JPH06505978A - 芳香族エステルまたはアミドを含有する抗凝集性ペプチド - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 芳香族エステルまたはアミドを含有する抗凝集性ペプチド発明の分野 本発明は、血小板凝集を阻害する新規ペプチド、該ペプチドを含有する医薬組成 物および該ペプチドの使用方法に関する。特に、線維素溶解剤と組み合わせた本 発明のペプチドの使用方法が記載される。

発明の背景 血栓は、凝固カスケードを始めるプロセスの結果である。それはフィブリンの高 分子網に巻き込まれる血小板の凝集からなる。このプロセスは、通常、組織損傷 の結果として始められ、血管中の血流を遅くするかまたは妨害する効果を有する 。アテローム硬化性動脈プラーク、血管の炎症（静脈炎）および敗血症のような 組織損傷に直接関係しない病因学的因子もまた血栓形成を開始する。血栓の不適 当な形成、およびその結果として生じる血流の減少が発作、肺動脈塞栓症および 心臓疾患のような病理学的結果を有することがある場合もある。

血小板は、血栓形成において重要な役割を果たす。現在の抗血栓性治療法は、プ ロスタサイクリン類似体、シクロオキシゲナーゼ阻害剤、トロンボキサン合成阻 害剤およびトロンボキサン受容体拮抗剤のような血小板／内皮細胞アラキドン酸 塩−プロスタグランジン系を修飾する薬物；ならびにヘパリンのような抗凝集剤 を使用する。これらの薬物は、血小板凝集の２つの区別できる段階のうちの一方 または両方を阻害する。ＡＤＰ　（アデノシンニリン酸）、コラーゲン、エピネ フリンまたはトロンビンのような化学的刺激物に対する応答である第１次期は、 血小板の初期の活性化を生じる。この後に、血小板自体によって開始され、カリ 、トロンボキサンＡ２　（ＴＸＡ２）合成および血小板貯蔵顆粒からのさらなる ＡＤＰの放出によって特徴付けられる第二次期が続き、これはさらに血小板を活 性化させる。

プロスタグランジンＩ　＊　（Ｐ　Ｇ　Ｉ　ｔ）とも呼ばれるプロスタサイクリ ンおよび安定なＰＣＩｔ類似体は、血小板凝集の第一次期および第二次期を共に 阻害する。

しかしながら、かかる類似体の使用は、血圧の望ましくない変化を伴った。アイ ケン（Ａｉｋｅｎ）ら、プロスタグランジン系（Ｐ　ｒｏｓｔａｇｌａｎｄｉｎ ｓ）、１９．６２９−４３　（１９８０）を参照。

シクロオキシゲナーゼ阻害剤およびトロンボキサンシンセターゼ阻害剤は、ＴＸ Ａ４の生産をブロックするように作用する。ＴｘＡ２拮抗剤は、ＴｘＡ、受容体 を結合することによってＴｘＡ、の作用をブロックする。これらの療法は、血小 板活性化の第２段階にだけ作用する。シクロオキシゲーゼ阻害剤の使用は、潰瘍 発生およびプロスタサイクリン合成に対する副作用を伴った。

ヘパリンは、トロンビンによるフィブリノーゲンの活性を予防し、これによって 、トロンビンによるＧＰＩＩｂ−Ｔｌｌａ受容体の活性化を予防する。これは、 血小板凝集の第一次期だけを阻害し、コラーゲン、ＡＤＰおよびエピネフリンの ような他の手段による血小板の活性化への作用をあまり有していない。

シクロオキシゲナーゼ阻害剤、プロスタグランジン類似体およびヘパリンは、全 て、血小板／フィブノーゲン活性化の第一次期または第二次期を阻害することに よって間接的に血小板凝集を阻害する。したがって、血小板の活性化の第一次期 または第二次期のいずれから起ころうとも血小板凝集を直接ブロックする選択的 治療用生成物を必要とする。

血小板凝集は、ＧＰＩ　１ｂ−１１Ｉａ血小板受容体複合物を介して１次的に媒 介されると思われる。フォノ・ウィルブランド因子、血漿蛋白、およびフィブリ ノーゲンは、隣接する血小板上のＧＰＩ　１ｂ−ＩＩ　ｌａ受容体を結合および 架橋することができ、これによって、血小板の凝集を行うことができる。フィブ ロネクチン、ビトロネクチンおよびトロンポスポンジンは、ＧＰＩＩｂ−１１１ ａに結合することも示した蛋白である。フィブロネクチンは、血漿中にあり、細 胞内基質中の構造蛋白として見られる。構造蛋白およびＧＰＩ　１ｂ−１１１ａ 間の結合は、損傷を受けた血管壁に血小板を付着させるように機能してもよい。

ヒト血漿フィブロネクチンのペプチド断片、および細胞付着を容易にし、かつ、 ファゴサイトーシスを増強するＲＧＤ　（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐについての一 文字アミノ酸記号）配列を含有する合成ペプチドは、米国特許第５１７，６８６ 号、米国特許第４．５８９，８８１号、米国特許第４．６６１，１１１号および 米国特許第４，６１４，５１７号に開示されている。ＷＯ８９１０５１５０（Ｐ ＣＴ　ＵＳ８８１０４４０３）にはＲＧＤ配列を含有する直線状および環状ペプ チドも報告された。ＲＧＤ配列を含有するペプチドは、血小板凝集を阻害するこ とが報告されていた。ニーベルシュタイン（Ｎｉｅｖｅｌｓｔｅｉｎ）ら［トロ ンボシス・アンド・ヘモスタシス（Ｔｈｒｏｍｂ、　ａｎｄ　Ｈｅｍｏｓｔａｓ ｉｓ）、５８．２１３３　（１９８７）］は、−］ＲＧＤＳ−ペプチがトロンビ ン誘発性凝集および血小板のフィブロネクチンへの付着を阻害し、ＧＰＩｌｂ− Ｉ１１ａ複合体を介して相互に作用し合うことを報告した。米国特許第４，６８ ３，２９１号には、ＡｒｇおよびＬｙｓを含有するペプチドならびにフィブリノ ーゲンの血小板への結合を阻害し、かつ、血小板凝集を阻害する一ＲＧＤ−配列 が開示されている。これらのペプチドの欠点は、血漿におけるそれらの乏しい安 定性およびそれらの低い効力である。欧州特許第０２７５７４８号には、ＧＰＩ 　１ｂ−１１Ｉａ受容体に結合しており、かつ、血小板凝集を阻害する直線状の テトラペプチド−ヘキサペプチドおよび環状のへキサペプチド−オクタペプチド が開示されている。報告された環状ペプチドは、２つのシステイニル残基間のジ スルフィド架橋を介して形成される。他の直線状および環状ペプチドは欧州特許 出願公開筒Ａ０３４１９１５号に開示されている（その内容は本明細書中に引用 記載する）。そこに開示されている１つの化合物はＡｃ−Ａｒｇ−Ｇｌ　ｙ−Ａ ｓｐ−ＮＨＣＨ２ＣＨ２Ｐｈである。

本発明は、ペプチドのカルボキシ末端がアリールアルコールまたはアリールアミ ンで置換されてアリールエステルまたはアミドを形成する化合物を提供すること である。本発明の化合物は、ＧＰ−１１ｂｌＩＩａのフィブリノーゲンへの結合 を阻害し、驚くことに有効である。かくして、本発明の化合物についての長所は 、それらの血小板凝集を阻害する能力およびそれらの改良された活性である。

閉塞した動脈および深静脈血栓症の治療についての最近の進歩は、血流を再確立 または改善するために、線維素溶解剤を使用して血栓または塞栓を溶解する。

アニストレブラーゼ（ａｎｉｓｔｒｅｐｌａｓｅ）、組織プラスミノーゲン活性 化因子（ｔＰＡ）、ウロキナーゼ（Ｕ　Ｋ）、プロウロキナーゼ（ｐＵＫ）、お よびストレプトキナーゼ（ＳＫ）、ならびにその突然変異体および誘導体のよう な線維素溶解剤は、フィブリンを特異的部位で加水分解させ、これによってフィ ブリン網を崩壊する蛋白分解酵素である。それらのｉｎ　ｖｉｖｏでの作用は、 血液中でプラスミノーゲンを蛋白分解的に活性化してプラスミンを形成すること であり、それはフィブリン血餅を溶解させる。フィブリンのより小さいペプチド への溶解は、血栓または塞栓を溶解する効果を有する。しかしながら、かかる治 療について繰り返される問題は、続発性血栓の形成による血管の再閉塞である。

線維素溶解治療法は、最も一般的には、凝塊した血管中の流れを再確立するため に使用される。しかしながら、線維素溶解治療法は、血栓の開始の原因である因 子を逆転しない。このために、ヘパリンのような抗凝固薬を使用して再閉塞を予 防することもある。実際、動脈中に高度の狭窄を有する患者は高用量のヘパリン の存在下でさえ再潅流後の再血栓症の危険性が非常に高い。ゴールド（Ｇｏｌｄ ）ら、サーキュレーション（Ｃｉｒｃ、）、７３．３４７−５２　（１９８６） を参照。

さらに、ＳＫおよびｔＰＡの使用は、血小板過剰凝集能（ｈｙｐｅｒａｇｇｒｅ ｇａｂｉｌｉｔｙ）を伴う。オールスタイン（Ｏｈｌｓｔｅｉｎ）ら、トロンボ シス・リサーチ（Ｔ　ｈｒｏｍｂ。

Ｒｅｓ、）、４．５７５−８５　（１９８７）を参照。高用量（７）ｔＰＡｌ： ：よる処置は、全身性出血を伴うことがあり、再閉塞を予防するためには推奨さ れない。したがって、線維素溶解治療後の再血栓症の予防方法が必要である。

米国特許出願第９１７，１２２号には、再潅流後の再閉塞の阻害方法および線維 素溶解に必要なｔＰＡの用量を低下させるための方法において使用するためのＴ ｘＡ、拮抗剤が開示されている。ヤスダ（Ｙａｓｕｄａ）ら［クリニカル・リサ ーチ（ＣＩｉｎ、　Ｒｅｓ、　）、３４．２（１９８６）］は、ｔＰＡによる血 栓症後の高フィブリン血小板血栓による再閉塞がイヌにおいてＧＰＩｌｂ−ＩＩ Ｉａに対するネズミモノクローナル抗体によって阻害されることを示した。本発 明は、血小板凝集を直接阻害するペプチドを投与することによる新規な血管再閉 塞阻害方法を記載する。

発明の概要 １つの態様において、本発明は、式（Ｉ）：Ｄ−Ｅ−Ａｓ　ｐ　−Ｑ−Ｙ （Ｉ） ［式中、 ＱはＮＨ，ＮＣＨ，またはＣ９ Ｙは非置換または１〜３個のＣト。アルキル、トリフルオロメチル、）１０ゲン 、ＯＲ’、ＳＲ’、（ＣＨｚ）、Ａｒ、Ｃ０ＮＲ，Ｒ２、Ｃ０ｔＲ２またはＲ１ Ｒ４Ｎによって置換されているフェニル、ナフチルまたはＨｅｔ；ＷはＮＨＲ’ 、ＮＲ’Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨＲ’、ＮＲ’Ｃ（＝ＮＨ）Ｒ’または（Ｃ＝ＮＨ）Ｎ ＨＲ’　。

ＵはＣＯ，ＳＯｚ、ＮＨＣＯｌ（ＣＨ２）、、５ＯｚＮＨ，ＮＨ３０２または■ はｌ］、Ｒｏ、Ｒ４Ｒｓ　Ｎ　、　Ｒａ　Ｒｓ　Ｎ　ＣＯ、Ｒ’　Ｏ、Ｙ　Ｎ　 Ｒ’、Ａは存在しないか、Ａｓｎ、Ｇｌ　ｎ、ＡＩ　ａ、ＰｒｏまたはＡｂｕ； ＢはＡｒｇ、Ｉ−ＩＡｒｇ、ＮＡｒｇ、（Ｍｅ２）Ａ　ｒ　ｇ、　（Ｅｔｚ）Ａ 　ｒ　ｇ、　Ａｂ　ｕ。

Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｈｉ　５ＳＯｒｎ、Ｌｙｓ、Ｐｈｇまたはそのａ−Ｒ”置換誘 導体、Ｄｔｃ、ＴｐｒまたはＰｒｏから選択されるＤ−またはＬ−アミノ酸：Ｅ はＧｌ　ｙ、Ｓａｒ、ＣＨＩＣｏ、０ＣＨｔＣＯ，またはＮＨｃｏ；ＲｏはＨ， Ｃ，、アルキルまたはＡｒ（ＣＨＪ−：ＸはＲ４Ｒ４Ｎ、Ｒ４Ｒ８Ｎ−Ｃｏまた はＨ；Ｒ１およびＲ２はＨ，Ｃ，、アルキルまたは（ＣＨ２）　−Ａ　ｒ　；Ｒ ４はＨまたはＣ１−６アルキル： ＲｓはＲｓ、Ｒｇ　ＣＯ１Ｒａ　ＯＣＯＳＲｅ　ＯＣＨ（Ｒｓ　’　）　ＣＯ。

Ｒｓ　Ｎ　ＨＣＨ（Ｒｓｏ）Ｃｏ、Ｒ５５ＣＨ（Ｒｅｏ）Ｃｏ、ＲｇＳＯ２また ｌ；１Ｒａｓｏ；Ｒ６およびＲ６゛はＨ，Ｃ，−６アルキル、Ｃ８−７シクロア ルキル、Ａｒ５Ａｒ−Ｃ１−４アルキル、Ｈｅｔ、　Ｈｅｔ−Ｃ１−４アルキル 、Ａｒ　（Ｃ１−１２）、ＣＨ（ＡｒＸＣＨ２）謙たはＡｒ−Ｃ３−７ンクロア ルキル； Ａｒはフェニルまたは１〜３個の０１−６アルキル、トリフルオロメチル、ハロ ゲン、Ｒ’ＯもしくはＲ’Ｓによって置換されているフェニル。

ｍは（１）ＷがＮＲ’−（Ｃ＝ＮＨ）ＮＨＲ’である場合、０〜４゜（２）Ｗが （Ｃ＝ＮＨ）ＮＨＲ’もしくはＮＲ’（Ｃ＝ＮＨ）Ｒ’である場合、０〜５；ま たは （３）ＷがＮＨＲ’である場合、０〜６゜ｑは（１）ＷがＮＲ’−（Ｃ＝ＮＨ） ＮＨＲ’である場合、１〜４：（２）Ｗが（Ｃ＝ＮＨ）ＮＨＲ’もしくはＮＲ’ （Ｃ＝ＮＨ）Ｒ’である場合、２〜５．または （３）ＷがＮＨＲ’である場合、３〜６である］で示される化合物またはその医 薬的に許容される塩である。

本発明の１つの特徴は、アリール基が窒素または酸素を介してＡｓｐ残基に結合 する化合物であり、これは血小板凝集の阻害について高い活性を有した。

本発明の別の特徴は、Ａｒｇのα−アミノ基が修飾されて該アミノ基を環に取り 込んでいる新規活性化合物である。

本発明のさらに別の特徴は、Ａｒｇのα−アミノ基が除去されているか、または 別の置換基によって置換されている新規活性化合物である。

本発明は、式（Ｉ）で示される化合物および医薬的に許容される担体からなる、 血小板凝集および血餅形成の阻害のための医薬組成物でもある。

本発明は、さらに、式（Ｉ）で示される化合物の有効量を体内に投与することか らなる、必要とする哺乳類における血小板凝集の阻害方法である。

別の態様において、本発明は、線維素溶解剤の有効量および式（Ｉ）で示される 化合物を体内に投与することからなる、線維素溶解治療後の哺乳類における動脈 または静脈の再閉塞の阻害方法を提供するものである。本発明は、発作、一過性 脳虚血発作、または心筋梗塞の処置方法でもある。

本発明は、また、医薬担体中の線維素溶解剤および式（Ｉ）で示される化合物か らなる、哺乳類における、線維素溶解および再潅流を行い、かつ、動脈または静 脈における再閉塞を阻害する医薬組成物でもある。

最後に、本発明は、容器中の線維素溶解剤および式（１）で示される化合物から なる、線維素溶解治療を行うための方法において使用するためのキットである。

発明の詳細な説明 本発明は、配列Ｇａｙ−Ａｓｐからなり、かつ、Ａｓｐのカルボキシ基に直接結 合したアリールエステルまたはアミド部分を有する非環式ペプチド様化合物を記 載する。本発明の化合物は、血小板凝集を阻害し、かつ、ＧＰＩｌｂ−１１１ａ 受容体および他の付着蛋白と相互作用すると思われる。アリール基のＡｓｐ残基 への結合は、血小板凝集の阻害について高い活性を与える。

本発明の化合物は、前記式（Ｉ）で示されるペプチドである。

好適には、Ｙは、所望により、ハロゲン、Ｃｌ−４アルキル、Ｃｌ−４アルコキ シ、Ｃ１−、アルキルチオ、Ｃ０ＮＲ１Ｒｔ＊たはＣＯ，Ｒ３によって置換され ていてもよいフェニルまたはナフチルである。

好ましくは、ＱＡはＮＨである。

好適には、Ｙはフェニルまたはナフチルである。

好ましくは、Ｙは所望によりクロロ、ｃｌ−４アルキル、Ｃｌ−４アルキルチオ またはカルボキシによって置換されていてもよいフェニルである。

好適には、ＶはＸ　Ａ　Ｂ　Ｒ’Ｎ、Ｒ４Ｒ５ＮＣ０またはＲ，Ｒ３Ｎであり、 ここで、Ｒ′またはＲ４はＨまたはメチルである。

好適ニル、ＶはＡｒＣ０Ｎ（ＣＨ３）またはＨｅｔＣＯ−Ｎ（ＣＨｓ）である。

好ましくは、ＶはＲ，Ｒ，Ｎであり、ここで、Ｒ４はＨまたはメチルであり、Ｒ 。

はＲ，ＣＯまたはＲｓｏｃｏである。

好適には、ＥはＧｌｙ、Ｓａｒ、ＮＨＣＯまたはＣＨ２Ｃ０である。好ましくは 、ＥはＧｌｙである。

好適には、Ｈｅｔはチェニルまたはピリジルである。

したがって、Ｗが−ＮＲ’（Ｃ＝ＮＨ）ＮＨＲ’である場合、ｍは好ましくは２ 〜３であり；Ｗが−（Ｃ＝ＮＨ）ＮＨＲ’または−ＮＲ’（Ｃ＝ＮＨ）Ｒ’であ る場合、ｍは好ましくは３〜４であり；Ｗが−ＮＨＲ’である場合、ｍは好まし くは４〜５である。

び置換基（ＣＨ，）、−Ｗ間の位置関係に左右される。したがって、Ｗが−ＮＲ ’（Ｃ＝ＮＨ）ＮＨＲ’である場合、ｍは、好ましくは、パラ位については０〜 １、メタ位については０〜２、オルト位については１〜３である。Ｗが−（Ｃ＝ ＮＨ）ＮＨＲ’または−ＮＲ’（Ｃ＝ＮＨ）Ｒ’である場合、ｍは、好ましくは 、パラ位については０〜２、メタ位については１〜３、オルト位については２〜 ４である。Ｗが−ＮＨＲ’である場合、ｍは、好ましくは、パラ位については０ 〜３、メタ位については２〜４、オルト位については３〜５である。一般にパラ 位が好ましい。

Ｘ−ＡまたはＸ−Ｂに関して本明細書に記載する式におけるＸの意味は、八が存 在しない場合、これらのアミノ酸のアミノ基を示す。本発明の化合物が１個以上 のキラル中心を有する場合、特記しない限り、本発明は、慣用技術によって合成 され、分割される各固有の非ラセミ化合物を含む。置換基Ｒ３、Ｒ２、Ｒ１、Ｒ ，、Ｒｏ、Ｒ６′、Ａｒ、　Ｒ’、Ｑ、ｎＳｐおよびｑの意味は、いずれか１つ の場合、他の場合のそれらの意味とは独立している。

本明細書で使用される場合、Ｃ１−４アルキルは、メチル、エチル、ｎ−プロピ ル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチルおよびｎ−ブチルを含むことを意味 する。Ｃ３−６アルキルとしては、これらの基およびさらにペンチルおよびヘキ シル、ならびにｎ−ペンチル、イソペンチルおよびネオペンチルのようなそれら の単純脂肪族異性体が挙げられる。

本明細書で使用する場合、Ａｒは、フェニル、または１もしくは２個のＣｌ−８ アルキル、トリフルオロメチル、ハロゲン、Ｒ’ＯもしくはＲ’Ｓによって置換 されているフェニルを意味する。ＡｒについてのＲ’ＯおよびＲ’Ｓの置換に関 して、Ｒ′はＨであり、結果として、ヒドロキシまたはメルカプトを生じるか： Ｃ＋−ｓＣ＋−用であり、結果としてＣ１−６アルコキシまたはＣ１６アルキル チオを生じるか：あるいはＡｒ（ＣＨｚ）□であり、結果として所望により１ま たは２個のＣ１−４アルキル、Ｃｌ−４アルコキシまたはハロゲンによってフェ ニル上で置換されていてもよいフェノキシ、フェニルＣ１−、アルコキシ、フェ ニルチオまたはフェニルＣｌ−３アルキルチオを生じる。所望によりメチルまた はメトキシによって置換されていてもよいベンジルオキシおよびベンジルチオが 挙げられる。

Ｙは、置換された芳香族またはへテロ芳香族の基である。すなわち、Ｙは、１ま たは２個のＣ１−６アルキル、トリフルオロメチル、ハロゲン、Ｒ’Ｏ，Ｒ’Ｓ 。

（ＣＨ２）−Ａｒ、Ｃ０ＮＲＩＲ２、ＣＯ２Ｒ２またはＲ２Ｈ，Ｎによって置換 されていてもよいフェニルまたはナフチルである。Ｈｅｔまたはへテロアリール は、窒素、酸素および硫黄からなる群から選択される１〜３個のへテロ原子を含 む、５または６員の単環式芳香族環、あるいは、９または１０員の二環式芳香族 環を示し、これは安定であり、かつ、慣用の化学的合成法によって入手可能であ る。複素環としては、ピリジル、フリル、チェニル、インドリル、キノリニル、 ベンゾフリルおよびベンゾチェニルが挙げられる。化学合成によって入手可能で あり、かつ、安定であるフェニル、ナフチルまたはＨｅｔ環上の３個までの置換 基の入手しやすい組合せは、本発明の範囲内である。

により１または２個のＣ０−６アルキルまたはＲ’０基によって置換されていて もよい、１または２個の窒素原子を含有する５もしくは６員の単環式環または９ もし代表的な例としては、フタルイミジル、ピペリジニル、ピロリル、イソキノ リル、２−ピリドニル、１，３−ジヒロー２Ｈ−イソインドリル、２−ピロリジ ノニル、イミダゾリルおよびモルホリニルが挙げられる。

本発明は、ペプチド結合、−ＣＯＮＨ−のいずれかが同配体結合によって置換さ れる化合物を含む。ペプチド同配体の例としては、−ＮＨＣＯ−１−ＣＨ＝ＣＨ −１−ＣＨｔＣＨ，−１−ＣＯＣＨｔ−１−ＣＯＯ−１−ＣＨＯＨＣＨ！−１− ＣＨｔ　Ｎ　Ｒ４−１−Ｃ３ＮＨ−および−ＣＨ，Ｓ−が挙げられる。

本発明の特定の化合物としては、 Ｎ−［［５−（アミノイミノメチル）アミノ−１−オキソペンチル］−Ｇｌｙ− Ａｓｐ−フェニルアミド； Ｎ−［（２Ｒ）−２−フェニル−５−（アミノイミノメチル）アミノ−１−オキ ソペンチル］−Ｇａｙ−Ａｓｐ−フェニルアミド：Ｎ−［（２Ｓ）−２−（１， ３−ジヒドロ−２Ｈ−イソインドリル）−５−（アミノイミノメチル）−アミノ −１−オキソペンチル］−Ｇａｙ−Ａｓｐ−フェニルアミド； Ｎ−［Ｎ’−（４，４−ジフェニルブチリル）−Ｎ−メチル−アルギニル］−〇 １ｙ−Ａｓｐ−フェニルアミド： Ｎ−［（２Ｓ）−（１−（２−ピロリジノニル））−５−（アミノイミノメチル ）アミノ−１−オキソペンチル］−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−フェニルアミド：Ｎ′−（ フタロイル）−Ａ　ｒ　ｇ−Ｇ　］　ｙ−Ａ　ｓ　ｐ−フェニルアミド；Ｎ’ベ ンゾイル−Ｎ’ＭｅＡｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−（４−カルボキシ）フェニルアミ ド。

Ｎ’アセチル−Ａ　ｒ　ｇ−Ｇ　］　ｙ−Ａｓ　ｐ−フェニルアミド。

Ｎ’ベンゾイル−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−フェニルアミド：Ｎ’ベンジルオキ シカルボニル−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−ＡＳｐ−フェニルアミド；Ｄ−Ｐｈｇ−Ａｒｇ −Ｇｌｙ−Ａｓｐ−フェニルアミド；Ｎ’ベンジルオキシカルボニル−Ｎ’メチ ル−〇ｒｎ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−フェニルアミド： ４−（アミノイミノメチル）アミノベンゾイル−８ａｒ−Ａｓｐ−フェニルアミ ド； Ｎ＃ベンゾイル−Ｎ’ＭｅＡｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−（２−クロロ）フェニルア ミド； Ｎ″ベンゾイルＮ’ＭｅＡｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−（２−メトキシ）フェニルア ミド： Ｎ１ベンゾイル−Ｎ’ＭｅＡｒｇ−Ｇｌｙ−ＭｅＡｓｐ−（２−ヒドロキシ）フ ェニルアミド； Ｎ１ベンゾイル−Ａｒｇ−ＮＨＮＨＣＯ−Ａｓｐ　−（Ｎ−メチル）フェニルア ミＡｓｐ−フェニルアミド 本発明の好ましい化合物は、 Ｎ’−（２−メチルベンゾイル）　−Ｎ’−ＭｅＡｒｇ−Ｇｌｙ−ＡＳ＋）−（ ２−メチル）フェニルアミド； Ｎ′ベンゾイル−Ｎ’ＭｅＡｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−フェールアミド。

