JPH06114250A

JPH06114250A - ウイルス選択的除去材料

Info

Publication number: JPH06114250A
Application number: JP4270632A
Authority: JP
Inventors: Masato Onishi; 誠人大西; Takashi Owada; 尚大和田
Original assignee: Terumo Corp
Current assignee: Terumo Corp
Priority date: 1992-10-09
Filing date: 1992-10-09
Publication date: 1994-04-26

Abstract

(57)【要約】【構成】材料表面にアミン化合物を固定化したウイルス
選択的除去材料。【効果】本発明のウイルス選択的除去材料は、取り扱い
が容易であり、しかもウイルスに対して選択的な相互作
用を有し、多孔性膜等に使用した場合に、簡便で処理速
度の優れた膜になる。また、ウイルスの認識・分離（除
去）・濃縮などに使用することができるため、食品工
業、発酵工業、医薬品工業を初めとした産業界で広く実
用可能な材料である。さらに、血漿などの蛋白質成分を
含む溶液中でもウイルスを認識できるため、医療や生活
現場におけるウイルス汚染やウイルス感染の防止、治
療、診断などに効果を発揮する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、アミン化合物を表面に
固定化したウイルス選択的除去材料に関し、詳しくは、
血漿中や血液成分を含んだ蛋白溶液より選択的にウイル
スを除去する材料に関する。

【０００２】

【従来の技術】多くのウイルス粒子の等電点（ｐＩ）
は、３〜６であり、中性領域では負電荷を有しているた
め、不純物の少ない水などからは、静電相互作用により
ウイルスを吸着することができる。そのようなウイルス
除去材料としては、特開平３−１２３６３０に記載され
ているように、ポリビニルピリジニウムなどのポリカチ
オン構造を表面に有する材料や多孔質膜がある。しかし
ながら、従来のカチオン性フィルタ−は、血漿中や血液
中などに代表される高蛋白濃度の溶液中では、蛋白質の
カチオン性表面への非特異的吸着が起こるため、ウイル
スを選択的に除去することは困難だった。

【０００３】体液中や蛋白溶液中などよりウイルスを除
去するフィルタ−としては、特開平２−１６７２３２に
記載の再生セルロ−ス膜がある。この膜の孔径は、ウイ
ルス粒子より小さいため、ウイルスは透過できない。し
かしながら孔径が小さいために透過速度が小さく、ま
た、目詰まりが生じやすいといった問題点を有してい
た。

【０００４】生物学的親和性を利用して血中や血漿中な
どよりウイルスを分離する材料として、細胞表層に存在
するウイルスとの結合部位（リセプタ−）を材料表面に
固定化した材料が、国際公開番号８９／０１８１３に記
載されている。しかしながら、この方法は、細胞からリ
セプタ−を精製するプロセスやそのリセプタ−を基材に
結合させるプロセスが煩雑であり、また生体由来成分を
用いているため、コスト、性能の安定化、経時的変化な
どが問題となる。

【０００５】

【発明が解決しようとする課題】本発明は、取り扱いが
容易であり、しかもウイルスに対して選択的な相互作用
を有し、多孔性膜等に使用した場合には簡便で処理速度
の優れた膜となるウイルス除去可能な材料を提供するこ
とにある。

【０００６】

【課題を解決するための手段】上記発明の目的は以下に
示す材料によって達成される。（１）表面にアミン化合物を固定化した材料。（２）アミン化合物がアジリジン化合物の重合体または
共重合体である（１）に記載の材料。（３）アミン化合物が、材料表面に導入された反応性官
能基を有する表面グラフト鎖を介して材料表面に導入さ
れた（１）又は（２）に記載の材料。

