JPH06277045A - 新規微生物 - Google Patents
新規微生物Info
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- JPH06277045A JPH06277045A JP9383993A JP9383993A JPH06277045A JP H06277045 A JPH06277045 A JP H06277045A JP 9383993 A JP9383993 A JP 9383993A JP 9383993 A JP9383993 A JP 9383993A JP H06277045 A JPH06277045 A JP H06277045A
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- JP
- Japan
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- toluene
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- organic solvents
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Abstract
(57)【要約】
【構成】 シュードモナス属に属し、有機溶媒耐性を有
し、かつ食塩を含む溶液中で７５％（ｖ／ｖ）のトルエ
ンを分解する能力を有する新規微生物シュードモナス・
プチダＳＨ−２９９２株(FERM P-13564)。 【効果】 本発明の新規微生物は、各種有機溶媒に耐性
を有し、かつ食塩を含む溶液中で７５％（ｖ／ｖ）のト
ルエンを分解する能力を有している。このように、本菌
は塩分を含む下水道や海水中でトルエン等の有機溶媒を
分解することができるので、有機溶媒や油分で汚染され
た下水道や海水等の処理に際しての利用が期待される。
し、かつ食塩を含む溶液中で７５％（ｖ／ｖ）のトルエ
ンを分解する能力を有する新規微生物シュードモナス・
プチダＳＨ−２９９２株(FERM P-13564)。 【効果】 本発明の新規微生物は、各種有機溶媒に耐性
を有し、かつ食塩を含む溶液中で７５％（ｖ／ｖ）のト
ルエンを分解する能力を有している。このように、本菌
は塩分を含む下水道や海水中でトルエン等の有機溶媒を
分解することができるので、有機溶媒や油分で汚染され
た下水道や海水等の処理に際しての利用が期待される。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、新規微生物に関し、詳
しくは食塩を含む溶液中で高濃度（７５％ｖ／ｖ）のト
ルエンを分解することができるシュードモナス属の新規
微生物に関する。トルエンは有機溶媒の中でも毒性の強
いものであるが、本発明の微生物はトルエンの他、ベン
ゼン，キシレンなどの芳香族炭化水素に対しても耐性を
有している。したがって、本発明の微生物は海洋中の有
機溶媒の除去や下水道等の有機溶媒の分解などに利用す
ることができる。
しくは食塩を含む溶液中で高濃度（７５％ｖ／ｖ）のト
ルエンを分解することができるシュードモナス属の新規
微生物に関する。トルエンは有機溶媒の中でも毒性の強
いものであるが、本発明の微生物はトルエンの他、ベン
ゼン，キシレンなどの芳香族炭化水素に対しても耐性を
有している。したがって、本発明の微生物は海洋中の有
機溶媒の除去や下水道等の有機溶媒の分解などに利用す
ることができる。
【０００２】
【従来の技術および発明が解決しようとする課題】一般
に、有機溶媒を分解する微生物としてシュードモナス
属，フラボバクテリウム属，アルギノゲネス属等に属す
る微生物が知られているが、これらは分解能力が十分で
なく、特に芳香族炭化水素等の難分解性物質が含まれる
場合は、分解に長時間を要する。また、比較的多量の有
機溶媒が流出したときに、効果的に対応できないという
問題もある。
に、有機溶媒を分解する微生物としてシュードモナス
属，フラボバクテリウム属，アルギノゲネス属等に属す
る微生物が知られているが、これらは分解能力が十分で
なく、特に芳香族炭化水素等の難分解性物質が含まれる
