JPH0631306B2 - シチジン―５′―ジリン酸コリン１水和物結晶の製造法 - Google Patents
シチジン―５′―ジリン酸コリン１水和物結晶の製造法Info
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- JPH0631306B2 JPH0631306B2 JP60154930A JP15493085A JPH0631306B2 JP H0631306 B2 JPH0631306 B2 JP H0631306B2 JP 60154930 A JP60154930 A JP 60154930A JP 15493085 A JP15493085 A JP 15493085A JP H0631306 B2 JPH0631306 B2 JP H0631306B2
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Description
【発明の詳細な説明】 産業上の利用分野 本発明はシチジン−５′−ジリン酸コリン（以下、ＣＤ
Ｐ−コリンと称する。）１は水和物結晶の製造法に関す
る。
Ｐ−コリンと称する。）１は水和物結晶の製造法に関す
る。
従来の技術 ＣＤＰ−コリンは脳代謝賦活剤として用いられている物
質であって、その製造法としては微生物を用いる方法と
化学的に合成する方法とが知られている。
質であって、その製造法としては微生物を用いる方法と
化学的に合成する方法とが知られている。
化学的合成法によるＣＤＰ−コリンの製造法としては、
たとえばシチジン−５′−モノリン酸(以下、５′−Ｃ
ＭＰと略称する。)とホスホリルコリンとを原料とし、
これらをジシクロヘキシルカルボジイミドの存在下に反
応させる方法[ジャーナル オブ バイオロジカル ケ
ミストリー(J．Biol. Chem.）第222巻185頁(１９５６
年)]、５′−ＣＭＰのアミド類とホスホリルコリンとを
反応させる方法[特公昭４２−１３８４号公報]、５′−
ＣＭＰとホスホリルコリンのアミド類とを反応させる方
法[特公昭４５−４７４７号公報]などが提案されてい
る。しかし、これらいずれの方法においても反応は定量
的には進行しないで、反応生成物中には目的物であるＣ
ＤＰ−コリンのほかに、未反応の原料や副反応により生
成した副生成物が不純物として存在している。このよう
な不純物はその種類が多いうえに、ＣＤＰ−コリン自体
の物理化学的性質に類似する物質も含まれており、この
ような不純物を含む粗製のＣＤＰ−コリンから不純物を
除去するには、未だ数多くの課題が残されている。
たとえばシチジン−５′−モノリン酸(以下、５′−Ｃ
ＭＰと略称する。)とホスホリルコリンとを原料とし、
これらをジシクロヘキシルカルボジイミドの存在下に反
応させる方法[ジャーナル オブ バイオロジカル ケ
ミストリー(J．Biol. Chem.）第222巻185頁(１９５６
年)]、５′−ＣＭＰのアミド類とホスホリルコリンとを
反応させる方法[特公昭４２−１３８４号公報]、５′−
ＣＭＰとホスホリルコリンのアミド類とを反応させる方
法[特公昭４５−４７４７号公報]などが提案されてい
る。しかし、これらいずれの方法においても反応は定量
的には進行しないで、反応生成物中には目的物であるＣ
ＤＰ−コリンのほかに、未反応の原料や副反応により生
成した副生成物が不純物として存在している。このよう
な不純物はその種類が多いうえに、ＣＤＰ−コリン自体
の物理化学的性質に類似する物質も含まれており、この
ような不純物を含む粗製のＣＤＰ−コリンから不純物を
除去するには、未だ数多くの課題が残されている。
従来、化学的合成法により製造された粗製のＣＤＰ−コ
リンを精製する方法として、活性炭を用いる方法、強塩
基性イオン交換樹脂を用いる方法、あるいはこれらを併