【０００７】本発明においてウイルス選択的除去材料と
は、ウイルス活性を不活化もしくは低減させる材料であ
る。本材料は、感染予防やウイルス分離（収集）などを
目的として使用される材料であって、媒体と接触して使
用される。ウイルス活性の除去率は、性状の異なる複数
のウイルスに対して少なくとも９０％、好ましくは９９
％以上であることが望ましい。ウイルスといっても種類
が多く、使用目的によっても標的となるウイルスは異な
るが、「ウイルス除去率」は、例えば、指標ウイルスと
してヘルペスウイルス（ＨＳＶ−１）、φＸ１７４、エ
イズウイルス（ＨＩＶ）などを用いて求めることができ
る。

【０００８】本発明の材料は、蛋白質を含む溶液からも
ウイルスを選択的に除去することが可能な材料である。
蛋白質を含む溶液として、血液、血漿、体液、培養液、
あるいはこれらの液体由来の蛋白成分を含む溶液などを
好適に例示できるが、特に、血漿や血漿蛋白質を含む液
体からウイルスを選択的に吸着除去できる材料であるこ
とが特徴であり、そのような材料をフィルターに使用し
た例は、本発明−が最初である。

【０００９】本発明のウイルス選択的吸着材料は、表面
にアミン化合物が固定化された水不溶性材料である。ア
ミン化合物とは、アンモニアの水素をアルキルやアリ−
ル基で置換した化合物であり、分子内に１級〜３級のア
ミノ基を有している。分子内に複数の１級もしくは２級
アミンを有する化合物が好ましく、そのような化合物と
しては、アジリジン化合物の重合体または共重合体を好
適に例示できる。アジリジン化合物とは、１分子中にア
ジリジン基を少なくとも１個含有する化合物を構成成分
とする重合体または共重合体のことであり、そのアジリ
ジン基は、アルキル基その他の置換基で置換されている
ものであっても良い。さらに具体的には、アジリジン化
合物は、一般に、次式で表される。

【００１０】

【化１】

【００１１】（式中、Ｒ¹，Ｒ²，Ｒ³、Ｒ⁴及びＲ⁵は水
素、脂肪族及び芳香族炭化水素、ハロゲンその他の置換
基を示す。）

【００１２】またアジリジン化合物の重合体または共重
合体の特定の例としては、例えば、エチレンイミン、プ
ロピレンイミン、ブチレンイミン、Ｎ−ヒドロキシエチ
ルエチレンイミン、Ｎ−アミノエチルエチレンイミンな
どのモノマ−単位を含んだ化合物、ポリエチレンイミン
やポリプロピレンイミンなどの重合体、上記のモノマ−
の相互または他の共重合性モノマ−との共重合体を例示
できる。これらアジリジン化合物のポリマ−と反応し得
る官能基を末端に有する重合体とのブロック共重合体や
グラフト共重合体なども含まれるが、アジリジン成分量
は、少なくとも５％以上、好ましくは２０％以上であ
る。また、サイクラムやバイサイクラム系化合物をはじ
めとするアジリジン化合物の環状ポリアミン類やそれら
の誘導体も例示できるが、好ましくは、エチレンイミン
の重合体や共重合体であるポリエチレンイミンや環状ポ
リアミン化合物である。またアジリジン化合物の平均分
子量は６００以上が好ましい。

【００１３】ポリエチレンイミンなどのポリアミン化合
物は、基材表面を覆うほど固定化させないことが好まし
い。例えば、乾燥時のＥＳＣＡでの表面分析において、
アジリジン化合物やアミン化合物の割合が表面において
炭素原子換算で６０％以下、好ましくは４０％以下であ
る。

【００１４】例えば、ポリオレフィン系材料に固定化し
たポリエチレンイミンの場合は、窒素原子／炭素原子
（Ｎ／Ｃ）の比率が、０．００５〜０．２であることが
好ましく、さらに好ましくは、０．０１〜０．１であ
る。Ｎ／Ｃが０．２５を超えると、ポリエチレンイミン
が表面を６０％以上を覆うこととなり、蛋白質との相互
作用が強くなるため、ウイルス選択的除去能力が低下す
る。基材自体が窒素原子を含む場合は、基材の窒素／炭
素比で補正して存在比を算出すればよい。

