JPH06327488A

JPH06327488A - 光学活性７−アミジノナフタレン誘導体の製造法

Info

Publication number: JPH06327488A
Application number: JP11862293A
Authority: JP
Inventors: Akihiko Miyadera; 彰彦宮寺; Hisayoshi Nishio; 久義西尾
Original assignee: Daiichi Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Daiichi Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 1993-05-20
Filing date: 1993-05-20
Publication date: 1994-11-29
Anticipated expiration: 2018-03-24
Also published as: JP3388803B2

Abstract

(57)【要約】【構成】アルキル−２−〔４−〔〔（３Ｓ）−１−ア
セトイミドイル−３−ピロリジニル〕オキシ〕フェニ
ル〕−３−〔７−アミジノ−２−ナフチル〕プロピオネ
ート又はその塩を、微生物、その培養液及びこれらの分
画物からなる群から選ばれる１種又は２種以上で処理す
る光学活性２−〔４−〔〔（３Ｓ）−１−アセトイミド
イル−３−ピロリジニル〕オキシ〕フェニル〕−３−
〔７−アミジノ−２−ナフチル〕プロピオン酸又はその
塩の製造法。【効果】血液凝固抑制剤又は血栓若しくは塞栓の予防
・治療剤として有用な目的化合物を穏和な条件下におい
て簡便な方法で、容易に高純度で得ることができる。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、血液凝固抑制剤又は血
栓若しくは塞栓の予防・治療剤として有用な、光学活性
２−〔４−〔〔（３Ｓ）−１−アセトイミドイル−３−
ピロリジニル〕オキシ〕フェニル〕−３−〔７−アミジ
ノ−２−ナフチル〕プロピオン酸又はその塩の製造法に
関する。

【０００２】

【従来の技術及び発明が解決しようとする課題】従来、
血栓形成抑制剤として抗トロンビン剤の開発が行われて
きたが、この抗トロンビン剤は抗凝固作用とともにトロ
ンビンによる血小板の凝集作用も併せて抑制することか
ら出血傾向をきたす危険のあることが知られており、凝
固能のコントロールを容易に行えるものではなかった。
そこで、トロンビン阻害作用以外の作用機序に基づく抗
凝固剤の開発が行われ、本出願人は活性化血液凝固第Ｘ
因子（以下ＦＸａと略す）を可逆的に阻害して強力な抗
凝固作用を示す芳香族アミジン誘導体又はその塩が、良
好な水溶性を有し、経口投与においても強くＦＸａを特
異的かつ可逆的に阻害し強力な抗凝固作用を示し、血栓
・塞栓に基づく種々の疾病の予防並びに治療薬として有
用であることを見出し、先に特許出願した（特願平４−
２９２８９２号）。

【０００３】これらの芳香族アミジン誘導体又はその塩
のうち、光学活性２−〔４−〔〔（３Ｓ）−１−アセト
イミドイル−３−ピロリジニル〕オキシ〕フェニル〕−
３−〔７−アミジノ−２−ナフチル〕プロピオン酸又は
その塩は、エチル（２ＲＳ）−２−〔４−〔〔（３Ｓ）
−１−アセトイミドイル−３−ピロリジニル〕オキシ〕
フェニル〕−３−〔７−アミジノ−２−ナフチル〕プロ
ピオネート又はその塩の前駆体であるエチル（２ＲＳ）
−２−〔４−〔〔（３Ｓ）−１−ｔｅｒｔ−ブトキシカ
ルボニル−３−ピロリジニル〕オキシ〕フェニル〕−３
−〔７−シアノ−２−ナフチル〕〕プロピオネートより
分別結晶化により分割し、それらをエチル２−〔４−
〔〔（３Ｓ）−１−アセトイミドイル−３−ピロリジニ
ル〕オキシ〕フェニル〕−３−〔７−アミジノ−２−ナ
フチル〕プロピオネート又はその塩に誘導した後、塩酸
によるエステル加水分解を行うことにより製造される。

