JPH061799A - 非ａ非ｂ型肝炎ウイルス抗原ペプチド、該ペプチドをコードする核酸断片およびその利用法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【目的】 非Ａ非Ｂ型肝炎ウイルス感染症の診断薬とし
て有用なペプチドを開発する。 【構成】 下記に示すペプチドの少なくとも一部を有す
る非Ａ非Ｂ型肝炎ウイルス抗原ペプチド、またはそれと
同等の抗原性を有するペプチド。 （１） Ｖａｌ Ｓｅｒ Ｇｌｎ Ｌｅｕ Ｐｒｏ Ｇｌｙ Ｓｅｒ Ｈｉｓ Ｌｅｕ Ｐｒｏ Ｓｅｒ Ｔｒｐ Ｉｌｅ Ｔｒｐ Ｔｒｐ Ａｒｇ （２） Ｓｅｒ Ｔｈｒ Ｔｈｒ Ｔｈｒ Ｔｈｒ Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｇｌｎ Ｖａｌ Ｇｌｙ Ａｒｇ Ｇｌｎ Ｔｈｒ Ｓｅｒ Ａｒｇ Ｈｉｓ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｌｅｕ Ｐｈｅ Ｓｅｒ Ｇｌｎ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｓｅｒ Ｇｌｎ Ｇｌｕ Ｖａｌ Ｇｌｎ Ｌｅｕ

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、Ａ型でもＢ型でもない
血清型肝炎ウイルスの原因ウイルス（以下、非Ａ非Ｂ型
肝炎ウイルスという）の抗原タンパク質、およびそれを
コードする核酸断片、および該ペプチドを有効成分とし
た非Ａ非Ｂ型肝炎ウイルス感染症診断薬に関する。

【０００２】

【従来の技術】ウイルス性肝炎は肝炎ウイルスの感染に
より起こる肝疾患である。肝炎ウイルスとして現在まで
に、Ａ型、Ｂ型、およびＤ型（デルタ型）の各肝炎ウイ
ルスが同定されていた。しかし、これらの肝炎ウイルス
の感染によらないウイルス性肝炎が多数存在することが
報告されている。このような肝炎のうち原因ウイルスが
Ａ型でもＢ型でもないものを総称して非Ａ非Ｂ型肝炎と
呼ぶようになった。従って、非Ａ非Ｂ型肝炎の原因ウイ
ルスは一種類ではなく、例えば食物や水を介して感染す
る経口感染型ウイルスや主として血液を介して伝播し、
輸血後などに多発する血液伝播型ウイルスなどが知られ
ている。

【０００３】非Ａ非Ｂ型肝炎ウイルスは、他のウイルス
の発見の経緯とは異なり、ウイルス遺伝子のクローニン
グから発見された（Ｓｃｉｅｎｃｅ、２４４、３５９−
３６２（１９８９））。この非Ａ非Ｂ型肝炎ウイルスは
現在のところ、エンベロープウイルスであると考えられ
ており、分類学上フラビウイルスかペスチウイルスに近
似しているとされているが、全く新しいタイプのウイル
スである可能性もある。

【０００４】そのウイルスゲノムの一部を、ヒト・スー
パーオキサイド・ムターゼ（ＳＯＤ）との融合タンパク
質Ｃ１００−３ポリペプチドとして酵母で発現させこれ
を診断薬とした抗体アッセイ系が確立されている（Ｓｃ
ｉｅｎｃｅ、２４４、３６２−３６４（１９８９））。
しかしながら、上記のウイルス遺伝子のクローニングに
成功した領域や融合タンパク質としての発現に成功した
タンパク質は、フラビウイルスの非構造タンパク質領域
に相当する遺伝子やタンパク質であった。

【０００５】その後、非Ａ非Ｂ型肝炎ウイルスの構造タ
ンパク質領域についてもいくつかの研究グループが遺伝
子のクローニングに成功している。例えば、カイロン型
（ＷＯ９０／１１０８９、ＷＯ９０／１４４３６など）
やがんセンター型（Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓ
ｃｉ．ＵＳＡ、８７、９５２４−９５２８（１９９
０））、阪大微研型（Ｊ．Ｖｉｒｏｌ．、６５、１１０
５−１１１３（１９９１））があり、これらのデータを
元に血液伝播型非Ａ非Ｂ型肝炎ウイルスをさらにサブク
ラスに分けることも提唱されている（Ｈｅｐａｔｏｌｏ
ｇｙ、１４、３８１（１９９１））。しかしながら、ウ
イルスの性状の解析、ウイルスの分離、ウイルスの構造
タンパク質の解析などは進んでいない。