Ｎ’アセチル−Ｎ’ＭｅＡ　ｒ　ｇ−Ｇ　Ｉ　ｙ−Ａ　ｓ　ｐ−フェニルアミド ；Ｎ’アセチル−Ｎ’ＭｅＡｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−（２−カルボキシ）フェニ ルアミド： Ｎ’（２−メチルチオ）ベンゾイル−Ｎ’ＭｅＡ　ｒ　ｇ−Ｇ　Ｉ　ｙ−Ａ　ｓ 　ｐ−（２−メチルチオ）フェニルアミド。

Ｎ’ベンゾイル−Ｎ’ＭｅＡｒｇ−Ｇ１　ｙ−Ａｓｐ−（４−クロロ）フェニル アミド。

Ｎ１ベンゾイル−Ｎ＆ＭｅＡｒｇ−ＧｌシーＡｓｐ−（３−カルボキシ）フェニ ルアミド：および Ｎ’（２−チェニルカルボニル）−Ｎ’ＭｅＡ　ｒ　ｇ−Ｇ　ｌ　ｙ−Ａ　ｓ　 ｐ−フェニルアミドである。

本明細書では当該技術分野において一般に使用される命名法を使用してペプチド を記す。

アラニン　Ａｌａ　ロイシン　Ｌｅｕ アルギニン　Ａｒｇ　リシン　Ｌｙｓ アスパラギン　Ａｓｎ　メチオニン　Ｍｅｔアスパラギン酸　Ａｓｐ　フェニル アラニン　Ｐｈｅシスティン　Ｃｙｓ　プロリン　Ｐｒ。

グルタミン　Ｇｉｎ　セリン　Ｓｅｒ グルタミン酸　Ｇｌｕ　トレオニン　Ｔｈｒグリシン　Ｇｌｙ　トリプトファン 　Ｔｒｐヒスチジン　Ｈｉｓ　チロシン　Ｔｙｒイソロイシン　Ｉｌｅ　ノくリ ン　Ｖａｌアスパラギンまたはアスパラギン酸　Ａｓｘグルタミンまたはグルタ ミン酸　Ｇｌｘ慣用の表現に従って、アミノ末端は左側、カルボキシ末端は右側 である。特言己しない限り、全てのキラルアミノ酸（ＡＡ）は、Ｌ−絶対配置の ものとみなす。

Ａｂｕはアミノ酪酸を表し、Ｄｔｃは５．５−ジメチルチアゾリジン−４−カル ボン酸を表し、Ｔｐｒはチアゾリジン−４−カルボン酸を表し、ＨＡｒｇｉｔホ モアルギニンを表し、ＮＡｒｇはノルアルギニンを表し、（Ｍｅ２）Ａ　ｒ　ｇ 　Ｉ；ＬＮ’　、　Ｎ”−ジメチルアルギニンを表し、（Ｅｈ）ＡｒｇはＮ’、 Ｎ−ジエチルアルギニンを表し、Ｄ−ＰｈｇはＤ−フェニルグリシンを表し、Ｏ ｒｎはオルニチンを表す。

ｔ−Ｂｕはターンヤリ−ブチル基を表し、Ｂｏｃはｔ−ブチルオキシカルボニル 基を表し、Ｆｍｏｃはフルオレニルメトキシカルボニル基を表し、Ｐｈ１ｉフエ ニル基を表し、ｐｈｔｈはフタロイルを表し、Ｃｂｚはカルボベンジルオキシ基 を表し、ＢｒＺは０−ブロモベンジルオキシカルボニル基を表し、Ｃ］Ｚｌｔｏ −クロロペンノルオキシカルボニル基を表し、Ｂｚｌはベンジル基を表し、４− ＭＢｚｌは４−メチルベンジル基を表し、Ａｃはアセチルを表し、ＡｌｋｌｉＣ Ｉ−４アルキルを表し、Ｎｐｈは１−または２−ナフチルを表し、ｃＨｅｘはシ クロヘキシルを表す。

ＤＣＣはジシクロへキシルカルボジイミドを表し、ＤＭＡＰはジメチルアミノピ リジンを表し、ＤＩＥＡはジイソプロピルエチルアミンを表し、ＥＤＣはＮ−エ チル−Ｎ’（ジメチルアミノプロピル）−カルボジイミドを表し、ＨＯＢｔは１ −ヒドロキシベンゾトリアゾールを表し、ＴＨＦはテトラヒドロフランを表し、 ＤＭＦはジメチルホルムアミドを表し、ＰＰＡは１−プロパンホスホン酸環状無 水物を表し、ＤＰＰＡはアジ化ジフェニルホスホリルを表し、ＢＯＰはへキサフ ルオロリン酸ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ−トリス（ジメチルアミノ） ホスホニウムを表し、ＨＦはフッ化水素酸を表し、ＴＦＡはトリフルオロ酢酸を 表す。

本明細書で使用する場合、結合剤は、ペプチド結合を形成するために使用される 試薬を示す。典型的な結合剤は、カルボジイミド、活性化無水物およびエステル ならびにハロゲン化アシルである。ＥＤＣ，ＤＣＣＳＤＰＰＡ、ＰＰＡ、ＢＯＰ 試薬、ＨＯＢｔ、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドおよび塩化オキサリルのような 試薬は典型的である。

（α−Ｒ’）ＡＡと記されることもある、本発明のアミノ酸のα−Ｒ°置換誘導 体は、Ｒｏによってα−アミノ基上で一置換されるアミノ酸を示し、ここで、Ｒ ｏはＣ＋−ＳアルキルまたはＡ　ｒ　（ＣＨ２）　＊である。好適には、Ｒｏは メチルまたはベンジルである。Ｒｏは好ましくメチルである。各々、（ａ　−Ｍ ｅ）Ａ　ｒ　ｇおよび（α−Ｍｅ）ＧｌｙであるＮ”−メチルアルギニンおよび Ｎ’−メチルグリシンは、本明細書では、従来の慣用の記号法に従って、ＭｅＡ ｒｇおよびＳａｒ　（サルコシン）とも記される。他の全てのＮ−α−置換アミ ノ酸はそれらの表現において記号α−を有するであろう。

ペプチドは、メリフィールド（Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ）　［ジャーナル・オブ・ アメリカン・ケミカル・ソサイエティ（Ｊ　、　Ａｖ、　Ｃｈｅｍ、　Ｓｏｃ、 　）、８５．２１４９　（１９６４）］の固相法または当該技術分野で知られて いる一般的な液相法によって調製される。ジャーナル・オブ・メゾインナル・ケ ミストリー（Ｊ　、　Ｍｅｄ、　Ｃｈｅｔ　）、２９．９８４　（１９８６）お よびジャーナル・オブ・メゾインナル・ケミストリー　（Ｊ　、　Ｍｅｄ、　Ｃ ｈｅｔ　）、３０．２２９１　（１９８７）においてアリ（Ａｌｉ）らによって 一般的に開示されたペプチド合成方法は、一般的な技術の説明であり、これを本 明細書中に引用記載する。固相合成法および液相合成法の組合せは、ジー、トリ ー、テトラ−またはペンタ−ペプチド断片が面相合成法によって調製され、次い で、液相合成法によって結合されるかまたはさらに修飾される収束合成法（ｃｏ ｎｖｅｒｇｅｎｔ　５ｙｎｔｈｅｓｉｓ）におけると同様に使用されてよい。液 相合成法は、一般に、本発明のより小さいペプチドについて好ましい。

各合成断片、アミノ酸またはペプチドの側鎖の反応性官能基は、ペプチド技術分 野において知られているように保護されるのが好適である。例えば、Ｂｏａ。

ＣｂｚまたはＦｍｏｃ基は、アミノ基、特にα−アミノ基の保護のために使用さ れ得る。Ｂｏａ基は、一般に、α−アミノ基の保護のために好ましい。ｔ　−Ｂ ｕ。

ｃＨｅｘまたはベンジルエステルは、ＡｓｐまたはＧｌｕの側鎖カルボキシの保 護のために使用され得る。ベンジル基または好適に置換されたベンジル基は、シ スティンのメルカプト基または他のチオール含有残基：またはセリンもしくはト レオニンのヒドロキシルを保護するために使用される。トンル基は、Ｈｉｓのイ ミダゾリル基の保護のために使用され、Ａｒｇのグアニジノ窒素の保護のために はトンル基またはニトロ基が使用される。好適に置換されたカルボベンジルオキ シ基またはベンジル基は、ＴｙｒＳＳｅｒもしくはＴｈｒのヒドロキシル基、ま たはりシンのε−アミノ基のために使用され得る。フタロイル基もまた、リジン のε−アミノ基の保護のために使用され得る。ベンジルオキシカルボニルまたは ベンノル保護基の好適な置換は、クロロ、ブロモ、ニトロまたはメチルとのオル トおよび／またはパラ置換であり、保護基の反応性を変えるために使用される。

Ｂｏａ基を除いて、保護基は、最も好都合には緩酸処理によって除去されないも のである。これらの保護基は当該技術分野で知られているように、接触水素添加 、アンモニア水中ナトリウムまたはＨＦ処理のような方法によって除去される。

ペプチドの液相合成法は、アミド結合を形成するために使用される慣用の方法を 使用して行われる。典型的には、Ｈ−Ｑ−Ｙ断片は、所望により１−ヒドロキシ ベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）およびジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）の ような触媒の存在下、Ｎ、Ｎ’ジシクロへキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）のよ うな好適なカルボジイミド結合剤を使用して、その遊離アミノまたはヒドロキシ ル基を介して適当な側鎖保護Ａｓｐに結合される。所望により塩基の存在下での 、保護Ｂｏｃ−アミノ酸の遊離カルボキシルの活性化エステル、無水物または酸 ハロゲン化物の形成および保護アミノ酸の遊離アミンとの次反応のような他の方 法もまた好適である。例えば、保護Ｂｏｃ−アミノ酸またはペプチドは、Ｎ−メ チルモルホリン、ＤＭＡＰまたはトリアルキルアミンのような塩基の存在下、塩 化メチレンまたはテトラヒドロフラン（ＴＨＥ）のような無水溶媒中、クロロギ 酸イソブチルで処理されて、「活性化無水物」を形成し、次いで、これを、第２ 保護アミノ酸またはペプチドの遊離アミンと反応させる。これらの方法によって 形成されたＢｏｃ−Ａｓｐ−Ｑ−Ｙ中間体は、慣用の方法を使用して、アミノ末 端で選択的に脱保護され、同様の方法を使用して他のペプチドまたはアミノ酸に 結合させる。

固相法を使用する場合、例えば、Ｙがリシンに結合され得るカルボキシル基を有 する場合、ペプチド、またはその好都合な断片は、カルボキシ末端から逐次的に 始まり、ペプチドのアミノ末端に向かって作動して作製される。固相合成法は、 一般に、米国特許第４．２４４．９４６号およびギシン（Ｇ　１ｓｉｎ）　［ヘ ルベチカ・ンミカ・アクタ（Ｈｅｌｖ、　Ｃｈｅｗ、　Ａｃｔａ）、５６．１４ ７６（１９７３）］に開示されているように、ベンズヒドリルアミン樹脂（ＢＨ Ａ）、メチルベンズヒドリルアミン樹脂（ＭＢＨＡ）、クロロメチル樹脂（ＣＭ Ｒ）、ヒドロキシメチル樹脂（ＨＭＲ）または５ＡＳＲＩＮ樹脂のような好適な 樹脂に、Ｂｏｃ−ＮＨ−Ｙのような適当に保護されたＹ残基のカルボキシル基を 共有結合させることによって始められる。ペプチド生成物のカルボキシ末端がカ ルボキシアミドであるべきである場合、ＢＨＡまたはＭＢＨＡ支持樹脂が使用さ れる。ペプチド生成物のカルボキシ末端がカルボキシル基であるべきである場合 、ＣＭＲまたはＨＭＲ支持体が一般に使用されるが、これは、カルボキシアミド またはエステルを製造するために使用してもよい。

第１保護残基を樹脂に結合させた後、アミノ基を緩酸処理によって脱保護し、こ のアミノ基に第２保護ＡＡの遊離カルボキシルを結合させる。このプロセスは、 所望のペプチドが形成されるまで、中間体を単離せずに連続的に行う。次いで、 完成したペプチドを、いずれかの順序で担持樹脂から脱ブロックおよび／または 分離し得る。

Ｙ残基がカルボキシル基を持っておらず、固相合成法が望ましい場合、ペプチド は、Ａｓｐのβ−カルボキシル基を介してＣＭＲまたはＨＭＲに結合されてよい 。例えば、該合成法は、液相合成法を介して、適当に側鎖保護されたアスノくラ ギン酸残基にアリールアミンまたはアリールオキシ基を結合させることによって 始められる。次いで、側鎖カルボキシル基を選択的に脱保護し、クロロメチル樹 脂（ＣＭＲ）に結合させる。ベンジルエステルは、水素添加によって選択的に脱 保護される好適な側鎖保護基である。次いで、酸による処理によってアミノ基を 遊離し、一般的な方法で固相ペプチド合成法を行う。

Ｙがカルボン酸基を持たず、水素添加に不適合な置換基を持っており、固相合成 法が望ましい場合、アスパラギン酸の側鎖カルボキシルを保護するために１−ブ チルエステルまたは他の酸遊離基を使用する。この場合、アスノ（ラギン酸のア ミノ基は、フルオレニルメトキシカルボニル基（Ｆｍｏｃ）のような塩基遊離基 によって保護される。アスパラギン酸のアリールアミンまたはフェノールへの液 相結合の後、緩酸加水分解によってｔ−ブチルエステルの選択的脱保護が行われ る。慣用の方法によって、Ａｓｐの側鎖カルボキシル基を樹脂に結合させる。次 いで、次なる固相ペプチド合成法のために、級塩基によってフルオレニルメトキ シカルボニル基を除去する。

支持樹脂からペプチドを切断するための好ましい方法は、アニソールまたはジメ トキノベンゼンのような好適なカチオンスカベンジャーの存在下、無水ＨＦで樹 脂支持ペプチドを処理することである。この方法は、同時に、硫黄を保護するチ オアルキル基を除（全ての保護基を除去し、樹脂からペプチドを分離する。この 方法でＣＭＲまたはＨＭＲから加水分解されたペプチドはカルボン酸であり、Ｂ ＨＡ樹脂から分離されたものはカルボキシアミドとして得られる。ペプチドがＡ ｓｐのβ−カルボキシルを介して結合される場合、カルボキシル基が望ましいの で、ＣＭＲまたはＨＭＲが使用される。ペプチドがＹ残基を介して結合される場 合、樹脂の選択は、酸またはカルボキシアミドのいずれが望ましいかに左右され るであろう。

ペプチドの末端アミノ基の修飾は、当該技術分野で一般に知られているように、 アルキル化、スルホニル化またはアシル化によって行われる。これらの修飾は、 ペプチドへの取り込み前にＤ残基について行われるか、または合成され、末端ア ミノ基が遊離された後であるが、保護基が除去される前にペプチドについて行わ れてよい。

典型的には、アセチル化は、第３級アミンの存在下、ハロゲン化アシル、または 対応するアルキルもしくはアリール酸の無水物を使用して遊離アミノ基について 行われる。モノアルキル化は、シアノホウ水素化リチウムまたはシアノホウ水素 化ナトリウムのような緩還元剤の存在下、適当な脂肪族アルダしドまたはケトン によるアミノ基の還元アルキル化によって最も好都合に行われる。ジアルキル化 は、塩基の存在下、過剰のハロゲン化アルキルでアミノ基を処理することによっ て行われ得る。

Ａ　ｒ　ｇｓ　ＨＡ　ｒ　ｇｓ　（Ｍｅｚ）Ａ　ｒ　ｇｓ　（Ｅ　ｔｇ）Ａ　ｒ 　ｇ、Ａ　Ｉ　ａ　ｓ　Ｇ　１　ｙ　ｓ　ＨＩ　Ｓ　５Ａｂｕ、Ｏｒｎ、Ｌｙｓ の誘導体を含む本発明のアミノ酸のα−Ｒ′置換誘導体は、化学技術分野に共通 な方法によって調製される。置換基Ｒ′は前記定義のＣ＋−ＳアルキルまたはＡ ｒ（ＣＨｚ）−であってよい。これらの誘導体の代表的な製造方法は、米国特許 第４，６８７．７５８号；チュン（Ｃｈｅｕｎｇ）ら、カナディアン・ジャーナ ル・オブ・ケミストリー（Ｃａｎ、　Ｊ、Ｃｈｅｔ）、５５．９０６．（１９７ ７）、フライディンガー（Ｆ　ｒｅｉｄｉｎｇｅｒ）ら、ジャーナル・オブ・オ ーガニック・ケミストリー（Ｊ、Ｏｒｇ、Ｃｈｅｍ、）、４８．７７　（１９８ ２）；およびシャマン（Ｓ　ｈｕｍａｎ）ら、ペプチド：第７回アメリカペプチ ドシンポジウムの議事録（Ｐｅｐｔｉｄｅｓ　：　Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ　ｏ ｆ　ｔｈｅ　７　ｔｈ　Ａ１１ｅｒｉｃａｎ　Ｐｅｐｔｉｄｅ　Ｓｙｍｐｏｓｉ ｕｍj、リッ チ、ディ（Ｒｉｃｈ、　Ｄ、　）、グロス、イー（Ｇｒｏｓｓ、　Ｅ、）編、ピ アス・ケミカル・カンバー−−（Ｐｉｅｒｃｅ　Ｃｈｅｕ＋１ｃａｌ　Ｃｏ、） 、ロックフォード、イリノイ州、６１７（１９８１）に開示されており、これは 本明細書中に引用記載する。

ペプチドの酸付加塩は、親化合物、および過剰の、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リ ン酸、酢酸、マレイン酸、コハク酸もしくはメタンスルホン酸のような酸から好 適な溶媒中で標準的な方法で製造される。酢酸塩形態が特に有用である。許容さ れる内部塩または双性イオンを形成する化合物もある。カチオン塩は、適当なカ チオンを含有するヒドロキシド、カルボナートまたはアルコキシドのような過剰 のアルカリ試薬で：または適当な有機アミンで、親化合物を処理することによっ て製造される。Ｌｉ”、Ｎａ’、Ｋ＋、Ｃａ″１＋、Ｍｇ”およびＮＨ，”のよ うなカチオンは、医薬的に許容される塩に存在するカチオンの例である。

本発明は、式（１）で示されるペプチドおよび医薬的に許容される担体からなる 医薬組成物を提供するものである。前記に従って製造されたペプチドおよび他の ペプチド、またはフィブロネクチン、フィブリノーゲンもしくはフォノ・ウィル ブランド因子のポリペプチド誘導体の医薬組成物は、非経口投与用溶液剤または 凍結乾燥粉末剤として製剤化されてよい。粉末剤は、使用前に好適な希釈剤また は他の医薬的に許容される担体の添加によって再構成されてよい。液状製剤は、 一般に、緩衝液、等張液、水溶液である。好適な希釈剤の例としては、通常等張 生理食塩水溶液、標準的な水中５％デキストロースまたは緩衝化酢酸ナトリウム もしくは酢酸アンモニウム溶液が挙げられる。かかる製剤は、特に非経口投与に 好適であるが、経口投与のためにも使用されるか、またはガス注入法のための計 量用量吸入器または噴霧器中に含まれてよい。ポリビニルピロリドン、ゼラチン 、ヒドロキシセルロース、アラビアゴム、ポリエチレングリコール、マンニトー ル、塩化ナトリウムまたはクエン酸ナリウムのような賦形剤を添加するのが望ま しい。

別法としては、これらのペプチドは、経口投与のために、被包されるか、錠剤化 されるか、またはエマルジョンもしくはシロップ中に調製されてよい。医薬的に 許容される固体または液体担体は、該組成物を増強もしくは安定化するため、ま たは、該組成物を調製し易くするために添加されてよい。固体担体としては、デ ンプン、ラクトース、硫酸カルシウム・二水和物、白土、ステアリン酸マグネシ ウムもしくはステアリン酸、タルク、ペクチン、アラビアゴム、寒天またはゼラ チンが挙げられる。液体担体としては、シロップ、落花生油、オリーブ油、生理 食塩水および水が挙げられる。該担体としては、また、単独またはワックスと一 緒になった、モノステアリン酸グリセリンまたはジステアリン酸グリセリンのよ うな徐放性物質も挙げられる。固体担体の量は変化するが、好ましくは、投与単 位当たり約２０１９〜約１９であろう。医薬調製物は、錠剤形態については粉砕 し、混合し、顆粒化し、次いで、所望により圧縮するか二またはゼラチン硬カプ セル形態については粉砕し、混合し、次いで、充填することを含む製薬の慣用技 術に従って調製される。液体担体が使用される場合、調製物は、シロップ、エリ キシル、エマルジョンまたは水性もしくは非水性懸濁液の形態であろう。かかる 液体製剤は、直接、経口投与されるか、または、ゼラチン軟カプセル中に充填さ れてよい。

直腸投与について、本発明のペプチドは、ココアバター、グリセリン、ゼラチン またはポリエチレングリコールのような賦形剤と組合せられ、坐剤に成型されて もよい。

本発明は、式（Ｉ）で示されるペプチドおよび医薬的に許容される担体の体内投 与からなる、哺乳類、特にヒトにおける血小板凝集および血餅形成の阻害方法を 提供するものでもある。かかる治療のための適応症としては、急性心筋梗塞（Ａ Ｍｌ）、深静脈血栓症、肺塞栓症、解離性動脈瘤、一過性脳虚血発作（ＴＩＡ） 、発作および他の梗塞関連疾患、ならびに不安定アンギナが挙げられるユ汎発性 血管内凝固症候群（Ｄ　Ｉ　Ｃ）、敗血症、手術または感染性ショック、術後お よび分娩後損傷、心肺バイパス手術、不適合輸血、常位胎盤早期剥離、血栓性血 小板減少性紫斑病（ＴＴＰ）、ヘビ毒および免疫病のような慢性または急性状態 の過剰凝集性は、かかる処置に反応すると思われる。さらに、本発明のペプチド は、転移症状の予防法、真菌類感染症の予防法または処置法、および骨吸収が因 子である疾患の予防法または処置法において使用されてよい。

当該ペプチドは、血漿中の薬物の濃度が血小板凝集を阻害するのに充分であるよ うな方法で、患者に経口または非経口的に投与される。当該ペプチドを含有する 医薬組成物は、患者の症状に一致する方法で、約０．２〜約５０ｍｇ／ｋｇの用 量で投与される。急性治療については、非経口投与が好ましい。過剰凝集性の持 続性状態については、水または通常生理食塩水中５％デキストロース中の当該ペ プチドの静脈内輸液が最も有効であるが、筋肉内ポーラス注射でも充分である。

慢性であるが、非臨界的状態の血小板凝集性については、カプセルもしくは錠剤 の経口投与、またはポーラス筋肉内注射が好適である。当該ペプチドは、約０゜ ４〜約５０ｍｇ／Ａｔの用量で毎日１〜４回投与されて、約０．４〜約２００　 Ｗ９７に９／日の合計日用量が達成される。

本発明は、さらに、式（Ｉ）で示されるペプチドおよび線維素溶解剤の体内投与 からなる、線維素溶解治療後の動脈または静脈の再閉塞の阻害方法を提供するも のである。線維素溶解治療におけるペプチドの投与が完全に再閉塞を予防するか 、または再閉塞までの時間を遅延させることが判明した。

本発明に関して使用する場合、線維素溶解剤なる語は、フィブリン血餅の溶解を 直接的または間接的に引き起こす、天然生成物または合成生成物のいずれの化合 物も意味する。プラスミノーゲン活性化因子は、線維素溶解剤のよく知られたー グループである。有用なブスミノーゲン活性化因子としては、例えば、アニスト レプラーゼ、ウロキナーゼ（ＵＫ）、プロウロキナーゼ（ｐＵＫ）、ストレプト キナーゼ（ＳＫ）、組織プラスミノーゲン活性化因子（ｔＰＡ）、ならびに、そ の化学的に修飾されたか、または１個以上のアミノ酸が付加、欠失もしくは置換 されたか、または例えば１個のプラスミノーゲン活性化因子の活性部位を別のプ ラスミノーゲン活性化因子のフィブリン結合ドメインもしくはフィブリン結合分 子と組み合わせることによって１個以上の機能性ドメインが付加、欠失もしくは 変性されたその突然変異体または変異体が挙げられる。他の変異体としては、１ 個以上の糖鎖形成部位が変性されたｔＰＡ分子が挙げられる。プラスミノーゲン 活性化因子のうち好ましいものは、プラスミノーゲン活性化因子の血清半減期を 増加させるために一次アミノ酸配列が成長因子ドメインにおいて変性されたｔＰ Ａの変異体である。ｔＰＡ成長因子変異体は、例えば、ロビンソン（Ｒｏｂｉｎ ｓｏｎ）らによって欧州特許出願公開第Ａ０２９７５８９号ならびにブラウン（ Ｂ　ｒｏｗｎｅ）らによって欧州特許出願公開第Ａ０２４０３３４号および英国 特許第８８１５１３５．２号に開示されている。他の変異体としては、欧州特許 第００２８４８９号、欧州特許第０１５５３８７号および欧州特許第０２９７８ ８２号に開示されているもののようなハイブリッド蛋白が挙げられる（これらの 全ては本明細書中に引用記載される）。アニストレブラーゼは本発明において使 用するための好ましいハイブリッド蛋白である。線維素溶解剤は、天然源から単 離されてよいが、一般に、遺伝子工学の慣用方法によって生産される。

ｔＰＡ、ＳＫ、ＵＫおよびｐＵＫの有用な製剤化は、例えば、欧州特許出願公開 第Ａ０２１１５９２号、独国特許出願第３０３２６０６号、欧州特許出願公開第 ＡＯＯ９２１８２号および米国特許第４．５６８．５４３号に開示されている（ これらの全ては本明細書中に引用記載される）。典型的には、線維素溶解剤は、 ｐＨ３５〜５．５に緩衝化された酢酸ナトリウムもしくは酢酸アンモニムまたは アジピン酸ナトリウムもしくはアジピン酸アンモニムのような緩衝化等張性水溶 液中で製剤化されてよい。ポリビニルピロリドン、ゼラチン、ヒドロキシセルロ ース、アラビアゴム、ポリエチレン、グリコール、マンニトールおよび塩化ナト リウムのようなさらなる賦形剤が添加されてもよい。かかる組成物は凍結乾燥す ることができる。

当該医薬組成物は、同一容器中の当該ペプチドおよび線維素溶解剤の両方を用い て製剤化されてよいが、別々の容器中での製剤化が好ましい。両方の薬物を溶液 形態で投与する場合、それらを、同時投与用輸液／注射システムに、または縦列 装室に含有することができる。

