は、３５±１５．０分、６６．７±１２゜６分、及び６ ３．３±１５．３分であった。テストしたラット全ての閾値は、注射後２時間以 内に基準線レベルに回復した。

（Ｃ）外科的麻酔は、ラットの別の群において、電気的閾値が＞１５ｍＡｍｐと なる最長時間にほぼ等しい時間でテストした。１０ｍｇ／Ｋｇ用量においては、 テストした３匹の動物のうち、ｔ＝１５分（注射後）におり）で腹腔を開く切開 に反応したものはいなかった。２０ｍｇ／Ｋｇ用量におし１ては、テストした３ 匹の動物のうち、ｔ＝４５分（注射後）において腹腔を開く切開に反応したもの はいなかった。（外科的麻酔の本証明の直後、動物は、ＣＱ２窒息により屠殺し た。） 上述の（ａ）〜（Ｃ）のデーターは、レシチン被覆したアルファキサロン微細結 晶は溶解することが出来、且つ、脳に浸入し、且つ、それらの静脈内注射後１０ 秒以内に全身麻酔を生じることを示している。また、このデーターは、この調製 物が誘発試薬かつ注射可能な全身麻酔剤としての有用性を有することも示してい る。

実施例１１ 本実施例においては、実施例１０のアルファキサロン調製物を構造及び解離挙動 に関して特徴付けている。

２％（Ｗ／Ｖ）の卵のレシチン及び０．０５％の二−ルレ・７ドと共に、２％（ ｗ／ｖ）の薬剤を、３００ｍＭのグルコース、１０ｍＭのトリス　（ｐＨ７，４ ）の媒体中で高出力で２０分間超音波処理することにより、２％（Ｗ／Ｖ）のア ルファキサロン調製物を作成した。

実施例３と同様に、脂質及びリン脂質に対し親和性を有する蛍光性染料であるニ ールレッドを使用して調製物中のレシチンを可視化させ且つ追跡した。

アルファキサロンで飽和した溶液内へ希釈した直後の「クルター　Ｎ４　サブミ クロン　パーティクル　アナライザー」での分析により、０．５２±０゜０３□ ｍの平均粒子直径が得られた。「ライフ　ウエツツラー　ダイアルックス　２０ 　フルオレッセント　マイクロスコープ」を利用して、スライド上で調製物を可 視化させることにより、このサイズの粒子を明らかにした。

その粒子は、その結晶の約１．２〜１．７倍の直径を有する赤色蛍光の鮮烈なハ ローに囲まれた球状又は円筒型の無色な複屈折性の結晶からなっていた。

この蛍光は結晶表面付近で強く、且つ、結晶表面からの距離の関数として徐々に よりぼやけていった。

１次対２次のレシチン被覆の比率を実施例３において記載した種類の分画実験に おいて決定した。臨床用（血液用）遠心機内で調製物を中程度め速度で１５分間 沈降させた。この上清を吸い出した。２．５ｍｌのエタノールを含む吸収管（キ ュベツト）に初期調製物の分液（１０μｌ）及びその上清を添加し、更に、ニー ルレッド蛍光（Ｆｌ）を蛍光光度計において測定した。

その沈殿物をグルコース／トリス媒体中に再懸濁させて初期容量を再構成させた が、ごく僅かな一部分は粒子サイズ決定機及び顕微鏡的観察での分析のために取 り出した。この手順を総計３回繰り返した。表５は、粒子サイズの変化を示す。

ｈ’ｓ　’　′−た　ルフ　ロン　の　能ニールレッ＋　１ 調翌宜　Ｌ［口工　―創ぢηＣ頴工　葺丑幻虹隼■初期　２９２．０　３１０． ０　０．５２±０．０３第１再懸濁　２４．０　１３．５　２．４　±０．７第 ２再懸濁　９．　５　５．　０　＞３．０第３再懸濁　６．　５　６．　５　＞ ３．０第１再懸濁切のＭ微鏡的ａ察により、その微細結晶はそれらのニールレッ ドのハローを保持しているが、しかし、そのハローはより薄く且つより弱くなっ ていたことが示された。また、微細結晶は、約２．５ｐｍ直径の凝塊中に固まっ ていた。ニールレッドの薄層は、その凝塊中の微細結晶間に見ることが出来た。