【０００４】しかしながら、これらの方法では、分別結
晶化の操作が繁雑であり、工業的に有利に目的化合物を
得ることができないという問題があった。従って、光学
活性２−〔４−〔〔（３Ｓ）−１−アセトイミドイル−
３−ピロリジニル〕オキシ〕フェニル〕−３−〔７−ア
ミジノ−２−ナフチル〕プロピオン酸又はその塩を穏和
な条件下で簡便に得る方法が望まれていた。

【０００５】

【課題を解決するための手段】かかる実情において、本
発明者らは鋭意研究を行った結果、アルキル−２−〔４
−〔〔（３Ｓ）−１−アセトイミドイル−３−ピロリジ
ニル〕オキシ〕フェニル〕−３−〔７−アミジノ−２−
ナフチル〕プロピオネート又はその塩を、微生物、その
培養液及びこれらの分画物からなる群から選ばれる１種
又は２種以上で処理してエステル加水分解すれば、光学
活性２−〔４−〔〔（３Ｓ）−１−アセトイミドイル−
３−ピロリジニル〕オキシ〕フェニル〕−３−〔７−ア
ミジノ−２−ナフチル〕プロピオン酸又はその塩が穏和
な条件下で簡便に得られることを見出し、本発明を完成
した。

【０００６】すなわち、本発明は、一般式（２）

【０００７】

【化７】

【０００８】（式中、Ｒは炭素数１〜６の低級アルキル
基を示す）で表わされるアルキル−２−〔４−〔〔（３
Ｓ）−１−アセトイミドイル−３−ピロリジニル〕オキ
シ〕フェニル〕−３−〔７−アミジノ−２−ナフチル〕
プロピオネート又はその塩を、微生物、その培養液及び
これらの分画物からなる群から選ばれる１種又は２種以
上で処理することを特徴とする一般式（１）

【０００９】

【化８】

【００１０】で表わされる光学活性２−〔４−〔〔（３
Ｓ）−１−アセトイミドイル−３−ピロリジニル〕オキ
シ〕フェニル〕−３−〔７−アミジノ−２−ナフチル〕
プロピオン酸又はその塩の製造法を提供するものであ
る。

【００１１】本発明において、原料化合物として用いら
れるアルキル−２−〔４−〔〔（３Ｓ）−１−アセトイ
ミドイル−３−ピロリジニル〕オキシ〕フェニル〕−３
−〔７−アミジノ−２−ナフチル〕プロピオネート又は
その塩は、前記一般式（２）で表わされるものであり、
例えば特願平４−２９２８９２号公報に記載の方法によ
り製造することができる。一般式（２）中、Ｒで示され
る炭素数１〜６のアルキル基としては、例えばメチル
基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル
基、ペンチル基、ヘキシル基等が挙げられ、特にエチル
基が好ましい。

【００１２】これらの原料化合物は、０．１〜１０重量
％、特に０．１〜１．０％の濃度のものを用いるのが好
ましい。

【００１３】また、本発明で用いられる微生物、その培
養液及びこれらの分画物としては、酵母のデバイロマイ
セス属、並びに細菌のブレビバクテリウム属、シトファ
ーガ属、スフィンゴバクテリウム属、並びに糸状菌アス
ペルギルス属、シラシネラ属、クアバラリア属、モルチ
エレラ属に属する微生物、その培養液及びこれらの分画
物等が使用される。これらの微生物のうち、デバイロマ
イセス属の好ましい種としてはデバイロマイセススピ
ーシーズ；ブレビバクテリウム属の好ましい種としては
ブレビバクテリウムリネンス；シトファーガ属の好ま
しい種としてはシトファーガアーベンシコラ；スフィ
ンゴバクテリウム属の好ましい種としてはスフィンゴバ
クテリウムスピリチボルム；アスペルギルス属の好ま
しい種としてはアスペルギルスフミゲタス、アスペル
ギルスユニラテラリス、アスペルギルスニギア、ア
スペルギルスウサミ；シラシネラ属の好ましい種とし
てはシラシネラムコロイデス；クアバラリア属の好ま
しい種としてはクアバラリアトリフォリ；モルチネラ
属の好ましい種としてはモルチネライサベリナを挙げ
ることができる。