かかる治療についての適応症としては、心筋梗塞、深静脈血栓症、肺塞栓症、発 作および他の閉塞関連疾患が挙げられる。当該ペプチドは、ｔＰＡまたは他の線 維素溶解剤の非経口投与の直前、該非経口投与と同時、または該非経口投与の直 後に投与される。治療後再閉塞を最大限に阻害するために再潅流が確立された後 、充分な時間、当該ペプチドによる処置を続けることが望ましいことが証明され る。ｔＰＡ、ＳＫ、ＵＫまたはｐＵＫの有効用量は、領５〜５ｕ／ｋｇであり、 当該ペプチドの有効用量は約０．１〜２５１１９／ＡＩ９である。

同時または別々の阻害剤および線維素溶解剤の好都合な投与について、ボックス 、カートンまたは他の容器のような単一の容器中の、前記のような非経口投与用 のための有効量の阻害剤および前記のような非経口投与用のための有効量のｔ　 ′ＰＡまたは他の線維素溶解剤を各々有する個々のボトル、バッグ、バイアルま たは他の容器からなるキットが調製される。かかるキットは、例えば、所望によ り凍結乾燥プラグ状態の、別々の容器または同一容器中の薬剤、および再構成用 溶液の容器からなることができる。この変形は、単一容器の２つのチャンバーに 再構成用溶液および凍結乾燥プラグを含むことであり、これらは使用前に混合さ せることができる。かかる装置について、線維素溶解剤および当該ペプチドは、 例えば、２つの容器中に別々に充填されるか、または粉末として一緒に凍結乾燥 され、単一容器中に得られてよい。

両薬剤が溶液形態で投与される場合、それらは、同時投与用輸液／注射システム または縦列装置中に含有されることができる。例えば、血小板凝集阻害剤は、静 脈注射用形態であるか、または、第２輸液バツグ中の線維素溶解剤にチューブを 介して連続して連結した輸液バッグ中にあってよい。かかるシステムを使用して 、患者は、ペプチド阻害剤の初回ポーラス型注射または輸液、次いで、線維素溶 解剤の輸液を受けることができる。

当該ペプチドの薬理活性は以下の試験によって評価された：血栓形成のｉｎ　ｖ ｉｖｏ阻害は、アイケン（Ａ　１ｋｅｎ）らのプロスタグランジンズ（Ｐ　ｒｏ ｓｔａｇｌａｎｄｉｎｓ）、１９．６２９−４３　（１９８０）に開示されてい る方法に従って、麻酔したイヌへのペプチドの輸液の全身系作用および血流力学 的作用を記録することによって示される。

血小、板凝集の阻害 ナイーブな雑種イヌの成体から血液を収集した（凝血を予防するためにクエン酸 塩添加した）。室温にて１５０Ｘｇで１０分間の遠心によって、高血小板血漿、 ＰＲＰを調製した。８００Ｘｇで１０分間、ＰＲＰを遠心することによって洗浄 した血小板を調製した。得られた細胞ペレットを、Ｃａ＋　４を含まないタイロ ード緩衝液（ｐＨ６，５）中で２回洗浄し、次いで、１．８１１ＭＣａ←を含有 するタイ口□　−ド緩衝液（ｐＨ７，４）中に３Ｘ１０’細胞／ｍｌで再懸濁し た。ペプチドを添加し、その３分後に、血小板凝集の全てのアッセイにおける作 動薬を添加した。最終作動薬濃度は、０，１ユニツト／ＩＩｌトロンビンおよび ２１１Ｍ　ＡＤＰ　（シグマ（Ｓ　ｉｇｍａ））であった。クロノ−ログ・ルミ −アブレボメーター（Ｃｈｒｏｎｏ−ＬｏｇＬ　ｕｍｉ　−Ａ　ｇｇｒｅｇｏｍ ｅｔｅｒ）で凝集をモニターした。作動薬の添加の５分後の光透過度を使用して 、式９％凝集＝［（９０−ＣＲ）十（９０−１０）］Ｘ１００に従ってパーセン ト凝集を算出した［ここで、ＣＲはチャートの測定値、９０は基線、１０はＰＲ Ｐブランク測定値である］。［凝集の％阻害］対［ペプチドの濃度］をプロット することによってＩＣ１ｏを決定した。ペプチドを２００ａ＋Ｍでアッセイし、 ２の因子によって連続希釈して好適な用Ａ応答曲線を確立した。

血漿プロテアーゼに対するペプチドの安定性を評価するために、作動薬の添加前 に、ＰＲＰ中でペプチドを（３分間よりもむしろ）３時間インキュベートした。

ＡＤＰによる刺激に応答してイヌ血小板の凝集を阻害する能力について化合物を アッセイした。実施例１〜５．１２〜１３および１５の化合物は約０．１〜１゜ ０μＭの範囲のＩＣ，。を有し：実施例６〜９．１１．１９〜２１．２６および ２７の化合物は約２〜４０μＭのＩＣ，。を有し、実施例１０の化合物は２００ ＭＭを越えるＩＣ５゜を有した。実施例５の化合物は好ましい化合物である。

以下の実施例は、如何なる場合も本発明の範囲を限定するものではなく、本発明 の化合物の製造方法および使用方法を説明するものである。多（の他の具体例は 、当業者に容易に明らかであり、入手可能である。

実施例 以下の実施例では、全ての温度は摂氏である。アミノ酸分析はディオネックス・ オートイオン（Ｄｉｏｎｅｘ　ａｕｔｏｉｏｎ）　１００によって行われた。ペ プチド含量についての分析はアミノ酸分析に基づく。質量スペクトルは高速原子 衝撃を使用してＶＧＺａｂ質量分光計によって行われた。薄層クロマドグフィー のためにＥＭシリカゲル薄層（０，２５，、）プレートを使用した。ＯＤＳはオ クタデシルシリルンリカゲルクロマトグラフィー支持体を表す。溶離液組成物を 表すために使用される略語は、ｎ−ＢｕＯＨ：ｎ−ブタノール、ＨＯＡｃ：酢酸 、Ｈ２Ｏ：水、ＥｔＯＡｃ：酢酸エチル、１−ＰｒｏＨ：イソプロパノール、Ｐ ：ピリジンおよびＣＡ：クロロ酢酸である。ＨＰＬＣは、イソクラティック勾配 モードまたは連続勾配モードのいずれかにおいてＣＲＩＢ記録積分器を有するベ ックマン（Ｂｅｃｋｍａｎ）　３４４勾配クロマトグラフイーシステムによって 行われた。ウルトラスフェア（Ｕｌｔｒａｓｐｈｅｒｅ”）およびウルトラスフ ェア（Ｕｌｔｒａｓｐｈｅｒｅ’）　ＯＤＳは、各々、カリファルニア州フラー トンのベックマン・インストウルメンツ・インコーホレイテッド（Ｂｅｃｋｍａ ｎ　Ｉｎｓｔｒｕｍｅｔｓ　Ｉｎｃ、）によって製造されたシリカゲルおよびオ クタデシルシリルンランクロマトグラフィー支持体である。ダイナマックス（Ｄ ｙｎａｍａｘ’）およびダイナマックス（Ｄｙｎａｍａｘ’）　Ｃ１８シリカゲ ルおよびオクタデンルシランクロマトグラフィー支持体は、各々、マサチューセ ッツ州つバーンのレイニン・インストゥルメンツ・カンパニー（Ｒａｉｎｉｎ　 Ｉ　ｎｓｔｒｍｅｎｔｓＣＯｌ）によって製造された。セファデソークス（Ｓ　 ｅｐｈａｄｅｘ）は、ニューシャーシー州ビス力タウエイのファルマシア・ファ イン・ケミカルズ（Ｐｈａｒｍａｃｉａ　ＦｉｎｅＣｈｅＩｌｉｃａｌｓ）によ って製造された架橋結合ポリ（デキストラン）である。セライト（ＣｅＨｔｅ’ ）は、コロラド州デンバーのマンスヴイル・コーポレーション（Ｍａｎｓｖｉｌ ｌｅ　Ｃｏｒｐ、　）によって製造された酸洗浄珪藻土シリカからなる濾過助剤 である。固相ペプチド合成法は、自動ベックマン（Ｂｅｃｋｍａｎ）　９９０合 成器を使用して行われた。示される場合、ペプチドの純度は、ＨＰＬＣクロマト グラムの積分に基づいている。ＭｅＡｒｇは、米国特許第４，６８７，７５８号 （１９８７）においてアリ（Ａｌｔ）らによって開示されている方法によって製 造された。

Ｇ　］　ｙ　（ＯＭｅ）−塩酸塩（６，３９，５Ｑｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ　（ １００１１）中冷懸濁液にＤＩＥＡ　（１９，３ｍＬ　１１０ｍｍｏｌ）を滴下 して中性ｐＨ１：、した。次イテ、ＨＯＢｔ　（７，４９，５５ｍｍｏｌ）およ びＢｏｃ−Ｎ’ＭｅＡｒｇ（Ｔｏｓ）（２２，１ｑ、５０＋ｔｍｏｌ）を添加し た。反応混合物を数分間撹拌し、次いで、０℃でＥＤＣ（１０，５５９，５５ｍ ｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温に加温し、撹拌を一夜続けた。溶媒を真 空下で除去し、残留物を酢酸エチルおよび水に分配させた。有機抽出物をＩＮ　 ＨＣＩ（３ｘ）、水（３×）、１０％Ｎａ２ＣＯｓ　（３Ｘ）、水（３×）およ び飽和塩溶液（１×）で連続して洗浄した。有機抽出物を無水硫酸ナトリウムで 乾燥し、濾過し、次いで、標記化合物を白色固体に濃縮した（２１．５４９．８ ４％）。

ｂ）Ｎ’ＭｅＡｒｇ（Ｔｏｓ）−ＧＩ　ｙ（ＯＭｅ）（２）室温で４５分間、Ｂ ｏＣ−Ｎ’ＭｅＡｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｇｌｙ（ＯＭｅ）（１）（２６ｇ、５ｍｍｏ ｌ）を塩化メチレン中５０％ＴＦＡで処理した。溶媒を除去し、残留物を塩化メ チレンから数回蒸発させて痕跡量のＴＦＡを除去した。残留物をエーテルと一緒 に粉砕し、さらなる精製を行わずに次工程に使用した。

ｃ）Ｎ’（２−メチル）ベンゾイル−Ｎ’ＭｅＡｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｇｌｙ（ＯＭ ｅ）（３）Ｎ’ＭｅＡ　ｒ　ｇ（Ｔ　ｏ　５）−Ｇ　１　ｙ（ＯＭｅ）　（２） 　（５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ　（１０ｍＡ’）中冷溶液にＤＩＥＡ（１，９２ｇ、 ３．５ＮＺ）を添加してｐＨを中性（ｐＨ７，５〜８゜０）にした。ＨＯＢｔ　 （７４５ｍ＋９）を添加し、次いで、無水２−メチル安息香酸（５，５ｍｍｏｌ ）　（２−メチル安息香酸１．３７９およびＤＣＣ１，３９から製造した）を添 加した。反応混合物を室温で一夜撹拌した。溶媒を真空下で除去し、残留物を酢 酸エチル（１２０＊Ｊ）に溶解し、水（３Ｘ４０ｍＡ’）、１０％炭酸ナトリウ ム（２Ｘ４０ｍｌ）、水（２Ｘ４０■ｌ）および飽和塩溶液で連続して洗浄した 。有機抽出物を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、次いで、濃縮して標記化 合物を白色の綿毛状固体として得た（２．２９）。

ｄ）Ｎ”（２−メチル）ベンゾイル−Ｎ”ＭｅＡｒｇ（Ｔｏｓ）−ＧＩ　ｙ　（ ４）Ｎ’（２−メチル）ベンゾイル−Ｎ’ＭｅＡｒｇ（Ｔｏｓ）−ＧＩ　ｙ（Ｏ Ｍｅ）（３）（２，２１，４、ｌ　ｍｏｌ）のメタノール（１０＋＋１）中溶液 にＩＮ　ＮａＯＨ（５＋＋Ａ’。

５ｍｍｏｌ）の溶液を滴下した。反応混合物を室温で１時間撹拌してエステル加 水分解を完了した。溶媒を除去し、残留物を水（５０，Ｎ）に再溶解し、酢酸エ チルで逆抽出し、３ＮＨＣ１＋で酸性ｐ）（（２，８６）に酸性化した。酸性溶 液を酢酸エチルで抽出し、有機層を水で２回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥 し、濾過し、次いで、濃縮して標記化合物を白色の綿毛状固体として得た（１． ５３９）。

ｅ）Ｂｏｃ−Ａｓｐ（０−ｃＨｅｘ）−（２−メチル）フェニルアミド（５）Ｂ ｏｃ−Ａｓｐ（０−ｃＨｅｘ）（３，２９，１０ＩＩＩＩＩｌｏ１）のＴＨＦ　 （５０ｍＡ’）およびＮ−メチルモルホリン（１，２１＊Ｌ　１−１　ｏｏａｏ ｌ）中冷溶液にクロロギ酸イソブチル（１，４３ｄ、　１１ｍｍｏｌ）を滴下し た。反応混合物を数分間撹拌し、次いで、２−メチルアニリン（１，１７ｍ１． １１　ｍｍｏｌ）のＴＨＦ　（５，０＋＋４り中溶液を添加した。反応混合物を 室温に加温し、１８時間撹拌した。反応が完了した後（ＴＬＣモニターした）、 反応混合物を濃縮乾固した。残留物を酢酸エチル（３００＋ｌ）に溶解し、５％ クエン酸水溶液（３×）、水（３Ｘ）、１０％ＮａＨＣＯｓ水溶液（３×）、水 （３×）および飽和塩溶液（１×）で連続して洗浄した。有機抽出物を乾燥しく 無水Ｎａ２５Ｏ４）、濾過し、次いで、茶色がかった固体に濃縮した。それをエ ーテル−ヘキサンから再結晶して標記化合物（１，７ｇ）を得た。

ｆ）Ａｓｐ（０−ｃＨｅｘ）−（２−メチル）フェニルアミド（６）Ｂｏｃ−Ａ ｓｐ（０−ｃＨｅｘ）−（２−メチル）フェールアミド（５）　（１，２ｇ、３ 　ｍｍｏｌ）を、室温で４５分間、塩化メチレン（１０＋Ｊ）中５０％ＴＦＡ溶 液で処理した。溶媒を除去し、残留物を塩化メチレンから数回蒸発させて痕跡量 のＴＦＡを除去した。エーテルの添加によって、生成物をそのＴＦＡ塩として沈 殿させた。固体を収集し、風乾した。

Ａｓｐ（０−ｃＨｅｘ）−（２−メチル）フェニルアミド（６）　（３＋ｏｎ＋ ｏｌ）のＤＭＦ　（５＋＋１）中冷溶液にＤ　Ｉ　ＥＡ　（１，２ｍｌ、６．６ ｍｍｏｌ）を添加してｐＨを中性にした。次いで、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリア ゾール（５０１１Ｉｇ、３　、３１１１１０１）を添加し、次いでＤＭＦ　（５ ｍＡ’）中のＮ’（２−メチル）ベンゾイル−Ｎ’ＭｅＡｒｇ（Ｔｏ　５）−Ｇ 　Ｉ　Ｖ　（１，５３ｇ、２　、９６　ｗ＋ｏｌ）を添加した。反応を冷所で数 分間撹拌し、次いで、Ｎ−エチル−Ｎ゛−（ジメチルアミノプロピル）カルボジ イミド（ＥＤＣ）　（６３３ｍｑ、３．３ｍａ＋ｏｌ）を滴下した。反応混合物 を室温に加温し、１８時間撹拌した。反応混合物を濃縮乾固した。油状残留物を 酢酸エチル（１０Ｑ＋＋１）に溶解し、水（３Ｘ４０ｍＡ’）、５％クエン酸水 溶液（２ｘ４０ｍｚ）、水（２Ｘ４Ｑ＋＋／）、１０％ＮａＨＣＯｓ水溶液（２ Ｘ４（ｂ／）、水（３Ｘ４０ｍｌ）および飽和塩溶液（ＩＸ４０ｍｌ）で連続し て洗浄した。有機抽出物を乾燥しく無水ＮａｚＳＯｓ）、濾過し、次いで、濃縮 して、質量スペクトルによって支持された標記化合物（１，５９，７１％）を得 た。

保護された直線状ペプチド（−７）（１，４３９）を、０℃で１時間、アニソー ル（３ｍ／）の存在下、無水ＨＦ　（３０ｍｌ）で処理した。真空下、０℃でＨ Ｆを除去し、残留物をエーテルと一緒に粉砕して油状物を得た。残留物を０．２ Ｍ酢酸に溶解し、エーテルで数回洗浄し、凍結乾燥して粗製ペプチド（１，１３ ９）を得た。

ゲル濾過（セファデックス（Ｓｅｐｈａｄｅｘ’）　Ｇ−１５，１％酢酸／水） によってアリコツトを精製した。適当な画分を溜め、凍結乾燥して半精製ペプチ ド（１０９１１９）を得た。半精製ペプチドのアリコツト（２５ｓ＋）を半分数 ＨＰＬＣ（５μ、アルテックス・ウルトラスフェア（Ａｌｔｅｘ　Ｕｌ、ｔｒａ ｓｐｈｅｒｅ’）　ＯＤＳ、　Ｉ　Ｑ＋＋＋＋Ｘ　２５ｃｍ、イソクラティック 、Ａ、アセトニトリル、Ｂ：水−０，１％トリフルオロ酢酸、２０％アセトニト リル、２２０ｎｍでＵＶ検出）によって精製して精製された標記化合物（２０ｕ ）を得た。ＭＳ　（ＦＡＢ）ｍ／ｅ　５６８．１　［Ｍ＋Ｈ］”；ＨＰＬＣｋ’ 　１０．９３　（５μアルテツクス・ウルトラスフェア（ＡｌｔｅｘＵｌｔｒａ ｓｐｈｅｒｅ″）　ＯＤＳ、勾配、Ａニアセトニトリル、Ｂ：水−０，１％トリ フルオロ酢酸、２０分以内で１０％〜５０％アセトニトリル、２２０ｎｍでＵＶ 検出）、ｋ’　６．１７　（５μアルテツクス・ウルトラスフェア（ＡＬｔｅｘ 　Ｕｌｔｒａｓｐｈｅｒｅ＋）ＯＤＳ、イソクラティック、２０％アセトニトリ ル／水−０，１％トリフルオロ酢酸、２２０ｎｍでＵＶ検出）；アミノ酸分析： Ａｓｐ　（１，００）、Ｇｌｙ（０，９７）。

実施例２ Ｎ′ベンゾイル−Ｎ’ＭｅＡｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−フェニルアミド（１５）の Ｂｏｃ−Ａｓｐ（０−Ｂｚ　］）（３，２３ｖ、１０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ　（８ ＋＋Ａ’）中冷溶液にアニリン（７３３μｌ、８關０１）、ＨＯＢｔ　（１，５ ９９，１，３モル当量）およびＤＴＥＡ（２８０μｌ）を添加した。反応混合物 を数分間撹拌し、ＥＤＣ（１，９２９，１０ｍｗｏｌ）を添加した。反応混合物 を室温に加温し、−夜撹拌した。

反応混合物を濃縮し、残留物を酢酸エチルに溶解し、水、ＩＮ塩酸（２×）、水 、５％重炭酸ナトリウム、水および飽和塩化ナトリウムで連続して洗浄した。有 機抽出物を乾燥しく無水ＮａｔＳＯ４）、濾過し、次いで、濃縮して標記化合物 を得た（２．４５９．７６％）。

ｂ）Ａｓｐ（○−Ｂｚｌ）−フェニルアミド（１０）Ｂｏｃ−Ａｓｐ（０−Ｂｚ 　Ｉ）−フェニルアミド（９）　（２，４３９，５、ｌ　ｍｍｏｌ）を、室温で ４５分間、塩化メチレン（２０ｍｌ）中５０％ＴＦＡ溶液で処理した。

溶媒を除去し、残留物を塩化メチルから数回蒸発させて痕跡量のＴＦＡを除去し た。エーテルの添加によって、生成物をそのＴＦＡ塩として沈殿させた。固体を 収集し、風乾して標記化合物を得た（３．３６９）。

ｃ）Ｂｏｃ−Ｎ’ＭｅＡｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｇａｙ　（１１）Ｂ　ｏ　ｃ−Ｎ’Ｍ ｅＡ　ｒ　ｇ（Ｔｏ　５）−Ｇ　］　ｙ（ＯＭｅ）　（１）　（１４，８９，２ ８，８ｍｍｏｌ）のアセトン（６０ｍＡ）中溶液にＩＮ　ＮａＯＨ（３５ｗＬ　 １．２当量）を滴下した。エステル加水分解を完了させるために反応混合物を室 温で１時間撹拌した。溶媒を除去し、残留物を水（５０＋＋１）に再溶解し、酢 酸エチルで逆抽出していずれの未反応エステルも除去し、３ＮＨＣ１で酸性化し た（ｐＨ２，８６）。酸性溶液を酢酸エチルで抽出し、有機層を水（２×）で洗 浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、次いで、濃縮して標記化合物を白 色綿毛状固体として得た（１０．５３９．７３％）。

Ａｓｐ（０−ＢＺｌ）−フェニルアミド（１０）　（６，１ｍ＋１ｏｌ）のＤＭ Ｆ　（７，５＋＋１）中冷溶液にＤＩＥＡ（１６０μ／、１．５当量）を添加し てｐＨを中性にした。

Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１：２１ｇ、７　、９　ｉ＋ｍｏｌ）を添 加し、次いで、ＤＭＦ　（５ｆｆｉ／）中のＢｏ　ｃ−Ｎ’ＭｅＡ　ｒ　ｇ（Ｔ ｏ　５）−Ｇ　ｌ　ｙ　（３，６６９，７，３２ｍｍｏｌ）を添加した。反応を 冷所で数分間撹拌し、ＥＤＣ（１，４９，７，３２ｍｍｏｌ）を滴下した。反応 混合物を室温に加温し、１８時間撹拌した。反応混合物を濃縮乾固した。油状残 留物を酢酸エチル（１２５，Ｚ）中に取り、水（３Ｘ４０ｍｌ）、ＩＮ塩酸（２ Ｘ　４ｆｆｉ　ｍｌ＞、水（２Ｘ４０ｍ／）、５％ＮａＨＣＯｓ水溶液（２Ｘ４ ０ｍ／）、水（３Ｘ４０冨ｌ）および飽和塩溶液（ＩＸ４０＋＋／）で連続して 洗浄した。有機溶媒を乾燥しく無水ＮａｚＳＯ＜）、濾過し、次いで、濃縮して 標記化合物を得た（４．５３９．９５％）。

Ｂｏｃ−Ｎ’ＭｅＡｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｇｌｙ−Ａｓｐ（０−Ｂｚ　Ｉ）−フェニ ルアミド（１２）（２，４５９，３，１４ｍｍｏｌ）を、室温で４５分間、塩化 メチレン（２Ｑｍｊ’）中５０％ＴＦＡで処理した。溶媒を除去し、残留物を塩 化メチレンから数回蒸発させて痕跡量のＴＦＡを除去した。残留物をエーテルと 一緒に粉砕して標記化合物のＴＦＡ塩を得た（２．７２ｇ）。

Ｎ’ＭｅＡ　ｒ　ｇ（Ｔｏ　５）−Ｇ　ｌ　ｙ−Ａ　ｓ　ｐ（０−Ｂ　ｚ　］　 ）−フェニルアミド（１３）（９７０ｉｇ、１　、１２　ｍｍｏｌ）のＤＭＦ　 （２，Ｑ＊／）中溶液にＤＩＥＡ（２９３μｔ、１５当量）を添加してｐＨを中 和した（７．０）。次いで、塩化ベンゾイル（１３７μｌ、　１．１８ｍｍｏｌ ）を添加した。反応混合物を２時間撹拌した。溶媒を真空下で除去し、残留物を 酢酸エチル（７５ｍＡ’）中に取り、水（３ｘ４０＋＋１）、ＩＮ塩酸（２Ｘ４ ０ｍｌ）、水（２Ｘ４０＠ｌ）、５％ＮａＨＣＯ３水溶液（２Ｘ４０ｍｌ）、水 （３Ｘ４Ｑ＋＋Ａ）および飽和塩溶液（ＩＸ４０ｍｌ）で連続して洗浄した。有 機溶媒を乾燥しく無水Ｎａ２５Ｏ＜）、濾過し、次いで、濃縮して粗製ペプチド （０，６９９）を得た。ペプチドをフラッシュクロマトグラフィー（ンリカ、２ ．５％メタノール／酢酸エチル）によって精製して標記化合物を得た（２７０１ ９）。

保護された直線状ペプチド（１４）（１８４−９）を、０℃で１時間、アニソー ル（１ｍＡりの存在下、無水ＨＦ（Ｌｏｗｌ）で処理した。真空下、０°ＣでＨ Ｆを除去し、残留物をエーテルと一緒に粉砕した。残留物を０．２Ｍ酢酸に溶解 し、エーテルで数回洗浄し、凍結乾燥して粗製ペプチドを得た（１０８ｍｗ）ｅ ペプチドを、フラッシュクロマトグラフィー（シリカＯＤＳ、１０〜２０％アセ トニトリル／水−０，１％ＴＦＡの勾配液）によって精製して標記ペプチドを得 た（７１　ｍｑ）。ＭＳ　（ＦＡＢ）ｍｌｅ　５４０　［Ｍ＋Ｈ］”；ＨＰＬＣ ｋ’　４．４４　（５μアルテックス−ウルトラスフェア（Ａｌｔｅｘ　Ｕｌｔ ｒａｓｐｈｅｒｅ”）　ＯＤＳ、勾配、Ａニアセトニトリル、Ｂ：水−０，１％ トリフルオロ酢酸、１５分以内で１０％〜５０％アセトニトリル、２２０止でＵ Ｖ検出）；アミノ酸分析：Ａｓｐ　（１，００）、ｃｒｙ　（１，０８）。

Ｎ’ＭｅＡ　ｒ　ｇ（Ｔｏ　ｓ）　−Ｇ　ｌ　ｙ−Ａ　ｓ　ｐ（０−Ｂ　ｚ　Ｉ ）−フェニルアミド（１３）（８７０１９、ｌ　ｍ＋ａｏｌ）のＤＭＦ　（２， ０ｍｌ’）中溶液にＤＩＥＡ　（２６１１’、１゜５当量）を添加して中性ｐＨ （７，０）を得た。次いで、無水酢酸（１００μ１１１　、０５　ｍｍｏｌ）を 添加した。反応混合物を３０分間撹拌した。溶媒を真空下で除去し、残留物を酢 酸エチル（７５＋＋７）に溶解し、水（３Ｘ４（ｂｌ）、ＩＮ塩酸（２Ｘ４Ｑ＋ ＋１）、水（２Ｘ４０＋＋１’）、５％ＮａＨＣＯｓ水溶液（２Ｘ４０＋１）、 水（３×４０１１）および飽和塩溶液（ＩＸ４０ｍＡ’）で連続して洗浄した。