【０００６】診断薬としては、ウイルスの構造タンパク
質、非構造タンパク質いづれを使用することも可能では
あるが、感染後の抗体がすぐに産生される構造タンパク
質を使用する方が病気の早期発見が可能であり好まし
い。また、一般にウイルスの株が違うと免疫血清学的性
状も一部異なるため、同一の診断方法では、株間の違い
により検出感度の違いが生じ、ワクチンでは免疫原性や
感染防御能の違いが生じる。さらに、株の違いにより治
療薬の感受性が違いことも考えられる。

【０００７】例えばＢ型肝炎ウイルスでは、欧米、東南
アジア等の地域毎にメジャーな流行株（サブタイプ）の
存在が知られており、本発明の対象となる非Ａ非Ｂ型肝
炎ウイルスにおいても地域に特有のウイルス株が存在す
ることが考えられる。従って、日本で流行している非Ａ
非Ｂ型肝炎ウイルスに特有の抗原タンパク質を見いだ
し、株を同定できるような非Ａ非Ｂ型肝炎ウイルス感染
症診断法が必須である。

【０００８】

【発明が解決しようとする課題】本発明者らは、かかる
従来技術や知見の下で、従来から診断薬として用いられ
ている抗原に比し、優れて信頼性が高く有効な非Ａ非Ｂ
型肝炎ウイルス抗原を得るべく鋭意検討を進めた結果、
血液伝播型非Ａ非Ｂ型肝炎ウイルス遺伝子を含有した日
本人由来の血清から非Ａ非Ｂ型肝炎ウイルスの抗原遺伝
子をクローニングし、この中に同種のウイルスの中で他
のウイルスには存在しないペプチドをコードする遺伝子
を見いだし、本発明を完成するに至った。

【０００９】

【課題を解決するための手段】かくして本発明によれ
ば、まず、第一の発明としては、抗非Ａ非Ｂ型肝炎ウイ
ルス血清と抗原抗体反応しうる下記（１）または（２）
のアミノ酸配列の少なくとも一部を有するペプチド、 （１） Ｖａｌ Ｓｅｒ Ｇｌｎ Ｌｅｕ Ｐｒｏ Ｇｌｙ Ｓｅｒ Ｈｉｓ Ｌｅｕ Ｐｒｏ Ｓｅｒ Ｔｒｐ Ｉｌｅ Ｔｒｐ Ｔｒｐ Ａｒｇ （２） Ｓｅｒ Ｔｈｒ Ｔｈｒ Ｔｈｒ Ｔｈｒ Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｇｌｎ Ｖａｌ Ｇｌｙ Ａｒｇ Ｇｌｎ Ｔｈｒ Ｓｅｒ Ａｒｇ Ｈｉｓ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｌｅｕ Ｐｈｅ Ｓｅｒ Ｇｌｎ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｓｅｒ Ｇｌｎ Ｇｌｕ Ｖａｌ Ｇｌｎ Ｌｅｕ または、これらのペプチドと同等の抗原性を有するペプ
チドが提供される。

【００１０】また、第二の発明としてこれらのペプチド
をコードする新規な核酸断片が提供される。

【００１１】さらに第三の発明として、上記のペプチド
を有効成分とする非Ａ非Ｂ型肝炎ウイルス感染症診断薬
が提供される。本発明の非Ａ非Ｂ型肝炎ウイルス抗原ペ
プチドは、上記（１）または（２）のアミノ酸配列の少
なくとも一部、好ましくは６アミノ酸以上、さらに好ま
しくは１０アミノ酸以上を有するものである。

