JPH0630630B2 - 遊離脂肪酸の定量方法及びそれに用いる定量用試薬組成物 - Google Patents
遊離脂肪酸の定量方法及びそれに用いる定量用試薬組成物Info
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- JPH0630630B2 JPH0630630B2 JP11815887A JP11815887A JPH0630630B2 JP H0630630 B2 JPH0630630 B2 JP H0630630B2 JP 11815887 A JP11815887 A JP 11815887A JP 11815887 A JP11815887 A JP 11815887A JP H0630630 B2 JPH0630630 B2 JP H0630630B2
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Description
【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は遊離脂肪酸の定量方法、さらに詳しくは特に臨
床検査における血中遊離脂肪酸の定量に適した遊離脂肪
酸の定量方法及びそれに用いる遊離脂肪酸の定量用試薬
組成物に関するものである。
床検査における血中遊離脂肪酸の定量に適した遊離脂肪
酸の定量方法及びそれに用いる遊離脂肪酸の定量用試薬
組成物に関するものである。
血液中の遊離脂肪酸（以下ＮＥＦＡと略す）の定量は、
生体内の脂質代謝に基づくエネルギー状態を反映するこ
とから、臨床的に有意義なものであるとされている。
生体内の脂質代謝に基づくエネルギー状態を反映するこ
とから、臨床的に有意義なものであるとされている。
ＮＥＦＡの定量法については、ドールの報告した滴定法
［V.P.Dole，ジャーナル オブ クリニカ インベステ
イゲーション（J.Clin.Invest.,)35,150,1956年］以来
数多くの定量法が報告されている。たとえば、ＮＥＦＡ
にコバルト［ノバク．エム．；ジャーナル オブ リピ
ッド リサーチ（Novak.M.;J.Lipid.Res..)6431 1965
年］あるいは銅［ダンコンブ ダブリュ ジー，クリニ
カ キミカ アクタ（Duncombe.W.G-,Clin.Chim.Acta)9
122,1964年］を作用させ、ＮＥＦＡのコバルト塩あるい
は銅塩として比色定量する方法、またＮＥＦＡに、アデ
ノシン３リン酸（以下ＡＴＰと略す）及びコエンザイム
Ａ（以下ＣｏＡと略す）存在下アシルコエンザイムＡ合
成酵素（以下ＡＣＳと略す）を作用させ、下記反応式Ｉ
より生成するアシルコエンザイムＡ（以下アシルＣｏＡ
と略す）やアデノシン１リン酸（以下ＡＭＰと略す）あ
るいは消費されるＣｏＡを測定する方法−いわゆる酵素
法−等が報告されている。
［V.P.Dole，ジャーナル オブ クリニカ インベステ
イゲーション（J.Clin.Invest.,)35,150,1956年］以来
数多くの定量法が報告されている。たとえば、ＮＥＦＡ
にコバルト［ノバク．エム．；ジャーナル オブ リピ
ッド リサーチ（Novak.M.;J.Lipid.Res..)6431 1965
年］あるいは銅［ダンコンブ ダブリュ ジー，クリニ
カ キミカ アクタ（Duncombe.W.G-,Clin.Chim.Acta)9
122,1964年］を作用させ、ＮＥＦＡのコバルト塩あるい
は銅塩として比色定量する方法、またＮＥＦＡに、アデ
ノシン３リン酸（以下ＡＴＰと略す）及びコエンザイム
