JPH0680583A - 抗ウイルス剤として用いるための繊維芽細胞成長因子及び硫酸化多糖を含有する共働性組成物 - Google Patents

抗ウイルス剤として用いるための繊維芽細胞成長因子及び硫酸化多糖を含有する共働性組成物

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JPH0680583A
JPH0680583A JP4015488A JP1548892A JPH0680583A JP H0680583 A JPH0680583 A JP H0680583A JP 4015488 A JP4015488 A JP 4015488A JP 1548892 A JP1548892 A JP 1548892A JP H0680583 A JPH0680583 A JP H0680583A
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virus
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pharmaceutical composition
fibroblast growth
sulfated polysaccharide
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JP4015488A
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Domenico Ungheri
ドメニコ・ウンゲリ
Luisa Garofano
ルイーサ・ガロフアノ
Carlo Battistini
カルロ・バテイステイーニ
Paolo Carminati
パオロ・カルミナテイ
Guy Mazue
ギイ・マツエ
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Pfizer Italia SRL
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Farmitalia Carlo Erba SRL
Carlo Erba SpA
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Abstract

(57)【要約】 （修正有） 【目的】 エンベロープ保有ウイルスによって引き起こ
されるウイルス感染の予防又は治療に用いるための、繊
維芽細胞成長因子および抗ウイルス活性を有する硫酸化
多糖を含有する抗ウイルス活性を有する共働性医薬組成
物を提供する。 【構成】 塩基性繊維芽細胞成長因子（ｂ−ＦＧＦ）又
はその類似体（塩基性繊維芽細胞成長因子完全分子の断
片）およびカラギーナン、ヘパリン、デキストラン硫
酸、ペントサンポリサルフェート、マンナン硫酸、デル
マタン硫酸、超硫酸化されたヘパリン、超硫酸化された
デルマタン、及び紅藻類（ＡＳＰ）に属する海藻が産生
するアガロース型硫酸化多糖から成る群から選択された
硫酸化多糖を含有する、抗ウイルス活性共働性医薬組成
物。 【効果】 α，β，γ型ヘルペスウイルス、オルト又は
パラミキソウイルス、トロピカルウイルス、レトロウイ
ルス等の広範囲のエンベロープ含有ウイルスに効果を表
わす。

Description

【発明の詳細な説明】
【０００１】本発明は、エンベロープ保有ウイルスによ
って引き起こされるウイルス感染の予防又は治療に用い
るための、繊維芽細胞成長因子、抗ウイルス活性を有す
る硫酸化多糖、及び任意の医薬上許容可能な賦形剤を含
有する抗ウイルス活性を有する共働性医薬組成物（ｓｙ
ｎｅｒｇｉｓｔｉｃ ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｃ
ｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ）に関する。
【０００２】エンベロープ保有ウイルスは、例えば、α
型ヘルペスウイルス、例えば単純ヘルペスウイルス（Ｈ
