JPH0669385B2 - 分岐オリゴ糖高含有糖の製造法 - Google Patents

分岐オリゴ糖高含有糖の製造法

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Description

【発明の詳細な説明】 (a) 発明の目的 (産業上の利用分野) 本発明は、非醗酵性で、う蝕防止効果、ビフイダス菌増
殖効果を有し、しかも砂糖に近似する水溶液粘度を有す
る分岐オリゴ糖高含有糖を安価な酵素を使用して工業的
に有利に製造する方法に関する。本発明の製造法で得ら
れる糖は、飲食物、し好品、飼料、餌料及び医薬品等の
分野における甘味料として有利に使用される。
(従来の技術) 分岐オリゴ糖は古くより清酒中に存在するオリゴ糖とし
て、イソマルトース、サスビオース、コージビオース、
パノース、イソマルトトリオース等が知られ、これらの
分岐オリゴ糖は非醗酵性糖とも称せられ、酒類との関連
において多くの研究が発表されている。
また、積極的に酒質の改善をはかるために、分岐オリゴ
糖生成に関与するα−グルコシダーゼ(トラスグルコシ
ダーゼともいう。)を調製し、それを4段用酵素剤とし
て用いて分岐オリゴ糖含量の高い4段糖化液を作り、原
料もろみに添加する研究〔醸協:74,53P(1979)〕、或
いはそれを3倍増醸用糖類としてのマルトース転移糖を
多く含有する澱粉糖の製造に利用する方法(特公昭40−
27319号、特公昭41−5918号公報)の提案もされたが、
いずれも糖製造コストが高くて、酒造用以外の用途、た
とえば飲食物や飼料用等には利用できない。
さらに、3倍増醸酒の味質改善を目的として、マルトー
スを主として生成するアミラーゼとトランスグルコシダ
ーゼを用いて非醗酵性糖を製造する提案(特開昭56−51
982号公報)もされた。これによれば、イソマルトー
ス、パノース、イソマルトトリオース、ニゲロース等の
非醗酵性糖の含有量が約50%程度の分岐オリゴ糖製品が
得られるが、その製品はリミツトデキストリン含量が高
く、したがって酒造用以外の用途、たとえば飲食物用等
の用途に利用する場合に、砂糖に較べて粘度が高いため
に、その用途に制限があった。
近年、虫歯予防などの見地から、砂糖などの甘味料が敬
遠される傾向があり、う蝕防止性或いは低う蝕性の甘味
料の出現が要望され、その一つとして分岐オリゴ糖高含
有糖が注目されはじめた。たとえば特開昭58−76063号
及び特開昭61−181354号公報には、分岐オリゴ糖の物
性、低う蝕性及びビフイダス菌増殖効果を利用する飲食
物への使用等が記載されており、その分岐オリゴ糖の製
造法としては、α−1,6結合を多く有するプルラン、デ
キストラン等の高分子多糖類を基質とし、これらを適当
な酵素又は酸で加水分解したのち、分子分画クロマトグ
ラフイー、イオン交換クロマトグラフイー等で分画し、
減圧乾燥、粉砕する方法が記載されているが、この方法
はプルラン、デキストラン等の基質が非常に高価であ
り、工業的生産には不適当である。また、高濃度グルコ
ース溶液にグルコアミラーゼを作用させ、グルコアミラ
ーゼの逆合成作用を利用して分岐オリゴ糖を生成させた
のち、分画する方法も記載されているが、この方法は反
応に長時間を要し、実質的でない。
さらに、分岐オリゴ糖製品の粘度を低下させ、浸透圧を
高めるために、β−アミラーゼ、澱粉枝切り酵素及び転
移作用により分岐オリゴ糖を生成する酵素を用いて分岐
オリゴ糖を多量に含むシロツプを製造する方法(特開昭
61−219345号公報)も提案されたが、この方法は、前記
の特開昭56−51982号公報に記載された方法に、単に澱
粉枝切り酵素を併用してリミツトデキストリン含量を低
下せしめたにすぎず、糖化に長時間を要し、しかも高価
な澱粉枝切り酵素を必要とするので、工業的に不利であ
る。
(発明が解決しようとする問題点) 本発明は、う蝕防止効果及びビフイダス菌増殖効果に優
れ、しかも砂糖に近似する水溶液粘度を有する分岐オリ
ゴ糖高含有糖を安価な酵素を用いて短時間に、したがっ
て工業的に有利に製造する方法を提供しようとするもの
である。
(b) 発明の構成 (問題点を解決するための手段) 本発明者らは、前記の問題点を解決するために種々研究
を重ねた結果、澱粉液化液をマルトースを主として生成
するアミラーゼ及び転移作用により分岐オリゴ糖を生成
する酵素の存在下で糖化反応させる公知の方法におい
て、さらにグルコアミラーゼを併用すれば、生成糖が分
岐オリゴ糖含量の僅かな低下で5糖類以上の糖量を著し
く低下させることができ、ひいては生成糖の水溶液粘度
を砂糖の水溶液粘度に近似する程度に低下させることが
できることを見出し、本発明に到達したのである。
すなわち、本発明の分岐オリゴ糖高含有糖の製造法は、
濃度25%以上で、かつDE10〜20の澱粉液化液を、マルト
ースを主として生成するアミラーゼ及び転移作用により
分岐オリゴ糖を生成する酵素の存在下で糖化反応させる
方法において、さらにグルコアミラセーゼを併用するこ
とを特徴とする方法である。
本発明における原料澱粉はその種類を問わず、各種の澱
粉がいづれも使用できる。その澱粉は、濃度25%以上
で、かつDE10〜20の範囲内に液化させてから糖化反応さ
せる。
本発明におけるマルトースを主として生成するアミラー
ゼとしては、たとえば麦芽アミラーゼ、糸状菌や細菌の
α−アミラーゼ、放線菌や細菌のβ−アミラーゼ、植物
起源のα−アミラーゼなどがあげられる。
本発明における転移作用により分岐オリゴ糖を生成する
酵素としては、α−グルコシダーゼ(トランスグルコシ
ダーゼともいう。)が用いられ、その起源を問わない。
具体例としては、アスペルギルス、リゾプス、ムコール
等の糸状菌トランスグルコシダーゼがあげられる。
本発明におけるグルコアミラーゼとしては、アスペルギ
ルスやラゾプス起源のものが用いられる。
本発明の製造方法の代表的な態様例としては、濃度25
%以上で、かつDE10〜20の澱粉液化液に、マルトースを
主として生成するアミラーゼ、転移作用により分岐オリ
ゴ糖を生成する酵素、及びグルコアミラーゼを実質上同
時に添加して、所定の温度で反応させて、分岐オリゴ糖
生成反応と、生成した5糖以上のオリゴ糖の減少反応と
を同時に行なわせる方法、濃度25%以上で、かつDE10
〜20の澱粉液化液に、まずマルトースを主として生成す
るアミラーゼ及び転移作用により分岐オリゴ糖を生成す
る酵素を添加して、所定の温度で反応させて分岐オリゴ
糖を充分に生成させたのち、次いでグルコアミラーゼを
添加して5糖類以上のオリゴ糖を減少させる方法の二つ
の方法があげられる。
本発明の製造法における反応温度は、通常40〜60℃、好
ましくは50〜55℃であり、全反応時間は通常20〜35時
間、好ましくは24〜30時間である。そして、前記の方
法におけるグルコアミラーゼ添加後の反応時間は通常10
〜24時間、好ましくは15〜20時間である。
本発明の製造反応によって得られる分岐オリゴ糖液は、
常法にしたがって過、脱色、イオン交換精製等の処理
をしたのち、真空濃縮して高濃度の液状製品(シラツプ
状製品)とすることができるし、またその濃縮液に粉末
化基剤を添加し或いは添加することなくスプレー乾燥し
て粉末製品にすることができる。
さらに、本発明の製造反応によって得られる分岐オリゴ
糖液は、必要に応じて下記の(イ)〜(ハ)のような処
理を施して高純度の分岐オリゴ糖液にしてから、上記と
同様の精製処理やスプレー乾燥をして高純度の分岐オリ
ゴ糖製品にすることができる。
(イ) 糖液に食塩を添加して、グルコース−食塩の複