Ａ（以下ＣｏＡと略す）存在下アシルコエンザイムＡ合
成酵素（以下ＡＣＳと略す）を作用させ、下記反応式Ｉ
より生成するアシルコエンザイムＡ（以下アシルＣｏＡ
と略す）やアデノシン１リン酸（以下ＡＭＰと略す）あ
るいは消費されるＣｏＡを測定する方法−いわゆる酵素
法−等が報告されている。
反応式Ｉ： これら定量法のうちコバルトや銅を用いる比色法は、操
作が繁雑なうえ測定精度に劣るため、ＡＣＳを利用した
上記反応式Ｉに基づく定量法が一般化した。
作が繁雑なうえ測定精度に劣るため、ＡＣＳを利用した
上記反応式Ｉに基づく定量法が一般化した。
なかでも反応式Ｉで生成してくるアシルＣｏＡをアシル
コエンザイムＡ酸化酵素（以下ＡＣＯＤと略す）を利用
して、下記反応式IIにしたがって酸化する方法は、測定
精度に問題のあるＡＭＰを測定する方法や、ＮＥＦＡの
定量範囲が限定されてしまうＣｏＡ消費量を測定する方
法に比べて操作性、精度、感度等の点で優れていること
から現在繁用されている方法である。
コエンザイムＡ酸化酵素（以下ＡＣＯＤと略す）を利用
して、下記反応式IIにしたがって酸化する方法は、測定
精度に問題のあるＡＭＰを測定する方法や、ＮＥＦＡの
定量範囲が限定されてしまうＣｏＡ消費量を測定する方
法に比べて操作性、精度、感度等の点で優れていること
から現在繁用されている方法である。
反応式II： ところで、ＡＣＯＤによるアシルＣｏＡの酸化反応は、
試薬として反応系に添加したＣｏＡの還元作用のため阻
害を受ける。したがってＡＣＯＤを用いる測定系を実用
化するためには、Ｎ−エチルマレイミド（以下ＮＥＭと
略す）等、ＳＨ試薬の添加によって反応式Ｉにおける未
反応のＣｏＡの影響を抑える必要があった（特公昭57-3
3955公報）。
試薬として反応系に添加したＣｏＡの還元作用のため阻
害を受ける。したがってＡＣＯＤを用いる測定系を実用
化するためには、Ｎ−エチルマレイミド（以下ＮＥＭと
略す）等、ＳＨ試薬の添加によって反応式Ｉにおける未
反応のＣｏＡの影響を抑える必要があった（特公昭57-3
3955公報）。
しかしながら、ＡＣＯＤは活性中心にＳＨ基を有する酵
素であるため、ＳＨ試薬と長時間共存させておくと構造
的破壊を起こし、試薬自体の安定性低下につながる。
素であるため、ＳＨ試薬と長時間共存させておくと構造
的破壊を起こし、試薬自体の安定性低下につながる。
本発明は、ＡＣＳ及びＡＣＯＤを利用するＮＥＦＡの定
量法において、従来の方法の操作性、精度、感度等を損
うことなく試薬の安定性をも高め得るＮＥＦＡの定量方
法及びそのための試薬組成物を提供することを目的とし
ている。
量法において、従来の方法の操作性、精度、感度等を損
うことなく試薬の安定性をも高め得るＮＥＦＡの定量方
法及びそのための試薬組成物を提供することを目的とし
ている。
本発明は、検体中の遊離脂肪酸にＡＴＰとＣｏＡの存在
下ＡＣＳを作用させ、生成するアシルＣｏＡに下記一般
式Ｉで示される脂肪酸又はその水溶性の塩の存在下でＡ
ＣＯＤを作用させ、アシルＣｏＡを酸化して生じる変化
を測定することを特徴とするＮＥＦＡの定量方法及び少
なくともＡＴＰ、ＣｏＡ及びＡＣＳを含む第１試薬と少
なくとも下記一般式Ｉで示される脂肪酸又はその水溶性
の塩及びＡＣＯＤを含む第２試薬とから構成されるＮＥ
ＦＡ定量用試薬組成物に関するものである。
下ＡＣＳを作用させ、生成するアシルＣｏＡに下記一般
式Ｉで示される脂肪酸又はその水溶性の塩の存在下でＡ
ＣＯＤを作用させ、アシルＣｏＡを酸化して生じる変化
を測定することを特徴とするＮＥＦＡの定量方法及び少
なくともＡＴＰ、ＣｏＡ及びＡＣＳを含む第１試薬と少