用する方法が提案されている。
リンを精製する方法として、活性炭を用いる方法、強塩
基性イオン交換樹脂を用いる方法、あるいはこれらを併
用する方法が提案されている。
しかしながら、これら精製法は、いずれもＣＤＰ−コリ
ン、さらには数種の不純物を、まず活性炭やイオン交換
樹脂に吸着させ、続いて吸着されたＣＤＰ−コリンと不
純物とを各種溶離剤を用いて分別溶出させる方法であ
り、このような方法では(i)大量の活性炭あるいはイオ
ン交換樹脂を必要とする、(ii)溶離剤として水のほかに
蟻酸，アンモニア，アルコールなどの各種酸、アルカ
リ、溶剤を必要とする、(iii)溶出液中のＣＤＰ−コリ
ン濃度が低く、濃縮などによるＣＤＰ−コリンの採取に
多量のエネルギーを必要とする、(iv)溶出に用いた酸，
アルカリ，溶剤などの回収に煩雑な操作を必要とするな
どの欠点があるため工業的精製法としては必ずしも有利
な方法とはいえない。
ン、さらには数種の不純物を、まず活性炭やイオン交換
樹脂に吸着させ、続いて吸着されたＣＤＰ−コリンと不
純物とを各種溶離剤を用いて分別溶出させる方法であ
り、このような方法では(i)大量の活性炭あるいはイオ
ン交換樹脂を必要とする、(ii)溶離剤として水のほかに
蟻酸，アンモニア，アルコールなどの各種酸、アルカ
リ、溶剤を必要とする、(iii)溶出液中のＣＤＰ−コリ
ン濃度が低く、濃縮などによるＣＤＰ−コリンの採取に
多量のエネルギーを必要とする、(iv)溶出に用いた酸，
アルカリ，溶剤などの回収に煩雑な操作を必要とするな
どの欠点があるため工業的精製法としては必ずしも有利
な方法とはいえない。
問題点を解決するための手段 本発明者らは、従来技術が有するこのような欠点を克服
すべく鋭意検討の結果、特定の２種のイオン交換樹脂を
使用することにより粗製のＣＤＰ−コリン水溶液から不
純物のみを特異的に吸着除去できることを見い出し、こ
の方法により得られた水溶液から、容易に効率よくＣＤ
Ｐ−コリン１水和物が結晶として製造できることを見い
出した。
すべく鋭意検討の結果、特定の２種のイオン交換樹脂を
使用することにより粗製のＣＤＰ−コリン水溶液から不
純物のみを特異的に吸着除去できることを見い出し、こ
の方法により得られた水溶液から、容易に効率よくＣＤ
Ｐ−コリン１水和物が結晶として製造できることを見い
出した。
すなわち、本発明は化学的合成法により製造された粗製
のシチジン−５′−ジリン酸コリンの水溶液を調製し、
該水溶液を強酸性イオン交換樹脂と次いで弱塩基性イオ
ン交換樹脂と接触させ、得られた水溶液を濃縮した後、
アルコールを加えて晶出させることを特徴とするシチジ
ン−５′−ジリン酸コリン１水和物の製造法である。
のシチジン−５′−ジリン酸コリンの水溶液を調製し、
該水溶液を強酸性イオン交換樹脂と次いで弱塩基性イオ
ン交換樹脂と接触させ、得られた水溶液を濃縮した後、
アルコールを加えて晶出させることを特徴とするシチジ
ン−５′−ジリン酸コリン１水和物の製造法である。
本発明における、化学的合成法によって製造された粗製
のシチジン−５′−ジリン酸コリン(以下、単に粗製の
ＣＤＰ−コリンと略称する。)としては、たとえば５′
−ＣＭＰまたはその反応性誘導体とホスホリルコリンま
たはこれらの塩、あるいは５′−ＣＭＰとホスホリルコ
リンの反応性誘導体またはこれらの塩を反応させること
により製造されたものを挙げることができる。このよう
な原料化合物を用いるＣＤＰ−コリンの製造法は、すで
に公知であり、５′−ＣＭＰの反応性誘導体としては、
たとえば５′−ＣＭＰのアミド類(たとえば遊離のアミ
ド，モノメチルアミド，ジエチルアミド，モルホリドな
ど)、またホスホリルコリンの反応性誘導体としては、
たとえばホスホリルコリンのアミド類(たとえば遊離の
アミド，モノメチルアミド，ジエチルアミド，モルホリ
