JPH0592974A

JPH0592974A - ネプラノシンａの新規な製造法

Info

Publication number: JPH0592974A
Application number: JP2414449A
Authority: JP
Inventors: Masaji Ono; 雅二大野
Original assignee: Asahi Chemical Industry Co Ltd
Current assignee: Asahi Chemical Industry Co Ltd
Priority date: 1990-12-25
Filing date: 1990-12-25
Publication date: 1993-04-16

Abstract

(57)【要約】（修正有）【目的】発酵法で得られている抗生物質ネプラノシン
Ａを化学的に合成する。【構成】シクロペンテン化合物〔Ｉｃ〕と５−アミノ
−４，６−ジハロピリミシンとを反応させてピリジン化
合物〔II〕を得る。次いで化合物〔II〕をイミダゾール
閉環して、プリン化合物〔III〕を得、６位のハロゲノ
基をアミノ基に変換した後、２′位、３′位、６位の水
酵基の保護基を脱離してネプラノシンＡ〔IV〕を合成す
る。［式中、Ｘはハロゲン原子、Ｒ′_２，Ｒ′_３，Ｒ′_４は
それぞれ水酵基の保護基を示す］【効果】菌の培養によらずネプラノシンＡの化学的合
成をすることができる。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、ネプラノシンＡの新規
な製造法に関する。

【０００２】

【従来の技術】ネプラノシンＡ（Ｎｅｐｌａｎｏｃｉｎ
Ａ）（抗生物質Ａ１１０７９−Ｂ_1bと呼称した）は、
シクロペンテン環をもつ核酸関連物質であって、式

【化４】で示され〔カレントケモセラピーアンドインフエ
クションズディシーズ（ＣｕｒｒｅｎｔＣｈｅｍｏ
ｔｈｅｒａｐｙａｎｄＩｎｆｅｃｔｉｏｎｓＤｉｓ
ｅａｓｅ，１５５８〜１５５９（１９８０）〕、１’
（Ｒ）、２’（Ｓ）、３’（Ｒ）の絶対配置をもつこと
が確認されており、ヌクレイックアシドリサーチシ
ンポジュウムシリーズ〔Ｎｕｃｌｅｉｃａｃｉｄｓ
ＲｅｓｅａｒｃｈＳｙｍｐｏｓｉｕｍＳｅｒｉｅ
ｓＮｏ．８、Ｓ６５〜Ｓ６７（１９８０）〕、植物病
原菌糸状菌生育阻害作用およびマウス白血病Ｌ１２１０
細胞生育阻害作用を有するだけでなく、エールリッヒ腹
水癌、ザルコーマ１８０、Ｐ３８８白血病、ラットの吉
田肉腫に対しても著しい延命効果を示し、制癌剤として
有用な抗生物質である。従来、ネプラノシンＡは、アン
プラリエーラ・スピーシーズ（Ａｍｐｕｌｌａｒｉｅｌ
ｌａｓｐ．）Ａ１１０７９（ＦＥＲＭ−Ｐ４４９４）
の培養物から採取する醗酵法（特開昭５４−１５４７９
２号）により得られていた。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】本発明者は、ネプラノ
シンＡがその糖部位にシクロペンテン環を有するアデニ
ン誘導体であり、その化学構造および生理活性に興味を
持たれている物質であることから、このネプラノシンＡ
を全合成するより、醗酵法による製造上の欠点を解消す
ることに着目した。

【０００４】しかしながら、ネプラノシンＡを化学的に
合成するためには、シクロペンテニル部位を天然型と同
一の光学活性な形で合成することが必要である。そこ
で、本発明者は、シクロペンタジエンとアセチレンジカ
ルボン酸ジメチルエステルからなる３段階で得られる式

【化５】の対称ジエステルを出発原料とし、これを豚肝臓エステ
ラーゼにより不斉選択加水分解して（−）体のモノエス
テルを得、このモノエステルを用いて種々合成研究を続
けた結果、本発明を完成したものである。