有機溶媒を乾燥しく無水Ｎａ２ｓＯ４）、濾過し、濃縮して標記化合物を得た（ ０．５７ｖ、７９％）。

ｂ）Ｎ’アセチルＮ’ＭｅＡｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−フェニルアミド（１７）保 護された直線状ペプチド（１６）（５６５１９，７８０ｍｌａｏｌ）を、０℃で １時間、アニソール（１ｄ）の存在下、無水ＨＦ（１０＋＋１＋）で処理した。

真空下、０℃でＨＦを除去し、残留物をエーテルと一緒に粉砕した。残留物を０ ．２Ｍ酢酸中に取り、エーテルで数回洗浄し、凍結乾燥して粗製ペプチド（３０ ０−９）を得た。ペプチドをゲル濾過（セファデックス（Ｓｅｐｈａｄｅｘｌｌ ）　Ｇ−１５，１％酢酸／水）によって精製した。適当な画分を溜め、凍結乾燥 して半精製ペプチド（２４１禦ｇ）を得た。ペプチドをフラツシュクロマトグラ フィ−（シリカＯＤＳ、５％アセトニトリル／水−０，１％ＴＦＡ）によってさ らに精製して標記化合物（２３６Ｑ）を得た。ＭＳ　（ＦＡＢ）ｍｌｅ　４７８ ．２　［Ｍ十Ｈ］”；ＨＰＬＣｋ’２．７１（５μアルテツクス・ウルトラスフ ェア（Ａｌｔｅｘ　ＵｌｔｒａｓｐｈｅｒｅＲ）　０ＤＳ１勾配、Ａニアセトニ トリル、Ｂ：水−０，１％トリフルオロ酢酸、１５分以内で１０％−５０％アセ トニトリル、２２０ｎｍでＵＶ検出）；アミノ酸分析。

Ａｓｐ　（１，００）、Ｇｌｙ（１，０２）。

実施例４ Ｎ６アセチル−Ｎ’ＭｅＡ　ｒ　ｇ−Ｇ　］　Ｖ−Ａ　ｓ　ｐ−（２−カルボキ シ）−フェニルアミド（１８）の調製 １、Ｑｍｍｏｌｍｍ−ルについて以下の方法に従って、保護されたテトラペプチ ド樹脂Ｂｏ　ｃ−Ｎ’ＭｅＡ　ｒ　ｇ（Ｔｏ　５）−Ｇ　ｌ　ｙ−Ａ　ｓ　ｐ（ ０−ｃＨｅ　ｘ）−２−アミ７′安息香酸（０−Ｂｚｌ−樹脂）を調製した。

カルボキシル末端から開始して所望の配列が得られるまで保護アミノ酸を連続し て添加した。アルファーアミノ基の保護のためにｔ−ブチルオキシカルボニル（ Ｂｏｃ）基を使用した。側鎖官能基を以下のとおり保護した・アルギニン、トノ ル（Ｔｏｓ）；アスパラギン酸、シクロヘキシルエステル（０−ｃＨｅ）：）。

塩化メチ１２９５０％トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）での処理によってＢｏＣ基の 除去を行った。塩化メチレン中７％ジイソプロピルエチルアミン（Ｄ　Ｉ　ＥＡ ）での処理によってアミン−ＴＦＡ塩の中和を行った。ＤＭＦ中の３当量のＢｏ ｃ−アミノ酸および３当量の１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）な らびに塩化メチレン中の３当量のジシクロへキノルカルボジイミド（Ｄ　ＣＣ） を使用して成長ペプチドにアミノ酸を結合させた。ニンヒドリン試験によって結 合の完成度を検査し、所望により結合を繰り返した。正のニンヒドリン試験が不 完全な結合を示した場合、ＢＯＰ試薬を使用して再結合を達成した。一般的なプ ロトコールを以下に挙げる。

１、塩化メチレンで洗浄　１Ｘ１分 ２．５０％ＴＦＡで洗浄　１Ｘ１分 ３．５０％ＴＦＡで脱ブロック　ｌＸ２０分４　塩化メチレンで洗浄　６Ｘ１分 ５．７％ＤＩＥＡで中和　３Ｘ２分 ６、塩化メチレンで洗浄　４Ｘ１分 ７、ジメチルホルムアミドで洗浄　２Ｘ１分８、ＤＭＦ中のＢｏｃ−ＡＡ　＋　 ＨＯＢｔ　排水しない９、塩化メチレン中ＤＣＣ２時間 １０、ジメチルホルムアミドで洗浄　２Ｘ１分１１、塩化メチレンで洗浄　３Ｘ １分 ギシン（Ｇｉｓｉｎ）の方法［ヘルベチカ・シミ力・アクタ（Ｈｅｌｖ、　Ｃｈ ｅｗ、　Ａｃｔａ）、５６．１４７６　（１９７３）］に従って、ＢｏＣ−２− アミノ安息香酸セシウムおよびクロロメチル樹脂からＢｏｃ−２−アミノ安息香 酸−（〇−樹脂）を調製した。Ａｓｐの付加のために工程１で合成を開始した。

塩化メチレン中５０％ＴＦＡでＮ−末端ＢｏＣ基を除去し、得られたＴＦＡ塩を 塩化メチレン中７％ＤＩＥＡで中和した後、樹脂結合ペプチドを、無水酢酸：ピ リジン・塩化メチレン（１：　１　：　２．２０．１＞で３０分間アセチル化し て保護されたペプチド−樹脂中間体（１，６４９）を得た。

０℃で５０分間、アニソール（１ｗ／）の存在下、無水液体ＨＦ（１（ｂｌ）で の処理によって側鎖保護基の除去とともに樹脂からペプチドを切断した。真空下 でＨＦを除去し、樹脂をエチルエーテルで洗浄し、風乾した。次いで、樹脂を１ ％酢酸／水（２Ｘ３０ｍＡ’）で抽出し、次いで、凍結乾燥して粗製ペプチド２ ００１＋９を得た。半分数ＨＰＬＣ（５μＶｙｄａｃ、２ｃｍＸ２５ｃｍ、イソ ラフティック、１０％アセトニトリル／水−領１％トリフルオロ酢酸、３００ｎ ＩＩｌでＵＶ検出）によってアリコツト（５０■ｇ）を精製して標記化合物（２ ０，０１９）を得た。ＭＳ（ＦＡＢ）ｍ／ｅ　５２２　［Ｍ十Ｈ］”；ＨＰＬＣ ｋ’　６．７　（５μＶｙｄａｃ、ステップ勾配、Ａニアセトニトリル、Ｂ：水 −０，１％トリフルオロ酢酸、５分以内で１％〜５％アセトニトリル、２５分以 内で５〜１０％、３００ｎｌａでＵＶ検出）】アミノ酸分析：Ａｓｐ　（１，０ ０）、Ｇｌｙ　（１，０４）。

実施例５ Ｎｏ（２−メチルチオ）ベンゾイルＮ’ＭｅＡｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−（２−メ チルＢｏｃ−Ａｓｐ（０−ｃＨｅｘ）（６３０ｇ＋９．２ｕｍｏｌ）およびＮ− メチルモルホリン（２４２ｍｇ、１．２モル／当量）のＴＨＦ　（１０ｍＡ’） 中冷溶液にクロロギ酸イソブチル（３１１μ！、１．２モル／当量）を滴下した 。反応混合物を数分間撹拌し、２−メチルメルカプトアニリン（２９５票９．１ ．２モル／当量）の溶液を添加した。反応混合物を室温に加温し、１８時間撹拌 した。反応が完了した後（ＴＬＣモニターした）、反応混合物を濾過し、濾液を 蒸発乾固した。得られた残留物を酢酸エチルに溶解し、５％クエン酸水溶液（３ ×）、水（３×）、１０％ＮａＨＣＯｓ水溶液（３×）、水（３×）および飽和 塩化ナトリウム水溶液（ＩＸ）で連続して洗浄した。有機抽出物を乾燥しく無水 に２ＣＯ３）、濾過し、次いで、濃縮して標記化合物を得た（８６０−ｇ）。

ｂ）Ａｓｐ（０−ｃＨｅｘ）−（２−メチルチオ）フェールアミド（２０）Ｂｏ ｃ−Ａｓｐ（０−ｃＨｅｘ）−（２−メチルチオ）フェールアミド（１９）（８ ６０−９）を、室温で６０分間、塩化メチレン（１０ｍｌ）中５０％ＴＦＡ溶液 で処理した。溶媒を除去し、残留物を塩化メチレンから数回蒸発させて痕跡量の ＴＦＡを除去し、次いで、エーテルと一緒に粉砕して標記化合物のＴＦＡ塩を得 た。

Ａｓｐ（０−ｃＨｅｘ）−（２−メチルチオ）フェニルアミド（１，９７ｍｍｏ ｌ）　（２０）のＤＭＦ　（２１＋７’）中冷溶液にＤＩＥＡ　（３４３μ／） を添加してｐＨを中性にした。次いで、Ｎ−ヒドロキシ−ベンゾトリアゾール（ ３２０１１９，２，３７＋ｎ＋ｏｌ）を添加し、次いで、Ｂｏａ−Ｇｌｙ　（３ ８０ｍ＋９．２．１７ｍａ＋ｏｌ）を添加した。反応を冷所で数分間撹拌し、Ｅ ＤＣ（４１６ｕ、２．１７ｗｏｌ）を滴下した。

反応混合物を室温に加温し、１８時間撹拌した。反応混合物を濃縮乾固した。得 られた残留物を酢酸エチルに溶解し、１０％にＩＣＯ，、水（ｌ×）、５％クエ ン酸（１×）、水（２ｘ）および飽和ＮａＣ１溶液（１×）で連続して洗浄した 。有機抽出物を乾燥しく無水ＮａｚＳＣＬ）、濾過し、次いで、濃縮して標記化 合物を得た　（７７０肩ｇ）。

ｄ）Ｇｌｙ−Ａｓｐ（０−ｃＨｅｘ）−（２−メチルチオ）フェニルアミド（２ ２）Ｂｏｃ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ（０−ｃＨｅｘ）−（２−メチルチオ）フェニルア ミド（２１）（７７０哩）を、室温で６０分間、塩化メチレン（５薦ｌ）中５０ ％ＴＦＡ溶液で処理した。溶媒を除去し、残留物を塩化メチレンから数回蒸発さ せて痕跡量のＴＦＡを除去した。残留物をエーテルと一緒粉砕して標記化合物の ＴＦＡ塩を得ｔこ（６０９，５富９）。

Ｇａｙ−Ａｓｐ（０−ｃＨｅｘ）−（２−メチルチオ）フェニルアミド（２２） （５９４Ｍ９．１．１７ｍ＋ｏｌ）のＤＭＦ　（２ｆｆｉｌ）中冷溶液にＤＩＥ Ａ（２０４μＩ）を添加してｐＨを中性にした。Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾ ール（１９（ｂｖ、１．４ｍｍｏｌ）を添加し、次いで、Ｂｏｃ−Ｎ’ＭｅＡｒ ｇ（Ｔｏｓ）（５７０ｍｇ、１．２９ｍｍｏｌ　）を添加した。反応を冷所で数 分間撹拌し、ＥＤＣ（２４７１９，１，２９ｍｍｏｌ）を滴下した。反応混合物 を室温に加温し、１８時間撹拌した。反応混合物を濃縮乾固した。得られた残留 物を酢酸エチルに溶解し、１０％ＫｚＣＯｓ　（２Ｘ）、水（１×）、５％クエ ン酸（３×）、水（２×）および飽和ＮａＣ１溶液で連続して洗浄した。有機抽 出物を乾燥しく無水Ｎａ２　Ｓ　Ｏ４）、濾過し、次いで、濃縮して標記化合物 を得た（９２０吋）。

ｆ）Ｎ’ＭｅＡｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｇｌｙ−Ａｓｐ（０−ｃＨｅｘ）−（２−メチ ルチオ）−フェニルアミド（２４） Ｂｏｃ−Ｎ’ＭｅＡｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｇｌｙ−Ａｓｐ（０−ｃＨｅｘ）−（２− メチルチオ）−フェニルアミド（２３）（９２０−９）を、室温で６０分間、塩 化メチレン（５ｍ／）中５０％ＴＦＡ溶液で処理した。溶媒を除去し、残留物を 塩化メチレンから数回蒸発させて痕跡量のＴＦＡを除去し、次いで、エーテルと 一緒に粉砕して標記化合物のＴＦＡ塩を得た（６３５．５１９）。

ｇ）２−メチルメルカプト安息香酸（２５）２−メルカプト安息香酸（５９，３ ２，５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ　（３０ｍ／）およびトリエチルアミン（５，４ｍＡ ）中冷溶液にＴＨＦ　（２ｍＡ’）中ヨウ化メチル（２，２翼Ｉ）を滴下した。

反応混合物を、冷所で、不活性雰囲気下、１８時間撹拌した。トリエチルアミン 塩を濾過し、濾液を濃縮乾固した。残留物を酢酸エチル（１２５，１）に溶解し 、５％クエン酸（２×）、水（３×）および飽和ＮａＣ１溶液で連続して洗浄し た。有機抽出物を乾燥しく無水Ｍｇ５Ｏ４）、濾過し、次いで、濃縮して標記化 合物を固体として得た（４．０９）。

ｈ）Ｎ’（２−メチルメルカプトベンゾイル）Ｎ’−ＭｅＡｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｇ ｌ　ｙ−Ａｓｐ（０−ｃＨｅｘ）−（２−メチルチオ）フェニルアミド（２６） Ｎ”ＭｅＡｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｇｌｙ−Ａｓｐ（０−ｃＨｅｘ）−（２−メチルチ オ）フェニルアミド（２４）（６３５肩９．０　、７６０１１１１０１）のＤＭ Ｆ　（２ｍｌ）中冷溶液にＤＩＥＡ（１３３μｌ、１．０当量）を添加してｐＨ を中性にした。Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（３７１１９）を添加し、次 いで、２−メチルメルカプト安息香酸（２５）　（４６３ｕ）を添加した。反応 を冷所で数分間撹拌し、ＥＤＣ（５２８−９）を滴下した。反応混合物を室温に 加温し、２８時間撹拌し、次いで、濃縮乾固した。残留物を酢酸エチルに溶解し 、１０％に２ＣＯ３（２Ｘ）、水（２×）、５％クエン酸（２×）、水（２×） および飽和ＮａＣ１溶液（１×）で連続して洗浄した。有機溶媒を覧燥しく無水 ＮａｚＳＯ４）、＃遇し、次いで、濃縮して粗製ペプチド（１，１９）を得た。

ペプチドをクロマトグラフィー（シリカ、塩化メチレン：メタノール９１）によ って精製してを得た標記化合物（６１０−９）。

ｉ）Ｎ’（２−メチルチオ）ベンゾイル−Ｎ’ＭｅＡｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−（ ２−保護された直線状ペプチド（２６）　（２７０ｍｑ）を、０℃で１時間、ア ニソール（０，５＋＋７）の存在下、無水ＨＦ　（５ｍＡ）で処理した。真空下 、０℃でＨＦを除去し、残留物をエーテルと一緒に粉砕して粗製ペプチド（１７ ９＋＋ｇ）を得た。

ゲル濾過（セファデックス（Ｓ　ｅｐｈａｄｅｘ’）　Ｇ−１５，１％酢酸／水 ）によってアリコツト（１３０ｕ）を精製した。適当な画分を溜め、凍結乾燥し て半精製ペプチド（１０７ｍｗ）を得た。該ペプチドをフラッシュクロマトグラ フィー（シリカＯＤＳ、勾配溶離液、１０〜５０％アセトニトリル／水−０，１ ％ＴＦＡ）によってさらに精製してより純粋なペプチド（７５，４ｕ）を得た。

半分取ＨＰＬＣ（５μアルテツクス・ウルトラスフェア（Ａｌｔｅｘ　Ｕｌｔｒ ａｓｐｈｅｒｅ’）　ＯＤＳ、　Ｉ　Ｑｍｍ×２５ｃ（イソクラティック、２２ ％アセトニトリル／水−０，１％トリフルオロ酢酸、２２Ｏｎ！１でＵＶ検出） による最終精製によって標記化合物を得た。ＭＳ（ＦＡＢ）ｍ／ｅ　６３２　［ Ｍ＋Ｈ］”＋ＨＰＬＣｋ’　７．５　（５μアルテツクス・ウルトラスフェア（ Ａｌｔｅｘ　Ｕｌｔｒａｓｐｈｅｒｅ’）　ＯＤＳ、勾配、Ａニアセトニトリル 、Ｂ：水−０，１％トリフルオロ酢酸、４０分以内で１０％〜５０％アセトニト リル、２２０ｕｍでＵＶ検出）、ｋ’　５．９　（５μアルテツクス・ウルトラ スフェア（Ａｌｔｅｘ　ＵｌｔｒａｓｐｈｅｒｅＲ）　ＯＤＳ、２３％アセトニ トリル／水−０，１％トリフルオロ酢酸、２２０１ｍでＵＶ検出）、アミノ酸分 析：Ａｓｐ　（１，００）、Ｇｌｙアルゴン雰囲気下における５−ヨードペンタ ン酸エチル（１，６６９，６５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ　（２５ｍｊ’）中溶液にカ リウムイミドニ炭酸ｔ−プチルメチルエステル（１，３８９，５、５ｍｍｏｌ） を添加した。得られた混合物を、アルゴン雰囲気下、室温で４時間撹拌した。混 合物をＨｚＯ中に注ぎ、Ｅ　ｂｏ　（３Ｘ　１００　ｘｉりで抽出した。合わせ た有機抽出物をＨｚＯ（３ｘ　５０１／）で洗浄し、次いで、乾燥した（Ｎａ２ ｓＯ４）。減圧下、溶媒を除去し、残留物をフラッシュクロマトグラフィーに付 して２５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンで溶離することによって精製して標記化合物を 無色油状物として得た（２．０９．１００％）。

ｂ）５−［［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］ペンタン酸５ −［Ｎ−（ｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ−（メトキシカルボニル）アミノコペ ンタン酸エチル（２，０９，６，６ｖｉｏｌ）　（７）ＭｅＯＨ（３Ｃ１＋１’ ）　中溝液１：０．９５　ＮＮａＯＨ（３０ｗｌ、２８　、５　ｌ１ｆｆｉａｌ ）を添加し、得られた混合物を室温で撹拌した。

５時間撹拌した後、得られた透明溶液を減圧下で濃縮した。濃縮物を氷酢酸で酸 性化し、混合物をＣＨｘＣｌｘ（３Ｘ　１００＋＋１）で抽出した。合わせた有 機抽出物を乾燥しくＮａ２ＳＯ４）、溶媒を真空内で除去して白色固体を得た（ １．　Ｏｙ、７１％）：融点４５〜４７℃。

ｃ）Ｂｏｃ−Ａｓｐ（０−Ｂｚ　Ｉ）−フェニルアミドアニリン（２，８１ｈｆ 　３０．９ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（４゜Ｏｇ、３０．９ 關ｏ１）の乾燥ＤＭＦ　（３２ｍＪ）中溝液をアルゴン雰囲気下で０℃に冷却し た。この溶液にＨＯＢｔ水和物（４，３ｙ、３２．　Ｏｍｍｏｌ）を添加し、次 イテ、Ｂｏｃ−Ａｓｐ（０−Ｂｚ　Ｉ）（１０，０ｇ、３０　、９　ｍｍｏｌ） を添加した。得られた混合物を、溶解が生じるまで０℃で撹拌し、ＥＤＣ塩酸塩 （５，９９，３ｏ、Ｏｍｍｏｌ）を滴下した。得られた混合物を室温にゆっくり と加温し、２時間撹拌した。

混合物をＨｚＯ（５００Ｈ１＞およびＥｔｏＡｃ（２ｏｏ＠ｌ）に分配させた。

水性相をＥｔＯＡｃ　（２００ｚｌ＞で抽出し、合わせた有機抽出物をＨｚＯ（ ３Ｘ　７５ｚｌ）および飽和ＮａＣＡ’水溶液（７５，１）で連続して洗浄し、 乾燥した（Ｎａ２Ｓ　０４）。

溶媒を真空内で除去し、次いで、残留物を２ｙ％ＥｔＯΔＣ／ヘキサンと一緒に 粉砕した。形成された固体を濾過によって収集して標記化合物を得た（７．７９ ）。

濾液を減圧下で濃縮してさらなる物質を得た（２．３ｙ、合計収率８１％）。

ｄ）Ａｓｐ（Ｂｚ　１）−フェニルアミド・トリフルオロ酢酸塩アルゴン雰囲気 下におけるＢｏｃ−Ａｓｐ（Ｂｚ　］）−フェニルアミド（５，７５ｇ、１４． ４ｖａｏｌ）　（’）１　：　２　ト’Ｊ　フル、ｔｏ酢酸／　ＣｆｈＣｌｘ　 （３０ｍＡ’）中溝液を室温で２時間撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮し、 残留物をＥｔ、０（３ｘ３（ｂ／）で処理し、次いで、蒸発させて白色粉末を得 た（６．　Ｏｙ、１．００％）。

ｅ）Ｂｏｃ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ（Ｂｚｌ）−フェニルアミドアルゴン雰囲気下で０ ℃におけるＡｓｐ（Ｂｚｌ）−フェニルアミド・トリフルオロ酢酸塩（５，９９ ，１４，３ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ中溶液にジイソプロピルエチル７　ミン（１ ，８５９，１４，３ｍｍｏｌ）を添加し、次イテ、ＨＯＢｔ水和物（２，１６ｇ 、１６．０１１１１０１）を添加した。混合物にＢｏｃ−グリシン（２，５９， １４，３ｍｍｏｌ）を添加し、得られた混合物を、溶解が生じるまでＯ’Ｃで撹 拌した。ＥＤＣ塩酸塩（２，７４９，１４，３ｍａ＋ｏｌ）を滴下した。得られ た混合物を室温にゆっくりと加温し、２時間撹拌した。混合物をＨｚＯ（２００ ｍ１Ａ’）およびＥｔＯＡｃ　（１００１／）に分配させた。水性相をＥｔＯＡ ｃ　（１００＠１）で抽出し、合わせた有機抽出物をＨｚＯ（３Ｘ　５０ｍ１） および飽和ＮａＣＡ’水溶’ｇ＆　（４０ｍＡ’）　テ連続シテ洗浄し、乾燥し た（Ｎａ２ＳＯ４）。溶媒を真空内で除去し、残留物をフラッシュクロマトグラ フィーに付して６０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンで溶離することによって精製して白 色固体を得た（２．４ｇ、３８％）。

ｆ）Ｇｌ　ｙ−Ａｓｐ（Ｂｚ　ｌ）−フェニルアミド・トリフルオロ酢酸塩アル ゴン雰囲気下におけるＢｏ　ｃ−Ｇ　］　ｙ−Ａ　ｓ　ｐ（Ｂ　ｚ　］）−フェ ニルアミド（２，４９，５，３ｙｍｏｌ）の１：２トリフルオロ酢酸／ＣＨ２Ｃ ｌ２（１５＋＋／）中溝液を室温で１時間撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮 し、残留物をＥｔ２０（３×３０１７）で処理し、次いで、蒸発させて白色粉末 を得た（２．５ｇ、１００％）。

アルゴン雰囲気下で０℃におけるＧａｙ−Ａｓｐ（Ｂｚｌ）−フェニルアミド・ トリフルオロ酢酸塩（２，Ｏｙ、４．２ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ中溶液にジイソ プロピルエチルアミン（０，５５９，４、３ｏ＋ｍｏｌ）を添加し、次イテ、Ｈ ＯＢｔ水和物（０゜５９９．４．４ａ＋＋ｍｏｌ）を添加した。得られた混合物 に５−［［（１，１−ジメチルエトキン）カルボニル］アミノ］ペンタン酸（０ ，９２ｙ、４．２ｍｍｏυを添加し、１０分間撹拌し続けると、溶解が生じた。

ＥＤＣ塩酸塩（領８１９．４，２１１１１１１０１）を滴下した。得られた混合 物を室温にゅっ（りと加温し、２時間撹拌した。混合物を室温で一夜放置し、次 イテ、ＨｚＯ（１００ｍＡ’）　オヨヒＥｔＯＡｃ　（７５ｍＡ’）　ｌ：分配 させた。水性相をＥｔＯＡｃ　（７５ｍ／）で抽出し、合わせた有機抽出物をＨ ｚＯ（３Ｘ３０ｇ／）および飽和ＮａＣ１水ｍｅ　（３０ｍｌ＞　ｔ’連ｆＪｃ 　シフＪｌｃ浄Ｌ、次イテ、乾燥した（Ｎａ２Ｓ　０４）。溶媒を真空内で除去 し、残留物をフラッノユクロマトグラフィーに付して７％ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｚ ２で溶離することによって精製して標記化合物（０，８９，３４％）を得た。こ れをＥｔＯＡｃと一緒に粉砕した後、白色固体を形成した。

ｈ）Ｎ−［５−［［（１，１−ジメチルエトキン）カルボニル］アｚノ］−１− オキシ〜 ペンチル］−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−フェニルアミドＮ−［５−［［（１，１−ジメチ ルエトキシ）カルボニル］アミノ］−１−オキソペンチル］−Ｇ　Ｉ　ｙ−Ａｓ 　ｐ（０−Ｂｚ　ｌ）−フェニルアミド（０，７２ｇ、１　、３　ｍｍｏｌ）の 無水ＥｔＯＨ（７５ｍｌ）中溝液に活性炭上１０％パラジウム（１５０ｍｐ）を 添加した。得られた混合物を３−ｐｓｉＨ２で３時間水素添加した。混合物を脱 気し、次いで、セライト（Ｃｅｌｉｔｅ）のパッドを介して濾過した。濾液を真 空内で濃縮して白色固体を得た（０．５８ｑ、９７％）。

アルゴン雰囲気下におけるＮ−［５−［［（１，１−ジメチルエトキノ）カルボ ニル］アミノ］−１−オキソペンチルコーＧａｙ−Ａｓｐ−フェニルアミド（０ ，５８９、］、　、　３　ｍｍｏｌ）の１・４トリフルオロ酢酸／　ＣＨ２（Ｊ ’２　（２５＋１７’）中溝液を室温で１時間撹拌した。反応混合物を減圧下で 濃縮して標記化合物を得、これをさらなる精製を行わずに使用した。