【００１２】またこれらのペプチドと同等の抗原性を有
する限りにおいて修飾（アミノ酸の付加、挿入、置換、
欠損、脱落等）されたペプチドであってもよい。さらに
上記アミノ酸配列の少なくとも一部に他のアミノ酸配列
を付加してもよいが、このペプチドを非Ａ非Ｂ型肝炎ウ
イルス感染症診断薬として使用する場合には、検出精度
の低下を避けるために、ヒトに対する病原菌由来の抗原
ペプチド以外のペプチドが好ましい。そのような例とし
て、マウス寄生虫由来のグルタチオン−Ｓ−トランスフ
ェラーゼ（以下、ＧＳＴという）、マウス由来のデヒド
ロフォレート・リダクターゼ、ヒト血清アルブミンなど
を挙げることができる。

【００１３】これらのペプチドは、化学的に合成された
ものであっても、これらのペプチドをコードする遺伝子
を単独で、あるいは他のペプチドをコードする遺伝子と
フレームを合わせて連結した形で適当な宿主に組み込
み、発現させた後、宿主を破砕し、常法例えば塩析、ゲ
ル濾過、イオン交換およびアフィニティークロマトグラ
フィーによる分離、高速液体クロマトグラフィー、電気
泳動による分画法等を適宜組み合わせることにより精製
されたものであってもよい。

【００１４】遺伝子組み換えによりペプチドを製造する
場合には、ＤＮＡ断片が過度に短いと発現しない、ある
いは発現したとしても精製がきわめて困難であるので、
前述のＧＳＴをコードする遺伝子などとともに宿主に組
み込み、発現させる方が好ましい。

【００１５】一方、本発明の核酸断片は、上記ペプチド
（１）または（２）をコードするものであり、その具体
例として、下記（１）または（２）が挙げられる。 （１） ＧＴＡＴＣＧＣＡＧＴ ＴＡＣＣＣＧＧＡＴＣ ＣＣＡＣＡＡＧＣＣＧ ＴＣＧＴＧＧＡＴＡＴ ＧＧＴＧＧＣＧＧ （２） ＴＣＴＡＣＣＴＡＣＡ ＣＧＡＣＡＧＧＧＧＧ ＡＣＡＡＧＴＧＧＧＴ ＣＧＣＣＡＧＡＣＴＡ ＧＴＣＧＴＣＡＣＧＧ ＧＧＣＣＣＴＣＴＴＣ ＡＧ ＣＣＡＧＧＧＧＧ ＣＧＴＣＴＣＡＧＧＡ ＡＧＴＣＣＡＡＣＴＴ

【００１６】このような核酸断片は、如何なる方法によ
って得られたものであってもよく、例えば常法にしたが
って、化学的に合成することができるほか、ＧＰＴが１
００以上で非Ａ非Ｂ型肝炎と診断された日本人の血液か
ら、公知の技術によってウイルスＲＮＡを単離し、逆転
写酵素酵素にｃＤＮＡを調製した後、非Ａ非Ｂ型肝炎ウ
イルスの公知の配列（Ｊ．Ｖｉｒｏｌ．、６５、１１９
５−１２１３（１９９１））に基づいて設計されたプラ
イマーを使用したＰＣＲ法（Ｓｃｉｅｎｃｅ、２３、９
４８７（１９８８））を行い、クローニングベクターに
挿入することによって得られたＩＫ４ＣＥクローン（本
願明細書実施例１参照）から得ることもできる。ＩＫ４
ＣＥクローンが有する非Ａ非Ｂ型肝炎ウイルス遺伝子由
来の計１２６０ｂｐのｃＤＮＡの塩基配列（ジデオキシ
法により解析、配列番号１参照）の第１０００番目〜第
１０４７番目の塩基配列と第１１５０番目〜第１２３９
番目の塩基配列が本発明の遺伝子の相当する。

【００１７】本発明の前記（１）または（２）で示され
るペプチドの配列は、これまでに知られている非Ａ非Ｂ
型肝炎ウイルスペプチドのアミノ酸配列とホモロジーを
示さない。従って、このペプチドを診断薬として用いる
と、非Ａ非Ｂ型肝炎患者血清との抗体陽性反応が、正常
者血清と比較して高率に検出されるため、例えばマイク
ロプレート、ポリスチレンビーズ、ラテックス粒子など
の支持体表面に該ペプチドを吸着させた状態で診断薬と
して提供することができる。このような診断薬は、常用
されている抗原抗体反応測定法、例えばＲＩＡ、ＥＬＩ
ＳＡ、蛍光抗体法、受身凝集法、逆受身凝集反応等の常
法にしたがって使用可能である。また、本発明の核酸断
片は、非Ａ非Ｂ型肝炎ウイルス感染患者血液からウイル
スを検出するためにプローブとして用いることも可能で
ある。

