JPH05509078A - 成長抑制因とガンおよび細胞増殖性疾患措置法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 発明の名称　成長抑制因子とガンおよび細胞増殖性疾患措置法 発明の分野 本発明は新しい、そし７て有益なバ２イオフラボノイド組成物１１３よび、メチ ルｐ−ヒドロキシフェニルラクテート（ＭｅＨＰＬＡ）・やその類似物、化学的 誘導体および化学的に関連した化合物、フェニルメチレンケトン類、ニトロアル ケン類、オーロン類、抗腫瘍剤、増殖性細胞成長の抑制剤、および免疫抑制剤と してのカルコン類などを含む関連化合物に関するものである。

発明の背景 正常な組織と悪性組織には二つのタイプの核エストロゲン結合部位が存在してい る。タイプ１部位は古典的なエストロゲン受容体を示（２、τおり、核タイプ■ 部位はエストロゲン）性ホルモン類Δ４の一定の核応答をもたらすようである。

エストロゲン投与後、タイプＴ受容体部位はエストラジオールと結合し５、この 受容体−エストロゲン複合体は組織成長のエストロゲン刺激と関連しτいる転写 ・ｆベントの開始前に該受容体部位と相互作用する。それとは対照的に、タイプ ■部位は古典的なエストロゲン受容体より大きなキャパシティーおよびより低い 親和性でエストロゲンと結合し１、細胞質から核への転位は行われないようであ る。したがって、核タイプ■部位の１ノベルはエストロゲン投与によって増大さ れるが、タイプ■部位はホルモン投与後も細胞質にとどまる。核タイプ■部位は エストロゲン性ホルモンに対する特定の核応答を仲介するようであり、子宮細胞 性肥大および増生と高度の相関性を有している。さらに核タイプ■部位はマウス 乳房腫瘍およびヒト乳ガンなどの悪性組織において高度の刺激を受ける。この観 察結果は、高度に増殖性の組織はより多くの核タイプ■部位を有しているという 知見と合致している。核タイプ■部位の刺激は子宮酸、長の刺激と強い相関性を 有しているので、タイプ■部位はエストロゲンが子宮域刺激を引き起こすメカニ ズムに関連した場所であると考えられている。さらに、核マトリックス上のタイ プ■部位の存在はＤＮＡ合成の規制において一定の役割を演じている可能性があ ることを示唆している。

核タイプ■部位は、すべてではないとしても、多くの非悪性細胞の構成要素であ る。通常、非悪性細胞におけるタイプ■部位はメチルｐ−ヒドロキシフェニルラ クテート（ＭｅＨＰＬＡあるいはメチル３−（４−ヒドロキシフェニル）−２− ヒドロキシプロピオネート）によって占められている。メチルｐ−ヒドロキシフ ェニルラクテート（ＭｅＨＰＬＡ　）は正常および悪性細胞、および免疫システ ムのリンパ球細胞における核タイプ■結合部位に関する内発性リガンドであり、 この化合物はこの結合作用を通じて細胞成長および増殖を規制するのである。

ＭｅＨＰＬＡはバイオフラボノイド（ＱｒｉｆｆｉｔｈｓおよびＳｕ＋ｉｔｈ　 （１９７２）Ｂｉｏｃｈｅｍ、　Ｊ、、　１２８：９０１）および／またはチロ シン代謝（ｋａｒｏｕｍ（１９８５）　Ｂｉｏｇｅｎｉｃ　Ａｍ１ｎｅｓ　２　 ＋　２６９）から内発的に誘導することが可能である。さらに、ＭｅＨＰＬＡは 悪性細胞によって代謝され、その結果としての腫瘍におけるこの化合物の不足は 細胞成長規制の喪失と直接関係している。ＭｅＨＰＬＡがタイプ■部位に結合す る場合、非悪性組織の細胞成長および増殖は抑制、あるいは停止される。逆に、 悪性細胞はＭｅＨＰＬＡを代謝し、したがって、核タイプ■部位に対する結合が 不十分となり、細胞成長および増殖の規制が失われる。結果的に、調べられたす べての腫瘍細胞部は非常に高いレベルの非結合核タイプ■部位を有している。こ れと同じタイプの代謝作用がここでは本発明による化合物が免疫システムにおけ る細胞増殖作用を規制する可能性のあるメカニズムとして提案されている。これ らの部位が抗増殖剤としてのＭｅＨＰＬＡ類似物の標的となるべきである。

本発明は免疫システムにおけるもののような悪性、あるいはその他の急速に増殖 する細胞によっては代謝されないが、高い親和性で核タイプ■部位と結合する化 合物を開示している。これらの化合物は腫瘍細胞増殖、ＤＮＡ合成およびリンパ 球活性化に対する非常に効果的な抑制剤である。したがって、本発明による化合 物は免疫抑制剤としても有益である。

核タイプ■部位は種々の腫瘍および免疫システムにおけるもののような他の増殖 性細胞で観察されている。さらに、フェニルメチレンケトン類、ニトロアルケン 類、オーロン類、およびカルコン類などの類似物あるいは化学的に関連性のある 化合物は広範な腫瘍および活性化リンパ球などのその他の急速に増殖する細胞に 対する効果的な抑制剤である。これらの化合物は種々の自動免疫性疾患、および その病理状態を措置するために細胞増殖の抑止が望ましい、あるいは必要な免疫 システムの他の病理状態の措置において臨床的に有効である。

結果的に、特に膵臓、子宮頚部、肝臓、脳、脳下垂体および他の器官や組織部位 のガンや、白血病、リンパ腫、基質腫、および情事筋腫なと他のタイプのガンを 含む核タイプ■部位を含むどの腫瘍も、ＭｅＨＰＬＡ　、フェニルメチレンケト ン類、オーロン類およびカルコン類などのその類似物、誘導体および化学的に関 連性のある化合物による措置に応答する筈である。

ＭｅＨＰＬＡはラット子宮におけるような正常な細胞成長のエストロゲン刺激を 阻止するので、ＭｅＨＰＬＡの類似物やそれと化学的に関連性のある化合物は子 宮細胞増生、子宮頚部細胞増生、子宮内膜炎、および良性前立腺肥大などの措置 にも有益である。非増殖性非悪性細胞は通常ＭｅＨＰＬＡと結合したタイプ■部 位を有しているので、提案されている化合物の非悪性細胞群に対する影響は最低 レベルからゼロの範囲である。こうした理由から、ＭｅＨＰＬＡ　、フェニルメ チレンケトン類、ニトロアルケン類、オーロン類、およびカルコン類などその類 似物や化学的に関連性のある化合物、誘導体および化学的に関連性のある化合物 、および生理学的に受け入れ可能なその塩類なども、ガン、自動免疫性疾患、移 植片対宿主疾患および非悪性細胞の異常増殖の抑制や阻止における予防剤として も有益である。

タイプ■部位の正確な生理学的役割は未知であるが、核タイプ■部位の抑制は子 宮域応答とエストロゲンとの対立に関連している。これはデキサメタシン、プロ ジエステロン、およびナホキシジンおよびクロミツエンなどのトリフェニルエチ レン誘導体などの拮抗剤に対してあてはまる。核タイプ■部位のエストラジオー ル結合に関しては最低ひとつの内発性抑制因子が存在しているが、核タイプ■部 位に対する具体的な抑制剤は、本発明の発明者たちの一部が確認したようなもの 以前には確認されていない。さらに、本発明による抑制剤は核タイプ■部位に対 して特に作用を発揮し細胞基質あるいは核タイプ■エストロゲン受容体に対する エストラジオール結合には干渉を及ぼさない。

これらの抑制剤はメチル３−（４−ヒドロキシフェニル）−２−ヒドロキシプロ ピオネート、フェニルメチルケトン類、ニトロアルケン類、オーロン類、および カルコンなどの誘導体や化学的に関連性のある化合物、そして生理的に受け入れ 可能なその塩類として確認されており、正常および悪性組織における細胞成長お よび増殖、そして免疫機能の強力な調節剤である。ひとつの抑制剤はメチルｐ− ヒドロキシフェニルラグテートあるいはＭｅＨＰＬＡとして知られている。以下 、これらの用語は同義的に使われている。これらの化合物による細胞成長抑止は 、これらの化合物の、細胞増殖およびＤＮＡ合成の調節に関与している可能性の ある正常および悪性細胞における親和性の高い核結合部位と相互作用する能力と 関係している。ＭｅＨＰＬＡが核タイプ■部位に結合されると、細胞成長および 増殖が抑制される。内発性３−（４−ヒドロキシフェニル）−２−ヒドロキシプ ロピオン酸の細胞成長阻止能力ははるかに低い。この作用は核タイプ■部位への その低い結合親和性に関連している。

本発明の別の目的はガン予防の手段である。ＭｅＨＰＬＡは哺乳動物細胞の正常 な構成要素であるが、悪性細胞によって代謝されるので、腫瘍や免疫システムの 細胞のような他の急速に増殖する細胞によって代謝されないフェニルメチレンケ トン類、ニトロアルケン類、オーロン類、およびカルコン類、誘導体および化学 的に関連性のある化合物、そして生理的に受け入れ可能なその塩などを含む、こ こに述べられているようなＭｅＨＰＬＡ、構造的類似物および化学的に関連性の ある化合物は、悪性腫瘍の阻止、および自動免疫疾患などを含む免疫システムの 多くの病理的な状態の措置においても有益である筈である。これらの化合物はど のような副作用もほとんどなく、低いレベルの投与量で摂取されれば、悪性細胞 や免疫システムのリンパ球の増殖を抑制する筈である。

ＭｅＨＰＬＡは細胞成長の非常に強力な抑制剤であるので、この化合物およびそ の類似物や化学的に関連性のある化合物は抗腫瘍剤として用いられた。本発明は これらの化合物の強力な抗腫瘍および免疫抑制作用を開示するものである。

本発明のひとつの目的はガンの措置である。

本発明の別の目的はタイプ■核エストロゲン結合部位を含んでいる増殖中の細胞 の成長を抑止するための手順である。

本発明のさらに別の目的はエストロゲン反応性組織の成長を抑止する方法である 。

本発明のもうひとつ別の目的はヒト乳ガン、および非結合核タイプ■部位を含ん でいる他の悪性腫瘍の措置である。

本発明のさらにもうひとつ別の目的は両性前立腺肥大、子宮頚部肥大、子宮細胞 増生および子宮内膜炎の措置である。

本発明の別の目的は免疫抑制剤を提供することである。

発明の要約 多くの抗ガン剤は免疫抑制作用を有している（ＳｌｅｄｉｎおよびＳｔｅｉｎｂ ｅｒｇ　（１９８８）　＋”Ｉｎｆｌａｍ＋＋＋ａｔｉｏｎ　Ｂａ５ｉｃ　Ｐｒ １ｎｃｉｐｌｅｓａｎｄ　Ｃ１１ｎｉｃａｌ　Ｃｏｒｒｅｌａｔｅｓ“　（Ｇａ ｌｉｎ、　Ｇｏｌｄｓｔｅｉｎ、　Ｓｙｎｄｅｒｍａｎ等）ラベン・プレス社、 ニューヨーク）。一般に使用されている免疫抑制剤の多くは最初は抗ガン剤とし てつくられたものである。免疫抑制剤は種々の自動性疾患の措置において臨床的 に有効であることが証明されている。

本発明の別の目的は、慢性関節リウマチ、多発性硬化症、重症筋無力症、糠床病 、甲状腺炎、葡萄網膜炎、循環性エリマド−デス、ショーグレン症候群、自動免 疫性皮膚疾患およびその他を含む自動免疫性疾患の措置である。

本発明の別の目的は移植片対宿主疾患の措置法を提供し、移植拒絶反応を防ぐこ とである。

このように、上記の目的を達成する上で、本発明のひとつの側面に従って、Ｍｅ ＨＰＬＡ、その類似物、化学的誘導体あるいは化学的に関連性のある化合物を投 与するステップで構成されるガンおよび自動免疫性疾患を措置する方法が提供さ れる。

より具体的には、その化合物は、以下の化合物で構成されるグループから選択さ れる。

ここで、Ｒ８はＨｌｌ−６の炭素を含むアルキル基、およびアリール基で構成さ れるグループから選択され、Ｒ１とＲ。

はＨ，ＯＨおよびＯＣＨ，で構成されるグループから選択され、そしてＲ４はＨ または１−６の炭素を含むアルキル基で構成されるグループから選択される。本 発明を実施するために用いることができる好ましい化合物は、メチル３−（４− ヒドロキシフェニル）−２−ヒドロキシプロピオネート、ｎ−プロピル３−（４ −ヒドロキシフェニル）−２−ヒドロキシプロピオネ−、ト、３−（４−ヒドロ キシフェニル）−２−プロペン酸、４−（４−ヒドロキシフェニル）−２−ブタ ノン、１−（４−ヒドロキシフェニル）−３−ペンタノン、メチル（４−ヒドロ キシフェノキシ）アセテート、およびメチル３−（３，４−ジヒドロキシフェニ ル）−２−プロペノエートで構成されるグループから選択することができる。

本発明の別の側面は、以下の構造式で示される化合物で構成されるグループから 選択される化合物を治療効果のある量だけ投与するステップで構成される、ガン および自動免疫性疾患および移植片対宿主疾患などの免疫システムの病理状態を 措置する方法を提供する。

