JPH0670759A - エイズに関係するレトロウイルス（ｈｔｌｖ−ｉｉｉ）の連続的産生のための細胞株 - Google Patents
エイズに関係するレトロウイルス（ｈｔｌｖ−ｉｉｉ）の連続的産生のための細胞株Info
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- JPH0670759A JPH0670759A JP5034673A JP3467393A JPH0670759A JP H0670759 A JPH0670759 A JP H0670759A JP 5034673 A JP5034673 A JP 5034673A JP 3467393 A JP3467393 A JP 3467393A JP H0670759 A JPH0670759 A JP H0670759A
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- A61P31/12—Antivirals
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Abstract
(57)【要約】
【構成】新生物性異数性Ｔ細胞（例えばＯＫＴ４+ Ｔ細
胞，ＨＴクローン細胞）にＨＴＬＶ−ＩＩＩウイルスを
感染させた、不死の生育能を持つ細胞株（例えばＡＴＣ
Ｃ受託番号ＣＲＬ ８５４４のＨ９／ＨＴＬＶ−ＩＩＩ
B ） 【効果】ＨＴＬＶ−ＩＩＩウイルスを連続的に大量に生
産することが可能であり、エイズの救済および血液試料
中のウイルスに対する抗体の検出のためのワクチンの製
造に有用である。
胞，ＨＴクローン細胞）にＨＴＬＶ−ＩＩＩウイルスを
感染させた、不死の生育能を持つ細胞株（例えばＡＴＣ
Ｃ受託番号ＣＲＬ ８５４４のＨ９／ＨＴＬＶ−ＩＩＩ
B ） 【効果】ＨＴＬＶ−ＩＩＩウイルスを連続的に大量に生
産することが可能であり、エイズの救済および血液試料
中のウイルスに対する抗体の検出のためのワクチンの製
造に有用である。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は後天性免疫不全症候群
（エイズ）、前エイズの患者および健康なキャリヤーか
らの細胞変性または殺細胞効果を持つ（ＨＴＬＶ−ＩＩ
Ｉ）ヒト向Ｔ細胞レトロウイルス（ＨＴＬＶ群）連続的
産生のための方法ならびにその再現性ある検出および分
離のための細胞系に関する。リンパ様白血病の成人から
誘導され、ＨＴと名付けられたひとつの新生物性異数性
Ｔ細胞株は、ＨＴＬＶ−ＩＩＩの感染を受け、ＨＴＬＶ
−ＩＩＩに高度に感受性で許容性のＴ細胞集団を生じ、
ウイルスの大量培養、分離および生物学的検出に都合が
よい。他のＯＫＴ４陽性の操作性細胞株にはＭｏｌｔ
３、ＣＥＭ、Ｔｉ７．４およびＨＵＴ３８が含まれ、こ
れらは、ＨＴＬＶ−ＩＩＩウイルス感染後、無期限の生
育能を生じ、それを保持可能である。
（エイズ）、前エイズの患者および健康なキャリヤーか
らの細胞変性または殺細胞効果を持つ（ＨＴＬＶ−ＩＩ
Ｉ）ヒト向Ｔ細胞レトロウイルス（ＨＴＬＶ群）連続的
産生のための方法ならびにその再現性ある検出および分
離のための細胞系に関する。リンパ様白血病の成人から
誘導され、ＨＴと名付けられたひとつの新生物性異数性
Ｔ細胞株は、ＨＴＬＶ−ＩＩＩの感染を受け、ＨＴＬＶ
−ＩＩＩに高度に感受性で許容性のＴ細胞集団を生じ、
ウイルスの大量培養、分離および生物学的検出に都合が
よい。他のＯＫＴ４陽性の操作性細胞株にはＭｏｌｔ
３、ＣＥＭ、Ｔｉ７．４およびＨＵＴ３８が含まれ、こ
れらは、ＨＴＬＶ−ＩＩＩウイルス感染後、無期限の生
育能を生じ、それを保持可能である。
【０００２】
【従来の技術】疫学的データから、後天性免疫不全症候
群（エイズ）は明らかに密接な接触または血液生成物に
よる水平伝達される感染性剤によって起ることが強く示
唆される。この病気は日和見感染、主としてニューモシ
スティス カルシニ（Pneumocystis carcinii)肺炎およ
びカポジ肉腫によって証明されてはいるものの、基にあ
る障害は絶対的リンパ球減少およびヘルパーＴリンパ球
（ＯＫＴ４+ ）数の減少による患者の細胞性免疫に影響
を与えることである。その上、この病気発病の完全な臨
床的証明の前に、その前駆症、前エイズが説明できない
慢性リンパ腺症および／またはヘルパーＴ細胞の一群を
含む白血球減少としてしばしば認められる。これは患者
の重篤な免疫不全につながり、Ｔ細胞の特異な一群が感
染剤の一次的標的であることを示唆している。エイズま
たは前エイズ患者はしばしば慢性的に巨大細胞ウイルス
またはＢ型ウイルス肝炎に感染しているものの、種々の
理由から、これらは明らかに免疫反応不全に関係のない
日和見または偶然の感染と思われる。エイズの原因はヒ
トＴ細胞向リンパ性レトロウイルス（ＨＴＬＶ）であ
り、これには本発明以前にヒトＴ細胞白血病／リンパ腫
ウイルス、ＨＴＬＶ−ＩおよびＨＴＬＶ−ＩＩと呼ばれ
る二種の主要な性質の良く判ったヒトのレトロウイルス
の群が含まれる。最も一般に分離されるＨＴＬＶ−Ｉは
主として成人Ｔ細胞癌患者から得られる。血清疫学的研
究、試験管内での生物学的効果および核酸ハイブリダイ
ゼイションのデータから、ＨＴＬＶ−Ｉは病源学的にこ
の癌に結びつき、これは最初、日本の南部の、更にカリ
ブ地方およびアフリカの成人がかかる。サブグループＩ
ＩのＨＴＬＶ（ＨＴＬＶ−ＩＩ）は最初、毛細胞白血病
のＴ細胞変種の患者から分離された。現在までの所、こ
れが新生物病の患者からＨＴＬＶ−ＩＩＩが分離された
唯一のものである。ウイルスの分離および血清疫学的デ
ータから、両サブグループのＨＴＬＶはエイズ患者に見
いだされることがある。
群（エイズ）は明らかに密接な接触または血液生成物に
よる水平伝達される感染性剤によって起ることが強く示
唆される。この病気は日和見感染、主としてニューモシ
スティス カルシニ（Pneumocystis carcinii)肺炎およ
