JPH0560478B2

JPH0560478B2 -

Info

Publication number: JPH0560478B2
Application number: JP7325685A
Authority: JP
Inventors: Kaoru Okamoto; Toshio Goto; Nobuo Tanaka
Original assignee: Nippon Zoki Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Nippon Zoki Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 1985-04-05
Filing date: 1985-04-05
Publication date: 1993-09-02
Also published as: JPS61229897A

Description

【発明の詳細な説明】（産業上の利用分野）本発明は新規ヌクレオシド化合物及びその薬学
的に許容される塩、その製造方法並びに該化合物
を有効成分として含有する医薬組成物に関する。

（従来の技術）各種疾病に対する治療技術は急速に進歩してい
るが、悪性腫瘍に関してはいまだ研究途上の段階
にある。現在、ヌクレオシド化合物は抗腫瘍物質
としてチオノイシン、シタラビン等数種類が医薬
品として使用されているのみであり、より有効な
抗腫瘍物質を得るための研究が行われている。

例えば、ヌクレオシド抗腫瘍物質の一つとし
て、ストレプトミセス・ヒグロスコピクスの一菌
株が生産するカデグオマイシン（２−アミノ−
３，４−ジヒドロ−４−オキソ−７−β−Ｄ−リ
ボフラノシル−7H−ピロロ〔２，３−ｄ〕ピリ
ミジン−５−カルボン酸）が特開昭58−92693号
公報に開示されている。カデグオマイシンは天然
で極微量しか生産されないため、その大量合成法
が望まれており、例えば、「T.Kondo et al.，
Tetrahedron Letters，243647（1983）」に合成法
の一例が開示されている。

（発明が解決しようとする問題点）本発明の目的は、新規なヌクレオシド化合物及
びその薬学的に許容される塩、その製造方法並び
に該化合物を有効成分として含有する医薬組成物
を提供することにある。

（問題点を解決するための手段）本発明者らはヌクレオシド化合物、その抗腫瘍
性並びに合成法について研究するうち、カデグオ
マイシンの５位のカルボキシル基をアルデヒド基
に置換した本発明ヌクレオシド化合物が優れた抗
腫瘍作用を有し抗腫瘍剤として有用であることを
見出し、本発明を完成した。

本発明化合物は、次の一般式（）で表される
新規ヌクレオシド化合物である。

（式中、破線はリボフラノース又はアラビノフ
ラノースの両体を含むことを表す）本発明ヌクレオシド化合物は、前記一般式
（）で表される化合物の薬学的に許容しうる塩
を包含し、例えば、塩酸、硫酸等との無機酸、酢
酸、クエン酸等との有機酸との酸付加塩等が挙げ
られる。

次に、本発明化合物の製造方法について述べ
る。

(1) 例えば、本発明化合物は下記一般式（）で
表される化合物を出発原料として製造すること
ができる。

（式中、R₁はアルコキシアルキル基、R₂は
アシル基、R₃，R₄はアシル基、アルキリデン
基、アルアルキル基、R₅はアシル基、アルア
ルキル基、Ｘはハロゲンを表す。破線はリボフ
ラノース又はアラビノフラノースの両体を含む
ことを表す）上記一般式（）における具体例としては、
R₁がメトキシメチル基等のアルコキシアルキ
ル基、R₂がアセチル、ベンゾイル基等のアシ
ル基、R₃及びR₄は一般のヌクレオシド化学に
おいて使用されている任意の保護基、例えば、
アセチル、ベンゾイル基等のアシル基、トリチ
ル、ベンジル基等のアルアルキル基、又はイソ
プロピリデン、エチリデン基等のアルキリデン
基、R₅は同様にアセチル、ベンゾイル基等の
アシル基、トリチル、ベンジル基等のアルアル
キル基、Ｘは塩素、臭素等のハロゲンが挙げら
れる。