場合は、分解に長時間を要する。また、比較的多量の有
機溶媒が流出したときに、効果的に対応できないという
問題もある。
【０００３】
【課題を解決するための手段】そこで、本発明者らは上
記課題を解決すべく鋭意検討を重ねた結果、海洋中から
分離した微生物が各種有機溶媒中で生育し、トルエンな
どの芳香族炭化水素を分解する能力を有しており、上記
目的に適合することを見出し、本発明を完成した。
記課題を解決すべく鋭意検討を重ねた結果、海洋中から
分離した微生物が各種有機溶媒中で生育し、トルエンな
どの芳香族炭化水素を分解する能力を有しており、上記
目的に適合することを見出し、本発明を完成した。
【０００４】すなわち、本発明はシュードモナス属に属
し、有機溶媒耐性を有し、かつ食塩を含む溶液中で７５
％（ｖ／ｖ）のトルエンを分解する能力を有する新規微
生物シュードモナス・プチダＳＨ−２９９２株(FERM P-
13564)に関するものである。
し、有機溶媒耐性を有し、かつ食塩を含む溶液中で７５
％（ｖ／ｖ）のトルエンを分解する能力を有する新規微
生物シュードモナス・プチダＳＨ−２９９２株(FERM P-
13564)に関するものである。
【０００５】本発明の微生物は、神奈川県内の海洋中か
ら分離され、以下に示す菌学的性質を有する新規な細菌
である。なお、以下の試験ではいずれも塩化ナトリウム
2.５加培地を使用した。 Ａ．形態的性質 (1) 桿菌 (2) 芽胞：− (3) 大きさ：幅0.８〜1.２μm 、長さ１．２〜4.０μm Ｂ．培地における生育状態 (1) 生育温度範囲：至適発育温度範囲は２０〜３０℃
ら分離され、以下に示す菌学的性質を有する新規な細菌
である。なお、以下の試験ではいずれも塩化ナトリウム
2.５加培地を使用した。 Ａ．形態的性質 (1) 桿菌 (2) 芽胞：− (3) 大きさ：幅0.８〜1.２μm 、長さ１．２〜4.０μm Ｂ．培地における生育状態 (1) 生育温度範囲：至適発育温度範囲は２０〜３０℃
【０００６】Ｃ．生理的性質 (1) グラム反応：陰性 (2) 運動性：＋ (3) 好気性状態での発育：＋ (4) カタラーゼ反応：＋ (5) エタノールから酢酸への酸化：− (6) グルコースの酸化分解：＋ (7) 食塩の要求性：＋ (8) 鞭毛の数：＞１ (9) 蛍光色素の産生：＋ (10) ピオシアニンの生成：− (11) カロチノイドの生成：− (12) 他の色素の生成：− (13) ＯＦ培地：＋ (14) ４１℃での生育：− (15) ４℃での生育：＋
【０００７】(16) シュクロースからレバンの生成：− (17) アルギニンジヒドロラーゼ：＋ (18) オキシダーゼ反応：＋ (19) 脱窒反応：− (20) ゼラチンの加水分解：− (21) 澱粉の加水分解：− (22) レシチナーゼ（卵黄）：− (23) リパーゼ（ツィーン80加水分解）：− (24) ＤＮＡのＧＣ含量（mol%) ：６6.８％ (25) リジンデカルボキシラーゼ：− (26) オルニチンデカルボキシラーゼ：− (27) ウレアーゼ：− (28) インドール生成：− (29) Ｖ−Ｐテスト：＋ (30) 硫化水素生成：−
【０００８】(31) ONPG加水分解：− (32) フェニルアラニンデカルボキシラーゼ：− (33) 炭素源の利用性： グルコース：− トレハロース：− DL- アルギニン：＋ 酢酸塩：＋ コハク酸塩：＋ フマル酸塩：＋ L-リンゴ酸塩：＋ 乳酸塩：＋ クエン酸塩：＋ ピルビン酸塩：＋ グリセロール：− D-アラビノース：− マルトース：− セロビオース：− ラクトース：− 澱粉：− イヌリン：− フタル酸塩：− マンニトール：− D-キシロース：− L-アラビノース：− ラムノース：− D-ガラクトース：− シュクロース：− トレハロース：− グルコン酸塩：＋ マロン酸塩：− D-リンゴ酸塩：− L-酒石酸塩：− ソルビトール：− アドニトール：− エタノール：− ナフタレン：− 馬尿酸塩：＋ L-ソルボース：− デキストリン：− ラフィノース：− ズルシトール：−
【０００９】(34) 糖類からの酸の生成 グルコース：＋ マンニトール：− アドニトール：− アラビノース：− イノシトール：− ラムノース：− ソルビトール：− マルトース：− シュクロース：−