ドなど)などがある。本反応は、通常非水系の有機溶媒
(たとえばｏ−クロロフエノール，トリクレゾール，ア
セトニトリル，ピリジンなど)中で行なわれる。このよ
うな反応により得られた粗製のＣＤＰ−コリンには未反
応原料あるいはこれに起因する不純物のほかに、副反応
により生成した不純物(たとえばジシチジンピロリン酸
エステル，シチジン−５′−ジリン酸など)が含まれて
いる。
のシチジン−５′−ジリン酸コリン(以下、単に粗製の
ＣＤＰ−コリンと略称する。)としては、たとえば５′
−ＣＭＰまたはその反応性誘導体とホスホリルコリンま
たはこれらの塩、あるいは５′−ＣＭＰとホスホリルコ
リンの反応性誘導体またはこれらの塩を反応させること
により製造されたものを挙げることができる。このよう
な原料化合物を用いるＣＤＰ−コリンの製造法は、すで
に公知であり、５′−ＣＭＰの反応性誘導体としては、
たとえば５′−ＣＭＰのアミド類(たとえば遊離のアミ
ド，モノメチルアミド，ジエチルアミド，モルホリドな
ど)、またホスホリルコリンの反応性誘導体としては、
たとえばホスホリルコリンのアミド類(たとえば遊離の
アミド，モノメチルアミド，ジエチルアミド，モルホリ
ドなど)などがある。本反応は、通常非水系の有機溶媒
(たとえばｏ−クロロフエノール，トリクレゾール，ア
セトニトリル，ピリジンなど)中で行なわれる。このよ
うな反応により得られた粗製のＣＤＰ−コリンには未反
応原料あるいはこれに起因する不純物のほかに、副反応
により生成した不純物(たとえばジシチジンピロリン酸
エステル，シチジン−５′−ジリン酸など)が含まれて
いる。
このような粗製のＣＤＰ−コリンから、その水溶液を調
製するには反応生成物に水を加えればよい。通常ＣＤＰ
−コリンの濃度がほぼ１〜３０重量％(好ましくは、ほ
ぼ３〜１０重量％)になるように水を加える。反応は通
常有機溶媒中で行なわれるが、このような場合には反応
液から有機溶媒を留去して濃縮したのち水を加えて水溶
液とするか、あるいは反応液にエーテルなどを加えたの
ち、水で抽出することにより粗製のＣＤＰ−コリンの水
溶液を得ることができる。
製するには反応生成物に水を加えればよい。通常ＣＤＰ
−コリンの濃度がほぼ１〜３０重量％(好ましくは、ほ
ぼ３〜１０重量％)になるように水を加える。反応は通
常有機溶媒中で行なわれるが、このような場合には反応
液から有機溶媒を留去して濃縮したのち水を加えて水溶
液とするか、あるいは反応液にエーテルなどを加えたの
ち、水で抽出することにより粗製のＣＤＰ−コリンの水
溶液を得ることができる。
本発明では、このようにして得られた水溶液を強酸性イ
オン交換樹脂と弱塩基性イオン交換樹脂との両樹脂に接
触させる。
オン交換樹脂と弱塩基性イオン交換樹脂との両樹脂に接
触させる。
本発明で用いることのできる強酸性イオン交換樹脂とし
ては、−ＳＯ3Ｈを活性基とする強酸型のイオン交換樹
脂を挙げることができ、通常架橋ポリスチレンをスルホ
ン化した樹脂が用いられる。このような強酸性イオン交
換樹脂として、たとえばアンバーライト ＩＲ−１２
４,２００,２５２(オルガノ（株）製)、ダイヤイオン
ＰＫ−２０８,２１６,２２８,ダイヤイオン ＳＫ−
１１０，ダイヤイオン ＨＰＫ−２５,３０,５５(三菱
化成工業（株）製)、ダウエックス ５０ＷＸ８,ＭＳ
Ｃ−１(ダウケミカル社（株）製）などを挙げることが
できる。このような強酸性イオン交換樹脂は、Ｈ型を用
いる。この樹脂の使用量は、不純物の種類あるいはその
量によっても左右されるが、通常処理されるべき粗製の
ＣＤＰ−コリン１００ｇ当たりほぼ５００〜３０００ml
である。
ては、−ＳＯ3Ｈを活性基とする強酸型のイオン交換樹
脂を挙げることができ、通常架橋ポリスチレンをスルホ
ン化した樹脂が用いられる。このような強酸性イオン交