一般式（）で表される化合物のうち、例え
ば、６−ブロモ−２−ジアセチルアミノ−３，
４−ジヒドロ−５−ヒドロキシメチル−３−メ
トキシメチル−７−（５−Ｏ−アセチル−２，
３−Ｏ−イソプロピリデン−β−Ｄ−リボフラ
ノシル）−7H−ピロロ〔２，３−ｄ〕ピリミジ
ン−４−オンはカデグオマイシン合成中間体と
して「T.Kondo et al.，Tetrahedron
Letters，243647（1983）」に開示されているよ
うに、公知の方法により容易に得られるもので
ある。

本製造方法は以下のように行うことができ
る。

一般式（）で表される化合物の６位のハロ
ゲン基をパラジウム−炭素等の触媒下にて還元
する。次に、反応を阻害しない適当な溶媒、例
えばアセトニトリル中、活性二酸化マンガン等
の酸化剤で処理し、５位のヒドロキシルメチル
基を酸化してアルデヒド基に変換する。最後
に、例えば、メタノール中にてアンモニア水を
作用させアセチル基を加水分解した後、イソプ
ロピリデン基を脱離するためにトリフルオロ酢
酸で処理する等の脱保護基反応を行うことによ
り、一般式（）で表される本発明ヌクレオシ
ド化合物を得ることができる。

(2) 又、本発明化合物は下記式（）で表される
カデグオマイシン或いはそのアラビノース体を
出発原料として製造することもできる。

（式中、破線はリボフラノース又はアラビノ
フラノースの両体を含むことを表す）本製造方法においては、まず上記式（）で
表されるカデグオマイシン或いはそのアラビノ
ース体を、メタノール中塩酸触媒下にて加熱還
流して５位のカルボキシル基をエステル化し、
続いて、テトラヒドロフラン中還流下で水素化
ホウ素リチウムを作用させることによりアルコ
ール体が得られる。最後に、ジメチルスルホキ
シド中活性二酸化マンガンで５位のメトキシメ
チル基を酸化して一般式（）で表される本発
明化合物を得ることができる。

得られた本発明化合物は、蒸溜、クロマトグ
ラフイー、再結晶等の通常の手段により精製
し、融点測定、IR，NMR，UV、マススペク
トル、旋光度等により同定を行つた。

（実施例）以下に、本発明化合物の製造方法の一例を示
す。

実施例１ (1) ６−ブロモ−２−ジアセチルアミノ−３，４
−−ジヒドロ−５−ヒドロキシメチル−３−メ
トキシメチル−７−（５−Ｏ−アセチル−２，
３−Ｏ−イソプロピリデン−β−Ｄ−リボフラ
ノシル）−7H−ピロロ〔２，３−ｄ〕ピリミジ
ン−４−オン545mgに10％パラジウム−炭素300
mg、酢酸カリウム300mg及び20mlのメタノー
ル／水を加え、水素ガスで置換し室温下30分間
攪拌した。触媒を濾去し洗浄後、濾液を濃縮し
残査に水を加え酢酸エチルで抽出した。有機層
を水、飽和塩化ナトリウムで洗い無水硫酸ナト
リウム上で乾燥後、触媒を留去した。得られた
粗生成物をシリカゲルカラムで精製し、ｎ−ヘ
キサンより再結晶して２−ジアセチルアミノ−
３，４−ジヒドロ−５−ヒドロキシメチル−３
−メトキシメチル−７−（５−Ｏ−アセチル−
２，３−Ｏ−イソプロピリデン−β−Ｄ−リボ
フラノシル）−7H−ピロロ〔２，３−ｄ〕ピリ
ミジン−４−オンの白色結晶390mgを得た。