【０００５】

【課題を解決するための手段】本発明は、式

【化６】（式中、Ｒ' ₂およびＲ’₃は各々水酸基の保護基、
Ｒ’₄は水酸基の保護基を示す）で表されるシクロペン
テン化合物を５−アミノ−４，６−ジハロピリミジンと
反応させて式

【化７】（式中、Ｘはハロゲン原子を示し、Ｒ’₂、Ｒ’₃およ
びＲ’₄は前記と同じ基を意味する）で表されるピリミ
ジン化合物を得、該化合物をイミダゾール閉環して式

【化８】（式中、Ｒ' ₂、Ｒ’₃、Ｒ’₄およびＸは前記と同じ
基を意味する）で表されるプリン化合物を得、該化合物
の６位のハロゲノ基をアミノ基に変換し、次いで２’
位、３’位および６’位の水酸基の保護基を脱離してネ
プラノシンＡを製造するものである。

【０００６】上記の出発物質〔Ｉｃ〕を製造するには、
シクロペンタジエンとアセチレンジカルボン酸ジエステ
ル、例えばジメチルエステルからＤｉｅｌｓ−Ａｌｄｅ
ｒ反応により得たビシクロ〔２．２．１〕−ヘプタ−
２，５−ジエン−２，３−ジカルボン酸ジエステル、例
えばジメチルエステルをＯｓＯ₄酸化し、得られた５，
６−ジヒドロキシ−ビシクロ〔２．２．１〕−ヘプタ−
２−エン−２，３−ジカルボン酸ジエステルのジヒドロ
キシ基を適当な保護基、例えばイソプロピリデン基で保
護し、得られた５，６−Ｏ−保護−５，６−ジヒドロキ
シ−ビシクロ〔２．２．１〕−ヘプタ−２−エン−２，
３−ジカルボン酸ジエステル、例えば５，６−Ｏ−イソ
プロピリデン−５，６−ジヒドロキシ−ビシクロ〔２．
２．１〕−ヘプタ−２−エン−２，３−ジカルボン酸ジ
メチルエステル（１）をエステラーゼ、例えばブタ肝臓
エステラーゼで不斉加水分解してモノエステル、例えば
モノメチルエステル（２）を得、これをオゾン酸化して
２，３−Ｏ−保護−２，３−ジヒドロキシ−４−アルコ
キシオキサリル−シクロペンタン−１−カルボン酸、例
えば２，３−Ｏ−イソプロピリデン−２，３−ジヒドロ
キシ−４−メトキサリル−シクロペンタン−１−カルボ
ン酸（３）を得、これを２，３−Ｏ−保護−２，３−ジ
ヒドロキシ−４−ホルミル−シクロペンタン−１−カル
ボン酸、例えば２，３−Ｏ−イソプロピリデン−２，３
−ジヒドロキシ−４−ホルミル−シクロペンタン−１−
カルボン酸（４）に変換し、これを２−オキソ−６，７
−Ｏ−保護−３−オキサビシクロ〔３．２．１〕オクタ
ン−６，７−ジオール、例えば２−オキソ−６，７−Ｏ
−イソプロピリデン−３−オキサビシクロ〔３．２．
１〕オクターン−６，７−ジオール（５）に変換し、こ
れを２，３−Ｏ−保護−２，３−ジヒドロキシ−４−フ
エニルセレノメチル−シクロペンタン−１−カルボン
酸、例えば２，３−Ｏ−イソプロピリデン−２，３−ジ
ヒドロキシ−４−フエニルセレノメチル−シクロペンタ
ン−１−カルボン酸（６）に変換し、これをクルチウス
反応によりイソシアネート化した後、１−保護アミノ−
２，３−Ｏ−保護−４−フエニルセレノ−シクロペンタ
ン−２，３−ジオール、例えば１−メトキシカルボニル
アミノ−２，３−Ｏ−イソプロピリデン−４−フエニル
セレノ−シクロペンタン−２，３−ジオール（７）に変
換し、これをエキソメチレン化して１−保護アミノ−
２，３−Ｏ−保護−４−メチレンシクロペンタン−２，
３−ジオール、例えば１−メトキシカルボニルアミノ−
２，３−Ｏ−イソプロピリデン−４−メチレンシクロペ
ンタン−２，３−ジオール（８）を得、これをエポキシ
化して１−保護アミノ−２，３−Ｏ−保護−４−（オキ
シラン−２−イル）−シクロペンタン−２，３−ジオー
ル、例えば１−メトキシカルボニルアミノ−２，３−Ｏ
−イソプロピリデン−４−（オキシラン−２−イル）−
シクロペンタン−２，３−ジオール（９）を得、これを
式