換樹脂として、たとえばアンバーライト ＩＲ−１２
４,２００,２５２(オルガノ（株）製)、ダイヤイオン
ＰＫ−２０８,２１６,２２８,ダイヤイオン ＳＫ−
１１０，ダイヤイオン ＨＰＫ−２５,３０,５５(三菱
化成工業（株）製)、ダウエックス ５０ＷＸ８,ＭＳ
Ｃ−１(ダウケミカル社（株）製）などを挙げることが
できる。このような強酸性イオン交換樹脂は、Ｈ型を用
いる。この樹脂の使用量は、不純物の種類あるいはその
量によっても左右されるが、通常処理されるべき粗製の
ＣＤＰ−コリン１００ｇ当たりほぼ５００〜３０００ml
である。
また、本発明で用いることのできる弱塩基性イオン交換
樹脂としては、第３級アミン，ポリアミンなどを活性基
とする有効pH範囲０〜９のイオン交換樹脂を挙げること
ができる。このような弱塩基性イオン交換樹脂として
は、たとえばアンバーライト ＩＲＡ−６８,９３,９
４，ＩＲ−４５(オルガノ（株）製)、ダイアイオン Ｗ
Ａ−１０,２０,３０)三菱化成工業（株）製)、ダウエッ
クス ＭＷＡ−１,ＷＧＲ(ダウケミカル社（株）製)な
どである。このような弱塩基性イオン交換樹脂はＯＨ型
を用いる。この樹脂の使用量は、不純物の種類あるいは
その量によっても左右されるが、通常処理されるべき粗
製のＣＤＰ−コリンの１００ｇ当たりほぼ２００〜５０
０mlである。これら両樹脂に粗製のＣＤＰ−コリンの水
溶液を接媒させる方式としては、バッチ式と塔式とを挙
げることができる。一般に効率の面からみて塔を用いる
のが好ましい。水溶液との接触は両樹脂のうちのいずれ
を先に行ってもよい。一般には強酸性イオン交換樹脂を
先に接触させる。これら両樹脂は混床式で用いてもよ
い。不純物として無機塩が含まれている場合には、ま
ず、強酸性イオン交換樹脂で処理し、次いで弱塩基性イ
オン交換樹脂で処理するのがよい。塔方式の場合にはＳ
Ｖがほぼ０．１〜５の速度で通液する。接触温度は強酸
性イオン交換樹脂の場合にはＣＤＰ−コリンの加水分解
を防止するため約１０℃以下が好ましく、弱塩基性イオ
ン交換樹脂の場合には室温で行なわれる。
樹脂としては、第３級アミン，ポリアミンなどを活性基
とする有効pH範囲０〜９のイオン交換樹脂を挙げること
ができる。このような弱塩基性イオン交換樹脂として
は、たとえばアンバーライト ＩＲＡ−６８,９３,９
４，ＩＲ−４５(オルガノ（株）製)、ダイアイオン Ｗ
Ａ−１０,２０,３０)三菱化成工業（株）製)、ダウエッ
クス ＭＷＡ−１,ＷＧＲ(ダウケミカル社（株）製)な
どである。このような弱塩基性イオン交換樹脂はＯＨ型
を用いる。この樹脂の使用量は、不純物の種類あるいは
その量によっても左右されるが、通常処理されるべき粗
製のＣＤＰ−コリンの１００ｇ当たりほぼ２００〜５０
０mlである。これら両樹脂に粗製のＣＤＰ−コリンの水
溶液を接媒させる方式としては、バッチ式と塔式とを挙
げることができる。一般に効率の面からみて塔を用いる
のが好ましい。水溶液との接触は両樹脂のうちのいずれ
を先に行ってもよい。一般には強酸性イオン交換樹脂を
先に接触させる。これら両樹脂は混床式で用いてもよ
い。不純物として無機塩が含まれている場合には、ま
ず、強酸性イオン交換樹脂で処理し、次いで弱塩基性イ
オン交換樹脂で処理するのがよい。塔方式の場合にはＳ
Ｖがほぼ０．１〜５の速度で通液する。接触温度は強酸
性イオン交換樹脂の場合にはＣＤＰ−コリンの加水分解
を防止するため約１０℃以下が好ましく、弱塩基性イオ
ン交換樹脂の場合には室温で行なわれる。
接触処理後の樹脂は、常法により再生することができ
る。すなわち強酸性イオン交換樹脂については、たとえ
ば塩酸などの鉱酸の水溶液を用いてＨ型に再生すること
ができる。また弱塩基性イオン交換樹脂については、た
とえば水酸化ナトリウムなどのアルカリの水溶液を用い
てＯＨ型に再生することができる。