【００１５】材料表面に固定化するとは、アジリジン化
合物を含む重合体が材料表面から溶出することのないよ
うに、基材表面の反応性基と結合させることであり、共
有結合により結合させることが好ましい。材料に固定化
されたアミンの量は、過塩素酸などを用いた滴定法など
により測定できる。フィルタ−材料の場合、１×１０^-4
eq／ｇ以上のアミンが材料表面に固定化されている
ことが好ましい。

【００１６】材料表面に固定化する方法は公知の方法が
適用可能である。例えば、グラフト重合法、コ−ティン
グ法、化学修飾法、酸化法などにより、エポキシ基、ア
ミノ基、アルデヒド基、カルボキシル基、ヒドロキシル
基、酸クロライド基などの官能基を基材表面に導入した
後、アミン化合物のアミノ基と直接もしくはカップリン
グ剤やスペ−サ−を介して基材表面に固定化することが
できる。好ましくは、高分子材料表面に反応性官能基を
有する表面グラフト鎖を導入する工程と、該反応性官能
基にアジリジン化合物の重合体または共重合体を固定化
する工程とを有する方法である。また、反応性官能基を
有するグラフト鎖は、グリシジルアクリレ−トもしくは
グリシジルメタクリレ−トなどのエポキシ基を有する単
量体を構成成分とするグラフト鎖が好ましい。

【００１７】この上記構成の材料が好ましい理由を、我
々は以下のように考える。反応性官能基を有する表面グ
ラフト鎖（たとえばポリグリシジルアクリレ−ト）は、
微視的には表面上で基材（たとえばポリプロピレン）と
相分離して存在しているため、該反応性官能基と結合さ
せたアミン化合物も材料表面で微視的には局在化してい
ると推測される。その結果、アミン化合物の表面存在量
が少なくなり、また、蛋白質との相互作用も少なくなる
ように局在化（相分離）されているため、蛋白質の非特
異的な吸着が少なくなりウイルス除去能が発現されやす
い。

【００１８】一方、コ−ティング法や基材自体が有する
官能基にアミン化合物を結合させる方法は、前述のよう
な効果が期待されず、その結果、蛋白質の非特異的な吸
着が多くなりウイルス除去能が発現されにくい。

【００１９】ウイルス選択的除去材料の形態は特に限定
されず、ビ−ズ状、繊維状、フィルタ−状、チュ−ブ状
など任意の形態を取り得るが、好ましくは、最大孔径が
０．１μ〜５０μの範囲にあるフィルタ−であり、平
膜、中空糸膜、不織布、織布などを例示できる。血漿や
培養液などを対象とした場合は、最大孔径が０．１μ〜
５μ が好ましく、細胞などが含まれる場合は、最大孔
径が、５〜５０μが好ましい。最大孔径が０．１μ以下
だと、孔径が小さくなるため十分な濾過量が得られなく
なるからである。また、孔径が０．１μ以下だとサイズ
により捕捉されるウイルスもある。本発明のフィルタ−
の透水量は、１０ ml/min/m²/mmHg 以上、好ましくは１
００ ml/min/m²/mmHg 以上であることが、濾過圧を低く
できるため好ましい。

【００２０】また、不織布状の基材の場合、フィルタ−
材を形成するフィラメントは、モノフィラメントであっ
てもマルチフィラメントであってもよいが、平均直径が
１００μｍ以下、好ましくは、５０μｍ以下であると、
膜の表面積が大きくなり吸着部位が増加することとなる
ため好ましい。

【００２１】さらに、フィルタ−の空孔部の割合（空孔
率）は、２０％以上、好ましくは５０％以上である。

【００２２】基材の材質は、特に限定されず、セルロ−
スやその誘導体などの天然高分子、あるいはポリオレフ
ィン、ポリアミド、ポリイミド、ポリウレタン、ポリエ
ステル、ポリサルホン、ポリアクリルニトリルなどの高
分子材料を例示できるが、好ましくは、寸法安定性に優
れ水に対して低膨潤性の材料、たとえばポリプロピレン
やポリフッ化ビニリデンなどにより基材膜が構成されて
おり、表面処理により親水性フィルタ−に改質されてい
るものが好ましい。

