JPH0616704B2 - フッ化物イオンに耐性な細菌カタラーゼ及びそれを生産するミクロコッカスｓｐ．ｋｗｉ‐５菌株 - Google Patents
フッ化物イオンに耐性な細菌カタラーゼ及びそれを生産するミクロコッカスｓｐ．ｋｗｉ‐５菌株Info
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- JPH0616704B2 JPH0616704B2 JP12388190A JP12388190A JPH0616704B2 JP H0616704 B2 JPH0616704 B2 JP H0616704B2 JP 12388190 A JP12388190 A JP 12388190A JP 12388190 A JP12388190 A JP 12388190A JP H0616704 B2 JPH0616704 B2 JP H0616704B2
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Description
【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明は新規なフッ化物イオン耐性カタラーゼ及びそれ
を生産するミクロコッカス属に属する新菌株に関する。
を生産するミクロコッカス属に属する新菌株に関する。
（従来技術） 半導体プロセス等過酸化水素を含む排水の水処理分野、
カズノコの漂白に伴う残存過酸化水素の分野等の食品分
野においてカタラーゼは広く利用されている。カタラー
ゼは過酸化水素の分野を触媒する酵素であって、多くの
生物により生産されることが知られている。例えばウマ
（Ｄｅｕｔｓｃｈ、１９５２）、サッカロミセス セレ
ビシエ（Ｓｅａｈら、１９７３）、バチルス Ｎo.ＫＵ
１（Ｋｕｒｏｎｏら、１９７３）、エスケリッチアコリ
（Ｃｌａｉｂｏｒｎｅら、１９７９）等が報告されてい
る。
カズノコの漂白に伴う残存過酸化水素の分野等の食品分
野においてカタラーゼは広く利用されている。カタラー
ゼは過酸化水素の分野を触媒する酵素であって、多くの
生物により生産されることが知られている。例えばウマ
（Ｄｅｕｔｓｃｈ、１９５２）、サッカロミセス セレ
ビシエ（Ｓｅａｈら、１９７３）、バチルス Ｎo.ＫＵ
１（Ｋｕｒｏｎｏら、１９７３）、エスケリッチアコリ
（Ｃｌａｉｂｏｒｎｅら、１９７９）等が報告されてい
る。
（発明が解決しようとする問題点） カタラーゼは一般にフッ化物イオン、シアンイオン、ア
ジ化ナトリウム、β−メルカプトエタノール等によって
阻害を受けることが知られている。水処理分野へのカタ
ラーゼの適用においては、排水に含まれるフッ化物イオ
ンに耐性なカタラーゼを使用することが求められてい
た。フッ化物イオンに耐性のあるカタラーゼとしてはＢ
ａｃｉｌｌｕｓ Ｎo.ＫＵ１が知られていたが作用至適
ｐＨがアルカリのため、フッ化物イオンに耐性でかつ中
性で活性を有するカタラーゼを生産する菌株が求められ
ていた。
ジ化ナトリウム、β−メルカプトエタノール等によって
阻害を受けることが知られている。水処理分野へのカタ
ラーゼの適用においては、排水に含まれるフッ化物イオ
ンに耐性なカタラーゼを使用することが求められてい
た。フッ化物イオンに耐性のあるカタラーゼとしてはＢ
ａｃｉｌｌｕｓ Ｎo.ＫＵ１が知られていたが作用至適
ｐＨがアルカリのため、フッ化物イオンに耐性でかつ中
性で活性を有するカタラーゼを生産する菌株が求められ
ていた。
（問題を解決するための手段） 本発明者らはフッ化物イオン耐性を有するカタラーゼを
生産する微生物を広く自然界より探索し、製紙工場排水
より単離したミクロコッカス sp．ＫＷＩ−５菌株が前
述の要求を満たすカタラーゼを生産することを見いだし
本発明を完成した。
生産する微生物を広く自然界より探索し、製紙工場排水
