JPH0650965B2

JPH0650965B2 - ユリ属植物の種苗の増殖方法

Info

Publication number: JPH0650965B2
Application number: JP61048423A
Authority: JP
Inventors: 靜史谷本; 高橋　　滋
Original assignee: 三井石油化学工業株式会社; 第一園芸株式会社
Priority date: 1986-03-07
Filing date: 1986-03-07
Publication date: 1994-07-06
Anticipated expiration: 2009-07-06
Also published as: JPS62208220A

Description

【発明の詳細な説明】〔産業上の利用分野〕本発明はユリ属植物を特定の方法によつて組織培養する
ことにより、ユリ種苗を大量に増殖する方法に関する。

〔従来の技術〕

ユリ属植物には多くの品種があり、鉄砲ユリ、カノコユ
リやスカシユリなどは園芸植物として鑑賞用に愛好され
ており、また、オニユリ、ヤマユリなどは食用ユリとし
て利用されている。ユリ属を始めとする球根植物の増殖
は、従来、球根分割、リン片ざし、ムカゴの利用や播種
などによつて増殖が行われてきた。しかし、これらの増
殖法では多くの土地と人手を必要とするばかりでなく、
近年ではウイルス病の蔓延によりユリ種苗の生育速度の
低下や花の品質低下が問題となつている。これらの問題
点を改良し、増殖効率の向上を目的として近年植物組織
培養技術を利用した方法も報告されている（例えば特開
昭55-15734号公報）。組織培養技術による増殖は培養組
織片、培養細胞からの不定芽、不定胚、球根等の分化を
経て達成され、またこれらの分化は植物ホルモンである
サイトカイニンとオーキシンの濃度比によつて制御され
ていると考えられてきた（例えばAnnals of Botany、vol
45.321-327、1980年）。しかし、植物ホルモンのみでは
分化が起こらない植物種や分化が起こつたとしてもその
頻度が非常に低い植物種も多数存在し、より直接的かつ
効果的な分化誘導方法の確立が期待されている。

〔発明が解決しようとする問題点〕本発明者らは従来のユリ属植物の組織培養方法には前記
した種々の問題点のあることを認知した上で、従来法と
は異なる新規な方法によつてユリ属植物を組織培養して
該植物の種苗を従来に比べて効率良く増殖する方法につ
いて検討した。

〔発明の概要〕

その結果、下記方法を見出し本発明を完成するに到つ
た。すなわち本発明の方法によれば、ユリ属植物の組織
片または培養細胞を嫌気処理した後に組織培養すること
を特徴とするユリ属植物の種苗の増殖方法が提供され
る。

〔発明の具体的説明〕

本発明の組織培養において使用されるユリ属植物として
は、従来から知られている該属に属する植物を本発明の
方法に用いることができる。該植物として具体的には、
鉄砲ユリ、カノコユリ、スカシユリ、オニユリ、ヤマユ
リ、笹ユリおよび新鉄砲ユリ等を例示できる。

本発明ではユリ属植物の組織培養は該植物の組織片また
は培養細胞を用いて行うことができる。該組織片として
具体的には茎頂、茎、葉、花、種子、子球（リン片
塊）、リン片、根またはその他の組織を小片に切断した
ユリ属植物の組織片を例示することができ、これらの組
織片は通常、次亜塩素酸ソーダ、エチルアルコールや炎
によつて殺菌した後に使用される。しかし、無菌的に栽
培したユリ属植物を使用する場合には、上記の殺菌操作
は不要である。また、無病・無ウイルスのユリ属植物の
種苗を増殖する場合には、培養材料として生長点近傍組
織、生長点近傍組織から得られたユリ属植物の前述した
組織片などを用いることができる。本発明のユリ属植物
の組織培養において用いることのできる培養細胞とは、
前記組織片を公知の方法によつて組織培養することによ
つて得られるカルス組織を含めた未分化の不定形細胞で
ある。

本発明においてユリ属植物の組織片又は培養細胞を組織
培養してユリ属植物の種苗を形成させるに当たつて以下
の方法が用いられる。

すなわち本発明では、組織培養に供するために採取した
後のユリ属植物の組織片あるいは培養細胞を嫌気処理し
た後組織培養する方法が用いられる。本発明では特に組
織片を嫌気処理することが好ましい。該方法によればユ
リ属植物の組織又は培養細胞が球根へ分化するのが著し
く促進される。該方法は本発明者らに係わる新規な知見
である。