【００１４】微生物の培養液としては、当該微生物を適
当な培地で培養したものを挙げることができる。また、
分画物としては微生物の菌体又は培養液を水又は適当な
緩衝液で抽出したもの；液体培地で培養を行った場合に
は、培養物の濾液、該当抽出液又は濾液に硫安又はアル
コールを加えることにより得られる沈澱物；該当抽出液
又は濾液をゲル濾過、限外濾過、イオン交換クロマトグ
ラフィー等を用いて分画したもの；菌体の破砕物；及び
該当破砕物を上記の分画方法を用いて分画したもの等を
挙げることができる。培地には、使用微生物が資化しう
る炭素源、窒素源、無機塩類及び微量の栄養分が含まれ
る。すなわち、炭素源としては、グルコース、マルトー
ス、デキストロース等の炭水化物；窒素源としては、酵
母エキス、コーンスティープリカー、ペプトン、肉エキ
ス、混合アミノ酸パウダーなどの天然有機窒素源；無機
塩としてはマグネシウム、鉄、銅、マンガン、カリウ
ム、ナトリウムなどの塩が適宜用いられる。更に、必要
に応じて微生物の生育に必要な各種有機物、無機物、あ
るいは通常用いられている消泡剤などを添加することが
できる。

【００１５】これらの微生物の菌体、培養液、分画物の
使用量は特に制限されないが、原料化合物に対して１〜
３０重量倍であるのが好ましい。

【００１６】なお、微生物として糸状菌を用いた場合に
は、原料のラセミ体のうち（＋）−体が選択的に加水分
解され、（＋）−２−〔４−〔〔（３Ｓ）−１−アセト
イミドイル−３−ピロリジニル〕オキシ〕フェニル〕−
３−〔７−アミジノ−２−ナフチル〕プロピオン酸が有
利に得られる。一方、微生物として酵母又は細菌を用い
た場合には（−）−体が選択的に加水分解され、（−）
−２−〔４−〔〔（３Ｓ）−１−アセトイミドイル−３
−ピロリジニル〕オキシ〕フェニル〕−３−〔７−アミ
ジノ−２−ナフチル〕プロピオン酸が有利に得られる。
従って、微生物を選択することにより、（＋）−体又は
（−）−体を作り分けることが可能である。

【００１７】反応は、原料化合物溶液と微生物の菌体等
を、１０〜５０℃、好ましくは２０〜４０℃において、
pH４〜８、好ましくは５〜７の範囲で３〜４８時間、好
ましくは７２時間程度攪拌することにより行われる。反
応終了後、反応液を濾過、減圧濃縮、限外濾過、カラム
クロマトグラフィー等の公知の手段を行うことにより、
高純度の目的化合物を単離することができる。

【００１８】このようにして得られる目的化合物は、更
に、通常の方法により医薬的に許容し得る塩にすること
ができる。かかる塩としては、例えば塩酸塩、臭化水素
酸塩、ヨウ化水素酸塩、燐酸塩、硝酸塩、硫酸塩等の鉱
酸塩類；メタンスルホン酸塩、２−ヒドロキシエタンス
ルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩等の有機スルホ
ン酸塩類；並びに酢酸塩、プロピオン酸塩、シュウ酸
塩、マロン酸塩、コハク酸塩、グルタル酸塩、アジピン
酸塩、酒石酸塩、マレイン酸塩、リンゴ酸塩、マンデル
酸塩等の有機カルボン酸塩類が挙げられる。

【００１９】

【発明の効果】本発明によれば、血液凝固抑制剤又は血
栓若しくは塞栓の予防・治療剤として有用な、光学活性
２−〔４−〔〔（３Ｓ）−１−アセトイミドイル−３−
ピロリジニル〕オキシ〕フェニル〕−３−〔７−アミジ
ノ−２−ナフチル〕プロピオン酸又はその塩を穏和な条
件下において簡便な方法で、容易に高純度で得ることが
でき、工業的にも有利である。