る。すなわち強酸性イオン交換樹脂については、たとえ
ば塩酸などの鉱酸の水溶液を用いてＨ型に再生すること
ができる。また弱塩基性イオン交換樹脂については、た
とえば水酸化ナトリウムなどのアルカリの水溶液を用い
てＯＨ型に再生することができる。
粗製のＣＤＰ−コリンの水溶液を両樹脂に接触処理させ
たあとの水溶液は、そのまま濃縮し、濃縮液を常法によ
りアルコールで晶出することにより純品のＣＤＰ−コリ
ン１水和物の結晶を得ることができる。
たあとの水溶液は、そのまま濃縮し、濃縮液を常法によ
りアルコールで晶出することにより純品のＣＤＰ−コリ
ン１水和物の結晶を得ることができる。
なお、粗製の、あるいは精製されたＣＤＰ−コリンの水
溶液中に含まれる不純物は高速液体クロマトグラフィー
(ＵＶ検出またはＲＩ検出)を用いて分析することができ
る。
溶液中に含まれる不純物は高速液体クロマトグラフィー
(ＵＶ検出またはＲＩ検出)を用いて分析することができ
る。
本発明の作用効果 本発明の製造法によれば、粗製のＣＤＰ−コリンに含ま
れる不純物成分のみが選択的に吸着除去されるため、従
来の吸着炭，吸着樹脂による精製法と比べて樹脂の使用
量が大幅に減少し、また水以外の特殊な溶離剤を必要と
しない。このため、極めて高濃度のＣＤＰ−コリンを含
有する精製液を得ることができる。また本精製法では精
製収率が約９７％以上であり、ほぼ定量的である。また
本発明の製造法によれば、各種溶離剤などの回収操作が
不要となるなどの利点を有している。
れる不純物成分のみが選択的に吸着除去されるため、従
来の吸着炭，吸着樹脂による精製法と比べて樹脂の使用
量が大幅に減少し、また水以外の特殊な溶離剤を必要と
しない。このため、極めて高濃度のＣＤＰ−コリンを含
有する精製液を得ることができる。また本精製法では精
製収率が約９７％以上であり、ほぼ定量的である。また
本発明の製造法によれば、各種溶離剤などの回収操作が
不要となるなどの利点を有している。
このように本発明は工業上極めて有用なシチジン−５′
−ジリン酸コリン１水和物の製造法である。
−ジリン酸コリン１水和物の製造法である。
以下実施例を挙げて本発明を更に具体的に説明する。
実施例 １ ３０ｇのＣＤＰ−コリン，７ｇのホスホリルコリンおよ
び１．５ｇの５′−ＣＭＰを含有する粗製のＣＤＰ−コ
リンの水溶液５００mlを強酸性イオン交換樹脂充填塔
[塔内径１．５cmの二重管式クロマト塔にダイヤイオン
ＨＰＫ−２５,４２〜６０メッシュ,Ｈ型４００mlを充
填(樹脂層の高さ２２５cm)したもの、外筒には５℃の冷
水を通じておく]にＳＶが０．５の速度で通液し、通液
後７００mlの水を用いて水洗(ＳＶ＝０．５)した。この
間ＣＤＰ−コリンを含有する合計９５０mlの溶出液を採
液した。高速液体クロマトグラフィー(ＲＩ検出)による
分析の結果、この溶出液中のホスホリルコリンの量は
０．１ｇ(除去率９８．５％)、５′−ＣＭＰの量は１．
５ｇであることを確認した。
び１．５ｇの５′−ＣＭＰを含有する粗製のＣＤＰ−コ
リンの水溶液５００mlを強酸性イオン交換樹脂充填塔
[塔内径１．５cmの二重管式クロマト塔にダイヤイオン
ＨＰＫ−２５,４２〜６０メッシュ,Ｈ型４００mlを充
填(樹脂層の高さ２２５cm)したもの、外筒には５℃の冷
水を通じておく]にＳＶが０．５の速度で通液し、通液
後７００mlの水を用いて水洗(ＳＶ＝０．５)した。この
間ＣＤＰ−コリンを含有する合計９５０mlの溶出液を採
液した。高速液体クロマトグラフィー(ＲＩ検出)による
分析の結果、この溶出液中のホスホリルコリンの量は
０．１ｇ(除去率９８．５％)、５′−ＣＭＰの量は１．
５ｇであることを確認した。
次いでこの溶出液を弱塩基性イオン交換樹脂充填塔[塔
内径１．０cmのクロマト塔にダイヤイオン ＷＡ−３