より単離したミクロコッカス sp．ＫＷＩ−５菌株が前
述の要求を満たすカタラーゼを生産することを見いだし
本発明を完成した。
次に活性測定法、本発明のフッ化物イオン耐性カタラー
ゼの理化学的性質、本発明のミクロコッカスsp．ＫＷＩ
−５菌の菌学的性質について述べる。
ゼの理化学的性質、本発明のミクロコッカスsp．ＫＷＩ
−５菌の菌学的性質について述べる。
（活性測定法） 過酸化水素３５０ｐｐｍを含むリン酸緩衝液（ｐＨ６．
８）１ｍｌを１ｍｌの酵素溶液と混合し、３０℃で５分
間反応させた後、１ｍｌの硫酸チタン溶液（０．８％硫
酸第２チタン硫酸溶液を含む２０％硫酸溶液）を加えて
反応停止及び発色を行い、４４０ｎｍでの吸光度を測定
する。この測定値を下記の式に代入して活性（Ｋat-f
値）を求める。（赤堀四朗ら著「酵素研究法」第２巻、
朝倉書店１９５６年発行、第324〜325頁） Ｋat-f＝ｌog（Ａ／Ｂ）×Ｃ／Ｄ ［min］-1［ml］-1 ただし、Ａ：対照（カタラーゼを含まない）の吸光度 Ｂ：試料（カタラーゼを入れて反応させた）の吸光度 Ｃ：酵素溶液の希釈率 Ｄ：反応時間 本発明のフッ化物イオン耐性カタラーゼの理化学的性質
は次のとおりである。
８）１ｍｌを１ｍｌの酵素溶液と混合し、３０℃で５分
間反応させた後、１ｍｌの硫酸チタン溶液（０．８％硫
酸第２チタン硫酸溶液を含む２０％硫酸溶液）を加えて
反応停止及び発色を行い、４４０ｎｍでの吸光度を測定
する。この測定値を下記の式に代入して活性（Ｋat-f
値）を求める。（赤堀四朗ら著「酵素研究法」第２巻、
朝倉書店１９５６年発行、第324〜325頁） Ｋat-f＝ｌog（Ａ／Ｂ）×Ｃ／Ｄ ［min］-1［ml］-1 ただし、Ａ：対照（カタラーゼを含まない）の吸光度 Ｂ：試料（カタラーゼを入れて反応させた）の吸光度 Ｃ：酵素溶液の希釈率 Ｄ：反応時間 本発明のフッ化物イオン耐性カタラーゼの理化学的性質
は次のとおりである。
（理化学的性質） （１）作用及び基質特異性 過酸化水素に作用し、水と酵素に分解する。
パーオキシダーゼ活性はない。
（２）至適ｐＨ及び安定ｐＨ範囲 前記の活性測定法に基き、ｐＨに対する影響を調べた。
第１図に活性の最大値を１００とした各ｐＨでの相対活
性を示した。至適ｐＨはｐＨ５．５〜１１．０であるこ
とがわかる。
第１図に活性の最大値を１００とした各ｐＨでの相対活
性を示した。至適ｐＨはｐＨ５．５〜１１．０であるこ
とがわかる。
次にｐＨの安定性について第２図に示した。酵素を各ｐ
Ｈで３０℃で１時間保持したのちｐＨ６．８、３０℃に
おいて測定した残存活性を、未処理の酵素活性を１００
として示した。
Ｈで３０℃で１時間保持したのちｐＨ６．８、３０℃に
おいて測定した残存活性を、未処理の酵素活性を１００
として示した。
第２図から、本発明のカタラーゼはｐＨ５．５〜１０で
安定である。なお用いた緩衝液は、ｐＨ４．５〜５．５
（５０ｍＭ酢酸緩衝液）、ｐＨ５．５〜８．０（５０ｍ
Ｍリン酸緩衝液）、ｐＨ７．５〜９．０（５０ｍＭトリ
ス緩衝液）、ｐＨ９．０〜１３．０（５０ｍＭグリシン
緩衝液）である。
安定である。なお用いた緩衝液は、ｐＨ４．５〜５．５
（５０ｍＭ酢酸緩衝液）、ｐＨ５．５〜８．０（５０ｍ
Ｍリン酸緩衝液）、ｐＨ７．５〜９．０（５０ｍＭトリ
ス緩衝液）、ｐＨ９．０〜１３．０（５０ｍＭグリシン
緩衝液）である。
（３）作用適温の範囲 前記の活性測定法に従い、各温度にて５分間酵素反応を
行なった。第３図は３０℃における活性を１００とした
ときの各温度における活性比を表わす。第３図から本酵
素の作用最適温度は３０〜３５℃であることがわかる。
また、至適温度の８０％以上の活性を示す作用温度は、
２０〜５０℃程度であることがわかる。
行なった。第３図は３０℃における活性を１００とした
ときの各温度における活性比を表わす。第３図から本酵