本発明に係わる嫌気処理は以下のようにして行うことが
できる。組織培養に供しようとするユリ属植物の組織片
を採取後、チツ素、アルゴン、CO₂等の酸素を含有しな
いか、あるいは酸素を通常５％以下含んでいてもよいガ
ス雰囲気にこの試料を置き、該試料を通常15〜30度の温
度で30〜90分間該ガスを接触させることによつて嫌気処
理が行われる。本発明では嫌気処理は組織片の採取直後
に行うことが特に好ましく、このような組織片を用いて
組織培養を行つた場合には採取後しばらくしてから嫌気
処理を施したものを用いた場合に比べてユリ属植物の種
苗を効率良く増殖することができるので好ましい。

嫌気処理後に行われる組織培養において使用される培地
としては以下に詳述する培地が用いられる。

本発明で使用することのできる培地は無機成分および炭
素源を必須成分とし、これに植物ホルモン類、ビタミン
類を添加し、更に必要に応じてアミノ酸類を添加した培
地である。該培地の無機成分としては、窒素、リン、カ
リウム、ナトリウム、カルシウム、マグネシウム、イオ
ウ、鉄、マンガン、亜鉛、ホウ素、モリブデン、塩素、
ヨウ素、コバルト等の元素を含む無機塩を挙げることが
でき、具体的には硝酸カリウム、硝酸ナトリウム、硝酸
アンモニウム、塩化アンモニウム、塩化カリウム、塩化
カルシウム、リン酸１水素カリウム、リン酸２水素ナト
リウム、硫酸マグネシウム、塩化マグネシウム、硫酸ナ
トリウム、硫酸第１鉄、硫酸第２鉄、硫酸マンガン、硫
酸銅、モリブデン酸ナトリウム、三酸化モリブデン、ヨ
ウ化カリウム、硫酸亜鉛、ホウ酸、塩化コバルト等の化
合物を例示できる。

該培地の炭素源としては、シヨ糖等の炭水化物とその誘
導体、脂肪酸等の有機酸およびエタノール等の１級アル
コールなどを例示できる。

該培地の植物ホルモン類としては、例えば、ナフタレン
酢酸（ＮＡＡ）、インドール酢酸（ＩＡＡ）、p-クロロ
フエノキシ酢酸、2,4-ジクロロフエノキシ酢酸(2,4-
Ｄ）、インドール酪酸（ＩＢＡ）およびこれらの誘導体
等のオーキシン類およびベンジルアデニン（ＢＡ）、カ
イネチン、ゼアチン等のサイトカイニン類を例示でき
る。

該培地のビタミン類としては、ビオチン、チアミン（ビ
タミンB₁）、ピリドキシン（ビタミンB₆）、ピリドキサ
ール、ピリドキサミン、パントテン酸カルシウム、アス
コルビン酸（ビタミンＣ）、イノシトール、ニコチン
酸、ニコチン酸アミドおよびリボフラビン（ビタミンＢ
_２）などを例示できる。

該培地のアミノ酸類としては、例えばグリシン、アラニ
ン、グルタミン酸、システイン、フエニルアラニンおよ
びリジンなどを例示できる。

本発明の前記培地は、通常は、前記無機成分を約0.1μ
Ｍないし約100mM、前記炭素源を約１ｇ／ないし約100
g／、前記植物ホルモン類を約0.1mg／ないし約100m
g／、前記ビタミン類を約0.1mg／ないし約150mg／
および前記アミノ酸類を０ないし約1000mg／含ませ
て使用されることが望ましい。

本発明に係わる組織培養に用いられる前記培地として具
体的には、従来から知られている植物の組織培養に用い
られている培地、例えば、ムラシゲ・スクーグ（’62）
〔Murashige & Skoog〕の培地、リンスマイヤー・スク
ーグ（ＲＭ−1965）〔Linsmaier & Skoog〕の培地、ホ
ワイト（’63）〔White〕の培地、ガンボルグ（Gambor
g）のＢ−５培地、三井のＭ−９培地、ニツチ・ニツチ
の培地〔Nitch & Nitch〕等に前記した炭素源および植
物ホルモンを添加し、更に必要に応じて前記したビタミ
ン類、アミノ酸類を添加して調製される培地を例示でき
るが、本発明ではこの中でも特にニツチ・ニツチ、リン
スマイヤー・スクーグ又はムラシゲ・スクーグの培地を
用いて調製される培地が好ましい。なお、上記した従来
公知の培地の組成に関しては、例えば、竹内、中島、古
谷著の「新植物組織培養」P386〜P391、朝倉書店、1979
年に記載されている。