【００１０】以上の諸性質をバージェイのマニュアル
オブ ディターミナティブ バクテリオロジー（Berge
y's Manual of Determinative Bacteriology)第８版に
基づいて検索したところ、本菌はシュードモナス属に属
し、シュードモナス・プチダに該当することが判明し
た。しかし、本菌はシュードモナス・プチダに属する公
知の菌株とはD-アラビノースの利用性，ＤＮＡのＧＣ含
量などにおいて異なる性質を示すことから、新菌種と認
め、本菌をシュードモナス・プチダ（ビオバルＡ）ＳＨ
−２９９２株と命名した。本菌は、工業技術院生命工学
工業技術研究所に寄託されており、その受託番号はFERM
P-13564である。本発明においては、本菌の他、その自
然もしくは人工的手段によって変異させて得られる変異
株であっても、前記した能力を有するものはすべて本発
明に包含される。
オブ ディターミナティブ バクテリオロジー（Berge
y's Manual of Determinative Bacteriology)第８版に
基づいて検索したところ、本菌はシュードモナス属に属
し、シュードモナス・プチダに該当することが判明し
た。しかし、本菌はシュードモナス・プチダに属する公
知の菌株とはD-アラビノースの利用性，ＤＮＡのＧＣ含
量などにおいて異なる性質を示すことから、新菌種と認
め、本菌をシュードモナス・プチダ（ビオバルＡ）ＳＨ
−２９９２株と命名した。本菌は、工業技術院生命工学
工業技術研究所に寄託されており、その受託番号はFERM
P-13564である。本発明においては、本菌の他、その自
然もしくは人工的手段によって変異させて得られる変異
株であっても、前記した能力を有するものはすべて本発
明に包含される。
【００１１】次に、本発明における有機溶媒の耐性およ
び分解の試験方法について説明する。有機溶媒耐性試験
は、ＬＢ寒天平板培地に分離した菌株を植菌し、該平板
培地上に各種有機溶媒を重層後、３０℃で２４時間培養
し、菌の生育状態を観察し、耐性能力の有無を判定し
た。また、有機溶媒の分解試験は、海水に窒素源として
ペプトンを加えたものを培養瓶（５リットル）に充填
し、滅菌したのち、有機溶媒と分離した菌株を加え、ｐ
Ｈを7.０に調整し、振盪（１２０ｒｐｍ／ｍｉｎ）を行
い、培養終了後発生した二酸化炭素の量を測定すること
により分解能力の有無を判定した。
び分解の試験方法について説明する。有機溶媒耐性試験
は、ＬＢ寒天平板培地に分離した菌株を植菌し、該平板
培地上に各種有機溶媒を重層後、３０℃で２４時間培養
し、菌の生育状態を観察し、耐性能力の有無を判定し
た。また、有機溶媒の分解試験は、海水に窒素源として
ペプトンを加えたものを培養瓶（５リットル）に充填
し、滅菌したのち、有機溶媒と分離した菌株を加え、ｐ
Ｈを7.０に調整し、振盪（１２０ｒｐｍ／ｍｉｎ）を行
い、培養終了後発生した二酸化炭素の量を測定すること
により分解能力の有無を判定した。
【００１２】この分解方法における酸化分解条件は、使
用する微生物の生育温度の範囲、好ましくは最適生育温
度の範囲に設定する。この温度は、有機溶媒の種類，培
地の組成，ｐＨ，その他の条件によって異なるので一様
に規定することはできないが、例えば１０〜３０℃、好
ましくは２０〜３０℃に設定することができる。反応系
のｐＨは、通常6.０〜7.５の範囲に設定すればよい。
用する微生物の生育温度の範囲、好ましくは最適生育温
度の範囲に設定する。この温度は、有機溶媒の種類，培
地の組成，ｐＨ，その他の条件によって異なるので一様
に規定することはできないが、例えば１０〜３０℃、好
ましくは２０〜３０℃に設定することができる。反応系
のｐＨは、通常6.０〜7.５の範囲に設定すればよい。
【００１３】培養は、通常好気的条件で行うことがよ
く、例えば振盪培養法，通気攪拌培養法などが利用でき
る。培養時間は、有機溶媒の量や種類により異なるが、
トルエンを１％含有する場合、通常１０日以上、好まし
くは１５〜３０日間である。無機塩として添加する物質
としては、リン酸塩，マグネシウム塩，カルシウム塩，
鉄塩、その他必要に応じて微量金属塩が用いられる。ま
た、窒素源としては、被検菌が資化し得るものであれば
よく、例えばペプトン，尿素，硫酸アンモニウム，塩化
アンモニウム，リン酸アンモニウム，硝酸アンモニウ
ム，各種アミノ酸などが挙げられる。これらの窒素源は
１種でもよく、２種以上を適宜組合わせて用いてもよ
い。さらに、被検菌の成長を促進するための栄養源とし
て、ビタミン，酵母エキス，麦芽エキスなどの適量を添
加してもよい。
く、例えば振盪培養法，通気攪拌培養法などが利用でき
る。培養時間は、有機溶媒の量や種類により異なるが、
トルエンを１％含有する場合、通常１０日以上、好まし
くは１５〜３０日間である。無機塩として添加する物質
としては、リン酸塩，マグネシウム塩，カルシウム塩，
鉄塩、その他必要に応じて微量金属塩が用いられる。ま
た、窒素源としては、被検菌が資化し得るものであれば
よく、例えばペプトン，尿素，硫酸アンモニウム，塩化
アンモニウム，リン酸アンモニウム，硝酸アンモニウ
ム，各種アミノ酸などが挙げられる。これらの窒素源は
１種でもよく、２種以上を適宜組合わせて用いてもよ
い。さらに、被検菌の成長を促進するための栄養源とし
て、ビタミン，酵母エキス，麦芽エキスなどの適量を添
加してもよい。
【００１４】本発明においては、上記被検菌を、該菌が
資化し得る炭素源、例えばグルコース，ラクトース，サ
ッカロース，マルトース，廃糖蜜，でんぷん等を含む培
養液にて予め培養して得られる菌体を、上述した培地と
同様な組成の物質を含む液に添加し、反応を行う場合も
包含される。
資化し得る炭素源、例えばグルコース，ラクトース，サ
ッカロース，マルトース，廃糖蜜，でんぷん等を含む培
養液にて予め培養して得られる菌体を、上述した培地と
同様な組成の物質を含む液に添加し、反応を行う場合も
包含される。
【００１５】
【実施例】次に、本発明を実施例により詳しく説明す
る。 実施例１ ＬＢ寒天平板培地に分離した菌株並びに保存菌株を植菌
し、この平板培地上に各種有機溶媒を３０ｍｌ入れて重
層後、３０℃で２４時間培養した。２４時間培養後に、
菌の生育状態を肉眼的に観察し、耐性能力の有無につい
て判定した。結果を第１表に示す。
る。 実施例１ ＬＢ寒天平板培地に分離した菌株並びに保存菌株を植菌
し、この平板培地上に各種有機溶媒を３０ｍｌ入れて重
層後、３０℃で２４時間培養した。２４時間培養後に、
菌の生育状態を肉眼的に観察し、耐性能力の有無につい
て判定した。結果を第１表に示す。
【００１６】
【表１】
【００１７】実施例２ ２００ｍｌ振盪フラスコに２％ＮａＣｌ添加ＬＢ培地を
１００ｍｌ入れ、各種有機溶媒を所定濃度となるように
加えたものを生菌数測定用培地とした。この培地にＬＢ
培地で２４時間前培養して増殖させた有機溶媒耐性菌シ
ュードモナス・プチダ（ビオバルＡ）ＳＨ−２９９２株
(FERM P-13564)の培養物１００μｌを添加し、シリコン
栓を付け、２５℃、１２０ｒｐｍ／ｍｉｎの条件で振盪
培養した。培養は、菌数が定常期（１０9 個）に達する
まで行い、その時間を２４時間から２４０時間までの所
定時間に測定して求めた。なお、比較のため、有機溶媒
を添加しないで培養した場合も同様にして試験した。結
果を第２表および第３表に示す。
１００ｍｌ入れ、各種有機溶媒を所定濃度となるように
加えたものを生菌数測定用培地とした。この培地にＬＢ
培地で２４時間前培養して増殖させた有機溶媒耐性菌シ
ュードモナス・プチダ（ビオバルＡ）ＳＨ−２９９２株
(FERM P-13564)の培養物１００μｌを添加し、シリコン
栓を付け、２５℃、１２０ｒｐｍ／ｍｉｎの条件で振盪
培養した。培養は、菌数が定常期（１０9 個）に達する
まで行い、その時間を２４時間から２４０時間までの所
定時間に測定して求めた。なお、比較のため、有機溶媒
を添加しないで培養した場合も同様にして試験した。結
果を第２表および第３表に示す。
【００１８】
【表２】
【００１９】
【表３】
【００２０】実施例３ 全容量５２５０ｍｌ，直径２００ｍｍ，高さ３３０ｍｍ
の円筒形ガラス製瓶を用いて有機溶媒分解試験を行っ
た。すなわち、この瓶に無機培地（組成？）１５００ｍ
ｌを入れ、２４時間前培養したシュードモナス・プチダ
