JPH0597872A - ホスフアチジルイノシトールの分離・精製法 - Google Patents
ホスフアチジルイノシトールの分離・精製法Info
- Publication number
- JPH0597872A JPH0597872A JP3283544A JP28354491A JPH0597872A JP H0597872 A JPH0597872 A JP H0597872A JP 3283544 A JP3283544 A JP 3283544A JP 28354491 A JP28354491 A JP 28354491A JP H0597872 A JPH0597872 A JP H0597872A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- phosphatidylinositol
- solvent
- mixed
- purity
- phospholipid
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Landscapes
- Fats And Perfumes (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【構成】 ホスファチジルイノシトールを含有する混合
リン脂質を、水または酢酸水溶液を含む、アルコールと
非極性溶媒の混合溶媒に溶解し、高速液体クロマトグラ
フィーに供して、ホスファチジルイノシトールを分離・
精製する。 【効果】 ホスファチジルイノシトールを含有する混合
リン脂質から、安全性，汎用性の高い安価な溶媒を使用
して、汎用的な機器を用いた簡便な操作で、容易に収率
よく、高純度のホスファチジルイノシトールを分離・精
製できる。
リン脂質を、水または酢酸水溶液を含む、アルコールと
非極性溶媒の混合溶媒に溶解し、高速液体クロマトグラ
フィーに供して、ホスファチジルイノシトールを分離・
精製する。 【効果】 ホスファチジルイノシトールを含有する混合
リン脂質から、安全性，汎用性の高い安価な溶媒を使用
して、汎用的な機器を用いた簡便な操作で、容易に収率
よく、高純度のホスファチジルイノシトールを分離・精
製できる。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、混合リン脂質からホス
ファチジルイノシトールを高純度に精製する方法に関す
るものである。本発明によって得られる高純度ホスファ
チジルイノシトールは、食品，化粧品，トイレタリー，
農薬，飼料，水産などの分野で栄養剤，乳化剤等とし
て、また医薬分野では乳化剤，リポソーム形成基剤等と
して幅広く利用される。
ファチジルイノシトールを高純度に精製する方法に関す
るものである。本発明によって得られる高純度ホスファ
チジルイノシトールは、食品，化粧品，トイレタリー，
農薬，飼料，水産などの分野で栄養剤，乳化剤等とし
て、また医薬分野では乳化剤，リポソーム形成基剤等と
して幅広く利用される。
【０００２】
【従来の技術】天然物由来のリン脂質は、通常、ホスフ
ァチジルコリン，ホスファチジルエタノールアミン，ホ
スファチジルイノシトール，ホスファチジルセリン，ホ
スファチジン酸，それらのリゾ体，スフィンゴミエリン
などの混合物からなり、これから特定のリン脂質を分画
するために、メタノール，エタノール，アセトン，２−
プロパノール，ヘキサン，クロロホルムなどの溶剤によ
る抽出や再結晶などの溶剤分別法、シリカゲル，アルミ
ナ，イオン交換樹脂など吸着剤を用いた方法、アセチル
化など誘導体による分画法などが利用されている。
ァチジルコリン，ホスファチジルエタノールアミン，ホ
スファチジルイノシトール，ホスファチジルセリン，ホ
スファチジン酸，それらのリゾ体，スフィンゴミエリン
などの混合物からなり、これから特定のリン脂質を分画
するために、メタノール，エタノール，アセトン，２−
プロパノール，ヘキサン，クロロホルムなどの溶剤によ
る抽出や再結晶などの溶剤分別法、シリカゲル，アルミ
ナ，イオン交換樹脂など吸着剤を用いた方法、アセチル
化など誘導体による分画法などが利用されている。
【０００３】ホスファチジルイノシトールの分画に関し
ては、塩化炭化水素とカラムクロマトを用いた濃縮例
（特開平３−１４１２８８号公報）や、ヘキサン，２−
プロパノール，水の混合溶剤でグラジェント溶出を行っ
