JPH0616720B2 - 血清又は血漿中のｈｄｌ−コレステリンの特異的測定法及び測定試薬 - Google Patents
血清又は血漿中のｈｄｌ−コレステリンの特異的測定法及び測定試薬Info
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- JPH0616720B2 JPH0616720B2 JP61218274A JP21827486A JPH0616720B2 JP H0616720 B2 JPH0616720 B2 JP H0616720B2 JP 61218274 A JP61218274 A JP 61218274A JP 21827486 A JP21827486 A JP 21827486A JP H0616720 B2 JPH0616720 B2 JP H0616720B2
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- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
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- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
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Description
【発明の詳細な説明】 産業上の利用分野 臨床実験においてすでに以前から確立された血清（又は
血漿）中の全コレステリンの測定と共に、近年“高密度
リポ蛋白質”フラクシヨンに結合したコレステリン（HD
L−コレステリン）の付加的分析がアテローム性動脈硬
化症もしくは心筋硬塞の危険性の改良された診断のため
に著しく重要である。
血漿）中の全コレステリンの測定と共に、近年“高密度
リポ蛋白質”フラクシヨンに結合したコレステリン（HD
L−コレステリン）の付加的分析がアテローム性動脈硬
化症もしくは心筋硬塞の危険性の改良された診断のため
に著しく重要である。
従来技術 多くの臨床的研究は、高まつた血清−全コレステリン量
（リポ蛋白質フラクシヨン乳縻脂粒、VLDL（超低密度リ
ポ蛋白質）、LDL（低密度リポ蛋白質）並びにHDLに結合
した遊離及び脂肪酸エステル化コレステリンの全量）が
心筋硬塞の上昇した危険性に導びき、他方血清−HDL−
コレステリン含量とアテローム性動脈硬化性血管変性と
の間には逆の関係が成り立つ〔例えば、Ｇ．アスマン
（Assmann）著、リピツドストツフベクセル・ウント・
アテロスクレロース（Lipidstoffwechsel and Atherosk
lerose）、シヤッタアウワー（Schattauer）出版、ステ
ユツトガルト１９８２年参照〕。
（リポ蛋白質フラクシヨン乳縻脂粒、VLDL（超低密度リ
ポ蛋白質）、LDL（低密度リポ蛋白質）並びにHDLに結合
した遊離及び脂肪酸エステル化コレステリンの全量）が
心筋硬塞の上昇した危険性に導びき、他方血清−HDL−
コレステリン含量とアテローム性動脈硬化性血管変性と
の間には逆の関係が成り立つ〔例えば、Ｇ．アスマン
（Assmann）著、リピツドストツフベクセル・ウント・
アテロスクレロース（Lipidstoffwechsel and Atherosk
lerose）、シヤッタアウワー（Schattauer）出版、ステ
ユツトガルト１９８２年参照〕。
約１５年来、血清−全コレステリン測定のための簡単
で、かつ非常に正確な完全酵素分析法が提供されてお
り、該方法は手によつても又同様に良好に自動分析シス
テムによつても、全く試料の前処置工程なしに実施可能
であり、通常の反応式； により経過する。
で、かつ非常に正確な完全酵素分析法が提供されてお
り、該方法は手によつても又同様に良好に自動分析シス
テムによつても、全く試料の前処置工程なしに実施可能
であり、通常の反応式； により経過する。
コレステリン検出は生じたH2O2を介して、有利に比色定
量法により、特にフエノール、フエノール誘導体又はア
ニリン誘導体と４−アミノアンチピリンとのペルオキシ
ダーゼ触媒による赤色〜紫色のキノンイミン色素への酸
化的カップリング（トリンダー（Trinder）−反応）に
より行なうか、又は生じたコレステノンを介して、又は
式２）で消費されたＯ２を介して行なう。これらの測定
法は、例えば西ドイツ国特許公開第２２２４１３２号及
び同第２５０６７１２号公報から専門家には公知であ
る。
量法により、特にフエノール、フエノール誘導体又はア
ニリン誘導体と４−アミノアンチピリンとのペルオキシ
ダーゼ触媒による赤色〜紫色のキノンイミン色素への酸
化的カップリング（トリンダー（Trinder）−反応）に
より行なうか、又は生じたコレステノンを介して、又は
式２）で消費されたＯ２を介して行なう。これらの測定
法は、例えば西ドイツ国特許公開第２２２４１３２号及
び同第２５０６７１２号公報から専門家には公知であ
る。
相応する反応システムもしくは分析試薬の著しい特徴
は、場合により、付加的に溶剤としても働らくコール酸
ナトリウムのような胆汁酸塩と共に、界面活性剤、特に
非イオン系アルキル−又はアルキルアリールポリエチレ
ンオキシドエーテルの存在であり、この界面活性剤なし
にはコレステリンエステラーゼは全く加水分解活性を展
開しない。この際、コレステリンエステラーゼとしては
微生物由来の酵素を使用するのが有利である。
は、場合により、付加的に溶剤としても働らくコール酸
ナトリウムのような胆汁酸塩と共に、界面活性剤、特に
非イオン系アルキル−又はアルキルアリールポリエチレ
ンオキシドエーテルの存在であり、この界面活性剤なし
