JPH0558849A - 発毛・養毛促進剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【構成】 培養細胞Ｐ１９の抽出液及び／又は培養上清
を含むことを特徴とする発毛・養毛促進剤。 【効果】 優れた養毛効果を呈する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は発毛・養毛促進剤、特に
その新規有効成分に関する。

【０００２】

【従来の技術】いわゆる脱毛症は種々の原因で起こり得
るが、いずれも結果的には毛髪の正常な成長が行なわれ
ないまま休止期の状態に達するために硬毛が軟毛化し、
やがて脱毛症へと移行するものと考えられている。そし
て、このような脱毛症を改善するために従来より各種薬
剤を配合した発毛・養毛促進剤が用いられており、その
有効成分としてはビタミンＢ₆等のビタミン類、メチオ
ニン等のアミノ酸類、アセチルコリン誘導体等の血管拡
張剤、紫根エキス等の抗炎症剤、エストラジオール等の
女性ホルモン剤、セファランチン等の皮膚機能亢進剤等
が配合されている。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】ところで、従来の発毛
・養毛促進剤はフケ、カユミ、抜毛等の予防及び改善に
有効で、発毛や育毛を促進するとされているが、未だ満
足すべき効果を発揮するものは得られていないのが現状
である。本発明は前記従来技術の課題に鑑みなされたも
のであり、その目的は毛の正常な成長を促進すると共
に、安全性の高い発毛・養毛促進剤を提供することにあ
る。

【０００４】

【課題を解決するための手段】前記目的を達成するため
に本発明者らが鋭意検討した結果、培養細胞Ｐ１９の細
胞抽出液若しくはその培養上清を有効成分とすることに
より、発毛・養毛を著しく促進することを見出し、本発
明を完成するに至った。

【０００５】すなわち本出願の請求項１記載の発毛・養
毛促進剤は、培養細胞Ｐ１９の抽出液及び／又は培養上
清を含むことを特徴とする。

【０００６】以下、本発明の構成について詳述する。本
発明において用いられるＰ１９細胞は、McBurneyらによ
って確立されたマウス胎児性癌細胞である(Development
al Biology,vol.89,p.503-508,1982)。この細胞は癌細
胞であるにもかかわらず、様々な処理によって正常型の
細胞に分化させることができ、さらにはマウス初期胚に
導入することによってこの細胞由来の個体を得ることも
できるという特徴を有している(Teratocarcinoma and E
mbryonic Stem Cells,IRL Press, Washington D.C.,198
7)。このため、主に発生、分化の基礎的研究に広く用い
られているものである。そして、このＰ１９細胞を任意
の方法で破壊し、その抽出液ないし培養上清を有効成分
として用いるものである。

【０００７】なお、本発明にかかる発毛・養毛促進剤に
は、前記培養細胞Ｐ１９の抽出液又は培養上清の外、発
毛、養毛促進効果を高めるために、例えば他の成分とし
てミノキシジル、ジアゾキシド、各種抗男性ホルモン剤
（例えば、オキセンドロン、４−アンドロステン−３，
１７−ジオン−１７−サイクリックエチレンケタール誘
導体等）、ニコチン酸及びその誘導体、塩化カルプロニ
ウム、ビタミンＥアセテート、ビタミンＥニコチネー
ト、パントテン酸及びその誘導体、ビオチン、グリチル
リチン酸、グリチルレチン酸、冬虫夏草エキス、朝鮮ニ
ンジンエキス、センブリエキス、トウガラシエキス、セ
ファランチン、プラセンタエキス、エチニルエストラジ
オール、塩酸カルプロニウム、感光素、その他ビタミン
類及びアミノ酸等を共に配合することができる。更に通
常発毛・養毛促進剤に用いられる添加剤、例えばヒノキ
チオール、ヘキサクロロフェン、フェノール、ベンザル
コニウムクロリド、セチルピリジニウムクロリド、ウン
デシレン酸、トリクロロカルバニリド及びビチオノール
等の抗菌剤、メントール等の清涼剤、サリチル酸、亜鉛
及びその誘導体、乳酸及びそのアルキルエステル等の薬
剤、オリーブ油、スクワラン、流動パラフィン、イソプ
ロピルミリステート、高級脂肪酸、高級アルコール等の
油分、その他界面活性剤、香料、酸化防止剤、紫外線吸
収剤、色素、エタノール、水、保湿剤、増粘剤等を本発
明の効果を損わない範囲で適宜配合することができる。

【０００８】本発明の発毛・養毛促進剤の剤形は、液
状、エアゾール、乳液及び軟膏等、頭皮に適用できる剤
形、並びに液状及び懸濁状等の皮下注入に適用できる剤
形のものであればいずれも可能である。このような製剤
は、溶解、乳化又は懸濁化による方法で調整することが
できる。