【００１８】

【発明の効果】かくして本発明によれば、非Ａ非Ｂ型肝
炎ウイルスのある種のウイルスに特異的なペプチドは、
ある種の非Ａ非Ｂ型肝炎ウイルスに感染した患者の血清
と特異的に反応するので、該ウイルス感染症の診断に用
いることができ、また、このペプチドをコードする核酸
断片もプローブとして前記ウイルスの感染症診断に用い
ることができる。

【００１９】

【実施例】以下に実施例を挙げて本発明をさらに具体的
に説明する。 （実施例１） 非Ａ非Ｂ型肝炎ウイルス由来遺伝子のク
ローニングと解析 （Ａ）非Ａ非Ｂ型肝炎ウイルス由来構造タンパク質領域
の遺伝子のクローニングＢ型肝炎陰性でＧＰＴ値１００
以上のヒト血清０．５ｍｌに５倍量のグアニジウムチオ
シアネート溶液（４Ｍグアニジウムチオシアネート、５
０ｍＭトリス塩酸ｐＨ７．６、１０ｍＭ ＥＤＴＡ、
０．１Ｍ ２−メルカプトメタノール、２％ザルコシ
ル）を加えフェノール／クロロホルム抽出しグリコーゲ
ンをキャリアーとしてエタノール沈澱により血清中の全
ＲＮＡを精製した。一方、岡本ら（前掲参照）の結果を
もとに以下の配列を持つ４本の合成ＤＮＡプライマーを
作製した。 （１）5' CATATGAGCACGAATCCTAA、（２）5' CCCAACGAGCAAGTCGACGT、 （３）5' TGATCATGCATACTCCCGGGT、（４）5' GCTGCCGTTGGTATTCACAA （４）の合成ＤＮＡをプライマーとして前記ＲＮＡのｃ
ＤＮＡを、ｃＤＮＡ合成システム（ベーリンガーマンハ
イム社製）を用いて作製した。合成したｃＤＮＡ（１．
２６ｋｂｐ）をテンプレートとして、プライマー（１）
と（２）を使ったＰＣＲ法を行いこのｃＤＮＡ断片を増
幅した。増幅されたｃＤＮＡ断片の５’末端をＴ４ポリ
ヌクレオチドキナーゼによりリン酸化した後、ＳｍａＩ
で消化したｐＵＣ１８と連結し得られた約３．４１ｋｂ
ｐのプラスミドをｐＩＫＣと命名した。また、プライマ
ー（３）と（４）を用いて前記と同様の操作を行い、得
られた約３．４５ｋｂｐのプラスミドをｐＩＫＥと命名
した。ｐＩＫＣ中に挿入された非Ａ非Ｂ型肝炎ウイルス
のｃＤＮＡ断片の３’部分とｐＩＫＥ中に挿入された非
Ａ非Ｂ型肝炎ウイルスのｃＤＮＡの５’部分は一部重複
している。そこで、ｐＩＫＣとｐＩＫＥを制限酵素Ａｖ
ａＩで消化した後、連結し、得られた約４．０１ｋｂｐ
のプラスミドをｐＩＫ４ＣＥと命名した。

【００２０】（Ｂ）ｐＩＫ４ＣＥの核酸塩基配列とアミ
ノ酸配列の決定 ｐＩＫ４ＣＥにクローニングされた非Ａ非Ｂ型肝炎ウイ
ルスのｃＤＮＡ塩基配列を調べるため、組み込んだｃＤ
ＮＡ（１．２６ｋｂｐ）をリクローニングしＳｅｑｕｅ
ｎｃｅシーケンスキット（Ｕｎｉｔｅｄ Ｓｔａｔｅｓ
Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ社製）により塩基配列を決定
した。その結果得られた塩基配列とそれから予測される
アミノ酸配列の解読結果を配列番号１に示した。

【００２１】これらの塩基配列とアミノ酸配列をデータ
ベース（ＤＮＡＳＩＳ）で検索したところこれまでに知
られている血液伝播型非Ａ非Ｂ型肝炎ウイルスのペプチ
ドとホモロジーを示さないＩＫ４ＣＥクローンに特異的
な塩基配列（配列番号１）の第１０００番目〜第１０４
７番目の塩基配列と第１１５０番目〜第１２３９番目の
塩基配列（アミノ酸配列でいうと第３３４番目〜第３４
９番目と第３８４番目〜第４１３番目）が存在すること
が判明した。

【００２２】（実施例２） ＩＫ４ＣＥクローンに特異
的ペプチドの非Ａ非Ｂ型肝炎に対する特異性の検討 ペプチド Ｖａｌ Ｓｅｒ Ｇｌｎ Ｌｅｕ Ｐｒｏ
Ｇｌｙ Ｓｅｒ Ｈｉｓ Ｌｅｕ Ｐｒｏ Ｓｅｒ Ｔ
ｒｐ Ｉｌｅ Ｔｒｐ Ｔｒｐ Ａｒｇ を化学合成
し、ペプチド濃度が０．１μｇ／ｍｌとなるようにＥ緩
衝液（組成：Ｎａ₂ＣＯ₃ １．６ｇ／ｌ、ＮａＨＣＯ₃
２．９ｇ／ｌ、ＮａＮ₃ ０．１６ｇ／ｌ）に溶解
し、その１００μｌをＥＩＡプレート（Ｎｕｎｃ社製）
に添加し、室温で１時間放置した。その後、抗原タンパ
ク質を捨て、０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０含有リン酸緩衝
液（以下、ＰＢＳ−Ｔｗという）で２回洗浄した後、３
％牛血清アルブミンを含むＰＢＳ−Ｔｗで５回洗浄し
た。その後、１００倍希釈した正常人血清または急性肝
炎、肝硬変、肝ガン患者血清を１００μｌ加え、室温で
１時間反応させた。

【００２３】この反応させたＥＩＡプレートをＰＢＳ−
Ｔｗで５回洗浄後、７，５００倍希釈したアルカリフォ
スファターゼ結合抗ヒトＩｇＧ抗体（ＴＡＧＯ社製）を
１００μｌの基質溶液（１ｍｇ／ｍｌのｐ−ニトロフェ
ニルフォスフェート）を加え、暗所で３０分後放置後、
４０５ｎｍの吸光度を測定した。

【００２４】急性肝炎と診断された患者では、診断後５
７日目には正常人血清の吸光度の１０倍以上に達し、８
８０日後も正常人血清の吸光度の６倍以上の値を示し
た。さらに、６０日前後にＧＰＴ値の異常な上昇がみら
れたか、これと同調して吸光度が顕著に上昇し、正常人
血清の吸光度の１５倍に達した。このことは、本発明の
ペプチドに対する抗体検出が非Ａ非Ｂ型肝炎ウイルスの
病体把握に応用可能であることを示している。

【００２５】ついで、１２例の非Ａ非Ｂ型急性肝炎、肝
硬変、肝ガン患者の血清中の本ペプチドに対する抗体を
測定した。その結果、１２例中５例で吸光度が正常人の
６倍以上の値を示し、これらの６例は本発明のペプチド
を持ったＩＫ４ＣＥ株タイプの感染であることが明きら
かとなった。

【００２６】

【配列表】

配列番号：1 配列の長さ：1257 配列の型：核酸 鎖の数：二本鎖 トポロジー：直鎖状 配列の種類：DNA 起源 生物名：血液伝播型非Ａ非Ｂ型肝炎ウイルス 配列 ATG AGC ACG AAT CCT AAA CCT CAA AGA AAA ACC AAA CGT AAC ACC AAC 48 Met Ser Thr Asn Pro Lys Pro Gln Arg Lys Thr Lys Arg Asn Thr Asn 1 5 10 15 CGC CGC CCA CAG GAC GTC AAG TTC CCG GGC GGT GGT CAG ATC GTT GGT 96 Arg Arg Pro Gln Asp Val Lys Phe Pro Gly Gly Gly Gln Ile Val Gly 20 25 30 GGA GTT TAC CTG TTG CCG CGC AGG GGC CCC AGG TTG GGT GTG CGC GCA 144 Gly Val Tyr Leu Leu Pro Arg Arg Gly Pro Arg Leu Gly Val Arg Ala 35 40 45 ACT AGG AAG ACT TCC GAG CGG TCG CAG CCT CGT GGA AGG CGA CAA CCT 192 Thr Arg Lys Thr Ser Glu Arg Ser Gln Pro Arg Gly Arg Arg Gln Pro 50 55 60 ATC CCC AAG GCT CGC CGG CCC GAG GGC AGG GCC TGG GCT CAG CCC CGG 240 Ile Pro Lys Ala Arg Arg Pro Glu Gly Arg Ala Trp Ala Gln Pro Arg 65 70 75 80 TAC CCT TGG CCC CTC TAT GGC AAT GAG GGT CTG GGG TGG GCA GGA TGG 288 Tyr Pro Trp Pro Leu Tyr Gly Asn Glu Gly Leu Gly Trp Ala Gly Trp 85 90 95 CTC CTG TCA CCC CGA GGC TCT CGG CCT AGT TTG TCA CCC ACG GAC CCC 336 Leu Leu Ser Pro Arg Gly Ser Arg Pro Ser Leu Ser Pro Thr Asp Pro 100 105 110 CGG CGT AGG TCG CGT AAT TTG GGT AAG GTC ATC GAT ACC CTT ACA TGC 384 Arg Arg Arg Ser Arg Asn Leu Gly Lys Val Ile Asp Thr Leu Thr Cys 115 120 125 GGC TTC GGA GCC CTC ATG GGG TAC ATT CCG CTC GTC GGC GCC CCC CTA 432 Gly Phe Gly Ala Leu Met Gly Tyr Ile Pro Leu Val Gly Ala Pro Leu 130 135 140 GGC ATG GGC CCC AGG GCC CTG CGG CAT GGC GTC CGG CGT CTG GAG GAC 480 Gly Met Gly Pro Arg Ala Leu Arg His Gly Val Arg Arg Leu Glu Asp 145 150 155 160 GGC GTG AAC TAC GCA ACA GGG AAT CTG CCC GGT TGC TCT TTC TCT ATC 528 Gly Val Asn Tyr Ala Thr Gly Asn Leu Pro Gly Cys Ser Phe Ser Ile 165 170 175 TTC CTT CTA GCT TTG CTG TCT TGT CTG ACC ATC CCA GCT TCC GCT TAC 576 Phe Leu Leu Ala Leu Leu Ser Cys Leu Thr Ile Pro Ala Ser Ala Tyr 180 185 190 GAA GTG CGC AAC GAG TCC GGG GTG TAC CAT GTC ACG AAC GAC TGC TCC 624 Glu Val Arg Asn Glu Ser Gly Val Tyr His Val Thr Asn Asp Cys Ser 195 200 205 AAC TCA AGT ATT GTG TAT GAG GCA GCG GAC ATG ATC ATG CAA CCC CCC 672 Asn Ser Ser Ile Val Tyr Glu Ala Ala Asp Met Ile Met Gln Pro Pro 210 215 220 GGG TGC GTG CCC TGC ATC CGA GAG AAC AAT TCC TCC CGT TGC TGG GTG 720 Gly Cys Val Pro Cys Ile Arg Glu Asn Asn Ser Ser Arg Cys Trp Val 225 230 235 240 ＧＣＧ ＣＴＣ ＡＣＣ ＣＣＣ ＡＣＧ ＣＴＣ ＧＣＧ ＧＣＣ ＡＧＧ
ＡＡＣ ＡＡＣ ＡＧＣ ＡＴＣ ＣＣＣ ＡＣＣ ＡＣＧ ７６８ Ala Leu Thr Pro Thr Leu Ala Ala Arg Asn Asn Ser Ile Pro Thr Thr 245 250 255 ACA ATA CGA CGC CAC GGA TCT TTG CTT GTT GGG GCA GCT GCT CTC TGT 768 Thr Ile Arg Arg His Gly Ser Leu Leu Val Gly Ala Ala Ala Leu Cys 260 265 270 TCC GCT ATG TAC GTA GGG GAT CTC TGC GGA TCT GTC TTC CTC GTC TCC 864 Ser Ala Met Tyr Val Gly Asp Leu Cys Gly Ser Val Phe Leu Val Ser 275 280 285 CAG CTG TTC ACC TTC TCA CCT CGC CGG TAT GAG ACG GTA CAA GAA TGC 912 Gln Leu Phe Thr Phe Ser Pro Arg Arg Tyr Glu Thr Val Gln Glu Cys 290 295 300 AAC TGC TCA CTC TAT CCC GGC CAC GTA TCA GGT CAC CGC ATG GCT TGG 960 Asn Cys Ser Leu Tyr Pro Gly His Val Ser Gly His Arg Met Ala Trp 305 310 315 320 GAT ATG ATG ATG AAC TGG TCA CCT ACA ACG GCC CTA GTG GTA TCG CAG 1008 Asp Met Met Met Asn Trp Ser Pro Thr Thr Ala Leu Val Val Ser Gln 325 330 335 TTA CCC GGA TCC CAC AAG CCG TCG TGG ATA TGG TGG CGG GGC CAC TGG 1056 Leu Pro Gly Ser His Lys Pro Ser Trp Ile Trp Trp Arg Gly His Trp 340 345 350 GGA GTC CTA GCG GGC CTT GCC TAC TAT TCC ATG GTG GGG AAC TGG GCT 1104 Gly Val Leu Ala Gly Leu Ala Tyr Tyr Ser Met Val Gly Asn Trp Ala 355 360 365 AAA GTG TTG GTT GTG ATG CTA CTC TTT GCC GGT GTT AGC GGC TCG TCT 1152 Lys Val Leu Val Val Met Leu Leu Phe Ala Gly Val Ser Gly Ser Ser 370 375 380 ACC TAC ACG ACA GGG GGA CAA GTG GGT CGC CAG ACT AGT CGT CAC GGG 1200 Thr Tyr Thr Thr Gly Gly Gln Val Gly Arg Gln Thr Ser Arg His Gly 385 390 395 400 GCC CTC TTC AGC CAG GGG GCG TCT CAG GAA GTC CAA CTT GTG AAT ACC 1248 Ala Leu Phe Ser Gln Gly Ala Ser Gln Glu Val Gln Leu Val Asn Thr 405 410 415 AAC GGC AGC ATT 1260 Asn Gly Ser 419