びカポジ肉腫によって証明されてはいるものの、基にあ
る障害は絶対的リンパ球減少およびヘルパーＴリンパ球
（ＯＫＴ４+ ）数の減少による患者の細胞性免疫に影響
を与えることである。その上、この病気発病の完全な臨
床的証明の前に、その前駆症、前エイズが説明できない
慢性リンパ腺症および／またはヘルパーＴ細胞の一群を
含む白血球減少としてしばしば認められる。これは患者
の重篤な免疫不全につながり、Ｔ細胞の特異な一群が感
染剤の一次的標的であることを示唆している。エイズま
たは前エイズ患者はしばしば慢性的に巨大細胞ウイルス
またはＢ型ウイルス肝炎に感染しているものの、種々の
理由から、これらは明らかに免疫反応不全に関係のない
日和見または偶然の感染と思われる。エイズの原因はヒ
トＴ細胞向リンパ性レトロウイルス（ＨＴＬＶ）であ
り、これには本発明以前にヒトＴ細胞白血病／リンパ腫
ウイルス、ＨＴＬＶ−ＩおよびＨＴＬＶ−ＩＩと呼ばれ
る二種の主要な性質の良く判ったヒトのレトロウイルス
の群が含まれる。最も一般に分離されるＨＴＬＶ−Ｉは
主として成人Ｔ細胞癌患者から得られる。血清疫学的研
究、試験管内での生物学的効果および核酸ハイブリダイ
ゼイションのデータから、ＨＴＬＶ−Ｉは病源学的にこ
の癌に結びつき、これは最初、日本の南部の、更にカリ
ブ地方およびアフリカの成人がかかる。サブグループＩ
ＩのＨＴＬＶ（ＨＴＬＶ−ＩＩ）は最初、毛細胞白血病
のＴ細胞変種の患者から分離された。現在までの所、こ
れが新生物病の患者からＨＴＬＶ−ＩＩＩが分離された
唯一のものである。ウイルスの分離および血清疫学的デ
ータから、両サブグループのＨＴＬＶはエイズ患者に見
いだされることがある。
【０００３】下記の事に基いてＨＴＬＶ群のレトロウイ
ルスがエイズの病源学的物質であることが証拠に基いて
示唆される：（１）動物のレトロウイルスが免疫不全の
原因になるという先例がある（ネコのネコ白血病ウイル
ス）；（２）ＨＴＬＶ群のレトロウイルスは向Ｔ細胞性
である；（３）これらは好んで「ヘルパー」Ｔ細胞（Ｏ
ＫＴ４+ ）に感染する；（４）細胞合胞体形成の誘導で
見られるような種々のヒトおよび哺乳動物細胞に細胞変
性効果を持つ；（５）これらはいくつかのＴ細胞機能を
変える；（６）ある場合には、感染により選択的にＴ細
胞を殺す；および（７）これらは密接な接触または血液
生成物によって伝達される。ＨＴＬＶ感染細胞の細胞膜
抗原に対する抗体の存在がエイズ患者の４０％以上の血
清に見られた〔エセックス（Ｅｓｓｅｘ）等，サイエン
ス（Ｓｃｉｅｎｃｅ），２２０巻８５９頁，１９８３
年〕。この抗原はそれ以後ＨＴＬＶのエンベロープの部
分とされた〔ショプバッハ（Ｓｃｈｏｐｂａｃｈ）等，
サイエンス（Ｓｃｉｅｎｃｅ）２２４巻，５０３頁，５
月４日，１９８４年およびリー（Ｌｅｅ）等，プロシー
ディングズ オブ ザ ナショナル アカデミー オブ
サイエンシズ オブユナイテッド ステイツ オブ
アメリカ（Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳ
Ａ）投稿中〕。
ルスがエイズの病源学的物質であることが証拠に基いて
示唆される：（１）動物のレトロウイルスが免疫不全の
原因になるという先例がある（ネコのネコ白血病ウイル
ス）；（２）ＨＴＬＶ群のレトロウイルスは向Ｔ細胞性
である；（３）これらは好んで「ヘルパー」Ｔ細胞（Ｏ
ＫＴ４+ ）に感染する；（４）細胞合胞体形成の誘導で
見られるような種々のヒトおよび哺乳動物細胞に細胞変
性効果を持つ；（５）これらはいくつかのＴ細胞機能を
変える；（６）ある場合には、感染により選択的にＴ細
胞を殺す；および（７）これらは密接な接触または血液
生成物によって伝達される。ＨＴＬＶ感染細胞の細胞膜
抗原に対する抗体の存在がエイズ患者の４０％以上の血
清に見られた〔エセックス（Ｅｓｓｅｘ）等，サイエン
ス（Ｓｃｉｅｎｃｅ），２２０巻８５９頁，１９８３
年〕。この抗原はそれ以後ＨＴＬＶのエンベロープの部
分とされた〔ショプバッハ（Ｓｃｈｏｐｂａｃｈ）等，
サイエンス（Ｓｃｉｅｎｃｅ）２２４巻，５０３頁，５
月４日，１９８４年およびリー（Ｌｅｅ）等，プロシー
ディングズ オブ ザ ナショナル アカデミー オブ
サイエンシズ オブユナイテッド ステイツ オブ
アメリカ（Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳ
Ａ）投稿中〕。
【０００４】種々の分離されたＨＴＬＶの最初の検出と
分離によりふたつの初期の進歩が可能になった：正常お
よび新生物性の成熟Ｔ細胞の異った二群を定常的な選択
的生育を可能にするインターロイキン２（ＩＬ−２）と
も呼ばれるＴ細胞生育因子（ＴＣＧＦ）の発見〔ラセッ
ティ（Ｒｕｓｃｅｔｔｉ）等，ジャーナル オブ イム
ノロジー（Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．）；１１９巻，１３１
頁，１９７７年；およびポイエズ（Ｐｏｉｅｓｚ）等，
プロシーディングズ オブ ザ ナショナル アカデミ
ー オブ サイエンシズ オブ ユナイテッド ステイ
ツ オブ アメリカ（Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓ
ｃｉ．ＵＳＡ），７７巻，６１３４頁，１９８０年〕お
よび逆転写酵素測定に基くレトロウイルスの鋭敏な検出
法の開発。ＨＴＬＶの分離と伝達の方法にはウイルスに
許容性のＴ細胞を使用する共培養法が含まれる。共培養
実験に正常ヒトＴ細胞を使用すると標的Ｔ細胞のいくつ
かに対し不朽化（形質転換）能を持つふたつのサブグル
ープのＨＴＬＶが優先的に得られる。
分離によりふたつの初期の進歩が可能になった：正常お
よび新生物性の成熟Ｔ細胞の異った二群を定常的な選択
的生育を可能にするインターロイキン２（ＩＬ−２）と
も呼ばれるＴ細胞生育因子（ＴＣＧＦ）の発見〔ラセッ
ティ（Ｒｕｓｃｅｔｔｉ）等，ジャーナル オブ イム