０,ＯＨ型１００mlを充填したもの(樹脂層の高さ１２７
cm)にＳＶが２．０の速度で通液し、通液後４００mlの
水を用いて水洗(ＳＶ＝２．０)した。この間ＣＤＰ−コ
リンを含有する合計１３００mlの溶出液を採液した。こ
の溶出液を高速液体クロマトグラフィー(ＵＶ検出)によ
って分析したところ、ＣＤＰ−コリン量は２９．４ｇで
あり、５′−ＣＭＰ、その他不純物ピークは検出されな
かった(ＣＤＰ−コリンの回収率９８．０％)。
内径１．０cmのクロマト塔にダイヤイオン ＷＡ−３
０,ＯＨ型１００mlを充填したもの(樹脂層の高さ１２７
cm)にＳＶが２．０の速度で通液し、通液後４００mlの
水を用いて水洗(ＳＶ＝２．０)した。この間ＣＤＰ−コ
リンを含有する合計１３００mlの溶出液を採液した。こ
の溶出液を高速液体クロマトグラフィー(ＵＶ検出)によ
って分析したところ、ＣＤＰ−コリン量は２９．４ｇで
あり、５′−ＣＭＰ、その他不純物ピークは検出されな
かった(ＣＤＰ−コリンの回収率９８．０％)。
実施例 ２ ６．５Ｗ／Ｖ％のＣＤＰ−コリン,１．４Ｗ／Ｖ％のホ
スホリルコリン,０．２Ｗ／Ｖ％の５′−ＣＭＰ,１．０
Ｗ／Ｖ％の５′−ＣＭＰモルホリデート,モルホリン,ジ
シチジンピロリン酸エステル,４−モルホリン−Ｎ,Ｎ′
−ジシクロヘキシルカルボジイミド,遊離リン酸,その他
の不純物を含有する粗製のＣＤＰ−コリンの水溶液400m
lを強酸性イオン交換樹脂充填塔[塔内径１．５cmの二重
管式クロマト塔へダイヤイオン ＨＰＫ−３０,４２
〜６０メッシュ,Ｈ型４００mlを充填(樹脂層の高さ２２
５cm)したもの、外筒には５℃の冷水を通じておく]にＳ
Ｖが０．５の速度で通液し、通液後６００mlの水を用い
て水洗(ＳＶ＝０．５)した。この間ＣＤＰ−コリンを含
有する合計７２０mlの溶出液を採液した。
スホリルコリン,０．２Ｗ／Ｖ％の５′−ＣＭＰ,１．０
Ｗ／Ｖ％の５′−ＣＭＰモルホリデート,モルホリン,ジ
シチジンピロリン酸エステル,４−モルホリン−Ｎ,Ｎ′
−ジシクロヘキシルカルボジイミド,遊離リン酸,その他
の不純物を含有する粗製のＣＤＰ−コリンの水溶液400m
lを強酸性イオン交換樹脂充填塔[塔内径１．５cmの二重
管式クロマト塔へダイヤイオン ＨＰＫ−３０,４２
〜６０メッシュ,Ｈ型４００mlを充填(樹脂層の高さ２２
５cm)したもの、外筒には５℃の冷水を通じておく]にＳ
Ｖが０．５の速度で通液し、通液後６００mlの水を用い
て水洗(ＳＶ＝０．５)した。この間ＣＤＰ−コリンを含
有する合計７２０mlの溶出液を採液した。
次いでこの溶出液を弱塩基性イオン交換樹脂充填塔[塔
内径１．０cmのクロマト塔にアンバーライトＩＲＡ−９
４Ｓ,ＯＨ型６０mlを充填(樹脂層の高さ７５cm)したも
の]にＳＶが２．０の速度で通液し、通液後４２０mlの
水を用いて水洗(SV＝2.0)した。この間ＣＤＰ−コリン
を含有する合計１１００mlの溶出液を採液した。
内径１．０cmのクロマト塔にアンバーライトＩＲＡ−９
４Ｓ,ＯＨ型６０mlを充填(樹脂層の高さ７５cm)したも
の]にＳＶが２．０の速度で通液し、通液後４２０mlの
水を用いて水洗(SV＝2.0)した。この間ＣＤＰ−コリン
を含有する合計１１００mlの溶出液を採液した。
この溶出液を高速液体クロマトグラフィー(ＵＶ検出)に
よって分析したところ２５．５ｇのＣＤＰ−コリンが確
認され、不純物ピークは認められなかった。
よって分析したところ２５．５ｇのＣＤＰ−コリンが確
認され、不純物ピークは認められなかった。
このＣＤＰ−コリン含有の水溶液を濃縮し、濃縮液をア
ルコールで晶出することにより純品のＣＤＰ−コリン１
水和物の結晶が得られた。この結晶の元素分析値は次の
通りであった。
ルコールで晶出することにより純品のＣＤＰ−コリン１
水和物の結晶が得られた。この結晶の元素分析値は次の