【００２３】また、本発明のウイルス選択的除去材料
が、蛋白溶液中よりウイルスを選択的に除去するために
は、低吸着性表面であることが好ましい。さらに、フィ
ルタ−においては、孔を閉塞せず十分な透過性能を維持
できるように、水に非膨潤性（膨潤率が２０％以下）で
あり、ガラス転移点が２９０Ｋ以下の柔軟な高分子によ
り表面改質されていることが好ましい。そのような重合
体として、メトキシエチルアクリレ−トに代表されるア
ルコキシアルキルアクリレ−ト類の単量体を主な構成成
分とする重合体や共重合体を例示することができる。

【００２４】蛋白質を含む溶液とは、血液、血漿、血
清、尿などの体液成分や体液成分を含む液体、細胞や微
生物などの培養液やそれら生物の生産物を含む液体など
を好適に例示できる。ウイルスが混入している可能性の
ある液体を、本発明の材料に接触させることにより、ウ
イルス活性やウイルス感染の可能性を低下させたりする
ことが可能となるが、その具体的方法としては、バッチ
方式での浸漬法、種々の形状のカラムを利用したフロ−
方式、フィルタ−を用いた濾過方式などが例示できる
が、好ましくは、フィルタ−による濾過である。

【００２５】本発明のウイルス選択的除去材料は、カラ
ムや膜モジュ−ルなどを用いる公知の分離方法や分離装
置で使用することができる。また、感染予防や診断など
の健康管理製品や医療製品として、材料単独での使用は
もちろんのこと、練り込み・内包・積層などの方法によ
り複合化して使用することもできる。

【００２６】また本発明のウイルス選択的除去材料は、
血漿などの蛋白質が混在する液体中のウイルスを除去す
る目的で主に使用できるが、血液や体液の飛散や接触に
より、ウイルス感染の危険性の生じる恐れがある環境で
の使用も好適に例示できる。たとえば医療現場や救急治
療、ウイルス感染者や感染の恐れのある生物に適用する
医療用具や日常生活品、あるいはウイルス感染を防ぐ目
的で健常な人が使用する日常生活品などである。また、
エア−フィルタ−等への使用等、ウイルスフリ−の環境
を提供する製品などへも使用することができる。

【００２７】

【作用】アミン化合物は、真核細胞や原核細胞を問わず
生物が保有しており、陰性電荷に富む細胞膜や核酸を初
めとして種々の生体高分子に作用してそれらの機能に影
響を与えることが知られている。（例えば、化学と生
物、第２８巻、３号、１６２〜１７１ペ−ジ、１９９１
年、白幡晶著：フィジィオロジィーオブポリアミ
ン、ユーバッハラッハ・ワイエムヘイマー著、シ
ーアーシープレス、ボカレイトン、１９８９年（Th
e Physiology of Polyamines, ed by U.Bachrach and
Y.M.Heimer, CRC Press, Boca Raton, 1989）：バイオ
ケミカルジャーナル、２６０巻、１−１０頁、１９８
９年、エフシューバー著（The biochemical Journal,
vol.260, p1-10, 1989. F. Schuber）など）

【００２８】一方、ポリビニルピリジニウムなどの分子
内に４級アンモニウム構造を有する多価陽イオン化合物
や疎水性基を有する化合物は、血液や培養液のように蛋
白質などが共存する条件下では、それらの蛋白質とのと
の相互作用が強くなり非特異的な吸着が増加して、細胞
やウイルスなどへの選択性が失われてしまうこととな
る。細胞の多くは、細胞表面に負に荷電した糖蛋白質を
有しており、高分子ポリカチオンと静電的に結合するこ
とが知られているが、４級アンモニウム塩を有する強塩
基性化合物や疎水性部を有するような高分子量のポリカ
チオンでは静電相互作用が強すぎるため、細胞への選択
性や細胞へのダメ−ジが大きくなる。