た分画例（FETTE SEIFEN ANSTRICHMITTEL,Nr.1，PP6-8,
1986）などがある。
ては、塩化炭化水素とカラムクロマトを用いた濃縮例
（特開平３−１４１２８８号公報）や、ヘキサン，２−
プロパノール，水の混合溶剤でグラジェント溶出を行っ
た分画例（FETTE SEIFEN ANSTRICHMITTEL,Nr.1，PP6-8,
1986）などがある。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】ホスファチジルイノシ
トールの精製においては、従来、リン脂質の分画に使わ
れてきた溶剤分別法や誘導体による分画法では、特にホ
スファチジルエタノールアミンやホスファチジン酸との
分離が困難なことから、ホスファチジルイノシトールを
高純度に濃縮することはできなかった。また、これらの
方法とカラムクロマトグラフィーを組み合わせた分画法
でも、クロロホルム，ジクロロメタンなど人体に害の大
きい塩化炭化水素系の溶剤を使用したり、グラジェント
溶出のような煩雑な操作と高精度の設備を要求する手段
を用いない限り、ホスファチジルイノシトールを高純度
に精製することは不可能であった。
トールの精製においては、従来、リン脂質の分画に使わ
れてきた溶剤分別法や誘導体による分画法では、特にホ
スファチジルエタノールアミンやホスファチジン酸との
分離が困難なことから、ホスファチジルイノシトールを
高純度に濃縮することはできなかった。また、これらの
方法とカラムクロマトグラフィーを組み合わせた分画法
でも、クロロホルム，ジクロロメタンなど人体に害の大
きい塩化炭化水素系の溶剤を使用したり、グラジェント
溶出のような煩雑な操作と高精度の設備を要求する手段
を用いない限り、ホスファチジルイノシトールを高純度
に精製することは不可能であった。
【０００５】本発明は、健康面での悪影響が小さく、汎
用性のある安全な物質を用いて、高純度のホスファチジ
ルイノシトールを簡易に製造できる方法の提供を目的と
する。
用性のある安全な物質を用いて、高純度のホスファチジ
ルイノシトールを簡易に製造できる方法の提供を目的と
する。
【０００６】
【課題を解決するための手段】即ち本発明は、ホスファ
チジルイノシトールを含有する混合リン脂質を、水また
は酢酸水溶液を含む、低級アルコールと非極性溶媒の混
合溶媒に溶解させ、高速液体クロマトグラフィーに供す
ることを特徴とするホスファチジルイノシトールの分離
・精製法である。
チジルイノシトールを含有する混合リン脂質を、水また
は酢酸水溶液を含む、低級アルコールと非極性溶媒の混
合溶媒に溶解させ、高速液体クロマトグラフィーに供す
ることを特徴とするホスファチジルイノシトールの分離
・精製法である。
【０００７】本発明に用いる混合リン脂質は、目的とす
るリン脂質を含むものであれば動物，植物，微生物など
の起源は問題でなく、いずれのリン脂質でも使用でき
る。天然物由来の混合リン脂質には、リン脂質以外の成
分、例えばグリセリド等の中性脂質や糖乃至糖脂質など
が含まれていることが多く、このため本発明の方法を適
用する前に、エタノールまたは含水エタノールなどの溶
剤を用いてこれらを除去しておくことが望ましい。
るリン脂質を含むものであれば動物，植物，微生物など
の起源は問題でなく、いずれのリン脂質でも使用でき
る。天然物由来の混合リン脂質には、リン脂質以外の成
分、例えばグリセリド等の中性脂質や糖乃至糖脂質など
が含まれていることが多く、このため本発明の方法を適
用する前に、エタノールまたは含水エタノールなどの溶
剤を用いてこれらを除去しておくことが望ましい。
【０００８】本発明の方法によって、混合リン脂質から
高純度ホスファチジルイノシトールを得る手順を次に説
明する。上記の混合リン脂質を水または酢酸水溶液を含
む、アルコールと非極性溶媒の混合溶媒に溶解させる。
このとき、混合溶媒は二層分離を示さない均一系であ
る。低級アルコールの種類、即ち直鎖もしくは側鎖，飽
和もしくは不飽和の有無は特に限定されないが、２−プ
ロパノール，エタノールなど炭素数１０以下のアルコー
ルを用いるのが好ましい。また、非極性溶媒としては、
特定のものに制限されることはないが、例えば食品添加
物用のｎ−ヘキサンまたはアセトンを用いるのが良い。
次に、本発明で用いる混合溶媒は、非極性溶媒１容に対
して水または酢酸水溶液を０．０１から０．３３容、好
ましくは０．２から０．２３容を混合したものであり、