第２及び第３の再懸濁物の観察により、更により大きい凝塊（初期調製物の粒子 の約８倍の直径のもの）が明らかにされた。この凝塊は微かなピンク色の蛍光を 示した。

表５における蛍光データーは、調製物中のレシチンの９８％が、洗浄により解離 することが出来る周辺リン脂質（図１）であることを示している。ニールレッド の蛍光により示されるところによると、そのレシチンの２．２２％が、アルファ キサロンｍ細結晶に強固に会合している。これは１次被覆を意味する。その薬剤 とレシチンとが同一の密度であると仮定すると、５２０ｎｍ直径の微測結晶上の レシチンのこの量によっては１．９ｎｍすなわち１９オングストロームの厚みの 石を結果として生じることが、簡単に計算出来る。この価は、レシチンの単一層 の厚みの期待値に非常に近い。この実験はまた、微細結晶の凝塊化を防ぐ周辺レ シチンの役割も説明する。それを除去すると、微細結晶はより近くに近接するよ うになり、且つ、遠達力の作用により凝集するようになる。

実施例１２ 以下に示す実施例は、単一注射での皮膚の長期間の麻酔を生じさせる方法として 、リン脂質被覆した微細結晶を使用する方法を示す。

Ｃｈｅｒｎｅｙ（米国特許第２，８０３，５８２号、１９５７年）は、水溶性の 局所麻酔剤テトラカインをヨウ化水素酸（ＨＩ）塩の形成により、水不溶性にす る方法を記載した。Ｇｏｏｄｍａｎｎ及びＧ　ｉ　Ｉ　１ｍａｎの「治療学の薬 理学的基礎Ｊ　（第７版、マクミラン　パブリッシング　カンパニー社、ニュー ヨーク、１９８５年、３１２ページ）は、この塩の結晶を外科的創傷内に振りか けて４５時間の期間の局所麻酔を起こすことが出来ることを示している研究（Ｃ ｈｅｒｎｅｙ、Ｌ、Ｓ、Ａｎｅｓｔｈ、Ａｎａｌｇ。

４２巻、４７７−４８１ページ、１９６３年）を引用している。

しかしながら、１９８８年のＰＤＨに対する側層文献は、テトラカインのヨウ化 水素酸塩は、合衆国内においては臨床的利用のためには市販薬としては入手する ことが出来ないということを示している。

本実施例は、それをレシチン被覆した微細結晶にすることにより、Ｃｈｅｒｎｅ ｙの発明の利用法を増進させる方法を示している。

不溶性のテトラカイン−１（−１は、ヨウ化カリウム（Ｋｒ）をテトラカインー Ｈ−ＣＩの飽和水溶液に添加することにより調製した。この沈殿物を再懸濁させ 、更に、水で数回洗浄し、更にその後、乾燥させた。

調製物Ａとしては、ｌｏｇのテトラカインーＨ−ＩとＩｇの卵のレシチンとを試 験管内に添加し、更に、５．４％のグルコース、１０ｍＭのトリス、ｐＨ７，０ を添加して最終容量が１０ｍ１となるようにした。この物質を総計で２０分間超 音波処理（温度調節をしながら）して白色の懸濁液を産生じた。これを−晩沈殿 させ、更に、上半分を棄却した。

調製物Ｂを同様の方法で作成した。テトラカインーＨ−Ｉ　（０，５０ｇ）と卵 のレシチン（１，０ｇ）　とを１０ｍ１の容積で同時超音波処理した。上部の７ ．５ｍｌを棄却し、更に、底の２．５ｍｌを再懸濁させて最終調製物を生じた。