ｊ）Ｎ−［［５−（アミノイミノメチル）アミノコ−１−オキソペンチル］−Ｇ ｌｙＮ−［５−アミノ−１−オキソペンチル］−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−フェニルアミ ド（０，５９，１２ｍｍｏｌ）を蒸留Ｈ，Ｏ中に置き、０．９５Ｎ　ＮａＯＨで ｐＨを１０に調節した。硫酸水素Ｏ−メチルイソ尿素（０，２４９，１、４ｍｍ ｏｌ）を添加し、０゜９５ＮＮａＯＨでｐＨを１０に再度調節した。得られた混 合物を室温で一夜撹拌した。薄層クロマドグフィーによる反応の分析によって反 応が不完全であることが判明し、そこで、さらに硫酸水素０−メチルイソ尿素（ ２，４ｇ、１２．　（ｈｃａｏｌ＞を添加した。１０％ＮａＯＨ′ｔｌ−ｐＨを 〉１０に調節し、次いで、混合物を室温で一夜、アルゴン雰囲気下で撹拌した。

ｐＨを３ＮＨＣＪでｐＨ６に調節し、次いで、混合物を、数日間、アルゴン雰囲 気下、−２５℃で貯蔵した。解凍した後、形成された白色固体を濾過によって収 集した。濾液を凍結乾燥し、合わせた固体をＭｅＯＨと一緒に粉砕し、次いで、 濾過した。濾液を真空内で濃縮し、残留物を逆相ＨＰＬＣに付して０１％ＴＦＡ を含有する２５％ＭｅＯＨ／Ｈ２０で溶離することによって精製して標記化合物 （０，２１ｙ、４０％）を得た。

実施例７ Ｎ−［（２Ｒ）−２−フェニル−５−（アミノイミノメチル）アミノ−１−オキ ソペンチル］−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−フェニルアミド（２９）の調製アルゴン雰囲気 下、−７８℃における（４Ｒ）−４−ベンジル−２−オキサゾリジノン（２０， ０９，０，１３２ｍｏｌ）のＴＨＦ中溶液にｎ−ブチルリチウム（ＴＨＦ中２． ５Ｍ溶液を５２．８富ｌ、Ｏ，）３２ｍｏｌ）をゆっくりと添加した。得られた 溶液を一７８℃で１０分間撹拌し、次いで、予め冷却しておいた塩化フェニルア セチル（１７，５ｓ＋１．０．１３２ｍｏｌ）のＴＨＦ　（５（ｂＡ’）中溶液 （−７８℃）をゆっくりと添加した。得られた溶液を室温に加温し、−夜撹拌し た。溶媒を減圧除去し、残留物をＥｔ＊Ｏ（１，（Ｄ’）およびＨ，０（１５０ 冨Ｉ）に分配させた。有機抽出物をＨｚＯ（１００Ｗ／＞およびＮａＣｌ飽和水 溶液（７５翼７りで連続して洗浄し、乾燥させた（ＮａｚＳＯ４）。溶媒を減圧 除去し、固体残留物を１０％）：ｔＯＡｃ／ヘキサン（５００，／）に懸濁した 。デカンテーションにて不溶物を除去した。冷却すると、溶液から白色結晶固体 が形成し、これを濾過により集めた（１５．２９．３９％）。濾液を減圧濃縮し た。残留物を上記不溶物と合わせ、フラッシュクロマトグラフィーに付して３０ ％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンで溶離して精製し、さらなる物質を得た（合計収量：２ ３．０９．５９％）。融点６９〜７１℃。

アルゴン雰囲気下、−７８℃における４−（Ｒ）−ベンジル−３−フェニルアセ チル−２−オキサゾリジノン（２３，７ｇ、８Ｑ　、　３　ｍｍｏｌ）の新たに 蒸留したＴＨＦ（６００Ｗ／）中溶液にカリウムビス（トリメチルシリル）アミ ドの溶液（トルエン中０．５Ｍ溶液を１６１１７．８０．３關ｏ１）を滴下した 。得られた溶液を一７８℃で２０分間撹拌し、次いで、前もって冷却しておいた 臭化アリル（１０，５，／。

１２１關ｏ１）のＴＨＦ　（４０ｍＡ’）中溶液を滴下した。得られた混合物を 一７８°Ｃで１時間撹拌し、次いで、室温に加温し、−夜撹拌した。氷酢酸（１ ４，０１７’）を該反応混合物に添加し、次いで、これを濾過した。濾液を減圧 濃縮し、残留物をＥｔ、Ｏ（１，ＯＡ’）およびＨ２０（２００−ｍｆ）に分配 させた。有機抽出物をＨ２Ｏ（２Ｘ　１５０−１）、５％ＮａＨＣＯ，水溶液（ １５０Ｗ／）およびＮａＣ１飽和水溶液（１５０ｗｊ’）で連続的に洗浄し、次 いで、乾燥した（　Ｎａｚ　Ｓ　Ｏ４）。溶媒を真空内で除去し、残留物をフラ ッシュクロマトグラフイーに付して３０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンで溶離すること により精製した。純粋な（２Ｒ，４Ｒ）ジアステレオマーを含む両分を合わせた 。残存物質は、（２Ｒ，４Ｒ）および（２Ｓ、４Ｒ）ジアステレオマーの混合物 からなっていた。この混合物をシクロヘキサンと一緒に粉砕して、さらなる純粋 な（２Ｒ，４Ｒ）ジアステレオマーを得た（合計収量：１１．７９．４３％）。

融点７３〜７５℃。

ｃ）（２Ｒ）−２−フェニル−４−ペンテン酸メチル−２０℃、アルゴン雰囲気 下における臭化メトキシマグネシウムの溶液［−２０℃において臭化メチルマグ ネシウム（ＥｔｚＯ中３．０Ｍ溶液を１６．１ｍ１）をメタノール（２０（ｂｌ ）に添加して調製］に（２Ｒ，４Ｒ）−４−ベンジル−３−（１４＋ソー２−フ ェニル−ベンター４−エニル）−２−オキサゾリジノン（８，１９，２４、２ｍ ｍｏｌ）のメタノール（２００肩ｌ）中溶液をゆっくりと添加した。得られた溶 液を一２０℃で１時間撹拌し、次いで、０℃に加温し、１．５時間撹拌した。ｐ Ｈ７のリン酸塩緩衝液（２００翼ｌ）を添加することにより反応をクエンチし、 ０℃で１０分間撹拌した。該混合物をＣＨｚＣｌｔ（７００Ｗ／＞およびＮ　Ｈ ４Ｃｌ／　Ｎ　ａ　Ｃｌ水溶液（１：　１　ｗ／ｗ、７００Ｗ／）に分配させた 。水性層をＣＨ２Ｃｌ２（３Ｘ　２００ＩＩｌ＞で抽出し、合わせた有機抽出物 を乾燥した（Ｎａ２ＳＯＪ。溶媒を真空内で除去し、残留物をヘキサン（２Ｘ４ ０＋＋／）で処理し、次いで、撹拌した。形成された固体をデカンテーションに よって除去し、溶媒を減圧除去して標記化合物を得た（３．７９．８０％）。

ｄ）（２Ｒ）−５−ヨード−２−フェニルペンクン酸メチルアルゴン雰囲気下、 ０℃における（２Ｒ）−２−フェニル−４−ペンテン酸メチル（３７ｇ、１９． ５關ｏ１）の無水ＴＨＦ　（５０＠ｌ）中溶液にＢＨ３・ＴＨＦ　（ＴＨＦ中１ ，０Ｍ溶液を６．５＊Ｌ　６．５關ｏ１）を添加した。得られた溶液を５０℃で １時間加熱し、次いで、室温に冷却した漬無水メタノール（１，５１１）を該反 応混合物に滴下し、その後素早く、無水酢酸ナトリウム（１６ｇ、１９．５ｍｕ ｏ１）の無水メタノール（１８１１）中溶液および一塩化ヨウ素（ＣＨ２Ｃ１２ 中１゜０Ｍ溶液を１３．０ｄ、　１３．０＋ｍｏｌ）を添加した。得られた混合 物を室温で４５分間撹拌し、次いで、チオ硫酸ナトリウムを含むＨ２Ｏ（８００ ＋Ｊ）中に注いだ。

該混合物をＥｈＯ（３Ｘ　２７５ｍ／）で抽出し、合わせた有機抽出物を乾燥し た（Ｎａ２　Ｓ　Ｏ４）。溶媒を真空内で除去し、残留物をフラツシュクロマト グラフイーに付して１０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンで溶離することにより精製し、 標記化合物を無色油状物として得た（２．４９．３９％）。

ｅ）（２Ｒ）−５−［Ｎ−（ｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ−（カルボメトキシ ）アミ／］−２−フェニルペンタン酸メチルエステルアルゴン雰囲気下の（２Ｒ ）−５−ヨード−２−フェニル−ベンクン酸メチル（１９９，５，９ｍｍｏｌ） のＤＭＦ　（２５ｍＡ’）中溶液にｔ−ブトキシメチルイミノジカルボン酸カリ ウム（１，３９，６，Ｏｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を室温で３０分 撹拌した。該混合物をチオ硫酸ナトリウムを含むＨｓＯ（２００ｍ１）中に注ぎ 、ＥｈＯ（３Ｘ１００＋＊／）で抽出した。合わせた有機抽出物をＨ２Ｏ（３Ｘ ２Ｑｇ／）で洗浄し、乾燥した（Ｎａ２ＳＯ４）。溶媒を減圧除去し、油状物を 得た。

前記水性洗浄液をさらにＣＨｔＣｂ　（３Ｘ１００ｍｌ＞で抽出し、合わせたＣ 　Ｈｔ　ＣＩ　２抽出物をＨ２Ｏ（３ｘ　２５ｍＡ’）で洗浄し、乾燥した（　 Ｎａ２　Ｓ　Ｏ４）。溶媒を真空内で除去し、残留物をフラッシュクロマトグラ フィーに付して２５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンで溶離することにより精製し、標記 化合物を無色油状物として得た（１３ｇ、６０％）。

（２Ｒ）−５−［（Ｎ−ｔ−ブトキンカルボニル）−（Ｎ−カルボメトキシ）ア ミノコ−２−フェニルペンタン酸メチルエステル（１，３９，３，，６ｍｍｏｌ ）のメタノール（２５，１）中溶液に０．９５Ｎ　Ｎａ０Ｈ（１５，０ｍＡ’、 １４．２ｍｍｏｌ）を添加し、得られた混合物を０℃で撹拌した。０℃で２時間 撹拌した後、該混合物を室温に加温し、さらに３時間撹拌した。該混合物をＨ２ Ｏ（１５ＱｍＡ’）中に注ぎ、酢酸で酸性化し、ＣＨ２Ｃｌ２　（３Ｘ　１００ ｍｌ＞で抽出した。合わせた有機抽出物を乾燥した（ＮａｚＳＯ４）。溶媒を真 空内で除去し、ＮＭＲ分析により、出発物質の存在が示された。残留物をメタノ ール（１５ｄ）に溶解し、０．９５Ｎ　ＮａＯＨ（１５＠ｌ、１４　、２　＋ｕ ＋ｏｌ）を添加した。該混合物を室温で３時間撹拌した。得られた溶液をＨ２Ｏ （２００ｍ１）中に注ぎ、酢酸で酸性化し、次いで、ＣＨｚＣＡ’ｚ　（３Ｘ１ ２５ｍｌ）で抽出した。合わせた有機抽出物を乾燥しくＮａ２ＳＯ４）、溶媒を 真空内で除去して標記化合物を得た（１．０ｇ、９６％）。［ａコｏ２ｓ（１， ＣＨｓＯＨ）アミノコ−１−オキソペンチル］−グリシル−ＮＩ−フェニル−し −アスノくルトアミドベンジルエステル アルゴン雰囲気下、０℃におけるＧａｙ−Ａｓ＋）（０−Ｂｚ　］）−フェニル アミド（１，４４ｇ、３　、　ｌ　ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ　（５＠ｊり中溶液 にジイソプロピルエチルアミン（０，４０ｇ、３．ｌ　ｍｍｏｌ）を添加し、次 いで、ＨＯＢｔ水和物（０，４３９，３，２ｍｍｏｌ）を添加した。該混合物に （２Ｒ）−５−［（ｔ−ブトキシカルボニル）アミ列−２−フェニルペンタン酸 （０，９０９，３，１關０１）のＤＭＦ　（３ｍＡ）中溶液を添加し、得られた 混合物を０℃で１０分間撹拌した。ＥＤＣ塩酸塩（０゜５９９．３　、　ｌ　ｍ ｍｏｌ）を滴下した。得られた混合物をゆっくりと室温まで加温し、アルゴン雰 囲気下に一夜保った。該混合物をＨ２Ｏ（１５００ｍＡ’）およびＥｔＯＡｃ　 （５０＠ｌ＞に分配させた。水性層をＥｔＯＡｃ　（５０＠１）で抽出し、合わ せた有機抽出物をＨ２Ｏ（３Ｘ　２０８１）およびＮａＣｌ飽和水溶液（２５麿 １）で連続的に洗浄し、乾燥した（　Ｎａ２　Ｓ　Ｏ４）。溶媒を真空内で除去 し、残留物をフラツシュクロマトグラフイーに付して５％ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃ４ で溶離することにより精製して白色固体を得た（１．１９．５７％）。

ｈ）Ｎ−［（２Ｒ）−２−フェニル−５−［（１，１−ジメチルエトキシカルボ ニル）アミノコ−１−オキソペンチル］−Ｇ］ｙ＝Ａｓｐ−フェニルアミドＮ− ［（２Ｓ）−２−フェニル−５−［（１，１−ジメチルエトキシカルボニル）ア ミノコ−１−オキソペンチル］−Ｇａｙ−Ａｓ’ｐ−フェニルアミド（０５９， ０７９ｍｍｏｌ）の無水ＥｔＯＨ（１００＋＋／）中溶液に活性炭上１０％ノ々 ラジウム（２５０吋）を添加し、得られた混合物を３０ｐＳｉＨｚで４５分間水 素添加しｔこつ該混合物を脱気し、セライト（Ｃ６１ｉｔｅ）のパッドで濾過し た。濾液を減圧濃縮し、標記化合物を得た（０．４３ｇ、１００％）。

アルゴン雰囲気下におけるＮ−［（２Ｒ）−２−フェニル−５−［（１，１−ジ メチルエトキシカルボニル）アミノコ−１−オキソペンチル］−Ｇｌｙ−Ａｓｐ −フェニルアミド（０，４３９、Ｑ、８ｍ５ｏｌ）のトリフルオロ酢酸（１，０ ｍ１）およびＣＨ宜Ｃ１ｔ　（５ｍｌ＞中溶液を室温で１．５時間撹拌した。該 反応混合物を減圧濃縮し、残留物を繰り返しＥｔ、Ｏで処理し、蒸発させて白色 粉末を得た（０．４３９．９８％）。

Ｎ−［（２Ｒ）−２−フェニル−５−（アミノイミノメチル）アミノ−１−オキ ソペンチル］−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−フェニルアミド（０，４４９、Ｑ　、　８ａｎ ｏｌ）を蒸留水（５ｍｌ）中に加え、１，０ＮＮａＯＨでｐＨを〉１２に調節し た。硫酸水素０−メチルイソ尿素（１，４９，７、９ｍｍｏｌ）を添加し、１． ＯＮ　ＮａＯＨでｐＨを〉１２に調節した。得られた混合物を室温で一夜撹拌し た。３Ｎ　ＨＣｌでｐＨを６に調節し、該混合物を凍結乾燥した。残留物をＭｅ ＯＨ（５冨Ａ’）と−緒に粉砕し、濾過した。濾液を減圧濃縮し、残留物を分取 逆相ＨＰＬＣに付して０．１：２５・７５のＴＦＡ／ＣＨ３ＣＮ／ＨＩＯで溶離 することによって精製した。単離された物質を凍結乾燥し、標記化合物を得た（ １．６ｇ、４１％）。アミノ酸分析。

Ａｓｐ　（１，００）、Ｇｌｙ（１，０５）。

アニリン（１，４５ｍＬ　１５．９ａｎｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミ ン（２゜０５９．１５．９ｍｌ１ｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（１６ｍＡ’）中溶液を、 アルゴン雰囲ｆｉ下、０℃に冷却した。この溶液にＨＯＢｔ水和物（２，２３９ ，１６，５關０１）を添加し、次いで、Ｂｏｃ−Ａｓｐ（０−ｃＨｅｘ）（５， Ｑｇ、１５　、９　ｍｍｏｌ）を添加した。

得られた混合物を、溶解が生じるまで、０℃で撹拌し、次いで、ＥＤＣ塩酸塩（ ３，０５９，１５，９ＩＩＩＩ１１０１）を滴下した。得られた混合物をゆっく りと室温に加温し、２時間撹拌した。該混合物をＨｚＯ（２５０ｍＡ’）および ＥｔＯＡｃ　（１５０ｍ１）に分配させた。水性層をＥｔＯＡｃ　（１５０ｍｇ ）で抽出し、合わせた有機抽出物をＨｚＯ（３Ｘ５０寓ｌ）およびＮａＣｌ飽和 水溶液（４０菖ｌ）で連続的に洗浄し、乾燥した（Ｎａ２ＳＯ４）。溶媒を真空 内で除去し、残留物を２０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンと一緒に粉砕して白色固体を 得た（３．８５９．６２％）。

ｂ）Ａｓｐ（０−ｃＨｅｘ）−フェニルアミド・トリフルオロ酢酸塩アルゴン雰 囲気下のＢｏｃ−Ａｓｐ（０−ｃＨｅｘ）−フェニルアミド（３，８ｙ、９．７ 市０１）の１＝１トリフルオロ酢酸／ＣＨｔＣｂ　（２０ｗｌ）中溶液を室温で ３０分撹拌した。該反応混合を減圧濃縮し、残留物をＥｔ２０　（３Ｘ　３　Ｑ ｓｉ’）で処理し、蒸発させて白色粉末を得た（４．０９、−’１００％）。

ｃ）Ｎ−［Ｎ”−（１，１−ジメチルエトキンカルボニル）−ＮＳ−［イミノ［ ［４−（メチルフェニル）スルホニル］アミノ］メチル］−Ｌ−オルニチルコー グリシンベンジルエステル アルゴン雰囲気下、０℃におけるＧｌｙ−ＯＢｚｌ塩酸塩（７０ｇ、３５ｍｍｏ ｌ）の乾燥ＤＭＦ　（４０＋＋／）中溶液にジイソプロピルエチルアミン（４， ５９，３５ｍ１ｏｌ）を添加した。この溶液にＨＯＢｔ水和物（５，２９，３８ ，５關ｏ１）を添加し、次いで、Ｎ”−（１，１−ジメチルエトキシカルボニル ）−Ｎ’−［イミノ［［４−（メチルフェニル）スルホニル］アミン］メチル］ −Ｌ−オルニチン（１５，０９，３５ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を 溶解が生じるまで０℃で撹拌し、次いで、ＥＤＣ塩酸塩（６，７９，３５ｍｍｏ ｌ）を滴下した。得られた混合物をゆっくりと室温に加温し、−夜撹拌した。該 混合物をＨｔＯ（３５０ｍｌ’）およびＥｔＯＡｃ（７５ｍｌ）に分配させた。

水性層をＥｔＯＡｃ　（２Ｘ　７５ｍ／）で抽出し、合わせた有機抽出物をＨｚ Ｏ（３Ｘ　４　Ｑｍｌ＞で洗浄し、乾燥した（　Ｎａ２　Ｓ　Ｏ４）。溶媒を真 空内で除去し、残留物をフラッシュクロマトグラフィーに付して７％ＭｅＯＨ／ ＣＨ２Ｃ／２で溶離することにより精製し、標記化合物を得た（９．０９．４９ ％）。

アルゴン雰囲気下における実施例８（Ｃ）の化合物（１５，Ｏｑ、２６ｏ＋ｍｏ ｌ）のトリフルオロ酢酸（２０１１）およびＣＨ２Ｃｌ２　（３０＋＋１）中溶 液を室温で１時間撹拌した。該反応混合物を減圧濃縮し、残留物をＥｔ２０　（ ３Ｘ　３０１１）で処理し、蒸発させて白色粉末を得た（１５．６９．１００％ ）。

アルゴン雰囲気下におけるジイソプロピルエチルアミン（０，９８９，７，６ａ ｎｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２　（３５ｍ１１）中溶液に実施例８（ｄ）の化合物（１ ，５ｇ、２．５＋ａｍｏｌ）を添加した。得られた混合物にα、ｉ゛−ジクロロ ー〇−キシレン（０，４４ｇ、２．５１０１０１）を添加し、該反応混合物を、 アルゴン雰囲気下、室温で一夜撹拌した。該混合物をＨ，ｏ　（２Ｘ　２　Ｑｍ ｌ）で抽出し、有機抽出物を減圧濃縮した。

残留物をフラッジユクロマトグラフイーに付して５％Ｍ　ｅ　ＯＨ／　ＣＨ２Ｃ ｌ　２で溶離することによって精製し、標記化合物を白色固体として得た（０． ６５９．４６％）。

ｆ）Ｎ−［（２Ｓ）−２−（１，３−ジヒドロ−２Ｈ−イソインドリル）−５− ［イミノ［［４−（メチルフェニル）スルホニル］アミノ］メチル］アミノ］− ２−オキソペンチルコーグリシン 実施例８（ｅ）の化合物（０，５５ｇ、０　、９５　ａ＋ｍｏｌ）の無水エタノ ール（１５Ｑ　ｍｌ）中溶液に活性炭上１０％パラジウム（２００１９）を添加 した。得られた混合物を３０ｐｓｉＨ，で４．５時間水素添加した。該混合物を 脱気し、セライトのツク・ソドで濾過した。濾液を真空内で濃縮し、標記化合物 を得た（０．４５９．９８％）。

ｇ）Ｎ−’［（２Ｓ）−２−（１，３−ジヒドロ−２Ｈ−イソインドリル）−５ −（アミノイミノメチル）アミノ−１−オキソペンチル］−Ｇｌｙ−Ａｓｐ（０ −ｃＨｅｘ）一フェニルアミド アルゴン雰囲気下、０℃におけるＡＳ＋）（０−ｃＨｅｘ）−フェニルアミド・ トリフルオロ酢酸塩（２７５薦９．０　、６８１ｌｎａｌ）の乾燥ＤＭＦ　（５ 票ｌ）中溶液にジイソプロピルエチルアミン（８８ｍｙ、０．６８ａｎｏｌ）を 添加した。この溶液にＨＯＢｔ水和物（１１０１１９、Ｑ、３ａｎｏｌ）を添加 し、次いで、実施例８（ｆ）の化合物（３３０ｍ＋９、Ｑ　、　５８ａｎｏｌ） を添加した。得られた混合物を、溶解が生じるまで、０℃で撹拌し、ＥＤＣ塩酸 塩（１３０ｍｇｇ、０．６８ａｎｏｌ）を滴下した。得られた混合物をゆっくり と室温まで加温し、−夜撹拌した。該混合物をＨｔＯ（１００ｍｇ）およびＥｔ ＯＡｃ（４０ｗｆ）に分配させた。水性層をＥｔＯＡｃ　（２Ｘ　４０Ｉｔ’） で抽出し、合わせた有機抽出物をＨｔＯ（３ｘ　２０１１１）で洗浄し、乾燥し た（Ｎａ２ＳＯ，）。溶媒を真空内で除去し、残留物をフラ・ンシュクロマトグ ラフイーに付して５％Ｍｅ　ＯＨ／　ＣＨ２Ｃｌ　１で溶離することによって精 製し、標記化合物を白色固体として得た（２６０ｍｖ、５０％）。

ｈ）ル」又犯二吐逓−辷２見幽二幻辷盃どし上ｎ空」二に２ノイミノメチル）ア ミノ−１−オキソペンチル］−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−フェニルア１上 実施例８（ｇ）の化合物（１５０ｍｇ、０．２ａｎｏｌ）のアニソール（１，５ −）中溶液をフッ化水素反応容器に移した。これに−７８℃でフ・ソ化水素を導 入し、得られた溶液を０℃に加温した。０℃で１時間撹拌した後、フッ化水素を 真空内で除去した。該残留物にエーテル（１００ＩＡ’）を添加し、次いで、１ 時間激しく撹拌した。形成された固体を素早く濾過することにより集め、逆相Ｈ ＰＬＣに付して４０％ＭｅＯＨ／Ｈ２０で溶離することによって精製した。凍結 乾燥後、標記化合物を吸湿性粉末として得た（３０ｍｇ、３０％）。

実施例９ Ｎ’−（４，４−シフエールブチリル）−Ｎ１−メチル−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓ ｐグリノンベンジルエステル塩酸塩（０，９１９，４、５ｍｍｏｌ）およびジイ ソプロピルエチルアミン（０，５８ｑ、４．５ｎｏｏｏｌ）の乾燥ＤＭＦ　（７ ｓ＋４’）中溶液を、アルゴン雰囲気下、０℃に冷却した。この溶液にＨＯＢｔ 水和物（０，６６９，４゜９　Ｉｌｍｏｌ　）を添加し、次いで、Ｂｏｃ−Ｍｅ Ａｒｇ（Ｔｏｓ）（２，００９，４，５ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物 を、溶解が生じるまで、０℃で撹拌し、ＥＤＣ塩酸塩（０，８６９，４，５ｍｍ ｏｌ）を滴下した。得られた溶液をゆっくりと室温まで加温し、アルゴン雰囲気 下に一夜保った。該混合物を８２０　（１００ｍ／）およびＥｔＯＡｃ　（７５ ＋＋ｌ）　１ｍ分配ｃ’セタ。水性層をＥｔＯＡｃ（７５ｉ＋／）　で抽出し、 合わせた有機抽出物をＨｓＯ（３Ｘ　２０＋＋４’）およびＮａＣ１飽和水溶液 （３０肩ｌ）で連続的に洗浄し、乾燥した（ＮａｚＳＯ４）。溶媒を真空内で除 去し、残留物をフラッシュクロマトグラフィーによって精製して白色固体を得た （２．４０ｙ、８９％）。

アルゴン雰囲気下におけるＢｏｃ−ＭｅＡｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｇｌｙ−ＯＢｚ　Ｉ （２，４０９，４，（ｌｕ＋ｏｌ）のトリフルオロ酢酸（１０１／）およびＣＨ ｚＣ４（３０ｍｌ）中溶液を室温で９０分撹拌した。該反応混合物を減圧濃縮し 、残留物を５０％Ｅｔ２０／ヘキサン（３Ｘ３０ｍｌ）で処理し、蒸発させて白 色固体を得た（２゜５ｇ、１００％）。