通りであった。
実施例 ３ 遊離のホスホリルコリン１２ｇとシチジン−５′−リン
酸アミドのジシクロヘキシルグアニジウム塩２８ｇとを
オルトクロロフェノール５００mlに溶解させ１００℃で
１６時間反応させた。反応終了後オルトクロロフェノー
ルを減圧で殆んど濃縮留去した。この濃縮液にエーテル
５００mlを加えこれを水２５０mlで２回抽出した。両抽
出液を合しエーテル１００mlで洗い水層に含まれるエー
テルを減圧留去し液量を４００mlとした。このようにし
て得られた粗製のＣＤＰ−コリンの水溶液を実施例２で
用いたのと同じ２種のイオン交換樹脂充填塔を用いて同
じ条件下で処理し、得られたＣＤＰ−コリン水溶液を高
速液体クロマトグラフィーによって分析したところ不純
物のピークは全く認められなかった。
酸アミドのジシクロヘキシルグアニジウム塩２８ｇとを
オルトクロロフェノール５００mlに溶解させ１００℃で
１６時間反応させた。反応終了後オルトクロロフェノー
ルを減圧で殆んど濃縮留去した。この濃縮液にエーテル
５００mlを加えこれを水２５０mlで２回抽出した。両抽
出液を合しエーテル１００mlで洗い水層に含まれるエー
テルを減圧留去し液量を４００mlとした。このようにし
て得られた粗製のＣＤＰ−コリンの水溶液を実施例２で
用いたのと同じ２種のイオン交換樹脂充填塔を用いて同
じ条件下で処理し、得られたＣＤＰ−コリン水溶液を高
速液体クロマトグラフィーによって分析したところ不純
物のピークは全く認められなかった。
この水溶液を濃縮し、濃縮液をアルコールで晶出するこ
とにより純品のＣＤＰ−コリン１水和物の結晶１３．９
ｇを得た。
とにより純品のＣＤＰ−コリン１水和物の結晶１３．９
ｇを得た。
第１図は実施例２で用いた粗製のＣＤＰ−コリンの水溶
液の高速液体クロマトグラフィー(ＵＶ検出)による分析
チャートを示す。第２図は、強酸性イオン交換樹脂と接
触させて得られたＣＤＰ−コリンを含有する溶出液の高
速液体クロマトグラフィー(ＵＶ検出)による分析チャー
トを示す。 第３図は、さらに弱塩基性イオン交換樹脂と接触させる
ことにより得られたＣＤＰ−コリンを含有する精製液の
高速液体クロマトグラフィー(ＵＶ検出)による分析チャ
ートを示す。Ｐ0はＣＤＰ−コリンのピークを示し、Ｐ1
〜Ｐ9はいずれも不純物のピークを示す。
液の高速液体クロマトグラフィー(ＵＶ検出)による分析
チャートを示す。第２図は、強酸性イオン交換樹脂と接
触させて得られたＣＤＰ−コリンを含有する溶出液の高
速液体クロマトグラフィー(ＵＶ検出)による分析チャー
トを示す。 第３図は、さらに弱塩基性イオン交換樹脂と接触させる
ことにより得られたＣＤＰ−コリンを含有する精製液の
高速液体クロマトグラフィー(ＵＶ検出)による分析チャ
ートを示す。Ｐ0はＣＤＰ−コリンのピークを示し、Ｐ1
〜Ｐ9はいずれも不純物のピークを示す。
Claims (1)
- 【請求項１】化学的合成法により製造された粗製のシチ
ジン−５′−ジリン酸コリンの水溶液を調製し、該水溶
液を強酸性イオン交換樹脂と次いで弱塩基性イオン交換
樹脂と接触させ、得られた水溶液を濃縮した後、アルコ
ールを加えて晶出させることを特徴とするシチジン−
５′−ジリン酸コリン１水和物の製造法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP60154930A JPH0631306B2 (ja) | 1985-07-12 | 1985-07-12 | シチジン―５′―ジリン酸コリン１水和物結晶の製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP60154930A JPH0631306B2 (ja) | 1985-07-12 | 1985-07-12 | シチジン―５′―ジリン酸コリン１水和物結晶の製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6216497A JPS6216497A (ja) | 1987-01-24 |