塩結晶を晶出させ、グルコースを除く処理。
(ロ) 糖液を活性炭カラム、ゲル過等の分子分画ク
ロマトグラフイー又はイオン交換クロマトグラフイーを
用いて処理して、分岐ゴリゴ糖以外の糖類を除く処理。
(ハ) 糖液に酵母を作用させて、同糖液から分岐オリ
ゴ糖以外の糖類を資化醗酵させて除く処理。
(実施例等) 以下に、実施例及び比較例をあげてさらに詳述する。こ
れらの例において用いた酵素の活性測定法は下記のとお
りである。
アミラーゼ 1%可溶性澱粉液(pH6.0)10mlに酵素液1mlを添加し、
40℃で30分間酵素反応を行なわせ、フエーリング・レー
マンシヨール法で還元糖を定量し、40℃、30分間にグル
コースとして10mgを生成する活性を1単位とした。
トランスグルコシダーゼ 2%α−メチル−D−グルコシド溶液1ml及び0.02N−酢
酸・酢酸ナトリウム緩衝液(pH5.0)1ml混合液に酵素液
0.5mlを加えて、40℃で60分間酵素反応を行なわせる。
正確に60分後に沸騰水溶液中に入れ5分間加熱し、流水
中で冷却する。この液0.1mlを用いてグルコース・オキ
シダーゼ法により、生成したグルコースを定量し、40℃
で60分間に反応液2.5mlに1μgのグルコースを生成す
る活性を1単位とした。
グルコアミラーゼ 0.56%可溶性澱粉溶液9mlに酵素液1mlを加えて、40℃30
分間の酵素反応を行なせえる。フエーリング・レーマン
シヨール法で酵素反応により生成した還元糖を定量し、
40℃で30分間に10mgのグルコースを生成する活性を1単
位とした。
実施例1 コーンスターチ液化液(濃度30%、DE14.5)をpH5.5に
調整したのち、麹面α−アミラーゼ8u/g−ds、アスペ
ルギルス・ニガールのトランスグルコシダーゼ0600u/
g−dsを添加して、55℃で24時間糖化を行なわせたの
ち、酵素を失活させることなく、グルコアミラーゼ(ア
スペルギルス・ニガー系)0.45u/g−dsを添加してさ
らに反応させた。その結果は第1表に示すとおりであっ
た。
第1表からわかるように、24時間糖化後に、酵素を失活
させることなくグルコアミラーゼを添加してさらに糖化
反応させることにより、分岐2等類〜分岐4糖類合計量
が約2減少するのみで、分岐5糖類以上の糖類を約11%
減少させることができた。
実施例2 コーンスターチ液化液(濃度30.4%、DE13.0)をpH5.5
に調整したのち、麹菌α−アミラーゼ8u/g−ds、アス
ペルギルス・ニガーのトランスグルコシダーゼ600u/g
−ds、及びグルコアミラーゼ(アスペルギルス・ニガー
系)0.225〜0.45u/g−dsを同時添加して、55℃で酵素
反応を行なわせた結果は第2表に示すとおりであった。
第2表からわかるように、酵素反応の初期からグルコア
ミラーゼを共存させて反応を行なわせても、分岐2糖類
〜分岐4糖類合計の含有量を減少させることなく、5糖
類以上の含量を減少させることができた。
以上の実施例1及び実施例2から明らかなように、グル
コアミラーゼを併用することにより分岐2糖類〜分岐4
糖類の合計含量を実質上低下させることなく、或いは極
く僅かの低下で、5糖類以上の糖類の合計含量を有効に
減少させることができる。そして、かかる5糖類以上の
糖類含有量を低下させた分岐オリゴ糖高含有糖は水溶液
粘度を砂糖の水溶液粘度に近づけることができるので、
砂糖と同様の用途に有利に使用できるようになる。
また、上記実施例1及び2から、グルコアミラーゼの適
正な添加量は、α−アミラーゼ8u/g−ds及びトランス
グルコシダーゼ600u/g−dsの場合には、0.3〜0.45u/
g−dsであり、α−アミラーゼ11.2u/g−ds及びトラ
ンスグルコシダーゼ840u/g−dsの場合には、0225〜0.
375u/g−dsである。
実施例3 32%コーンスターチ・スラリー(pH6.25)に耐熱性α−
アミラーゼ(大和化成社商品名クライスターゼT−5)
を澱粉に対して0.12%添加し、105℃で10分間クツキン
グしたのち、95℃で90分間加熱して液化させ、DE13.5の
液化液を得た。
この液化液を55℃に冷却し、pHを5.5に調整したのち、
α−アミラーゼ(天野製薬社商品名ビオザイム−C)0.
2%/ds、トランスグルコシダーゼ(天野製薬社製)0.0
4%/ds、及びグルコアミラーゼ(天野製薬社商品名GNL
−3000)0.015%/dsを同時に添加して、55℃で30時間
糖化反応させた。
得られた糖化液を脱色、イオン交換精製を行なったの
ち、真空濃縮して濃度75%の糖液(シロツプ)を得た。
その糖組成は第3表に示すとおりであった。また、この
糖の水溶液粘度は第1図に示すとおりである。砂糖の水
溶液粘度に近似していた。また、この糖の水溶液の浸透
圧は第2図に示すとおりであった。
実施例4 実施例3と同様に処理して得られた澱粉液化液を、55
℃、pH5.5に調整したのち、実施例3で用いたのと同じ
α−アミラーゼ0.2%/ds、同じトランスグルコシダー
ゼ0.04%/dsを同時に添加して55℃で24時間反応させた
のち、酵素を失活させずに、さらに実施例3で用いたの
と同じグルコアミラーゼ0.015%/dsを添加して、16時
間反応させた。
得られた糖化液を脱色、イオン交換精製したのち、真空
濃縮して糖濃度75%の濃縮液とした。その糖組成は第3
表に示すとおりであった。
実施例5 実施例3で用いたのと同じα−アミラーゼ0.28%/ds、
同じトランスグルコシダーゼ0.054%/ds、及び同じグ
ルコアミラーゼ0.0125%/dsを用い、糖化時間を24時間
に変更し、そのほかは実施例3と同様にして反応させ、
同様にして精製、真空濃縮して、糖濃度75%の高濃縮糖
液を得た。その糖組成は第3表に示すとおりであった。
比較例 実施例3におけると同様にして液化された澱粉液化液
に、実施例3で用いたのと同じα−アミラーゼ0.1%/d
s、同じトランスグルコシダーゼ0.02%/dsを同時に添
加して、55℃20時間反応させた。得られた糖液を脱色、
イオン交換精製した糖液の糖組成は第3表に示すとおり
であり、分岐5糖類以上の含量が著しく高かった。ま
た、この糖の水溶液の粘度及び浸透は第1図及び第2図
に示すとおりであった。
実施例6 実施例3で得られた分岐オリゴ糖高含有糖の精製液を下
記の条件でスプレー乾燥して粉末製品とした。
糖液濃度 45% 糖液加熱温度 80℃ スプレードライヤー出口温度 60℃ 絵液量 4.5/hr デイスク経 100mm デイスク回転数 16,000r.p.m. 得られた糖粉末は水分2.2%であり、25℃、RH55%にお
ける安息角が55゜であった。なお、この乾燥におけるス
プレードライヤー出口温度を65℃以上とすると、糖粉末
の流動性が悪くなり、ドライヤー内に堆積した。
実施例7 実施例3で得られた濃度45%の分岐オリゴ糖高含有糖の
精製液に、その固形分に対して5%量のカゼインナトリ
ウムと、25%量のデキストリンを添加して、スプレード
ライヤー出口温度を90℃にしたほかは実施例6のスプレ
ー乾燥におけると同一の条件を用いてスプレー乾燥し、
流動性のよい糖粉末製品を得た。
この糖粉末製品は水分が2.4%であり、25℃、RH55%に
おける安息角が52゜であった。
実施例8 実施例3で得られた糖液を、活性炭で脱色したのち、イ
オン交換樹脂で精製し、濃度50%まで真空濃縮した。次
いで、得られた濃縮液を分画用樹脂(三菱化成工業株式
会社商品名ダイヤイオンFRK−01)を用いて分画し、高
純度の分岐オリゴ糖シラツプを得た。その分画条件及び
得られた糖組成は下記のとおりであった。
分画条件 カラム :17mmφ×800mm(樹脂フル充填)、ジャケッ
ト付、60℃ 分離樹脂 :ダイヤイオンFRK−01(Na型) 分離負荷量:45g(乾物) 流速 :SV=0.2 糖組成 G1 1.6% G2 11.6% iG2 33.7% G3 1.3% P 9.5% iG3 12.0% iG4 12.3% iG5+ 18.0% 分岐オリゴ糖会計 85.5% (e) 発明の効果 本発明の製造方法は、澱粉より安価な酵素を用いて比較
的短時間に、しがたがって工業的に有利に砂糖に近い水
溶液粘度を示す分岐オリゴ糖高含有糖を製造することが
できる。
そして、その得られた分岐オリゴ糖高含有糖は、極めて
まろやかな甘味を有し、各種の食品等の酸味、塩から
味、渋味、旨味、苦味などの呈味とよる調和するので、
通常の飲食物、し好物などに対する甘味付け用、或いは
呈味改善用等に使用できる。
さらに、この分岐オリゴ糖高含有糖は、低又は抗う蝕性
甘味料、ビフイダス菌増殖促進剤、保湿剤、結晶防止
剤、食品の照りやボデー付与剤等としても優れている。
【図面の簡単な説明】
第1図は、実施例3で得られた分岐オリゴ糖高含有糖、
比較例で得られた分岐オリゴ糖高含有糖、及び砂糖につ
いて、それらの各水溶液濃度と粘度の関係を図示したも
のであり、第2図は、それらの各水溶液濃度と浸透圧の
関係を図示したものである。

Claims (4)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項1】濃度25%以上で、かつDE10〜20の澱粉液化
    液を、マルトースを主として生成するアミラーゼ及び転
    移作用により分岐オリゴ糖を生成する酵素の存在下で糖
    化反応させる方法において、さらにグルコアミラーゼを
    併用することを特徴とする分岐オリゴ糖高含有糖の製造
    法。
  2. 【請求項2】澱粉液化液にマルトースを主として生成す
    るアミラーゼ、転移作用により分岐オリゴ糖を生成する
    酵素及びグルコアミラーゼを同時に添加して糖化反応さ
    せる特許請求の範囲第1項記載の製造法。
  3. 【請求項3】澱粉液化液に、まずマルトースを主として
    生成するアミラーゼ及び転移作用により分岐オリゴ糖を
    生成する酵素を加えて糖化反応させて分岐オリゴ糖を生
    成させたのち、グルコアミラーゼを添加してさらに反応
    させる特許請求の範囲第1項記載の製造法。
  4. 【請求項4】生成糖化液の濃縮液をスプレー乾燥して粉
    末製品にする特許請求の範囲第1項、第2項又は第3項
    記載の製造法。
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