【００２０】

【実施例】次に、実施例を挙げて本発明を更に説明する
が、本発明はこれら実施例に限定されるものではない。

【００２１】参考例１グルコースペプトン液体培地８５０mlに、糸状菌（アス
ペルギルスフミゲタスＩＦＯ−８８６６；財団法人
発酵研究所から購入）を接種し、３０℃で３日間振盪培
養した。この培養物の糸状菌体と、培養液を反応に用い
た。

【００２２】実施例１（＋）−２−〔４−〔〔（３Ｓ）−１−アセトイミドイ
ル−３−ピロリジニル〕オキシ〕フェニル〕−３−〔７
−アミジノ−２−ナフチル〕プロピオン酸塩酸塩の製
造：エチル（２ＲＳ）−２−〔４−〔〔（３Ｓ）−１−
アセトイミドイル−３−ピロリジニル〕オキシ〕フェニ
ル〕−３−〔７−アミジノ−２−ナフチル〕プロピオネ
ート塩酸塩のラセミ体８５０mgを、参考例１の培養物に
溶解し、３０℃で７２時間振盪培養した。反応終了後、
反応液を高速液体クロマトグラフィーで分析したとこ
ろ、（＋）−２−〔４−〔〔（３Ｓ）−１−アセトイミ
ドイル−３−ピロリジニル〕オキシ〕フェニル〕−３−
〔７−アミジノ−２−ナフチル〕プロピオン酸の生成率
は４９％であった。得られた反応液を、濾過し、濾液を
減圧下濃縮し、吸着樹脂により精製し、目的化合物を含
む分画を減圧下濃縮した。得られた残渣に１Ｎ−ＨＣｌ
５０mlを加え、塩酸塩化した後、吸着樹脂により脱塩
し、減圧下濃縮し、含水エタノールより結晶化し、目的
の化合物（＋）−２−〔４−〔〔（３Ｓ）−１−アセト
イミドイル−３−ピロリジニル〕オキシ〕フェニル〕−
３−〔７−アミジノ−２−ナフチル〕プロピオン酸塩酸
塩を５１９mg得た。得られた目的化合物の機器分析デー
タは、以下のとおりであった。また、このものを光学異
性体分離クロマトグラフィーにより分析したところ、化
合物の光学純度は９９％e.e.であった。

【００２３】〔α〕_D ²⁴＝＋５７．４°（ｃ＝１．００
０，Ｈ₂Ｏ）（４０℃で溶解、同温３０分加温の後測
定）¹ Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）δ：２．２０−２．３５
（２Ｈ，ｍ），２．２９（１．５Ｈ，ｓ），２．３２
（１．５Ｈ，ｓ），２．８０−２．９５（１Ｈ，ｍ），
３．３０−４．００（６Ｈ，ｍ），５．１６（０．５
Ｈ，ｂｒ），５．２２（０．５Ｈ，ｂｒ），６．９０−
７．００（２Ｈ，ｍ），７．４５−７．５１（２Ｈ，
ｍ），７．５７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），７．６
６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），７．９３（１Ｈ，
ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），７．９７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．
３Ｈｚ），８．１１（１Ｈ，ｓ），８．６８（１Ｈ，ｂ
ｒ），８．７０−９．３０（ｂｒ），１１．５０−１
２．２０（ｂｒ）Ｘ線分析より本化合物は（＋）−２−〔４−〔（３Ｓ）
−１−アセトイミドイル−３−ピロリジニル〕オキシ〕
フェニル〕−３−〔７−アミジノ−２−ナフチル〕プロ
ピオン酸であると判断された。

【００２４】実施例２（＋）−２−〔４−〔〔（３Ｓ）−１−アセトイミドイ
ル−３−ピロリジニル〕オキシ〕フェニル〕−３−〔７
−アミジノ−２−ナフチル〕プロピオン酸塩酸塩の製
造：表１に示す糸状菌とその培養液を参考例１と同様の
操作により得、実施例１と同様にして反応を行った。反
応終了液を高速液体クロマトグラフィーにて分析した結
果を表１に示す。