【００２９】本発明の材料は、ウイルスに対して作用し
やすい塩基性と分子構造を有する一方、共存する蛋白質
などとの相互作用が小さいため、ウイルスを選択的に捕
捉する。

【００３０】脊椎動物のウイルスは、単純なウイルスで
２〜３種類、きわめて複雑なポックルウイルスなどでは
１００種以上にも及ぶ蛋白質やポリペプチドを有してい
る。エンヴェロ−プを持たない単純なウイルスではカプ
シドと呼ばれる蛋白質の殻を有しており、エンヴェロ−
プを有するウイルスではエンヴェロ−プより突出するペ
プロマ−と呼ばれる糖蛋白質がウイルス粒子の表面に存
在している。そのため、ウイルス粒子は正もしくは負の
表面電荷を有している。多くのウイルスは、アニオン性
のリン脂質やシアル酸、あるいはカプシド蛋白質などに
由来するアニオン性部位を有し、高分子の多価カチオン
などへ静電的相互作用により吸着することが知られてい
る。しかしながら、４級アンモニウム塩を有する強塩基
性化合物や疎水性部を有するような高分子量のポリカチ
オンでは静電相互作用が強すぎるため、培養液中や血漿
中などのような蛋白質の共存下より選択的にウイルスを
吸着できないこととなる。

【００３１】アミン化合物のなかでも、ポリエチレンイ
ミンは、分子内にアミンを多く有する水溶性ポリマ−で
あり、しかも価格が安価であるためリガンドとして好適
である。さらに、ポリエチレンイミン自体は蛋白との相
互作用が比較的弱く、また材料表面に固定化された場合
でも、表面存在量を制御することでタンパク質の非特異
的な吸着を抑制し、選択的にウイルスを吸着することが
可能となる。

【００３２】

【実施例】以下実施例をあげて、本発明を具体的に説明
する。実施例における特性は、以下の条件あるいは方法
で測定した。

【００３３】１．透水量２５℃±２℃で測定した値である。

【００３４】２．空孔率下式（Ａ）により算出した。

【００３５】

【数１】

【００３６】３．膜の最大孔径ＡＳＴＭ−Ｆ３１６を参考にしてバブルポイント法によ
り求めた値である。最大孔径は、製膜後の膜全体に均一
に存在する孔の最大孔径を表わす値であり、ピンホ−ル
や製膜後に作られた該最大孔径より大きな孔などは含ま
れない。

【００３７】４．フラメント直径走査型電子顕微鏡で観察したフィラメントの長径と短径
の平均値のことであり、異形フィラメントであっても多
孔質フィラメントであっても同様である。

【００３８】５．ウイルスの定量プラ−ク（溶菌班）法により行った。すなわち、検体を
宿主細胞もしくは宿主細菌と接触させてたのち、ウイル
スに感染することにより生成するプラ−ク（溶菌班）数
を測定することにより求めた。ウイルス除去（捕捉）率
は、下式（Ｂ）により算出した。

【００３９】

【数２】

【００４０】（実施例１）メルトフローインデックスが
３０及び０．３のポリプロピレン混合物（混合重量比１
００：４０）１００重量部当り、３２０重量部の流動パ
ラフィン（数平均分子量３２４）及び０．３重量部の結
晶核形成剤としての１，３、２，４ービス（ｐ−エチル
ベンジリデン）ソルビトールを二軸型押出機により溶融
混練しペレット化した。このペレットを上記押出機を用
いて１５０〜２００℃で溶融し、スリット幅０．６ｍｍ
のＴダイスより空気中に押し出して、Ｔダイス直下に置
かれた冷却液相のガイドローラーの回転によってポリエ
チレングリコ−ルよりなる冷却固化液中に導き冷却固化
した後、１，１，２−トリクロロ−１，２，２−トリフ
ルオロエタンに浸漬して流動パラフィンの抽出を行なっ
た。続いて、１３５℃の空気中で２分間熱処理し、最大
孔径０．５μ、空孔率５８％、膜厚８０μのポリプロピ
レンフィルタ−を得た。