なくとも下記一般式Ｉで示される脂肪酸又はその水溶性
の塩及びＡＣＯＤを含む第２試薬とから構成されるＮＥ
ＦＡ定量用試薬組成物に関するものである。
一般式Ｉ： Ｒ−Ａ−（ＣＨ2）n−ＣＯＯＨ （式中、Ｒは炭素数１〜20の脂肪族基を表し、ｎは０又
は１〜２の整数を表し、 Ａは−ＣＨ＝ＣＨ−又は を表し、 Ｙ及びＺは水素原子、水酸基又は低級アルキル基を表
す、ただしＹとＺは同時に水素原子を表さない。） 本発明における上記一般式Ｉで示される脂肪酸は、下記
反応式IIIで示される反応に従って、試薬として添加し
たＣｏＡ及びＡＴＰの存在下ＡＣＳの作用を受け、ＡＣ
ＯＤの基質となり得ない物質を生成する。
は１〜２の整数を表し、 Ａは−ＣＨ＝ＣＨ−又は を表し、 Ｙ及びＺは水素原子、水酸基又は低級アルキル基を表
す、ただしＹとＺは同時に水素原子を表さない。） 本発明における上記一般式Ｉで示される脂肪酸は、下記
反応式IIIで示される反応に従って、試薬として添加し
たＣｏＡ及びＡＴＰの存在下ＡＣＳの作用を受け、ＡＣ
ＯＤの基質となり得ない物質を生成する。
反応式III： （式中、ＦＡは上記一般的Ｉで示される脂肪酸を示し、
ＦＡ−ＣｏＡはＡＣＯＤの基質となり得ない物質を示
す） 上記一般式Ｉで示される脂肪酸と、この脂肪酸をもとに
反応式IIIに従って生成されるＡＣＯＤの基質となり得
ない物質との関係を、具体的な物質として列挙すれば、
例えば第１表に示す如きものが挙げられる。
ＦＡ−ＣｏＡはＡＣＯＤの基質となり得ない物質を示
す） 上記一般式Ｉで示される脂肪酸と、この脂肪酸をもとに
反応式IIIに従って生成されるＡＣＯＤの基質となり得
ない物質との関係を、具体的な物質として列挙すれば、
例えば第１表に示す如きものが挙げられる。
上記一般式Ｉで示される脂肪酸の使用量は、試料中の予
想されるＮＥＦＡの濃度並びに反応液中に存在するＣｏ
Ａの絶対量にもよるが、ＣｏＡに対するモル比が１以
上、好ましくは５〜50程度とするとよい。
想されるＮＥＦＡの濃度並びに反応液中に存在するＣｏ
Ａの絶対量にもよるが、ＣｏＡに対するモル比が１以
上、好ましくは５〜50程度とするとよい。
また、ＡＣＯＤはpH6.0〜8.5の範囲内で作用させるとよ
い。
い。
本発明によるＮＥＦＡの定量方法において、ＡＣＯＤの
作用により生じる変化を検出する方法としては、次のよ
うなものが挙げられる。
作用により生じる変化を検出する方法としては、次のよ
うなものが挙げられる。
ＡＣＯＤの作用により生成する過酸化水素を公知の方
法で測定する。
法で測定する。
ＡＣＯＤの作用により消費される酸素を公知の方法で
測定する。
測定する。
なかでも現在臨床検査の分野で繁用されている過酸化水
素の比色法による測定方法は、これまでのＮＥＦＡの定
量法にも利用されていたものなので、特別な装置や熟練
を必要としないので、好ましい方法である。
素の比色法による測定方法は、これまでのＮＥＦＡの定
量法にも利用されていたものなので、特別な装置や熟練
を必要としないので、好ましい方法である。
本発明によるＮＥＦＡの定量用組成物における上記一般
式Ｉの脂肪酸以外の物質は、従来の酵素法に基づく定量
用組成物に使用されるものと同様のものを用いることが
できる。すなわち、第１試薬には、リン酸、ホウ酸、ク
エン酸等適当な緩衝剤や、必要に応じて防腐剤や、公知
の安定剤等を加えることが可能である。同様に第２試薬
についても、緩衝剤、防腐剤及び安定剤等を加えること
ができる。更に第１試薬あるいは第２試薬には、ＡＣＯ
Ｄの作用により生じる変化を検出し得る試薬系を共存さ
せることも可能である。
式Ｉの脂肪酸以外の物質は、従来の酵素法に基づく定量
用組成物に使用されるものと同様のものを用いることが
できる。すなわち、第１試薬には、リン酸、ホウ酸、ク
エン酸等適当な緩衝剤や、必要に応じて防腐剤や、公知
の安定剤等を加えることが可能である。同様に第２試薬
についても、緩衝剤、防腐剤及び安定剤等を加えること
ができる。更に第１試薬あるいは第２試薬には、ＡＣＯ
Ｄの作用により生じる変化を検出し得る試薬系を共存さ
せることも可能である。
このような試薬系として広く知られているものとして
は、ＡＣＯＤの作用で生成してくる過酸化水素の測定試
薬系が挙げられる。具体的には、ペルオキシダーゼ（以
下ＰＯＤと略す）やカタラーゼを使用するものが挙げら
れる。これらは、ＰＯＤやカタラーゼの作用により、例
えば下記反応式〜に基づいて色素を生成させ、これ
を比色定量するものである。
は、ＡＣＯＤの作用で生成してくる過酸化水素の測定試
薬系が挙げられる。具体的には、ペルオキシダーゼ（以
下ＰＯＤと略す）やカタラーゼを使用するものが挙げら
れる。これらは、ＰＯＤやカタラーゼの作用により、例
えば下記反応式〜に基づいて色素を生成させ、これ
を比色定量するものである。
本発明による試薬組成物は、溶解状態のみならず、凍結
乾燥等の方法により乾燥状態で提供することも可能であ
る。
乾燥等の方法により乾燥状態で提供することも可能であ
る。
本発明によるＮＥＦＡの定量方法及び試薬組成物におけ
る前記一般式Ｉで示される脂肪酸は、ＡＣＯＤの作用に
よって進行する前記反応式IIで示される反応をＣｏＡが
妨害するのを抑える作用を有する。すなわち、前記反応
式Ｉにおいて、ＮＥＦＡとの反応にあずからなかったＣ
ｏＡ及びＡＴＰを、前記一般式Ｉで表される脂肪酸とＡ
ＣＳの存在下で反応させてＡＣＯＤの作用しない物質と
し、反応の系外に出してしまうのである。
る前記一般式Ｉで示される脂肪酸は、ＡＣＯＤの作用に
よって進行する前記反応式IIで示される反応をＣｏＡが
妨害するのを抑える作用を有する。すなわち、前記反応
式Ｉにおいて、ＮＥＦＡとの反応にあずからなかったＣ
ｏＡ及びＡＴＰを、前記一般式Ｉで表される脂肪酸とＡ
ＣＳの存在下で反応させてＡＣＯＤの作用しない物質と
し、反応の系外に出してしまうのである。
以下、本発明を実施例により説明する。
実施例１ 次に示す第１試薬及び第２試薬を用いてＮＥＦＡの定量
を行った。
を行った。
○第１試薬 ・リン酸緩衝液（pH6.8） 50mM ・ＡＴＰ ２mM ・塩化マグネシウム・ ６水和物 ５mM ・４−アミノアンチピリン ２mM ・ＣｏＡリチウム塩 0.2mM ・ＡＣＳ（比活性２Ｕ／mg タンパク） 0.3mg／ml ・トリトンＸ−100 0.1ｇ／dl ○第２試薬 ・リン酸緩衝液（pH6.8） 50mM ・Ｎ−エチル−Ｎ−（Ｏ− メチルスルホンアミドエチル） ｍ−トルイジン ２mM ・前記一般式Ｉで示される 脂肪酸（第２表参照） ２mM ・ＰＯＤ（比活性 100Ｕ／mg タンパク） 0.04mg／ml ・ＡＣＯＤ（比活性20Ｕ／mg タンパク） 0.25mg／ml ・トリトンＸ−100 0.05ｇ／dl 尚試料としては、オレイン酸ナトリウム30.45mgをトリ
トンＸ−100５ｇ／dl溶液10mlに溶解後、同溶液で全量1
00mlとしたものを用いた。測定操作は次のとおりであ
る。
トンＸ−100５ｇ／dl溶液10mlに溶解後、同溶液で全量1
00mlとしたものを用いた。測定操作は次のとおりであ
る。
試料50μと第１試薬１mlを混合し、37℃にて５分間
反応させる。
反応させる。
更に第２試薬２mlを加え、37℃にて５分間反応させた
後555nmにおける吸光度を測定する。
後555nmにおける吸光度を測定する。
従来法として、第２試薬中の脂肪酸にかえてＮＥＭ１mM
を加えたものを用いて同様の操作に従い定量を行って、
得られた結果を比較した。
を加えたものを用いて同様の操作に従い定量を行って、
得られた結果を比較した。
結果を第２表に示す。
尚ＮＥＭを利用した場合の光学的密度は0.26程度であっ
た。
た。
実施例２ 前記一般式Ｉで示される脂肪酸として３−オクテン酸を
利用した本発明によるＮＥＦＡ定量法と、ＮＥＭを利用
した従来法とで得られる結果の相関々係を調査した。
利用した本発明によるＮＥＦＡ定量法と、ＮＥＭを利用
した従来法とで得られる結果の相関々係を調査した。
本発明によるＮＥＦＡの定量法は実施例１と同様の操作
に従い、従来法はＮＥＭを含む市販のＮＥＦＡ定量用試
薬を利用し、操作は取扱い説明書の記載に従って行っ
た。
に従い、従来法はＮＥＭを含む市販のＮＥＦＡ定量用試
薬を利用し、操作は取扱い説明書の記載に従って行っ
た。
尚各々の定量法について、試料の定量とは別に50μの
精製水を用いて同様の操作を行って試薬ブランクの光学
的密度を求め、下記計算式を用いてＮＥＦＡ値（μＥｑ
／）を算出した。試料としては、ヒト血清15検体を、
標準試料としてはオレイン酸の1000μＥｑ／（30.45m
g／dl、実施例１で調製したものと同一）溶液を用い
た。
精製水を用いて同様の操作を行って試薬ブランクの光学
的密度を求め、下記計算式を用いてＮＥＦＡ値（μＥｑ
／）を算出した。試料としては、ヒト血清15検体を、
標準試料としてはオレイン酸の1000μＥｑ／（30.45m
g／dl、実施例１で調製したものと同一）溶液を用い
た。
計算式 本発明によるＮＥＦＡの定量法と従来法との間には、第
３表に示すとおり良好な相関々係が見られた。
３表に示すとおり良好な相関々係が見られた。
ちなみに本発明によるＮＥＦＡの定量法における検量線
は、第１図に示すとおり、原点０を通る直線性の良いも
であった。
は、第１図に示すとおり、原点０を通る直線性の良いも
であった。
実施例３ 第２試薬に３−オクテン酸（本発明）又はＮＥＭ（従来
法）を加えた場合のＡＣＯＤの安定性を調査した。
法）を加えた場合のＡＣＯＤの安定性を調査した。
３−オクテン酸 ２mM又はＮＥＭ １mMを含む第２試薬
を、溶解状態で次の２つの条件のもとに放置し、試薬の
反応性を比較した。
を、溶解状態で次の２つの条件のもとに放置し、試薬の
反応性を比較した。
○条件１：25℃で４日間放置し、実際に血清を用いて定
量操作を行い、第２試薬のタイムコースを観察した。結
果を第２図及び第３図に示す。
量操作を行い、第２試薬のタイムコースを観察した。結
果を第２図及び第３図に示す。
○条件２：２〜10℃で24日間放置し、実際に血清を用い
て定量操作を行い、第２試薬のタイムコースを観察し
た。結果を第４図及び第５図に示す。
て定量操作を行い、第２試薬のタイムコースを観察し
た。結果を第４図及び第５図に示す。
条件１及び２において、第２試薬中の過酸化水素測定用
試薬系の安定性を確認するために標準試料にかえて、過
酸化水素溶液を加えて発色状態を観察したが、各試薬間
での差はほとんどみられず、第２図ないし第５図におけ
る試薬間のＮＥＭ添加に起因する反応性のちがいは、Ａ
ＣＯＤの活性低下によるものと考えられた。
試薬系の安定性を確認するために標準試料にかえて、過
酸化水素溶液を加えて発色状態を観察したが、各試薬間
での差はほとんどみられず、第２図ないし第５図におけ