ノロジー（Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．）；１１９巻，１３１
頁，１９７７年；およびポイエズ（Ｐｏｉｅｓｚ）等，
プロシーディングズ オブ ザ ナショナル アカデミ
ー オブ サイエンシズ オブ ユナイテッド ステイ
ツ オブ アメリカ（Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓ
ｃｉ．ＵＳＡ），７７巻，６１３４頁，１９８０年〕お
よび逆転写酵素測定に基くレトロウイルスの鋭敏な検出
法の開発。ＨＴＬＶの分離と伝達の方法にはウイルスに
許容性のＴ細胞を使用する共培養法が含まれる。共培養
実験に正常ヒトＴ細胞を使用すると標的Ｔ細胞のいくつ
かに対し不朽化（形質転換）能を持つふたつのサブグル
ープのＨＴＬＶが優先的に得られる。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】しかしながら、ＨＴＬ
Ｖ変種（今やＨＴＬＶ−ＩＩＩと名付けられている）は
正常Ｔ細胞に対する不朽化性を欠き、主としてＴ細胞に
細胞変性効果を示し、そして今やエイズの原因と信じら
れている。実際に、このような変種は共培養または無細
胞伝達実験において標的としてのこれらの正常Ｔ細胞を
使ってしばしば、しかし一時的に検出される。細胞変性
効果はＨＴＬＶの細胞変性変種に対して高度に感受性で
許容性の、したがって、ウイルスの感染後も永久に生育
する能力を保持する細胞を見い出すことにより克服され
る。本発明は、この新規な不朽化Ｔ細胞集団の同定およ
び性質、およびエイズおよび前エイズ患者からのこのよ
うなウイルスを分離し、連続的に高レベルで産生させる
ことにこれを使用することを明らかにする。
Ｖ変種（今やＨＴＬＶ−ＩＩＩと名付けられている）は
正常Ｔ細胞に対する不朽化性を欠き、主としてＴ細胞に
細胞変性効果を示し、そして今やエイズの原因と信じら
れている。実際に、このような変種は共培養または無細
胞伝達実験において標的としてのこれらの正常Ｔ細胞を
使ってしばしば、しかし一時的に検出される。細胞変性
効果はＨＴＬＶの細胞変性変種に対して高度に感受性で
許容性の、したがって、ウイルスの感染後も永久に生育
する能力を保持する細胞を見い出すことにより克服され
る。本発明は、この新規な不朽化Ｔ細胞集団の同定およ
び性質、およびエイズおよび前エイズ患者からのこのよ
うなウイルスを分離し、連続的に高レベルで産生させる
ことにこれを使用することを明らかにする。
【０００６】
【課題を解決するための手段】初期の実験において、リ
ンパ様白血病成人から出た、ＨＴと名づけられたひとつ
の新生物性異数性Ｔ細胞株を同定し、これは新しい細胞
変性ウイルス分離物の感染に感受性であった。この細胞
株はこれらの分離ウイルス（ＨＴＬＶ−ＩＩＩ）の伝達
に対して感受性の標的であり、これにより連続的なウイ
ルスの大量培養が可能であり、またこのウイルス自身同
志の、およびＨＴＬＶ−ＩやＨＴＬＶ−ＩＩとの比較に
有用な特異性のある免疫試薬および核酸プローブの開発
を可能にする。ＨＴＬＶ−ＩおよびＨＴＬＶ−ＩＩと区
別される生物学効果における違いに加えて、ＨＴＬＶ−
ＩＩＩはいくつかの免疫学的分析および形態学的にこれ
らの公知のＨＴＬＶ群と異っている。しかし、この新し
いレトロウイルスも向Ｔ４リンパ性であり、逆転写酵
素、患者の血清および動物の超免疫血清を使った異族性
拮抗ラジオイムノアッセイで調べた構造蛋白質の交差反
応および合胞体誘導を含む、ＨＴＬＶ−ＩおよびＨＴＬ
Ｖ−ＩＩと多くの類似した性質を示す。これらの新たに
分離されたウイルスは総称的にＨＴＬＶ−ＩＩＩと名付
けられた。その蛋白質および遺伝学的情報のいくつかに
検出される差異と共に、ＨＴＬＶ−ＩＩＩがＴ細胞を殺
す能力がＨＴＬＶ群の他のものからこの変種を明らかに
区別している。
ンパ様白血病成人から出た、ＨＴと名づけられたひとつ
の新生物性異数性Ｔ細胞株を同定し、これは新しい細胞
変性ウイルス分離物の感染に感受性であった。この細胞
株はこれらの分離ウイルス（ＨＴＬＶ−ＩＩＩ）の伝達
に対して感受性の標的であり、これにより連続的なウイ
ルスの大量培養が可能であり、またこのウイルス自身同
志の、およびＨＴＬＶ−ＩやＨＴＬＶ−ＩＩとの比較に
有用な特異性のある免疫試薬および核酸プローブの開発
を可能にする。ＨＴＬＶ−ＩおよびＨＴＬＶ−ＩＩと区
別される生物学効果における違いに加えて、ＨＴＬＶ−
ＩＩＩはいくつかの免疫学的分析および形態学的にこれ
らの公知のＨＴＬＶ群と異っている。しかし、この新し
いレトロウイルスも向Ｔ４リンパ性であり、逆転写酵
素、患者の血清および動物の超免疫血清を使った異族性
拮抗ラジオイムノアッセイで調べた構造蛋白質の交差反
応および合胞体誘導を含む、ＨＴＬＶ−ＩおよびＨＴＬ
Ｖ−ＩＩと多くの類似した性質を示す。これらの新たに
分離されたウイルスは総称的にＨＴＬＶ−ＩＩＩと名付
けられた。その蛋白質および遺伝学的情報のいくつかに
検出される差異と共に、ＨＴＬＶ−ＩＩＩがＴ細胞を殺
す能力がＨＴＬＶ群の他のものからこの変種を明らかに
区別している。
【０００７】寄託 本発明に相当する細胞株でＨ9 ／ＨＴＬＶ−ＩＩＩB と
名付けるものをＡＴＣＣ Ｎｏ．ＣＲＬ８５４３として
１９８４年４月１９日、アメリカン タイプカルチャー
コレクション（American Type Culture Collection
）（エイ ティー シー シー，アメリカ合衆国，メ
リーランド ２０８５２−１７７６，ロックビル，１２
３０１ パークローン ドライブ（ＡＴＣＣ，１２３０
１ Parklawn Drive, Rockville, Maryland ２０８５２
−１７７６ ＵＳＡ）に寄託した。この寄託により寄託
物の永続性が確保され、また一般に容易に入手できる。
Ｈ９は本発明にしたがった代表的で望ましい細胞株であ
る。更にＭｏｌｔ３／ＨＴＬＶ−ＩＩＩB もＡＴＣＣ