【００４１】このようにして得られたポリプロピレンフ
ィルタ−に、アルゴンプラズマ（１００Ｗ、０．１Ｔｏ
ｒｒ、１５秒間）を照射した後、２−メトキシエチルア
クリレ−トガス（１．０Ｔｏｒｒ）に３分間、グリシ
ジルアクリレ−トガス（０．７Ｔｏｒｒ)に３分間接触
させて表面グラフト重合を行い、表面に反応性官能基を
有する親水性多孔質膜を得た。続いて、１ｗｔ％のポリ
エチレンイミン（分子量１８００）と１．０ｗｔ％のピ
リジンを含む水溶液に、６０℃、１８時間浸漬すること
により膜表面にポリエチレンイミンを固定化した。得ら
れた膜は、水及び塩化メチレン／メタノ−ル共沸溶媒で
良く洗浄した後、試料とした。

【００４２】ポリプロピレン膜の表面に導入されたポリ
（２−メトキシエチルアクリレ−ト）とグリシジル基に
結合したポリエチレンイミンは、ＩＲ（ＡＴＲ法）によ
り確認した。ＥＳＣＡで求めた窒素／炭素比は０．０６
であった。また、過塩素酸滴定により求めたアミンの量
は、３．３×１０^-4 eq／ｇであった。該膜の空孔率は
５５％、透水量３９０ml/min/m²/mmHg、最大孔径０．５
２μであった。

【００４３】この膜を、ニュ−クリポア製スウインロッ
クフィルタ−ホルダ−（φ２５ｍｍ）にセットし、ヘル
ペスウイルス type Ｉ H.F. 株を約１０⁴ (PFU/ml)とな
るように添加したＰＢＳバッファ−（ＰＨ７．３５〜Ｐ
Ｈ７．６）、及び人新鮮血より採取した血漿を、各々１
０ｍｌ濾過してウイルス除去率を測定したところ、ＰＢ
Ｓバッファ−中で９９．９％以上、人血漿中で９９．９
％であった。また、φＸ１７４（バクテリオファ−ジ）
についても同様に試験を行った結果、人血漿中で９９．
８％、水中で９９．９％以上の除去率を示した。

【００４４】（実施例２）グリシジルアクリレ−トのか
わりにグリシジルメタクリレ−トを使用した他は、実施
例１と同様で、ポリフッ化ビニリデンフィルター（ミリ
ポア社製）にポリエチレンイミン（分子量７０，００
０）を固定化したフィルタ−を作製した。この膜のＥＳ
ＣＡで求めた窒素／炭素比は０．０８、過塩素酸滴定に
より求めたアミンの量は、４．８×１０^-4 eq／ｇであ
った。この膜の空孔率は６１％、透水量３８０ml/min/m
²/mmHg、最大孔径０．５０μであった。

【００４５】この膜を、ニュ−クリポア製スウインロッ
クフィルタ−ホルダ−（φ２５ｍｍ）にセットし、ヘル
ペスウイルス type Ｉ H.F. 株を約１０⁴ (PFU/ml)含む
ＰＢＳバッファ−（ＰＨ７．３５〜ＰＨ７．６）と人新
鮮血より採取した血漿を、各々１０ｍｌ濾過し、ウイル
ス除去率を測定したところ、ＰＢＳバッファ−中で９
９．９％以上、人血漿中で９９．９％であった。また、
φＸ１７４（バクテリオファ−ジ）についても同様に試
験を行った結果、人血漿中で９９．８％，水中で９９．
９％以上の除去率を示した。