Ｒ１とＲ４はＨとＯＨで構成されるグループから選択され、Ｒ３とＲ，はＨ，Ｏ Ｈ，ＯＣＨ，、アミノ、アルキルアミノおよび１−６の炭素を含むアルキル基、 アシロキシ、およびハロゲン類で構成されるグループから選択され、Ｒ５はＨ２ ＯＨ，ＯＣＨ，、アシロキシおよびハロゲン類で構成されるグループから構成さ れ、Ｒ／、およびＲ′３はＨ，ＯＨ，ＯＣＨ，、アミノ、シアノ、１−６の炭素 原子を含むアルキルアミノ基、アシロキシ、ハロゲン類およびａ−アジドおよび アジリジン誘導体、３．４−ヒドロキシフェニルメチレン、ｐ−とドロキシフェ ニルメチレンおよび他の好ましくはアシロキシまたはハロゲン置換基で置換され たフェニル基で構成されるグループから選択され、Ｒ’ＩＩ　Ｒ’４ｔ　Ｒ’、 、ＲＩｌｌおよびＲＪｌはＨ，ＯＨ，ＯＣＨ，、アミノ、シアノおよび１−６の 炭素原子を含むアルキルアミノ基、アシロキシ、ハロゲン類およびａ−アジドお よびアジリジン誘導体およびハロゲン置換誘導体で構成されるグループから選択 される。カルコンＲ″、およびＲ′、が置換されてアジリジン環系が形成される と、ＲＲ８とＲ’オ炭素および窒素原子で構成される三要素環構造が形成される 。本発明を実施するために用いられる好ましい化合物は、フェニルメチレンケト ン類、ニトロアルケン類、オーロン類およびカルコン類から選択することができ る。

本発明を実施するために最も好ましいフェニルメチレンケトン類は以下のものを 含む。

ここでＲ１とＲ４は）−Ｉ、ＯＨ、アシロキシあるいはハロゲン類であり、Ｒ８ とＲ８はＯＨ，ＯＣＨいアミノ、１−６の炭素原子のアルキルあるいはアルキル アミノ基、Ｒ／、とＲ′１はＨ，ＣＨ。

あるいはｐ−ヒドロキシ、３，４−ジヒドロキシ、アシロキシおよびハロゲン核 置換基を持つフェニルメチレンであり、Ｒ／、はＨ，ＯＨ，ＯＣＨ，および１− ６の炭素原子を含むアルキル基である。

最も好ましくは、本発明を実施するために用いることができるフェニルメチレン ケトン類は、以下の構造式で示される化合物で構成されるグループから選択され る。

ｖ−１ 毘−Ｉ　ＭＶ−１７ 本発明を実施する上で最も好ましいオーロン類は以下の槽水発明の実施に最も好 ましいニトロアルケン類は以下の構造式で示される化合物を含んでいる。

ここでＲ，、Ｒ，およびＲ５はＨ，ＯＨ，ＯＣＨ，、アミノ、１−６の炭素原子 のアルキルあるいはアルキルアミノ基、アシロキシおよびハロゲン類であり、Ｒ ６はＨｌあるいは１−６の炭素原子のアルキル基である。

本発明を実施する上で最も好ましいニトロアルケン類には以下の構造式で示され る化合物が含まれている。

以下余白 造式で示される組成物である。

Ｒ，−Ｒ９およびＲ′□−Ｒ／、はＨ，ＯＨ，ＯＣＨ，、アミノ、１−６の炭素 原子のアルキルあるいはアルキルアミノ基である。

本発明を実施する上で有益な最も好ましいオーロン類はＭＶ−１９，ＭＶ−２０ およびＭＶ−２１テある。

ＭＶ−１９ＭＶ−２０ 本発明を実施するために最も好ましいカルコン類は以下の構造式で示される化合 物である。

ここで、Ｒ，−Ｒ，、Ｒ’、−Ｒ’、およびＲ′、とＲ′３はＨ，０１（。

ＯＣＨ，、アミノ、シアノ、１−６の炭素原子のアルキルあるいはアルキルアミ ノ基、アシロキシおよびハロゲン類、ａ−アジドおよびアジリジン誘導体である 。

以下余白 本発明を実施する上で有益な最も好ましいカルコン類は以下の構造式で示される 組成物である。

２′−ヒドロキシカルコン　２’、４’、４−トリヒドロキシカルコン４−ヒド ロキシカルコン　４−４７−シヒドロキシカルコンＭＶ−３５ＭＶ−４６ 本発明の別の側面は、生物学的に抑制効果を持つ量のＭｅＨＰＬＡ、その類似物 、化学的誘導体、あるいはフェニルメチレンケトン類、ニトロアルケン類などの 化学的に関連性を有する化合物、その類似物、あるいはカルコン類を増殖中の細 胞に投与するステップにより、タイプ■核エストロゲン結合部位を含む増殖細胞 の成長の抑止に関連している。

本発明のさらに別の側面は子宮、乳腺、子宮腫瘍および乳腺腫瘍などのエストロ ゲン応答性組織の増殖性成長の抑止である。ひとつの特殊な側面として、上に述 べた組成物はヒト乳ガン細胞の措置に用いられている。これらの組成物はヒト乳 ガン細胞の成長を抑止する。

本発明のさらにもうひとつ別の側面は免疫抑制剤の提供である。ひとつの側面で 、これらの組成物はＭｅＨＰＬＡ　、フェニルメチレンケトン類、ニトロアルケ ン類、オーロン類、およびカルコン類、そして生理的に受け入れられるそれらの 塩などの類似物、誘導体、および化学的に関連性のある化合物で構成されるグル ープから選択される。

本発明の別の特殊な側面は、ＭｅＨＰＬＡ　、その類似物、およびフェニルメチ レンケトン類、ニトロアルケン類、オーロン類、およびカルコン類と、生理的に 受け入れ可能なその塩などを含む化学的に関連性のある化合物を治療的に効果の ある量だけ投与するステップで構成される両性前立腺肥大の措置法である。

本発明のもうひとつ別の特殊な側面は、治療的に効果のある量のＭｅＨＰＬＡ　 、その類似物、誘導体、およびフェニルメチレンケトン類、ニトロアルケン類、 オーロン類、およびカルコン類、と生理的に受け入れ可能なその塩を投与するス テップで構成される、慢性関節リウマチ、多発性硬化症、重症筋無力症、糖尿病 、葡萄網膜炎、循環性エリマド−デス、ショーグレン症候群、自動免疫性皮膚疾 患などを含む自動免疫性疾患措置のための方法である。

以下余白 本発明のもうひとつ別の側面は、治療的に効果のある量の以下の構造式で示され る化合物で構成される化合物を投与するステップで構成される、慢性関節リウマ チ、多発性硬化症、重症筋無力症、糖尿病、葡萄網膜炎、循環性エリマド−デス 、ショーグレン症候群、自動免疫性皮膚疾患などを含む自動免疫性疾患措置のた めの方法である。

ここでＲ１はＨ，１−６の炭素を含むアルキル基およびアリール基で構成される グループから選択され、Ｒ１およびＲ８はＨ，ＯＨ，およびＯｆ：Ｈ，で構成さ れるグループから選択され、Ｒ４はＨまたは１−６の炭素を含むアルキル基で構 成されるグループから選択される。本発明を実施するために用し）ることができ る好ましい化合物は、メチル３−（４−ヒドロキシフェニル）−２−ヒドロキシ プロピオネート、ｎ−プロピル３−（４−ヒドロキシフェニル）−２−ヒドロキ シプロピオネート、ｎ−ブチル３−（４−ヒドロキシフェニル）−２−ヒドロキ シプロピオネート、３−（４−ヒドロキシフェニル）−２−プロペン酸、４−（ ４−ヒドロキシフェニル）−２−ブタノン、１（４−ヒドロキシフェニル）−３ −ペンタノン、メチル（４−ヒドロキシフェノキシ）アセテート、およびメチル ３−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−２−プロペノエート、そして以下の構 造式で示される化合物で構成されるグループから選択することができる。

以下余白 ここで、Ｒ１とＲ４はＨおよびＯＨで構成されるグループから選択され、Ｒ，、 Ｒ，およびＲ１はＨ，ＯＨ，ＯＣＨいアミノ、アルキルアミノおよび１−６の炭 素を含むアルキル基、アシロキシ、およびハロゲン類で構成されるグループから 選択され、Ｒ１はＨ，ＯＨ，ＯＣＨ，、アシロキシ、およびハロゲン類で構成さ れるグループから選択され、Ｒ′、およびＲ′、はＨ，ＣＨ，。

ＯＨ，ＯＣＨ，、３，４−ジヒドロキシフェニルメチレン、ｐ−ヒドロキシフェ ニルメチレン、および好ましくはアシロキシまたはハロゲン置換基で置換された 他のフェニル基で構成されるグループから選択され、Ｒ’Ｉｔ　Ｒ′、！　Ｒ’ １ｇ　Ｒ’ｌおよびＲ′。

はＨ，ＯＨ，ＣＨ，およびＯＣＨいアシロキシおよびハロゲン置換誘導体で構成 されるグループから選択される。本発明を実施するために用いることができる好 ましい化合物はフェニルメチレンケトン類、ニトロアルケン類、オーロン類、お よびカルコン類から選択することができる。

本発明の別の側面はフェニルメチレンケトン類、ニトロアルケン類、オーロン類 、およびカルコン類、およびその誘導体、化学的に関連性のある化合物、および 生理的に受け入れ可能なその塩などを含む′ＭｅＨＰＬＡの類似物で構成される 抗腫瘍剤の提供である。

本発明の別の側面はフェニルメチレンケトン類、ニトロアルケン類、オーロン類 、およびカルコン類、およびその誘導体、化学的に関連性のある化合物、および 生理的に受け入れ可能なその塩などを含むＭｅＨＰＬＡの類似物で構成される免 疫抑制剤の提供である。

本発明の別の側面は、ガン、自動免疫性疾患、移植片対宿主疾患および非悪性細 胞成長を抑止、あるいは予防するための予防剤の提供である。これらの予防剤は 上に述べたＭｅＨＰＬＡや、フェニルメチレンケトン類、ニトロアルケン類、オ ーロン類、およびカルコン類、およびその誘導体、化学的に関連性のある化合物 、および生理的に受け入れ可能なその塩などを含むＭｅＨＰＬＡの類似物で構成 される。

さらに別の目的、特徴、および利点は、開示のために提示される本発明の現在の 段階での好ましい実施例に関する以下の説明から明らかであろう。

図面の簡単な説明 図１は核タイプ■部位への［“Ｈ］エストラジオール結合に対するＭＶ−３，Ｍ Ｖ−１２およびＭＶ−８８の競合を示している。

図２は腋窩筋リンパ節核における核タイプ■部位の分析を示している。

図３はＭＣＦ−７ヒト乳ガン細胞増殖に対するＭＶ−３、ＭＶ−１２およびＭＶ −８８の影響を示している。

図４はイン・ビボでのマウス乳腺腫瘍に対する本発明の化合物の影響を示してい る。

図５はイン・ビボでのマウス乳腺腫瘍成長に対するＭＶ−１９゜ＭＶ−２０およ びＭＶ−２１の影響を示している。

図６はイン・ビボでのマウス乳腺腫瘍の成長に対するシクロデキストリン・カプ セル化ＭＶ−８８の影響を示している。

図７は自動免疫性葡萄網膜炎の発達の抑止を示している。

具体的な実施例の詳細な説明 定　義 「メチル３−（４−ヒドロキシフェニル）−２−ヒドロキシプロピオネート」は メチルｐ−ヒドロキシフェニルラクテートあるいはＭｅＨＰＬＡとしても知られ ている。　ｒＭｅＨＰＬＡＪという用語は、核タイプ■部位と結合し、そうする ことで細胞増殖を抑止するその類似物、化学的誘導体、および化学的に関連性の ある化合物を含めて意味している。

「化学的に関連性のある化合物」という用語は、ＭｅＨＰＬＡと構造的に関連し ており、本明細書中に開示されているｐ−りマル酸、ｐ−ヒドロキシフェニルブ タノン、（４−ヒドロキシフェノキシ）アセテートおよびアリールプロペンアル デヒド、アリールアリールエチニルケトン類、アリールブテンアルデヒド、アル キルアリールプロペニルケトン類、およびアリールプロペニルケトン類の誘導体 および類似物を意味している。

これらの化学的な関連性を有する化合物は上記化合物、およびそのエステル類、 エーテル類、ケトン類のシスおよびトランス異性体と、Ｏ原子の代わりにＳある いはＮを含んでいる誘導体を含んでいる。より具体的には、これら構造的に関連 した類似物および誘導体はＲｏがメチル、エチル、ｎ−プロピル、ｎ−ブチル、 イソプロピル、ｔｅｒｔ−ブチルあるいはアリール基を示し、Ｒ１とＲ，がＨ， ＯＨ，あるいはＯＣＲ，基を示し、Ｒ，はＨあるいは１−６の炭素のアルキル基 を示す化合物を含んでいる。これらＭｅＨＰＬＡと構造的に関連した化合物の各 クラスの特定の類似物はここに定義されているような生物学的活性（表■および ■）を有しており、したがって細胞増殖、腫瘍細胞成長の有効な抑制剤、および 免疫抑制剤としてＭｅＨＰＬＡと同じような役割を果すことが示されている。好 ましくは、本発明を実施する上で有効な類似物および化学的に関連性のある化合 物はフェニルメチレンケトン類、ニトロアルケン類、オーロン類、およびカルコ ン類などを含んでいる。最も好ましくは、これらの類似物は以下の構造式で示さ れる化合物で構成されるグループから選択される。

ここで、Ｒ１はＨ，ｌ−６の炭素を含むアルキル基、およびアリール基で構成さ れるグループから選択され、Ｒ３およびＲ１はＨ，ＯＨ１およびＯＣＨ，で構成 されるグループから選択され、Ｒ４はＨあるいは１−６の炭素を含むアルキル基 で構成されるグループから選択される０本発明を実施するために用いることがで きる好ましい化合物はメチル３−（４−ヒドロキシル）−２−ヒドロキシプロピ オネート、ｎ−プロピル３−（４−ヒドロキシフェニル）−２−ヒドロキシプロ ピオネート、ｎ−ブチル３−（４−ヒドロキシフェニル）−２−ヒドロキシプロ ピオネート、３−（４−ヒドロキシフェニル）−２−プロペン酸、４−（４−ヒ ドロキシフェニル）−２−ブタノン、１−（４−ヒドロキシフェニル）−３−ペ ンタノン、メチル（４−ヒドロキシフェノキシ）アセテート、およびメチル３− （３，４−ジヒドロキシフェニル）−２−プロペノエートで構成されるグループ から選択することができる。