両方の調製物は、２０％（Ｗ／Ｖ）のテトラカインーＨ−Ｉ及び１０％（Ｗ／Ｖ ）の卵のレシチンであった。

両調製物は沈殿傾向を示し、３０％（ｗ／ｖ）テトラカインを与えた。両調製物 の長期安定性は良好であった。

調製物Ａ　（０，１ｍ１）をラットの背中の皮膚内に皮内注射したところ、約１ ．０ｃｍ直径の膨疹を引き起こし、その境界にフェルトペンで印を付けた。

注射した領域の中央に配置させた埋め込み式の皮膚内用電極を使用し、注射した 皮膚における麻酔の度合をショック音声化テストにより決定した。音声化につい ての閾値は、注射後の初めの３時間の量測定できない程高かった（１５ｍＡｍｐ を超える）。注射後の時間間隔２２〜２５時間の間に、４匹のラットをテストし た。この群は、６．６±２．６ｍＡｍｐの平均（±ＳＤ）音声化閾値を有し、こ れは良好な麻酔を意味する。４１〜４４時間におけるこの群の再テストにより、 麻酔が軽減したことが示された。４匹の動物の内の３匹については、皮膚は正常 に見えた。１匹の動物は、注射した皮膚の中央に約２ｍｍ直径の茶色がかった斑 点を示した。対照として、２匹の動物に０．１ｍｌの塩酸テトラカイン溶液を注 射した。この結果、最初は高いレベルの麻酔（１５ｍＡｍｐを超える）を生じた が、この麻酔剤溶液は、２８目に痴皮が観察され、組織に対する重度の損傷を引 き起こしたため、麻酔の測定値は実用的でも意味のあるものでな力じた。これは 、各々２回の注射を施した２匹のラットを実験に追加して得られた結果により確 認された。４種類全ての注射領域は完全に茶色であり、且つ、２４時間目には癲 皮を生じ、更に、４８時間目にはクレータ−が観察された。

発明者は、調製物Ｂを用いて自己実験を行った。右足ふくらはぎの内側、膝下１ ２ｃｍ及び２２ｃｍの皮膚内へ０．１５ｍ１の調製物Ｂを２回皮内注射した。こ の注射により、直径が約１．１ｃｍの膨疹を生じた。注射時の痛みはなかった。

この膨疹は、約３０秒以内に軽減した。注射した部位について、針での突き刺し 及び冷刺激麻酔についてのテストを、注射後２４時間に亘って行なった。

図８には、５段階等級における針での突き刺しによる麻酔程度の調査を示した（ ４／４＝針の鋭さに対する完全な無感覚状態、０７４冨針の鋭さに対する完全な 知覚状態）。この図は、また、２％と５％のテトラカインーＨ−Ｃ１溶液での観 察結果をも示している。このレシチン被覆した微細結晶調製物は、注射後７〜９ 時間の間の完全な麻酔を示し、１２時間半〜１４時間半の時点で５０％感受性ま で復帰し、更に、１６〜２１時間の時点で完全に逆転した。注射は刺激（炎症） を起こさなかった。１１分又は１時間半の時点で、微かな紅色水腫が観察された 。注射した領域は、２４時間目には、完全に正常に見え、且つ、感じた。注射し た組織と注射しなかった組織との差異を示すことが出来る唯一の信頼出来る手段 は、注射後１〜５日目の強烈な摩擦に対する感受性であった。

上述の実験に対する対照として、自身に、１％、２％、及び５％のテトラカイン ーＨ−ＣＩの溶液のＯ，１５ｍ１容量を注射した。その濃縮された溶液が与える 損傷をより少なくする試みとして、ｐＨを５．３〜６．５に調節した。生理学的 張度は、グルコースを含めることにより維持した（それぞれ、４．３％、３．２ ％及び０％）。

図８は、上記の溶液が２時間を超えない期間の完全な麻酔を生させたことを示す 。１％及び２％のテトラカインーＨ−ＣＩ溶液は緩やかな紅色水腫のみを生じ、 それは麻酔が軽減した時点で正常の色に戻った。５％のテトラカインーＨ−ＣＩ 溶液は、２７分目に、中央に鮮赤色の斑点（７ｍｍ直径）及び硬さを生じた。表 示しである麻酔値はその周辺において測定した。その部位は麻酔が軽減した後も 炎症を起こしていた。その赤色斑点は７８目に癲皮へと変形し、それは２１日８ まで存続した。４８日８には、その部位はピンク色がかった皮膚の１ｃｍ直径の 輪に囲まれた２ｍｍ直径の痴皮を有しており、それは接触に対して感受性であり 、約１ｍｍ程盛り上がっていた。これは鍛痕へと変形してゆき、それは１年間存 続した。５％（Ｗ／Ｖ）のテトラカイン溶液での、この劣悪な結果は、２０％（ Ｗ／Ｖ）のテトラカインーＨ−Ｉ微細結晶を用いて得られた卓越した結果とは、 際だって対照的である。

上述のデーターは、Ｃｈｅｒｎｅｙの発明に関連するレシチン被覆した微細結晶 法の利用により、麻酔剤を４倍を越えるより高い濃度で注射し、且つ、５倍長い 期間の安全かつ可逆性の麻酔を行なうことが可能であることを示している。