Ｎｏ．ＣＲＬ８６０２として１９８４年８月１５日にエ
イ ティー シー シー（ＡＴＣＣ）に寄託され、寄託
物の永続性が保証されると共に、一般に容易に入手でき
る。
名付けるものをＡＴＣＣ Ｎｏ．ＣＲＬ８５４３として
１９８４年４月１９日、アメリカン タイプカルチャー
コレクション（American Type Culture Collection
）（エイ ティー シー シー，アメリカ合衆国，メ
リーランド ２０８５２−１７７６，ロックビル，１２
３０１ パークローン ドライブ（ＡＴＣＣ，１２３０
１ Parklawn Drive, Rockville, Maryland ２０８５２
−１７７６ ＵＳＡ）に寄託した。この寄託により寄託
物の永続性が確保され、また一般に容易に入手できる。
Ｈ９は本発明にしたがった代表的で望ましい細胞株であ
る。更にＭｏｌｔ３／ＨＴＬＶ−ＩＩＩB もＡＴＣＣ
Ｎｏ．ＣＲＬ８６０２として１９８４年８月１５日にエ
イ ティー シー シー（ＡＴＣＣ）に寄託され、寄託
物の永続性が保証されると共に、一般に容易に入手でき
る。
【０００８】感受性細胞株ＨＴは、試験管内感染の前
に、ＨＴＬＶについて試験され、プロウイルス配列が欠
除していることも含めてすべての点で陰性であった。前
エイズまたはエイズ患者から出たＴ細胞の短期間培養
（ＴＣＧＦを用いて生育）から集めたＨＴＬＶ−ＩＩＩ
を含む濃縮培養液に対し、親のＨＴ細胞（ポリプレン処
理した３×１０6 個の細胞）を繰返し暴露してＨＴＬＶ
−ＩＩＩを連続産生させる。この濃縮液が逆転写酵素
（ＲＴ）を持つ粒子を含むことを最初に見た。細胞増殖
が下降した時、通常培養液に暴露して１０乃至２０日後
に、新鮮な（感染していない）ＨＴ親細胞を培養液に加
える。感染親細胞株の培養液はＲＴ活性を持つ粒子につ
いて陽性であり、感染細胞数の約２０％が前エイズ血友
病患者（患者Ｅ．Ｔ．）の血清を用いた間接免疫螢光分
析（ＩＦＡ）に陽性であった。Ｅ．Ｔ．からの血清も破
砕ＨＴＬＶ−ＩＩＩの蛋白質に対する抗体を含んでいた
が、ＨＴＬＶ−ＩまたはＨＴＬＶ−ＩＩ感染細胞の蛋白
質と反応しなかった。
に、ＨＴＬＶについて試験され、プロウイルス配列が欠
除していることも含めてすべての点で陰性であった。前
エイズまたはエイズ患者から出たＴ細胞の短期間培養
（ＴＣＧＦを用いて生育）から集めたＨＴＬＶ−ＩＩＩ
を含む濃縮培養液に対し、親のＨＴ細胞（ポリプレン処
理した３×１０6 個の細胞）を繰返し暴露してＨＴＬＶ
−ＩＩＩを連続産生させる。この濃縮液が逆転写酵素
（ＲＴ）を持つ粒子を含むことを最初に見た。細胞増殖
が下降した時、通常培養液に暴露して１０乃至２０日後
に、新鮮な（感染していない）ＨＴ親細胞を培養液に加
える。感染親細胞株の培養液はＲＴ活性を持つ粒子につ
いて陽性であり、感染細胞数の約２０％が前エイズ血友
病患者（患者Ｅ．Ｔ．）の血清を用いた間接免疫螢光分
析（ＩＦＡ）に陽性であった。Ｅ．Ｔ．からの血清も破
砕ＨＴＬＶ−ＩＩＩの蛋白質に対する抗体を含んでいた
が、ＨＴＬＶ−ＩまたはＨＴＬＶ−ＩＩ感染細胞の蛋白
質と反応しなかった。
【０００９】既に述べたように、異数性ＨＴ細胞株はＨ
ＴＬＶ−ＩＩＩの連続的増殖の望ましい必要条件を示し
た。この細胞株はリンパ様白血病の成人患者から出た新
生物性異数性Ｔ細胞株で、螢光活性化セルソーターを使
用したサイトフルオロメトリーにより調べて成熟Ｔ細胞
表現型〔ＯＫＴ３+ （６２％），ＯＫＴ４+ （３９％）
およびＯＫＴ８- 〕について選択したものである。この
細胞の培養は２０％ウシ胎児血清と抗生物質を加えたＲ
ＰＭＩ／１６４０中で定常的に保持される。この培養物
を実施例１、第２表に示す。Ｈ９クローンが望ましく、
Ｈ４クローンは二番目に望ましい。
ＴＬＶ−ＩＩＩの連続的増殖の望ましい必要条件を示し
た。この細胞株はリンパ様白血病の成人患者から出た新
生物性異数性Ｔ細胞株で、螢光活性化セルソーターを使
用したサイトフルオロメトリーにより調べて成熟Ｔ細胞
表現型〔ＯＫＴ３+ （６２％），ＯＫＴ４+ （３９％）
およびＯＫＴ８- 〕について選択したものである。この
細胞の培養は２０％ウシ胎児血清と抗生物質を加えたＲ
ＰＭＩ／１６４０中で定常的に保持される。この培養物
を実施例１、第２表に示す。Ｈ９クローンが望ましく、
Ｈ４クローンは二番目に望ましい。
【００１０】ＨＴＬＶ−ＩＩＩ培養液を後天的免疫不全
症候群（エイズ）患者の培養細胞から分離する。患者の
末梢血白血球をＦｉｃｏｌｌ−Ｈｙｐａｑｕｅ中でバン
ド形成させ、５ｇ／ｍｌフィトヘマグルチニン（ＰＨＡ
−Ｐ）を含む生育培地（ＲＰＭＩ１６４０，２０％ウシ
胎児血清，０．２９ｍｇ／ｍｌグルタミン）中３７℃で
４８時間、５％ＣＯ2 雰囲気下に培養する。次いでこの
白血球に１０％精製Ｔ細胞生育因子（ＴＣＧＦ）を含む
生育培地を加える；望みに応じて、細胞の一部にアルフ
ァーインターフェロンに対するウサギ抗体を与えた。そ
の後、この白血球の細胞および生育培地についてＨＴＬ
ＶのサブグループＩ−ＩＩＩの存在を調べる。
症候群（エイズ）患者の培養細胞から分離する。患者の
末梢血白血球をＦｉｃｏｌｌ−Ｈｙｐａｑｕｅ中でバン
ド形成させ、５ｇ／ｍｌフィトヘマグルチニン（ＰＨＡ
−Ｐ）を含む生育培地（ＲＰＭＩ１６４０，２０％ウシ
胎児血清，０．２９ｍｇ／ｍｌグルタミン）中３７℃で
４８時間、５％ＣＯ2 雰囲気下に培養する。次いでこの
白血球に１０％精製Ｔ細胞生育因子（ＴＣＧＦ）を含む
生育培地を加える；望みに応じて、細胞の一部にアルフ
ァーインターフェロンに対するウサギ抗体を与えた。そ
の後、この白血球の細胞および生育培地についてＨＴＬ
ＶのサブグループＩ−ＩＩＩの存在を調べる。
【００１１】下記の中のひとつ以上を示す試料を陽性と
考えた：上澄液にＭｇ++依存逆転写酵素活性が繰返し検
出される；電子顕微鏡でウイルスが観察される；陽性血
清者または超免疫血清からの抗体によってウイルス関連
抗原が細胞内に表現される；または、逆転写酵素または