【化９】（式９中、Ｒ’₁はアミノ基の保護基、Ｒ’₂および
Ｒ’₃は前記と同じ基を意味する）で表される１−保護
アミノ−２，３−Ｏ−保護−４−ヒドロキシメチル−４
−シクロペンテン−２，３−ジオール、例えば１−メト
キシカルボニルアミノ−２，３−Ｏ−イソプロピリデン
−４−ヒドロキシメチル−４−シクロペンテン−２，３
−ジオール（１０）に変換し、この６’位の水酸基を前
述の保護基で保護して式

【化１０】（式中、Ｒ’₁、Ｒ’₂、Ｒ₃およびＲ’₄は前記と同
じ基を意味する）で表される１−保護アミノ−２，３−
Ｏ−保護−４−保護−ヒドロキシメチル−４−シクロペ
ンテン−２，３−ジオール、例えば１−メトキシカルボ
ニルアミノ−２，３−Ｏ−イソプロピリデン−４−メト
キシメトキシメチル−４−シクロペンテン−２，３−ジ
オール（１１）を得、このアミノ保護基を脱離すること
により式〔Ｉｃ〕で表されるシクロペンテン化合物、例
えば１−アミノ−２，３−Ｏ−イソプロピリデン−４−
メトキシメトキシメチル−４−シクロペンテン−２，３
−ジオール（１２）が得られる。

【０００７】上記の式〔Ｉａ〕および〔Ｉｂ〕のアミノ
基の保護基としては、アミノ基を保護する公知の保護基
であって、例えばホルミル基、トリフルオロアセチル
基、クロロアセチル基、ｏ−ニトロフエノキシアセチル
基、フタロイル基、ｐ−トルエンスルホニル基、ｏ−ニ
トロフエニルスルフエニル基などのアシル基、ベンジル
オキシカルボニル基、ｏ（またはｐ）−ブロモベンジル
オキシカルボニル基、ｏ（またはｐ）−クロロベンジル
オキシカルボニル基、ｐ−ニトロベンジルオキシカルボ
ニル基、ｐ−メトキシベンジルオキシカルボニル基、ｐ
−フエニルアゾベンジルオキシカルボニル基、ｐ−
（ｐ’−メトキシフエニルアゾ）ベンジルオキシカルボ
ニル基などのベンジルオキシカルボニル基、トリクロロ
エトキシカルボニル基、メトキシカルボニル基、ｔ−ブ
トキシカルボニル基、ｔ−アミルオキシカルボニル基、
ジイソプロピルメトキシカルボニル基などの脂肪族オキ
シカルボニル基、２−フエニル−イソプロキシカルボニ
ル基、２−トリル−イソプロポキシカルボニル基などの
アラルキルオキシカルボニル基、トリメチルシリルなど
のシリル基などが挙げられる。またこのアミノ基をベン
ゾイルアセトン、アセチルアセトンなどの１，３−ジケ
トンと反応させることによって得られるエナミンの形成
による保護基も挙げられる。