素の作用最適温度は３０〜３５℃であることがわかる。
また、至適温度の８０％以上の活性を示す作用温度は、
２０〜５０℃程度であることがわかる。
（４）熱安定性 ｐＨ６．８で２０分間各温度にて熱処理後、残存活性を
調べた。未処理の酵素活性を１００とし、その残存活性
を第４図に示した。第４図から本酵素は１０℃〜５０℃
で安定であることがわかる。
調べた。未処理の酵素活性を１００とし、その残存活性
を第４図に示した。第４図から本酵素は１０℃〜５０℃
で安定であることがわかる。
（５）失活の条件 第２図に示したようにｐＨ４．０において、３０℃１時
間処理すると本発明のカタラーゼは完全に失活する。ま
た第３図に示すようにｐＨ６．８において、７０℃２０
分の処理にて完全に失活する。
間処理すると本発明のカタラーゼは完全に失活する。ま
た第３図に示すようにｐＨ６．８において、７０℃２０
分の処理にて完全に失活する。
（６）阻害 第１表に示す薬品の存在下にカタラーゼ活性を測定し、
非存在下の活性を１００として、残存活性を百分率で示
した。表からわかるように本酵素はフッ化物イオンに対
し著しい耐性を有する。
非存在下の活性を１００として、残存活性を百分率で示
した。表からわかるように本酵素はフッ化物イオンに対
し著しい耐性を有する。
（７）等電点 ｐＨ３．５〜９．５のグラジエントポリアクリルアミド
ゲルを用いて等電点電気泳動を行なった結果、等電点は
ｐＨ４．４であった。なお、標準物質としてＢＩＯ Ｒ
ＡＤ社のＩＥＦスタンダードを用いた。
ゲルを用いて等電点電気泳動を行なった結果、等電点は
ｐＨ４．４であった。なお、標準物質としてＢＩＯ Ｒ
ＡＤ社のＩＥＦスタンダードを用いた。
（８）分子量 Ｐｈａｒｍａｃｉａ社のスーパーローズ１０を用いたゲ
ルろ過により、分子量２１０，０００を得た。なお分子
量マーカーとしてチログロブリン（分子量６６４，００
０）、アポフェリチン（分子量４４６，０００）、β−
アミラーゼ（分子量２００，０００）、γ−グロブリン
（分子量１５０，０００）、ウシ血清アルブミン（分子
量６７，０００）、オバルブミン（分子量４５，００
０）、シトクロームＣ（分子量１２，４００）を用い
た。
ルろ過により、分子量２１０，０００を得た。なお分子
量マーカーとしてチログロブリン（分子量６６４，００
０）、アポフェリチン（分子量４４６，０００）、β−
アミラーゼ（分子量２００，０００）、γ−グロブリン
（分子量１５０，０００）、ウシ血清アルブミン（分子
量６７，０００）、オバルブミン（分子量４５，００
０）、シトクロームＣ（分子量１２，４００）を用い
た。
（９）サブユニット構造 ＳＤＳ−ポリアクリルアミド電気泳動の結果、本発明の
カタラーゼ１分子は分子量５８，０００のサブユニット
４個から構成されていた。なお分子量マーカーとしてウ
シ血清アルブミン（分子量６７，０００）、オバルブミ
ン（分子量４５，０００）、α−キモトリプシノーゲン
（分子量２５，７００）、リボヌクレアーゼ（分子量１
４，７００）、シトクロームＣ（分子量１２，４００）
を用いた。
カタラーゼ１分子は分子量５８，０００のサブユニット
４個から構成されていた。なお分子量マーカーとしてウ
シ血清アルブミン（分子量６７，０００）、オバルブミ
ン（分子量４５，０００）、α−キモトリプシノーゲン
（分子量２５，７００）、リボヌクレアーゼ（分子量１
４，７００）、シトクロームＣ（分子量１２，４００）
を用いた。
（１０）比活性 精製された本酵素の比活性は、４，０００Ｋａｔ-f／ｍ
ｇ蛋白である。
ｇ蛋白である。
酵素の精製は、培養終了後の培養液に溶菌剤を加えて抽
出した後、当分野公知の分離精製手段、例えばイオン交
換体、ゲルろ過材等を用いて精製することができる。本
酵素の製造法については後記実施例で具体的に説明す
る。
出した後、当分野公知の分離精製手段、例えばイオン交