本発明の別の側面は以下の構造式で構成されるグループから選択される化合物を 治療的に効果のある量だけ投与するステップで構成される、ガンおよび自動免疫 性疾患および移植片対宿主疾患などを含む免疫システムの病理的な状態を措置す る方法を提供する。

以下余白 ここでＲ１とＲ４はＨおよびＯＨで構成されるグループから選択され、Ｒ８およ びＲ，はＨ，ＯＨ，ＯＣＨ，、アミノ、アルキルアミノ、および１−６の炭素を 含むアルキル基、アシロキシ、およびハロゲン類で構成されるグループから選択 され、Ｒ。

はＨ，ＯＨ，ＯＣＨいアシロキシおよびハロゲン類で構成されるグループから選 択され、Ｒ′１とＲ′３はＨ，ＣＨ，、ＯＨ，ＯＣＨ，，３，４−ジヒドロキシ フェニルメチレン、ｐ−ヒドロキシフェニルメチレン、および好ましくはアシロ キシあるいはハロゲン置換基で置換された他の置換フェニル基で構成されるグル ープから選択され、Ｒ’ＩＴ　Ｒ’４ｆ　ＲＺｆ　Ｒ′□およびＲ′、はＨ２Ｏ Ｈ，ＯＣＨ，、アミノ、シアノ、１−６の炭素原子のアルキルアミノ基、アシロ キシ、ハロゲン類、およびａ−アジドおよびアジリジン誘導体、アシロキシ、お よびハロゲン置換誘導体で構成されるグループから選択される。本発明を実施す るために使うことができる好ましい化合物はフェニルメチレンケトン類、ニトロ アルケン類、およびカルコン類から選択することができる。

以下余白 本発明を実施するために最も好ましいフェニルメチルケトン類は以下のものを含 む。

Ｒ１およびＲ４はＨ，ＯＨ，アルコキシあるいはハロゲン類であり、Ｒ３とＲ， はＯＨ，ＯＣＨいアミノ、■−６の炭素原子のアルキルあるいはアルキルアミノ 基あるいはハロゲン類であり、Ｒ′１およびＲ′、はＨ，ＣＨ，、あるいはｐ− ヒドロキシ、３，４−ジヒドロキシ、アシロキシ、およびハロゲン環置換体を有 するフェニルメチレンであり、Ｒ′、はＨ，ＯＨ，ＯＣＨ，および１−６の炭素 原子からのアルキル基である。

最も好ましくは、本発明を実施するために用いることができるフェニルメチレン ケトン類は以下の構造式で構成されるグループから選択される。

Ｙ−１ Ｍ′ｖ−Ｉ　ＭＶ−１７ 本発明を実施するために最も好ましく用し１られるニトロアルケン類には以下の ようなものカマある。

本発明を実施するために最も好ましく用いられるオーロン類は以下のようなもの がある。

石−１９ＭＶ−２０ 以下余白 本発明を実施する上で最も好ましいカルコンには以下の構造式で示される組成物 が含まれる。

７−ヒドロキシカルコン　２’、４’、４−トリヒドロキシカルコン４−ヒドロ キシカルコン　４−４′−ジヒドロキシカルコンＭＶ−３５ＭＶ−４６ Ｖ−４７ ｒ個体」という用語は動物およびヒトを含めて意味するように使われている。

増殖しつつある細胞の成長の「生物学的に抑制」あるいは了抑制」という用語は 、部分的あるいは全体的抑制を含めて意味するように使われており、また、細胞 の増殖あるいは成長の速度の減少も意味して使われている。本発明による化合物 の生物学的に抑制効果を持つ投与量は、組織培養中の悪性腫瘍細胞成長、動物に おける子宮の成長（図１４および図１５参照）、あるいはＭａｒｋａｖｅｒｉｃ ｈ等がＣａｎｃｅｒ　Ｒｅ５ｅａｒｃｈ　４３　：　３２０８−３２１１　（１ ９８３）で述べているような動物における腫瘍成長に対するテスト化合物の影響 を評価することによって、あるいは当業者に公知の他の方法によって決めること ができる。これらの方法は本明細書中に、はとんど全文組み込まれている米国特 許１１ｈ２１９．６８０に述べられている。

「免疫抑制的」あるいは「免疫を抑制するＪあるいは「免疫システムの抑制」と いう用語は部分的、あるいは全体的な免疫抑制を含めて意味するように使われて おり、「異常なＪ免疫機能がより正常化されるような変化を含めて意味するよう に使われている。本発明の免疫抑制的効果を持つ投与量とはＧｅｒｙ等が（１９ ８６）　Ｉｎｖｅｓｔ、Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ、Ｖｉｓ、Ｓｃｉ、２７　：１２ ９６で述べているような実験的自動免疫性葡萄網膜炎の確立されたラット・モデ ルにおけるテスト化合物の影響を評価することによって、あるいは当業者に公知 の他の方法によって決めることができる。

「予防剤Ｊという用語は疾患、あるいは疾患の拡大の部分的あるいは全体的抑制 または予防に用いることが可能な薬剤を含めて意味するように使われており、ま た、疾患の予防として、あるいは疾患の予防的措置のために使われる薬剤を含め て意味するように用いられている。

本発明の方法で有益な化合物の投与は局所、腸外、経口、鼻孔内、静脈内、筋肉 内、皮下、あるいはその他の適切な手段により行うことができる。投与される量 は年齢、体重、同時並行的に行われる措置があればその種類、そしてその悪性腫 瘍や病理的免疫状態の性格に基づく。本発明の方法において有益な効果的化合物 は、経口投与のためのカプセル、タブレット、水溶液、懸濁液、あるいはエリキ シル剤、あるいは溶液、懸濁液または乳剤などの無味乾燥な溶液などの形態で投 与することができる。食塩水、あるいは燐酸塩緩衝食塩水などのいずれの不活性 基質でも好んで用いられ、あるいは本発明による方法で用いられるどの基質も、 適切な可溶特性を有している。

本発明による化合物は生物学的に有効な担体に入れることもできる。この生物学 的に有効な担体は、本発明による化合物が共存でき、投与される量で措置を受け る個体に対して毒性がないどのような溶剤も含んでいる。

最も好ましくは、本発明による化合物はカプセル化された化合物として投与され る。本発明の実施する上で効果的な化合物の多くは水に対する可溶性が低いので 、本発明の別の側面はシクロデキストリン、リボゾーム内にカプセル化された、 あるいはシラストリ・ツク・インブラント（ｓｉｌａｓｔｉｃ　ｉｍｐｌａｎｔ ）としての本発明による化合物の薬品伝送システムで構成されている。しかしな がら、本発明による化合物は他の方法によって、および当業者に公知の方法によ って他の化合物と共にカプセル化することもできる。

「抗腫瘍剤」という用語は、細胞成長を減らしたり、有効な量で該腫瘍細胞に投 与された場合にその腫瘍細胞の増殖を抑制したりする薬剤を含めて意味するよう に用いられる。

本発明のひとつの具体的な実施例は、ＭｅＨＰＬＡ、その類似物、化学的誘導体 、あるいは化学的に関連性のある組成物を含む抗腫瘍剤である。ＭｅＨＰＬＡ類 似物の具体的な事例は以下の構造式で示される化合物の誘導体である。

ここでＲ１はＨ，１−６の炭素を含むアルキル基およびアリール基で構成される グループから選択され、Ｒ１とＲ１はＨ２ＯＨおよびＯＣＨ，で構成されるグル ープから選択され、Ｒ４はＲ２１−６の炭素を含むアルキル基で構成されるグル ープから選択される。本発明の実施に用いることができる好ましい化合物はメチ ル３−（４−ヒドロキシフェニル）−２−ヒドロギシブロビオネー　ト、ｎ−プ ロピル３−（４−ヒドロキシフェニル）−２−ヒドロキシプロピオネート、ｎ− ブチル３−（４−ヒドロキシフェニル）−２−ヒドロキシプロピオネート、３− （４−ヒドロキシフェニル）−２−プロペン酸、４−（４−ヒドロキシフェニル ）−２−ブタノン、１−（４−ヒドロキシフェニル）−３−ペンタノン、メチル （４−ヒドロキシフェノキシ）アセテート、およびメチル３−（３，４−ジヒド ロキシフェニル）−２−プロピオネートで構成されるグループから選択すること ができる。

このタイプの化合物のひとつの具体例はＲ１がＣＨ，、ＲおはＨ，Ｒ，はＯＨ， そしてＲ４がＨである場合である。これは分離され、特徴付けが行われ、本発明 によるものと同一と確認された天然に発生する内発性化合物である。その類似物 の他の例は、Ｒ基がエチル、ｎ−プロピル、ｎ−ブチル、イソプロピル、ｔａｒ ｔ−ブチルあるいはアリール基と置き換えられ、Ｒ８および／またはＲ５はＨ， ＯＨ，あるいはＯＣＨ，基と置き換えられ、Ｒ，はＨまたは１−６の炭素のアル キル基と置き換えられる化合物を含んでいる。これらのエステル類はＤおよびＬ 形態で存在している。

化合物の他のグループは式を有する誘導体化合物を含んでいる。

これらの化合物の例はｐ−フマル酸、３−（４−ヒドロキシフェニル）−２−プ ロペン酸、そしてそのエステル類である。

これらの物質はシスおよびトランス異性体として存在する。

フマル酸の場合、Ｒ１とＲ１は水素であり、Ｒ１はＯＨである。

別のエステル類としては、Ｒ１がメチル、エチル、ｎ−プロピル、ｎ〜ブチル、 イソプロピル、ｔｅｒｔ−ブチルあるいはアリール、Ｒ３および／またはＲ，は Ｈ，ＯＨあるいはＯＣＲ，基である。

別の類似物としてはカフェイン酸、３−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−２ −プロペン酸で、これらの場合Ｒ１はＨｌそしてＲ１とＲ，は両方ともＯＨであ る。

以下余白 抗腫瘍活性を有する他の化合物は以下の構造式を有する化合物などのような１− （４−ヒドロキシフェニル）−３−ブタノン誘導体である。

ここで、Ｒ１はＨ，１−６の炭素を含むアルキル基、およびアリール基で構成さ れるグループから選択され、Ｒ３とＲ。

はＨ，ＯＨおよびＯＣＨ，で構成されるグループから選択され、Ｒ，はＨまたは １−６の炭素を含むアルキル基から構成されるグループから選択される。本発明 の実施のために用いることができる好ましい化合物は、メチル３−（４−ヒドロ キシフェニル）−２−ヒドロキシプロピオネート、ｎ−プロピル３−（４−ヒド ロキシフェニル）−２−ヒドロキシプロピオネート＊８、ｎ−ブチル３−（４− ヒドロキシフェニル）−２−ヒドロキシプロピオネート、３−（４−ヒドロキシ フェニル）−２−プロペン酸、４−（４−ヒドロキシフェニル）−２−ブタノン 、１−（４−ヒドロキシフェニル）−３−ペンタノン、メチル（４−ヒドロキシ フェノキシ）アセテート、およびメチル３−　（３゜４−ジヒドロキシフェニル ）−２−プロピオネートで構成されるグループから選択することができる。

ケトン誘導体はＲ１の位置にメチル、エチル、ｎ−プリピル、ｎ−ブチル、イソ プロピル、ｔｅｒｔ−ブチル、あるいはアリール基、そしてＲ，とＲ１の位置に Ｈ，ＯＨ１または０ＣＲ１を持ち、そして最も好ましくはＲ１の位置にＨｌそし てＲ，の位置にＯＨを有する化合物を含んでいる。

さらに、構造式に示されているように、芳香体とケト基の間にあるＣＨ，基の数 は変えることができる。化合物の特殊な具体例としては１−（４−ヒドロキシフ ェニル）−３−ペンタノンおよび１−（４−ヒドロキシフェニル）−３−ブタノ ンである。

これらの化合物はタイプ■部位に結合すること、および臨床アッセイで抗腫瘍お よび抗増殖活性を有する。

ラットの子宮で抗増殖作用を示す別のグループの化合物は以下の構造式で示され る。

これらの化合物は（４−ヒドロキシフェノキシ）酢酸のエーテルと結合した類似 物、例えば、メチル（４−ヒドロキシフェノキシ）アセテートである。これらの 化合物のすべてはＲ１がＨ，Ｃ，−Ｃ，のアルキル炭素鎖あるいはアリール基、 Ｒ，およびＲ，はＨ，ＯＨまたはＯＣＨ，の類似物を含んでいる。このフェノキ シ化合物のさらなるバリエーションは、例えば、Ｒ１がＨあるいはＣ，−Ｃ，の アルキル炭素鎖、あるいはアリ−ル基、Ｒ３およびＲ８がＨ，ＯＨ，あるいはＯ ＣＲ，である以下の構造物で示される化合物である。

以下の構造式で示される化合物も有益である。

Ｒ，はＣ，−Ｃ，のアルキル鎖、あるいはアリール基、Ｒ３とＲ，はＨ，ＯＨ１ あるいはＯＣＲ，である。

以下余白 抗増殖作用を示す別の化合物のグループは、以下の一般的構造式で示すことがで きる。

ここで、Ｒ１はＨ，１−６の炭素を含むアルキル基、そして置換あるいは未置換 アリール基で構成されるグループからのものであり、Ｒ３とＲ１はＨ，ＯＨ１お よびＯＣＨ，で構成されるグループから選択される。

以下余白 本発明の実施に用いることができるこのグループの好ましい化合物は以下の構造 式で示される化合物である。

ｒ−ヒドロキシカルコン　γ、４’、４−トリヒドロキシカルコン４−ヒドロキ シカルコン　４−４７−シヒドロキシカルコンＭＶ−３５ＭＶ−４６ Ｖ−４７ 本発明を実施するための最も好ましいこのグループの化合物は３−（４−ヒドロ キシフェニル）−１−フェニル−２−プロペン−１−オン、および４−（４−ヒ ドロキシフェニル）−３−ブテン−２−オン、それらの類似物や化学的誘導体お よび化学的に関連性のある化合物、そして薬学的に受け入れ可能なそれらの塩で ある。