この溶媒にさらにアルコールを加えたものである。添加
する該アルコール量は、混合溶媒が二層分離しない限り
限定されないが、好ましくは非極性溶媒１容に対して１
から１．５容である。なお、使用する酢酸水溶液の濃度
は０〜７０容積％、好ましくは１０〜４０容積％であ
る。
高純度ホスファチジルイノシトールを得る手順を次に説
明する。上記の混合リン脂質を水または酢酸水溶液を含
む、アルコールと非極性溶媒の混合溶媒に溶解させる。
このとき、混合溶媒は二層分離を示さない均一系であ
る。低級アルコールの種類、即ち直鎖もしくは側鎖，飽
和もしくは不飽和の有無は特に限定されないが、２−プ
ロパノール，エタノールなど炭素数１０以下のアルコー
ルを用いるのが好ましい。また、非極性溶媒としては、
特定のものに制限されることはないが、例えば食品添加
物用のｎ−ヘキサンまたはアセトンを用いるのが良い。
次に、本発明で用いる混合溶媒は、非極性溶媒１容に対
して水または酢酸水溶液を０．０１から０．３３容、好
ましくは０．２から０．２３容を混合したものであり、
この溶媒にさらにアルコールを加えたものである。添加
する該アルコール量は、混合溶媒が二層分離しない限り
限定されないが、好ましくは非極性溶媒１容に対して１
から１．５容である。なお、使用する酢酸水溶液の濃度
は０〜７０容積％、好ましくは１０〜４０容積％であ
る。
【０００９】続いて、上記の混合溶媒に溶解した混合リ
ン脂質を、ＨＰＬＣ（高速液体クロマトグラフィー）に
供し、同じ混合溶媒で溶出させる。溶出したフラクショ
ンの溶剤を常法により留去することによって、本発明の
目的の成分を高純度に精製することができる。なお、本
発明では、混合溶剤に酢酸を添加することにより溶出パ
ターンが変化し、塩素系炭化水素やクラジェント溶出を
用いなくともホスファチジルイノシトールを分画でき
る。また、混合リン脂質を前述のようにエタノールまた
は含水エタノールなどで前処理し、目的とするリン脂質
の純度を予め高めておけば、酢酸を添加せず水の量を調
節するのみで、特定のリン脂質を高純度に精製すること
が可能である。
ン脂質を、ＨＰＬＣ（高速液体クロマトグラフィー）に
供し、同じ混合溶媒で溶出させる。溶出したフラクショ
ンの溶剤を常法により留去することによって、本発明の
目的の成分を高純度に精製することができる。なお、本
発明では、混合溶剤に酢酸を添加することにより溶出パ
ターンが変化し、塩素系炭化水素やクラジェント溶出を
用いなくともホスファチジルイノシトールを分画でき
る。また、混合リン脂質を前述のようにエタノールまた
は含水エタノールなどで前処理し、目的とするリン脂質
の純度を予め高めておけば、酢酸を添加せず水の量を調
節するのみで、特定のリン脂質を高純度に精製すること
が可能である。
【００１０】
【実施例】以下の実施例中、リン脂質の成分のうち、ホ
スファチジルコリンをＰＣ，ホスファチジルエタノール
アミンをＰＥ，ホスファチジルイノシトールをＰＩ，ホ
スファチジン酸をＰＡと略記する。 実施例１ 粉末状大豆レシチンＬＰ−２０（日清製油（株）製；リ
ン脂質組成はＰＣ：２８％，ＰＥ：２６％，ＰＩ：１６
％，ＰＡ：８％）を（ヘキサン／２−プロパノール／３
０％酢酸＝４５／４５／１０（ｖ／ｖ／ｖ））に溶解
し、同溶出液を予め送液したシリカゲルカラム（ＴＳＫ
gel ＳＩＬ６０；４．６φ×２５０mm）を通過させ、高
速液体クロマトグラフィーによる成分分画を行った。検
出は示差屈折計を用いた。図１に示すように、各リン脂
質は良好に分離され、ＰＩのフラクションを分取し溶剤
を留去したところ、ＰＩ純度９１％の分画物が得られ
た。
スファチジルコリンをＰＣ，ホスファチジルエタノール
アミンをＰＥ，ホスファチジルイノシトールをＰＩ，ホ
スファチジン酸をＰＡと略記する。 実施例１ 粉末状大豆レシチンＬＰ−２０（日清製油（株）製；リ
ン脂質組成はＰＣ：２８％，ＰＥ：２６％，ＰＩ：１６
％，ＰＡ：８％）を（ヘキサン／２−プロパノール／３
０％酢酸＝４５／４５／１０（ｖ／ｖ／ｖ））に溶解
し、同溶出液を予め送液したシリカゲルカラム（ＴＳＫ
gel ＳＩＬ６０；４．６φ×２５０mm）を通過させ、高
速液体クロマトグラフィーによる成分分画を行った。検
出は示差屈折計を用いた。図１に示すように、各リン脂
質は良好に分離され、ＰＩのフラクションを分取し溶剤
を留去したところ、ＰＩ純度９１％の分画物が得られ
た。
【００１１】実施例２ 実施例１に記載の大豆レシチンＬＰ−２０をエタノール