ＳＶ）；β又はγ型ヘルペスウイルス、例えばサイトメ
ガロウイルス；オルトミキソウイルス、例えばインフル
エンザウイルス；パラミキソウイルス、例えばヒトＲＳ
（ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ ｓｙｎｃｙｔｉａｌ）ウイ
ルス（ＨＲＳＶ）；発疹性発熱及び／又は脳炎の原因で
あるトロピカルウイルス、例えばセムリキ森林熱（Ｓｅ
ｍｌｉｋｉ Ｆｏｒｅｓｔ）ウイルス（ＳＦＶ）、又は
その他の熱帯病に関与する例えば”トガ”及び”アレ
ナ”群のウイルス；あるいはレトロウイルス、例えば後
天性免疫不全症候群の原因であるＨＩＶウイルス、及び
モロニー（Ｍｏｌｏｎｅｙ）肉腫の原因であるＭＳＶウ
イルスである。
【０００３】本発明の繊維芽細胞成長因子は、塩基性繊
維芽細胞成長因子又は酸性繊維芽細胞成長因子、あるい
はそれらの類似体である。
【０００４】本発明の抗ウイルス活性を有する硫酸化多
糖は、例えば、カラギーナン例えばλカラギーナン、ヘ
パリン、デキストラン硫酸、ペントサンポリサルフェー
ト、マンナン硫酸、デルマタン硫酸、超硫酸化（ｓｕｐ
ｅｒ−ｓｕｌｆａｔｅｄ）されたヘパリン、超硫酸化さ
れたデルマタン、及び例えば紅藻類（Ｒｈｏｄｏｐｈｙ
ｃｅａｌ）に属する海藻が産生するアガロース型硫酸化
多糖類から成る群から選択されるものである。
【０００５】エンベロープ保有ウイルスによって引き起
こされる感染と戦うために多大な努力がなされてきたけ
れども、実際に有効な薬剤はまだ確認されていない。
【０００６】ＦＧＦは、脈管形成、創傷治癒、骨及び神
経組織を含めた組織再生の促進剤として公知である。Ｋ
ａｎｅｒら（Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４８，１４１０，１９
９０）は、ｂ−ＦＧＦ受容体が１型ＨＳＶの細胞侵入の
侵入門であることを立証した。その受容体と結合するｂ
−ＦＧＦの阻害剤及びｂ−ＦＧＦの競合的拮抗剤は、Ｈ
ＳＶ−１取込みを妨害する。
【０００７】ｂ−ＦＧＦが、２型単純ヘルペスウイルス
（ＨＳＶ−２）、ＲＳウイルス（ＨＲＳＶ）、セムリキ
森林熱ウイルス（ＳＦＶ）、ヒト免疫不全ウイルス（Ｈ
ＩＶ）、及びモロニー肉腫ウイルス（ＭＳＶ）のような
その他のウイルスの増殖及び感染を防止することを、本
発明者らも示した（本出願人の同時係属中のイタリア国
特許出願第２２８０４Ａ／８９）。
【０００８】硫酸化多糖類は、種々のエンベロープ保有
ウイルスの強力な且つ選択的阻害剤であることが知られ
ている（Ａｎｔｉｖｉｒａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ９，
３３５−３４３，１９８８；同文献，２３３−２４６，
１９８９；同文献，１２，１−２０，１９８９；Ａｎｔ
ｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ａｇ．ａｎｄ Ｃｈｅｍｉｏｔ
ｈ．３１，１５２４−１５２８，１９８７；同文献 ３
１，１３８８−１３９３，１９８７；３２，１７４２−
１７４５，１９８８；Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４０，６４６
−６５３，１９８８；Ｔｈｅ Ｌａｎｃｅｔ，Ｊｕｎｅ
１３，１９７９−１９８２，１９８７；Ｖｉｒｏｌｏｇ
ｙ １６４，５４２−５４６，１９８８）。
【０００９】本発明者らは、意外なことに、繊維芽細胞
成長因子と硫酸化多糖を組み合わせた場合、得られた抗
ウイルス活性はその組み合わせの個々の成分の抗ウイル
ス活性の合計から予測されるものより優れており、した
がって共働作用があることを発見した。２つの成分の組
み合わせは、したがって、ウイルス感染の治療にさらに
有効である。本発明は、エンベロープ保有ウイルスによ
って引き起こされるウイルス感染の予防又は治療に使用
するための、繊維芽細胞成長因子、抗ウイルス活性を有
する硫酸化多糖、及び任意の医薬上許容可能な一種以上