換体、ゲルろ過材等を用いて精製することができる。本
酵素の製造法については後記実施例で具体的に説明す
る。
上記各特性を示す本発明により得られるカタラーゼと従
来公知のカタラーゼとの比較を、第２表に示す。
来公知のカタラーゼとの比較を、第２表に示す。
本発明のカタラーゼを生産するにはミクロコッカス属に
属するミクロコッカス sp．ＫＷＩ−５菌株を利用する
ことができる。
属するミクロコッカス sp．ＫＷＩ−５菌株を利用する
ことができる。
この菌株の菌学的性質を以下に示す。なお、菌学的性質
の試験及び分類方法は下記の文献に基づいて行なった。
の試験及び分類方法は下記の文献に基づいて行なった。
長谷部武治ら著、学会出版センター発行「＜改訂版＞微
生物の同定」（１９８４）及びバージェーズ・マニュア
ル・オブ・システマチィック・バクテリオロジー（Ｂｅ
ｒｇｅｙ’Ｓ Ｍａｎｕａｌ ｏｆ Ｓｙｓｔｅｍａｔ
ｉｃ Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ）（１９８４） （１）形態 細胞の形及び大きさ ０．８〜１．２μｍの球菌で鞭毛を持たない。
生物の同定」（１９８４）及びバージェーズ・マニュア
ル・オブ・システマチィック・バクテリオロジー（Ｂｅ
ｒｇｅｙ’Ｓ Ｍａｎｕａｌ ｏｆ Ｓｙｓｔｅｍａｔ
ｉｃ Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ）（１９８４） （１）形態 細胞の形及び大きさ ０．８〜１．２μｍの球菌で鞭毛を持たない。
運動性：なし。
胞子：なし。
グラム染色は陽性である。
抗酸性は陰性である。
（２）生育状態（培地ｐＨ：６．８） 肉汁寒天平板培養 円形、偏平状または隆起状で縁はなめらかで光沢があ
る。培養時間の経過につれて黄色を呈する。
る。培養時間の経過につれて黄色を呈する。
肉汁寒天斜面培養 拡帯状に生育し、縁はなめらかで光沢がある。培養時間
の経過につれて黄色を呈する。培地には色素を分必しな
い。
の経過につれて黄色を呈する。培地には色素を分必しな
い。
肉汁液体培養 生育良好でうすい黄色を呈する。
リトマスミルク アルカリ性を呈する。
（３）生理学的性質 硝酸塩の還元：陽性。
脱窒反応：陰性 ＭＲテスト：陰性。
ＶＰテスト：陰性。
インドールの生成成：陰性。
硫化水素の生成：陰性。
デンプンの加水分解：陰性。
クエン酸の利用 Ｋｏｓｅｒの培地：利用する。
Ｃｈｒｉｓｔｅｎｓｅｎの培地：利用する。
Ｓｉｍｏｎｓの培地：利用する。
無機窒素源の利用 硝酸塩：陰性。
アンモニウム塩：陽性。
色素の生成：陰性。
ウレアーゼ：弱い陽性。
オキシダーゼ：陰性。
カタラーゼ：陽性。
生育の範囲 ｐＨ：６〜１１で生育。６〜８で最適。
温度：１５−３０℃で生育。３０℃で最適。
酸素に対する態度：好気性。
Ｏ−Ｆテスト（Ｈｕｇｈ Ｌｅｉｆｓｏｎ法によ
る）：Ｏ。
る）：Ｏ。
糖類から酸及びガスの生成の有無 Ｄ−グルコース、Ｄ−フルクトース、Ｄ−マルトース、
グリセロールを利用し、酸を生成するが、ガスの発生は
認められない。Ｄ−アラビノース、Ｄ−キシロース、Ｄ
−マンノース、Ｄ−ガラクトース、Ｄ−トレハロース、
Ｄ−シュークロース、Ｄ−ラクトース、Ｄ−ソルビトー
ル、Ｄ−マンニトール、Ｄ−イノシトールおよびデンプ
ンは利用しない。
グリセロールを利用し、酸を生成するが、ガスの発生は
認められない。Ｄ−アラビノース、Ｄ−キシロース、Ｄ
−マンノース、Ｄ−ガラクトース、Ｄ−トレハロース、
Ｄ−シュークロース、Ｄ−ラクトース、Ｄ−ソルビトー
ル、Ｄ−マンニトール、Ｄ−イノシトールおよびデンプ
ンは利用しない。
（４）その他の性質 塩化ナトリウムの耐性：１０％塩化ナトリウム存在下
でも生育する。
でも生育する。
ゼラチンの液化：陽性。
Ｔｗｅｅｎの分解：Ｔｗｅｅｎ４０、６０及び８０を
分解する。
分解する。
チロシン分解：陽性。