で前処理して得た不溶分（ＰＩ純度２１％）１．９２ｇ
を（ヘキサン／２−プロパノール／３０％酢酸＝４５／
４５／１０（ｖ／ｖ／ｖ））３０mlに溶解し、予め同溶
出溶媒を送液した分取用シリカゲルカラム（ＳＯＫＥＮ
ＰＡＫ ＳＩＬ；８０φ×５００mm×２本）を用いて
高速液体クロマトグラフィーを行い、ＰＩの分取を行っ
た（図２参照）。検出には紫外吸光計を用い、ＵＶ２１
０nmを測定した。ＰＩのピークフラクションを集め、溶
媒を留去して０．３８ｇの分画物を得た。分画物のＰＩ
純度は９３％、ＰＩ回収率は８８％であった。
で前処理して得た不溶分（ＰＩ純度２１％）１．９２ｇ
を（ヘキサン／２−プロパノール／３０％酢酸＝４５／
４５／１０（ｖ／ｖ／ｖ））３０mlに溶解し、予め同溶
出溶媒を送液した分取用シリカゲルカラム（ＳＯＫＥＮ
ＰＡＫ ＳＩＬ；８０φ×５００mm×２本）を用いて
高速液体クロマトグラフィーを行い、ＰＩの分取を行っ
た（図２参照）。検出には紫外吸光計を用い、ＵＶ２１
０nmを測定した。ＰＩのピークフラクションを集め、溶
媒を留去して０．３８ｇの分画物を得た。分画物のＰＩ
純度は９３％、ＰＩ回収率は８８％であった。
【００１２】実施例３ 液々抽出を行い、ＰＩ以外の成分を減少させた大豆レシ
チン１．８６ｇを（ヘキサン／２−プロパノール／水＝
６０／８０／１２（ｖ／ｖ／ｖ））３０mlに溶解させ、
実施例２と同様にＰＩの分取を行った（図３参照）。
０．７９ｇの分画物が得られ、ＰＩ純度は原料において
は４６％であったが、分画物では９７％に上昇した。
チン１．８６ｇを（ヘキサン／２−プロパノール／水＝
６０／８０／１２（ｖ／ｖ／ｖ））３０mlに溶解させ、
実施例２と同様にＰＩの分取を行った（図３参照）。
０．７９ｇの分画物が得られ、ＰＩ純度は原料において
は４６％であったが、分画物では９７％に上昇した。
【００１３】比較例 実施例１に記載の大豆レシチンＬＰ−２０を（ヘキサン
／２−プロパノール＝２０／３０（ｖ／ｖ））に溶解
し、実施例１と同様に高速液体クロマトグラフィーを行
ったところ、ＰＩのピークが他成分と重なり、分画物の
ＰＩ純度は原料に比べ殆ど上昇が認められなかった。
／２−プロパノール＝２０／３０（ｖ／ｖ））に溶解
し、実施例１と同様に高速液体クロマトグラフィーを行
ったところ、ＰＩのピークが他成分と重なり、分画物の
ＰＩ純度は原料に比べ殆ど上昇が認められなかった。
【００１４】
【発明の効果】本発明により、安全で安価な汎用性の高
い溶剤のみを使って、混合リン脂質から高純度のホスフ
ァチジルイノシトールを容易に、収率よく分離・精製す
ることができる。得られるホスファチジルイノシトール
は、食品素材，飼料，化粧品素材などに用いた場合、残
留物の危険性が小さく、安全性が高いという利点を有し
ている。また、極めて高純度の産物が得られるため、リ
ポソーム形成基材等の医薬品素材，試薬などとしてその
ま用いることができる。さらに、シリカゲルカラム等の
一般的な分離操作を用いるため、分離システムのスケー
ルアップも容易である。
い溶剤のみを使って、混合リン脂質から高純度のホスフ
ァチジルイノシトールを容易に、収率よく分離・精製す
ることができる。得られるホスファチジルイノシトール
は、食品素材，飼料，化粧品素材などに用いた場合、残
留物の危険性が小さく、安全性が高いという利点を有し
ている。また、極めて高純度の産物が得られるため、リ
ポソーム形成基材等の医薬品素材，試薬などとしてその
ま用いることができる。さらに、シリカゲルカラム等の
一般的な分離操作を用いるため、分離システムのスケー
ルアップも容易である。
【００１５】
以下の各図面中、各リン脂質成分をホスファチジルコリ
ン：ＰＣ，ホスファチジルエタノールアミン：ＰＥ，ホ
スファチジルイノシトール：ＰＩ，ホスファチジン酸：
ＰＡと略記する。
ン：ＰＣ，ホスファチジルエタノールアミン：ＰＥ，ホ
スファチジルイノシトール：ＰＩ，ホスファチジン酸：
ＰＡと略記する。
【図１】実施例１の高速液体クロマトグラフィーにより
得られたクロマトグラム。横軸は経過時間（分）、縦軸
は示差屈折計の相対感度を示す。
得られたクロマトグラム。横軸は経過時間（分）、縦軸
は示差屈折計の相対感度を示す。
【図２】実施例２の高速液体クロマトグラフィーにより
得られたクロマトグラム。横軸は経過時間（分）、縦軸
はＵＶ検出器の相対感度を示す。
得られたクロマトグラム。横軸は経過時間（分）、縦軸