電子顕微鏡観察により検出された粒子が新鮮なヒトの中
心の血液（ｃｏｒｅ ｂｌｏｏｄ）、骨髄、または末梢
血Ｔリンパ球に伝達される。
考えた：上澄液にＭｇ++依存逆転写酵素活性が繰返し検
出される；電子顕微鏡でウイルスが観察される；陽性血
清者または超免疫血清からの抗体によってウイルス関連
抗原が細胞内に表現される；または、逆転写酵素または
電子顕微鏡観察により検出された粒子が新鮮なヒトの中
心の血液（ｃｏｒｅ ｂｌｏｏｄ）、骨髄、または末梢
血Ｔリンパ球に伝達される。
【００１２】免疫学的または核酸分析によりＨＴＬＶ−
ＩにもＨＴＬＶ−ＩＩにも分類されないすべての分離ウ
イルスはＨＴＬＶ−ＩＩＩとして分類した。ＨＴＬＶ−
ＩＩＩ産生細胞培養の細胞は確立された免疫学的手法を
使って性質を調べた所、ほとんどＴ４表現型（ＯＫＴ
４，ｌｅｕ３ａ陽性）を持つＴリンパ球（Ｅロゼット受
容体，ＯＫＴ／３およびｌｅｕ／１陽性）である。この
過程はガロ（Ｇａｌｌｏ）等によりサイエンス（Ｓｃｉ
ｅｎｃｅ）２２０巻，８６５−８６７頁，１９８３年に
も記載されている。
ＩにもＨＴＬＶ−ＩＩにも分類されないすべての分離ウ
イルスはＨＴＬＶ−ＩＩＩとして分類した。ＨＴＬＶ−
ＩＩＩ産生細胞培養の細胞は確立された免疫学的手法を
使って性質を調べた所、ほとんどＴ４表現型（ＯＫＴ
４，ｌｅｕ３ａ陽性）を持つＴリンパ球（Ｅロゼット受
容体，ＯＫＴ／３およびｌｅｕ／１陽性）である。この
過程はガロ（Ｇａｌｌｏ）等によりサイエンス（Ｓｃｉ
ｅｎｃｅ）２２０巻，８６５−８６７頁，１９８３年に
も記載されている。
【００１３】宿主ＨＴ細胞および他のクローン化細胞集
団の感染は、エイズまたは前エイズ患者からのＴ細胞培
養の濃縮または非濃縮培養液にこれらの細胞を暴露する
こと（無細胞感染）または共培養によって起り；すなわ
ち、ＨＴ細胞はＨＴＬＶ−ＩＩＩ陽性Ｔ細胞培養に対し
暴露されることによって感染される。
団の感染は、エイズまたは前エイズ患者からのＴ細胞培
養の濃縮または非濃縮培養液にこれらの細胞を暴露する
こと（無細胞感染）または共培養によって起り；すなわ
ち、ＨＴ細胞はＨＴＬＶ−ＩＩＩ陽性Ｔ細胞培養に対し
暴露されることによって感染される。
【００１４】通常の無細胞感染方法は次の通りである：
２乃至５×１０6 細胞をＣＯ2 インキュベーター中３７
℃で３０分間、ポリブレン（２ｇ／ｍｌ）またはＤＥＡ
Ｅデキストランで処理する。次いでそのインキュベータ
ー内で（ＣＯ2 ／３７℃）１時間、ウイルス接種物
（０．１乃至１ｍｌ）に暴露する。細胞を定期的に振と
うすることによって懸濁状態に保つ。１時間置いた後に
正規の生育培地を加える。感染培養がＨＴＬＶ−ＩＩＩ
に陽性かどうかを培養１、２および３週間後に調べる。
２乃至５×１０6 細胞をＣＯ2 インキュベーター中３７
℃で３０分間、ポリブレン（２ｇ／ｍｌ）またはＤＥＡ
Ｅデキストランで処理する。次いでそのインキュベータ
ー内で（ＣＯ2 ／３７℃）１時間、ウイルス接種物
（０．１乃至１ｍｌ）に暴露する。細胞を定期的に振と
うすることによって懸濁状態に保つ。１時間置いた後に
正規の生育培地を加える。感染培養がＨＴＬＶ−ＩＩＩ
に陽性かどうかを培養１、２および３週間後に調べる。
【００１５】ＨＴ細胞（クローン）の感染も共培養法−
ＨＴ細胞をエイズまたは前エイズ患者からのＴ細胞の短
期培養（約５乃至２０日）と種々の比率（通常１：５）
で混合する−によって行う。ＨＴＬＶ−ＩＩＩ陽性は、
共培養後、種々の間隔（７，１４，２１日等）で感染し
た受容体細胞にウイルス抗原またはウイルス核酸配列を
検出することによって評価される。混合培養は生育培地
で数ケ月保持される。
ＨＴ細胞をエイズまたは前エイズ患者からのＴ細胞の短
期培養（約５乃至２０日）と種々の比率（通常１：５）
で混合する−によって行う。ＨＴＬＶ−ＩＩＩ陽性は、
共培養後、種々の間隔（７，１４，２１日等）で感染し
た受容体細胞にウイルス抗原またはウイルス核酸配列を
検出することによって評価される。混合培養は生育培地
で数ケ月保持される。
【００１６】共培養を細胞処理のための標準法に適用す
る。細胞を生育させる標準条件は９５％の湿度を与えた
空気と５％ＣＯ2 の雰囲気下の３７℃である。操作にお
いて、ヒトの血液からの供与細胞が、共培養をするため
の標的細胞（ＨＴ新生物性異数性Ｔ細胞）に作用するウ
イルスを生成する。レトロウイルス陽性細胞の共培養は
ウイルスを産生し、永久の生育または不滅の生育（ＨＴ
ＬＶ−ＩＩＩおよびＨＴ9 として）；すなわち不死条件
が保持される。
る。細胞を生育させる標準条件は９５％の湿度を与えた
空気と５％ＣＯ2 の雰囲気下の３７℃である。操作にお
いて、ヒトの血液からの供与細胞が、共培養をするため
の標的細胞（ＨＴ新生物性異数性Ｔ細胞）に作用するウ
イルスを生成する。レトロウイルス陽性細胞の共培養は
ウイルスを産生し、永久の生育または不滅の生育（ＨＴ
ＬＶ−ＩＩＩおよびＨＴ9 として）；すなわち不死条件
が保持される。
【００１７】Ｈ９に加えて、ウイルスＨＴＬＶ−ＩＩＩ
陽性細胞の共培養を許容する許容性細胞が更に見い出さ
れ、同定された；これらはＭｏｌｔ３およびＨＵＴ７８
細胞、およびＣＥＭおよびＴｉ７．４である。しかし、
後者、Ｔｉ７．４はヘルペス様ウイルスであり、その意
味において使用できない。注目した細胞の性質は陽性も
陰性も下記の第１表に掲げる。
陽性細胞の共培養を許容する許容性細胞が更に見い出さ
れ、同定された；これらはＭｏｌｔ３およびＨＵＴ７８
細胞、およびＣＥＭおよびＴｉ７．４である。しかし、
後者、Ｔｉ７．４はヘルペス様ウイルスであり、その意
味において使用できない。注目した細胞の性質は陽性も
陰性も下記の第１表に掲げる。
【表１】
【００１８】
【実施例】実施例１ 下記の第２表に示すように、単一細胞ＨＴクローンをポ
ポビック（Ｐｏｐｏｖｉｃ）等によりネオプラズマ（Ｎ
ｅｏｐｌａｓｍａ）１８巻，２５７頁，１９７１年に、
およびバック（Ｂａｃｈ）等イムノロジカル レビュー
（Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｒｅｖ．）５４巻，５頁，１９８１
年に記載されているようにして、螢光活性化セルソータ
ーを使ったサイトフルオロメトリーにより調べて成熟Ｔ
細胞表現型（ＯＫＴ３+ （６２％），ＯＫＴ４+ （３９
％）およびＯＫＴ８- ）を表わす長期培養異数性ＨＴ細
胞株から分離した。この培養は２０％ウシ胎児血清およ
び抗生物質を含むＲＰＭＩ／１６４０で定常的に保持し
た。２×１０5 細胞／培養培地ｍｌの濃度で種母添加し
た親細胞培養の最終細胞濃度は、培養５日後で１×１０
6 乃至１．５×１０6 細胞／ｍｌの範囲内であった。多
核細胞検出のために、感染後６および１４日に細胞塗沫
を行い、Ｗｒｉｇｈｔ−Ｇｉｅｍｓａ染色した。５個以
上の核を持つ細胞を多核細胞と考えた。非感染培養から
のクローン化細胞もいくつか多核巨大細胞を含む；しか
し、リング形成は無く、これらの細胞の数ははるかに少
い（０．７％乃至１０％）。免疫螢光陽性細胞をリン酸
緩衝化食塩液（ＰＢＳ）で洗浄し、同じ緩衝液にｍｌ当
り１０6 細胞の濃度で再懸濁した。約５０λの細胞懸濁
液をスライド上に取り、風乾、アセトン中室温で１０分
間固定した。スライドは使用するまで−２０℃に保管し
た。ＨＴＬＶ−ＩＩＩに対する超免疫ウサギ抗血清（Ｐ
ＢＳで１／２０００に希釈）またはＰＢＳで１／８に希
釈した患者（Ｅ．Ｔ．）の血清の２０マイクロリットル
を細胞に適用し、３７℃で５０分間置いた。ウサギまた
はヒト免疫グロブリンＧに対するフルオレッセイン結合
抗血清を希釈し、固定した細胞に室温で３０分間適用し
た。次いでスライドを顕微鏡観察の前に十分に洗浄し
た。非感染親細胞株およびそのクローンは本試験で常に
陰性であった。逆転写酵素活性を測定するために、ウイ
ルス粒子を下記のようにして無細胞上澄液から沈殿させ
た：４Ｍ ＮａＣｌ０．４ｍｌおよび３０％（重量／容
量）ポリエチレングリコール（Ｃａｒｂｏｗａｘ６００
０）３．６ｍｌを集めた培養液８ｍｌに加え、その懸濁
液を氷冷下に一夜置いた。懸濁液をＳｏｒｖａｌｌ Ｒ
Ｃ−３遠心分離機を使って２０００ｒｐｍで３０分間、
４℃で遠心分離した。沈澱を５０％（容量／容量）グリ
セロール（２５ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ，ｐＨ７．５／
５ｍＭジチオスレイトール／１５０ｍＭ ＫＣｌ／０．
０２５％Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００）３００μｌに再懸
濁した。粒子を０．９％Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００／
１．５Ｍ ＫＣｌを加えて破砕した。逆転写酵素（Ｒ
Ｔ）分析はポイエズ（Ｐｏｉｅｓｚ）等，プロシーディ
ングズ オブ ザ ナショナル アカデミー オブ サ
イエンシズ オブ ユナイテッド ステイツ オブ ア
メリカ（Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳ
Ａ）７７巻，７４１５頁，１９８０年記載のようにして
行い、培養液ミリリットル当りのｃｐｍで表わした。
ポビック（Ｐｏｐｏｖｉｃ）等によりネオプラズマ（Ｎ
ｅｏｐｌａｓｍａ）１８巻，２５７頁，１９７１年に、
およびバック（Ｂａｃｈ）等イムノロジカル レビュー
（Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｒｅｖ．）５４巻，５頁，１９８１
年に記載されているようにして、螢光活性化セルソータ
ーを使ったサイトフルオロメトリーにより調べて成熟Ｔ
細胞表現型（ＯＫＴ３+ （６２％），ＯＫＴ４+ （３９
％）およびＯＫＴ８- ）を表わす長期培養異数性ＨＴ細
胞株から分離した。この培養は２０％ウシ胎児血清およ
び抗生物質を含むＲＰＭＩ／１６４０で定常的に保持し
た。２×１０5 細胞／培養培地ｍｌの濃度で種母添加し
た親細胞培養の最終細胞濃度は、培養５日後で１×１０
6 乃至１．５×１０6 細胞／ｍｌの範囲内であった。多
核細胞検出のために、感染後６および１４日に細胞塗沫
を行い、Ｗｒｉｇｈｔ−Ｇｉｅｍｓａ染色した。５個以
上の核を持つ細胞を多核細胞と考えた。非感染培養から
のクローン化細胞もいくつか多核巨大細胞を含む；しか
し、リング形成は無く、これらの細胞の数ははるかに少
い（０．７％乃至１０％）。免疫螢光陽性細胞をリン酸
緩衝化食塩液（ＰＢＳ）で洗浄し、同じ緩衝液にｍｌ当
り１０6 細胞の濃度で再懸濁した。約５０λの細胞懸濁
液をスライド上に取り、風乾、アセトン中室温で１０分
間固定した。スライドは使用するまで−２０℃に保管し
た。ＨＴＬＶ−ＩＩＩに対する超免疫ウサギ抗血清（Ｐ
ＢＳで１／２０００に希釈）またはＰＢＳで１／８に希
釈した患者（Ｅ．Ｔ．）の血清の２０マイクロリットル
を細胞に適用し、３７℃で５０分間置いた。ウサギまた
はヒト免疫グロブリンＧに対するフルオレッセイン結合
抗血清を希釈し、固定した細胞に室温で３０分間適用し
た。次いでスライドを顕微鏡観察の前に十分に洗浄し
た。非感染親細胞株およびそのクローンは本試験で常に
陰性であった。逆転写酵素活性を測定するために、ウイ
ルス粒子を下記のようにして無細胞上澄液から沈殿させ
た：４Ｍ ＮａＣｌ０．４ｍｌおよび３０％（重量／容
量）ポリエチレングリコール（Ｃａｒｂｏｗａｘ６００
０）３．６ｍｌを集めた培養液８ｍｌに加え、その懸濁
液を氷冷下に一夜置いた。懸濁液をＳｏｒｖａｌｌ Ｒ
Ｃ−３遠心分離機を使って２０００ｒｐｍで３０分間、
４℃で遠心分離した。沈澱を５０％（容量／容量）グリ
セロール（２５ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ，ｐＨ７．５／
５ｍＭジチオスレイトール／１５０ｍＭ ＫＣｌ／０．