カゼイン分解：陽性。
上記の菌学的性質から前記した文献の分類方法に従つて
ミクロコッカス属の公知の菌種と比較すると、本発明の
菌株はミクロコッカスバリアンスと類似している。しか
しながらグリセロールの利用（ミクロコッカスバリアン
スは利用しない）、食塩の耐性（ミクロコッカスバリア
ンスは１０％の塩化ナトリウムに耐性を持たない）とい
う点で明らかに相違する。また本発明の菌株はミクロコ
ッカスロゼウスともその生理学的性質がよく似ている
が、コロニーの色（ミクロコッカスロゼウスは赤色に対
し、本菌株は黄色）、ゼラチンの分解（ミクロコッカス
ロゼウスはしない）、クエン酸の利用（ミクロコッカス
ロゼウスはＳｉｍｏｎｓ培地で増殖しない）という点で
明らかに異なる。
ミクロコッカス属の公知の菌種と比較すると、本発明の
菌株はミクロコッカスバリアンスと類似している。しか
しながらグリセロールの利用（ミクロコッカスバリアン
スは利用しない）、食塩の耐性（ミクロコッカスバリア
ンスは１０％の塩化ナトリウムに耐性を持たない）とい
う点で明らかに相違する。また本発明の菌株はミクロコ
ッカスロゼウスともその生理学的性質がよく似ている
が、コロニーの色（ミクロコッカスロゼウスは赤色に対
し、本菌株は黄色）、ゼラチンの分解（ミクロコッカス
ロゼウスはしない）、クエン酸の利用（ミクロコッカス
ロゼウスはＳｉｍｏｎｓ培地で増殖しない）という点で
明らかに異なる。
以上の通り、本菌株は公知の菌株とは区別されるため、
ミクロコッカス属に属する新菌株と判断し、ミクロコッ
カスｓｐ．ＫＷＩ−５と命名した。本菌株は、平成２年
２月６日に通商産業省工業技術院微生物工業技術研究所
に寄託した。
ミクロコッカス属に属する新菌株と判断し、ミクロコッ
カスｓｐ．ＫＷＩ−５と命名した。本菌株は、平成２年
２月６日に通商産業省工業技術院微生物工業技術研究所
に寄託した。
微生物受託番号は、微工研菌寄第１１２５８号である。
（作用） 本発明のフッ化物イオン耐性カタラーゼは１０ｍＭのフ
ッ化物イオン存在下でも活性があり、しかも広範囲のｐ
Ｈで作用する。従ってフッ化物イオンを含む排水中で過
酸化水素を分解することができる。また、本発明のミク
ロコッカスsP．ＫＷＩ−５菌を用いて、本発明のフッ化
物イオン耐性カタラーゼを生産することができる。
ッ化物イオン存在下でも活性があり、しかも広範囲のｐ
Ｈで作用する。従ってフッ化物イオンを含む排水中で過
酸化水素を分解することができる。また、本発明のミク
ロコッカスsP．ＫＷＩ−５菌を用いて、本発明のフッ化
物イオン耐性カタラーゼを生産することができる。
フッ化物イオン耐性カタラーゼを生産するための培養条
件は、次の通りである。まず培地としては炭素源、窒素
源、無機塩等、微生物の生育に必要な成分を含むものを
用いる。炭素源としては、グルコース、オレイン酸、リ
ンゴ酸、グリセロール等が使用でき、窒素源としては魚
肉エキス、ペプトン、カザミノ酸、コーンスチープリカ
ー、大豆粉等、無機塩としては、リン酸二水素カリウ
ム、硫酸マグネシウム、塩化第二鉄等を用いる。培地の
ｐＨは６．８付近にすることが望ましい。
件は、次の通りである。まず培地としては炭素源、窒素
源、無機塩等、微生物の生育に必要な成分を含むものを
用いる。炭素源としては、グルコース、オレイン酸、リ
ンゴ酸、グリセロール等が使用でき、窒素源としては魚
肉エキス、ペプトン、カザミノ酸、コーンスチープリカ
ー、大豆粉等、無機塩としては、リン酸二水素カリウ
ム、硫酸マグネシウム、塩化第二鉄等を用いる。培地の
ｐＨは６．８付近にすることが望ましい。
上記の培地で３０℃で本菌株を好気的に培養すれば、培
養開始後約２４時間でカタラーゼの生産量が最大とな
る。培養温度が高いと、例えば３７℃では生産量が３０
℃の６０％になり、また温度が低くてもその生産量が低
下する。
養開始後約２４時間でカタラーゼの生産量が最大とな