【０００８】上記式〔Ｉａ〕、〔Ｉｂ〕および〔Ｉｃ〕
の２’位、３’位および６’位の水酸基の保護基として
は、核酸化学または炭水化物化学において使用される公
知の保護基が挙げられる。６’位の水酸基の保護基とし
ては、例えばホルミル、アセチル、クロロアセチル、ト
リクロロアセチル、トリフルオロアセチル、メトキシア
セチル、ピバロイル、ベンゾイル、β−ベンゾイルプロ
ピオニル、フエノキシアセチル、トリチルオキシアセチ
ルなどのアシル基、トリチル、モノメトキシトリチル、
ジメトキシトリチル、トリメトキシトリチルなどのトリ
チル基、メトキシメチル基などが挙げられる。２’位お
よび３’位の水酸基の保護基としては、ホルミル、アセ
チル、メトキシアセチル、ベンゾイル、ｐ−クロロベン
ジルオキシアセチルなどのアシル基、ｔ−ブチル、ベン
ジル、トリチル、α−エトキシエチル、α−メトキシイ
ソプロピル、テトラヒドロピラニル、メトキシテトラヒ
ドロピラニル、ｏ−ニトロベンジル、ｔ−ブチルジフエ
ニルシリル基などが挙げられる。また２’位および３’
位の水酸基は隣接する酸素原子と共に環状アセタールを
形成する形で保護される。このような保護基としては、
イソプロピリデン、メトキシメチレン、メトキシエチリ
デン、エトキシメチレン、エトキシエチリデン、ベンジ
リデン、シクロアルキリデン基などが挙げられる。

【０００９】次に、中間体〔Ｉｃ〕の合成の一例とし
て、２’位および３’位の水酸基がイソプロピリデン基
で保護され、６’位の水酸基がメトキシメチル基で保護
され、１’位のアミノ基がメトキシカルボニル基で保護
される場合について、反応式で示せば、次の通りであ
る。

【化１１】

【化１２】

【化１３】前記の中間体〔Ｉａ〕、中間体〔Ｉｂ〕、中間体〔Ｉ
ｃ〕としては、上記の如く具体的に例挙した化合物以外
に、２’および３’位の水酸基、６’位の水酸基または
１’位のアミノ基を前記で述べた保護基を導入した誘導
体についても例示される。本発明においては、上記の中
間体は光学活性の形で得られ、特に（−）−異性体が有
用である。

【００１０】シクロペンテン化合物〔Ｉｃ〕と５−アミ
ノ−４，６−ジハロピリミジンとの反応は、通常有機溶
媒中第３級有機アミンの存在下加熱下で行われる。反応
の経過はシリカゲルなどの薄層クロマトグラフイー（Ｔ
ＬＣ）、高速液体クロマトグラフイー（ＨＰＬＣ）など
により確認できるので、出発物質〔Ｉｃ〕の消失を待っ
て適宜反応を停止すればよい。反応液から得られたピリ
ミジン化合物〔ＩＩ〕を採取するには、反応溶媒を留去
し、適当な有機溶媒で抽出すればよい。さらに精製を必
要とする場合には、シリカゲルなどの担体を用いるカラ
ムクロマトグラフイーなどにより精製することができ
る。

【００１１】次に、ピリミジン化合物〔ＩＩ〕をイミダ
ゾール閉環するのであるが、４，５−ジアミノピリミジ
ン類をプリン類に閉環する公知の方法、例えばギ酸、ギ
酸アルカリ、ホルムアミド、クロルギ酸エステル、トリ
エチルオルソホルメート、Ｎ−ホルミル−ホルモリンな
どと加熱閉環する方法、ジチオギ酸アリカリで処理し、
次いで脱硫化水素化する方法により行われる。

【００１２】このようにして得られたプリン化合物〔Ｉ
ＩＩ〕の６位のハロゲノ基をアミノ基に変換するのであ
るが、通常は有機溶媒中アンモニア処理することにより
行われる。反応液から生成された式

【化１４】（式中、Ｒ’₂、Ｒ’₃およびＲ’₄は前記と同じ基を
意味する）で表されるＯ−保護ネプラノシンＡを採取す
るには、反応溶媒を留去し、適当な有機溶媒で抽出すれ
ばよい。さらに精製を必要とする場合には、シリカゲル
などの担体を用いてカラムクロマトグラフイーなどによ
り精製することができる。