る試薬間のＮＥＭ添加に起因する反応性のちがいは、Ａ
ＣＯＤの活性低下によるものと考えられた。
又、条件１において、ＡＣＯＤ残存活性値をオースミら
によるバイオケミカル アンド バイオ フィジカル
リサーチ コミュニケーション（OSUMI et al,Biochem.
Biophys.Res.Comm.83.2.479-485(1978)）記載の方法に
従って測定し、保存中の活性変化を観察した。その結
果、試薬調製直後のＡＣＯＤ活性を100とすると、４日
後のＡＣＯＤ活性は、ＮＥＭを使った従来法では18.6
％、３−オクテン酸を使った本発明法では90.1％という
値が得られ、ＮＥＭの添加を避けることでＡＣＯＤ活性
の低下が著るしく抑制されることが明らかであった。
によるバイオケミカル アンド バイオ フィジカル
リサーチ コミュニケーション（OSUMI et al,Biochem.
Biophys.Res.Comm.83.2.479-485(1978)）記載の方法に
従って測定し、保存中の活性変化を観察した。その結
果、試薬調製直後のＡＣＯＤ活性を100とすると、４日
後のＡＣＯＤ活性は、ＮＥＭを使った従来法では18.6
％、３−オクテン酸を使った本発明法では90.1％という
値が得られ、ＮＥＭの添加を避けることでＡＣＯＤ活性
の低下が著るしく抑制されることが明らかであった。
本発明によれば、ＡＣＯＤの保存安定性に悪影響を及ぼ
すと考えられるＮＥＭ等のＳＨ試薬を用いないＮＥＦＡ
の定量方法及びそのための試薬組成物を提供し得る。試
薬成分の安定性の向上は、溶液状態で供給されることの
多い自動分析装置用の試薬において特に多大な効果を奏
するものと考えられる。
すと考えられるＮＥＭ等のＳＨ試薬を用いないＮＥＦＡ
の定量方法及びそのための試薬組成物を提供し得る。試
薬成分の安定性の向上は、溶液状態で供給されることの
多い自動分析装置用の試薬において特に多大な効果を奏
するものと考えられる。
第１図は本発明によるＮＥＦＡの定量法における検量線
を示すグラフ、 第２図及び第４図は従来法による、また第３図及び第５
図は本発明法によるＡＣＯＤの安定性を示すグラフであ
る。
を示すグラフ、 第２図及び第４図は従来法による、また第３図及び第５
図は本発明法によるＡＣＯＤの安定性を示すグラフであ
る。
Claims (7)
- 【請求項１】検体中の遊離脂肪酸にアデノシン３リン酸
とコエンザイムＡの存在下アシルコエンザイムＡ合成酵
素を作用させ、生成するアシルコエンザイムＡに、下記
一般式Ｉで示される脂肪酸又はその水溶性の塩の存在下
でアシルコエンザイムＡ酸化酵素を作用させ、アシルコ
エンザイムＡの酸化によって生じる変化を測定すること
を特徴とする遊離脂肪酸の定量方法。 一般式Ｉ： Ｒ−Ａ−（ＣＨ2）n−ＣＯＯＨ （式中、Ｒは炭素数１〜20の脂肪族基を表し、ｎは０又
は１〜２の整数を表し、 Ａは−ＣＨ＝ＣＨ−又は を表し、 Ｙ及びＺは水素原子、水酸基又は低級アルキル基を表
す、ただしＹとＺは同時に水素原子を表さない。） - 【請求項２】一般式Ｉで示される脂肪酸が、２−ヘキセ
ン酸、３−ヘキセン酸、２−ヘプテン酸、３−ヘプテン
酸、２−オクテン酸、３−オクテン酸、２−ノネン酸、
３−ノネン酸、２−デセン酸、３−デセン酸、２−ウン
デセン酸、３−ウンデセン酸、２−ドデセン酸、２−ト
リデセン酸及び２−ヘキサデセン酸から成る群から選択
されたものであることを特徴とする特許請求の範囲第１
項記載の遊離脂肪酸の定量方法。 - 【請求項３】一般式Ｉで示される脂肪酸が、２−ヒドロ
キシミリスチン酸、３−ヒドロキシミリスチン酸、２−