本発明の他の実施例は臨床的に効果のある量のＭｅＨＰＬＡ　、その類似物、化 学的誘導体、あるいは化学的に関連性のある化合物を投与するステップで構成さ れるガンを措置する方法を含んでいる。この化合物は上に述べた抗腫瘍化合物の いずれであってもよい。

ガンの措置のために用いられることに加えて、これらの抗ガン剤はタイプ■核エ ストロゲン結合部位を含む細胞における細胞増殖および成長の抑制剤としても有 益である。

これらの化合物はタイプ■核エストロゲン結合部位に結合して、細胞成長を規制 する。これらの化合物の結合に敏感な具体的増殖細胞としては、子宮、乳腺、子 宮腫瘍、および乳ガンなどエストロゲン応答組織を含んでいる。上に述べた化合 物はヒト乳ガン細胞の増殖能力を抑止し、これによって、この疾病の効果的な治 療を提供する。良性前立腺肥大も上に述べた化合物が措置に有益に使える増殖性 組織疾患の別の例である。

以下余白 腫瘍抗増殖性および免疫抑制作用を示す別のグループの化合物は、以下の一般的 構造式で示すことができる。

ここで、Ｒ８はＨ，１−６の炭素を含むアルキル基、そして置換あるいは未置換 アリール基で構成されるグループからのものであり、Ｒ３とＲ１はＨ，ＯＨおよ びＯＣＨ，で構成されるグループから選択される。本発明の実施に用いることが できるこのグループの好ましい化合物は以下の化合物である。

？−ヒドロキシカルコン　２’、４’、４−トリヒドロキシカルコン４−ヒドロ キシカルコン　４−４′−ジヒドロキシカルコンＭＶ−３５ＭＶ（６ 本発明を実施するために最も好ましい化合物は２′−ヒドロキシカルコン、２’ 、４’、４−トリヒドロキシカルコン、４−ヒドロキシカルコン、４−４′−ジ ヒドロキシカルコン、ＭＶ−３５。

ＭＶ−４６およびＭＶ−４７、類似物、化学的誘導体と化学的に関連性のある化 合物、そして薬理学的に受け入れ可能なその塩である。

本発明の別の実施例は臨床的に効果のある量のＭｅＨＰＬＡ、フェニルメチレン ケトン類、ニトロアルケン類、オーロン類およびチャシコン類を含むその類似物 、あるいはそれらの誘導体や化学的に関連性のある化合物を含んでいる。この化 合物は上に述べた抗腫瘍あるいは免疫抑制性化合物のいずれであってもよい。

実施例１ ［”Ｈ］エストラジオール結合アッセイ種々のラット組織は核タイプ］部位への ［”Ｈ］エストラジオール結合を阻止する内発性リガンドを有している。しかし ながら、この化合物はエストロゲン受容体への［°Ｈ］エストラジオール結合に 対しては干渉しない。エストラジオールを移植したラットからの子宮組織がホス ト動物から切り出された。この子宮核は以前にＭａｒｋｅｖｉｃｈ、　Ｂ、　Ｍ 等がＪ、　Ｂｉｏｌ。

Ｃｈｅｗ、　２５８　：　１１６６３−１１６７１　（１９８３）で述べ、本明 細書にも参照例として開示されている方法に従って調製された。子宮核はエスト ロゲンを移植した成熟したラットから卵巣切除によって用意された。洗浄された 核ベレットは新鮮な子宮相当分１０ｍｇ／ｄの濃度に希釈された。この濃度では 、内発性抑制因子の影響は最低のレベルであったが、核タイプ■部位はじＨ］エ ストラジオールとの結合は最大のレベルであった。

これらの核のアリコツトと種々の濃度の本発明による化合物が４℃の温度下、１ ２ｕＭジエチルスチルベストロールを含む［”Ｈ］エストラジオールおよびそれ を含まない［°Ｈ］エストラジオール４０ｍＭの存在下で約６０分培養された。

この条件下では核タイプ■部位はタイプ１部位に干渉されることなく定量的に測 定される。この核ペレットを１ｍ１２のｌｏｍＭ　Ｔｒｉｓ−１，５ｍＭ　ＥＤ ＴＡに再懸濁させ、遠心分離し、エタノール抽出し、カウントを行った。この結 果が、バッファー・コントロールと比較しての結合した［“Ｈ］エストラジオー ルのパーセンテージ、あるいは１００％結合した場合は０％抑止とし、約４５、 　ＯＯＯｃｐｍ相当とする抑止のパーセンテージとして表された。

図１はこれらの化合物の濃度が１０ｎＭ以上の場合、［”Ｈ］エストラジオール 核タイプ■部位に反応することを示す代表的なデータを示している。図１に示さ れている結果は各試料に関する４回の反復実験における３組決定因子の平均＋標 準誤差を示している。

結合アッセイはマウス乳腺腫瘍およびヒト乳ガン試料が非悪性組織に対して高い レベルの未結合核タイプ■部位を有していることを示している。正常な乳腺はマ ウス乳腺腫瘍に比較して非常に高いレベルの総合抑制因子活性を含んでいる。

ヒト乳ガンは低いレベルの抑制因子を含んでいる。したがって、この証拠は悪性 腫瘍組織が高いレベルの未結合核タイプ■部位を有しており、抑制因子活性が不 足していることを示している。抑制因子活性におけるこの不足はこれらの腫瘍組 織群で観察された未結合核タイプ■部位のレベルの高さ、および増殖、細胞成長 およびＤＮＡ合成の速度の速さの理由を示している。

ラット子宮などのような正常な組織および正常なマウス乳腺に二つの内発性抑制 因子（ａおよびｆ）が存在していることはこれまでにも明らかにされている（本 明細書に引例として取り入れられている米国特許出願Ｎｃｔ０７９，１９９）　 、　ｆ−ピーク成分と未結合核タイプ■結合部位の増大との間の高い相関性もラ ット、マウスおよびヒト乳腺腫瘍において示されている。

図１に示されているデータは阿Ｖ−３、ＭＶ−１２、およびＭＶ−８８などのよ うな化合物が、ＭｅＨＰＬＡの場合と同様、非常に高い結合親和性（Ｋｄ−１− １−１Ｏｎで核タイプ■部位に結合することを示している。表Ｉに示しであるす べての化合物に関して同様の抑制曲線が得られた。結合相互作用に関するＫｉが 判定された。

このＫｉは核タイプ■結合部位への［”Ｈ］エストラジオール結合を５０％抑制 する薬品の濃度である。表工に示されているすべての化合物のデータは結合親和 性と細胞成長抑制作用との高い相関性を示している。

以下余白 表■　核タイプ■結合部位、イン・ビトロでのＭＣＦ−７ヒト乳ガン細胞増殖、 およびイン・ビボでのマウス乳腺腫瘍成長に対するＭＶ−化合物の影響 フェニルメチレンケトン類 ＭＶ−４３４，００不活性　未テスト ＭＶ−３０，０６１，００＋＋＋ ＭＶ−１７０，５００１，６０未テストＭＶ−１８０，８００１，００未テスト ニトロアルケン類 阿Ｖ−Ｎｌ　７１０．０　１，４０　未テストＭＶ−Ｎ３　０．２２０　０．８ ０　未テストオーロン類 ＭＶ−１９１０，０８００ネガティブ 阿Ｖ−２０２，８００１，９０＋ 阿Ｖ−２１０，０８０，７８＋＋＋ カルコンーシクロデキストリン複合体 阿Ｖ−８８ＣＤ　未テスト　３．００　＋＋＋ａＫｉは核タイプ■部位に対する ［“Ｈ］エストラジオール結合を５０％抑制するのに必要な化合物の濃度（ａＭ 　）である（図５参照）。ｂＫｉはＭＣＦ−７ヒト乳ガン細胞増殖を５０％抑制 するために必要な化合物の濃度（ｌａｇ／ｄ）である（図５参照）。

０この化合物はイン・ビボでのよく分化されたマウス乳腺肉腫の成長を抑制した （図７−９参照）。

核タイプ■結合部位が免疫システムの組織にも存在しているかどうかをテストす るために、膝窩筋すンパ節核が作成され、核タイプ■結合部位の分析が［”Ｈ］ エストラジオール交換で行われた。膝窩筋リンパ節は成熟した雌のマウスから取 り出され、無関係な組織から分離され、計量され、ＴＥバッフｙ　−（１０ｍＭ 　Ｔｒｉｓ　；　１．５ｍＭ　ＥＤＴＡ、　ｐＨ７，４）内で均一化された。こ のホモジェネートを８００ｘｇで２０分遠心分離して、核ベレットを得た。この 核ペレットを再懸濁およびＴＥバッファー（８００Ｘ　ｇ　Ｘ　７分）で遠心分 離することによって３回洗浄し、そして最終的に洗浄された核試料が最終量３０ ｍｇの組織湿重量相当分／ｄ　（８，６ｍ）に希釈され、タイプ■結合部位に関 してビＨ］エストラジオール交換（Ｍａｒｋａｖｅｒｉｃｈ等、Ｅｎｄｏｃｒｉ ｎｏｌｏｇｙ１０９　：　６２−６９　（１９８１）　）　によってアッセイさ れた。簡単に言えば、この操作は核懸濁液のアリコツト（２５０ｄ）を［”Ｈ］ エストラジオール（４−４ＯｎＭ）の存在（全体結合）あるいは不存在（非特殊 結合、ＮＳ）の条件下で、４℃の温度下で６０分間培養するステップで構成され ている。培養後、その核を再懸濁およびＴＥバッファー内での遠心分離を４回繰 り返して洗浄し、最終的に洗浄された核ペレットを１−のエタノール（１００％ ）で抽出した。このエタノール抽出物を小びんに移して、液体シンチレーション ・カウンティングの方法でその放射能を測定した。特殊結合はその系内の全体結 合のための非特殊結合（ＮＳ）の取り出すことによって調べられた。結果はリン パ節組織１グラム湿重量に結合した［”Ｈ］ニストラジオールのピコモルで示さ れ、１ピコモルは７０２６５ｃｐｍで示された。図２は膝窩筋リンパ節における 核タイプ■エストロゲン結合部位の存在を示している。膝窩筋リンパ節内のこれ らタイプ■結合部位は、ラットの子宮など他の組織で観察されるような部位に対 するのと同様の結合親和性（Ｋｄ＞２ＯｎＭ）を有しており、他の非エストロゲ ン化、非悪性組織で測定されるものと同じ数で存在していた。膝窩筋リンパ節は ほとんどリ　ンパ腫細胞だけを含んでおり、これらの細胞はしたがってＭｅＨＰ ＬＡ関連類似物および誘導体によって核タイプ■部位との結合作用を通じて抑制 される。

実施例２ イン・ビトロでの細胞増殖の抑制 Ａ、ＭＣＦ−７ヒト乳ガン細胞増殖アッセイ腫瘍成長反応性に関するアッセイを 行うために、組織培養体中のＭＣＦ−７ヒト乳ガン細胞株が用いられた。当業者 には、これがヒト・ガン細胞の成長および増殖に対するホルモンおよび薬品の影 響を阻止するための優れたモデル・システムであることが分かるであろう、ＭＣ Ｆ−７細胞はタイプＩおよび核タイプ■エストロゲン受容体部位の両方を有して おり、エストロゲン・ホルモンに対して増殖的な方法で反応する。さらに、それ らはタモキシフェンなど良く知られた抗エストロゲンによって抑制されるいＭＣ Ｆ−７細胞が３０鵬ベトリ皿に５ｘｔｏ’細胞／デイツシユの割合で入れられ、 約ｌＯ％の木炭でストリップした胎仔性仔ウシ結成を含んだダルベツコの修正イ ーグルス培養液内で約４８時間培養された。この時間中に、細胞はプラスチック 皿に付き、約２４時間で細胞が２倍化する程度の速度で指数関数的に成長した。

この細胞は４８時間程度皿にくっついたままにされ、培養液が交換された（「ゼ ロ口」）、これらの細胞は約６日間指数関数的に成長させられた。ゼロ口の時点 で、これらの細胞は、テスト対象の化合物、例えば、メチルｐ−ヒドロキシフェ ニルラクテートエタノールが１０ｕｌ内で０．１−１０ｕｇ／ｄの範囲の量で処 理された。培養液は約２日日と４日目に交換された。培養液が変えられる際、コ ントロールとテスト溶液も再び加えられた。６日目に細胞が取り出され、ヘモサ イトメーターでカウントされ、１プツシユあたりのＤＮＡ成分がブルドン−アッ セイで判定された（Ｂｕｒｔｏｎ、　Ｋ、。

Ｂｉｏｃｈｅｍ、Ｊ、　６２　：　３１５−３２３．１９５６）　、その結果が 措置後６日目の１デイツシユあたりの細胞数あるいはＤＮＡ成分（ｕｇ／ディツ シュ）で示された。その結果を図３に示す。

ＭＣＦ−７細胞増殖に対する化合物ＭＶ−３、ＭＶ−１２およびＭＶ−８８の影 響の評価が行われた。ＭＣＦ−７細胞は２Ｘ１０’細胞／ウエルの割合で、１０ ％胎仔性仔ウシ血清を含んだダルベツコの修正イーグルス培養液（ＤＭＥＭ）に 入れられた。２４時間後、これらの細胞が１０ｕｌエタノールに溶解された１１ ０２−１０５ｎ／＋１２の範囲の濃度で処理された。コントロールは同様の１の エタノールで処理された。細胞数は処理後４８時間の時点で調べられた６図３に 示されているように、ＭＶ−３、ＭＶ−１２、およびＭＶ−８８もＭＣＦ−７ヒ ト乳ガン細胞の増殖を抑制した。Ｙ−７９網膜芽細胞腫、ＭＥ−１８０ヒト子宮 頚部ガン細胞およびヒト黒色腫細胞の増殖も抑制された（データは示されていな い）、、表■に示されているすべての化合物に関する抑制曲線から得られた同様 のデータを用いて、細胞抑制に関するに１が調べられた。抑制に関するＫｉは細 胞増殖を５０％抑制するのに必要な薬剤（μｇ／ｄ）の濃度として定義されてい る。