る。培養温度が高いと、例えば３７℃では生産量が３０
℃の６０％になり、また温度が低くてもその生産量が低
下する。
このようにして得られた培養液は、溶菌酵素、核酸分解
酵素、有機溶媒などで処理して菌体を破壊した後、遠心
分離などで固形分を分離して粗酵素液とすることができ
る。粗酵素液は、限外ろ過、ゲルろ過、イオン交換、電
気泳動などの公知の手段によって精製し、精製酵素を得
ることができる。
酵素、有機溶媒などで処理して菌体を破壊した後、遠心
分離などで固形分を分離して粗酵素液とすることができ
る。粗酵素液は、限外ろ過、ゲルろ過、イオン交換、電
気泳動などの公知の手段によって精製し、精製酵素を得
ることができる。
（実施例） 実施例１ グルコース２％、ポリペポプトン１．６％、酵母エキス
０．４％よりなる滅菌された液体培地（ｐＨ６．８）１
００ｍｌを坂口フラスコに入れ、ミクロコッカスｓｐ．
ＫＷＩ−５を接種し、ロータリーシェイカーにて３０℃
で培養した。この培養液を溶菌酵素、核酸分解酵素、有
機溶媒で処理後、遠心分離して固形分を除き、粗酵素液
を得た。カタラーゼ活性は４００Ｋat-f／ｍｇであっ
た。
０．４％よりなる滅菌された液体培地（ｐＨ６．８）１
００ｍｌを坂口フラスコに入れ、ミクロコッカスｓｐ．
ＫＷＩ−５を接種し、ロータリーシェイカーにて３０℃
で培養した。この培養液を溶菌酵素、核酸分解酵素、有
機溶媒で処理後、遠心分離して固形分を除き、粗酵素液
を得た。カタラーゼ活性は４００Ｋat-f／ｍｇであっ
た。
実施例２ 実施例１の粗酵素液２０ｍｌを、分取用液体クロマトグ
ラフィーにてゲルろ過（カラムは東ソーＫＫ、ＴＳＫｇ
ｅｌＧ３０００ＳＷ）分画した。得られた酵素画分を
０．０５ｍＭリン酸緩衝液中で２４時間透析後、分取用
液体クロマトグラフィーにてイオン交換（カラムは東ソ
ーＫＫ、ＴＳＫｇｅｌＤＥＡＥ５ＰＷ）分画した。こう
して得られた酵素はポリアクリルアミド電気泳動におい
て単一バンドを示した。なお、比活性は４，０００Ｋat
-f／ｍｇ蛋白であった。
ラフィーにてゲルろ過（カラムは東ソーＫＫ、ＴＳＫｇ
ｅｌＧ３０００ＳＷ）分画した。得られた酵素画分を
０．０５ｍＭリン酸緩衝液中で２４時間透析後、分取用
液体クロマトグラフィーにてイオン交換（カラムは東ソ
ーＫＫ、ＴＳＫｇｅｌＤＥＡＥ５ＰＷ）分画した。こう
して得られた酵素はポリアクリルアミド電気泳動におい
て単一バンドを示した。なお、比活性は４，０００Ｋat
-f／ｍｇ蛋白であった。
（効果） 本発明によれば、ミクロコッカスｓｐ．ＫＷＩ−５菌株
を培養し、その培養液からフッ化物イオン耐性カタラー
ゼを得ることができる。このカタラーゼはフッ化物イオ
ンに対する優れた耐性を有しているので、半導体工業を
はじめとする過酸化水素を含む排水の水処理に広く利用
することができる。
を培養し、その培養液からフッ化物イオン耐性カタラー
ゼを得ることができる。このカタラーゼはフッ化物イオ
ンに対する優れた耐性を有しているので、半導体工業を
はじめとする過酸化水素を含む排水の水処理に広く利用
することができる。
第１図は、本発明の酵素の至適ｐＨを表わし、第２図は
本発明の酵素の安定ｐＨ範囲を表わす。 第３図は、本発明の酵素の作用適温の範囲を表わし、第
４図は、本発明の酵素の熱安定性を表わす。
本発明の酵素の安定ｐＨ範囲を表わす。 第３図は、本発明の酵素の作用適温の範囲を表わし、第
４図は、本発明の酵素の熱安定性を表わす。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.5 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｃ１２Ｒ 1:265）
Claims (2)
- 【請求項１】下記の理化学的性質を有するフッ化物イオ
ンに耐性な細菌カタラーゼ。 作用及び基質特異性 過酸化水素に作用し、水と酸素に分解する反応を触媒す
る。 至適ｐＨ及び安定ｐＨ範囲 至適ｐＨは５．５〜１１．０、安定ｐＨは５．０〜１０
である。 作用適温の範囲 至適温度は３０〜３５℃である。 阻害 アジ化ナトリウム（１ｍＭ）で著しい阻害を受ける。フ
ッ化カリウム、ヒドラジン、β−メルカプトエタノー
ル、エチレンジアミン四酢酸ナトリウム（各１ｍＭ）で
は阻害されない。 分子量 ＳＤＳポリアクリルアミドゲル電気泳動によると本酵素
は分子量58,000のサブユニット４個からなり、ゲルろ過
法による分子量は210,000である。 等電点 等電点電気泳動による等電点は、ｐＨ４．４である。 比活性 比活性は4,000Ｋat-f／ｍｇ蛋白である。 - 【請求項２】ミクロコッカス属に属し、請求項（１）記
載のフッ化物イオン耐性カタラーゼ生産能を有するミク
ロコッカスsp．ＫＷＩ−５菌株。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP12388190A JPH0616704B2 (ja) | 1990-05-14 | 1990-05-14 | フッ化物イオンに耐性な細菌カタラーゼ及びそれを生産するミクロコッカスｓｐ．ｋｗｉ‐５菌株 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP12388190A JPH0616704B2 (ja) | 1990-05-14 | 1990-05-14 | フッ化物イオンに耐性な細菌カタラーゼ及びそれを生産するミクロコッカスｓｐ．ｋｗｉ‐５菌株 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0420288A JPH0420288A (ja) | 1992-01-23 |
| JPH0616704B2 true JPH0616704B2 (ja) | 1994-03-09 |
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ID=14871678
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP12388190A Expired - Fee Related JPH0616704B2 (ja) | 1990-05-14 | 1990-05-14 | フッ化物イオンに耐性な細菌カタラーゼ及びそれを生産するミクロコッカスｓｐ．ｋｗｉ‐５菌株 |
Country Status (1)
| Country | Link |
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| JP (1) | JPH0616704B2 (ja) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH07246092A (ja) * | 1994-01-18 | 1995-09-26 | Showa Denko Kk | カタラーゼ及びその製造方法 |
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-
1990
- 1990-05-14 JP JP12388190A patent/JPH0616704B2/ja not_active Expired - Fee Related
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| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0420288A (ja) | 1992-01-23 |
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