０２５％Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００）３００μｌに再懸
濁した。粒子を０．９％Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００／
１．５Ｍ ＫＣｌを加えて破砕した。逆転写酵素（Ｒ
Ｔ）分析はポイエズ（Ｐｏｉｅｓｚ）等，プロシーディ
ングズ オブ ザ ナショナル アカデミー オブ サ
イエンシズ オブ ユナイテッド ステイツ オブ ア
メリカ（Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳ
Ａ）７７巻，７４１５頁，１９８０年記載のようにして
行い、培養液ミリリットル当りのｃｐｍで表わした。
【表２】
【００１９】実施例２ 下記の第３表に示すように、Ｈ４受容体Ｔ細胞クローン
との共培養を、それぞれ患者ＲＦおよびＳＮの末梢血か
らの新鮮な単球を使って行った。患者ＢＫとＬＳの場合
には、外部から加えたＴＣＧＦ（１０％容量／容量）の
存在下に１０日間生育したＴ細胞を使って共培養を行っ
た。受容体／供与体（患者のもの）細胞の比は１：５で
あった。混合培養はＲＰＭＩ／１６４０（２０％ＦＣＳ
および抗生物質）中、外部からＴＣＧＦを加えずに維持
した。Ｈ９Ｔ細胞クローンの無細胞感染は患者ＷＴのＴ
細胞培養から集めた濃縮培養液を使って行った。そのＴ
細胞培養は外部からＴＣＧＦを加えて２週間生育させた
後、培養液を集めて濃縮した。Ｈ９クローンの細胞はポ
リプレン（２μｇ／ｍｌ）で２０分間前処理し、２×１
０6 細胞を粒子ＲＴ活性陽性の１００培濃縮培養液０．
５ｍｌに１時間暴露した。共培養および無細胞感染細胞
培養のいずれにおいてもＨＴＬＶ−ＩＩＩウイルス表現
は試験管内培養後１月間して測定した。ＨＴＬＶ−ＩＩ
Ｉ表現には相当の変動があった（第３表参照）。逆転写
酵素（ＲＴ）分析および間接免疫螢光分析（ＩＦＡ）の
詳細は実施例１を参照のこと。
との共培養を、それぞれ患者ＲＦおよびＳＮの末梢血か
らの新鮮な単球を使って行った。患者ＢＫとＬＳの場合
には、外部から加えたＴＣＧＦ（１０％容量／容量）の
存在下に１０日間生育したＴ細胞を使って共培養を行っ
た。受容体／供与体（患者のもの）細胞の比は１：５で
あった。混合培養はＲＰＭＩ／１６４０（２０％ＦＣＳ
および抗生物質）中、外部からＴＣＧＦを加えずに維持
した。Ｈ９Ｔ細胞クローンの無細胞感染は患者ＷＴのＴ
細胞培養から集めた濃縮培養液を使って行った。そのＴ
細胞培養は外部からＴＣＧＦを加えて２週間生育させた
後、培養液を集めて濃縮した。Ｈ９クローンの細胞はポ
リプレン（２μｇ／ｍｌ）で２０分間前処理し、２×１
０6 細胞を粒子ＲＴ活性陽性の１００培濃縮培養液０．
５ｍｌに１時間暴露した。共培養および無細胞感染細胞
培養のいずれにおいてもＨＴＬＶ−ＩＩＩウイルス表現
は試験管内培養後１月間して測定した。ＨＴＬＶ−ＩＩ
Ｉ表現には相当の変動があった（第３表参照）。逆転写
酵素（ＲＴ）分析および間接免疫螢光分析（ＩＦＡ）の
詳細は実施例１を参照のこと。
【表３】
【００２０】実施例３ ＨＴＬＶ−ＩＩＩに対する高度の許容性を選択し、永続
的生育と連続的ウイルス産生を保持するために、ＨＴ親
Ｔ細胞集団の広いクローニングを行った。総計５１の単
細胞クローンを、供給者として健康な献血者の末梢血か
らの照射した単球を使い、毛細管法および限定希釈法に
よって得た。これらの細胞クローンの生育をＨＴＬＶ−
ＩＩＩ感染後に比較した。ＨＴＬＶ−ＩＩＩに感受性で
許容性である８種のＴ細胞クローンのウイルス感染に対
する反応の代表的例を第２表に示す。同一実験を２度行
い、各Ｔ細胞クローン２×１０6 細胞を０．１ｍｌの濃
縮ウイルスに暴露した。細胞生育と形態，細胞のウイル
ス抗原の表現および培養液のＲＴ活性を感染６および１
４日後に調べた。８クローンすべてウイルスに感受性で
許容性であるが、感染後の増殖能に相当の差異があっ
た。細胞数は感染６日以内に最初の細胞数から１０％乃
至９０％減少し、感染した８クローンすべてに多核（巨
大）細胞が常に高比率に見られた。エイズ患者（Ｅ．
Ｔ．）からの血清または破砕ＨＴＬＶ−ＩＩＩ全体に対
してつくった超免疫ウサギ血清を使った免疫螢光分析で
調べたウイルス抗原陽性Ｔ細胞のパーセントは１０％乃
至８０％の範囲であった。感染１４日後には、８クロー
ンすべてにおいて、全細胞数およびＨＴＬＶ−ＩＩＩ陽
性細胞の比率が上昇した。ウイルス陽性培養には常に多
数の核を含む丸い巨大細胞が見られた。これらの多核巨
大細胞はＨＴＬＶ−ＩおよびＨＴＬＶ−ＩＩにより誘導
されるものと類似しているが、核が特徴的なリング形成
を示す。電子顕微鏡検査から、細胞はかなりの量のウイ
ルスを放出することがわかった。
的生育と連続的ウイルス産生を保持するために、ＨＴ親
Ｔ細胞集団の広いクローニングを行った。総計５１の単
細胞クローンを、供給者として健康な献血者の末梢血か
らの照射した単球を使い、毛細管法および限定希釈法に
よって得た。これらの細胞クローンの生育をＨＴＬＶ−
ＩＩＩ感染後に比較した。ＨＴＬＶ−ＩＩＩに感受性で
許容性である８種のＴ細胞クローンのウイルス感染に対
する反応の代表的例を第２表に示す。同一実験を２度行
い、各Ｔ細胞クローン２×１０6 細胞を０．１ｍｌの濃
縮ウイルスに暴露した。細胞生育と形態，細胞のウイル
ス抗原の表現および培養液のＲＴ活性を感染６および１
４日後に調べた。８クローンすべてウイルスに感受性で
許容性であるが、感染後の増殖能に相当の差異があっ
た。細胞数は感染６日以内に最初の細胞数から１０％乃
至９０％減少し、感染した８クローンすべてに多核（巨
大）細胞が常に高比率に見られた。エイズ患者（Ｅ．
Ｔ．）からの血清または破砕ＨＴＬＶ−ＩＩＩ全体に対
してつくった超免疫ウサギ血清を使った免疫螢光分析で
調べたウイルス抗原陽性Ｔ細胞のパーセントは１０％乃
至８０％の範囲であった。感染１４日後には、８クロー
ンすべてにおいて、全細胞数およびＨＴＬＶ−ＩＩＩ陽
性細胞の比率が上昇した。ウイルス陽性培養には常に多
数の核を含む丸い巨大細胞が見られた。これらの多核巨
大細胞はＨＴＬＶ−ＩおよびＨＴＬＶ−ＩＩにより誘導
されるものと類似しているが、核が特徴的なリング形成
を示す。電子顕微鏡検査から、細胞はかなりの量のウイ
ルスを放出することがわかった。
【００２１】実施例４ ＨＴＬＶ−ＩＩＩが感染Ｔ細胞により長期間培養におい
て連続的に産生されるかどうかを調べるために、感染ク
ローン、Ｈ４のウイルス産生と生細胞数を数ケ月にわた
って追跡した。ウイルス産生は変動するものの、約１４
日毎にＨ４／ＨＴＬＶ−ＩＩＩ細胞培養から集めた培養
液は５ケ月間にわたって粒子のＲＴ活性を常に示した。
生細胞率は６５％乃至８５％の範囲であり、Ｈ４／ＨＴ
ＬＶ−ＩＩＩと呼ばれる細胞集団のダブリングタイムは
約３０乃至４０時間であった。したがって、この永続的
に生育するＴ細胞集団は連続的にＨＴＬＶ−ＩＩＩを産
生することができる。Ｈ４／ＨＴＬＶ−ＩＩＩ細胞によ
って産生されたウイルスの収量を、蔗糖密度勾配による
濃縮培養液の精製と密度勾配から集められた各画分の粒
子ＲＴ活性分析により調べた。最高ＲＴ活性は他のレト
ロウイルスに類似して密度１．１６ｇ／ｍｌの所に見ら
れた。
て連続的に産生されるかどうかを調べるために、感染ク
ローン、Ｈ４のウイルス産生と生細胞数を数ケ月にわた
って追跡した。ウイルス産生は変動するものの、約１４
日毎にＨ４／ＨＴＬＶ−ＩＩＩ細胞培養から集めた培養
液は５ケ月間にわたって粒子のＲＴ活性を常に示した。
生細胞率は６５％乃至８５％の範囲であり、Ｈ４／ＨＴ
ＬＶ−ＩＩＩと呼ばれる細胞集団のダブリングタイムは
約３０乃至４０時間であった。したがって、この永続的
に生育するＴ細胞集団は連続的にＨＴＬＶ−ＩＩＩを産
生することができる。Ｈ４／ＨＴＬＶ−ＩＩＩ細胞によ
って産生されたウイルスの収量を、蔗糖密度勾配による
濃縮培養液の精製と密度勾配から集められた各画分の粒
子ＲＴ活性分析により調べた。最高ＲＴ活性は他のレト
ロウイルスに類似して密度１．１６ｇ／ｍｌの所に見ら
れた。
【００２２】
【発明の効果】本発明のＨＴＬＶ−ＩＩＩウイルスを感
染させた新生物性異数性Ｔ細胞を含む細胞株は、不死の
生育能を持つものであり、従って、ＨＴＬＶ−ＩＩＩウ
イルスを連続的に大量に生産することを可能にしたもの
である。中でも、本発明の生成物である望ましい細胞株
（Ｈ９／ＨＴＬＶ−ＩＩＩB ）は、今や、エイズの救済
および血液試料中のウイルスに対する抗体の検出のため
のワクチン製造に有用である。
染させた新生物性異数性Ｔ細胞を含む細胞株は、不死の
生育能を持つものであり、従って、ＨＴＬＶ−ＩＩＩウ
イルスを連続的に大量に生産することを可能にしたもの
である。中でも、本発明の生成物である望ましい細胞株
（Ｈ９／ＨＴＬＶ−ＩＩＩB ）は、今や、エイズの救済
および血液試料中のウイルスに対する抗体の検出のため
のワクチン製造に有用である。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.5 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｇ０１Ｎ 33/569 Ｈ 9015−2Ｊ (Ｃ１２Ｎ 5/10 Ｃ１２Ｒ 1:91） (Ｃ１２Ｎ 7/00 Ｃ１２Ｒ 1:92） (72)発明者 ポポビック，ミクラス アメリカ合衆国，マリーランド 20814, ベセスダ，プークス ヒル ロード ♯ 401 ３
Claims (11)
- 【請求項１】 細胞株がＨＴＬＶ−ＩＩＩウイルスを感
染させた新生物性異数性Ｔ細胞を含むことを特徴とする
不死の生育能を持つ細胞株。 - 【請求項２】 Ｔ細胞がＯＫＴ４+ Ｔ細胞であることを
特徴とする請求項１記載の細胞株。 - 【請求項３】 Ｔ細胞がＨＴクローン細胞であることを
特徴とする請求項１記載の細胞株。 - 【請求項４】 ＨＴクローンがＨ４クローンであること
を特徴とする請求項３記載の細胞株。 - 【請求項５】 ＨＴクローンがＨ９クローンであること
を特徴とする請求項３記載の細胞株。 - 【請求項６】 細胞株がリンパ様白血病から出たＴ細胞
株であることを特徴とする請求項１記載の細胞株。 - 【請求項７】 細胞株がＯＫＴ３+ （６２％）、ＯＫＴ
４+ （３９％）およびＯＫＴ８- の成熟Ｔ細胞表現型を
持つことを特徴とする請求項１記載の細胞株。 - 【請求項８】 細胞株がＨ９／ＨＴＬＶ−ＩＩＩB （Ａ
ＴＣＣ受託番号ＣＲＬ ８５４３）であることを特徴と
する請求項１記載の細胞株。 - 【請求項９】 Ｔ細胞がＭｏｌｔ３、ＣＥＭ、Ｔｉ７．
４およびＨＵＴ７８細胞からなる群から選ばれることを
特徴とする請求項１記載の細胞株。 - 【請求項１０】 細胞株がＨＴＬＶ−ＩＩＩを連続的に
大量産出することができることを特徴とする請求項１記
載の細胞株。 - 【請求項１１】 ＨＴＬＶ−ＩＩＩウイルスが、細胞変
性効果を示し、非形質転換性であるヒト向Ｔリンパ性ウ
イルスの変種を含むことを特徴とする請求項１記載の細
胞株。
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US06/602,946 US4647773A (en) | 1984-04-23 | 1984-04-23 | Method of continuous production of retroviruses (HTLV-III) from patients with AIDS and pre-AIDS |
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Citations (1)
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|---|---|---|---|---|
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