の賦形剤を含有する共働性医薬組成物に関する。
【００１０】本発明はさらに、医薬上許容可能な一種以
上の賦形剤中で繊維芽細胞成長因子と硫酸化多糖を混合
する工程を包含する上記組成物の製造方法に関する。
【００１１】特に、本発明は、α型ヘルペスウイルス、
例えば単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ）、特にＨＳＶ−
１及びＨＳＶ−２、及び水痘帯状疱疹ヘルペスウイル
ス；β又はγ型ヘルペスウイルス、例えばサイトメガロ
ウイルス；オルトミキソウイルス、例えばインフルエン
ザウイルス；パラミキソウイルス、例えばヒトＲＳウイ
ルス（ＨＲＳＶ）；発疹性発熱及び／又は脳炎の原因で
あるトロピカルウイルス、例えばセムリキ森林熱ウイル
ス（ＳＦＶ）、又はその他の熱帯病に関与する例えば”
トガ”及び”アレナ”群のウイルス；あるいはレトロウ
イルス、例えば後天性免疫不全症候群の原因であるＨＩ
Ｖウイルス、及びモロニー肉腫の原因であるＭＳＶウイ
ルスによって引き起こされる感染の、本発明の組成物の
使用による予防及び治療に関する。
【００１２】本発明の医薬組成物が有効であることが判
明したウイルスの特定の例は、例えば単純ヘルペスウイ
ルス（ＨＳＶ）、特にＨＳＶ−１及びＨＳＶ−２であ
る。
【００１３】本発明の繊維芽細胞成長因子（ＦＧＦ）
は、塩基性ＦＧＦ（ｂ−ＦＧＦ）（ヒト又はウシ）、あ
るいは酸性ＦＧＦ（ａ−ＦＧＦ）（ヒト又はウシ）、あ
るいは上記のｂ−ＦＧＦ及びａ−ＦＧＦの類似体であり
得る。
【００１４】上記の成長因子、即ちヒト及びウシｂ−Ｆ
ＧＦ、並びにヒト又はウシａ−ＦＧＦが公知の因子であ
って、これらは、例えば公表済みの国際特許出願ＰＣＴ
ＷＯ８６／０７５９５号及びＰＣＴ ＷＯ８７／０１
７２８号に、及び公表済みの欧州特許出願第２２６１８
１号、第２３７９６６号、及び第２５９９５３号に、並
びに例えばＳｃｉｅｎｃｅ ｖｏｌ．２３３，ｐｐ．５
４５−５４８，Ａｕｇｕｓｔ１ｓｔ，１９８６；Ｅｍｂ
ｏ Ｊｏｕｒｎａｌ Ｖｏｌ．５，Ｎｏ．１０，ｐｐ．
２５２３−２５２８，１９８６；Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａ
ｌ ａｎｄ Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ Ｒｅｓ．Ｃｏｍ
ｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ ｖｏｌ．１４０，Ｎｏ ３，
ｐｐ．８７４−８８０，１９８６；Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃ
ａｌ ａｎｄＢｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ Ｒｅｓ．Ｃｏｍ
ｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ ｖｏｌ．１３３，Ｎｏ ２，
ｐｐ．５５４−５６２，１９８５；Ｓｃｉｅｎｃｅ ｖ
ｏｌ．２３０，ｐｐ．１３８５−１３８８，Ｄｅｃｅｍ
ｂｅｒ ２０ｔｈ，１９８５のような種々の科学文献に
記載されている。
【００１５】ヒトｂＦＧＦは、以下に示す配列を有する
１４６個のアミノ酸のポリペプチドである：
【００１６】
【化１】
【００１７】ウシｂＦＧＦは、位置１１２（ここではス
レオニンがセリンに置換される）、及び位置１２８（こ
こではセリンがプロリンに置換される）のみが異なる。
【００１８】ヒトｂＦＧＦ分子及びウシｂＦＧＦ分子
は、以下の１１個のアミノ酸の配列の全部又は一部を含
有し得るＮ−末端伸長を有することができる： （ｉ）Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｍｅｔ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｇｌ
ｙ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｔｈｒ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ、例えば
特に、以下の９個のアミノ酸： （ｉｉ）Ｍｅｔ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｉ
ｌｅ−Ｔｈｒ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ、又は以下の８個のアミ
ノ酸： （ｉｉｉ）Ａｌａ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−
Ｔｈｒ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ、又は以下の７個のアミノ酸： （ｉｖ）Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ｔｈｒ−Ｔ
ｈｒ−Ｌｅｕ。
【００１９】ヒト及びウシｂＦＧＦの１４６個のアミノ
酸の分子はさらに、Ｎ−末端で一つ又はそれ以上のアミ
ノ酸残基を欠くことも可能である。
【００２０】ヒトａＦＧＦは、以下に示す配列を有する
１４０個のアミノ酸のポリペプチドである：
【００２１】
【化２】
【００２２】ウシａＦＧＦも、以下に示す配列を有し、
ヒトａＦＧＦの配列との高度の相同性を特徴とする１４
０個のアミノ酸のポリペプチドである：
【００２３】
【化３】
【００２４】ヒト及びウシａＦＧＦの分子はさらに、ｂ
ＦＧＦ分子に関して上に示したＮ−末端で同様の伸長及
び欠失を有する。本発明の繊維芽細胞成長因子は、Ｃ−
末端でアミド化されてもよい。
【００２５】上記の繊維芽細胞成長因子の類似体は、例
えば、本発明によれば、受容体と結合する能力を保持す
る完全ＦＧＦ分子の任意の断片であり得、これはまたア
ミド化形態のものであってもよい。
【００２６】このような断片の例は、公表済みの欧州特
許出願第２４６，７５３号に記載されている。それら
は、例えば特に、遊離形態及びアミド化形態の、ヒト及
びウシｂＦＧＦのアミノ酸配列９３〜１２０；９７〜１
２０；１００〜１２０；１０３〜１２０；１０３〜１４
６；１０６〜１１５；１０６〜１１８；１０６〜１２
０；１０６〜１２５；１０６〜１３０；１０６〜１３
５；１０６〜１４０；１０６〜１４６；及び１０７〜１
１０から成るポリペプチドであり得る。
【００２７】本発明の繊維芽細胞成長因子の類似体は、
等価な性質、特にＦＧＦ受容体にそれ自体が結合する等
価な能力を保持する、一つ又はそれ以上のアミノ酸の置
換及び／又は欠失によってアミド化及び非アミド化形態
の上記のＦＧＦポリペプチド又はその類似体から誘導さ
れるムテイン（ｍｕｔｅｉｎ）である。したがって、例
えば位置１１２のアミノ酸はＴｈｒ又はＳｅｒであり
得；位置１２８のアミノ酸はＳｅｒ又はＰｒｏであり
得；位置１１３のアミノ酸はＡｌａ又はＳｅｒであり
得；位置１１４のアミノ酸はＭｅｔ又はＴｒｐであり
得、そして位置１１５のアミノ酸はＰｈｅ又はＴｈｒで
あり得る。
【００２８】異なる形態の、例えばＮ−末端が伸長又は
欠失した異なる型から誘導される前述の形態のＦＧＦの
混合物もまた、本発明の範囲内であると考えられる。”
繊維芽細胞成長因子”という用語は、本明細書中で用い
る場合、このような混合物、並びに上記の全ての類似体
を意味する。
【００２９】既述のように、本発明で用いられる成長因
子は公知の因子であり、したがって公知の方法により、
例えば組換えＤＮＡ技術によって、例えば前記の公表済
みの国際特許出願ＰＣＴ ＷＯ８６／０７５９５号及び
ＰＣＴ ＷＯ８７／０１７２８号に、また、公表済みの
欧州特許出願第２２６１８１号、第２３７９６６号及び
第２５９９５３号に記載されているものと同様の手順に
よって製造し得る。公知の技術を、ＦＧＦ類似体、例え
ば本発明のＦＧＦの断片を得るために用いてもよい。例
えば、上記の公表済みの欧州特許出願第２４６７５３号
及びそこに記載されている参考文献に記載されているも
のと同様の手順、例えばＪＡＣＳ ８５，２１４９（１