表■　チャルコンおよびその誘導体によるヒト黒色腫（ＨＳＯ２９４細胞）およ び乳ガン（ＭＣＦ−７細胞）細胞増殖の抑制化　合　物　黒色腫細胞ａＭＣＦ− ７細胞８ＭＶ−３９０，９０，９ ＭＶ−４６５，０５，Ｏ ＭＶ−４７０，９６，Ｏ ＭＶ−７２３，０３，Ｏ ＭＶ−８８１，５１，０ ８数値は抑制のためのＫｉを示しており、Ｋｉとは細胞増殖をコントロール（未 処理細胞）と比較して５０％抑制するのに必要な濃度（μｇ／ｄ）である。

抑制の効果は可逆的である。細胞が回復するのに約２４時間かかり、ｆ−ピーク 抑制因子除去後完全な単層に再成長するまでに７−２４日間かかった。

Ｂ、黒色腫 ヒト黒色腫細胞を用いて類似の実験が行われ、ＭＶ−３９゜ＭＶ−４６，ＭＶ− ４７，ＭＶ−７２およびＭＶ−８８はこれらの細胞の増殖を比較的低い濃度（表 ■）で抑制した。したがって、カルコン類（ＭＶ−７２およびＭＶ−８８）　、 およびソ（７）　シフ　／　（ＭＶ−４６゜ＭＶ−４７）およびアジド（ＭＶ− ３５”）誘導体も悪性腫瘍細胞の増殖を抑制した。

腫瘍細胞はｆ−ピーク抑制因子を代謝、あるいは不活性化するので、腫瘍細胞増 殖が非常に急速に進行すると考えられている。このことはメチルｐ−ヒドロキシ フェニルラクテートが正常な組織のタイプ■部位に結合しているのが認められ、 悪性腫瘍組織内では認められないという事実によっても裏付けられている。細胞 増殖は核タイプ■部位に結合するリガンドによって調節される。未結合部位の数 が増殖の速度を決める。腫瘍細胞では未結合タイプ■部位の数が増大し、したが って、その成長は通常その細胞内に存在する内発性抑制因子の量によっては抑制 されないのである。したがって、腫瘍細胞増殖は通常の細胞増殖（例えば、未結 合核タイプ］部位が少ない、あるいはない細胞）と比較して、急激に加速される のである。これら急速に増殖する細胞は、本発明で述べられている抑制剤を治療 効果のある量だけ投与することにより、正常の状態に戻し、あるいは細胞増殖を 減らすことができる。ヒト黒色腫細胞（Ｈ５Ｏ２９４細胞）に対する影響の評価 に用いられた実験手順はＭＣＦ−７細胞に関して上に述べたのと同様であった。

実施例３ イン・ビボでの乳腺腫瘍成長の抑制 イン・ビボでの腫瘍成長に対する影響を評価するために、移植可能なマウス乳腺 腫瘍モデル・システムが用いられた。

この腫瘍モデルおよび抗層瘍剤としてのアッセイのためのその使用はＭａｋｅｖ ｅｒｉｃｈ等によりＣａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ、４３　：　３２０８　（１９８３） に述べられており、本明細書内に引例として紹介されている。

簡単にいうと、遺伝子化合が同一の、移植された乳腺腫瘍を持った雌のマウスが 以下に述べるような実験グループに分けられた。！ｌ瘍のサイズが０．５Ｘ０． ５　（長さ×）程度になった時（日Ｏ）、それらの動物を完全なシラスティック （ｓｉｌａｓｔｉｃ）カプセル（コントロール）、あるいはテスト化合物を２５ Ｉ１ｇ含んだシラスティック・カプセルで処理した。ｍ瘍の大きさが処置後の指 定された時間にモニターされた。これらの移植片には毎日、その化合物が４５０ ｎｇずつ継続的に投与された。図４はＭＶ−３、ＭＶ−１２およびＭＶ−８８が コントロールと比較してこれらの腫瘍の成長を抑制したことを示している。同様 に、ＭＶ−１９，ＭＶ−２０およびＭＶ−２１の結合親和性（表Ｉ）と抗腫瘍活 性（図１９）との間の高い相関性が観察された。

実施例４ 子宮域アッセイ ラットの子宮はエストロゲンに対して反応性が非常に高く、このホルモンは子宮 細胞肥大、増殖、およびＤＮＡ合成を、１回の注入後２４時間以内に開始させる 。核タイプ■部位のエストジオール刺激はこうした反応が起きるための前提条件 である。このアッセイは食塩水−エタノール伝播体、ニストラジオール−１７ｆ およびテスト対象の化合物を未成熟の雌のラットに注入するプロセスを含んでい る。

コントロールのラットには食塩水−エタノール伝播体およびエストラジオール− １７ｆだけが注入された。このラットは２４時間後に殺され、その子宮の乾重量 と湿重量が調べられた。

この湿重量と乾重量の測定値は正確に定義されたエストロゲン作用の生化学的エ ンド・ポイントであり、細胞増殖およびＤＮＡ合成にける変化の直接の指標であ る。種々の化合物を用いてのこうした実験の結果を表ｍに示す。

以下余白 表■　子宮成長および核タイプ■部位結合抑制に対するＭｅＨＰＬＡ類似物およ び関連化合物の影響ｇｊ＆３話４−．．ｅＪ″０Ｘｙ７Ｘ）ｈ　ｔ　９０　、Ｏ ｏ、８３−　（４−ヒドロキシフェニル）　−２−ヒドロキシプロペン、　ｏ、 ｏ　ｓｏ、。

メチル３−　（３，４−ジヒドロキシ フェニル）　−２−プロピオネート　７°・０　１・０メチル３−　（４−ヒド ロキシ−３− メトキシフェニル）　−２−プロペノエート　５６・０　６・０フツト子宮域ア ツセイにおけるエストラジオール刺激を阻止するその化合物（１０μｇ）の能力 で判定。

５核タイプ■結合部位を５０％抑制する化合物の濃度（ｎＭＸ１０″″り。

子宮域アッセイを用いてのイン・ビボでの追加測定を行えば細胞増殖を抑制する これら化合物の有用性が示される。ヒドロキシフェニルラフ酸は別として、ｐ− ヒドロキシフェニルラクテートを少量投与すると、成熟していないラットでの子 宮成長のエストラジオール刺激が阻止される（図１４および表■参照）。しかし ながら、ヒドロキシフェニルラフ酸の投与量が高いと、一定の部分的拮抗現象が 見られる。ヒドロキシフェニルラフ酸がメチルｐ−ヒドロキシフェニルラクテー トと比較して２０分の１の親和性で核タイプ■部位に結合することが知られてい るので、これは驚くべきことではない。

これまでの結果は、核タイプ■部位の結合しているものと未結合のものとの比率 が、細胞成長の規制において重要な役割を果たし、正常な細胞における主な結合 抑制因子はメチルｐ−ヒドロキシフェニルラクテート（Ｍａｒｋａｖｅｒｉｃｈ 等、１９８８）である。

これらのデータは腫瘍細胞はメチルｐ−ヒドロキシフェニルラグテートを不活性 化する能力を有していることを示しているので、本発明で述べられているその類 似物や化学的な関連性を有する化合物がこうした不活性化を避けるために合成さ れた。したがって、芳香環上に種々の側環および種々の置換基を有する化合物の 投与は子宮の成長の抑制という結果をもたらしたのである。

Ｃ一端末メチル基を含むひとつの化合物である１−（４−ヒドロキシフェニル） −３−ブタノン（ｐ−ヒドロキシフェニルブタノン）は、メチル基がＣ−Ｃ結合 と関係しているので、エストラジオールの影響は受けない。この化合物はより安 定しており、したがって培養体およびイン・ビボでより良い抑制因子としての効 果を発揮する。さらに、１−（４−ヒドロキシフェニル）−３−ブタノンを用い ての実験は、それが高い親和性で核タイプ■部位に結合し、未成熟のラットに注 入されると子宮成長のエストラジオール刺激を阻止する。したがって、１−（４ −ヒドロキシフェニル）−３−ブタノンは細胞成長の効果的な抑制剤であり、細 胞増殖の調節剤である。

本発明による化合物の多く、特にフェニルメチルケトン類、ニトロアルケン類、 およびカルコン類は注射用基剤として一般的に用いられるような水溶液への溶解 性が非常に低い。この非溶解性は薬剤投与および臨床的な使用の可能性との関係 で大きな問題を提出する。薬剤の溶解性と投与法を改善するために、それらの化 合物をカプセル化して投与しやすくすることもできる。本発明において有益な薬 剤投与システムとして、例えば、リポゾームへの組み込みやシクロデキストリン へのカプセル化などがある。

実施例５ 本発明による化合物の投与法の改善 シクロデキストリンは親水性化合物を代謝し、消化器管での吸収性を改善する（ Ｓｚｅｒｊｉ、　（１９８２）　“Ｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎｓ　ａｎｄＴｈｅ ｉｒ　Ｉｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｃｏｍｐｌｅｘｅｓ″、　Ａｋａｄｅｍｉａｉ　Ｋ ｉａｄｏ、　Ｂｕｄａｐｅｓｔ。

Ｈｕｎｇａｒｙ）。ケルセチン（ＭＶ−８８に密接に関連している）などのバイ オフラボノイド類は最近この方法で投与されるようになった（Ｙａｎ等、　（１ ９８８）　Ｚｈｏｎｇｃａｏｙｏａ、　１９　：　４９２）　、２−ヒドロキシ プロピルｆ−シクロデキストリンおよびポリｆ−シクロデキストリン（？−シク ロデキストリンの可溶性形態）が細胞毒性を持っていないことは動物で証明され ており（ＰｉｔｈａおよびＰｉｔｈａ　（１９８５）　Ｊ、　Ｐｈａｒｍ、　Ｓ ｃｉ。１９　：　４９２）　、そして−定程度ヒトにおいても実証されている（ Ｐｉｔｈａ、Ｊ、　（１９８４）Ｔｈｉｒｄ　Ｉｎｔｅｒｎａｔ、Ｓｙｎ＋ｐｏ ｓ、　Ｏｎ　Ｃ１ａｔｈｒａｔｅ　Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ、　Ｔｏｋｙｏ。

ｐ、６９）　、これらの化合物はＭＹ−８８関連エノン類およびカルコン類の有 効性と投与における確実性を向上させた。シクロデキストリンは水溶性アルカリ 内で酸化プロピレンを使って濃縮され、Ｐｉ　ｔｈａおよびＰｉｔｈａ　（１９ ８５）が述べたような２−ヒドロキシデキストリンを得た。この薬剤を２−ヒド ロキシシクロデキストリンを水または食塩水に溶かした水溶液に過剰に（２倍過 剰、例えば、１００ｍｇ　２−ヒドロキシデキストリンに対して２００ｍｇ）加 えた。この薬剤はシクロデキストリンをメタノールに溶かした溶液に加えられた 。次にこの懸濁液が室温で攪拌され、過剰の非可溶化薬剤は（Ｐｉｔｈａおよび Ｐｉｔｈａ（１９８５）　Ｊ、　Ｐｈａｒｍ、　Ｓｃｉ、　１９　：　４９２） に述べられているような手順で遠心分離および超ろ過によって除去された。シク ロデキストリン試料内にカプセル化された薬剤の定量化は高性能液体クロマトグ ラフィー（ＨＰＬＣ）によって実行された。簡単にいうと、この手順は乾燥され たシクロデキストリン−薬剤混合物の重量を量り、その試料の知られている量（ １ｍｇ／ｍ１２）をエタノールに溶解する手順で構成されている。この手順によ り、ＭＶ−８８がＨＰＬＣで定量化できるようにその薬剤がシクロデキストリン から抽出された。　ＨＰＬＣ分析を行うために、分がっている量のＭＶ−８８標 準（１−２０ｕｇ）　、あるいは一定量（５−５０ｕｌ）のシクロデキストリン −ＫＶ−８８試料をＷａｔｅｒｓ　ｕＢｏｎｄａｐａｋ　Ｃ１８カラムに注入し 、１分あたり１ｄの流量で水：メタノール−（３０：　７０）を使って溶出され た。知られているＭＶ−８８標準を基準としての２６８ｎＭで検出されたサンプ ル・ピークのエリアを調べることで、シクロデキストリン内にカプセル化された ＭＶ−８８の濃度の定量化ができた。ＭＶ−８８標準およびサンプル調剤注射の ピーク・エリアはピークの高さくＣ２）を測定し、その高さの半分のところでの ピークのＩｌｌ　（ａｎ）をかけて（面積：Ｃ１１ｌｔ）判定された。この方法 で、標準曲線が構成され（ＭＶ−８８１１度対Ｏｎ２６８ｍ定値）　、サンプル 内ノＭＶ−８８（７）１１度（ＯＤ２６８測定値）が標準曲線の勾配からめられ た。標準的な値はシクロデキストリンＭＹ−８８複合体１２ｍｇあたり約１ｍｇ であった。

シクロデキストリンにカプセル化された場合の腫瘍成長を抑制する上での本発明 による化合物の有効性をテストするために、シクロデキストリンにカプセル化さ れたＭＶ−８８は食塩水ビヒクルに溶かされ、乳腺腫瘍をもったマウスに皮下注 射で投与された。ＭＶ−８８は水性状態下では可溶性はない。しかシナカラ、Ｍ Ｙ−８８シ’；Ｆ　Ｏデキストリン　ン（ＭＤ−８８ＣＤ　：表■）は投与量に 依存した形でマウスの乳腺腫瘍を抑制した（図６）。