はＵＶ検出器の相対感度を示す。
【図３】実施例３の高速液体クロマトグラフィーにより
得られたクロマトグラム。横軸は経過時間（分）、縦軸
はＵＶ検出器の相対感度を示す。
得られたクロマトグラム。横軸は経過時間（分）、縦軸
はＵＶ検出器の相対感度を示す。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 中村 準 東京都世田谷区奥沢８−５−５ (72)発明者 松本 和典 神奈川県横浜市神奈川区高島台７−３− 306 (72)発明者 渋谷 伸一 神奈川県相模原市上鶴間2313
Claims (1)
- 【請求項１】 ホスファチジルイノシトールを含有する
混合リン脂質を、水または酢酸水溶液を含む、低級アル
コールと非極性溶媒の混合溶媒に溶解させて、高速液体
クロマトグラフィーに供することを特徴とするホスファ
チジルイノシトールの分離・精製法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3283544A JPH0597872A (ja) | 1991-10-03 | 1991-10-03 | ホスフアチジルイノシトールの分離・精製法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3283544A JPH0597872A (ja) | 1991-10-03 | 1991-10-03 | ホスフアチジルイノシトールの分離・精製法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0597872A true JPH0597872A (ja) | 1993-04-20 |
Family
ID=17666904
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP3283544A Pending JPH0597872A (ja) | 1991-10-03 | 1991-10-03 | ホスフアチジルイノシトールの分離・精製法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0597872A (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0749693A3 (en) * | 1995-06-19 | 1998-09-16 | Kao Corporation | Method of concentration of acidic phospholipid |
| JP2003028849A (ja) * | 2001-07-10 | 2003-01-29 | Hiromasa Tojo | 自動化脂質組成一斉分析装置 |
-
1991
- 1991-10-03 JP JP3283544A patent/JPH0597872A/ja active Pending
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0749693A3 (en) * | 1995-06-19 | 1998-09-16 | Kao Corporation | Method of concentration of acidic phospholipid |
| JP2003028849A (ja) * | 2001-07-10 | 2003-01-29 | Hiromasa Tojo | 自動化脂質組成一斉分析装置 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4235793A (en) | Process to obtain oily, highly purified phosphatidylcholines | |
| US11154525B2 (en) | Purified compositions of polyunsaturated fatty acids, their preparation method and their use | |
| Marcus et al. | Platelet phosphatides. Their fatty acid and aldehyde composition and activity in different clotting systems | |