【０００９】

【実施例】本発明の実施例を更に詳細に説明する。な
お、本発明はこれに限定されるものではない。また特に
指定がない限り、配合量は重量％で表わす。

【００１０】製造方法 細胞の培養 培地、器具共に一般の動物細胞培養に用いるものを使用
することができる。通常はアルファ培地、ダルベッコ改
変イーグル培地等に５〜１０％程度の子牛胎児血清を含
有するものを使用するが、細胞が正常に増殖できるもの
であれば、任意の培地を用いることができる(Teratocar
cinoma and Embryonic Stem Cells,IRLPress,Washingto
n D.C.,1987)。

【００１１】細胞抽出液の調整 培養した細胞を、水又は任意の中性緩衝液（リン酸緩衝
塩溶液：ＰＢＳ等）中で超音波処理、凍結融解、ポリト
ロンホモジナイザー等の方法で破壊し、遠心又は濾過に
よって不溶物及び未破壊の細胞を除く。得られた無色透
明の上清を細胞抽出液として使用する。緩衝液中の細胞
の濃度は任意で良いが、ＰＢＳ１mlあたり５億個の細胞
を処理した場合、タンパク質濃度として約７mg/mlの細
胞抽出液が得られた。

【００１２】細胞培養上清の調製 培養した細胞を、任意の等張液（浸透圧によって細胞が
破壊されないよう、塩類等を加えた中性の水溶液。通常
ＰＢＳ、無血清培地等が用いられる。）中に移して数日
間（１日〜１週間程度）、前記培養条件に放置した後、
遠心又は濾過によって細胞及び不溶物を除く。得られた
透明の上清を細胞培養上清として使用する。等張液中の
細胞の濃度は任意で良いが、ＰＢＳ２mlあたり５千万個
の細胞を２日間処理した場合、タンパク質濃度にして約
０．５mg/mlの細胞培養上清が得られる。

【００１３】なお、このようにして得られた細胞抽出
液、培養上清の生物に対する作用は殆ど不明であり、培
養上清中にこの細胞の増殖を促進するタンパク質性の因
子が知られているのみである（Emnryonal Carcinoma-De
rived Growth Factor, Teratocarcinoma and Embryonic
Stem Cells, IRLPress, Washington D.C.,1987)。ま
た、本発明にかかる細胞抽出液、培養上清は熱に対して
安定ではなく、高濃度（タンパク質として０．１mg/ml
以上）で６０℃以上に加熱すると濁りを生じることがあ
るが、養毛料、化粧料に用いられる各種溶剤（エタノー
ル、プロパノール等）、あるいは油脂等に対しては安定
であるので、発毛・養毛促進剤の一成分とすることに何
等問題はない。

【００１４】また、この細胞抽出液、培養上清の配合量
は、適用方法又は剤形によりその最適量が異なるが、一
般に発毛・養毛促進剤全量中、タンパク質として０．０
０１〜０．１％、好ましくは０．００５〜０．０２％で
ある。また、一日の用量は、症状の進行程度、併用する
他の成分又は適用方法等によって変動するが、被適用皮
膚面積当り１cm²あたりタンパク質として１０^-7〜１０
^-4ｇ、好ましくは１０^-6〜２×１０^-5ｇである。

【００１５】養毛効果試験 養毛効果試験は、毛周期の休止期にあるＣ３Ｈ／ＨｅＮ
ＣｒＪマウスを用い、小川らの方法（ノーマル アンド
アブノーマル エピダーマル ディファレンジェーシ
ョン,M.Seiji及びI.A.Bernstein編集、第１５９〜１７
０頁、１９８２年、東大出版会）により実験を行なっ
た。すなわち、マウスを１群１０匹とし、バリカン及び
シェーバーでマウスの背部を剃毛し、それぞれの試料を
１日１回０．１mlづつ塗布した。各試料の養毛効果はマ
ウス背部の発毛部分を測定して、５０％発毛率にかかる
平均日数で示した。なお、被験試料は次のように調整し
た。

【００１６】次の表１に示す配合に従い、９５％エタノ
ールに本発明にかかる被験液及び硬化ヒマシ油ＥＯ（４
０モル）付加物を添加し、攪拌溶解させ、次いでイオン
交換水を添加、混合して下記配合の透明液状発毛・養毛
促進剤を得た。

【表１】 ────────────────────────────────── 対 照 実施例１ 実施例２ 比較例１ ────────────────────────────────── Ｐ１９細胞抽出液 − ０．１ − − Ｐ１９細胞培養上清 − − ０．１ − ミノキシジル − − − ０．０５ ９５％エタノール ６０．０ ６０．０ ６０．０ ６０．０ イオン交換水 ３８．０ ３７．９ ３７．９ ３７．９５ 硬化ヒマシ油 EO(40モル)付加物 ２．０ ２．０ ２．０ ２．０ ────────────────────────────────── ５０％発毛日数 30.2±2.3 17.3±2.0 15.9±2.2 21.8±1.7 促進日数 − 12.9±2.0 14.3±2.2 8.4±1.7 ────────────────────────────────── なお、Ｐ１９細胞抽出液及びＰ１９細胞培養上清の添加
量は、タンパク質量で示している。以上のように、本発
明にかかる発毛・養毛促進剤は、優れた養毛効果を有す
ることが明かとされた。