ｃ）Ｎ−［Ｎ”　−（４，４−ジフェニルブチリル−Ｎｓ　（イミノ［［４−（ メチルフェニル）スルホニル］アミノ］メチル］Ｎ！−メチル−Ｌ−オルニチル ］−グリシルベンジルエステル ＭｅＡｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｇｌｙ−ＯＢｚｌ　（２，５９，４，１１Ｉｌ１０１） およびジイソプロピルエチルアミン（０，５５ｇ、４．１！１６１０１）の乾燥 ＤＭＦ　（６肩ｌ）中溶液を、アルゴン雰囲気下、０℃に冷却した。この溶液に ＨＯＢｔ水和物（０，６２９，４゜６關ｏ１）を添加し、次いで、４．４−ジフ ェニルブタン酸（１，２ｇ、４　、　ｌ　ｍｏｌ）を添加した。得られた混合物 を、溶解が生じるまで、０℃で撹拌し、ＥＤＣ塩酸塩（０，８０９，４，Ｉｌｍ ｏｌ）を滴下した。得られた溶液をゆっくりと室温まで加温し、アルゴン雰囲気 下に一夜保った。該混合物をＮ２０　（３００＋＋１＞およびＥｔＯＡｃ　（７ （１＋Ａ’）に分配させた。水性層をＥｔＯＡｃ（２Ｘ７０ｍＡ’）で抽出し、 合わせた有機抽出物をＨｚＯ（３Ｘ　４０＋＋１＞で洗浄し、乾燥させた（Ｎａ ２ＳＯ＜）。

溶媒を真空内で除去し、残留物をフラッシュクロマトグラフィーに付して５％Ｍ ｅＯＨ／ＣＨｚＣｚ２で溶離することによって精製して標記化合物を白色固体と して得た（１．４ｇ、４８％）。

ｄ）Ｎ’−（４，４−ジフェニルブチリル）−Ｎ’ＭｅＡｒｇ（Ｔｏｓ）−ＧＩ 　ｙＮ’−（４，４−シフニー１−ルブチリル）　−Ｎ’ＭｅＡｒｇ（Ｔｏｓ） −ＧＩ　ｙ−ＯＢＺＩ　（１，３６９、ｌ　、　９　ｍｍｏｌ）の無水−ＥｔＯ Ｈ（１００＋＋１＞中溶液に活性炭上１０％パラジウム（３５０−ｇ）を添加し た。得られた混合物を３ＱｐｓｉＨ２で３時間水素添加した。該混合物を脱気し 、セライトのパッドで濾過した。濾液を真空内で濃縮して白色固体を得た（１． ００９．８３％）。

ｅ）Ｎ’−（４，４−ジフェニルブチリル）−Ｎ”ＭｅＡ　ｒ　ｇ（Ｔｏ　５） −Ｇ　Ｉ　ｙ　−Ａｓｐ（０−ｃＨｅｘ）−フェニルアミドＡｓｐ（０−ｃＨｅ ｘ）−フェールアミド・トリフルオロ酢酸塩（０，６５ｇ、１゜６ｍｍｏｌ）お よびジイソプロピルエチルアミン（０，２１９，１，６罷ｏ１）の乾燥ＤＭＦ　 （４ｍＡ’）中溶液を、アルゴン雰囲気下、０℃に冷却した。この溶液にＨＯＢ ｔ水和物（０，２２ｙ、１．７　ｍｍｏｌ）を添加し、次いで、実施例９（ｄ） の化合物（１，０９、ｌ　、　５　ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ　（３＋＋１）中溶 液ヲ添加１．ｆ：。得うレタ混合物を０℃で５時間撹拌し、ＥＤＣ塩酸塩（０， ３１ｇ、１．６龍ｏ１）を滴下した。得られた溶液をゆっくりと室温まで加温し 、アルゴン雰囲気下に一夜保った。

該混合物をＨｚＯ（１５０＋＋１）およびＥｔＯＡｃ（５０ｍｌ＞に分配させた 。水性層をＥｔＯＡｃ　（５０ｍｌ＞で抽出し、合わせた有機抽出物をＨｚＯ（ ３Ｘ　３０ｍ１Ａ’）およびＮａＣ１飽和水溶液（３０，１）で連続的に洗浄し 、乾燥した（ＮａｚＳＯ４）。溶媒を真空内で除去し、残留物をフラッシュクロ マトグラフィーに付して５％ＭｅＯＨ／ＣＨｚＣ１２で溶離することによって精 製し、標記化合物を白色固体として得た（０．７５９．５３％）。

実施例９（ｅ）の化合物（２００−ｇ、０　、２２　ｍｍｏｌ）のアニソール（ １，５１７’）中溶液をフッ化水素反応容器に移した。これに−７８℃で液体フ ッ化水素（１５ｍｌ）を導入し、得られた溶液を０℃に加温した。０°Ｃで１時 間撹拌した後、フッ化水素を真空内で除去した。残留物にエーテル（７５＋＋Ａ ’）を添加し、次いで、撹拌した。形成された固体を濾過により集め、逆相ＨＰ ＬＣに付して６０％ＭｅＯＨ１０，１％ＴＦＡを含有するＮ２０で溶離すること によって精製した。適当な画分を合わせ、減圧濃縮した。濃縮物を一夜凍結乾燥 して白色粉末を得た（１５１９．１０％）。

粗製生成物を半分数ＨＰＬＣによって精製して精製化合物を得、これを凍結乾燥 して標記化合物を得た（１５１９）。ＴＬＣＲ２０，６５（ｎ−ＢｕＯＨ：ＨＯ Ａｃ：Ｎ２０１　：　１　：　１）。

実施例１０ アミノ−１−オキソペンチル］−Ｇａｙ−Ａｓｐ−フェニルアミド（３２）の調 ０℃の炭酸カリウム（５６０票９．４，０關ｏ１）のＨ，０（１０肩ｔ）中溶液 にＡｒｇ（Ｔｏｓ）を添加した。０℃で数分間撹拌後、塩化４−ブロモブタノイ ル（１８５冒９．１．　Ｏｅ＋ｍｏｌ）を添加し、得られた混合物を３０分撹拌 し、Ｅｔ、Ｏで抽出した。水性層を冷希ＨＣＩ水溶液で酸性化し、ＥｔＯＡｃで 抽出した。溶媒を真空内で除去し、標記化合物を得た（０．４ｇ、８７％）。

アルゴン雰囲気下、０℃におけるＮ’−（４−ブロモ−１−オキソブチル）−Ａ 　ｒ　ｇ（Ｔｏ　ｓ）　（２，４９，５，Ｑｍｍｏｌ）のＤＭＦ　（３０＋＋１ ）中溶液に水素化ナトリウム（鉱油中６０％懸濁液を１，１ｇ、２７．５ｍｍｏ ｌ）を添加し、得られた混合物を室温まで加温し、−夜撹拌した。該混合物を氷 Ｈ２０中に注ぎ、０℃で希ＨＣ１水溶液で酸性化し、ＥｔＯＡｃで抽出−した。

水性層をアンバーライト（Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ’）　ＸＡＤ−２（１３０９）の カラムに乗せ、重力濾過して標記化合物（１，４９）を得た。有機抽出物を真空 内で濃縮してさらに０．５９の物質を得た（全収率７３％）。元素分析（Ｃ＋　 ｔ　Ｈ２４Ｎ　ｓ　Ｏ５Ｓ・０．８５Ｈ２０）：理論値：Ｃ４９，５９，Ｈ６， ２９，Ｎ　１３．６０：実測値　Ｃ４９，９７，Ｈ６，２２゜Ｎ１３．２４゜ ｃ）Ｎ−［（２Ｓ）　２　（１（２−ピロリジノニル））−５’−（アミノイミ ノメチル）−アミノ−１−オキソペンチル］−Ｇｌｙ−Ａｓｐ（０−ｃＨｅｘ） −フェニルヱ互上 ４ＮＨＣ１／ジオキサン５ｍ／ｌ、−Ｂｏｃ−Ｇａｙ−Ａｓｐ（０−ｃＨｅｘ） −フェニルアミド（４９６ＩＩｇ、１．１１＋ｕｏｌ）を溶解し、室温で２０分 間撹拌した。残留物を塩化メチレンに溶解し、３回蒸発させてＨＣＩの除去を確 実にした。残留物をＤＭＦ　５ｍｌに溶解し、ジイソプロピルエチルアミン（１ ７７ｕ、１．３７ｍｅａｌ）を添加した。ｐＨを塩基で中性に調節した。ＨＯＢ ｔ　（１９３ｍｙ、１．４３ｍｍｏｌ）、Ｎ−［（２Ｓ）−２−（１−（２−ピ ロリジノニル））−５−（（トルエンスルホニル）アミノ−イミノメチル）アミ ノ−１−オキソペンタン酸（５５０ｍｇ、１．３９ｍｍｏｌ）および１−（ジメ チルアミノ−プロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（２６６■９．１　 、３９　＋＋ｏｓｏｌ）を連続的に添加した。該反応物を室温で１８時間撹拌し た。ＤＭＦを真空内で除去し、残留物を酢酸エチル／クロロホルム（約１・１） に溶解し、ＩＮ　ＮａＨ３Ｏ４（３Ｘ）、５％ＮａＨＣＯｓ　（３Ｘ）で洗浄し 、乾燥しくＭｇ５ＯＪ、濾過し、次いで、真空内で濃縮した。６０９１９（収率 ７６％）。粗製生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、１０％メ タノール／クロロホルム）により精製した。適当な画分を集め、溶媒を蒸発させ た（４６３叩、収率５３％）。ＮＭＲδ（ＣＤ（Ｊｓ）　１．１　２．１　（ｍ 、　１４　Ｈ）、２３（ｓ、５Ｈ）、２．９　（ｄ、２Ｈ）、３．０−３．７　 （ｍ、ブロード、３Ｈ）、３．８５−４．０　（ｍ、２Ｈ）、４．５５−５．１ 　（ｍ、ブロード、３Ｈ）、６．２５−６．６５　（ｍ。

ブロード、２Ｈ）、６．９−７．９　（ｍ、９Ｈ）、７．９−８．１　（ｍ、Ｉ Ｈ）；ＴＬＣＲ，０，３５（１５％メタノール／クロロホルム）：ＭＳ　（ＦＡ Ｂ）ｍ／ｅ　７２６　［Ｍ＋Ｈ］’。

ｄ）Ｎ−［（２Ｓ）−２−（１−（２−ピロリジノニル））−５−（アミノイミ ノメチル）アミノ−１−オキソペンチル］−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−フェニルアミド実 施例１０（ｃ）の保護ペプチド（２１５１９，２９１ｎｍｏｌ）を、０℃で１時 間、無水ＨＦ５ｍ１で処理した。ＨＦを真空内で除去し、残留物を氷酢酸に溶解 し、凍結乾燥して粗製ペプチド塩を得た（１５９ｍ＋９．９９％）。５０寓ｖを 濾過し、分取ＨＰＬＣ（Ｃ１８逆相、１３％７−１＝トニトリル−Ｑ、１％ＴＦ Ａ／水−〇、１％ＴＦＡ）で精製した。溶媒を除去し、ペプチドを１０％酢酸に 溶解し、凍結乾燥した（２３票ｇ）。ＨＰＬＣｋ’　２．５８　（Ｃ１８逆相、 勾配、Ａニアセトニトリル−０，１％トリフルオロ酢酸、Ｂ：水−０，１％トリ フルオロ酢酸、１５分にわたって１０％−５０％、２２０ｕｍでのＵＶ検出）、 ｋ’　２．３４　（Ｃ１８逆相、１７％アセトニトリル／水−０，１％トリフル オロ酢酸、２２ｏｎｍでのＵＶ検出）；ＴＬＣＲ，０，６０（ブタノール：酢酸 ：水１　：　１　：　１）、Ｒ，０，５４（ブタノール：酢酸エチル：酢酸：水 １　：　１　：　１　：　１）；ＭＳ　（ＦＡＢ）ｍ／ｅ　４９０．２　［Ｍ＋ Ｈ］”；７　ミＪＷＩ１分析：Ａｓｐ　（１，０）、Ｇｌｙ（０，８５）、Ａｒ ｇ（０，２１）；ペプチド含量６９．８７％（ペプチドを、１６０”Ｃで１時間 、２：１：０．Ｏ０５％ｖ：ｖ：ｗＨＣ１’：ＴＦＡ：フェノールで加水分解） 。

実施例１１ Ｎ’−（フタロイル）−Ａ　ｒ　ｇ−Ｇ　Ｉ　ｙ−Ａ　ｓ　ｐ−フェニルアミド （３３）の調Ａ　ｒ　ｇ（Ｔｏ　ｓ）　（３，２８９，１０，Ｏｍｍｏｌ）のト ルエン（４０ｍｒ）中溶液に無水フタル酸（１，４８９，１０，Ｏｍｍｏｌ）お よびトリエチルアミン（０，３８１，３０゜Ｑｍｍｏｌ）を添加した。得られた 混合物をディーラ・スターク（Ｄｅａｎ　−Ｓ　ｔａｒｋ）トラップを用いて還 流下で加熱した。２時間還流した後、該反応混合物を冷却し、減圧濃縮した。残 留物に塩化メチレンを添加し、３０分間加温および撹拌すると溶解した。該溶液 をＨ！Ｏで洗浄し、溶媒を真空内で除去した。白色薄片状固体をＥｔ、Ｏと一緒 に粉砕し、濾過により集めて標記化合物を得た（４．１３９．９０％）。

元素分析（ＣｎＨｚｚＮ＜０ｓＳ）　・理論値：Ｃ５５，０１，Ｈ４，８４，Ｎ 　１２．２２；実測値：Ｃ５５，５５，Ｈ５，１９，Ｎ　１１．７７゜４ＮＨＣ １／ジオキサン５＋＋Ａ！１．ニーＢｏｃ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ（０−シクロフヘキ シル）−フェニルアミド（４９６１９，１，１１ｍｍｏｌ）を溶解し、室温で２ ０分間撹拌した。残留物を塩化メチレンに溶解し、３回蒸発させてＨＣＡ’の除 去を確実にした。残留物をＤＭＦ　５＋＋／に溶解し、ジイソプロピルエチルア ミン（１７７１９，１、３７ｍｍｏｌ）を添加した。塩基の添加によりｐＨを中 性に調節した。ＨＯＢｔ　（１９３１１ｇ、１．４３　ｍｍｏｌ）、フタロイル −Ａ　ｒ　ｇ（Ｔｏ　５）−ＯＨ（６３７１１９，１，３９ａｍｏｌ）および１ −（ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（２６６１９ ，１、３９ｍｍｏｌ）を連続的に添加し、反応を室温で１８時間撹拌した。ＤＭ Ｆを真空内で除去し、残留物を酢酸エチル／クロロホルム（約１・１）中に取り 、ｌ　Ｎ　ＮａＨＳ　Ｏ４で３回、５％ＮａＨＣＯｓで３回洗浄し、乾燥しくＭ ｇ５Ｏ＜）、濾過し、次いで、蒸発させた。８１７ｍ（収率９４％）を得た。

粗製生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、１０％メタノール／ クロロホルム）によって精製した。適当な両分をｔｌｃに従って集め、溶媒を除 去し、残留物を真空内で乾燥した（４８０１９．５５％）。ＮＭＲδ（ＣＤＣｌ ２）１．１１−１．９　（ｍ、１３Ｈ）、２．０５−２．２　（ｂｒ　ｓ、３Ｈ ）、２．３５（ｓ。

３Ｈ）、２．９　（６，５Ｈ）、３．０−３．３　（ｂｒ　ｓ、ＬＨ）、３．８ ５−４．０　（ｍ。

ＬＨ）、４．５５−５．１　（ｍ、ブロード、３Ｈ）、６．２５−６．６５　（ ｍ、ブロード。

３Ｈ）、６．９−７．９　（ｍ、１３Ｈ）、８．０　（ｓ、ＬＨ）：ＴＬＣＲ２ ０，３７（１５％メタノール／クロロホルム）；ＭＳ　（ＦＡＢ）ｍ／ｅ　７８ ８　［Ｍ＋Ｈ］”。

ｃ）Ｎ’−（フタロイル）−Ａｒ　ｇ−Ｇ　１　ｙ−Ａｓ　ｐ−フェニルアミド 実施例１１（ｂ）の保護ペプチド（２００ｍｇ、２５４　ｎｍｏｌ）を無水ＨＦ ５＋＋／で０℃で１時間処理した。ＨＦを真空内で除去し、残留物を氷酢酸に溶 解し、凍結乾燥して粗製ペプチド塩を得た（１３５ｍｇ、８７％）。１００＋９ を濾過し、ゲル濾過（セフ７デツクス（Ｓｅｐｈａｄｅｘ”）　Ｇ−１０，１０ ％酢酸）によって精製した。適当な画分を集め、凍結乾燥して標記化合物を得た （２５＋Ｉｇ）。ＨＰＬＣｋ’　３．４９　（Ｃ１８逆相、勾配、Ａニアセトニ トリル、Ｂ：水−０，１％トリフルオロ酢酸、１５分にわたって１０％−５０％ アセトニトリル、２２０ｎＩＩｌでＵＶ検出）、ｋ’　７．５６　（Ｃ１８逆相 、２０％ＣＨ３ＣＮ／水−０，１％トリフルオロ酢酸、２２０ｕｍでのＵＶ検出 ）；ＴＬＣＲ１０，７７（ブタノール：酢酸：水、１・１：１）、０６４（ブタ ノール：酢酸エチル：酢酸：水、１　：　１　：　１　：　１）；ＭＳ　（ＦＡ Ｂ）ｍ／ｅ　５５２．２　［Ｍ十Ｈ］”″二アミノ酸分析：Ａｓｐ　（０，９８ ）、Ｇｌｙ（０，９８）、Ａｒｇ　（０，８４）；ペプチド含量６７．０１％（ １６０℃で１時間、２＋１＋０．００５％ｖ　：　ｖ　：ｗ　Ｈ（Ｊ’／ＴＦＡ ／フェノールでペプチドを加水分解した）。

Ｎ’ＭｅＡ　ｒ　ｇ（Ｔｏ　５）−Ｇ　ｌ　ｙ（ＯＭｅ）　（２）　（５ｍｍｏ ｌ）のＤＭＦ（５Ｎ１）中冷溶液にＤ　Ｉ　ＥＡ　（２，８８ｍｌ、１６　、５ 　ｍｍｏｌ）を添加してｐＨを中性（ｐＨ７，５〜８．０）にした。次いで、塩 化ベンゾイル（０，６４＋＋１．５．５ｍｍｏｌ）を添加した。該反応混合物を 室温で一夜撹拌したε溶媒を真空下で除去し、残留物を酢酸エチル（６０ｍ／） 中に取り、水（３Ｘ２０＋＋１）、１０％重炭酸ナトリウム水溶液（２Ｘ２０ｍ ／）、水（２Ｘ２０＋１）、５％クエン酸水溶液（２Ｘ２０麗ｌ）、水（２Ｘ　 ２Ｑ　Ｉ／）および飽和塩溶液で連続的に洗浄した。有機溶媒を乾燥しく無水硫 酸ナトリウム）、濾過し、次いで、濃縮して標記化合物を白色の綿毛状固体とじ て得た（１．９４ｇ）。

ｂ）Ｎ’ベンゾイル−Ｎ’ＭｅＡｒｇ（Ｔｏｓ）−ＧａｙＮ’ベンゾイル−Ｎ’ ＭｅＡｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｇｌｙ（ＯＭｅ）（３）（３，５９，６゜８１１１０１ ）　（１）メタノール（１５ｍＡ）中溶液にｌＮＮａＯＨの溶液（８，２５ｍｆ 、８゜１２ｍｍｏｌ）を滴下した。該反応混合物を室温で１時間撹拌してエステ ル加水分解を完結させた。溶媒を除去し、残留物を水（８０＠Ａ’）に再溶解し 、酢酸エチルで逆抽出し、３ＮＨＣ１で酸性ｐＨ（１，３５）に酸性化した。該 酸性溶液を酢酸エチルで抽出し、有機層を水で２回洗浄し、無水硫酸ナトリウム で乾燥させ、濾過し、次いで、濃縮して標記化合物を白色の綿毛状固体として得 た（３．３９）。

ｃ）Ｂｏｃ−Ａｓｐ（０−ｃＨｅｘ）−（４−りｏｏ）７エールアミドＢｏｃ− Ａｓｐ（０−ｃＨｅｘ）（６，２９，２０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ　（１００ｓＯお よびＮ−メチルモルホリン（２，４２ｍｌ、　２２＋＋＋ｎｏｌ）中陰溶液にク ロロギ酸イソブチル（２，８６ｍ１．２２＋＋５ｏｌ）を滴下した。該反応混合 物を数分間撹拌し、次いで、４−クロロアニリン（２，８ｇ、２２＋ｓｍｏｌ） のＴＨＦ（１０諺Ｉ）中溶液を添加した。該反応混合物を室温まで加温し、１８ 時間撹拌した。反応が完結したらすぐに、該反応混合物を濃縮乾固した。残留物 を酢酸エチル（３００，１）に溶解し、水（３×）、ＩＮ　ＨＣＩ（２Ｘ）、水 （３×）、１０％ＮａＨＣＯ３水溶液（３×）、水（３ｘ）および飽和塩溶液で 連続的に洗浄した。有機抽出物を乾燥しく無水ＮａｚＳＯ４）、濾過し、次いで 、濃縮して白色固体を得た。酢酸エチル−ヘキサンから再結晶して標記化合物を 得た（２．４９）。

ｄ）戊邦江９コ」遺五ヒ没ヒｊ三田ｌと巳と３」Ｂｏｃ−Ａｓｐ（０−ｃＨｅｘ ）−（４−クロロ）フェニルアミド（１，４４９，３４＋ｍｏ１）を塩化メチレ ン（１０ｍｌ）中５０％ＴＦＡ溶液で室温で４５分間処理した。溶媒を除去し、 残留物を塩化メチレンから数回蒸発させて、痕跡量のＴＦＡを除去した。エーテ ルを添加して、生成物をそのＴＦＡ塩として沈澱させたつ該固体を集め、風乾し た。

ｅ）Ｎ’ベンゾイルＮ’ＭｅＡｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｇｌｙ−Ａｓｐ（０−ｃＨｅｘ ）−（４−クロロ）フェニルアミド ＤＭＦ　（８１１／）に溶解したＡｓｐ（０−ｃＨｅｘ）−（４−クロロ）フェ ニルアミド（２，２８ｍｍｏｌ）の冷溶液にＤ　Ｉ　ＥＡ　（１，５ｍｌ、　８ ．６＋ａａ＋ｏｌ）を添加してｐＨを中性にした。次いで、ＨＯＢｔ　（３００ ＋＋ｙ、２．２＋ｕ＋ｏｌ）を添加し、次いで、ＤＭＦ　（５＋＋／）中のＮ１ ベンゾイル−Ｎ’ＭｅＡ　ｒ　ｇ（Ｔｏ　５）−Ｇ　］　Ｖ　（１，００９，２ ｍｍｏｌ）を添加した。該反応物を冷所で数分間撹拌し、次いで、Ｎ−エチル− Ｎ。

−（ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（ＥＤＣ）（４９２１９，２，５ ７ａ＋ｍｏｌ）を滴下した。該反応混合物を室温まで加温し、１８時間撹拌した 。該反応混合物を濃縮乾固した。油状残留物を酢酸エチル（１００，１）に溶解 し、水（３Ｘ）、ＩＮ　ＨＣＩ（２Ｘ）、水（３×）、１０％ＮａＨＣＯ、水溶 液（３×）、水（３Ｘ）および飽和塩溶液で連続的に洗浄した。該有機抽出物を 乾燥しく無水Ｎａ２５Ｏ４）、濾過し、次いで、濃縮して標記化合物を得た（１ ．７４９）。フラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、勾配２−８％メタノ ール／塩化メチレン）により精製して標記化合物を得た（１．１ｇ）。

アニソール（２ｍｌ）の存在下、実施例１２（ｅ）の保護された直線状ペプチド （９００＠９）を無水ＨＦ（２０真ｌ）で０℃で１時間処理した。真空下、０° ＣでＨＦを除去し、残留物をエーテルと一緒に粉砕して油状物を得た。残留物を ０゜２Ｍ酢酸に溶解し、エーテルで数回洗浄し、凍結乾燥して粗製生成物を得た （７７５−９）。該ペプチドをフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカＯ ＤＳ。

勾配２０−２６％アセトニトリル／水−０，１％ＴＦＡ）により精製して標記ペ プチドを得た（３４３Ｗ９）。ＭＳ　（ＦＡＢ−）ｍ／ｅ　５７４．４　［Ｍ＋ Ｈ］”、５７２．２　［Ｍ−ＨＦ−；ＨＰＬＣｋ’　９．９４　（５μアルテツ クス・ウルトラスフェア（Ａｌｔｅｘ　Ｕｌｔｒａｓｐｈｅｒｅ”）　ＯＤ　Ｓ 、　４．５　＋＋＋＋Ｘ　２５ｃｍ、勾配、Ａニアセトニトリル、Ｂ・水−領１ ％トリフルオロ酢酸、２０分内に１−５０％Ａ、２２０ｎｍでのＵＶ検出）、お よびに’　６．８８　（２１％アセトニトリル／水−０１％トリフルオロ酢酸、 ２２０止でのＵＶ検出）；ＴＬＣＲ２０，７４（ｎ−ＢｕＯＨ：ＨｚＯ：ＡｃＯ Ｈ：ＥｔＯＡｃ　１　：　１　：　１　：　１）およびＲ＋　０．７４　（ｎ− ＢｕＯＨ：ＡｃＯＨ：ＨＩＯ：ピリジン１５：５：１０：１０）；アミノ酸分析 ：Ａｓｐ（１，００）、Ｇｌｙ　（１，０９）。

実施例１３ Ｎ’ベンゾイル−Ｎ’ＭｅＡｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓ＋）　（３−カルボキシ）−フ エニ３−アミノ安息香酸（２，７４９，２０關ｏ１）のベンジルアルコール（２ ０，６ｍｌ、２００　ａｕａｏｌ）中溶液にベンゼンスルホン酸（３，４８９， ２２ｍｍｏｌ）を添加した。該反応混合物をディージ・スタークトラップを用い て４時間加熱した。アルコールを蒸留し、残留物を酢酸エチルに溶解し、水、１ ０％ＮａＨＣＯｓ水溶液（３×）、水（３×）および飽和塩溶液で連続的に洗浄 した。有機抽出物を乾燥しく無水Ｎａ２Ｓ　Ｏ４）、濾過し、次いで、濃縮して 標記化合物を得た（１．５ｇ）。