| DE69011739T2 (de) | Verfahren zur Herstellung von Phosphatidsäure. | |
| CA1164478A (en) | Process for the separation of oils and/or phosphatidylethanolamine from alcohol soluble phosphatidylcholine products containing the same | |
| US4425276A (en) | Process for the separation of oil and/or phosphatidylethanolamine from alcohol soluble phosphatidylcholine products containing the same | |
| US5519159A (en) | Phosphatidylcholine with high oxidative stability and process for its preparation | |
| US5453523A (en) | Process for obtaining highly purified phosphatidylcholine | |
| JPH064653B2 (ja) | ホスフアチジルコリンの単離方法 | |
| AU675116B2 (en) | Method for extracting sphingomyelin from phospholipid con taining fat concentrate | |
| CA2676484A1 (en) | Process for producing sphingomyelin and plasmalogen-form glycerophospholipid | |
| US4443378A (en) | Process for the separation of acylated phospholipids from phosphatidylcholine products containing the same | |
| Hara et al. | Simple procedures for the rapid cleavage of ester lipids and for the large-scale isolation from brain of cerebroside sulfate | |
| JPH0597872A (ja) | ホスフアチジルイノシトールの分離・精製法 | |
| De Koning | Phospholipids of marine origin. VI. The octopus (Octopus vulgaris) | |
| EP0115981A1 (fr) | Procédé de fractionnement des phosphatides | |
| Wurster Jr et al. | Thin‐layer chromatographic separation of dimethylphosphatidates derived from lecithins | |
| JP6763521B2 (ja) | ２−ｄｈａ−リゾホスファチジルコリン含有脂質組成物及びその製造方法 | |
| KR830000794B1 (ko) | 유(油)함유 고순도 포스파티딜콜린의 제조방법 | |
| JP2793317B2 (ja) | ホスファチジルコリン或いはホスファチジルエタノールアミンの分離方法 | |
| Reers et al. | Separation of phosphatidylethanolamine from its oxidation and hydrolysis products by high-performance liquid chromatography | |
| SU825084A1 (ru) | Способ одновременного получения дифосфатидилглицерина, фосфатидилэтаноламина и фосфатидилхолина 1 2 | |
| JPH04282317A (ja) | 血中コレステロール低下剤 | |
| JPH0597873A (ja) | ホスフアチジルイノシトールの分離・精製及び濃縮方法 | |
| JPH056551B2 (ja) |