【００１７】実施例３ ［配合］ 細胞抽出液（タンパク質換算） ０．００５ ９５％エタノール ６０．０ 硬化ヒマシ油ＥＯ（４０モル）付加物 ２．０ イオン交換水 残 余 ［製造法］９５％エタノールに細胞抽出液（タンパク重
量換算）及び硬化ヒマシ油ＥＯ（４０モル）付加物を添
加し、加熱攪拌溶解させ、次いでイオン交換水を添加、
混合して実施例３の発毛・養毛促進剤を得た。

【００１８】実施例４ ［配合］ ＜Ａ相＞ 細胞培養上清（タンパク質換算） ０．０１ ポリオキシエチレン（６０モル付加物）硬化ヒマシ油 ２．０ グリセリン １０．０ ジプロピレングリコール １０．０ １，３−ブチレングリコール ５．０ ポリエチレングリコール１５００ ５．０ ＜Ｂ相＞ セチルイソオクタネート １０．０ スクワラン ５．０ ワセリン ２．０ プロピルパラベン ２．０ ＜Ｃ相＞ カルボキシビニルポリマー１％水溶液 ３０．０ ヘキサメタリン酸ソーダ ０．０３ イオン交換水 ８．３５ ＜Ｄ相＞ イオン交換水 ５．４９ ＜Ｅ相＞ 苛性カリ ０．１２ イオン交換水 ５．０ ［製造法］Ａ相、Ｂ相をそれぞれ６０℃で加熱溶解し、
混合してホモミキサー処理し、ゲルを作る。これにＤ相
を徐々に添加しホモミキサーで分散する。次にこれに溶
解したＣ相を加え、最後に溶解したＥ相を添加しホモミ
キサーで乳化してＯ／Ｗ乳化型の発毛・養毛促進剤を得
た。

【００１９】実施例５ ＜Ａ相＞ 流動パラフィン ５．０ セトステアリルアルコール ５．５ グリセリルモノステアレート ３．０ ＥＯ（２０モル付加）−２−オクチルドデシルエーテル ３．０ ビタミンＥアセテート ０．０５ プロピルパラベン ０．３ 香料 ０．０５ ＜Ｂ相＞ 細胞抽出液（タンパク質換算） ０．１ グリセリン ７．０ ジプロピレングリコール ２０．０ ポリエチレングリコール４０００ ５．０ ヘキサメタリン酸ソーダ ０．００５ イオン交換水 ５０．９０５ ［製造法］Ａ相、Ｂ相をそれぞれ加熱溶解して混合し、
ホモミキサーで乳化して軟膏状発毛・養毛促進剤を得
た。

【００２０】実施例６ エタノール ５５．０ 細胞培養上清（タンパク質換算） ０．０１ ＥＯ（８モル付加）オレイルアルコールエーテル ２．０ ヒノキチオール ０．０５ 香料 適 量 染料 適 量 イオン交換水 残 余 ［製造法］エタノールにＥＯ（８モル付加）オレイルア
ルコールエーテル、上清、ヒノキチオールを加え、これ
に香料、染料を加えて溶解した後、イオン交換水を加え
て可溶化し、発毛・養毛促進剤を得た。

【００２１】実施例７ ［配合］ ＜Ａ相＞ 流動パラフィン ５．０ セトステアリルアルコール ５．５ ワセリン ５．５ グリセリルモノステアレート ３．０ ＥＯ（２０モル付加）−２−オクチルドデシルエーテル ３．０ ビタミンＥアセテート ０．０５ プロピルパラベン ０．３ 香料 ０．０５ ＜Ｂ相＞ 細胞抽出液（タンパク質換算） ０．１ グリセリン ７．０ ジプロピレングリコール ２０．０ ポリエチレングリコール４０００ ５．０ ヘキサメタリン酸ソーダ ０．００５ イオン交換水 ４４．５９５ ［製造法］Ａ相を加熱溶解、混合し、これにＢ相の熱溶
解混合物を添加し、ホモミキサーにて乳化し、クリーム
状発毛・養毛促進剤を得た。

【００２２】

【発明の効果】以上説明したように本発明にかかる発毛
・養毛促進剤は、培養細胞Ｐ１９の抽出液ないし培養上
清を含むので、優れた養毛効果を呈する。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 村松 正實 埼玉県所沢市小手指町４−21−６ (72)発明者 近藤 滋 東京都府中市西府町１−38−11

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 培養細胞Ｐ１９の抽出液及び／又は培養
   上清を含むことを特徴とする発毛・養毛促進剤。