ジメチルスルフォキサイド食塩水などのような他のビヒクルを使って注射で投与 した場合、ＭＶ−８８はこの腫瘍の成長の抑制において、シクロデキストリン・ カプセル化後に投与された場合と比較して、それ程効果はなかった。しかしなが ら、シラスティック・インブラント（図４）の方法で継続的なやり方で投与され た場合、ＭＶ−８８は腫瘍成長をがなり抑制した。

転移可能な乳腺腫瘍をもっているマウスにテスト化合物を２５ｍｇ含んでいるシ ラスティック・カプセルが埋め込まれた。

コントロールには空のカプセルが埋め込まれ、腫瘍のサイズ（長さＸ幅）が埋め 込み後、０，３．６および１４日後に判定された。これらのカプセルは１日あた り４５０ｎｇのテスト化合物を放出した（体重１ｋｇあたり１０−１５１ｇ／ｋ ｇ程度）。措置を受けた個体とコントロールの個体を比較して、体重の上での大 きな変化は実験の全期間を通じて認められなかった。図４はシラスティック・イ ンブラント内に入れられたＭＶ−３、ＭＶ−１２およびＭＶ−８８を使ってのマ ウス乳腺腫瘍の措置によってイン・ビボでの乳腺腫瘍の成長の完全な抑制がもた らされた、し７かしながら、ＭＶ−１９およびＭＶ−２０を含んでいるシラステ ィック・カプセルを使っての転移可能な乳腺腫瘍を持っているマウスの措置は、 そのシラスティックはカプセルからＭＶ−１９およびＭＶ−２０が効果的に放出 されないので、コントロール群と比較して成長抑制の上でそれ程大きな変化は認 められなかった。したがって、これらの化合物は水性注射ビヒクルでの可溶性を 強化するシクロデキストリン・カプセル化手順を用いて投与された。こうした構 造活性研究は、結合親和性とＭＶ−１９、ＭＶ−２０およびＭＶ−２１の場合に 観察される腫瘍成長抑制との間に確実な構造／活性関係があることを示した。Ｍ Ｙ−１９とＭＶ−２０は核タイプ■部位に高い親和性で結合せず、乳腺腫瘍成長 を抑制しなかった。しかしながら、ＭＶ−２１は比較的高い親和性で結合するこ とが認められ、ＭＶ−２１での措置は腫瘍成長をかなり抑制した。（図５）投与 方法および投与量を変えれば腫瘍成長の完全な抑制がもたらされる可能性がある 。

実例６ 免疫抑制作用 多くの抗ガン剤は免疫抑制作用を有している（ＳｅｌｄｉｎおよびＳｔｅｉｎｂ ｅｒｇ　（１９８８）、　”Ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ　Ｂａ５ｉｃ　Ｐｒ１ｎ ｃｉｐｌｅｓａｎｄ　Ｃ１１ｎｉｃａｌ　Ｃｏｒｒｅｌａｔｅｓ”、（Ｇａｌｉ ｎ、　Ｊ、　Ｉ、、　Ｇｏｌｄｓｔｅｉｎ。

Ｍ、　Ｓｎｙｄｅｒｍａｎ、　Ｒｏ、　ｅｄｓ、）　Ｒａｖｅｎ　Ｐｒｅｓｓ、 　Ｌｔｄ、、ニューヨーク州）。免疫抑制剤は種々の自動免疫性疾患の措置にお いて臨床的に有効であることが分かっている。米国においては、すべての失明の １０−１５％は直接、あるいは間接的に葡萄網膜路または葡萄網膜炎によって引 き起こされる。葡萄網膜炎に対して臨床的な干渉が開始されなければ、回復不可 能な損傷が起こり、網膜機能の低下および／または失明にむすびついてしまうで あろう。現在の段階ではコルチコステロイドの投与が葡萄網膜炎に対する最も効 果的な方法である。しかしながら、コルチコステロイドの使用には眼球内圧力の 昂進や白内障の形成などの副作用が伴う。インターロイキン−２受容体表現との 相互作用によってＴ−リンパ腫の増殖を阻止するシクロスポリン−Ａ　（ｃｓＡ ）を含むこれまで用いられてきた免疫抑制剤は肝臓毒性あるいは腎臓毒性などの 悪い副作用を生み出す。

ＭＶ−３など本発明による化合物の免疫抑制作用に関するテストが実験的自動免 疫性葡萄網膜炎の確立されたラット・モデルを用いて行われた（Ｇｅｒｙ等、（ １９８６）　Ｉｎｖｅｓｔ、　Ｏｐｔｈａｍｏｌ。

Ｖｉ、ｓ、Ｓｃｊ、、　ｔ０３　：　１５５９）　、体文が１００＝２０ｃ）グ ７ムの雌のルイス・う・リドが子ウシまｌ′、はヒト分−了のアミノ酸位置５２ ３・〜５３８に対応４フｌンター・フォトリセブター・レチノイド結合蛋白質（ ［ＢＰ）を用いて免疫化された。＃８９Ｇと呼ばれるこのシ・−ケンスはアミノ 酸配列ＬＴＳＨＲＴＡＴＡＡＥＥＦＡＦＬを有している。これらのラットは２． Ｏｍｇ／ｄのＸ、結核性Ｈ３７Ｒａを含んでいる完全なＦｒｅｕｎｄのアジュバ ントに乳化した５０ｍｇのＩＲＢＰ　＃　８９６のシングル・フート注射によっ て免疫化された。これらのラットには同時に腹腔的注射によって１０ｘｉ０９の 熱で殺したＢ、　ｐｅｒｔｕｓｓｉｓ菌も与えられた。コントロールの、措置を 受けなかった個体は免疫後９あるいは１００日目、重大な、細菌性前方葡萄網膜 炎および後方葡萄網膜炎を発生させた。実験の対象となった方の動物は０，３お よび７日にｌｏｎｇのＭＶ−３を腹腔内注封された。　ＭＶ−３の強力な免疫抑 制作用は図７の実験で示されている。図７ａおよび７ｂはインターフォトリセプ ター・レチノイド結合蛋白質（ＩＲＢＰ）ペプチド＃８９６によるルイス・ラッ トの免疫後９日目に重大なり１ｌａｔｅｒａｌ、　ｐａｎｕｖｅｉｔｉｓが１０ ０％誘発されることを示している。対照的に、ＭＶ−３で措置されたラット（図 ７０）の疾患は完全の阻止された。これらの結果は、通常の開始ポイントでの自 動免疫反応の抑圧が行われ、６日目以後に軽度の疾患が発生発展すること、そし てこの現象がＭＶ−３の活発なレベルが減少した後に起きることを示している。

さらに、ＭＶ−３で措置したラットの足跡免疫化部位での典型的な炎症反応も抑 制された。こうした結果は、ＭＶ−Ｊおよびそれに関連した化合物も抗炎症特性 を有しでいることを示唆している。Ｍｖ−３および本発明による糺の化合物は、 リューマチ性関節炎、タハツ性硬化症、重大る無力症、糖尿病　甲状り、肥大、 Ｎ環性エリマド−デス、シコーゲン症候群、自動免１’を性皮膚疾患などを含む 他の自動免疫性疾患を措置し、モして／または予防する有効な方法を提供してく れる。さらに、ＭＶ−３および関連する化合物は移植片対宿主疾患の措置や移植 拒否反応の予防のための有効な手段を提供してくれる。

当業者は、本発明が上に述べたような課題を実行し、目的と利点、およびそれら と本質的に関連した目的や利点を達成するのに適合していることがすぐ理解でき るであろう。ここの述べられている化合物、方法、および手順は現在の段階では 好ましい実施例の代表的なものであり、具体例として述べられているのであって 、本発明の範囲を限定するために紹介されているのではない。本発明の精神を逸 脱せず、以下に添付する特許請求の範囲で定義されるような変更や他の使用方法 も当業者は容易に思いつくであろう。

また、当業者は上記の課題を実行し、上記の目的や利益、およびそれらと本質的 に関連した目的や利益を達成するのに適合していることを容易に理解できるであ ろう、ここに述べられている化合物、方法、手順および手法は現在の段階で好ま しい実施例の代表的なものであり、具体例として紹介されているのであって、本 発明の範囲を限定するために紹介されているのではない。本発明の精神を逸脱せ ず、以下に添付する特許請求の範囲で定義されるような変更や他の使用方法も当 業者は容易に思いつくであろう。

以下余白 ＦＩＧＵＲＥ　１ １０’　１０２　１０３　１０’　＋ｏｓ〔競合因子）ｎＭ ＦＩＧＵＲＥ　２ 〔３Ｈ〕エストラジオ−＃（ｎＭ） ＦＩＧＵＲＥ　３ ＦＩＣＩＩＲＥ　４ Ｂ暑 ＦＩＧＵＲＥ　５ ＦＩＧＵＲＥ　６ 乳腺腫瘍成長のＭＶ−８８ＣＤ抑制 ｏ　ｏ、ｓ　ｓ、ｏ　ｔｏ、。