実施例１３ 本実施例は、螺状物質の粒子は、レシチンの層で被覆し且つ安定化させることが 出来ることを示す。これらのリン脂質被覆した微粒子は、生理学的温度（３７℃ ）と１００℃との間で溶解するリン脂質適合性の固体物質から作成することが出 来る。

パラフィンワックスを用いて本実施例を説明する。

パラフィン（３，３５ｇ）を６０℃の湯浴上で溶解した。卵のレシチン（１゜３ ５ｇの卵のレシチン）をビーカーに入れ、更に、３００ｍＭのグルコース、１０ ｍＭのトリス（ｐＨ７，０）の水溶液を添加して最終容量を４７ｍ１とし、更に 、均質化した。

均質化したレシチンに液体状のパラフィンを添加し、更に、その混合物を３０分 間超音波処理して乳白色の均質な懸濁液を取得した。そのビーカーに覆いを被せ 、更に、室温にまで冷ました。その結果、レシチン被覆したサブミクロン直径の パラフィン分子の懸濁液は２週間を過ぎても安定であった。

上述の操作をリン脂質なしの条件で再現したところ、結果として固体パラフィン の沈殿化を生じた。

先の例は、水の沸点以下で、且つ、利用しようとする温度（３７℃）以上の融点 を有する物質からレシチン被覆した微細結晶を作成することが可能なことを示し ている。

生物学的及び合成的な材料の、医薬的に許容可能な蝋質及び固体は、硬化ひまし 油、セトステアリルアルコール、セチルアルコール、セチルエステルワックス、 ミリスチルアルコール、ペトロラタム、パラフィン、及び、様々な蝋質（乳状の もの、微細結晶、白色、黄色、等）を含むが、これらに限定はされない。また、 これらの物質を使用して薬剤の微細結晶のための蝋質被覆を与えることも可能で あり、この蝋質被覆は次にはリン脂質で被覆される。

この蝋質被覆は更に薬剤の放出速度を緩慢にさせ、そのため、その薬剤の作用期 間を延長させる。

パラフィンの、又はその代わりとして、生物学的に分解可能な蝋質としてのトリ ステアリンのレシチン被覆した微粒子は、注射した組織内で非常に長い存続期間 を有する。恐らく、それらは、水溶性抗原、又は、筋肉もしくは皮膚内の膜断片 の固定化及び捕獲（実施例１６参照）に有効であり、　（補助剤として）ワクチ ン接種の効率を上昇させることが出来るものと思われる。

実施例１４ 以下に示す実施例は、結晶薬剤が溶解しない非水混和性の有機溶媒の存在下でレ シチン被覆した微細結晶を作成することが出来ることを示す。本実施例は筋肉弛 緩剤のダントロレンに基づいている。その物理学的形態は、２７９〜２８０℃の 融点を有し且つ低い水溶解度を有する鮮橙色の結晶である。

ダントロレン（７，９ｍｇ＞を試験管に添加し、以下に記載の溶媒（１）〜（２ ）を累積的に添加したが、薬剤は溶解しなかった。

（１）　０．３ｍｌの鉱油 （２）＋０．４ｍｌのｎ−ジブチルエーテル（３）＋０．４ｍｌのメトキシフル ラン（４）＋０．３ｍｌのメトキシフルラン（５）　＋０．３ｍｌのメトキシフ ルラン（６）＋０．３ｍｌの鉱油 上述の物質を微小チップで１５分間超音波処理した。この結果、ダントロレン結 晶の目の細かい懸濁液を生じ、それは約１５分で沈降した。この混合物を再度超 音波処理し、更に、Ｏ，１ｍｌを取り出して１９．８ｍｇのジラウリルフオスフ ァチジルコリン（レシチン）を含む試験管へ添加した。攪拌しても、レシチンは 濡れるだけで溶解はしなかった。

等侵食塩水（１，５ｍ　ｌ）をその試験管に添加し、更に、その内容唆を超音波 処理した。この結果、堅さがありエッグノッグ（鶏卵、牛乳、砂糖等を混ぜ合わ せた飲み物）の様な見かけの黄みを帯びた懸濁液を生じた。２日間の保存の後、 その試験管の内容物は３層に分離しており、それを別々に試験管から取り出した 。