| JPH0631306B2 true JPH0631306B2 (ja) | 1994-04-27 |
Family
ID=15595050
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP60154930A Expired - Fee Related JPH0631306B2 (ja) | 1985-07-12 | 1985-07-12 | シチジン―５′―ジリン酸コリン１水和物結晶の製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0631306B2 (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2007018259A1 (ja) | 2005-08-10 | 2007-02-15 | Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. | シチジンジリン酸コリンの精製方法 |
| WO2023027178A1 (ja) | 2021-08-26 | 2023-03-02 | 協和発酵バイオ株式会社 | シチジン－５'－ジリン酸化合物の製造方法 |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1551778A (zh) | 2001-09-05 | 2004-12-01 | ɽ����ʽ���� | 用于糖尿病神经病变的药物组合物 |
| CN109836468A (zh) * | 2017-11-24 | 2019-06-04 | 苏州华赛生物工程技术有限公司 | 一种从微生物发酵液中分离纯化胞二磷胆碱钠的方法 |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5246314B2 (ja) * | 1972-04-10 | 1977-11-24 |
-
1985
- 1985-07-12 JP JP60154930A patent/JPH0631306B2/ja not_active Expired - Fee Related
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2007018259A1 (ja) | 2005-08-10 | 2007-02-15 | Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. | シチジンジリン酸コリンの精製方法 |
| US8303820B2 (en) | 2005-08-10 | 2012-11-06 | Kyowa Hakko Bio Co., Ltd. | Method of purifying cytidine diphosphate choline |
| KR101311571B1 (ko) * | 2005-08-10 | 2013-09-26 | 교와 핫꼬 바이오 가부시키가이샤 | 시티딘이인산 콜린의 정제 방법 |
| WO2023027178A1 (ja) | 2021-08-26 | 2023-03-02 | 協和発酵バイオ株式会社 | シチジン－５'－ジリン酸化合物の製造方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS6216497A (ja) | 1987-01-24 |
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |