JPH06510065A - 成長因子ｉｇｆ−ｉおよび／またはｉｇｆ−ｉｉの用法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 発明の名称 成長因子ＩＧＦ−Ｉおよび／または工ＧＦ−ＩＩの用法 技術分野 本発明は膵臓疾患および不全の防止または治療用の経口または胃腸の投与経路に 採用される医薬品の製造のためのインシュリン状成長因子１　（ＩＧＦ−Ｉ）お よび／またはインシュリン状成長因子２　（ＩＧＦ−ＩＩ）の用法に関する。本 発明はまた好ましくは人工または天然ミルクまたは初乳との混合において、経口 投与用栄養素からなる外因性ヒトまたは動物ＩＧＦ−Ｉおよび／またはＩＧＦ− ＩＩまたはその有効な類似物からなる組成物に関する。本発明は人間および動物 に適用できる。

従来技術 インシュリン状成長因子１　（ＩＧＦ−Ｉ）およびインシュリン状成長因子２　 （ＩＧＦ−Ｉ　工）は血漿および他の体液中に存在するペプチドである。これら のペプチドはそれらの本来のシーケンスの６４％の同族関係を示しかつ３つの二 硫化物結合を含んでいるそれぞれ７０および６７のアミノ酸からなる。それらは 広範囲の細胞型の成長を刺激し得る。ＩＧＦ−■と同様にＩＧＦ−ＩＩも骨格成 長に関して成長ホルモンの作用の媒介をなす。工ＧＦ−ＩおよびＩＧＦ−ＩＩは 両方とも人間の血漿から精製されかつそれらの完全なアミノ酸シーケンスが公知 である。ヒトＩＧＦ−ＩおよびＩＧＦ−１１に対して広範な同族関係を有するシ ーケンスか他の種類の血漿から精製されたＩＧＦ−１およびＩＧＦ−Ｉ　１中に 存在する。

ＩＧＦ−工およびＩＧＦ−工Ｉは両方とも全身性および局部的作用を有しかつ主 として異なる特殊な結合問題と関連付けられ、その中の６つか配列されかつそれ らは■ＧＦＢＰＩ、ＩＧＦＢＰ２．ＩＧＦＢＰ３．ＩＧＦＢＰ４、ＩＧＦＢＰ５ およびＩＧＦＢＰ６と呼ばれている。

これらは正および負の両方法において工ＧＦ−ＩおよびＩＧＦ−ＩＩの生物学的 機能および利用性を調整するようにする。結合プロティンに関して変化した親和 力を有する類似物が製造されかつシーケンスに関連した生物学的活性の変化が認 められた。ＩＧＦ−ＩおよびＩＧＦ−ＩＩは多くの異なる細胞型の血漿膜の外面 に露出されるＩＧＦ−型式ルセプタとの相互作用により作用するが、しかし作用 の相対的な特異性が結合プロティンの影響のためみとめられ得る。さらにＩＧＦ −Ｉ　Ｉが細胞膜上にも認められる別個かつ関連のない型式２レセプタに単に結 合するときＩＧＦ−ＩＩは別個の作用を有する。インシュリンレセプタに対する 両ＩＧＦ−ＩおよびＩＧＦ−ＩＩの他の結合がまた重要である。

精製された血漿ＩＧＦ−ＩおよびＩＧＦ−ＩＩの不足のためＩＧＦ−ＩおよびＩ ＧＦ−ＩＩの市販規模の製造の原理体系を開発することが非常に必要であった。

現在、かかる大規模の製造は遺伝子組み換えＤ　Ｎ　Ａ技術を使用することによ り容易に達成され得る。遺伝子組み換えＤＮＡ誘導Ｉ　Ｇ　Ｆ　−Ｉの製造によ る研究の結果として、それが骨格成長および骨格筋肉プロティン合成を促進する ことが示された。そのうえＩＧＦ−Ｉはまた異化状態の治療または防止に有効で ある（スウェーデン国特許出願第５Ｅ９００２７３１−９号）。ＩＧＦ−ＩＩは また■ＧＦ−Ｉの幾つかの代謝作用を中和することが示された（コエア氏等、内 分泌学、１９９２年、第１３０巻、第２４２３頁乃至第２４２５頁）。

バラード氏等の国際特許出願公開第Ｗ○９１／１２０１８号公報は胃腸疾患また は外科手術後の短くなった腸の治療のためのＩＧＦ−Ｉの治療的使用法を開示し た。

バラード氏等のものは膵臓の大きさまたは経口投与に追随する成長についての活 性または効果の証拠を備えていない。

型式１および型式２の両方のＩＧＦのレセプタが胃腸管内に存在しかつ経口ＩＧ Ｆ−Ｉおよび工ＧＦ−Ｉ工が古い授乳ラット・の繰り返し投与に追随する空腸酵 素に影響を及ぼすが、腸管成長についての効果は観察されなかったということが 以前に開示された（ヤング氏等著の「消化」、第４６巻、１９９０年、追加第２ 号、第２４０頁乃至第２５２頁）。また、系統的（すなわち、皮下または筋肉内 または静脈内）投与ＩＧＦ−Ｉが胃腸の重量を増加するが、膵臓の成長が評価さ れなかったことが報告された。

パインツーエリアン氏等著の「内分泌学」、第１２９巻、第４号、１７６９頁、 １９９１年は細胞有糸分裂生起および成長の規則において両ＩＧＦレセプタに関 して本質的な役側があることを報告している。

リバルド・エヌ氏等著の「正常ペプチド」、１９９１年６月１１日、第３４巻、 第１号、第１３頁乃至第２３頁は静置注射されたＩＧＦ−Ｉがソマトスタチンの 膵臓および十二指腸細胞含量に作用しかつプレイ・ヴイ氏等著の「分子細胞内分 泌学Ｊ、１９９１年３月、第７５巻、第３号、第２２１頁乃至第２２７頁はＩＧ Ｆ−ＩＩ／Ｍ６Ｐレセプタレベルが腸切除に追随する腸上皮において変更される ことを示唆している。

以前の研究は膵臓細胞についてＩＧＦならびにインシュリンレセプタがあるが、 すべての細胞型式についてＩＧＦレセプタがあるとき、これがいずれにしても作 用または潜在的な作用の特異性を示唆していない。

かくしてＩＧＦ−丁またはＩＧ、Ｆ−ＩＩが膵臓の成長に効能があるかも知れな いと思うような重要な理由はなかった。

外分泌膵臓機能についてのＩＧＦ−Ｉまたは１工の作用は以前には示唆されずか つ膵臓についてのＩＧＦの経口投与の作用の研究は以前に示唆されていた。

膵臓疾患の防止または治療用の経口または胃腸投与経路に採用されかつまた成長 遅延動物において異常である膵臓成長を促進するのに使用され得る医薬品が必要 であ今や意外にも、ＩＧＦ−Ｉおよび／またはＩＧＦ−１１またはその有効な類 似物かかかる医薬品の製造に使用され得ることが見出された。

発明の開示 本発明は膵臓疾患および不全の防止または治療用の経口または胃腸の投与経路に 採用される医薬品の製造のためのＩＧＦ−Ｉおよび／またはＩＧＦ−ＩＩの用法 に関する。

医薬品はまた膵臓成長を促進しかつ子・宮内成長遅延、後方部分膵臓切除、嚢胞 性線維症状および追随する膵臓炎のごとき膵臓不全の治療に有用である。

ヒトまたは動物ＩＧＦ−Ｉおよび／またはＩＧＦ−ＩＩを使用することができ、 単一でまたは互いとのまたはＩＧＦ−Ｉ、ＩＧＦ−工Ｉまたはその有効な類似物 の所望の作用を高めるかまたは改善するための表皮性成長因子（ＥＧＦ）のごと き他の成長因子との組み合わせにおいて付与され得る。

本発明は経口投与用の栄養素、好ましくは人工または天然ミルクまたは初乳から なる外因性ヒトまたは動物■ＧＦ−Ｉおよび／または工ＧＦ−Ｉ工またはその有 効な類似物からなる組成物に関する。

動物において他の種類（例えば牛、豚）の遺伝子組み換えヒ１−ＩＧＦ−Ｉおよ び／またはＩＧＦ−ＩＩが飲薬としてまたは人工液体または固体食料供給への追 加物として使用され得る。

膵臓疾患の防止または治療のための用途に関して、以下の用法を指摘する。

１）人間の膵臓成長促進。

脂肪吸収不良に至る不適切な外分泌膵臓機能と関連する疾患、例えば嚢胞性線維 症においてまたは高細胞増殖のための部分／完全膵臓切除を受けている幼児にお いて。

不釣り合いに減少した膵臓の大きさを有する成長遅延の幼児において。

２）外分泌膵臓欠如の治療 嚢胞性線維症、後方膵臓切除のごとき疾患において。

３）成長遅延新生児における膵臓発達の促進。

４）動物の治療 成長遅延動物の腸機能を回復させるための膵臓の成長の促進。

好ましくは人間においてヒトＩＧＦ−ＩまたはＩＧＦ−ＩＩが単一でまたは組み 合わせて使用する。付与された投与量は人間において１〜１００４ｇ／ｋｇ／体 重／Ｈそして動物において１〜１０００μｇ／ｋｇ／日にすることができる。好 適な投与経路は水性緩衝剤または他の薬理学組成物において口にまたは人工食品 、人工または天然ミルクに添加する。変形的にそれは例えば鼻と胃の管または十 二指腸管により胃腸管内でより末端に据え付けられ得る。

動物において他の種類（例えば、牛、豚）の遺伝子組み換えヒトＩＧＦ−Ｉまた はＩＧＦ−工Ｉが経口飲薬としてまたは人工液体または固体食品への添加物とし て使用され得る。

本発明の組成物は栄養素への添加物として使用され得る。

栄養素は好ましくは膵臓疾患の防止または治療のためのかつ膵臓成長の促進のた めのミルクである。かかる組成物は同時に栄養摂取、成長を促進しかつ胃腸感染 の衝撃を減少する。これは成長不全、経口供給を確立するのが困難である未熟児 の状態を有する人間の幼児に望ましい。

その使用は人工給餌についてまたは成長遅延が存在する場合に多数の同腹子から の幼い動物にとくに望ましい。

本発明はまた、同様な量のＩＧＦ−■および／またはＩＧＦ−ＩＩまたは類似物 が供給されるような人間または動物に使用するための天然または人工ミルク処方 の補足用の栄養的に許容し得る組成物に拡張する。

ペプチドが人間において約１〜１００μｇ／ｋｇ体重／日、好ましくは１〜１０ μｇ／ｋｇ／日かつ動物において１〜１０００μｇ／ｋｇ／日の投与量を供給す るのに十分な量において存在し得る。

発明を実施するための最良の形態 本発明の好適な形態を以下の例について説明する。

例１ 他の方法で治療されない１１匹の豚の研究において、膵臓の化学的性質が誕生直 後の犠牲後確認された。それらの中の６匹は正常な大きさからなりかつ５匹が誕 生において遅延された子宮内成長（ＩＵＧＲ）であった（表１）。ＩＵＧＲの子 豚は平均以下の少なくとも２つの標準偏差（ＳＤ）として定義され、これに対し て正常な子豚は出生において平均のＬＳＤ以内の体重を有した。

表１ 出生における正常および成長遅延の新生豚の膵臓の化学的組成 （ｇ／ｋｇ）　１．２１±０．０５　０，９６±０．０４★プロテイン （ｍｇ／ｇ組織）　１７０±４．７　１６０．８±１１ＮＡ （ｍｇ／ｇ組織）６．２０±０．３７　６．０５±０．３３ＮＡ （ｍｇ／ｇ組織）６．８１±０．７１　７．６６±０．５１合計ＤＮＡ（ｍｇ） 　１０．８＋０．９　４．３±０．３★プロティン：ＤＮＡ Ｃｍｇ／ｍｇ）　２５．９±１．７　２１．０±０．４ＲＮＡ：ＤＮＡ比 この表に示した結果は膵臓が正常な子豚における膵臓よりもＩＵＧＲの子豚にお いて不釣り合いに小さかったことを示す。工ＵＧＲの子豚に観察された膵臓発達 の遅延は合計の膵臓ＤＮＡ含量がこれらの動物において低かったとき増殖の少な い細胞数に主として起因した。組織構造の試験はすべての細胞型式の減少を示し た。

例２ 検出不能（＜　１　ｎ　ｇ／ｍ　１　）なレベルのＩＧＦ−１またはＩＧＦ−Ｉ Ｉを含有する市販の幼児ミルク処方（ＳＭＡゴールドカップ、ジョン　ウニイス 　アンド　プロ（ＮＺ）リミテッド社）によりまたは遺伝子組み換えヒト１ＧＦ −Ｉまたは遺伝子組み換えヒトＩＧＦ−ＩＩ（スウェーデン国のカビ　ファーマ シア　アクチボラーグ社により供給される）の２μｇ　／　ｍ　ｌを添加した同 一の処方により出生に続いて２４時間育てられた新生の子豚における研究が行わ れた。７匹の子豚が治療を受けた。

これらの子豚は７匹の同腹子でかつ各同腹子は１つの供餌処方、工ＧＦ−Ｉを加 えた処方およびＩＧＦ−ＩＩを加えた処方で供給された。これらの子豚は統計的 に同一の出生体重を有した。出生後子豚は最初の１２時間に２時間毎に２０　ｍ 　ｌ　／　ｋ　ｇが、次いで層殺までその後４時間毎に４０　ｍ　Ｉ　／　ｋ　 ｇが瓶で供給された。屠殺前に動物は細胞の有糸分裂量の計算を可能にするため にＢＤＲＵが注射された。動物は組織構造の評価のために出生後２４時間で層殺 された。

表２ 工ＧＦ−ＩまたはＩＧＦ＝ＩＩを添加したまたは添加しない幼児処方で育てられ た２４時間後の子豚の平均体重および消化器官の重量および物理的寸法。（ｎ＝ ７）対照　ＩＧＦ−Ｉ　ＩＧＦ−ＩＩ 出生体重（ｋｇ）　１．　２８６　１．　３１７　１．　２９５最終体重（ｋｇ ）　１．　３１８　１．３２８　１．　３２０胃重量（ｇ／ｋｇ）＃　５．０２ 　５．　１１　４．９９膵臓重量（ｇ／ｋｇ）＄　１．２３　１．４１★★　１ ．３７★小腸 重量（ｇ／ｋｇ）＄　２９　３２　２９長さくｃｍ／ｋｇ）　＃　３１０　２９ ３　３２３有糸指数　６，９３　９．０９★★★　８．６３★★★（分類された 　細胞／凹窩） 大腸 重量（ｇ／眩）＃　６．２　６．３　６．４長さく訓／ｋｇ）＃６９　６６　７ ２ ＃　出生体重に対して調整された。

★ｐ＜０．０５．★★ｐ＜０．０１．★★★ｐ＜０．００１表３ 膵臓および近位の空腸粘膜の化学的組成対照　ＩＧＦ−Ｉ　工ＧＦ−Ｉ工 膵臓： （ｎ＝７） 重量（ｇ／ｋｇ）４Ｆ　１，２３　１．４１★★　１．３７★プロテイン （ｍｇ／ｋｇ）＃　１５３　１８２★★　１８２★ＮＡ （ｍｇ／ｋｇ）＃　１１．６　１４．２★　１３．５★ＮＡ （ｍｇ／ｋｇ）＃　４．４　６，１★　５．９★プロティン：ＤＮＡ　３５．３ 　３１．　５　３２．０ＲＮＡ：ＤＮＡ比 （ｍｇ／ｍｇ）　２．　６７　２．４３　２．４０近位の空腸粘膜： （ｎ＝５） 重量（ｇ／ｋｇ）＃　５，７１２　６．７５４　６．１４７プロテイン （ｍｇ／ｋｇ）＃　５８３　６２３　５５９ＮＡ （ｍｇ／ｋｇ）　＃　２８．９　３３．　７　３１．　０ＮＡ （ｍｇ／　ｋ　ｇ）　＃　２５，０　３０．４　２８．１プロティン：ＤＮＡ　 ２３．　０　２０．　５　２０．　０ＲＮＡ：ＤＮＡ比 （ｍｇ／ｍｇ）　１．　１４　１．　１２　１．　１１＃　出生体重に対して調 整された。

★ｐく０，０５ ★★ｐ＜０．０１ これらの観察は新生の動物においてＩＧＦ−ＩおよびＩＧＦ−ＩＩの経口投与が 膵臓の成長を促進するために選択的に活性になる明瞭な証拠を提供する。

組織構造の検査は膵臓の増殖（細胞の数の増加）が外分泌膵臓を伴ったことを示 した。膵臓についての効果が胃腸系統の他の形態に比してとくに注目された。膵 臓の大きさの増加は細胞数の増加に起因するが、ＤＮＡ含量が増加するがプロテ ィン：　ＤＮＡ比が一定であるとき細胞の大きさではない。これらの観察は経口 ＩＧＦ−ＩまたはＩＧＦ−ＩＩが膵臓増殖を促進することを明瞭に示す。

光顕微鏡は膵臓外分泌細胞、吸収に必要な流体および酵素の製造に責任を有する 膵臓の主な細胞に起因することを示した。データは人工ミルクの存在においても 同様に経に投与されたＩＧＦ−ＩまたはＩＧＦ−ＩＩの活性を明らかに示した。

証拠は特殊な効果がＩＧＦ−ＩおよびＩＧＦ−ＩＩまたはその混合物の適宜な投 与および好適な用法の選択により可能であるようなＩＧＦ−ＩおよびＩＧＦ−Ｉ Ｉの異なる効果を示唆する。

例３ さらに他の組織構造資料が例２で得られた膵臓の部分の組織構造検査により得ら れた。

対照および工ＧＦ−１およびＩＧＦ−ＩＩ治療グループからの同一の膵臓の細胞 の特徴はそれゆえ量的に評価される。すべての細胞は接続組織、血管等を引いた 目視領域の区域に関連して計算する。試験された特徴は、（１）すべての細胞に 関連して、単位面積当たりの合計細胞、細胞光たりの平均面積およびＢｒｄＵ　 （プロメトオキシユリジン、ＤＮＡ合成用マーカー）有光指数、（２）外分泌細 胞に関連して、単位面積当たりの細胞を分泌するインシュリン、グルカゴンおよ びソマトスタチンの単位面積当たりの数、および３つの型式に関する合計、およ び （３）差異により、単位面積当たりの外分泌細胞の数。

異なる型式の外分泌細胞がインシュリン、グルカゴンおよびソマトスタチン用の 特別の抗体を使用する標準の免疫組織化学技術により識別された。外分泌細胞の 合計数が各場合にインシュリン、グルカゴンおよびソマトスタチン着色細胞の数 を加えることにより決定された。

結果 １）ＩＧＦ−Ｉ　（Ｐｒｏ、０１）による膵臓重量の１４．６％の増加があり、 それは平均細胞寸法の６％の増加および有糸分裂指数の１１％の増加に関連付け られた。

これは栄養過度および増殖の両方が工ＧＦ−Ｉにより誘起されたことを示唆する 。

２）ＩＧＦ−Ｉ　Ｉ　（Ｐｒｏ、０５）による膵臓重量の１１．４％の増加があ り、これは平均細胞寸法の５％の増加があるが有糸分裂指数の増加しないことに 関連付けられた。これはＩＧＦ−１，Ｉが栄養過度のみを誘起することを示唆す る。

組織構造検査による結果は表４に示している。

表４ 膵臓の特徴 対照　ＩＧＦ−■　ＩＧＦ−Ｉ丁 合計細胞 細胞／単位面積 （ｎ　ｏ　／　ｍｍ”　）　９９４２±４９３　９３７３±３５４　９４４３± ３４７面積／細胞 （μｍ１２／細胞）１０２±５．．４　１０８±４．７　１０７±３．５８ｒｄ Ｕ指数 （ｎｏ／ｍｍ２）　１４．８±３　１６．５±２．７　１４．９±１．８外分泌 細胞 インシュリン （ｎｏ／ｍｍ２）　６９２±７３　７４１±６８　６３３±１１２グルカゴン （ｎ　ｏ　／　ｍｍ２）　１０１５±９０　９６０±８３　１０６５±１０８ソ マトスタチン （ｎ　ｏ　／　ｍｍ２）　５７±１３６９±１７４７±１０合計外分泌細胞　１ ７６８±１０９　１７７０±９１　１７４６±１７４

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １）膵臓疾患および不全の防止または治療用の経口または胃腸の投与経路に採用 される医薬品の製造のための成長因子工ＧＦ−Ｉおよび／またはＩＧＦ−ＩＩま たはその有効な類似物の用法。 ２）前記医薬品が膵臓成長を促進することを特徴とする請求の範囲第１項に記載 のＩＧＦ−Ｉおよび／またはＩＧＦ−ＩＩまたはその類似物の用法。 ３）前記医薬品が成長遅延の子供の膵臓発達を促進することを特徴とする請求の 範囲第１項に記載の成長因子１ＧＦ−Ｉおよび／またはＩＧＦ−ＩＩまたはその 有効な類似物の用法。 ４）ヒトまたは動物のインシュリン状成長因子１（ＩＧＦ−Ｉ）が使用されるこ とを特徴とする請求の範囲第１項ないし第３項のいずれか１項に記載の成長因子 ＩＧＦ−Ｉおよび／またはＩＧＦ−ＩＩまたはその有効な類似物の用法。 ５）ヒトまたは動物のインシュリン状成長因子２（ＩＧＦ−ＩＩ）が使用される ことを特徴とする請求の範囲第１項ないし第３項のいずれか１項に記載の成長因 子ＩＧＦ−Ｉおよび／またはＩＧＦ−ＩＩまたはその有効な類似物の用法。 ６）インシュリン状成長因子１（ＩＧＦ−Ｉ）およびインシュリン状成長因子２ （ＩＧＦ−ＩＩ）が単一でまたは互いにまたは他の成長因子と組み合わせて付与 され得ることを特徴とする請求の範囲第１項ないし第５項のいずれか１項に記載 の成長因子ＩＧＦ−Ｉおよび／またはＩＧＦ−ＩＩまたはその有効な類似物の用 法。 ７）経口投与用栄養素からなる外因性ヒトまたは動物インシュリン状成長因子１ （ＩＧＦ−Ｉ）および／またはインシュリン状成長因子２（ＩＧＦ−ＩＩ）また はその有効な類似物からなることを特徴とする組成物。 ８）外因性ヒトまたは動物インシュリン状成長因子１（ＩＧＦ−Ｉ）および／ま たはインシュリン状成長因子２（ＩＧＦ−ＩＩ）またはその有効な類似物からな ることを特徴とする膵臓疾患の防止または治療用の請求の範囲第７項に記載の組 成物。 ９）人工または天然ミルクまたは初乳からなることを特徴とする請求の範囲第７ 項ないし第８項のいずれか１項に記載の組成物。 １０）インシュリン状成長因子１（ＩＧＦ−Ｉ）および／またはインシュリン状 成長因子２（ＩＧＦ−ＩＩ）またはその有効な類似物からなる経口または胃腸の 投与経路に採用される医薬品の投与による膵臓疾患および不全の防止または治療 方法。