約０．０５ｍ１の容量を有する底部層は赤みを帯びた黄色の塊であり、それは、 緩やかに攪拌すると等張の食塩水中に簡単に再懸濁した。それは、ダルトロレン の大半を含んでいた。それは、有機溶媒で濡れ、且つ、レシチンの層で被覆され ているダルトロレンの微細結晶からなっていた。

全体の容量の大半を占める中間層は非常に混濁していた。一番上の層は明るい色 をしていた。

中間及び一番上の層は、米国特許第４，７２５，４４２号（１９８８年）におい て、本発明者により記載されているような、レシチン被覆されている微細小滴に 相当していた。中間層におけるこの微細小滴はメトキシフルランにより富んでお りまた、一番上の層における微細小滴は鉱油に富んでいた。

本実施例は、安定で殆ど油溶解性を示さない結晶薬剤化合物を選択した場合には 、たとえ有機溶媒が多量に存在する場合にさえも、レシチン被覆した微細結晶が 超音波処理中に自発的に形成されることを示している。

本実施例は、リン脂質被覆した微細結晶の安定性に関わる物理的相互作用につい ての知見を提供した。

実施例１５ 本実施例は、駆虫剤であるアルベンダゾールのレシチン被覆した微細結晶調製物 を希釈し、家禽類及び畜生用の飲料水での投与に適する安定な懸濁液を得る方法 を示している。

実施例７において記載したようにして、濃縮した調製物（２０％（Ｗ／Ｖ）のア ルベンダゾール、１０％（Ｗ／Ｖ）のレシチン）を作成した。

分液を４００ｍ１の水道水内に希釈して０．２５ｍｇ／ｍｌの懸濁液を得、栓を した５００ｍ１用の試料瓶に入れ、震盪せずに保存した。希釈直後に行った粒子 サイズ分析により、その物質の１０％が２５４±２００ｎｍの粒子、８５％が２ ．７±０．５μｍの粒子、及び、５％が３μｍを超える粒子であることが示され た。

６４時間後には、その薬剤の４５％のみがその瓶の底３分の１に沈殿した。

底には薄い半透明の液体状の薄膜が存在していた。これは１回の反転で簡単に再 懸濁した。粒子サイズ分析により、この物質の５４％が１７±ｌｌｎｍの粒子で あり、１３％が３．０±０．３μｍの粒子であり、更に、３２％が３、ｃｚｍを 超える粒子であることが示された。

上記のテストは、流れが５日以上阻止されている場合にさえも、レシチン被覆し た微細結晶の分散した形態を自動希釈（分配機）系で使用することが出来ること を示している。

実施例１６ 本最終実施例は、レシチン被覆した微細結晶が組織内への注射の後の生物分子の 放出を遅延させる手段として有効であることを示す。用途としては、蓄積質注射 の後の生物学的物質の持続的な放出、及び、ワクチン投与の過程におけるウィル ス性又は細菌性抗原の貯留の延長を含む。

ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ、１４−Ｃラベル化物）を水溶性生物分子の例とし て採用した。このＢＳＡを、最終濃度が２７μｇ／ｍｌとなるように、実施例１ におけるのと同様にして予め形成しであるオキシテトラサイクリン微細結晶（２ ０％ｗ／ｖの○ＴＣ１２０％ｗ／ｖのレシチン）と混合した。

実験室用のラットを用い、　（ａ）皮内に、又は、（ｂ）筋肉内にＯ，１ｍｌの 混合物を注射し、更に、その皮膚及び筋肉の注射部位について、２日後の屠殺の 時点で残存している１４−ＣＢＳＡの放射活性を分析した。

対照は、等張のグルコース中における同一濃度のＢＳＡ、及び、超音波処理によ り調製したレシチン小胞（２０％Ｗ　／　Ｖ　）と混合した同一濃度のＢＳＡで あった。表６は、レシチン被覆した０ＴＣａ結晶混合物についての皮膚及び筋肉 部位中により高いレベルの１４−ＣＢＳＡ活性が検出されたこ・　隼の　に　て いる　− 試肢一ム皿織　Ｌ之ユニス且液　上之±２小胞　Ω工Ω微細級晶皮膚１　５．０ ％　３．０％　８８．０％皮膚２　４．４％　３．１％　１７．５％皮膚３　４ ．２％　３．９％　１２．６％筋肉１　５．９％　０．０％　２７．８％筋肉２ 　８．６％　８．２％　６．２％上記のデーターは、リン脂質被覆した微細結晶 は、その間隙の水性空間に生物学的物質及び抗原を保持することが出来、注射部 位からのそれらの放出速度を遅延させ、それにより、それらの活性を延長させる ことが出来るということを示唆している。