ＭＹ−８８注射（ＭＧ） −補正書の写しく翻訳文）提出書（特許法第１８４条の８）

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．以下の構造式で表される化合物のグループから選択される化合物を臨床的に 効果のある量投与するステップで構成されるガンを措置する方法。 ▲数式、化学式、表等があります▼，▲数式、化学式、表等があります▼，▲数 式、化学式、表等があります▼，▲数式、化学式、表等があります▼，及び▲数 式、化学式、表等があります▼ここで、Ｒ１とＲ４はＨとＯＨで構成されるグル ープから選択され、Ｒ■，Ｒ■とＲ■はＨ，ＯＨ，ＯＣＨ２、アミノ、アルキル アミノおよび１−６の炭素を含むアルキル基、アシロキシ、およびハロゲン類で 構成されるグループから選択され、Ｒ■はＨ，ＯＨ，ＯＣＨ２、アシロキシ、お よびハロゲン類で構成されるグループから選択され、Ｒ′１およびＲ′２はＨ， ＯＨ，ＯＣＨ２、アミノ、シアノ、１−６の炭素を含むアルキルあるいはアルキ ルアミノ基、アシロキシ、ハロゲン類、ａ−アジドおよびアジリディン誘導体、 ３，４−ジヒドロキシフェニルメチレン、ｐ−ヒドロキシフェニルメチレンおよ び好ましくはアシロキシまたはハロゲン置換基で置換された他のフェニル基で構 成されるグループから選択され、Ｒ′２，Ｒ′４，Ｒ′■，Ｒ′′１およびＲ′ ′２はＨ，ＯＨ，ＯＣＨ２、アミノ、シアノ、１−６の炭素原子のアルキルある いはアルキルアミノ基、アシロキシ、ハロゲン類、ａ−アジド、アジリディン、 アシロキシおよびハロゲン置換誘導体で構成されるグループから選択される。 ２．化合物が以下の構造式で構成されるグループから選択される、特許請求の範 囲第１項の方法。 ▲数式、化学式、表等があります▼及び▲数式、化学式、表等があります▼ここ で、Ｒ１とＲ４はＨ，ＯＨ、アシロキシ、あるいはハロゲン類であり、Ｒ２とＲ ３はＯＨ，ＯＣＨ２、アミノ、１−６の炭素原子のアルキルまたはアルキルアミ ノ基、またはハロゲン類であり、Ｒ′１およびＲ′２はＨ，ＣＨ２、あるいはｐ −ヒドロキシ、３，４−ジヒドロキシ、アシロキシおよびハロゲンの核置換基を 有するフェニルメチレン、そしてＲ′３はＨ，ＯＨ，ＣＨ２および１−６の炭素 原子からのアルキル基である。 ３．化合物が以下の構造式で表される化合物である特許請求の範囲第１項の方法 。 ▲数式、化学式、表等があります▼ ここでＲ１とＲ４はＨとＯＨで構成されるグループから選択され、Ｒ２とＲ３は Ｈ，ＯＨ，ＯＣＨ２、アミノ、アルキルアミノ、および１−６の炭素を含むアル キル基で構成されるグループから選択され、Ｒ′１およびＲ′２はＨ，ＣＨ２， ＯＨ，ＯＣＨ２、３，４−ジヒドロキシフェニルメチレン、ｐ−ヒドロキシフェ ニルメチレン、および他の置換フェニル基で構成されるグループから選択される 。 ４．化合物が以下の構造式で示される化合物である、特許請求の範囲第１項の方 法。 ▲数式、化学式、表等があります▼ ここで、Ｒ１とＲ４はＨおよびＯＨで構成されるグループから選択され、Ｒ２， Ｒ３およびＲ′３はＨ，ＯＨ，ＯＣＨ２、アミノ、アルキルアミノおよび１−６ の炭素を含むアルキル基で構成されるグループから選択され、そしてＲ′１とＲ ′２はＨ，ＣＨ２，ＯＨ，ＯＣＨ２，３，４−ジヒドロキシフェニルメチレン、 ｐ−ヒドロキシフェニルメチレン、および他の置換フェニル基で構成されるグル ープから選択される。 ５．化合物が以下の構造式で示される特許請求の範囲第１項の方法。 ▲数式、化学式、表等があります▼ ここで、Ｒ１，Ｒ３およびＲ■はＨ，ＯＨ，ＯＣＨ２、アミノ、１−６の炭素原 子のアルキルあるいはアルキルアミノ基、アシロキシおよびハロゲン類、そして Ｒ■はＨまたは１−６の炭素原子のアルキル基である。 ６．化合物が以下の構造式で示される特許請求の範囲第１項の方法。 ▲数式、化学式、表等があります▼ ここで、Ｒ１−Ｒ４およびＲ′１−Ｒ′４はＨ，ＯＨ，ＯＣＨ２、アミノ、１− ６の炭素原子のアルキルあるいはアルキルアミノ基である。 ７．化合物が以下の構造式で示される特許請求の範囲第１項の方法。 ▲数式、化学式、表等があります▼ Ｒ１−Ｒ４，Ｒ′１−Ｒ′４、Ｒ′′１およびＲ′′■はＨ，ＯＨ，ＯＣＨ２、 アミノ、シアノ、１−６の炭素原子のアルキルまたはアルキルアミノ基、アシロ キシ、ハロゲン類、ａ−アジド、アリジディンおよびハロゲン置換誘導体である 。 ８．以下の構造式で示される化合物で構成されるグループから選択される化合物 を生物学的に抑制効果を持つ量投与するステップで構成されるタイプロ核エスト ロゲン結合部位を含む増殖細胞の成長を抑制する方法。 ▲数式、化学式、表等があります▼，▲数式、化学式、表等があります▼，▲数 式、化学式、表等があります▼，▲数式、化学式、表等があります▼，及び▲数 式、化学式、表等があります▼ここで、Ｒ１およびＲ４はＨとＯＨで構成される グループから選択されＲ２，Ｒ３およびＲ４はＨ，ＯＨ，ＯＣＨ２、アミノ、ア ルキルアミノおよび１−６の炭素を含むアルキル基、アシロキシおよびハロゲン 類で構成されるグループから選択され、Ｒ２はＨ，ＯＨ，ＯＣＨ２、アシロキシ 、およびハロゲン類で構成されるグループから選択され、Ｒ′１とＲ′２はＨ， ＣＨ２，ＯＨ，ＯＣＨ２，３，４−ジヒドロキシフェニルメチレン、ｐ−ヒドロ キシフェニルメチレン、および他の好ましくはアシロキシまたはハロゲン置換基 で置換されたフェニル基で構成されるグループから選択され、Ｒ′２，Ｒ′４， Ｒ′３，Ｒ′′１およびＲ′′２はＨ，ＯＨ，ＯＣＨ２、アミノ、シアノ、１− ６の炭素原子のアルキルまたはアルキルアミノ基、アシロキシ、ハロゲン類、ａ −アジド、アリジディン、アシロキシおよびハロゲン置換誘導体で構成されるグ ループから選択される。 ９．化合物が以下の構造式で示される化合物で構成されるグループから選択され る、特許請求の範囲第８項の方法。 ▲数式、化学式、表等があります▼及び▲数式、化学式、表等があります▼１０ ．化合物が以下の構造式で示される化合物で構成されるグループから選択される 、特許請求の範囲第９項の方法。 ▲数式、化学式、表等があります▼及び▲数式、化学式、表等があります▼ここ で、Ｒ１とＲ４はＨとＯＨで構成されるグループから選択されＲ２，Ｒ３および Ｒ′■はＨ，ＯＨ，ＯＣＨ２、アミノ、アルキルアミノ、および１−６の炭素を 含むアルキル基で構成されるグループから選択され、そして、Ｒ′１とＲ′２は Ｈ，ＣＨ２，ＯＨ，ＯＣＨ２，３，４−ジヒドロキシフェニルメチレン、ｐ−ヒ ドロキシフェニルメチレンおよび他の置換フェニル基で構成されるグループから 選択される。 １１．化合物が以下の構造式で示される特許請求の範囲第９項の方法。 ▲数式、化学式、表等があります▼ ここで、Ｒ１とＲ４はＨおよびＯＨで構成されるグループから選択されＲ２とＲ ３はＨ，ＯＨ，ＯＣＨ２、アミノ、アルキルアミノおよび１−６の炭素を含むア ルキル基で構成されるグループから選択され、そしてＲ′１とＲ′２はＨ，ＣＨ ２，ＯＨ，ＯＣＨ２，３，４−ジヒドロキシフェニルメチレン、ｐ−ヒドロキシ フェニルメチレンおよび他の置換フェニル基で構成されるグループから選択され る。 １２．化合物が以下の構造式で示される特許請求の範囲第８項の方法。 ▲数式、化学式、表等があります▼ ここで、Ｒ１とＲ４はＨ，ＯＨ、アシロキシあるいはハロゲン類Ｒ２とＲ３はＯ Ｈ，ＯＣＨ２、アミノ、１−６の炭素原子のアルキルあるいはアルキルアミノ基 あるいはハロゲン類であり、Ｒ′１とＲ′２はＨ，ＣＨ２あるいはｐ−ヒドロキ シ、３，４−ジヒドロキシ、アシロキシおよびハロゲン核置換基を有するフェニ ルメチレンであり、Ｒ′２はＨ，ＯＨ，ＣＨ２，ＯＣＨ２および１−６の炭素原 子からのアルキル基である。 １３．化合物が以下の構造式で示される特許請求の範囲第８項の方法。 ▲数式、化学式、表等があります▼ ここで、Ｒ１，Ｒ２およびＲ３はＨ，ＯＨ，ＯＣＨ２、アミノ、１−６の炭素原 子のアルキルあるいはアルキルアミノ基、アシロキシ、およびハロゲン類であり 、Ｒ４はＨまたは１−６の炭素原子を有するアルキル基である。 １４．化合物が以下の構造式で示される特許請求の範囲第８項の方法。 ▲数式、化学式、表等があります▼ ここで、Ｒ１−Ｒ４およびＲ′１−Ｒ′４はＨ，ＯＨ，ＯＣＨ２、アミノ、１− ６の炭素原子のアルキルまたはアルキルアミノ基である。 １５．化合物が以下の構造式で示される特許請求の範囲第８項の方法。 ▲数式、化学式、表等があります▼ ここで、Ｒ１−Ｒ４およびＲ′１−Ｒ′■，Ｒ′′１およびＲ′′■はＨ，ＯＨ ，ＯＣＨ２、アミノ、シアノ、１−６の炭素原子のアルキルまたはアルキルアミ ノ基、アシロキシ、ハロゲン類、ａ−アジド、アリジディン、アシロキシおよび ハロゲン置換誘導体である。 １５．該増殖細胞が子宮、乳腺、子宮腫瘍および乳腺腫瘍で構成されるグループ から選択されるエストロゲン反応性組織である特許請求の範囲第８項の方法。 １６．該エストロゲン反応性組織がヒト乳ガン細胞である特許請求の範囲第１５ 項である方法。 １７．以下の構造式で示される化合物で構成されるグループから選択される化合 物を臨床的に効果のある量投与するステップで構成される、良性前立腺肥大を措 置するための方法。 ▲数式、化学式、表等があります▼，▲数式、化学式、表等があります▼，▲数 式、化学式、表等があります▼，▲数式、化学式、表等があります▼，及び▲数 式、化学式、表等があります▼ここで、Ｒ１とＲ４はＨとＯＨで構成されるグル ープから選択されＲ２，Ｒ３およびＲ４はＨ，ＯＨ，ＯＣＨ２、アミノ、アルキ ルアミノ、および１−６の炭素を含むアルキル基、アシロキシ、およびハロゲン 類で構成されるグループから選択され、Ｒ■はＨ，ＯＨ，ＯＣＨ２、アシロキシ 、およびハロゲン類で構成されるグループから選択され、Ｒ′１とＲ′２はＨ， ＣＨ２，ＯＨ，ＯＣＨ２，３，４−ジヒドロキシフェニルメチレン、ｐ−ヒドロ キシフェニルメチレンおよび好ましくはアシロキシまたはハロゲン置換基で置換 された他のフェニル基、Ｒ′■，Ｒ′４，Ｒ′■，Ｒ′′１およびＲ′′２はＨ ，ＯＨ，ＯＣＨ２、アミノ、シアノ、１−６の炭素原子のアルキルまたはアルキ ルアミノ基、アシロキシ、ハロゲン、ａ−アジド、アリジディン、アシロキジ、 およびハロゲン置換誘導体で構成されるグループから選択される。 １８．化合物が以下の構造式で示される化合物で構成されるグループから選択さ れる特許請求の範囲第１７項の方法。 ▲数式、化学式、表等があります▼及び▲数式、化学式、表等があります▼ここ で、Ｒ１およびＲ４はＨ，ＯＨ、アシロキシまたはハロゲン類、Ｒ２とＲ３はＯ Ｈ，ＯＣＨ２、アミノ、１−６の炭素原子のアルキルあるいはアルキルアミノ基 、またはハロゲン類、Ｒ′１およびＲ′２はＨ，ＣＨ２、あるいはｐ−ヒドロキ シ、３，４−ジヒドロキシ、アシロキシ、およびハロゲン核置換基を有するフェ ニルメチレンであり、Ｒ′２はＨ，ＯＨ，ＣＨ２，ＯＣＨ２および１−６の炭素 原子を有するアルキル基である。 １９．化合物が以下の構造式で示される化合物である、特許請求の範囲第１７項 の方法。 ▲数式、化学式、表等があります▼ ここで、Ｒ１とＲ４はＨとＯＨで構成されるグループから選択されＲ■とＲ２は Ｈ，ＯＨ，ＯＣＨ２、アミノ、アルキルアミノおよび１−６の炭素原子を含むア ルキル基で構成されるグループから選択され、そしてＲ′１とＲ′３はＨ，ＯＨ ，ＯＣＨ２，３，４−ジヒドロキシフェニルメチレン、ｐ−ヒドロキシフェニル メチレンおよび他の置換フェニル基で構成されるグループから選択される。 ２０．化合物が以下の構造式で示される化合物である、特許請求の範囲第１７項 の方法。 ▲数式、化学式、表等があります▼ ここで、Ｒ１とＲ４はＨとＯＨで構成されるグループから選択されＲ２，Ｒ３お よびＲ′■はＨ，ＯＨ，ＯＣＨ２、アミノ、アルキルアミノおよび１−６の炭素 を含むアルキル基で構成されるグループから選択され、そしてＲ′１とＲ′２は Ｈ，ＣＨ２，ＯＨ，ＯＣＨ２，３，４−ジヒドロキシフェニルメチレン、ｐ−ヒ ドロキシフェニルメチレンおよび他の置換フェニル基で構成されるグループから 選択される。 ２１．化合物が以下の構造式で示される化合物である特許請求の範囲第１７項の 方法。 ▲数式、化学式、表等があります▼ ここで、Ｒ１，Ｒ■およびＲ■はＨ，ＯＨ，ＯＣＨ２、アミノ、１−６の炭素原 子のアルキルまたはアルキルアミノ基であり、Ｒ■はＨあるいは１−６の炭素原 子のアルキル基である。 ２２．化合物が以下の構造式で示される化合物である特許請求の範囲第１７項の 方法。 ▲数式、化学式、表等があります▼ ここでＲ１−Ｒ４とＲ′１−Ｒ′■はＨ，ＯＨ，ＯＣＨ２、アミノ、１−６の炭 素原子のアルキルまたはアルキルアミノ基である。 ２３．該化合物が以下の構造式で示される化合物である特許請求の範囲第１７項 の方法。 ▲数式、化学式、表等があります▼ Ｒ１−Ｒ４，Ｒ′１−Ｒ′４，Ｒ′′１およびＲ′′２はＨ，ＯＨ，ＯＣＨ２、 アミノ、シアノ、１−６の炭素原子のアルキルまたはアルキルアミノ基、アシロ キシ、ハロゲン類、ａ−アジド、アジリデイン、アシロキシおよびハロゲン置換 誘導体である。 ２４．以下の構造式で示される化合物で構成されるグループから選択される化合 物を臨床的に効果のある量投与する方法。 ▲数式、化学式、表等があります▼，▲数式、化学式、表等があります▼，▲数 式、化学式、表等があります▼，▲数式、化学式、表等があります▼，及び▲数 式、化学式、表等があります▼ここで、Ｒ１とＲ４はＨとＯＨで構成されるグル ープから選択されＲ２，Ｒ３およびＲ４はＨ，ＯＨ，ＯＣＨ２、アミノ、アルキ ルアミノおよび１−６の炭素を含むアルキル基、アシロキシ、およびハロゲン類 で構成されるグループから選択され、Ｒ■はＨ，ＯＨ，ＯＣＨ２、アシロキシお よびハロゲン類で構成されるグループから選択され、Ｒ′１とＲ′２はＨ，ＣＨ ２，ＯＨ，ＯＣＨ２，３，４−ジヒドロキシフェニルメチレン、ｐ−ヒドロキシ フェニルメチレンおよび好ましくはアシロキシまたはハロゲン置換基で置換され た他のフェニル基、Ｒ′■，Ｒ′４，Ｒ′■，Ｒ′′１およびＲ′′２はＨ，Ｏ Ｈ，ＯＣＨ２、アミノ、シアノ、１−６の炭素原子のアルキルまたはアルキルア ミノ基、アシロキシ、ハロゲン、ａ−アジド、アリジディン、アシロキシ、およ びハロゲン置換誘導体で構成されるグループから選択される。 ２５．以下の構造式で示される化合物で構成されるグループから選択される化合 物を生物学的に抑制効果のある量投与するステップで構成される増殖細胞の成長 を抑制する方法。 ▲数式、化学式、表等があります▼，▲数式、化学式、表等があります▼，▲数 式、化学式、表等があります▼，▲数式、化学式、表等があります▼，及び▲数 式、化学式、表等があります▼ここで、Ｒ１とＲ４はＨとＯＨで構成されるグル ープから選択されＲ２，Ｒ３およびＲ４はＨ，ＯＨ，ＯＣＨ２、アミノ、アルキ ルアミノおよび１−６の炭素を含むアルキル基、アシロキシおよびハロゲン類で 構成されるグループから選択され、Ｒ■はＨ，ＯＨ，ＯＣＨ２、アシロキシおよ びハロゲン類で構成されるグループから選択され、Ｒ′１とＲ′２はＨ，ＣＨ２ ，ＯＨ，ＯＣＨ２，３，４−ジヒドロキシフェニルメチレン、ｐ−ヒドロキシフ ェニルメチレンおよび好ましくはアシロキシまたはハロゲン置換基で置換された 他のフェニル基、Ｒ′３，Ｒ′４，Ｒ′■，Ｒ′′１およびＲ′′２はＨ，ＯＨ ，ＯＣＨ２、アミノ、シアノ、１−６の炭素原子のアルキルまたはアルキルアミ ノ基、アシロキシ、ハロゲン、ａ−アジド、アリジディン、アシロキシ、および ハロゲン置換誘導体で構成されるグループから選択される。 ２６．以下の構造式で示させる化合物で構成されるグループから選択される化合 物を臨床的に効果のある量投与するステップで構成される、自動免疫性疾患を措 置するための方法。 ▲数式、化学式、表等があります▼，▲数式、化学式、表等があります▼，▲数 式、化学式、表等があります▼，▲数式、化学式、表等があります▼，及び▲数 式、化学式、表等があります▼ここで、Ｒ１とＲ４はＨとＯＨで構成されるグル ープから選択されＲ３、Ｒ２およびＲ■はＨ，ＯＨ，ＯＣＨ２、アミノ、アルキ ルアミノおよび１−６の炭素を含むアルキル基、アシロキシおよびハロゲン類で 構成されるグループから選択され、Ｒ■はＨ，ＯＨ，ＯＣＨ２、アシロキシおよ びハロゲン類で構成されるグループから選択され、Ｒ′１とＲ′２はＨ，ＣＨ２ ，ＯＨ，ＯＣＨ２，３，４−ジヒドロキシフェニルメチレン、ｐ−ヒドロキシフ ェニルメチレンおよび好ましくはアシロキシまたはハロゲン置換基で置換された 他のフェニル基、Ｒ′３，Ｒ′４，Ｒ′■，Ｒ′′１およびＲ′′２はＨ，ＯＨ ，ＯＣＨ２、アミノ、シアノ、１−６の炭素原子のアルキルまたはアルキルアミ ノ基、アシロキシ、ハロゲン、ａ−アジド、アリジディン、アシロキシ、および ハロゲン置換誘導体で構成されるゲループから選択される。 ２７．化合物が以下の構造式で示される化合物で構成されるグループから選択さ れる特許請求の範囲第２６項の方法。 ▲数式、化学式、表等があります▼及び▲数式、化学式、表等があります▼ここ で、Ｒ１とＲ４はＨ，ＯＨ、アシロキシあるいはハロゲン類でありＲ■およびＲ ■はＯＨ，ＯＣＨ２、アミノ、１−６の炭素原子のアルキルあるいはアルキルア ミノ基あるいはハロゲン類であり、Ｒ′１およびＲ′２はＨ，ＣＨ２あるいはｐ −ヒドロキシ、３，４−ジヒドロキシ、アシロキシおよびハロゲン核置換基であ り、そしてＲ′■はＨ，ＯＨ，ＣＨ２，ＯＣＨ２および１−６の炭素原子からの アルキル基である。 ２８．化合物が以下の構造式で示される化合物である特許請求の範囲第２６項の 方法。 ▲数式、化学式、表等があります▼ ここで、Ｒ１とＲ４はＨ，ＯＨ、アシロキシあるいはハロゲン類であり、Ｒ２よ びＲ３はＯＨ，ＯＣＨ２、アミノ、１−６の炭素原子のアルキルあるいはアルキ ルアミノ基あるいはハロゲン類であり、Ｒ′１およびＲ′３はＨ，ＣＨ２あるい はｐ−ヒドロキシ、３，４−ジヒドロキシ、アシロキシおよびハロゲン核置換基 であり、そしてＲ′２はＨ，ＯＨ，ＣＨ２，ＯＣＨ２および１−６の炭素原子か らのアルキル基である。 ２９．化合物が以下の構造式で示される化合物である特許請求の範囲第２６項の 方法。 ▲数式、化学式、表等があります▼ ここで、Ｒ１とＲ４はＨ，ＯＨ、アシロキシあるいはハロゲン類であり、Ｒ２お よびＲ３はＯＨ，ＯＣＨ２、アミノ、１−６の炭素原子のアルキルあるいはアル キルアミノ基あるいはハロゲン類であり、Ｒ′１およびＲ′２はＨ，ＣＨ２ある いはｐ−ヒドロキシ、３，４−ジヒドロキシ、アシロキシおよびハロゲン核置換 基であり、そしてＲ′■はＨ，ＯＨ，ＣＨ２，ＯＣＨ２および１−６の炭素原子 からのアルキル基である。 ３０．化合物が以下の構造式で示される特許請求の範囲第２６項の方法。 ▲数式、化学式、表等があります▼ ここで、Ｒ１，Ｒ２およびＲ■はＨ，ＯＨ，ＯＣＨ２、アミノ、１−６の炭素原 子のアルキルまたはアルキルアミノ基であり、Ｒ■はＨあるいは１−６の炭素原 子のアルキル基である。 ３１．化合物が以下の構造式で示される特許請求の範囲第２６項の方法。 ▲数式、化学式、表等があります▼ ここで、Ｒ１−Ｒ４およびＲ′１−Ｒ′■はＨ，ＯＨ，ＯＣＨ２、アミノ、１− ６の炭素原子のアルキルまたはアルキルアミノ基である。 ３２．化合物が以下の構造式で示される化合物で構成されるグループから選択さ れる特許請求の範囲第２６項の方法。 ▲数式、化学式、表等があります▼ ここで、Ｒ１−Ｒ４およびＲ′１−Ｒ′■およびＲ′′２はＨ，ＯＨ，ＯＣＨ２ 、アミノ、シアノ、１−６の炭素原子のアルキルあるいはアルキルアミノ基、ア シロキシ、ハロゲン類、ａ−アジド、アジリディン、アシロキシ、およびハロゲ ン置換誘導体である。 ３３．該疾病が、リューマチ性関節炎、多発性硬化症、重症筋無力症、糖尿病、 甲状腺肥大、葡萄網膜炎、循環性エリマトーデス、Ｓｊｏｒｇｉｎｓ症候群、自 動免疫性皮膚疾患、および移植片対宿主疾患と、器官および組織移植拒絶反応で 構成されるグループから選択される、特許請求の範囲第２６−３２項のいずれか の方法。 ３４．２−（ヒドロキシベンジリデン）−５−メチル−シクロペンタノン（ＭＶ −１）、２，６−ｂｉｓ（４−ヒドロキシベンジリデン）−４−メチル−シクロ ヘキサノン（ＭＶ−１７）、２，６−ｂｉｓ（３，４−ジヒドロキシベンジリデ ン）−４−メチルシクロヘキサン（ＭＶ−１８）、４−ヒドロキシ−∫−メチル −∫−ニトロスチレン（ＭＶ−Ｎ１）、３，４−ジヒドロキシ−∫−メチル−∫ −ニトロスチレン（ＭＶ−Ｎ３）、アウロン（ＭＶ−１９）、４′−ヒドロキシ アウロン（ＭＶ−２０）、３，４′−ジヒドロキシアウロン（ＭＶ−２１）、２ ′−ヒドロキシカルコン（ＭＶ−２２）、２′，４′，４−トリヒドロキシカル コン（ＲＶ−４０）、４−ヒドロキシカルコン（ＭＶ−８８）、ａ−アジド−２ ′−ヒドロキシカルコン（ＭＶ−３５）、３，４−ジヒドロキシ−４′−シアノ カルコン（ＭＶ−４６）および４′−シアノカルコン（ＭＶ−４７）で構成され るゲループから選択される化合物を臨床的に効果のある量投与するステップで構 成される、ガンを措置するための方法。 ３５．２−（ヒドロキシベンジリデン）−５−メチル−シクロペンタノン（ＭＶ −１）、２，６−ｂｉｓ（４−ヒドロキシベンジリデン）−４−メチル−シクロ ヘキサノン（ＭＶ−１７）、２，６−ｂｉｓ（３，４−ジヒドロキシベンジリデ ン）−４−メチルシクロヘキサン（ＭＶ−１８）、４−ヒドロキシ−∫−メチル −∫−ニトロスチレン（ＭＶ−Ｎ１）、３，４−ジヒドロキシ−∫−メチル−∫ −ニトロスチレン（ＭＶ−Ｎ３）、アウロン（ＭＶ−１９）、４′−ヒドロキシ アウロン（ＭＶ−２０）、３，４′−ジヒドロキシアウロン（ＭＶ−２１）、２ ′−ヒドロキシカルコン（ＭＶ−２２）、２′，４′，４−トリヒドロキシカル コン（ＲＶ−４０）、４−ヒドロキシカルコン（ＭＶ−８８）、ａ−アジド−２ ′−ヒドロキシカルコン（ＭＶ−３５）、３，４−ジヒドロキシ−４′−シアノ カルコン（ＭＶ−４６）および４′−シアノカルコン（ＭＶ−４７）で構成され るグループから選択される化合物を生物学的に抑制効果のある量投与するステッ プで構成される、タイプＩＩ核エストロゲン結合部位を含む増殖細胞の成長を抑 制する方法。 ３６．２−（ヒドロキシベンジリデン）−５−メチル−シクロペンタノン（ＭＶ −１）、２，６−ｂｉｓ（４−ヒドロキシベンジリデン）−４−メチル−シクロ ヘキサノン（ＭＶ−１７）、２，６−ｂｉｓ（３，４−ジヒドロキシベンジリデ ン）−４−メチルシクロヘキサン（ＭＶ−１８）、４−ヒドロキシ−∫−メチル −∫−ニトロスチレン（ＭＶ−Ｎ１）、３，４−ジヒドロキシ−∫−メチル−∫ −ニトロスチレン（ＭＶ−Ｎ３）、アウロン（ＭＶ−１９）、４′−ヒドロキシ アウロン（ＭＶ−２０）、３，４′−ジヒドロキシアウロン（ＭＶ−２１）、２ ′−ヒドロキシカルコン（ＮＶ−２２）、２′，４′，４−トリヒドロキシカル コン（ＲＶ−４０）、４−ヒドロキシカルコン（ＭＶ−８８）、ａ−アジド−２ ′−ヒドロキシカルコン（ＭＶ−３５）、３，４−ジヒドロキシ−４′−シアノ カルコン（ＭＶ−４６）および４′−シアノカルコン（ＭＶ−４７）で構成され るグループら選択される化合物を臨床的に効果のある量だけ投与するステップで 構成される、良性前立腺肥大を措置するための方法。 ３７．２−（ヒドロキシベンジリデン）−５−メチル−シクロペンタノン（ＭＶ −１）、２，６−ｂｉｓ（４−ヒドロキシベンジリデン）−４−メチル−シクロ ヘキサノン（ＭＶ−１７）、２，６−ｂｉｓ（３，４−ジヒドロキシベンジリデ ン）−４−メチルシクロヘキサン（ＭＶ−１８）、４−ヒドロキシ−∫−メチル −∫−ニトロスチレン（ＭＶ−Ｎ１）、３，４−ジヒドロキシ−∫−メチル−∫ −ニトロスチレン（ＭＶ−Ｎ３）、アウロン（ＭＶ−１９）、４′−ヒドロキシ アウロン（ＭＶ−２０）、３，４′−ジヒドロキシアウロン（ＭＶ−２１）、２ ′−ヒドロキシカルコン（ＭＶ−２２）、２′，４′，４−トリヒドロキシカル コン（ＲＶ−４０）、４−ヒドロキシカルコン（ＭＶ−８８）、ａ−アジド−２ ′−ヒドロキシカルコン（ＭＶ−３５）、３，４−ジヒドロキシ−４′−シアノ カルコン（ＭＶ−４６）および４′−シアノカルコン（ＭＶ−４７）で構成され るグループから選択される化合物を生物学的に抑制効果のある量投与するステツ プで構成される、増殖細胞の成長を抑制する方法。 ３８．２−（ヒドロキシベンジリデン）−５−メチル−シクロペンタノン（ＭＶ −１）、２，６−ｂｉｓ（４−ヒドロキシベンジリデン）−４−メチル−シクロ ヘキサノン（ＭＶ−１７）、２，６−ｂｉｓ（３，４−ジヒドロキシベンジリデ ン）−４−メチル・シクロヘキサン（ＭＶ−１８）、４−ヒドロキシ−∫−メチ ル−∫−ニトロスチレン（ＭＶ−１）、３，４−ジヒドロキシ−∫−メチル−∫ −ニトロスチレン（ＭＶ−Ｎ３）、アウロン（ＭＶ−１９）、４′−ヒドロキシ アウロン（ＭＶ−２０）、３，４′−ジヒドロキシアウロン（ＭＶ−２１）、２ ′−ヒドロキシカルコン（ＭＶ−２２）、２′，４′，４−トリヒドロキシカル コン（ＲＷ−４０）、４−ヒドロキシカルコン（ＭＶ−８８）、ａ−アジド−２ ′−ヒドロキシカルコン（ＭＶ−３５）、３，４−ジヒドロキシ−４′−シアノ カルコン（ＭＶ−４６）および４′−シアノカルコン（ＭＶ−４７）で構成され るゲループから選択される化合物を臨床的に効果のある量投与するステップで構 成される、自動免疫性疾患を措置するための方法。 ３９．メチルｐ−ヒドロキシフェニルラクテート、メチルｐ−ヒドロキシフェニ ルラクテートの類似物、メチルｐ−ヒドロキシフェニルラクテートの化学的誘導 体、および化学的に関連性のある化合物で構成されるグループから選択される化 合物を生物学的に抑制効果のある量増殖細胞に投与するステップで構成される自 動免疫性疾患を措置するための方法。 ４０．化合物が以下の構造式で示される化合物で構成されるグループから選択さ れる特許請求の範囲第３９項の方法。 ▲数式、化学式、表等があります▼，▲数式、化学式、表等があります▼，▲数 式、化学式、表等があります▼，▲数式、化学式、表等があります▼，▲数式、 化学式、表等があります▼，▲数式、化学式、表等があります▼，▲数式、化学 式、表等があります▼，▲数式、化学式、表等があります▼，▲数式、化学式、 表等があります▼，▲数式、化学式、表等があります▼及び▲数式、化学式、表 等があります▼ここで、Ｒ１はＨ，１−６の炭素を含むアルキル基、およびアリ ール基で構成されるグループから選択され、Ｒ２とＲ３はＨ，ＯＨ，ＯＣＨ２で 構成されるグループから選択され、そしてＲ４はＭおよび１−６の炭素のアルキ ル基で構成されるグループから選択される。