【００２５】

【表１】

【００２６】参考例２グルコースペプトン液体培地８５０mlに、酵母（デバイ
ロマイセススピーシーズＨＵＴ−７０６０；広島大
学工学部発酵工学教室から購入）を接種し、３０℃で３
日間振盪培養した。この培養物の酵母と培養液を反応に
用いた。

【００２７】実施例３（−）−２−〔４−〔〔（３Ｓ）−１−アセトイミドイ
ル−３−ピロリジニル〕オキシ〕フェニル〕−３−〔７
−アミジノ−２−ナフチル〕プロピオン酸塩酸塩の製
造：参考例２で得られた培養物に、実施例１と同様の操
作によりエチル（２ＲＳ）−２−〔４−〔〔（３Ｓ）−
１−アセトイミドイル−３−ピロリジニル〕オキシ〕フ
ェニル〕−３−〔７−アミジノ−２−ナフチル〕プロピ
オネート塩酸塩８５０mgを反応させた。反応終了液を高
速液体クロマトグラフィーにて分析したところ、水解体
の生成率は４６．６％であった。反応終了液を実施例１
と同様に精製し、（−）−２−〔４−〔〔（３Ｓ）−１
−アセトイミドイル−３−ピロリジニル〕オキシ〕フェ
ニル〕−３−〔７−アミジノ−２−ナフチル〕プロピオ
ン酸塩酸塩を４９４mg得た。得られた目的化合物の機器
分析データは、以下のとおりであった。また、このもの
を光学異性体分離クロマトグラフィーにより分析したと
ころ、化合物の光学純度は９８％e.e.であった。

【００２８】¹Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）δ：２．０
５−２．４（２Ｈ，ｍ），２．２８（１．５Ｈ，ｓ），
２．３１（１．５Ｈ，ｓ），３．１０−３．３０（１
Ｈ，ｍ），３．４０−４．１０（６Ｈ，ｍ），５．１３
（０．５Ｈ，ｂｒ），５．２０（０．５Ｈ，ｂｒ），
６．９０−７．００（２Ｈ，ｍ），７．３５−７．４０
（２Ｈ，ｍ），７．６０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈ
ｚ），７．８１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），７．８
４（１Ｈ，ｓ），７．９４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈ
ｚ），８．０６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），８．４
２（１Ｈ，ｓ），８．５５（０．５Ｈ，ｂｒ），８．６
４（０．５Ｈ，ｂｒ），９．３０−９．７０（５Ｈ）Ｈ
ＰＬＣカラム：Ｄ−ペニシラミンを光学活性部位とす
る配位子交換型カラム（ＳＵＭＩＣＨＩＲＡＬＯＡ−
５０００４．６φ×１５０mm 住化分析センター）溶媒：２mM 硫酸銅水溶液：アセトニトリル＝８５：
１５（ｖ／ｖ）流速：１ml／分カラム温度：６０℃ 保持時間：３８．１４分

【００２９】参考例３普通ブイヨン液体培地８５０mlに、細菌（ブレビバクテ
リウムリネンスＪＣＭ−１３２７；理化学研究所か
ら購入）を接種し、３０℃で３日間振盪培養した。この
培養物の細菌菌体と培養液を反応に用いた。