【００１３】次に、Ｏ−保護ネプラノシンＡ〔ＩＶ〕の
２’位、３’位および６’位の保護基を脱離することに
よりネプラノシンＡが得られるが、この脱離化は、核酸
化学において用いられる公知の脱離方法により行われ
る。例えば、２’、３’−Ｏ−イソプロピリデン基およ
び６−Ｏ−メトキシメチル基はアルコール、例えばメタ
ノール中塩酸で処理することにより容易に脱離される。

【００１４】このようにして得られたネプラノシンＡは
公知の方法により分離精製される。例えば活性炭、活性
アルミナ、シリカゲル、吸着樹脂などの吸着剤に吸着さ
せ、適当な溶媒、例えば含水有機溶媒、弱アルカリ水溶
液で溶出するカラムクロマトグラフイー、アンバーライ
トＩＲＣ−５０、ＩＲ−１２０、ＣＧ−１２０、ダウエ
ツクス５０などのカチオン交換樹脂に吸着させ、弱アル
カリで溶出する方法、あるいはこれらの組合せによる方
法などにより行われる。

【００１５】次に出発物質〔Ｉｃ〕からネプラノシンＡ
を製造する代表例を反応式で示せば次の通りである。

【化１５】

【化１６】

【００１６】

【実施例】次に、参考例および実施例を挙げて本発明の
製造例を具体的に説明するが、これにより本発明を限定
するものでなない。なお、実施例において、（）内の
数字で表示した化合物は、前記反応式で示された数字を
意味する。参考例１化合物（２）の製造化合物（１）３ｇ（１０．６ｍＭ）をアセトン３０mlと
０．１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ８．０）の混合溶液に溶か
し、これに豚肝臓エステラーゼ（シグマ社製）３mlを加
え、３０〜３２℃で５時間攪拌した。反応液を氷冷下希
リン酸でｐＨ４とし、ジクロロメタンで数回抽出した。
ジクロロメタン層を水洗し、芒硝で乾燥後、減圧濃縮し
て化合物（２）２．８４ｇ（収率９９．６％）を得た。〔α〕²³Ｄ−２３．８°（Ｃ＝１．１７、クロロホル
ム）融点：１１５〜１１℃

【００１７】参考例２化合物（３）の製造化合物（２）２ｇ（７．４６ｍＭ）を酢酸エチル１０ml
に溶かし、これに−７８℃に冷却下オゾンを３時間吹き
込んだ。次いで過剰のオゾンを窒素ガスを通して追い出
した後、１時間還流した。反応後、減圧濃縮して化合物
（３）を定量的に得た。

【００１８】参考例３化合物（４）の製造化合物（３）１．８ｇ（６．６ｍＭ）をメタノール３０
mlに溶かし、４０〜５０℃に加温下ＮａＢＨ₄２．３ｇ
（６６ｍＭ）を少しづつ加えた。全量を加えた後、１５
分間還流した。反応液を氷水で冷却下希塩酸でｐＨ４に
調節し、室温で攪拌下ＮａＩＯ₄１．６ｇ（１．２倍モ
ル）を徐々に加え、３０分間攪拌した。反応液を希リン
酸で酸性とした後、水を加えジクロロメタンで３回抽出
した。ジクロロメタン層を芒硝で乾燥後、減圧濃縮して
化合物（４）１．２５ｇ（収率８８％）を得た。

【００１９】参考例４化合物（５）の製造化合物（４）１．２５ｇ（５．８３ｍＭ）をイソプロパ
ノール２０mlに溶かし、室温で攪拌下ＮａＢＨ₄４３１
mg（２倍モル）を少しづつ加えた後、１．５時間攪拌し
た。反応液に氷水で冷却下アセトンを加え、過剰のＮａ
ＢＨ₄を分解した後、酢酸でｐＨ５に調節した。減圧下
溶媒留去し、残渣にエタノールを加え、減圧濃縮し、乾
燥した。残渣に無水酢酸５ml、ピリジン１０mlを加え、
室温で１２時間攪拌した。反応液を氷水中に注ぎ、ベン
ゼンで抽出した。ベンゼン層を重曹水、希塩酸、水の順
で洗浄し、芒硝で乾燥した後、減圧濃縮した。残渣をシ
リカゲルカラムクロマトグラフイー（展開溶媒ジクロロ
メタン）により精製して化合物（５）７００mg（収率６
０．５％）を得た。〔α〕²⁵Ｄ＋３５．９°（Ｃ＝０．８、クロロホルム）ジクロロメタン−ジエチルエーテル（１：５）より再結
晶化した再結晶は〔α〕²⁵Ｄ＋４４．４（Ｃ＝１．０、
クロロホルム）

【００２０】参考例５化合物（６）の製造ジフエニルジセレナイド１７３mg（０．５６ｍＭ）を無
水ジメチルホルムアミド３mlに溶かし、室温にて２０分
間窒素ガスを吹き込んだ後、窒素ガス気流下ＮａＢＨ₄
４５mg（１．２１ｍＭ）を徐々に加え、１００℃まで加
熱した。次いでこれに化合物（５）２０１mg（１．０１
ｍＭ、〔α〕²⁴Ｄ＋３７．３°）のジメチルホルムアミ
ド（２ml）溶液を徐々に滴下した後、１１０〜１２０℃
で２時間攪拌した。反応液を氷水で冷却し、希塩酸を含
む氷水中に注ぎ、酢酸エチルで２回抽出した。酢酸エチ
ル層を水洗し、芒硝で乾燥後、減圧濃縮した。残渣をシ
リカゲルカラムクロマトグラフイー（展開溶媒ジクロロ
メタン、次いで、ジクロロメタン：酢酸エチル＝２：
１）により精製して化合物（６）３３５mg（収率９３
％）を得た。〔α〕²⁴Ｄ＋９．５°（Ｃ＝１．９３、クロロホルム）

【００２１】参考例６化合物（７）の製造化合物（６）９２０mg（２．７９ｍＭ）をアセトン１６
mlに溶かし、これにトリエチルアミン０．４３ml（１．
８倍モル）を加えた後、攪拌しながら−７８〜−４０℃
に冷却下クロロ炭酸エチル０．３ml（１．２倍モル）を
適下した。−４０℃で３０分間攪拌するとトリエチルア
ミン塩酸塩が析出してきた。次いで、これにＮａＮ₃２
５４mg（１．５倍モル）の水（０．５ml）溶液を徐々に
滴下し、−４０〜−１０℃で３０分間攪拌した。ＩＲで
アジドを確認した後、反応液を飽和食塩水を含む氷中に
注ぎ、ジクロロメタンで数回抽出した。ジクロロメタン
層を水洗し、芒硝で乾燥後、減圧濃縮し、乾燥した。次
いで乾燥ベンゼン１０mlを加え、３０分間還流した。Ｉ
Ｒでイソシアネートをチェックした後、無水メタノール
１０mlを加え、１時間還流した。反応液を減圧下溶媒留
去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフイー（展
開溶媒ジクロロメタン）により精製して化合物（７）９
０６mg（収率９１％）を得た。〔α〕²⁰Ｄ＋１８．８°（Ｃ＝１．０５、クロロホル
ム）融点：８１〜８３℃

【００２２】参考例７化合物（８）の製造化合物（７）１６７mg（０．４３５ｍＭ）を乾燥ジクロ
ロメタン５mlに溶かし、−７８℃に冷却下オゾンを１５
分間吹き込んだ。次いで窒素ガスで過剰のオゾンを追い
出し、芒硝で乾燥後、少量のピリジンを加え、２時間還
流した。反応液をシリカゲルカラムクロマトグラフイー
（展開溶媒ジクロロメタン）により精製して化合物
（８）９４mg（収率９５％）を得た。〔α〕¹⁸Ｄ＋１３８．８°（Ｃ＝１．０１、クロロホル
ム）

【００２３】参考例８化合物（９）の製造化合物（８）４６mg（０．２１ｍＭ）を乾燥ジクロロメ
タン５mlに溶かし、氷冷下ｍ−クロロ過安息香酸５７mg
（１．５倍モル）を加え、室温で１６時間攪拌した。反
応液を亜硫酸水素ナトリウム水溶液、重曹水の順で洗浄
し、芒硝で乾燥後、減圧下溶媒留去した。得られた油状
物をシリカゲルカラムクロマトグラフイー（展開溶媒ジ
クロロメタン）により精製して化合物（９）４５mg（収
率９１％）を得た。〔α〕²⁰Ｄ＋１１１．３°（Ｃ＝１．０、クロロホル
ム）融点：１０２〜１０４℃

【００２４】参考例９化合物（１０）の製造乾燥トルエン３mlをアルゴン気流下−７８℃に冷却下ト
リメチルシリルトリフルオロメタンスルホネート０．４
５ml（５倍モル）および２，６−ルチジン０．２ml（５
倍モル）を加え、３０分間攪拌した。これに化合物
（９）１０３mg（０．４２ｍＭ）の乾燥トルエン溶液を
徐々に滴加し、−７８℃で３０分間、次いで徐々に昇温
して−２０℃で３時間攪拌した。次いで、これに１，８
−ジアザビシクロ〔５．４．０〕ウンデンセークーエン
０．３mlを徐々に適加し、室温で１６時間攪拌した。反
応混合物を重曹水に注ぎ、酢酸エチルで３回抽出した。
酢酸エチル層を食塩水で洗浄後、減圧下溶媒留去した。
残渣にメタノール２ml、炭酸カリウム２７０mg（２倍モ
ル）を加え、室温で２時間攪拌して脱シリル化した後、
減圧下溶媒留去した。残渣をジクロロメタンで３〜４回
抽出し、減圧下溶媒留去した。残渣をシリカゲルカラム
クロマトグラフイー（展開溶媒酢酸エチル：ヘキサン＝
１：１、次いで酢酸エチル）により精製して原料３５mg
（回収率３４％）、化合物（１０）２９mg（収率２８
％）を得た。化合物（１０）をジエチルエーテル−酢酸
エチルより再結晶化して再結晶品を得た。〔α〕¹⁸Ｄ−６７．２°（Ｃ＝０．５、クロロホルム）融点：１３９〜１４０℃

【００２５】参考例１０化合物（１１）の製造化合物（１０）８４mg（０．３４５ｍＭ）を乾燥ジクロ
ロメタン６mlに溶かし、これにアルゴン気流下エチルジ
イソプロピルアミン８９mg（０．６９ｍＭ）を加え、０
℃に冷却下メトキシメチルクロライド５６mg（２倍モ
ル）を滴下し、室温で１６時間攪拌した。反応混合物を
氷水中に注ぎ、ジクロロメタン層を重曹水、食塩水の順
で洗浄し、芒硝で乾燥後、減圧下溶媒留去した。残渣を
シリカゲルカラムクロマトグラフイー（展開溶媒酢酸エ
チル：ヘキサン＝１：１）により精製して定量的に油状
の化合物（１１）９９mgを得た。〔α〕²⁰Ｄ−３６．２°（Ｃ＝１．１、クロロホルム）

【００２６】参考例１１化合物（１２）の製造化合物（１１）１２７mg（０．４４２ｍＭ）にメターノ
ル１４ml、２．５Ｎ水酸化カリウム水溶液１４mlを加
え、アルゴン気流下１２時間攪拌還流した。反応液を減
圧下溶媒留去し、酢酸エチルで３回抽出した。酢酸エチ
ル層を食塩水で洗浄し、芒硝で乾燥後、減圧濃縮して組
製の化合物１０１mgを得た。これは精製することなく次
の反応に使用する。

【００２７】実施例１化合物（１３）の製造化合物（１２）１０１mg（０．４４ｍＭ）にブタノール
１４ml、トリエチルアミン０．６ml（１０倍モル）およ
び４，６−ジクロロ−５−アミノピリミジン１８１mg
（２．５倍モル）を加え、アルゴン気流下４０時間攪拌
還流した。反応液を減圧下溶媒留去し、残渣をジクロロ
メタンで数回抽出した後、シリカゲルカラムクロマトグ
ラフイー（展開溶媒酢酸エチル：ヘキサン＝１：１、次
いで４：１）により精製して化合物（１３）１１６mg
（収率７３％）を得た。〔α〕¹⁹Ｄ−７７．５°（Ｃ＝１．０６、クロロホル
ム）原料（１２）１６mg回収した。