生物学的物質の投与についての又はワクチンの補助剤としての被覆した微細結晶 の有効性は（それぞれ）、その微細結晶中に（それぞれ）免疫抑制剤又は免疫刺 激剤を含ませることにより増大させることが出来る。

図面の簡単な説明 図１は、リン脂質被覆した微細結晶の概略図である。符号○＝＝はリン脂質であ る（Ｏは極性先端、＝＝は対になっている脂肪酸銀である）。直径は０．５□ｍ （０，０５〜１０μｍの範囲）である。

図２は、２０％（Ｗ／Ｖンのオキシテトラサイクリン、２０％（Ｗ／Ｖ）の卵レ シチンの微細結晶調製物をニールレッドで処理し、スライド上に広げたときに、 蛍光顕微鏡で観察される視野を示す図である。白色は、高い蛍光強度を示す。上 段の図は、オキシテトラサイクリン蛍光のパターンを示す。

より小さい粒子は、約０．２μｍの直径である。下段の図は、ニールレッドの波 長で励起させた同一の視野のものである。この蛍光は、調製物中のレシチンの分 布を示す。

図３は、５％の卵レシチンで被覆した微細結晶形態の２０％のＯＴＣの０゜１ｍ ｌを注射した後に、ラット（ｎ＝４）の脚の筋肉中に残存しているオキシテトラ サイクリンのパーセント率を示す。注射後１〜７日目のデーターについて、市販 の２−メチル−ピロリドン溶液として注射した同量のＯＴＣの結果と比較してい る。

図４は、図３の実験における中枢動脈血中のＯＴＣのレベルを示す。

図５は、２０％（ｗ／ｖ）の０ＴＣ（１０％（ｗ／ｖ）のレシチン被覆）の筋肉 内注射後の、子ウシ中のＯＴＣの血中レベルを示す。

図６は、レシチン被覆した微細結晶として筋肉内に注射した５ｍｇのインドメサ チンによる浮腫に対する保護の経時変化について、アルカリ性溶液として注射し た同一用量と比較して示す。

図７は、レシチン被覆したアルファキサロンの微細結晶の静脈内注射の後の、皮 膚内電気的刺激に対する音声化の閾値として測定した、ラットにおける麻酔のレ ベルの典型的な経時変化を示す。

図８は、レシチン被覆した、２０％（Ｗ　／　Ｖ　）のヨウ化水素酸テトラヵイ ンの微細結晶（上段グラフ）を用いて行ったヒトの皮膚中における麻酔（針で刺 すことに対する）の経時変化について、テトラヵインーＨＣＩ溶液（下段グラフ ）と比較して示す。

ＯＴＣの残存％ 血中［ＯＴＣ］　（ｕｇ／ｍｌ） 血中［ＯＴＣ］　（ｕｇ／ｍｌ） ％阻害 音声化閾値（ｍ＾） 麻酔の程度 麻酔の程度 要約書 水不溶性薬剤は、リン脂質被覆された微細結晶の水性懸濁液としての調剤により 注射可能になる。その結晶薬剤をリン脂質又は他の膜形成性両親媒性脂質の存在 下、超音波処理又は高度の剪断力を誘導する他の方法により、５０ｎｍから１０ μｍの大きさに微細化する。この膜形成性脂質は、疎水性と親水性の両方の相互 作用により微細結晶を安定化させ、それを被覆及び包被して凝集から保護し、更 しこ、固体形態の薬剤物質の組織に対する刺激をより少なくする。脂質で封入し た薬剤粒子と会合し更にそれを取り囲んではいるが、それを包被はしていない、 小胞形態の付加的な膜形成性脂質によって２次被覆されることにより、凝集に対 する付加的な保護が得られる。４０％（Ｗ／ｖ）　までの濃度で薬剤を含む組織 適合性製剤を記載する。この調製物を、病変内、静脈内、動脈内、筋肉内、皮肉 等を含む数々の他の部位に注射することが出来る。

本開示は、抗生物質、駆虫剤、抗炎症剤、局所及び全身麻酔剤、並びに、生物学 的物質を用いての製剤及び薬動恕学的なデーターの例を記載する。

Claims (18)