（ビオバルＡ）ＳＨ−２９９２株(FERM P-13564)１ｍｌ
を添加し、所定濃度のトルエンを加え、テフロン製回転
子（５×２ｃｍ）を入れ、培養びんの三方の口をすべて
密閉したのち、２５℃、１８０ｒｐｍ／ｍｉｎの条件で
１０日間振盪培養した。有機溶媒の分解の確認は、有機
溶媒の分解により発生した二酸化炭素濃度を測定するこ
とにより行った。測定は、培養瓶の気相部よりマイクロ
シリンジで気体の一定量を採取した試料をガスクロマト
グラフィーにより分析することによって行った。結果を
第４表に示す。
の円筒形ガラス製瓶を用いて有機溶媒分解試験を行っ
た。すなわち、この瓶に無機培地（組成？）１５００ｍ
ｌを入れ、２４時間前培養したシュードモナス・プチダ
（ビオバルＡ）ＳＨ−２９９２株(FERM P-13564)１ｍｌ
を添加し、所定濃度のトルエンを加え、テフロン製回転
子（５×２ｃｍ）を入れ、培養びんの三方の口をすべて
密閉したのち、２５℃、１８０ｒｐｍ／ｍｉｎの条件で
１０日間振盪培養した。有機溶媒の分解の確認は、有機
溶媒の分解により発生した二酸化炭素濃度を測定するこ
とにより行った。測定は、培養瓶の気相部よりマイクロ
シリンジで気体の一定量を採取した試料をガスクロマト
グラフィーにより分析することによって行った。結果を
第４表に示す。
【００２１】
【表４】
【００２２】
【発明の効果】本発明の新規微生物は、各種有機溶媒に
耐性を有し、かつ食塩を含む溶液中で７５％（ｖ／ｖ）
のトルエンを分解する能力を有している。このように、
本菌は塩分を含む下水道や海水中でトルエン等の有機溶
媒を分解することができるので、有機溶媒や油分で汚染
された下水道や海水等の処理に際しての利用が期待され
る。
耐性を有し、かつ食塩を含む溶液中で７５％（ｖ／ｖ）
のトルエンを分解する能力を有している。このように、
本菌は塩分を含む下水道や海水中でトルエン等の有機溶
媒を分解することができるので、有機溶媒や油分で汚染
された下水道や海水等の処理に際しての利用が期待され
る。
Claims (2)
- 【請求項１】 シュードモナス属に属し、有機溶媒耐性
を有し、かつ食塩を含む溶液中で７５％（ｖ／ｖ）のト
ルエンを分解する能力を有する新規微生物シュードモナ
ス・プチダＳＨ−２９９２株(FERM P-13564)。 - 【請求項２】 有機溶媒がベンゼン，トルエンおよびキ
シレンのうちの少なくとも１種を含むものである請求項
１記載の新規微生物。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP9383993A JP2655564B2 (ja) | 1993-03-30 | 1993-03-30 | 新規微生物 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP9383993A JP2655564B2 (ja) | 1993-03-30 | 1993-03-30 | 新規微生物 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH06277045A true JPH06277045A (ja) | 1994-10-04 |
| JP2655564B2 JP2655564B2 (ja) | 1997-09-24 |
Family
ID=14093567
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP9383993A Expired - Lifetime JP2655564B2 (ja) | 1993-03-30 | 1993-03-30 | 新規微生物 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2655564B2 (ja) |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1996018724A3 (en) * | 1994-12-16 | 1996-08-22 | Cytec Tech Corp | Systems and methods for biodegradation |