Ｂｏｃ−Ａｓｐ（０−ｃＨｅｘ）（０，９１５９，２，９ｍａ＋ｏｌ）のＴＨＦ 　（１５＋＋ｆ）およびＮ−メチルモルホリン（０，３５＋＋１．３．２ｍｍｏ ｌ）中陰溶液にクロロギ酸イソブチル（０，４２ｍ１．３．２ｍｍｏｌ）を滴下 した。該反応混合物を数分間撹拌し、次いで、３−アミノ安息香酸ベンジル（０ ，６６９，２，９關ｏ１）のＴＨＦ　（２ｍ４）中溶液を添加した。′核反応混 合物を室温まで加温し、１８時間撹拌した。反応が完結したらすぐに、該反応混 合物を濃縮乾固した。残留物を酢酸エチルに溶解し、水（３×）、５％クエン酸 水溶液（３Ｘ）、−水（３×）、１０％ＮａＨＣＯ３水溶液（３×）、水（３Ｘ ）および飽和塩溶液で連続的に洗浄した。有機抽出物を乾燥しく無水Ｎａ２５（ Ｌ）、濾過し、次いで、濃縮して褐色がかった固体を得た（１゜４６９）。フラ ッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、勾配０．３−０．８％メタノール／塩 化メチレン）により精製して標記化合物を得た（０．６４９）。

ｃ）Ａｓｐ（０−ｃＨｅｘ）　−（３−ベンジルオキシカルボニル）フェニルア ミドＡｓｐ（０−ｃＨｅｘ）−（３−ベンジルオキシカルボニル）フェニルアミ ド（０゜６４１．１．２關ｏｆ）を塩化メチレン（１２＠Ａ’）中の５０％ＴＦ Ａ溶液で、室温で６０分間処理した。溶媒を除去し、残留物を塩化メチレンから 数回蒸発させて痕跡量のＴＦＡを除去した。生成物を、そのＴＦＡ塩としてエー テル−ヘキサンから結晶化した（０．６９）。

ｄ）Ｎ’ベンゾイル−Ｎ’ＭｅＡｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｇｌｙ−Ａｓｐ（０−ｃＨｅ ｘ）−（３−ベンジルオキシカルボニル）フェニルアミドＡｓｐ（０−ｃＨｅｘ ）−（３−ベンジルオキシカルボニル）フェニルアミド（６００ｍｇ、１．１１ 　ｍｍｏｌ）のＤＭＦ　（１０＋＋１）中陰溶液にＤ　Ｉ　ＥＡ　（０，４３票 １．２゜４５１０１）を添加してｐＨを中性にした。次いで、ＨＯＢｔ（１６５ ＋＋ｖ、１，２２ｍｍｏｌ）を添加し、次いで、ＤＭＦ　（５ｍＡ）中のＮ’ベ ンゾイル−Ｎ’ＭｅＡｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｇａｙ　（５５９１＋９．１．１１ｍｍ ｏｌ）を添加した。該反応を冷所で数分間撹拌し、次いで、Ｎ−エチル−Ｎ′− （ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（ＥＤＣ）（２３４１＋９．１．２ ２　ｍｌｌ１ｏｌ）を滴下した。該反応混合物を室温まで加温し、１８時間撹拌 した。該反応混合物を濃縮乾固した。残留物を酢酸エチル（１００１１）に溶解 し、水（３×）、５％クエン酸水溶液（３×）、水（３Ｘ）、１０％ＮａＨＣＯ ，水溶液（３ｘ）、水（３Ｘ）および飽和塩溶液で連続的に洗浄した。有機抽出 物を乾燥しく無水Ｎａ２　Ｓ　Ｏ４）、濾過し、次いで、濃縮して標記化合物を 得た（０．８７９）。フラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、勾配３−５ ％メタノール／塩化メチレン）により精製して標記化合物を得た（０．４４９） 。

アニソール（１ｄ＞の存在下、実施例１３（ｄ）の保護された直線状ペプチド（ ０，４４９）を無水ＨＦ（１０＠Ａ’）で０℃で１時間処理した。真空下、０℃ でＨＦを除去し、残留物をエーテルと一緒に油状物に粉砕した。残留物を０．２ Ｍ酢酸に溶解し、エーテルで数回洗浄し、凍結乾燥して粗製生成物を得た（２２ ０１９）。該ペプチドをフラッシュクロマトグラフィー（シリカＯＤＳ、勾配置 〇−１５％アセトニトリル／水−領１％ＴＦＡ）により精製して標記ペプチドを 得た（９１ｕ）。ＭＳ　（ＦＡＢ）ｍ／ｅ　５８４　［Ｍ＋Ｈ］”、５８２　［ Ｍ−Ｈｌ−；ＨＰＬＣｋ’　９．７３　（５μアルテツクス・ウルトラスフェア （ＡｌｔｅｘＵｌｔｒａｓｐｈｅｒｅ”）　ＯＤ　Ｓ、　４．５ｍｓ＋Ｘ　２５ ｃｍ、勾配、Ａニアセトニトリル、Ｂ：水−０，１％トリフルオロ酢酸、２０分 以内で１％−５０％Ａ、２２Ｏｒ＋ｕでのＵＶ検出）およびに’　１３．０８　 （１２％アセトニトリル／水−０，１％トリフルオロ酢酸、２２０ｎｉでのＵＶ 検出）；ＴＬＣＲ７０，５８（ｎ−ＢｕＯＨ：Ｎ２０：ＡｃＯＨ：　ＥｔＯＡｃ 　１　：　１　：　１　：　１）およびＲ＋　０．５６　（ｎ　ＢｕＯＨ：Ａｃ ＯＨ：Ｈ，Ｏ：ピリジン１５：５：１０：１０）；アミノ酸分析：Ａｓｐ（１゜ ００）、Ｇｌｙ（１，０１）。

実施例１４ Ｎ１ベンゾイル−Ｎ’ＭｅＡｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−（４−カルボキシ）フェー ル４−アミノ安息香酸（４，１２９，３０ｍｍｏｌ）のベンジルアルコール（３ １ｍ４．３００關０１）中溶液にベンゼンスルホン酸（５，２２９，３３ｍｍｏ ｌ）を添加した。

該反応混合物をディー２・スタークトラ・ノブを用いて４時間加熱した。該アル コールを蒸留し、残留物を酢酸エチルに溶解し、水、１０％ＮａＨＣＯ３（２Ｘ ）、水（３×）および飽和塩溶液（ＩＸ）で連続的に洗浄した。有機抽出物を乾 燥しく無水Ｎａ２Ｓ０４）、濾過し、次いで、濃縮して標記化合物を得た（１． ６２９）。

Ｂｏｃ−Ａｓｐ（０−ｃＨｅｘ）（０，８８３９，２，８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ　 （１０＋＋６）およびＮ−メチルモルホリン（０，３４ｇ／、３，１ｗｏｌ）中 陰溶液にクロロギ酸イソブチル（０，４０，ｊ’、３．１ｗｏｌ）を滴下した。

該反応混合物を数分間撹拌し、次いで、４−アミノ安息香酸ベンジル（０，５９ ４９，２，５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ　（２ｍＡ）中溶液を添加した。該反応混合物 を室温まで加温し、１８時間撹拌した。反応が完結したらすぐに、該反応混合物 を濃縮乾固した。残留物を酢酸エチルに溶解し、水（３×）、５％クエン酸水溶 液（３×）、水（３×）、１０％ＮａＨＣＯｓ水溶液（３×）、水（３×）およ び飽和塩溶液で連続的に洗浄した。有機抽出物を乾燥しく無水ＮａｚＳＯｎ）、 濾過し、次いで、濃縮して標記化合物を黄色がかった固体として得た（１．１８ ｇ）。

Ｂｏｃ−Ａｓｐ−（０−ｃＨｅｘ）−（４−ベンジルオキシカルボニル）ツユニ ルアミン（１，１ｇ、２．１　ｍｏｌ）を５０％ＴＦＡ／塩化メチレン（２０， ６）で室温で９０分間処理した。溶媒を除去し、残留物を塩化メチレンから数回 蒸発させて、痕跡量のＴＦＡを除去した。生成物を、エーテル−ヘキサンから、 そのＴＦＡ塩として結晶化した（０．９７ｖ）。

Ａｓｐ（０−ｃＨｅｘ）−（４−ベンジルオキシカルボニル）フェニルアミド（ ０９２ｇ、１．７１　ｍｍｏｌ）のＤＭＦ　（１５ｍＡ’）中陰溶液にＤ　Ｉ　 ＥＡ　（０，６６ｍｒ、３゜７８ｍｍｏｌ）を添加してｐＨを中性にした。ＨＯ Ｂｔ　（０，２５４９，１、８８ｌ１ｌｉｏｌ）を添加し、次いで、ＤＭＦ　（ ５＋＋４’）中のＮ’ベンゾイル−Ｎ’ＭｅＡ　ｒ　ｇ（Ｔ　ｏ　ｓ　）−Ｇｌ ｙ　（０，８６１９，１，７１ｍｍｏｌ）を添加した。該反応を冷所で数分間撹 拌し、次いで、ＥＤＣ（０，３６９，１，８８龍ｏ１）を滴下した。該反応混合 物を室温まで加温し、１８時間撹拌した。該反応混合物を濃縮乾固した。残留物 を酢酸エチル（１００＋Ａ’）に溶解し、水（３×χ、−５％クエン酸水溶液（ ３Ｘ）、水（３×）、１０％ＮａＨＣＯｓ水溶液（３×）、水（３×）および飽 和塩溶液で連続的に洗浄した。有機抽出物を乾燥しく無水Ｎａ２５Ｏ４）、濾過 し、次いで濃縮して標記化合物を得た（１．０６９）。該生成物をフラッシュク ロマトグラフィー（シリカ、３％メタノール／塩化メチレン）により精製して標 記化合物を得た（０．５７９）。

ｅ）Ｎ’ベンゾイル−Ｎ’ＭｅＡｒｇ−Ｇ１　ｙ−Ａｓｐ−（４−カルボキン） フエ実施例１４（ｄ）の保護された直線状ペプチド（０，５６９）を、アニソー ル（１ｍ／）の存在下、無水ＨＦ（１（ｂｌ）で０℃で１時間処理した。真空下 、０℃でＨＦを除去し、残留物をエーテルと一緒に粉砕した。残留物を０．２Ｍ 酢酸に溶解し、エーテルで数回洗浄し、凍結乾燥して粗製生成物を得た（２３０ ｕ）。該ペプチドをフラッシュクロマトグラフィー（シリカＯＤＳ、勾装置０− １３％アセトニトリル／水−０，１％ＴＦＡ）により精製して標記ペプチドを得 た（１８１９）。ＭＳ　（ＦＡＢ）ｍ／ｅ　５８４．２　［Ｍ＋Ｈ］”、ＨＰＬ Ｃｋ’　１０．０　（５μフルテツクス・ウルトラスフェア（Ａｌｔｅｘ　Ｕｌ ｔｒａｓｐｈｅｒｅ’）　ＯＤＳ、　４．５１１Ｘ２５ｃｍ、勾配、Ａ・アセト ニトリル、Ｂ：水−０１％トリフルオロ酢酸、２０分以内で１％−５０％Ａ、２ ２０ｎｍでのＵＶ検出）およびに’　８．５５　（１３％アセトニトリル／水− ０，１％ＴＦＡ、２２０ｎｍでのＵＶ検出）、ＴＬＣＲ。

０．７１　（ｎ−ＢｕＯＨ：ＨｚＯ：ＡｃＯＨ：ＥｔＯＡｃ　１　：　１　：　 １　：１）およびＲ１０，５８（ｎ−ＢｕＯＨ：ＡｃＯＨ：ＨｚＯ：ピリノン１ ５：５：１０：１０）；アミノ酸分析　Ａｓｐ　（１，０８）、Ｇ　Ｉ　Ｙ　（ １，００）。

実施例１５ Ｎ’（２−チェニルカルボニル）−Ｎ’ＭｅＡ　ｒ　ｇ−Ｇ　ｌ　ｙ−Ａ　ｓ　 ｐ−フェニルアＢｏｃ−Ａｓｐ（０−ｃＨｅｘ）（３１，５４ｖ、ｌ　Ｑ　Ｑｍ ｍｏｌ）のＴＨＦ（５００ｎｉ）およびＮ−メチルモルホリン（１２，０９ｍ／ 、　１１　Ｑｍｍｏｌ）中陰溶液にクロロギ酸イソブチル（１４，２７１７’、 １１０℃ｍｏ１．）を滴下した。該反応混合物を数分間撹拌し、次いで、アニリ ンの溶液（Ｉ　ＣｈＬ　１１　Ｑｍｍｏｌ）を添加した。該反応混合物を室温ま で加温し、１８時間撹拌した。反応が完結したらすぐに反応混合物を濃縮乾固し た。残留物を酢酸エチル（８００１１）に溶解し、水（３×）、５％クエン酸水 溶液（２×）、水（３×）、１０％ＮａＨＣＯ３水溶液（２ｘ）、水（３×）お よび飽和塩溶液で連続的に洗浄した。有機抽出物を乾燥しく無水ＮａｚＳＯ＜） 、濾過し、次いで、濃縮して白色固体を得た。該生成物を酢酸エチル−ヘキサン から再結晶して標記化合物を得た（３１．４２９）。

ｂ）Ａｓｐ（０−ｃＨｅｘ）−フェニルアミドＢｏｃ−Ａｓｐ（０−ｃＨｅｘ） −フェニルアミド（１１ｇ、２８．９ｍｍｏｌ）を５０％ＴＦＡ／塩化メチレン （１２０ｍ□ｌ）で室温で９０分間処理した。溶媒を除去し、残留物を塩化メチ レンから数回蒸発させて痕跡量のＴＦＡを除云した。エーテルを添加することに より、生成物をそのＴＦＡ塩として沈澱させた（１１．２９）。

実施例１４（ｄ）（７）手順ニシタカッテ、ＤＭＦ　（３０＊ｒ）中のＡｓｐ（ ０−ｃＨｅｘ）−フェールアミド（４，２ｙ、９　ｍｍｏｌ）をＤＭＦ　（５ｍ ｌ）中のＤＩＥＡ（３，４５ｍｌ、　１９．８ｍｌｌ１ｏｌ）、ＨＯＢｔ　（１ ，３４９，９，９ｍｍｏｌ）およびＮ’Ｂｏｃ−Ｎ’ＭｅＡｒ　ｇ（Ｔｏ　ｓ） 　−Ｇ　ｌ　ｙ　（１１）　（３，７４９，７，５ｆｆｌＩＩｌＯ１）と反応さ せて標記化合物を得た（５．６６９）。

ｄ）Ｎ’ＭｅＡｒｇ−Ｇａｙ−Ａｓｐ−７工＝ルアミド実施例１４（ｅ）の手順 にしたがって、実施例１５　（ｃ）の保護ペプチドをＴＦＡで処理して標記化合 物を得た（１．０７４９）。

Ｎ’ＭｅＡ　ｒ　ｇ−Ｇ　Ｉ　ｙ−Ａ　ｓ　ｐ−フェニルアミド（２７）（０， １６３ｇ、０゜３７　ｍｍｏｌ）のＤＭＦ　（５＋＋／）中陰溶液にＤＩＥＡ　 （１００／、！Ｊ、０．５５５ａｕ＋ｏｌ）を添加してｐＨを中性（ｐＨ７，５ 〜８．０）−にした。次いで、無水２−チェニルカルボン酸（０，３７ｍｍｏｌ ）　（２−チェニルカルボン酸（９６，４１９、Ｑ、　７５ｍｍｏｌ）から調製 した）およびＤＣＣ（７６，４１９，０、３７ｍｍｏｌ）を添加した。該反応を 冷所で数分間撹拌し、室温まで加温し、１８時間撹拌した。該反応混合物を濃縮 乾固した。次いで、残留物をゲル濾過（セファデックス（Ｓｅｐｈａｄｅｘ’） 　Ｇ−１５、１％酢酸／水）によって精製した。適当な画分を集め、凍結乾燥し て半精製生成物を得た（４５ｕ）。該ペプチドをフラッシュクロマトグラフィー （シリカＯＤＳ。

勾装置０−１６％アセトニトリル／水−０，１％ＴＦＡ）によりさらに精製して 標記化合物を得た（１６．３ｍｇ）、　ＭＳ　（ＦＡＢ）　ｍ／ｅ　５４６．２ 　［Ｍ＋Ｈ］’、５４４．４　［Ｍ−ＨＦ−；ＨＰＬＣｋ’　１６　（５μアル テツクス・ウルトラスフェア（Ａｌｔｅｘ　Ｕｌｔｒａｓｐｈｅｒｅ”）　ＯＤ 　Ｓ、　４．５ｍｍＸ　２５ｃ転勾配、Ａニアセトニトリル、Ｂ：水−０，１％ トリフルオロ酢酸、２０分以内で１−５０％Ａ、２２０止でのＵＶ検出）、およ びに’　９．０２　（１０％アセトニトリル／水−０，１％トリフルオロ酢酸、 ２２０ｎｒｔ’のＵＶ検出）。ＴＬＣＲ１０，８３（ｎ−ＢｕＯＨ：ＨｔＯ：Ａ ｃＯＨ：ＥｔＯＡｃ　１　：　１　：　１　：　１）；およびＲ，０，６４（ｎ −ＢｕＯＨ：　ＡｃＯＨ：　ＨｚＯ：ピリジン１５：５：１０：１０）二アミノ 酸分析：Ａｓｐ（１，００）、Ｇｌｙ（０，９８）。

ＧＩ　ｙ（ＯＢｚ　１）ｐ−トルエンスルホン酸塩（２，９３９，８，７ｍｍｏ ｌ）の乾燥ＤＭＦ中冷中温懸濁液ＩＲＡ　（７１，５１ｍＡ’、４１０關ｏ１） を滴下して中性ｐＨにした。次いで、ＨＯＢｔ　（１，１７ｇ、８．７ｆｆｌＩ １１０１）およびＮ’Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏ　ｓ）　（３，３８９，７，８９ｍ ｍｏｌ）を添加した。該反応混合物を数分間撹拌し、次いで、０℃でＤＤＣ（１ ，７８９，８，７ｍｍｏｌ）を添加した。該反応混合物を室温まで加温し、−夜 撹拌し続けた。減圧下、溶媒を除去し、残留物をフラッシュクロマトグラフィー （シリカ、勾配２−１０％メタノール／クロロホルム）により精製して標記化合 物を得た（３．０５ｖ）。

ｂ）Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｇａｙメタノール（５０ｍｌ）中のＮ’Ｂｏｃ −Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｇｌｙ　（０，６５９，１，１２關ｏ１）および炭素上活 性化パラジウム（１００厘９）をパー（Ｐ　ａｒｒ）振盪器中で５時間反応させ た。濾過により触媒を除去し、濾液を濃縮して標記化合物を得た。

実施例１４（ｄ）の手順にしたがって、ＤＭＦ　（１００ｍＡ’）中のＡｓｐ（ ０−Ｂｚｌ）−フェニルアミド（１０）　（２，２４１１１０１０１）をＤ　Ｉ 　ＥＡ　（０，４＠ｌ、　２．２４ａ＋ｏｌ）、ＨＯＢｔ（０，３９，２、２４ ｍｍｏｌ）、Ｂｏｐ試薬（０，９９９，２，２４ｍｍｏｌ）およびＢｏ　ｃ　− Ａ　ｒ　ｇ（Ｔｏ　５）−Ｇ　］　ｙ　（２，２４ｍｍｏｌ）と反応させて粗製 生成物を得た。これをフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、５％メタノール ／クロロホルム）により精製して標記化合物を得た（０．４９９）。

ｃｌ）Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｇｌ　ｙ−Ａｓｐ（０−Ｂｚ　Ｉ）−フェニルアミド Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｇａｙ−Ａｓｐ（０−Ｂｚ　］）−フェールアミド （２２０１９，０，２８７ｍｍｏｌ）を５０％ＴＦＡ／塩化メチレン（１０＋＋ Ａ’）で室温で４時間処理した。溶媒を除去し、残留物を塩化メチレンから数回 蒸発させ、痕跡量のＴＦＡを除去した。残留物をＨＣｌ−ジオキサンで処理し、 トルエンから数回蒸発させ、真空下で乾燥して標記化合物をその塩酸塩として得 た。

Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｇｌｙ−Ａｓｐ（０−Ｂｚｌ）−フェニルアミドのＤＭＦ　 （２０ｍｌ）中溶液にトリエチルアミン（４３μｍ）を中性ｐＨまで添加した。

無水酢酸（３０μＩ）を添加し、次いで、該反応混合物を１８時間撹拌した。真 空下、溶媒を除去し、残留物をフラッシュクロマトグラフィー（１５％メタノー ル／クロロホルム）により精製し、標記化合物を得た（０．１４９）。

ｆ）Ｎ’アセチル−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−フェールアミドアニソール（１ｍ ｊ’）の存在下、実施例１ｆｉ　（ｅ）の保護ペプチド（１２０ｍｙ）を無水Ｈ Ｆ（１０ｍｌ）で０℃で１時間処理した。真空下、０℃でＨＦを除去し、次いで 、残留物をエーテルと一緒に粉砕した。残留物を０．２Ｍ酢酸に溶解し、エーテ ルで数回洗浄し、凍結乾燥して粗製生成物を得た（３５ｕ）。該ペプチドを分配 カラムクロマトグラフィー（セファデックス（Ｓｅｐｈａｄｅｘ’）　Ｇ−１５ ，４，１：１ブタノール：酢酸：水）により精製した。適当な画分を集め、凍結 乾燥して半精製生成物を得た（２５ｕ）。半分数ＨＰＬＣ（５μＯＤＳ　シリカ 、２０％アセトニトリル／水−〇、１％ＴＦＡ）によってさらに精製して精製標 記化合物を得た（１８１９）。ＭＳ　（ＦＡＢ）ｍ／ｅ　４６４．２［Ｍ＋Ｈ］ ”、４６２［Ｍ−ＨＦ−；ＨＰＬＣｋ’　３．３５　（２０％アセトニトリル／ 水−０，１％ＴＦＡ。

２２０止でのＵＶ検出）；ＴＬＣＲ＋　０．１５　（ｎ　ＢｕＯＨ：ＨｔＯ：Ａ ｃ０Ｈ４：１：１）；アミノ酸分析：Ａｓｐ　（１，００）、Ｇｌｙ（０，９７ ）、ＡｒｇＮ１ベンゾイル−Ａ　ｒ　ｇ−Ｇ　１　ｙ−Ａ　ｓ　ｐ−フェニルア ミド（３９）の調製Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｇａｙ−Ａｓｐ（０−Ｂｚ　ｌ）−フェ ニルアミド（０，３１３ａｎａｌ）のＤＭＦ　（５＋＋／）中溶液にトリエチル アミン（５４μｌ）を中性ｐＨまで添加した。塩化ベンゾイル（３６μｌ）を添 加し、該反応混合物を１８時間撹拌した。真空下、溶媒を除去し、残留物をフラ ッシュクロマトグラフィー（シリカ、５−１０％メタノール／クロロホルム）に より精製し、標記化合物を得た。

ｂ）Ｎ”ベンゾイル−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−フェールアミド実施例１４（ｅ ）の手順にしたがって、該保護ペプチドを無水ＨＦで処理し、単離した。

実施例１８ Ｎ１ベンジルオキシカルボニル−Ａ　ｒ　ｇ−Ｇ　］　ｙ−Ａ　ｓ　ｐ−フェニ ルアミド（４実施例１（ａ）の手順にしたがって、Ｃｂｚ−ＡｒｇをＧ　］　ｙ −Ａ　ｓ　ｐ（０−ｔＢｕ）−フェニルアミドとカップリングさせ、ＤＭＦ中、 ＤＩＥＡＳＥＤＣおよびＨＯＢＴを用いて単離して標記化合物を得た。

実施例１８（ａ）の化合物をジオキサンに溶解し、塩酸で処理して標記化合物Ｄ −Ｐｈｇ−Ａｒｇ−Ｇａｙ−Ａｓｐ−フェニルアミド（４１）の調製Ｃｂｚ−Ｄ −フェニルグリシンをフッ化シアヌリルで処理して酸フッ化物を得た。Ｃｂｚ− Ｄ−フェニルグリシル・フルオリドおよびＡ　ｒ　ｇ（Ｔｏ　５）−Ｇ　Ｉ　ｙ −Ａｓｐ（０−ｃＨｅｘ）−フェニルアミドをカップリングさせ、得られた生成 物をＨＦで処理して所望の化合物を得た。ＭＳ（ＦＡＢ）ｍ／ｅ　５５５［Ｍ＋ Ｈ］”。

ジャーナル・オブ・オーガニック・ケミストリー（Ｊ　、　Ｏｒｇ、　Ｃｈｅｓ 、　）　４８．７７（１９８３）記載の方法と同様の方法によって、Ｎ’Ｃｂｚ −Ｏｒｎ（Ｐｈｔｈ）をＮ’Ｃｂｚ−Ｎ’ＭｅＯｒｎ（Ｐｈｔｈ）に変換した。

実施例１４（ｄ）の手順にしたがって、Ｎ’Ｃｂｚ−Ｎ’Ｍｅ−Ｏｒｎ（Ｐｈｔ ｈ）およびＧ　ｌ　ｙ　−Ａ　ｓ　ｐ（０−ボニル−Ｎ’ＭｅＯｒｎ（Ｐｈｔｈ ）−Ｇｌｙ−Ａｓｐ（０−Ｂｚ　ｌ）−フェニルアミドを得た。パラジウム触媒 上での水素化によりベンジルオキシカルボニル基（Ｃｂｚ）を除去し、得られた アミンをベンゾイル化し、得られたアミノ基を実施例１７（ａ）の手順にしたが ってベンゾイル化した。得られたペプチドをヒドラノンで処理して標記化合物を 得た。ＭＳ　（ＦＡＢ）ｍ／ｅ　４９８　［Ｍ＋Ｈ］“。