【特許請求の範囲】
1. １．主に、固体形態の医薬的に活性な水不溶性薬剤物質の固体粒子の水性懸濁液 からなり、その固体粒子が約０．０５〜約１０μｍの直径を有し、膜形成性両親 媒性脂質の０．３ｎｍから３，０μｍの厚みの層で被覆されており、その層が、 その薬剤物質を凝集に対して安定化させ且つ固体形態の薬剤物質の宿主の組織に 対する刺激性をより少なくする注射針通過性で注射可能な医薬組成物。
2. ２．主に、固体形態の医薬的に活性な水不溶性薬剤物質の固体粒子の水性懸濁液 からなり、その固体粒子が約０．０５〜約１０μｍの直径を有し、膜形成性両親 媒性脂質の０．３ｎｍから３．０μｍの厚みの封入１次層で被覆されており、そ の１次層は、膜形成性両親媒性脂質の被覆層と包被層の両方からなり、この１次 層が、その薬剤物質を凝集に対して安定化させ且つ固体形態の薬剤物質の宿主の 組織に対する刺激性をより少なくし、その固体粒子は、更に２５ｎｍから３．０ μｍの厚みの２次層で被覆されており、その２次層が、脂質で封入されている薬 剤粒子に会合し且つ薬剤粒子を取り囲んではいるが包被はしていない小胞形態の 膜形成性両親媒性脂質から成る注射針通過性で注射可能な医薬組成物。
3. ３．薬剤物質粒子が、約０．１〜約３．２μｍの直径を有する請求項１又は２に 記載の組成物。
4. ４．水溶性薬剤が、固体形態を生じる医薬的に許容可能な化合物との非共有結合 性複合体形成により水不溶性となっている請求項１又は２に記載の組成物。
5. ５．脂質に対する薬剤の重量比率が、約１：１から約１，０００：１である請求 項１又は２に記載の組成物。
6. ６．膜形成性脂質、がリン脂質である請求項１又は２に記載の組成物。
7. ７．０．０１〜約４０重量％の薬剤物質を含む、且つ、安定で注射針通過性であ る請求項１又は２に記載の組成物の水性懸濁液。
8. ８．３０を超える誘電率を有し、脂質膜又は薬剤物質を実質的に溶解しない医薬 的に許容可能な水混和性の極性有機性液体中に分散しているか、又は、該極性有 機性液体と水との混合物に分散している、安定で且つ注射針通過性である請求項 １又は２に記載の組成物の懸濁液。
9. ９．薬剤粒子と両親媒性膜形成性脂質の１次層との間の接触を促進するため、又 は、薬剤溶解の速度を緩慢にするため、又は、薬剤放出の速度を修正するために 、薬剤物質の粒子を薬剤物質１ｇ当たり０．２５ｇまでの水非混和性油で濡らし た請求項１又は２に記載の組成物。
10. １０．薬剤物質の粒子が、膜形成性の両親媒性脂質の１次層の塗布前又はその最 中において、３７℃〜１００℃の融点を有する蝋状リン脂質融合性固体の層によ り予め被覆されており、その蝋状リン路質適合性固体が、パラフィン、トリステ アリン、オレイン酸エチル、セトステアリルアルコール、セチルアルコール、ミ リスチルアルコール、ステアリルアルコール及びペトロラタムから選択される請 求項１又は２に記載の組成物。
11. １１．水を添加した場合に水性懸濁液を生じる、主に、請求項１又は請求項２記 載の組成物から成る、水を含んでいない固体医薬組成物。
12. １２．静脈内、動脈内、筋肉内、皮内、皮下、関節内、脳脊髄、表皮、肋骨内、 腹腔内、腫瘍内、膀胱内、病変内、又は、網膜下投与のための注射可能形態にあ る請求項１又は２に記載の医薬組成物。
13. １３．経口的に投与することが出来る形態にある請求項１又は２に記載の医薬組 成物。
14. １４．局所適用用の請求項１又は２に記載の医薬組成物。
15. １５．吸入用の請求項１又は２に記載の医薬組成物。
16. １６．眼内への滴下用の請求項１又は２に記載の医薬的組成物。
17. １７．飲料水への希釈用の請求項１又は２に記載の医薬的組成物。
18. １８．医薬的に活性な水溶性薬剤物質が駆虫剤である請求項１又は２に記載の組 成物。