ヒドロキシパルミチン酸、３−ヒドロキシパルミチン
酸、２−ヒドロキシステアリン酸、３−ヒドロキシステ
アリン酸から成る群から選択されたものであることを特
徴とする特許請求の範囲第１項記載の遊離脂肪酸の定量
方法。 - 【請求項４】アシルコエンザイムＡを酸化して生じた過
酸化水素を測定することを特徴とする特許請求の範囲第
１項記載の遊離脂肪酸の定量方法。 - 【請求項５】過酸化水素を比色法により定量することを
特徴とする特許請求の範囲第５項記載の遊離脂肪酸の定
量方法。 - 【請求項６】少なくともアデノシン３リン酸、コエンザ
イムＡ及びアシルコエンザイムＡ合成酵素を含む第１試
薬と、少なくとも下記一般式Ｉで示される脂肪酸又はそ
の水溶性の塩及びアシルコエンザイムＡ酸化酵素を含む
第２試薬とから構成されることを特徴とする遊離脂肪酸
定量用試薬組成物。 一般式Ｉ： Ｒ−Ａ−（ＣＨ2）n−ＣＯＯＨ （式中、Ｒは炭素数１〜20の脂肪族基を表し、ｎは０又
は１〜２の整数を表し、 Ａは−ＣＨ＝ＣＨ−又は を表し、 Ｙ及びＺは水素原子、水酸基又は低級アルキル基を表
す、ただしＹとＺは同時に水素原子を表さない。） - 【請求項７】第２試薬が、更に過酸化水素比色法測定用
試薬組成物を含むことを特徴とする特許請求の範囲第６
項記載の遊離脂肪酸定量用試薬組成物。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP11815887A JPH0630630B2 (ja) | 1987-05-15 | 1987-05-15 | 遊離脂肪酸の定量方法及びそれに用いる定量用試薬組成物 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP11815887A JPH0630630B2 (ja) | 1987-05-15 | 1987-05-15 | 遊離脂肪酸の定量方法及びそれに用いる定量用試薬組成物 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS63283596A JPS63283596A (ja) | 1988-11-21 |
| JPH0630630B2 true JPH0630630B2 (ja) | 1994-04-27 |
Family
ID=14729536
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP11815887A Expired - Fee Related JPH0630630B2 (ja) | 1987-05-15 | 1987-05-15 | 遊離脂肪酸の定量方法及びそれに用いる定量用試薬組成物 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0630630B2 (ja) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105263946A (zh) | 2013-06-04 | 2016-01-20 | 新加坡科技研究局 | 蛋白质纯化方法 |
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1987
- 1987-05-15 JP JP11815887A patent/JPH0630630B2/ja not_active Expired - Fee Related
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