にはコレステリンエステラーゼは全く加水分解活性を展
開しない。この際、コレステリンエステラーゼとしては
微生物由来の酵素を使用するのが有利である。
血清−HDL−コレステリンの測定は同じ原理により行な
われるが、このためには予め１回以上の工程で血清から
他のコレステリン含有リポ蛋白質（乳縻脂粒、VLDL及び
LDL）を分離しなければならない。
われるが、このためには予め１回以上の工程で血清から
他のコレステリン含有リポ蛋白質（乳縻脂粒、VLDL及び
LDL）を分離しなければならない。
このリポ蛋白質の分離のためには特に超遠心分離、電気
泳動又はあらゆる沈降法、例えば免疫沈降、燐タングス
テン酸／Mg2+、デキストランスルフエート／Mg2+又はヘ
パリン／Mn2+での又はポリエチレングリコールでの沈殿
を使用する〔例えば、rztl. Lab.第２９巻、第１０７
〜１１４頁（１９８３年）；Clin. Chem.、第３１巻、
第２５２〜２５６頁（１９８５年）〕。
泳動又はあらゆる沈降法、例えば免疫沈降、燐タングス
テン酸／Mg2+、デキストランスルフエート／Mg2+又はヘ
パリン／Mn2+での又はポリエチレングリコールでの沈殿
を使用する〔例えば、rztl. Lab.第２９巻、第１０７
〜１１４頁（１９８３年）；Clin. Chem.、第３１巻、
第２５２〜２５６頁（１９８５年）〕。
このために付加的に必要な装置の他にこの分離法は１部
著しい時間及び労力の消費を必要とし、このことは臨床
実験室の慣用的HDL−コレステリン測定を著しく困難と
し、このようにして該方法は高くつく。
著しい時間及び労力の消費を必要とし、このことは臨床
実験室の慣用的HDL−コレステリン測定を著しく困難と
し、このようにして該方法は高くつく。
発明が解決しようとする問題点 血清中の全コレステリン測定もHDL−コレステリン測定
も同様に高い診断学的重要性を有しているので、HDL−
コレステリン及び血清−全コレステリンの分析を特別な
試料の前処置の必要なしに１つの反応配合物中で可能と
する方法及び試薬を提供することは非常に重要である。
も同様に高い診断学的重要性を有しているので、HDL−
コレステリン及び血清−全コレステリンの分析を特別な
試料の前処置の必要なしに１つの反応配合物中で可能と
する方法及び試薬を提供することは非常に重要である。
従つて、本発明の目的は試料からLDL−コレステリン、V
LDL−コレステリン及び乳縻脂粒−コレステリンを予め
分離することなしに血清又は血漿中のHDL−コレステリ
ン測定を直接実施可能にすることである。
LDL−コレステリン及び乳縻脂粒−コレステリンを予め
分離することなしに血清又は血漿中のHDL−コレステリ
ン測定を直接実施可能にすることである。
問題点を解決するための手段 この目的は、本発明により、緩衝水性媒体中のコレステ
リンオキシダーゼ及びコレステリンエステラーゼを含有
するコレステリン検出システムと共に恒温保持し、コレ
ステリンオキシダーゼ反応の生成物又は酸素消費量を測
定することによる血清又は血漿中のHDL−コレステリン
の特異的測定法において、胆汁酸塩又は胆汁酸誘導体塩
又はジオクチルスルホサクシネート（Aerosol OT）の
存在で恒温保持し、次いで第１の測定を実施し、引き続
き非イオン系のポリエチレンオキシド基含有界面活性剤
又は第２アルカンスルホネートを添加し、新たに恒温保
持し、次いで第２の測定を実施し、かつ第１及び第２の
測定の差からHDL−コレステリン量を求める血清又は血
漿中のHDL−コレステリンの特異的測定法により達せら
れる。
リンオキシダーゼ及びコレステリンエステラーゼを含有
するコレステリン検出システムと共に恒温保持し、コレ
ステリンオキシダーゼ反応の生成物又は酸素消費量を測
定することによる血清又は血漿中のHDL−コレステリン
の特異的測定法において、胆汁酸塩又は胆汁酸誘導体塩
又はジオクチルスルホサクシネート（Aerosol OT）の
存在で恒温保持し、次いで第１の測定を実施し、引き続
き非イオン系のポリエチレンオキシド基含有界面活性剤
又は第２アルカンスルホネートを添加し、新たに恒温保
持し、次いで第２の測定を実施し、かつ第１及び第２の
測定の差からHDL−コレステリン量を求める血清又は血
漿中のHDL−コレステリンの特異的測定法により達せら
れる。
本発明は、一定の界面活性剤が乳縻脂粒、VLDL及びLDL
中に含有されるコレステリンのみをコレステリンエステ
ラーゼ及びコレステリンオキシダーゼとの反応に関与で
きるようにするという意外な確認にもとづくものであ
り、こうしてこのコレステリンフラクシヨンを第１の恒
温保持工程中で前記酵素と反応させ、次いで第２の恒温
保持工程で非イオン系ポリエチレンオキシド基を含有す
る界面活性剤又は第２アルカンスルホネートの添加によ
りHDL−コレステリンを反応に導入する。このことは、
唯一の反応配合物中で、先ず乳縻脂粒、VLDL及びLDL中
に含有されるコレステリンを、その後別にHDLコレステ
リンを測定し、全コレステリンもHDL−コレステリンも
唯一の配合中で得ること、又は乳縻脂粒コレステリン、
VLDLコレステリン及びLDLコレステリンを測定せずに先
ず完全に反応させ、次いでHDL−コレステリンのみを測
定することを可能とする。第１の場合はHDL−コレステ
リン量は第１の恒温保持及び第２の恒温保持の後の測定
の差から判明し、全コレステリン量は第２の恒温保持の
後の測定単独から得られる。HDL−コレステリンの単独
測定のためである第２の場合は、第１の恒温保持の間フ
エノール、フエノール誘導体又はアニリン並びにペルオ
キシダーゼを添加するが、アミノアンチピリン、MBTH又
はMBTH−Ｓは添加しない。これにより、反応式２により
生じたH2O2は全く色素を形成することなく反応完結す