【００３０】実施例４（−）−２−〔４−〔〔（３Ｓ）−１−アセトイミドイ
ル−３−ピロリジニル〕オキシ〕フェニル〕−３−〔７
−アミジノ−２−ナフチル〕プロピオン酸塩酸塩の製
造：参考例３で得られた培養物に、実施例１と同様の操
作によりエチル（２ＲＳ）−２−〔４−〔〔（３Ｓ）−
１−アセトイミドイル−３−ピロリジニル〕オキシ〕フ
ェニル〕−３−〔７−アミジノ−２−ナフチル〕プロピ
オネート塩酸塩８５０mgを反応させた。反応終了液を高
速液体クロマトグラフィーにて分析したところ、水解体
の生成率は４１．２％であった。反応終了液を実施例１
と同様に精製し、（−）−２−〔４−〔〔（３Ｓ）−１
−アセトイミドイル−３−ピロリジニル〕オキシ〕フェ
ニル〕−３−〔７−アミジノ−２−ナフチル〕プロピオ
ン酸塩酸塩を４３６mg得た。得られた目的化合物の機器
分析データは、実施例３のそれと完全に一致した。ま
た、実施例３と同様の分析条件により、このものを光学
異性体分離クロマトグラフィーにより分析したところ、
化合物の光学純度は９４％e.e.であった。

【００３１】実施例５（−）−２−〔４−〔〔（３Ｓ）−１−アセトイミドイ
ル−３−ピロリジニル〕オキシ〕フェニル〕−３−〔７
−アミジノ−２−ナフチル〕プロピオン酸塩酸塩の製
造：表２に示す細菌菌体と培養液を参考例３と同様の操
作により得、実施例３と同様にして反応を行った。反応
終了液を高速液体クロマトグラフィーにて分析した結果
を表２に示す。

【００３２】

【表２】

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁵ 識別記号庁内整理番号ＦＩ技術表示箇所 (Ｃ１２Ｐ 17/10 Ｃ１２Ｒ 1:13） (Ｃ１２Ｐ 17/10 Ｃ１２Ｒ 1:01） (Ｃ１２Ｐ 17/10 Ｃ１２Ｒ 1:16）

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】一般式（２）【化１】（式中、Ｒは炭素数１〜６の低級アルキル基を示す）で
表わされるアルキル−２−〔４−〔〔（３Ｓ）−１−ア
セトイミドイル−３−ピロリジニル〕オキシ〕フェニ
ル〕−３−〔７−アミジノ−２−ナフチル〕プロピオネ
ート又はその塩を、微生物、その培養液及びこれらの分
画物からなる群から選ばれる１種又は２種以上で処理す
ることを特徴とする一般式（１）【化２】で表わされる光学活性２−〔４−〔〔（３Ｓ）−１−ア
セトイミドイル−３−ピロリジニル〕オキシ〕フェニ
ル〕−３−〔７−アミジノ−２−ナフチル〕プロピオン
酸又はその塩の製造法。
【請求項２】一般式（２）【化３】（式中、Ｒは炭素数１〜６の低級アルキル基を示す）で
表わされるアルキル−２−〔４−〔〔（３Ｓ）−１−ア
セトイミドイル−３−ピロリジニル〕オキシ〕フェニ
ル〕−３−〔７−アミジノ−２−ナフチル〕プロピオネ
ート又はその塩を、糸状菌、その培養液及びこれらの分
画物からなる群から選ばれる１種又は２種以上で処理す
ることを特徴とする一般式（３）【化４】で表わされる光学活性（＋）−２−〔４−〔〔（３Ｓ）
−１−アセトイミドイル−３−ピロリジニル〕オキシ〕
フェニル〕−３−〔７−アミジノ−２−ナフチル〕プロ
ピオン酸又はその塩の製造法。
【請求項３】一般式（２）【化５】（式中、Ｒは炭素数１〜６の低級アルキル基を示す）で
表わされるアルキル−２−〔４−〔〔（３Ｓ）−１−ア
セトイミドイル−３−ピロリジニル〕オキシ〕フェニ
ル〕−３−〔７−アミジノ−２−ナフチル〕プロピオネ
ート又はその塩を、酵母、細菌、これらの培養液及びこ
れらの分画物からなる群から選ばれる１種又は２種以上
で処理することを特徴とする一般式（４）【化６】で表わされる光学活性（−）−２−〔４−〔〔（３Ｓ）
−１−アセトイミドイル−３−ピロリジニル〕オキシ〕
フェニル〕−３−〔７−アミジノ−２−ナフチル〕プロ
ピオン酸又はその塩の製造法。