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁵ 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｇ０１Ｎ 33/569 Ｌ 9015−2Ｊ 33/576 Ｚ 9015−2Ｊ // Ａ６１Ｋ 39/29 9284−4Ｃ Ｃ１２Ｐ 21/02 Ｃ 8214−4Ｂ 9284−4Ｃ Ａ６１Ｋ 39/00 Ｈ

Claims (3)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 下記（１）または（２）で示されるアミ
   ノ酸配列の少なくとも一部を有する非Ａ非Ｂ型肝炎ウイ
   ルス抗原ペプチド、またはそれと同等の抗原性を有する
   ペプチド。 （１） Ｖａｌ Ｓｅｒ Ｇｌｎ Ｌｅｕ Ｐｒｏ Ｇ
   ｌｙ Ｓｅｒ ＨｉｓＬｅｕ Ｐｒｏ Ｓｅｒ Ｔｒｐ
   Ｉｌｅ Ｔｒｐ Ｔｒｐ Ａｒｇ （２） Ｓｅｒ Ｔｈｒ Ｔｈｒ Ｔｈｒ Ｔｈｒ Ｇ
   ｌｙ Ｇｌｙ ＧｌｎＶａｌ Ｇｌｙ Ａｒｇ Ｇｌｎ
   Ｔｈｒ Ｓｅｒ Ａｒｇ Ｈｉｓ ＧｌｙＡｌａ Ｌ
   ｅｕ Ｐｈｅ Ｓｅｒ Ｇｌｎ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｓｅ
   ｒ ＧｌｎＧｌｕ Ｖａｌ Ｇｌｎ Ｌｅｕ
2. 【請求項２】 請求項１記載のペプチドをコードする核
   酸断片。
3. 【請求項３】 請求項１記載のペプチドを有効成分とす
   る非Ａ非Ｂ型肝炎ウイルス感染症診断薬。