| US5610061A (en) * | 1994-12-16 | 1997-03-11 | Cytec Industries, Inc. | Microorganisms for biodegrading compounds |
| US5633164A (en) * | 1994-12-16 | 1997-05-27 | Cytec Technology Corporaton | Methods for fluid phase biodegradation |
| US5641679A (en) * | 1994-12-16 | 1997-06-24 | Cytec Technology Corporation | Methods for bio-remediation |
| KR101601589B1 (ko) * | 2015-01-09 | 2016-03-08 | 현대자동차주식회사 | 도장설비의 악취 제거를 위한 미생물제, 및 이를 이용한 악취 제거 방법 |
-
1993
- 1993-03-30 JP JP9383993A patent/JP2655564B2/ja not_active Expired - Lifetime
Cited By (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1996018724A3 (en) * | 1994-12-16 | 1996-08-22 | Cytec Tech Corp | Systems and methods for biodegradation |
| US5610061A (en) * | 1994-12-16 | 1997-03-11 | Cytec Industries, Inc. | Microorganisms for biodegrading compounds |
| US5633164A (en) * | 1994-12-16 | 1997-05-27 | Cytec Technology Corporaton | Methods for fluid phase biodegradation |
| US5641679A (en) * | 1994-12-16 | 1997-06-24 | Cytec Technology Corporation | Methods for bio-remediation |
| US5688685A (en) * | 1994-12-16 | 1997-11-18 | Cytec Technology Corporation | System and methods for biodegradation of compounds |
| US5773283A (en) * | 1994-12-16 | 1998-06-30 | Cytec Technology Corporation | Systems and methods for biodegradation |
| KR101601589B1 (ko) * | 2015-01-09 | 2016-03-08 | 현대자동차주식회사 | 도장설비의 악취 제거를 위한 미생물제, 및 이를 이용한 악취 제거 방법 |
| US10463757B2 (en) | 2015-01-09 | 2019-11-05 | Hyundai Motor Company | Agent for removing malodor from painting booth, and method of removing malodor |
| US10603397B2 (en) | 2015-01-09 | 2020-03-31 | Hyundai Motor Company | Agent for removing malodor from painting booth, and method of removing malodor |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP2655564B2 (ja) | 1997-09-24 |
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