（収率82％）融点：57−59℃ UV（MeOH）：λmax＝300nm（ε＝8770） λmax＝265nm（ε＝5414） IR（KBr）：3450，1740，1690，1675，1572，
1372，1224，1090cm^-1 NMR（CDCl₃）：δ＝1.35（ｓ，3H），1.60（ｓ，
3H），2.11（ｓ，3H），2.37（ｓ，3H），2.38
（ｓ，3H），3.42（ｓ，3H），4.20（dd，1H，
J₁＝6.6Hz，J₂＝12.7Hz），4.33（dd，1H，J₁＝
4.2Hz，J₂＝12.7Hz），4.36（ddd，1H，J₁＝3.7
Hz，J₂＝4.2Hz，J₃＝6.6Hz），4.3−4.5（br.s，
1H），4.75（br.s，2H），4.80（dd，1H，J₁＝
3.7Hz，J₂＝6.3Hz），4.93（dd，1H，J₁＝2.9
Hz，J₂＝6.3Hz），5.35（ｓ，2H），6.18（ｄ，
1H，Ｊ＝2.9Hz），6.94（ｓ，1H）〔α〕¹² _D＝−47.9°（Ｃ＝0.16，CHCl₃） (2) 上記(1)にて得られた生成物390mgをアセトニ
トリル25mlに溶かした後、室温にて攪拌しつつ
活性二酸化マンガン３ｇを添加した。１時間攪
拌後、濾過しアセトンで洗浄し、濾液を濃縮し
た。残査にメタノール15ml及び28％アンモニア
水15mlを加え、室温下15時間攪拌後、減圧下濃
縮した。得られた粗生成物をシリカゲルカラム
で精製し、ｎ−ヘキサンより再結晶して２−ア
ミノ−３，４−ジヒドロ−５−ホルミル−３−
メトキシメチル−７−（２，３−Ｏ−イソプロ
ピリデン−β−Ｄ−リボフラノシル）−7H−ピ
ロロ〔２，３−ｄ〕ピリミジン−４−オンの黄
色結晶208mgを得た。（収率71％）融点：89−91℃ UV（MeOH）： λmax＝317nm（ε＝6663） λmax＝290nm（ε＝5149） λmax＝249nm（ε＝21303） IR（KBr）：3440，1695，1662，1630，1530，
1205，1153，1077cm^-1 NMR（CDCl₃）：δ＝1.37（ｓ，3H），1.61（ｓ，
3H），3.44（ｓ，3H），3.77（ｄ，1H，Ｊ＝
12.2Hz），3.95（dd，1H，J₁＝2.0Hz，J₂＝12.2
Hz），4.43（dd，1H，J₁＝2.0Hz，J₂＝2.0Hz），
5.02（dd，1H，J₁＝2.0Hz，J₂＝5.9Hz），5.13
（dd，1H，J₁＝4.4Hz，J₂＝5.9Hz），
5.50and5.61（ABquartet，2H，Ｊ＝10.8Hz），
5.60（br.s，2H），5.75（ｄ，1H，Ｊ＝4.4Hz），
7.49（ｓ，1H），10.25（ｓ，1H）〔α〕¹¹ _D＝−77.4°（Ｃ＝0.11，CHCl₃） FAB Mass：ｍ／ｚ 395（Ｍ＋１） (3) 上記(2)にて得られた生成物200mgにトリフル
オロ酢酸／水（2/1）15mlを加え、70℃で１時
間攪拌した。減圧下濃縮後、残査を水に溶かし
アンバーライトIR−45カラムに通して水／ア
セトニトリルで溶出した。溶出液を濃縮乾固し
２−アミノ−３，４−ジヒドロ−５−ホルミル
−７−β−Ｄ−リボフラノシル−7H−ピロロ
〔２，３−ｄ〕ピリミジン−４−オン（化合物
１）の黄色結晶133mgを得た。（収率85％）融点：205−213℃（分解） UV（H₂Ｏ）：λmax＝311nm（ε＝7452） λmax＝245nm（ε＝19110） IR（KBr）：3410，3320，1701，1685，1635，
1598，1406，1185，1140，1045cm^-1 NMR（D₂Ｏ，ｔ−BuOH＝1.23ppm）： δ＝3.79（dd，1H，J₁＝4.2Hz，J₂＝12.7
Hz），3.89（dd，1H，J₁＝3.1Hz，J₂＝
12.7Hz），4.19（ddd，1H，J₁＝3.1Hz，J₂
＝4.2Hz，J₃＝4.6Hz），4.35（dd，1H，J₁
＝4.6Hz，J₂＝5.1Hz），4.57（dd，1H，J₁
＝5.1Hz，J₂＝5.4Hz），5.98（ｄ，1H，Ｊ
＝5.4Hz），7.92（ｓ，1H），9.68（ｓ，
1H）〔α〕³⁰ _D＝−47.7°（Ｃ＝0.10，H₂Ｏ）〔α〕³⁰ ₄₃₅＝−111.6°（Ｃ＝0.10，H₂Ｏ） FAB Mass：ｍ／ｚ 311（Ｍ＋１）実施例２６−ブロモ−２−ジアセチルアミノ−３，４−
ジヒドロ−５−ヒドロキシメチル−３−メトキシ
メチル−７−（２，３，５−トリ−Ｏ−アセチル
−β−Ｄ−アラビノフラノシル）−7H−ピロロ
〔２，３−ｄ〕ピリミジン−４−オン290mgを出発
物質とし、実施例１と同様にして、化合物１のア
ラビノース体である２−アミノ−３，４−ジヒド
ロ−５−ホルミル−７−β−Ｄ−アラビノフラノ
シル−7H−ピロロ〔２，３−ｄ〕ピリミジン−
４−オン（化合物２）30mgを得た。