本発明で使用できる前記培地は液体培地又は寒天を通常
0.5〜１％含有させた固型培地である。

本発明では必要に応じて前記した培地にカルシウムイオ
ノフオア、サイクリツクＡＭＰおよびポリアミンからな
る群から選ばれた少なくとも１種の化合物を含む培地を
用いて前記した本発明の方法に係わる嫌気処理を施して
ユリ属植物の組織培養を行うことも出来る。この場合の
培地に添加されるカルシウムイオノフオアの培地におけ
る濃度は通常10^-8〜10^-4Ｍ／、好ましくは10^-7〜10^-5
Ｍ／の範囲にあり、カルシウムイオノフオアの中では
A23187を用いることが好ましい。ここでA23187とは6S−
〔６α（2S^*，3S^*）、８β（R^*）、９β、11α〕-5-(me
thylamino)-2-〔〔3,9,11-trimethyl-8-〔1-methyl-2-o
xo-2-(1H-pyrrol-2-yl)ethyl〕-1,7-dioxaspiro〔5,5〕
-un--dec-2-yl〕methyl〕-4-benzoxazolecarboxylicaci
dである。同様にサイクリツクＡＭＰについては通常は1
0^-9〜10^-5Ｍ／、好ましくは10^-8〜10^-6Ｍ／の範囲
にある。ポリアミンについては通常は10^-6〜10^-3Ｍ／
、好ましくは10^-5〜10^-4Ｍ／の範囲にある。ここで
本発明において培地に加えられるポリアミンとはポリメ
チレン基〔−(CH₂)_n-、ｎは整数〕の両端にアミノ基及び／又は
イミノ基を有する構造単位をもつ化合物であつて、具体
的にはスペルミン〔Bis(amino--propyl)-tetramethylen
ediamine； H₂N(CH₂)₃NH(CH₂)₄NH(CH₂)₃NH₂〕、スペルミジン〔H₂N
(CH₂)₃NH(CH₂)₄NH₂〕およびプトレシン〔H₂N(CH₂)₄N
H₂〕などのテトラメチレンジアミン類を例示できる。

本発明では前記したユリ属植物の組織片又は培養細胞
は、本出願人に係わる特願昭60-128348号と同様に酸素
含有気体を通気させた液体培地を用いて組織培養するこ
ともできる。

本発明の方法によれば、ユリ属植物の組織片または培養
細胞からリン片塊状をした子球（小球根を含む）を効率
良く多量に得ることができる。この点について更に言及
すると、本発明の方法によつて得られる子球のリン片塊
は、これを多数のリン片に分離して、これらを更に本発
明に係わる前記した培養方法によつて多数の子球としユ
リ種苗を大量に増殖することができる。尚、本発明で得
られたユリ属植物の子球は通常の栽培を行うと、性質が
一定で健全な植物体に生長し、美しい花を咲かせること
ができる。

〔発明の効果〕

本発明のユリ属植物の組織培養方法を用いればユリ属植
物の組織又は培養細胞から従来法に比べて効率良く高品
質の子球を多量に培養することができ、ユリ種苗を多量
に増殖することができる。

〔実施例〕

以下、実施例を用いて本発明の構成および効果を具体的
に説明する。

実施例１〜４材料に鉄砲ユリリン片切片、鉄砲ユリ葉切片、笹ユリリ
ン片切片、新鉄砲ユリリン片切片を用いて、該材料を70
％エタノールおよび次亜塩素酸ソーダ水溶液（有効塩素
量１％）で殺菌して、約２mm幅に切断した後に、シヨ糖
４％、ナフタレン酢酸0.01mg／、ベンジルアデニン0.
02mg／を有するpH6.0の無菌のムラシゲスクーグ（196
2年）の寒天培地（寒天濃度0.8％）を調製し、これに先
の材料の１ｇの切片10個を培養開始直後に培養物を無菌
のチツ素ガス雰囲気下に室温で１時間放置（嫌気処理）
した後に25℃、明所で３週間培養した所、切片10個当た
りの球根の形成数として表１に示す結果を得た。

比較例１〜４実施例１〜４において嫌気処理を行わなかつた以外は該
実施例１と同様に行つた結果を表１に示した。

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】ユリ属植物の組織片または培養細胞を嫌気
処理した後に組織培養することを特徴とするユリ属植物
の種苗の増殖方法。