【００４６】（実施例３）実施例１と同様の方法で作製
したポリプロピレンフィルターに、アルゴンプラズマ
（１００Ｗ、０．２Ｔｏｒｒ、２０秒間）を照射した
後、グリシジルアクリレ−トガス（０．７Ｔｏｒｒ)を
３分間接触させて表面グラフト重合を行い、表面に反応
性官能基を有する親水性多孔質膜を得た。続いて、１ｗ
ｔ％のポリエチレンイミン（分子量７０，０００）と
０．５ｗｔ％のピリジンを含む水溶液に、６０℃、１８
時間浸漬することにより膜表面にポリエチレンイミンを
固定化した。得られた膜は、水及び塩化メチレン／メタ
ノ−ル共沸溶媒で良く洗浄した後、試料とした。

【００４７】この空孔率は５７％、透水量３５２ml/min
/m²/mmHg、最大孔径０．４９μであった。この膜のＥＳ
ＣＡで求めた窒素／炭素比は０．０７、過塩素酸滴定に
より求めたアミンの量は、４．４×１０^-4 eq／ｇであ
った。

【００４８】この膜を、ニュ−クリポア製スウインロッ
クフィルタ−ホルダ−（φ２５ｍｍ）にセットし、実施
例１と同様にヘルペスウイルス type Ｉ H.F. 株の除去
率を測定したところ、ＰＢＳバッファ−中で９９．９％
以上、人血漿中で９８．３％であった。また、φＸ１
７４（バクテリオファ−ジ）についても同様に試験を行
った結果、人血漿中で９８．８％，水中で９９．９％以
上の除去率を示した。

【００４９】（実施例４）実施例１と同様の方法で作製
したポリプロピレンフィルターに、ポリエチレンイミン
のかわりにイミノビスプロピルアミンを固定化した膜を
得た。この空孔率は５６％、透水量３４８ml/min/m²/mm
Hg、最大孔径０．４９μであった。この膜のＥＳＣＡで
求めた窒素／炭素比は０．０３、過塩素酸滴定により求
めたアミンの量は、２．４×１０^-4 eq／ｇであった。

【００５０】この膜を、ニュ−クリポア製スウインロッ
クフィルタ−ホルダ−（φ２５ｍｍ）にセットし、実施
例１と同様にヘルペスウイルス type Ｉ H.F. 株の除去
率を測定したところ、ＰＢＳバッファ−中で９９．９％
以上、人血漿中で９９．６％であった。また、φＸ１
７４（バクテリオファ−ジ）についても同様に試験を行
った結果、人血漿中で９９．８％，水中で９９．９％以
上の除去率を示した。

【００５１】（実施例５）ポリプロピレン製不織布（東
燃（株）製タピルス）に、実施例１と同様にしてポリエ
チレンイミン（分子量１２００）を固定化した膜を得
た。

【００５２】このフィルタ−をフィルタ−ホルダ−（φ
４７ｍｍ）に３０枚積層してセットし、実施例１と同様
にヘルペスウイルス type Ｉ H.F. 株を用いてウイルス
除去率を測定したところ、ＰＢＳバッファ−中で９９．
９％以上、人血漿中で９８．３％であった。また、φＸ
１７４（バクテリオファ−ジ）についても同様に試験を
行った結果、人血漿中で９９．７％、水中で９９．９％
以上の除去率を示した。

【００５３】（実施例６）ポリウレタン製多孔質フィル
タ−（東洋ポリマ−（株）製ルビセル）に、実施例１と
同様の方法でにしてポリエチレンイミンを固定化したフ
ィルタ−を得た。

【００５４】過塩素酸滴定により求めたアミンの量は、
１．６×１０^-4 eq／ｇであった。該膜の空孔率は８２
％、透水量１．１×１０⁴ml/min/m²/mmHg 、最大孔径１
８μであった。

【００５５】このフィルタ−を、フィルタ−ホルダ−
（φ４７ｍｍ）に２０枚積層し、ヘルペスウイルス typ
e Ｉ H.F. 株を約１０⁴ (PFU/ml)含むＰＢＳバッファ−
（ＰＨ７．３５〜ＰＨ７．６）と人血液を、各々３０ｍ
ｌ濾過し、ウイルス除去率を測定したところ、ＰＢＳバ
ッファ−中で９９．９％以上、人血漿中で９９．１％で
あった。また、φＸ１７４（バクテリオファ−ジ）につ
いても同様に試験を行った結果、人血漿中で９９．４
％，水中で９９．９％以上の除去率を示した。