実施例２１ ４−（アミノイミノメチル）アミノベンゾイル−３ａｒ−Ａｓｐ−フェニルアミ 実施例１４（ｄ）の手順に従って、４−グアニジノ安息香酸塩酸塩および５ａｒ −Ａｓｐ（０−Ｂｚｌ）−フェニルアミドをＥＤＣとともに濃縮して４−グアニ ジノベンゾイル−３ａｒ−Ａｓｐ（０−Ｂｚｌ）−フェニルアミドを得た。パラ ジウム触媒存在下、この生成物を水素で処理して標記化合物を得た。ＭＳ　（Ｆ ＡＢ）ｍ／ｅ　４４１　［Ｍ＋Ｈ］’。

工程１２（ｃ）において４−クロロアニリンを２−クロロアニリンに代える以外 は実施例１２の手順を用いて標記化合物を調製した。

実施例２３ Ｎ′ベンゾイル−Ｎ’ＭｅＡｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ　（２−メトキシ）７エール アミド（４５）の調製 工程１２（ｃ）の４−クロロアニリンを２−メトキシアニリンに代える以外は実 施例１２の手順を用いて標記化合物を調製した。

工程１３（ｂ）の３−アミノ安息香酸ベンジルを２−ベンジルオキシアニリンに 代える以外は実施例１３の手順を用いて標記化合物を調製した。

ａ）Ｂｏａ−Ａｒｇ（ＮＯｘ）−０ＣＨ３Ｂ　ｏ　ｃ　−Ａ　ｒ　ｇ（Ｎｏｗ） 　（２，０９，５，５ｗｏｌ）のＭｅＯＨ／ＣＨｔＣ４ｚ中溶液にジアゾメタン のＥｔ、Ｏ中溶液を添加した。該反応混合物を５％ＮａＩＣＯ３水溶液およびＨ ，Ｏで連続的に洗浄し、乾燥させた。溶媒を真空内で除去し、標記化合物を得（ １，６９，８７％）、これをさらに精製せずに使用した。

ｂ）Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｎｏｗ）　−ＮＨＮＨ２Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｎｏｔ）−０Ｃ Ｈｓ　（１，６ｇ、４，８ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ中溶液に６２％ヒドラジン水和 物（１，２ａｒ、　２４ｗｏｌ）を添加した。該反応混合物を室温で４８時間攪 拌した。得られた混合物を減圧濃縮し、残留物をフラッシュクロマトグラフィー （シリカ、勾配５−１５％ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃ１ｍ）により精製して無色油状物 を得（０，７４９，４６％）、これは、放置すると固化した。

ｃ）Ｂｏｃ−Ａｓｐ（０−Ｂｚ　Ｉ）−（Ｎ−メチル）フェニルアミドＢｏｃ− Ａｓｐ（０−Ｂｚ　］）（２２，０ｇ６．２１１１１１ｏ１）のＤＭＦ中溶液に Ｎ−メチルアニリン（０，９９ｅ、９．３ｍｍｏｌ）、ＨＯＢＴ水和物（０，９ ２ｙ、６．８ｍｍｏｌ）およびＤＣＣ（１，３９，６，２ｍｍｏｌ）を添加した 。得られた混合物を室温で一夜撹拌した。該反応混合物を減圧濃縮した。残留物 をＣＨ２Ｃｌ２に溶解し、０．５ＮＨＣｌおよびＨＩＯで洗浄し、乾燥した（Ｍ ｇＳＯ＜）。溶媒を真空内で除去し、残留物をフラッシュクロマトグラフィーに より精製して粘性のある油状物を得た。

ｄ）Ｏ＝Ｃ−Ａｓｐ（０−Ｂｚ　Ｉ）−（Ｎ−メチル）フェニルアミド０℃にお けるＢｏｃ−Ａｓｐ（０−Ｂｚ　１）−（Ｎ−メチル）フェニルアミド（０゜９ １９．２．２ｍｍｏｌ）にトリフルオロ酢酸（８ｍｌ＞のＣＨ２Ｃｌ２　（８ａ ｒ）中溶液を添加した。０℃で４５分間撹拌した後、該混合物を減圧濃縮し、ト ルエンで数回共沸的に処理した。残留物にトルエン（４’２＊Ｉ）中２０％ホス ゲンの溶液を添加した。得られた混合物を還流下で１５分間加熱し、次いで、室 温まで冷却し、減圧濃縮した。残留物をトルエンで共沸的に処理し、さらに精製 せずに用いた。

実施例２５　（ｃ）の化合物のＣＨ３ＣＮ中溶液にＢ　ｏ　ｃ−Ａ　ｒ　ｇ（Ｎ ｏｗ）　−ＮＨＮＨ！　（０，７４９，２，２１１１１０１）のＣＨＩＣＮ中溶 液を温溶液、得られた溶液を室温で一夜撹拌した。溶媒を真空内で除去し、残留 物をフラッシュクロマトグラフィ−（シリカ、１０％ＭｅＯＨ／ＣＨｚＣＡ’ｘ ）により精製して標記化合物を得た（０．３４９．２３％）。

ｆ　）　Ａ　ｒ　ｇ−ＮＨＮＨＣＯ−Ａ　ｓ　ｐ−（Ｎ−メチル）フェニルアミ ド実施例２５　（ｅ）の化合物（０，３０９，０，４５ｍｍｏｌ）にトリフルオ ロ酢酸（０，７ａｒ、１１．２ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２　（０，７１１１）中 溶液を添加したつ得られた混合物を室温で１５分間撹拌し、次いで、減圧濃縮し た。残留物をトルエンで共沸的に処理し、次いで、残留物をＣＨ，Ｃｌ２に溶解 した。この溶液にトリエチルアミン（０，１，３ｉｊ’、ｌ、　Ｑ　ｍｍｏｌ） を添加し、次いで、塩化ベンゾイル（０，０５ａｒ、０　、４４　ｍｍｏｌ）を 添加した。得られた混合物を室温で一夜撹拌し、次いで、減圧濃縮した。残留物 をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、１０％ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃ１ｚ）に より精製して標記化合物を得た（０．１５ｇ、５０％）。

実施例２５　（ｆ）の化合物（１５０ｕ、０　、２２　ｍｏｌ）のＭｅＯＨ（３ ０ｆ）中溶液に氷酢酸（０，３，７’）および活性炭上１０％パラジウム（１９ −９）を添加した。得られた混合物を４５ｐｓｉＨ２で３時間水素添加した。こ の時、薄層クロマドグフィーにより出発物質の存在のみが示された。該混合物を 脱気し、さらに活性炭上１０％パラジウム（９０−ｇ）を添加した。該反応混合 物を一夜水素添加した（４５ｐｓｉ）。この時、再度、薄層クロマドグフィーに よって出発物質の存在のみが示された。該混合物をセライト（Ｃｅ’ｌ’ｉｔｅ ”）のパッドを介して濾過し、次いで、減圧濃縮した。残留物にメタノール（３ ０ｍｌ）、氷酢酸（０３Ｍｔ）および活性炭上１０％パラジウム（１００−ｖ） を添加し、該混合物を７時間水素化した（４６ｐｓｉ）。該混合物をセライト（ Ｃｅｌｉｔｅ″＋）のパッドを介して濾過し、次いで、減圧濃縮した。粗製生成 物を半分数ＨＰＬＣｋ’　３．８６　（ダイナマックス（Ｄｙｎａｓ＋ａｘ）　 Ｃ１８，１７％アセトニトリル／水−０，１％トリフルオロ酢酸、２６０ｕＭで のＵＶ検出）によって精製して精製標記化合物を得、これを少量の氷酢酸を含む Ｈ，Ｏから凍結乾燥した（１９＋＋９．１０％）。ＭＳ　（ＦＡＢ）ｍ／ｅ５４ １　［Ｍ＋Ｈ］”；ＴＬＣＲ１０，８７（ｎ　ＢｕＯＨ：ＨＯＡｃ：ＨｚＯ：酢 酸エチル１　：　１　：　１　：　１）；ＲｃＯ，８８（ｎ−ＢｕＯＨ：ＨＯＡ ｃ：Ｈ，０：ビリジ：／　１５　：　５　：　１０　：　１０）；ＨＰＬＣｋ’ 　７．８６　（ダイナマックス（Ｄ　ｙｎａｗ＋ａｘ）Ｃ１８、勾配、Ａニアセ トニトリル、Ｂ：水−０，１％トリフルオロ酢酸、３０分以内で１０−８０％Ａ 、２６０ｎＭでのＵＶ検出）。

工程２（ａ）におけるアニリンをフェノールに代える以外は実施例２の手順を用 いて標記化合物を調製した。

Ｎ−メチルアニリン（１５ｇ、１４．　Ｑｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ　（１０＋１ ）中溶液にＤ　Ｉ　ＥＡ　（１２ａｒ、５．Ｑｍｍｏｌ）を滴下してｐＨを８に した。次いで、Ｂｏｃ−Ｄ−Ａ　ｒ　ｇ（Ｔｏ　ｓ）　（５ｇ、１１．７ｍｍｏ ｌ）およびＨＯＢｔ　（２，１９，１７，Ｑｍｍｏｌ）を添加した。該反応混合 物を数分間撹拌し、次いで、ＥＤＣ（２，５９，１３，１ｍｍｏｌ）を２分間か けて滴下した。該反応混合物を室温で一夜撹拌した。該反応混合物にさらにＤ　 Ｉ　ＥＡ　（１，２ａｒ、６．Ｑｍｍｏｌ）およびＥＤＣ（２，０９，１０．５ 關ｏ１）を添加して遅い反応を完結させた。１週間後、溶媒を減圧除去し、残留 物を酢酸エチルおよび１０％にＩＣＯｓに分配した。有機抽出物を、水、５％ク エン酸、水および食塩水で連続的に洗浄した。有機抽出物を無水硫酸ナトリウム で乾燥し、濾過し、濃縮し、次いで、エーテル／ヘキサン（１／１）と−緒に粉 砕して標記化合物を白色固体として得た（２．４９．４０％）。

ｂ）Ｄ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−（Ｎ−メチル）フェニルアミドＢｏｃ−Ｄ−Ａｒｇ （Ｔｏｓ）−（Ｎ−メチル）フェニルアミド（２，：３９．４．４１■ｏｌ）を 塩化メチレン（２０，／）中５０％ＴＦＡで室温で１時間処理した。溶媒を除去 し、残留物を塩化メチレンから数回蒸発させて痕跡量のＴＦＡを除去した。

残留物をエーテルと一緒に粉砕し、さらに精製せずに次の段階に用いた。

Ｄ−Ａ　ｒ　ｇ（Ｔｏ　５）−（Ｎ−メチル）フェニルアミドの塩化メチレン（ ５ｍｌ）中温溶液にトリエチルアミン（１，３１／、９．３ｍｍｏｌ）を添加し た。次いで、塩化マロニルメチル（５００μｌ、　４．７＋ｎ＋ｏｌ）を添加し た。該反応混合物を室温まで加温し、−夜撹拌し続けた。該反応混合物を水中に 注ぎ、有機層を５％クエン酸、水、５％ＮａＨＣＯ１、水および食塩水で連続的 に洗浄した。該有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、次いで、濃縮し て標記化合物を白色固体として得た（１７９．８１％）。

１−（Ｄ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）　−Ｎ−メチルアニリド）−メチルマロネート（０ ，７８９，１，５ｍｍｏ１）のメタノール（１，５１Ａ）中溶液にｌＮＮａＯＨ の溶液（２，５ｍｌ、　２．５Ｉｌｌ＋ｎｏｌ）を滴下した。該反応溶液を室温 で１８時間撹拌した。ＩＭＨＣ１！を用いて溶液のｐＨを６に調節し、該溶液を 濃縮した。ＩＭＨＣｊ’を用いてｐＨを２に調節し、油状物を沈澱させた。水と 一緒に粉砕し、真空内で乾燥させて標記化合物を白色固体として得た（０．６０ ８９）。

Ａｓｐ（０−ｃＨｅｘ）−フェニルアミドＡ３ｐ（０−ｃＨｅｘ）−フェニルア ミドの乾燥ＤＭＦ　（２＋＋７）中溶液にＤＩＥＡ　（０，２ｍｌ、　１．１ｍ １ｏｌ）を滴下し、ｐＨ８にした。次いで、ＨｏＢｔ　（０，１８８ｇ、ｌ　、 　２＋ｕ＋ｏｌ）および１−（Ｄ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｎ−メチルアニリド）− マロン酸（６）　（０，５７ｇ、１．１＋ｍｏｌ）を添加した。該反応混合物を 数分間撹拌し、次いで、ＥＤＣ（０，２１６ｑ、１．ＩＩｌｌｍＯｌ）を滴下し た。該混合物を１８時間撹拌した。真空下、溶媒を除去し、残留物を酢酸エチル および１０％Ｋ　ｔ　ＣＯｓに分配した。有機抽出物を水、５％クエン酸、水お よび食塩水で連続的に洗浄した。

該有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、次いで、白色固体に濃縮し、 これをさらに精製せずに次の段階に用いた。

アニソール（２ｙｓｌ）の存在下、実施例２７（ｅ）の化合物を無水ＨＦ（１０ ｍｌ）で０℃で１時間処理した。真空下、０℃でＨＦを除去し、残留物をエーテ ルと一緒に油状物に粉砕した。残留物を０．２Ｍ酢酸に溶解し、凍結乾燥して粗 製生成物を得た（０．２６９）。該生成物をゲル濾過（セファデックス（Ｓｅｐ ｈａｄｅｘ’）　Ｇ−２５，０，２Ｍ酢酸）により精製して標記化合物を得ｆ＝ 　（０，０２８９）。ＭＳ　（ＦＡＢ）ｍ／ｅ　５４０．３　［Ｍ＋Ｈ］”；Ｈ ＰＬＣｋ’　１０．７　（５μアルテツクス・ウルトラスフェア（Ａｌｔｅｘ　 Ｕｌｔｒａｓｐｈｅｒｅ″）　ＯＤＳ、勾配、Ａ、アセトニトリル、Ｂ：水−０ １％トリフルオロ酢酸、２０分以内で１０％−５０％Ａ、２２０ｎｍでのＵＶ検 出）、ｋ’７．３（ウルトラスフェア（ＵｌｔｒａｓｐｈｅｒｅＲ）　ＯＤＳ。

２２％アセトニトリル／水−領１％トリフルオロ酢酸、２２０ｎｍでのＵＶ検出 ）；ＴＬＣＲ７０，７６（ｎ−ＢｕＯＨ：Ｒ２０：ＡｃＯＨ：ＥｔＯＡｃ　１　 ＋　１　：　１　：１）；Ｒ３０，８４（ｎ−ＢｕＯＨ：ＡｃＯＨ：Ｒ２０：ピ リジ：／１５：５：１０：１０）、アミノ酸分析：Ａｓｐ　（１，００）、Ａｒ ｇ　（０，９９）。

非経口投与単位組成物 実施例１または２の化合物２０ｍ＋９を滅菌乾燥粉末として含有する調製物を以 下のようにして調製する：核化合物２０窮９を蒸留水１５ｍ／に溶解する。滅菌 条件下で該溶液を２５ｍ１の多投部アンプル中に濾過し、次いで、凍結乾燥する 。静脈内注射または筋肉的注射用の水中５％デキストロース（Ｄ５Ｗ）２０ｇ＋ １１を添加することにより、粉末を再構成する。これによって、用量は、注射量 によって決定される。引き続いて、この投与単位の計量した量を、注射用Ｄ５Ｗ の別の量に加えることにより希釈してもよく、あるいは、計量した投与量を、静 脈点滴または他の注射−輸液システムのためのビンもしくはバッグのような別の 調剤機構に加え実施例３の化合物５０ｍｇをラクトース７５窮９およびステアリ ン酸マグネシウム５肩９とともに混合および粉砕することにより、経口投与用カ プセルを調製する。

得られた粉末をスクリーニグし、ゼラチン硬カプセル中に充填する。

シュクロース２０１１９、硫酸カルシウムニ水和物１５０１９および実施例３の 化合物５０麿９を１０％ゼラチン溶液とともに混合および顆粒化することにより 、経口投与用錠剤を調製する。湿顆粒をスクリーニグし、乾燥し、デンプン１０ 肩９、タルク５籾およびステアリン酸３ＩＱと混合し、錠剤に打錠する。

以上の記載は本発明の実施および利用のための説明である。しかしながら、本発 明は、本明細書に記載の具体例のみに限定されるものではな（、以下の請求の範 囲の範囲内のすべての改変を包含する。

国際調査報告 フロントページの続き （５１）Ｉｎｔ、Ｃ１，５識別記号　庁内整理番号Ａ６１Ｋ　３７１５４　ＡＢ Ｎ　８３１４−４ＣＣＯ７Ｄ　２０９／４４　９２８４−４Ｃ２３３１００９３ ６０−４Ｃ ３３３／１６　９１６５−４Ｃ ３３３／２０　９１６５−４Ｃ Ｃ０７Ｋ　５１０２　８３１８−４Ｈ （７２）発明者　ポンディネル、ウィリアム・ニドワードアメリカ合衆国ペンシ ルベニア州１９０８７、ウニイン、フランクリン・レーン１５１２番Ｉ （７２）発明者　クウ、トーマス・ウェンーフウアメリカ合衆国ペンシルベニア 州１９０２５、ドレッシャー、サウスウィンド・ウェイ１４１３番 （７２）発明者　サマネン、ジェームズ・マーティンアメリカ合衆国ペンシルベ ニア州１９４６０、フェニックスビル、ジャグ・ハロウ・ロード（番地の表示な し）

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．式： Ｄ−Ｅ−Ａｓｐ−Ｑ−Ｙ ［式中、 ＱはＮＨ、ＮＣＨ３またはＯ； Ｙは非置換または１〜３個のＣ１−６アルキル、トリフルオロメチル、ハロゲン 、ＯＲ′、ＳＲ′、（ＣＨ２）ｎＡｒ、ＣＯＮＲ１Ｒ２、ＣＯ２Ｒ２またはＲ４ Ｒ４Ｎによって置換されているフェニル、ナフチルまたはＨｅｔ；Ｄは▲数式、 化学式、表等があります▼または▲数式、化学式、表等があります▼ＷはＮＨＲ ′、ＮＲ′Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨＲ′、ＮＲ′Ｃ（＝ＮＨ）Ｒ′または（Ｃ＝ＮＨ） ＮＨＲ′； ＵはＣＯ、ＳＯ２、ＮＨＣＯ、（ＣＨ２）ｎ、ＳＯ２ＮＨ、ＮＨＳＯ２またはＯ Ｃ（＝Ｏ）； ＶはＨ、Ｒ′、Ｒ４ＲｓＮ、Ｒ４ＲｓＮＣＯ、Ｒ′Ｏ、Ｙ−ＮＲ′、ｘ−Ａ−Ｂ −ＮＲ′または▲数式、化学式、表等があります▼Ａは存在しないか、Ａｓｎ、 Ｇｌｎ、Ａｌａ、ＰｒｏまたはＡｂｕ；ＢはＡｒｇ、ＨＡｒｇ、ＮＡｒｇ、（Ｍ ｅ２）Ａｒｇ、（Ｅｔ２）Ａｒｇ、Ａｂｕ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｏｒｎ、 Ｌｙｓ、Ｐｈｇまたはそのα−Ｒ′置換誘導体、Ｄｔｃ、ＴｐｒまたはＰｒｏか ら選択されるＤ−またはし−アミノ酸；ＥはＧｌｙ、Ｓａｒ、ＣＨ２ＣＯ、ＯＣ Ｈ２ＣＯまたはＮＨＣＯ；Ｒ′はＨ、Ｃ１−６アルキルまたはＡｒ（ＣＨ２）ｐ ；ＸはＲ４Ｒ４Ｎ、Ｒ４Ｒ５Ｎ−ＣＯまたはＨ；Ｒ１およびＲ２はＨ、Ｃ１−６ アルキルまたは（ＣＨ２）ｐＡｒ；Ｒ４はＨまたはＣ１−６アルキル； Ｒ５はＲ６、Ｒ６ＣＯ、Ｒ６ＯＣＯ、Ｒ６ＯＣＨ（Ｒ６′）ＣＯ、Ｒ６ＮＨＣＨ （Ｒ６′）ＣＯ、Ｒ６ＳＣＨ（Ｒ６′）ＣＯ、Ｒ６ＳＯ２またはＲ６ＳＯ；Ｒ６ およびＲ６′はＨ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−７シクロアルキル、Ａｒ、Ａｒ− Ｃ１−４アルキル、Ｈｅｔ、Ｈｅｔ−Ｃ１−４アルキル、ハｒ−（ＣＨ２）ｐＣ Ｈ（Ａｒ）（ＣＨ２）ｐまたはＡｒ−Ｃ３−７シクロアルキル；Ａｒはフェニル または１〜３個のＣ１−６アルキル、トリフルオロメチル、ハロゲン、Ｒ′Ｏも しくはＲ′Ｓによって置換されているフェニル；▲数式、化学式、表等がありま す▼は１または２個の窒素原子を含有する５もしくは６員の単環しくは二環式環 ；ｍは（１）ＷがＮＲ′−（Ｃ＝ＮＨ）ＮＨＲ′である場合、０〜４；（２）Ｗ が（Ｃ＝ＮＨ）ＮＨＲ′もしくはＮＲ′（Ｃ＝ＮＨ）Ｒ′である場合、０〜５； または （３）ＷがＮＨＲ′である場合、０〜６；ｎは０〜２； Ｐは０〜３； ｑは（１）ＷがＮＲ′−（Ｃ＝ＮＨ）ＮＨＲ′である場合、１〜４；（２）Ｗが （Ｃ＝ＮＨ）ＮＨＲ′もしくはＮＲ′（Ｃ＝ＮＨ）Ｒ′である場合、２〜５；ま たは （３）ＷがＮＨＲ′である場合、３〜６である］で示される化合物またはその医 薬的に許容される塩。 ２．Ｙが所望によりハロゲン、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシ、Ｃ１− ４アルキルチオ、ＣＯＮＲ１Ｒ２またはＣＯ２Ｒ３により置換されていてもよい フェニルまたはナフチルである請求項１記載の化合物。 ３．Ｙがフェニルまたはナフチルである請求項２記載の化合物。 ４．Ｄが▲数式、化学式、表等があります▼である請求項１記載の化合物。 ５．ＱがＮＨである請求項１記載の化合物。 ６．ＶがＲ４Ｒ５Ｎである請求項１記載の化合物。 ７．ＥがＧｌｙである請求項４記載の化合物。 ８．Ｒ４がＨまたはメチルであり、Ｒ５がＲ６ＣＯまたはＲ６ＯＣＯである請求 項６記載の化合物。 ９．ＶがＡｒＣＯ−Ｎ（ＣＨ３）またはＨｅｔＣＯ−Ｎ（ＣＨ３）である請求項 ４記載の化合物。 １０．Ｙが所望によりクロロ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルキルチオまたは カルボキシで置換されていてもよいフェニルである請求項８記載の化合物。 １１．Ｎ−［［５−（アミノイミノメチル）アミノ−１−オキソペンチル］−Ｇ ｌｙ−Ａｓｐ−フェニルアミド、 Ｎ−［（２Ｒ）−２−フェニル−５−（アミノイミノメチル）アミノ−１−オキ ソペンチル］−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−フェニルアミド、Ｎ−［（２Ｓ）−２−（１， ３−ジヒドロ−２Ｈ−イソインドリル）−５−（アミノイミノメチル）アミノ− １−オキソペンチル］−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−フェニルアミド、Ｎ−［Ｎα−（４， ４−ジフェニルブチリル）−Ｎα−メチル−アルギニル］−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−フ ェニルアミド、 Ｎα−（フタロイル）−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−フェニルアミド、Ｎαベンゾ イル−ＮαＭｅＡｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−（４−カルボキシ）フェニルアミド、 Ｎαアセチル−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−フェニルアミド、Ｎαベンゾイル−Ａ ｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−フェニルアミド、Ｎαベンジルオキシカルボニル−Ａｒ ｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−フェニルアミド、Ｄ−Ｐｈｇ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ− フェニルアミド、Ｎαベンジルオキシカルボニル−Ｎαメチル−Ｏｒｎ−Ｇｌｙ −Ａｓｐ−フェニルアミド、 ４−（アミノイミノメチル）アミノベンゾイル−Ｓａｒ−Ａｓｐ−フェニルアミ ド、 Ｎαベンゾイル−ＮαＭｅＡｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−（２−クロロ）フェニルア ミド、 Ｎαベンゾイル−ＮαＭｅＡｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−（２−メトキシ）フェニル アミド、 Ｎαベンゾイル−ＮαＭｅＡｒｇ−Ｇｌｙ−ＭｅＡｓｐ−（２−ヒドロキシ）フ ェニルアミド、 Ｎαベンゾイル−Ａｒｇ−ＮＨＮＨＣＯ−Ａｓｐ−（Ｎ−メチル）フェニルアミ ド、 Ｎα（ＯＣＣＨ２ＣＯ）−Ａｒｇ−（Ｎ−メチル）フェニルアミド、Ａｓｐ−フ ェニルアミド Ｎα−（２−メチルベンゾイル）−Ｎα−ＭｅＡｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−（２− メチル）フェニルアミド、 Ｎαベンゾイル−ＮαＭｅＡｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−フェニルアミド、Ｎαアセ チル−ＮαＭｅＡｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−フェニルアミド、Ｎαアセチル−Ｎα ＭｅＡｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−（２−カルボキシ）フェニルアミド、 Ｎα（２−メチルチオ）ベンゾイル−ＮαＭｅＡｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−（２− メチルチオ）フェニルアミド、 Ｎαベンゾイル−ＮαＭｅ∧ｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−（４−クロロ）フェニルア ミド、 Ｎαベンゾイル−ＮαＭｅＡｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−（３−カルボキシ）フェニ ルアミド、および Ｎα（２−チエニルカルボニル）−ＮαＭｅＡｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−フェニル アミドである請求項１記載の化合物。 １２．請求項１記載の化合物および医薬的に許容される担体からなる医薬組成物 。 １３．医薬品製造における請求項１記載の化合物の使用。 １４．請求項１記載の化合物を投与することからなる血小板凝集の阻害方法。 １５．請求項１記載の化合物を投与することからなる発作または−過性脳虚血発 作の治療方法。 １６．請求項１記載の化合物を投与することからなる心筋梗塞の治療方法。 １７．線維素溶解剤および請求項１記載の化合物を投与することからなる哺乳類 の動脈または静脈の血栓崩壊および再閉塞阻害方法。 １８．線維素溶解剤がアニストレプラーゼ、ストレプトキナーゼ（ＳＫ）、ウロ キナーゼ（ＵＫ）、プロウロキナーゼ（ｐＵＫ）または組織プラスミノーゲン活 性化因子（ｔＰＡ）またはその突然変異体もしくは誘導体である請求項１６記載 の方法。