融点：203−210℃（分解） UV（H₂Ｏ）：λmax＝311nm（ε＝10845） λmax＝247nm（ε＝26895） IR（KBr）：3400，3330，3200，1685，1645，
1612，1552，1498，1380，1067cm^-1 NMR（D₂Ｏ，ｔ−BuOH＝1.23ppm）： δ＝3.87（dd，1H，J₁＝5.1Hz，J₂＝12.5
Hz），3.93（dd，1H，J₁＝3.2Hz，J₂＝
12.5Hz），4.01（ddd，1H，J₁＝3.2Hz，J₂
＝5.1Hz，J₃＝5.6Hz），4.27（ｔ，1H，Ｊ
＝5.6Hz），4.48（ｔ，1H，Ｊ＝5.6Hz），
6.32（ｄ，1H，Ｊ＝5.6Hz），7.97（ｓ，
1H），9.71（ｓ，1H）〔α〕²⁵ _D＝＋35.2°（Ｃ＝0.1，H₂Ｏ）〔α〕²⁵ ₄₃₅＝＋36.0°（Ｃ＝0.1，H₂Ｏ）実施例３ (1) カデグオマイシン20mgに無水メタノール５ml
及び濃硫酸を加え、油浴上４時間還流した。減
圧下濃縮し、残査を水に溶かしアンバーライト
IR−45カラムに通してメタノール／水で溶出
した。溶出液を濃縮乾固し、メチル２−アミノ
−３，４−ジヒドロ−４−オキソ−７−β−Ｄ
−リボフラノシル−7H−ピロロ〔２，３−ｄ〕
ピリミジン−５−カルボキシレートの淡黄色結
晶19mgを得た。（収率91％）融点：240−242℃（分解） UV（H₂Ｏ）： λmax＝296nm（ε＝8840） λmax＝270nm（ε＝7782） λmax＝232nm（ε＝19253） IR（KBr）：3400，1711，1645，1600，1550，
1512，1442，1398，1300，1212，1092cm^-1 NMR（D₂Ｏ，ｔ−BuOH＝1.23ppm）： δ＝3.81（ｓ，3H），3.65−3.96（ｍ，
2H），4.16（ｑ，1H，Ｊ＝3.2Hz），4.34
（ｔ，1H，Ｊ＝4.6Hz），4.55（ｔ，1H，
Ｊ＝5.0Hz），5.94（ｄ，1H，Ｊ＝5.1Hz），
7.72（ｓ，1H）〔α〕¹² _D＝−49.2°（Ｃ＝0.12，H₂Ｏ） (2) 上記(1)にて得られた生成物15mgに乾燥テトラ
ヒドロフラン３ml及び水素化ホウ素リチウム10
mgを加え窒素置換後、油浴上46時間還流した。
減圧下濃縮後、残査を水に溶かし分取高速液体
クロマトグラフイーで精製して２−アミノ−
３，４−ジヒドロ−５−ヒドロキシメチル−７
−β−Ｄ−リボフラノシル−7H−ピロロ〔２，
３−ｄ〕ピリミジン−４−オンの白色結晶６mg
を得た。（収率44％）融点：230−235℃（分解） UV（H₂Ｏ）： λmax＝283nm（ε＝6771） λmax＝261nm（ε＝10142） λmax＝221nm（ε＝
17823） IR（KBr）：3460，3370，1652，1632，1610，
1450，1198，1130，1042，1014，860cm^-1 NMR（DMSO−d₆／D₂Ｏ＝１／１，ｔ−
BuOH＝1.23ppm）： δ＝3.73（dd，1H，J₁＝4.1Hz，J₂＝12.3
Hz），3.75（dd，1H，J₁＝3.5Hz，J₂＝
12.3Hz），4.08（ddd，1H，J₁＝3.0Hz，J₂
＝3.5Hz，J₃＝4.1Hz），4.25（dd，1H，J₁
＝3.0Hz，J₂＝5.5Hz），4.51（dd，1H，J₁
＝5.5Hz，J₂＝6.8Hz），4.68（ｓ，2H），
5.91（ｄ，1H，Ｊ＝6.8Hz），6.94（ｓ，
1H）〔α〕¹³ _D＝−48.0°（Ｃ＝0.06，DMSO） (3) 上記(2)にて得られた生成物５mgをジメチルホ
ルムアミド２mlに溶かした後、活性二酸化マン
ガン50mgを加え室温下15時間攪拌した。セライ
トを通し濾過した後、水／メタノールで洗浄
し、濾液を濃縮した。残査を分取高速液体クロ
マトグラフイーで精製して2.5mgの化合物１を
得た。（収率50％）尚、上記実施例３で得られた化合物の融点、
IR，NMR，UV、マススペクトル、旋光度等の
物性値は実施例１で得られた化合物１のそれと一
致したので、両製造方法により同一物質が生成し
たことが確認された。

（作用）以下に本発明化合物の薬理作用について述べ
る。

(1) マウス・リンパ腫L5178Y細胞の発育阻止作
用化合物１及びカデグオマイシンをマウス・リン
パ腫L5178Y細胞の培地にそれぞれ添加し、37℃
で72時間培養後、電気式細胞数算定器（コールタ
ー社製）で細胞数を測定し、被検化合物の腫瘍細
胞発育阻止作用を調べた。マウス・リンパ腫
L5178Y脂肪は10％ウマ血清加フイツシヤー培地
で培養した。

結果を第１図に示す。

(2) ヒト白血病K562細胞の〔³Ｈ〕チミジンのと
りこみ促進作用ヒト白血病K562細胞に化合物１、同２及びカ
デグオマイシンをそれぞれ添加し、５％二酸化炭
素−95％空気気流下、37℃で18時間培養後〔³Ｈ〕
チミジンを加えさらに６時間培養した。細胞を
Cell−Harvesterを用いて集め、細胞中にとりこ
まれた放射能を測定することにより、ヒト白血病
K562細胞に対する被検化合物の〔³Ｈ〕チミジン
のとりこみ促進作用を調べた。ヒト白血病K562
細胞は10％ウシ胎児血清加PRMI−1640培地で培
養した。

結果を第２図に示す。

（効果）第１図に示すように、本発明化合物はカデグオ
マイシンに比べて顕著にマウス・リンパ腫
L5178Y細胞の発育を阻止する。化合物１の腫瘍
細胞発育阻止作用のIC₅₀は10μg／mlと非常に低濃
度であり、本発明化合物は微量にて抗腫瘍作用を
示す。

又、第２図に示すように、本発明化合物はヒト
白血病K562細胞の〔³Ｈ〕チミジンのとりこみを
著しく促進する。特に本発明化合物のリボース体
（化合物１）は、0.5μg／mlの濃度でカデグオマイ
シンの約2.5倍の〔³Ｈ〕チミジンとりこみ促進作
用を示すように、低濃度においてもその効果が著
しい。

以上の実験結果から明らかなように、本発明ヌ
クレオシド化合物は優れた抗腫瘍作用を示し、抗
腫瘍剤として有用なものである。又、本発明化合
物は血球増加作用や、リンパ球を賦活化する免疫
増強作用も期待できる。

本発明化合物は、適当な医薬用の担体若しくは
希釈剤と組み合わせて医薬とすることができ、通
常の如何なる方法によつても製剤化でき、経口又
は非経口投与するための固体、半固体、液体又は
気体の剤形に処方することができる。

処方にあたつては、本発明化合物をその薬学的
に許容しうる塩の形で用いてもよく、本発明化合
物を単独で若しくは適宜組み合わせて用いること
ができ、又、他の抗腫瘍物質等の医薬活性成分と
も組み合わせて使用してもよい。

経口投与製剤としては、そのまま或いは適当な
添加剤、例えば乳糖、マンニツト、トウモロコシ
デンプン、バレイシヨデンプン等の慣用の賦形剤
と共に、結晶セルロース、セルロース誘導体、ア
ラビアゴム、トウモロコシデンプン、ゼラチン等
の結合剤、トウモロコシデンプン、バレイシヨデ
ンプン、カルボキシメチルセルロースナトリウム
等の崩壊剤、タルク、ステアリン酸マグネシウム
等の滑沢剤、その他増量剤、湿潤化剤、緩衝剤、
保存剤、香料等を適宜組み合わせて錠剤、散剤、
顆粒剤或いはカプセル剤とすることができる。

さらに本発明化合物は、各種基剤、例えばカカ
オ脂等の油脂性基剤、乳剤性基剤、又は、マクロ
ゴール等の水溶性基剤、親水性基剤等と混和して
坐剤とすることができる。

注射剤としては水性溶剤又は非水性溶剤、例え
ば注射用蒸溜水、生理食塩水、リンゲル液、植物
油、合成脂肪酸グリセリド、高級脂肪酸エステ
ル、プロピレングリコール等の溶液若しくは懸濁
液とすることができる。

又、腫瘍の発生部位に応じて、その治療に最適
な上記以外の剤形、例えば、吸入剤、エアゾール
剤、点眼剤、軟膏、パツプ剤等に製剤化すること
もできる。

本発明化合物の望ましい投与量は、投与対象、
剤形、投与方法、投与期間等によつて変わるが、
所望の効果をえるには、一般に成人に対して一日
に本発明化合物の１乃至3000mg、好ましくは５乃
至1500mgを投与することができ、又、本発明化合
物を適当量含有する単位製剤を一日１乃至数単位
投与することができる。

（実施例）以下に本発明化合物を有効成分として含有する
医薬組成物の処方例を示すが、本発明はこれによ
つて限定されるものではない。

処方例１（錠剤）成分１錠当り（mg）本発明化合物 50 乳糖 180 トウモロコシデンプン 40 ステアリング酸マグネシウム 10 計 280 mg 処方例２（カプセル剤）成分１カプセル当り（mg）本発明化合物 50 乳糖 250 計 300 mg 処方例３（注射剤）成分１アンプル当り（mg）本発明化合物 10 塩化ナトリウム適量注射用蒸留水適量全量１ ml 処方例４（坐剤）成分１単位当り（mg）本発明化合物 100 カカオ脂 1900 計 2000 mg

【図面の簡単な説明】

第１図は本発明化合物のマウス・リンパ腫
L5178Y細胞の発育阻止作用を示すグラフであり、
第２図は本発明化合物のヒト白血病K562細胞に
おける〔³Ｈ〕チミジンのとりこみ促進作用を示
すグラフである。

Claims

【特許請求の範囲】１一般式（）で表される新規ヌクレオシド化
合物及びその薬学的に許容される塩。２一般式（）（式中、R₁はアルコキシアルキル基、R₂はア
シル基、R₃，R₄はアシル基、アルキリデン基、
アルアルキル基、R₅はアシル基、アルアルキル
基、Ｘはハロゲンを表す）で表される化合物のヒ
ドロキシメチル基を酸化してアルデヒド基に変換
後、保護基を脱離して一般式（）で表される新規ヌクレオシド化合物を製造する方
法。３一般式（）で表される新規ヌクレオシド化合物又はその薬学
的に許容される塩を有効成分として含有する抗腫
瘍剤。