る。４AAP、MBTH又はMBTH−Ｓの存在で第２の恒温保持
を実施する際にはじめて色素が形成され、この色素はHD
L濃度の直接的な尺度である。こうして該変法はHDL−測
定のために１回の測定のみが必要である。
中に含有されるコレステリンのみをコレステリンエステ
ラーゼ及びコレステリンオキシダーゼとの反応に関与で
きるようにするという意外な確認にもとづくものであ
り、こうしてこのコレステリンフラクシヨンを第１の恒
温保持工程中で前記酵素と反応させ、次いで第２の恒温
保持工程で非イオン系ポリエチレンオキシド基を含有す
る界面活性剤又は第２アルカンスルホネートの添加によ
りHDL−コレステリンを反応に導入する。このことは、
唯一の反応配合物中で、先ず乳縻脂粒、VLDL及びLDL中
に含有されるコレステリンを、その後別にHDLコレステ
リンを測定し、全コレステリンもHDL−コレステリンも
唯一の配合中で得ること、又は乳縻脂粒コレステリン、
VLDLコレステリン及びLDLコレステリンを測定せずに先
ず完全に反応させ、次いでHDL−コレステリンのみを測
定することを可能とする。第１の場合はHDL−コレステ
リン量は第１の恒温保持及び第２の恒温保持の後の測定
の差から判明し、全コレステリン量は第２の恒温保持の
後の測定単独から得られる。HDL−コレステリンの単独
測定のためである第２の場合は、第１の恒温保持の間フ
エノール、フエノール誘導体又はアニリン並びにペルオ
キシダーゼを添加するが、アミノアンチピリン、MBTH又
はMBTH−Ｓは添加しない。これにより、反応式２により
生じたH2O2は全く色素を形成することなく反応完結す
る。４AAP、MBTH又はMBTH−Ｓの存在で第２の恒温保持
を実施する際にはじめて色素が形成され、この色素はHD
L濃度の直接的な尺度である。こうして該変法はHDL−測
定のために１回の測定のみが必要である。
従つて、本発明のよる方法を、コレステリンオキシダー
ゼ反応２の生成物としてのH2O2を色素形成により測定す
るコレステリン検出システムを使用するように実施する
ことが有利である。H2O2−検出に好適な相応する色原体
システムは専門家に公知である。有利であるのはいわゆ
るトリンダー（Trinder）システムであり、該システム
はフエノールもしくはフエノール誘導体又は置換アニリ
ン、４−アミノアンチピリン及びペルオキシダーゼから
なる。好適なフエノールもしくはフエノール誘導体とし
ては特にフエノール、クロルフエノール、トリヨード−
もしくはトリブロム−ヒドロキシ安息香酸及びジクロル
フエノールスルホン酸が重要である。４−アミノアンチ
ピリンのかわりに、例えば３−メチル−２−ベンゾチア
ゾリノン−ヒドラゾン（MBTH）及びそのスルホン化誘導
体（MBTHS）を使用することもでき、有利に置換アニリ
ン、例えばジメチルアニリン、ジメチルアミノ安息香
酸、Ｎ−エチル−Ｎ−β−スルホエチル−ｍ−トルイジ
ン又はＮ−エチル−Ｎ−β−ヒドロキシエチル−ｍ−ト
ルイジンとの組合わせで使用するが、その際最後の２つ
の化合物は４−アミノアンチピリンとの組合わせにも好
適であつた。
ゼ反応２の生成物としてのH2O2を色素形成により測定す
るコレステリン検出システムを使用するように実施する
ことが有利である。H2O2−検出に好適な相応する色原体
システムは専門家に公知である。有利であるのはいわゆ
るトリンダー（Trinder）システムであり、該システム
はフエノールもしくはフエノール誘導体又は置換アニリ
ン、４−アミノアンチピリン及びペルオキシダーゼから
なる。好適なフエノールもしくはフエノール誘導体とし
ては特にフエノール、クロルフエノール、トリヨード−
もしくはトリブロム−ヒドロキシ安息香酸及びジクロル
フエノールスルホン酸が重要である。４−アミノアンチ
ピリンのかわりに、例えば３−メチル−２−ベンゾチア
ゾリノン−ヒドラゾン（MBTH）及びそのスルホン化誘導
体（MBTHS）を使用することもでき、有利に置換アニリ
ン、例えばジメチルアニリン、ジメチルアミノ安息香
酸、Ｎ−エチル−Ｎ−β−スルホエチル−ｍ−トルイジ
ン又はＮ−エチル−Ｎ−β−ヒドロキシエチル−ｍ−ト
ルイジンとの組合わせで使用するが、その際最後の２つ
の化合物は４−アミノアンチピリンとの組合わせにも好
適であつた。
コレステリンエステラーゼとしては例えばカンジダ・シ
リンドラツエー（Candida cylindracea）又は有利であ
る膵臓酵素からの微生物由来コレステリンエステラーゼ
を挙げることができる。
リンドラツエー（Candida cylindracea）又は有利であ
る膵臓酵素からの微生物由来コレステリンエステラーゼ
を挙げることができる。
胆汁酸もしくは胆汁酸誘導体の塩としてはコール酸、デ
ソキシコール酸、リトコール酸、タウロコール酸、グリ
ココール酸、デソキシグリココール酸及びデソキシタウ
ロコール酸及びコレイン酸のアルカリ金属塩もしくはマ
グネシウム塩をあげることができる。コール酸ナトリウ
ムが有利である。選択的にNa−ジオクチルスルホサクシ
ート（Aerosol OT）を使用することもできる。該界面
活性剤はリピド豊富で、比較的僅かな蛋白質を有するリ
ポ蛋白質である乳縻脂粒、VLDL及びLDLのみを溶かし、
その中に含有されるコレステリンを酵素反応に関与させ
る。
ソキシコール酸、リトコール酸、タウロコール酸、グリ
ココール酸、デソキシグリココール酸及びデソキシタウ
ロコール酸及びコレイン酸のアルカリ金属塩もしくはマ
グネシウム塩をあげることができる。コール酸ナトリウ
ムが有利である。選択的にNa−ジオクチルスルホサクシ
ート（Aerosol OT）を使用することもできる。該界面
活性剤はリピド豊富で、比較的僅かな蛋白質を有するリ
ポ蛋白質である乳縻脂粒、VLDL及びLDLのみを溶かし、
その中に含有されるコレステリンを酵素反応に関与させ
る。
HDL−フラクシヨンのコレステリンは非イオン系ポリエ
チレンオキシド基含有界面活性剤、例えば非イオン系ア
ルキル−又はアルキルアリール−ポリエチレンオキシド
エーテル、例えばｎ−ドデシルポリエチレングリコール
エーテル（Thesit ）、イソ−トリデカノールポリエチ
レンオキシドエーテル（Genapol ｘ−８０）、イソ−
オクチルフエノールポリエチレンオキシドエーテル（Tr
iton Ｘ−１００）により酵素反応に関与可能となる。
例えばホスタプール（Hostapur） ATとして市販されて
いる、アニオン系第２アルカンスルホネートも使用する
ことができる。これらのHDL溶解性界面活性剤の群をメ
タノール、エタノール、ｎ−プロパノール又はイソプロ
パノールと共に使用するのが有利である。プロパノール
を使用するのが有利である。アルコール量は有利に0.05
〜２％である。すべての濃度は反応混合物中の最終濃度
にもとずく。
チレンオキシド基含有界面活性剤、例えば非イオン系ア
ルキル−又はアルキルアリール−ポリエチレンオキシド
エーテル、例えばｎ−ドデシルポリエチレングリコール
エーテル（Thesit ）、イソ−トリデカノールポリエチ
レンオキシドエーテル（Genapol ｘ−８０）、イソ−
オクチルフエノールポリエチレンオキシドエーテル（Tr
iton Ｘ−１００）により酵素反応に関与可能となる。
例えばホスタプール（Hostapur） ATとして市販されて
いる、アニオン系第２アルカンスルホネートも使用する
ことができる。これらのHDL溶解性界面活性剤の群をメ
タノール、エタノール、ｎ−プロパノール又はイソプロ
パノールと共に使用するのが有利である。プロパノール
を使用するのが有利である。アルコール量は有利に0.05
〜２％である。すべての濃度は反応混合物中の最終濃度
にもとずく。
胆汁酸塩もしくは胆汁酸誘導体塩を0.2〜２０mmol／
の濃度まで添加するのが有利でる。この量は検査すべき
試料によりうわまわつてもよいし、下まわつてもよい。
ジオクチルスルホサクシネートに関しても同じことがい
える。
の濃度まで添加するのが有利でる。この量は検査すべき
試料によりうわまわつてもよいし、下まわつてもよい。
ジオクチルスルホサクシネートに関しても同じことがい
える。
第２の界面活性剤、すなわち非イオン系ポリエチレンオ
キシド基含有界面活性剤もしくは第２アルカンスルホネ
ートに関しては、有利な濃度は0.02〜２％である。試料
によりこの濃度はうわまわつても、下まわつてもよい。
キシド基含有界面活性剤もしくは第２アルカンスルホネ
ートに関しては、有利な濃度は0.02〜２％である。試料
によりこの濃度はうわまわつても、下まわつてもよい。
pH値、好適な緩衝剤及び使用すべき酵素の量に関して
は、反応において公知コレステリン測定におけると同様
に行なう。
は、反応において公知コレステリン測定におけると同様
に行なう。
本発明のもう１つの目的はコレステリンエステラーゼ、
コレステリンオキシダーゼ及び緩衝剤を含有する、血清
中のHDL−コレステリンの特異的測定試薬であり、該試
薬は調合済水溶液に関して、 コレステリンエステラーゼ 0.1〜10Ｕ／ml コレステリンオキシダーゼ 0.05〜10Ｕ／ml 緩衝剤（pH6.0〜8.0） 20〜500mmol／、 胆汁酸塩又は胆汁酸誘導体塩又はジオクチルスルホサク
シネート 0.2〜20mmol／、 及びこれとは分離して 非イオン系ポリエチレンオキシド基含有界面活性剤又は
第２アルカンスルホネート 0.02〜２％ 並びに場合により炭素原子数３までのアルコール 0.05
〜２％ を含有していることを特徴とする。
コレステリンオキシダーゼ及び緩衝剤を含有する、血清
中のHDL−コレステリンの特異的測定試薬であり、該試
薬は調合済水溶液に関して、 コレステリンエステラーゼ 0.1〜10Ｕ／ml コレステリンオキシダーゼ 0.05〜10Ｕ／ml 緩衝剤（pH6.0〜8.0） 20〜500mmol／、 胆汁酸塩又は胆汁酸誘導体塩又はジオクチルスルホサク
シネート 0.2〜20mmol／、 及びこれとは分離して 非イオン系ポリエチレンオキシド基含有界面活性剤又は
第２アルカンスルホネート 0.02〜２％ 並びに場合により炭素原子数３までのアルコール 0.05
〜２％ を含有していることを特徴とする。
第１の実施形によれば、本発明による試薬はペルオキシ
ダーゼ0.05〜２０Ｕ／ml、フエノール又はアニリン0.2
〜２０mmol／及び場合によりポリエチレングリコール
0.02〜５％及び／又はｎ−プロパノール0.05〜２％を含
有する。
ダーゼ0.05〜２０Ｕ／ml、フエノール又はアニリン0.2
〜２０mmol／及び場合によりポリエチレングリコール
0.02〜５％及び／又はｎ−プロパノール0.05〜２％を含
有する。
本発明による有利な試薬はコレステリンエステラーゼ0.
2〜２Ｕ／ml、コレステリンオキシダーゼ0.05〜0.5Ｕ／
ml、ペルオキシダーゼ１〜５Ｕ／ml、燐酸カリウム緩衝
剤（pH6.5〜7.0）５０〜２００mmol／、フエノール又
はフエノール誘導体1.4〜１０mmol／胆汁酸塩又は胆
汁酸誘導体塩又はジオクチルスルホサクシネート１〜５
mmol／、場合により前記のものから分離して４−アミ
ノアンチピリン0.2〜２ｍmol／及び他の成分と分離し
て、又は場合により４−アミノアンチピリンを除いた他
の成分と分離して、非イオン系ポリエチレンオキシド基
含有界面活性剤又は第２アルカンスルホネート0.5〜5.0
％、及び場合によりｎ−プロパノール0.1〜0.5％及びポ
リエチレングリコール0.5〜5.0％を含有する。
2〜２Ｕ／ml、コレステリンオキシダーゼ0.05〜0.5Ｕ／
ml、ペルオキシダーゼ１〜５Ｕ／ml、燐酸カリウム緩衝
剤（pH6.5〜7.0）５０〜２００mmol／、フエノール又
はフエノール誘導体1.4〜１０mmol／胆汁酸塩又は胆
汁酸誘導体塩又はジオクチルスルホサクシネート１〜５
mmol／、場合により前記のものから分離して４−アミ
ノアンチピリン0.2〜２ｍmol／及び他の成分と分離し
て、又は場合により４−アミノアンチピリンを除いた他
の成分と分離して、非イオン系ポリエチレンオキシド基
含有界面活性剤又は第２アルカンスルホネート0.5〜5.0
％、及び場合によりｎ−プロパノール0.1〜0.5％及びポ
リエチレングリコール0.5〜5.0％を含有する。
もう１つの実施形においては前記反応成分は担体材料上
又は担体材料中に含浸されて存在する。担体材料として
は吸収性又は膨潤性又は膜形成性担体、例えば試験紙と
して公知の担体材料、例えば紙及び類似のフリース材
料、例えばテイーバツク紙を使用する。多くの接触する
担体上に反応成分が分配されていてもよい。
又は担体材料中に含浸されて存在する。担体材料として
は吸収性又は膨潤性又は膜形成性担体、例えば試験紙と
して公知の担体材料、例えば紙及び類似のフリース材
料、例えばテイーバツク紙を使用する。多くの接触する
担体上に反応成分が分配されていてもよい。
他のコレステリン含有リポ蛋白質フラクシヨンを予め分
離することなく、HDL中に含有されるコレステリンを直
接測定することが本発明により達せられる。このことは
測定法の著しい簡易化及び簡素化を意味する。
離することなく、HDL中に含有されるコレステリンを直
接測定することが本発明により達せられる。このことは
測定法の著しい簡易化及び簡素化を意味する。
実施例 次に実施例につき本発明を詳細に説明する。
この際、次の略語を使用した： CHOD＝コレステリンオキシダーゼ CHOL−エステラーゼ＝コレステリンエステラーゼ POD＝ペルオキシダーゼ ４−AAP＝４−アミノアンチピリン PEG６０００＝ポリエチレングリコール6000 TRA＝トリエタノールアミン 例 １ a)基礎試薬： 燐酸カリウム 0.1mol／（pH6.7）、 コール酸ナトリウム ３mM、 ４−AAP 0.8mM、 フエノール 1.4mM、 PEG6000 0.1％ POD ３Ｕ／ml CHOD 1.2Ｕ／ml CHOL−エステラーゼ 0.5Ｕ／ml b)後発試薬： TRA−緩衝液 0.005ｍ（pH7.1） テジト（Ｔｈｅｓｉｔ） １０％ プロパノール １０％ c)テストの実施： 波長：５４６nm 温度：２５℃ 試薬空値に対して２５℃で測定。
層厚１０mmのクベツト中にピペツトで測り入れる： d)計算： 計算は、公知全−コレステリン濃度及びHDL−コレステ
リン濃度を有する血清−標準を一緒に実施することによ
り達せられる。この際、血清−標準は試料と同様なテス
ト配合物中で使用する。
リン濃度を有する血清−標準を一緒に実施することによ
り達せられる。この際、血清−標準は試料と同様なテス
ト配合物中で使用する。
実施例によるテスト配合物に相応して生じる段階的な色
素形成の時間的経過を第１図として示す。
素形成の時間的経過を第１図として示す。
例 ２ a)基礎試薬： 例１と同じであるが、４−AAPを含有しない。
b)後発試薬： 例１と同じであるが、付加的に４−AAP d)計算 計算は、公知全−コレステリン濃度及びHDL−コレステ
リン濃度を有する血清−標準を一緒に実施することによ
り達せられる。この際、血清−標準は試料と同様なテス
ト配合物中で使用する。
リン濃度を有する血清−標準を一緒に実施することによ
り達せられる。この際、血清−標準は試料と同様なテス
ト配合物中で使用する。
本発明による方法と燐タングステン酸（PWS）／Mg−硫
酸塩沈殿による方法との間で、種々の人血清における例
２によるHDL−コレステリン測定の対照を第２図に示し
た。この方法比較は相関係数0.814を有するＹ＝−0.907
＋1.019Ｘの回帰線を示す。
酸塩沈殿による方法との間で、種々の人血清における例
２によるHDL−コレステリン測定の対照を第２図に示し
た。この方法比較は相関係数0.814を有するＹ＝−0.907
＋1.019Ｘの回帰線を示す。
例１により行なう場合、HDL−コレステリンに関して同
じ結果が得られる。
じ結果が得られる。
添付図面は本発明の実施例の結果を示すグラフ図であ
る。 第１図は例１によるテスト配合物に相応して生じる段階
的な色素形成の時間的経過を示した図であり、縦軸は吸
光度を、横軸は経過時間（分）を示す。 第２図は例２による方法と燐タングステン酸（PSW）／M
gSO4沈殿による方法とを比較したものであり、縦軸は例
２によるHDL−コレステリン〔mg／dl〕を、横軸は燐タ
ングステン酸（PSW）／MgSO4沈殿法によるコレステリン
〔mg／dl〕を示す。 ８０mMを含有する。 c)テストの実施： 波長：546nm 温度：２５℃ 試薬空値に対して２５℃で測定。 層厚１０mmのクベツト中にピペツトで測り入れる：
る。 第１図は例１によるテスト配合物に相応して生じる段階
的な色素形成の時間的経過を示した図であり、縦軸は吸
光度を、横軸は経過時間（分）を示す。 第２図は例２による方法と燐タングステン酸（PSW）／M
gSO4沈殿による方法とを比較したものであり、縦軸は例
２によるHDL−コレステリン〔mg／dl〕を、横軸は燐タ
ングステン酸（PSW）／MgSO4沈殿法によるコレステリン
〔mg／dl〕を示す。 ８０mMを含有する。 c)テストの実施： 波長：546nm 温度：２５℃ 試薬空値に対して２５℃で測定。 層厚１０mmのクベツト中にピペツトで測り入れる：
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 ヨアヒム・ツイーゲンホルン ドイツ連邦共和国シユタルンベルク・イ ナ‐ザイデル‐ヴエーク １ (72)発明者 ブリギツテ・パウツ ドイツ連邦共和国ヘルシング・キーンター ルシユトラーセ 27
Claims (12)
- 【請求項１】緩衝水性媒体中にコレステリンオキシダー
ゼ及びコレステリンエステラーゼを含有するコレステリ
ン検出システムと共に恒温保持し、コレステリンオキシ
ダーゼ反応の生成物又は酸素消費量を測定することによ
る血清又は血漿中のHDL−コレステリンの特異的測定法
において、胆汁酸塩又は胆汁酸誘導体塩又はジオクチル
スルホサクシネートの存在で恒温保持し、次いで第１の
測定を実施し、引き続き非イオン系のポリエチレンオキ
シド基含有界面活性剤又は第２アルカンスルホネートを
添加し、新たに恒温保持し、次いで第２の測定を実施
し、かつ第１及び第２の測定の差からHDL−コレステリ
ン量を求めることを特徴とする血清又は血漿中のHDL−
コレステリンの特異的測定法。 - 【請求項２】コレステリンオキシダーゼ反応の生成物と
してのH2O2と共に色素形成に作用するコレステリン検出
システムを使用する特許請求の範囲第１項記載の方法。 - 【請求項３】色素形成のためにフエノール又はアニリ
ン、４−アミノアンチピリン及びペルオキシダーゼから
なる色原体システムを使用する特許請求の範囲第２項記
載の方法。 - 【請求項４】第１の恒温保持を、 ａ）胆汁酸塩又は胆汁酸誘導体塩、又はジオクチルスル
ホサクシネート、 ｂ）フエノール又はアニリン、及び ｃ）ペルオキシダーゼ の存在で実施し、引き続き非イオン系ポリエチレンオキ
シド基含有界面活性剤又は第２アルカンスルホネート及
び４−アミノアンチピリンを添加し、新たに恒温保持
し、次いで生じた色素を測定する特許請求の範囲第１項
記載の方法。 - 【請求項５】膵臓からのコレステリンエステラーゼを使
用する特許請求の範囲第１項から第４項までのいずれか
１項記載の方法。 - 【請求項６】胆汁酸塩又は胆汁酸誘導体塩、又はジオク
チルスルホサクシネートを0.2〜２０mmol／の濃度ま
で添加する特許請求の範囲第１項から第５項までのいず
れか１項記載の方法。 - 【請求項７】非イオン系ポリエチレンオキシド基含有界
面活性剤又は第２アルカンスルホネートを0.０２〜２％
の濃度まで添加する特許請求の範囲第１項から第６項ま
でのいずれか１項記載の方法。 - 【請求項８】反応をpH6.0〜8.0で実施する特許請求の範
囲第１項から第７項までのいずれか１項記載の方法。 - 【請求項９】反応媒体に炭素原子数１〜３のアルコール
0.05〜２％を添加する特許請求の範囲第１項から第８項
までのいずれか１項記載の方法。 - 【請求項１０】コレステリンオキシダーゼ、緩衝剤及び
コレステリンエステラーゼを含有する血清又は血漿中の
HDL−コレステリンの特異的測定試薬において、調合済
水溶液に対して、 コレステリンエステラーゼ 0.1〜10Ｕ／ml、 コレステリンオキシダーゼ 0.05〜10Ｕ／ml、 緩衝剤（pH6.0〜8.0） 20〜500mmol／、 胆汁酸塩又は胆汁酸誘導体塩又はジオクチル、 スルホサクシネート 0.2〜20mmol／、 及びこれとは分離して 非イオン系ポリエチレンオキシド基含有界面活性剤又は
第２アルカンスルホネート 0.02〜２％ 並びに場合により炭素原子数３までのアルコール 0.05
〜２％ を含有していることを特徴とする血清又は血漿中のHDL
−コレステリンの特異的測定試薬。 - 【請求項１１】ペルオキシダーゼ0.05〜20Ｕ／ml、 フエノール、フエノール誘導体又はアニリン 0.2〜20m
mol／、 及び場合により ポリエチレングリコール 0.02〜５％ 及び／又は ｎ−プロパノール 0.05〜２％ を含有する特許請求の範囲第１０項記載の試薬。 - 【請求項１２】コレステリンオキシダーゼ 0.05〜0.
5Ｕ／ml ペルオキシダーゼ 0.2〜２Ｕ／ml、 コレステリンエステラーゼ １〜５/Uml、 燐酸カリウム（pH6.5〜7.0） 50〜200mmol／、 フエノール又はフエノール誘導体 1.4〜10mmol／、
胆汁酸塩又は胆汁酸誘導体塩又はジオクチルスルホサク
シネート １〜５mmol／、 場合によりこれらと分離して ４−アミノアンチピリン 0.2〜２mmol／ 及び他の成分と分離して、ただし場合により４−アミノ
アンチピリンを除いた他の成分と分離して、 非イオン系ポリエチレンオキシド基含有界面活性剤又は
第２アルカンスルホネート 0.05〜0.5％ 及び場合により ｎ−プロパノール及び／又はポリエチレングリコール 0.1〜0.5％ を含有する特許請求の範囲第１１項記載の試薬。
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|---|---|---|---|
| DE19853533288 DE3533288A1 (de) | 1985-09-18 | 1985-09-18 | Verfahren und reagenz zur spezifischen bestimmung von hdl-cholesterin im serum |
| DE3533288.3 | 1985-09-18 |
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| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6269999A JPS6269999A (ja) | 1987-03-31 |
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| SE448324B (sv) * | 1985-09-27 | 1987-02-09 | Pharmacia Ab | Sett vid immunkemisk bestemning av lipoproteiner och apolipoproteiner |
| US5221623A (en) * | 1986-07-22 | 1993-06-22 | Boyce Thompson Institute For Plant Research, Inc. | Use of bacterial luciferase structural genes for cloning and monitoring gene expression in microorganisms and for tagging and identification of genetically engineered organisms |
| DE3636851A1 (de) * | 1986-10-29 | 1988-05-11 | Boehringer Mannheim Gmbh | Verfahren und reagenz zur spezifischen bestimmung des cholesterins der hdl-fraktion |
| ATE141335T1 (de) * | 1989-01-13 | 1996-08-15 | Robert Q Maines | Verfahren zur bestimmung des cholesterins, zum nachweis von gefässkrankheiten und zur anhebung des anteils an hdl-cholesterin |
| US5135716A (en) * | 1989-07-12 | 1992-08-04 | Kingston Diagnostics, L.P. | Direct measurement of HDL cholesterol via dry chemistry strips |
| FI901703L (fi) * | 1990-04-04 | 1991-10-05 | Elomit Oy | Foerfarande foer bestaemmande av kliniskt relevanta metaboliter. |
| US5344571A (en) * | 1992-02-18 | 1994-09-06 | University Of Texas System Board Of Regents | Method for separating isoanalytes and measuring analytes in fluids |
| JP2600065B2 (ja) * | 1994-03-08 | 1997-04-16 | 協和メデックス株式会社 | 高密度リポ蛋白中のコレステロールの定量法 |
| JP2653755B2 (ja) * | 1994-03-08 | 1997-09-17 | 協和メデックス株式会社 | 高密度リポ蛋白中のコレステロールの定量法 |
| WO1996029599A1 (en) * | 1995-03-20 | 1996-09-26 | Kyowa Medex Co., Ltd. | Method of quantifying cholesterol in low-density or very-low-density lipoprotein |
| US5989845A (en) * | 1996-04-05 | 1999-11-23 | Mercury Diagnostics, Inc. | Diagnostic compositions and devices utilizing same |
| US5776719A (en) * | 1997-07-07 | 1998-07-07 | Mercury Diagnostics, Inc. | Diagnostic compositions and devices utilizing same |
| US6040151A (en) | 1998-03-10 | 2000-03-21 | Mercury Diagnostics, Inc. | Diagnostic compositions and devices utilizing same |
| WO1997040376A1 (fr) * | 1996-04-22 | 1997-10-30 | Iatron Laboratories, Inc. | Procede specifique de dosage du cholesterol des lphd et composition utilisee pour le dosage. |
| JP3193634B2 (ja) * | 1996-05-29 | 2001-07-30 | 第一化学薬品株式会社 | Ｌｄｌコレステロールの定量方法 |
| ES2248856T3 (es) | 1996-12-09 | 2006-03-16 | Denka Seiken Co., Ltd. | Procedimiento para determinar el contenido en colesterol de lipoproteinas de alta densidad. |
| JPH1156395A (ja) * | 1997-08-27 | 1999-03-02 | Dai Ichi Pure Chem Co Ltd | コレステロールの定量法 |
| WO2004035817A1 (ja) * | 2002-10-16 | 2004-04-29 | Kyowa Medex Co., Ltd. | 高密度リポ蛋白中のコレステロールの測定方法および試薬 |
| ATE449867T1 (de) * | 2002-10-16 | 2009-12-15 | Kyowa Medex Co Ltd | Verfahren und reagens zur messung von cholesterin in lipoproteinen hoher dichte |
| TWI372783B (en) * | 2005-04-27 | 2012-09-21 | Kyowa Medex Co Ltd | A process for measuring the cholesterol in high density lipoprotein |
| CN100365409C (zh) * | 2005-06-01 | 2008-01-30 | 王贤理 | 一种测定低密度脂蛋白胆固醇的试剂及制备方法 |
| GB0609493D0 (en) * | 2006-05-12 | 2006-06-21 | Oxford Biosensors Ltd | Cholesterol sensor |
| GB0609494D0 (en) * | 2006-05-12 | 2006-06-21 | Oxford Biosensors Ltd | HDL cholesterol sensor using specific surfactant |
| JP5332611B2 (ja) * | 2007-01-15 | 2013-11-06 | 東洋紡株式会社 | 高密度リポ蛋白中コレステロールの測定方法およびその試薬 |
| JP2014030393A (ja) * | 2012-08-03 | 2014-02-20 | Denka Seiken Co Ltd | 高密度リポ蛋白（ｈｄｌ）中のコレステロールの定量方法 |
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Family Cites Families (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4164448A (en) * | 1973-12-07 | 1979-08-14 | Boehringer Mannheim Gmbh | Activation of cholesterol oxidase for cholesterol assay |
| US4184921A (en) * | 1976-03-25 | 1980-01-22 | Boehringer Mannheim Gmbh | Process and reagent for determining cholesterol |
| US4275152A (en) * | 1977-02-03 | 1981-06-23 | Eastman Kodak Company | Hydrolysis of protein-bound cholesterol esters |
| US4205521A (en) * | 1977-03-21 | 1980-06-03 | Victoria Torres | Decorative clock |
| US4105521A (en) * | 1977-09-21 | 1978-08-08 | Helena Laboratories Corporation | Clinical procedure for measuring lipoprotein cholesterols |
| US4414326A (en) * | 1978-04-24 | 1983-11-08 | Goldberg Jack M | Diagnostic agents |
| US4226713A (en) * | 1978-04-24 | 1980-10-07 | Goldberg Jack M | Diagnostic agents |
| DE2963844D1 (en) * | 1978-07-04 | 1982-11-18 | Goella Lab | Method and reagents for measuring the cholesterol content in serum |
| EP0180720B1 (de) * | 1981-09-10 | 1990-06-13 | B. Braun-SSC AG | Vorrichtung zur selektiven extrakorporalen Präzipation von Low Density Lipoprotenen aus Vollserum oder Plasma |
| FR2513766B1 (fr) * | 1981-09-28 | 1985-09-13 | Biomerieux Sa | Procedes et reactifs de separation selective des lipoproteines de faible densite ldl et de quantification de leurs composants |
| DE3208253A1 (de) * | 1982-03-08 | 1983-09-15 | Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim | Verfahren zur spezifischen bestimmung des cholesterins der ldl-fraktion im serum |
| ATE25464T1 (de) * | 1982-04-02 | 1987-02-15 | Ivan Endre Modrovich | Zeitstabile fluessige zusammensetzung fuer den cholesterinnachweis. |
-
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