【００５６】（比較例１）実施例１で基材として用いた
ポリプロピレンフィルタ−に、実施例１と同様の方法
で、２−メトキシエチルアクリレ−トとグリシジルアク
リレ−トを表面グラフト重合させた膜を作製した。該膜
の空孔率は５９％、透水量４３４ml/min/m²/mmHg 、最
大孔径０．５μであった。

【００５７】実施例１と同様の方法でウイルス除去試験
を行った。該フィルタ−は、ＰＢＳバッファ−中、血漿
中のどちらにおいても、ヘルペスウイルス、φＸ１７４
の各除去率は５０％以下であり、除去することができな
かった。

【００５８】（比較例２）実施例１で基材として用いた
ポリプロピレンフィルタ−に、実施例１と同様の方法
で、平均分子量１２００のポリエチレンイミンを６０
℃、１時間反応させて、膜表面に固定化した。この膜の
空孔率は５７％、透水量３６５ml/min/m²/mmHg、最大孔
径０．５０μであった。この膜のＥＳＣＡで求めた窒素
／炭素比は０．００４、過塩素酸滴定により求めたアミ
ンの量は、０．７×１０^-4 eq／ｇであった。

【００５９】実施例１と同様にしてウイルス除去率を測
定したところ、ヘルペスウイルスでは、ＰＢＳバッファ
−中で９９．９％以上、人血漿中で５４％、また、φＸ
１７４（バクテリオファ−ジ）では、人血漿中で５０％
以下、水中で９９．９％以上の除去率を示した。水中で
はウイルスを除去できるものの、種々の蛋白質を含む血
漿中ではウイルスを除去することができなかった。

【００６０】（比較例３）実施例１で基材として用いた
ポリプロピレンフィルタ−に、アルゴンプラズマ（１０
０Ｗ、０．１Ｔｏｒｒ、１５秒間）を照射した後、２−
メトキシエチルアクリレ−ト（０．８Ｔｏｒｒ）を３分
間、４−ビニルピリジン（０．８Ｔｏｒｒ）で２分間接
触させて表面グラフト重合を行なった後、０．１モルの
ベンジルクロライドを含むメタノ−ル中で５５℃で３時
間、４級化反応を行なうことにより、ピリジニウム構造
を表面に有する空孔率５７％，透水量１０⁴ ml/min/m²/
mmHg、最大孔径０．４８μの膜を得た。

【００６１】該フィルタ−のウイルス除去率を実施例１
と同様の方法で測定したところ、ＰＢＳバッファ−中で
は、ヘルペスウイルス及びφＸ１７４を９９．９％以上
除去することができたが、人血漿中ではどちらのウイル
スの除去率も５０％以下であった。

【００６２】

【発明の効果】本発明のウイルス選択的除去材料は、材
料表面にアミン化合物を固定化したものなので、取り扱
いが容易であり、しかもウイルスに対して選択的な相互
作用を有し、多孔性膜等に使用した場合に、簡便で処理
速度の優れた膜になる。また、本発明のウイルス選択的
除去材料は、ウイルスの認識・分離（除去）・濃縮など
に使用することができるため、食品工業、発酵工業、医
薬品工業を初めとした産業界で広く実用可能な材料であ
る。また、血漿などの蛋白質成分を含む溶液中でもウイ
ルスを認識できるため、医療や生活現場におけるウイル
ス汚染やウイルス感染の防止、治療、診断などに効果を
発揮することとなる。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁵ 識別記号庁内整理番号ＦＩ技術表示箇所Ｂ０１Ｊ 20/28 Ａ 7202−4ＧＣ０８Ｊ 7/00 Ａ 7310−4ＦＣ０９Ｄ 179/02 ＰＬＵ 9285−4Ｊ

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】表面にアミン化合物を固定化したことを特
徴とするウイルスを選択的に除去する材料。