【００２８】実施例２化合物（１４）の製造化合物（１３）１１６ml（０．３２５ｍＭ）をトリエチ
ルホルソホルメートおよび無水酢酸の当モルの混合物２
mlに溶かし、室温で２時間攪拌した。反応液を減圧下冷
時濃縮し、残渣を重曹水を含む氷に注ぎ、しばらく攪拌
した。これを酢酸エチルで抽出し、抽出液を水洗し、芒
硝で乾燥した後、減圧下溶媒留去して定量的に化合物
（１４）を得た。この残渣は、精製することなく次の反
応に使用する。

【００２９】実施例３化合物（１５）の製造実施例２で得た残渣１１９mg（０．３２５ｍＭ）を乾燥
テトラヒドロフランに溶かし、これに−７８℃に冷却下
乾燥アンモニアガスを１時間吹き込んだ。次いで反応物
を封管し、４０〜５０℃で１６時間加温した。反応後、
開封して減圧下溶媒留去し、次いで残渣をジクロロメタ
ンで数回抽出した。抽出液を水洗し、芒硝で乾燥した
後、減圧下溶媒留去した。残渣をシリカゲルカラムクロ
マトグラフイー（展開溶媒酢酸エチル：ヘキサン＝１：
１、４：１、次いでジクロロメタン・メタノール＝９
５：５）により精製して化合物（１５）２２mg（収率２
０％）を得た。〔α〕²⁰Ｄ−６９．８°（Ｃ＝１．１、クロロホルム）

【００３０】実施例４ネプラノシンＡ（１６）の製
造化合物（１５）２２mg（０．０６３ｍＭ）をメタノール
１mlおよび２Ｎ塩酸１mlの混合溶液に溶かし、室温で１
６時間攪拌した。反応液を減圧下メタノールを留去し、
残渣に水を加え、アンバーライトＣＧ１２０（Ｈ⁺）に
チャージして、０．５％アンモニア水で溶出した。溶出
液を減圧濃縮してネプラノシンＡ１３．３mg（収率８０
％）を得た。〔α〕²⁵Ｄ−１４８°（Ｃ＝０．４５、水）融点：２１５〜２１７℃ 上記製品をメタノール：水＝９：１により再結晶化して
再結品を得た。〔α〕²⁰Ｄ−１５２°（Ｃ＝０．３、水）融点：２２０〜２２２℃ このものの比旋光度および融点は醗酵法により得られる
ネプラノシンＡの文献値と一致した。

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】式【化１】（式中、Ｒ’₂およびＲ’₃は各々水酸基の保護基、
Ｒ’₄は水酸基の保護基を示す）で表されるシクロペン
テン化合物を５−アミノ−４，６−ジハロピリミジンを
反応させて式【化２】（式中、Ｘはハロゲン原子を示し、Ｒ’₂、Ｒ’₃およ
びＲ’₄は前記と同じ基を意味する）で表されるピリミ
ジン化合物を得、該化合物をイミダゾール閉環して式【化３】（式中、Ｒ’₂、Ｒ’₃、Ｒ’₄およびＸは前記と同じ
基を意味する）で表されるプリン化合物を得、該化合物
の６位のハロゲノ基をアミノ基に変換し、次いで２’
位、３’位および６位の水酸基の保護基を脱離すること
を特徴とするネプラノシンＡの製造法。
【請求項２】シクロペンテン化合物が光学活性体であ
ることを特徴とする請求項１記載の製造法。
【請求項３】光学活性体が（−）−異性体であること
を特徴とする請求項２記載の製造法。
【請求項４】Ｒ’₂がＲ’₃と共にイソプロピリデン
基であり、Ｒ’₄がメトキシメチレン基であることを特
徴とする請求項１記載の製造法。