９６３）に記載の固相合成を用いることができる。短い
アミノ酸配列、例えば４０アミノ酸より短い配列から成
る断片に関しては化学合成が好ましく、一方天然型ＦＧ
Ｆ分子又は例えば４０アミノ酸以上を含有するそれらの
類似体を製造するためには組換えＤＮＡ法による製造が
好ましい。
【００３０】本発明の組成物の抗ウイルス活性成分を有
する硫酸化多糖は、例えばカラギーナン、ヘパリン、デ
キストラン硫酸、ペントサンポリサルフェート、マンナ
ン硫酸、デルマタン硫酸、超硫酸化されたヘパリン、超
硫酸化されたデルマタン、及び紅藻植物綱（紅藻類）に
属する海藻が産生するアガロース型硫酸化多糖から成る
群から選択される。本発明の紅藻類により産生されるア
ガロース型硫酸化多糖類（以後、ＡＳＰと呼ぶ）は、β
（１→４）Ｄ−ガラクトース、及びα（１→３）Ｌ−ガ
ラクトースの交互反復単位から成るアガロイド型（ａｇ
ａｒｏｉｄ−ｔｙｐｅ）の共通主鎖を有する。特に、塩
化ナトリウムの上昇勾配を用いた陰イオン交換クロマト
グラフィーによって均質に精製し、蒸留水に対して完全
に透析し、そして凍結乾燥した後に、それらは以下の特
性を有する： （ａ）元素分析：無水化合物として計算した場合、炭素
２０〜３５％、水素３．２〜５．５％、窒素１％未満、
及び硫黄％以上； （ｂ）高速サイズ排除クロマトグラフィーによって測定
した場合の分子量１００００ｋＤＡまで。
【００３１】（ｃ）水、水性燐酸緩衝液（ｐＨ１〜１
３）、及び２０％までの水溶性アルコールを含有する水
性溶剤に可溶性であるが、ベンゼン、クロロホルム、エ
チルエーテルに、そして８０％以上のメチル−又はエチ
ル−アルコール及び１ｇ／ｌの塩化ナトリウムを含有す
る水性アルコール系溶液に不溶性； （ｄ）塩化バリウムの存在下で水に可溶性であるが、し
かし２Ｍ塩酸水溶液中で１２０℃で３時間加水分解した
後、塩化バリウムを添加すると硫酸バリウムの沈殿を生
じる； （ｅ）ガラクトース、３，６−アンヒドロガラクトー
ス、並びに硫酸半エステル、メチルエーテル、ピルビン
酸（１−カルボキシエチリデン）基、及びガラクトース
又はキシロースのような糖残基の群から選択される１〜
３個の置換基を有するそれらの全誘導体が、総単糖単位
の９０％以上を占める； （ｆ）総単糖単位の３０％以上が、２，３及び６位置で
上記（ｅ）のような置換基を有し得る４−０−結合α−
Ｌ−ガラクトピラノシド残基から成る； （ｇ）総単糖単位の４０％以上が、２，４及び６位置で
上記（ｅ）のような置換基を有し得る３−０−結合β−
Ｄ−ガラクトピラノシド残基から成る； （ｈ）総単糖単位の４０％以上が、２，３及び６位置で
上記（ｅ）のような置換基を有し得る４−０−結合α−
Ｌ−ガラクトピラノシド残基と、２位置で上記（ｅ）の
ような置換基を有し得る４−０−結合３，６−アンヒド
ロ−α−Ｌ−ガラクトピラノシド残基とから成る； （ｉ）β−Ｄ−ガラクトピラノシド残基の０−４及び０
−６を架橋する環式ケタールとして結合するピルビン酸
（１−カルボキシエチリデン）基が、総単糖単位の１０
％未満で置換基として生じる； （ｊ）単糖単位あたりのメチルエーテル基置換基のモル
比が０．３：１を超えない； （ｋ）硫酸半エステル基は、β−Ｄ−ガラクトピラノシ
ド残基の２，４及び６位置に、α−Ｌ−ガラクトピラノ
シド残基の２，３及び６位置に、並びに３，６−アンヒ
ドロ−α−Ｌ−ガラクトピラノシド残基の２位置に存在
し得るし、そして総硫酸化度（Ｄ．Ｓ．）、即ち単糖単
位当りの硫酸半エステル基の平均数は常に０．６より大
きい； （ｌ）総硫酸化度に対する２及び４位置での硫酸半エス
テル基の寄与は常に、０．３より大きい。
【００３２】（ａ）のパーセントは、重量％である。
（ｅ）〜（ｉ）のパーセントは、モルパーセントであ
る。
【００３３】好ましくは、異なる供給源から単離される
ＡＳＰは、約０．９±０．１のＤ．Ｓ．を有する。
【００３４】ＡＳＰのアガロイド骨格は分枝鎖単位とし
ていくつかの主鎖外ガラクトース残基（５％まで）を有
し、そして１０％までの４−０−結合α−Ｌ−ガラクト
ピラノース残基が４−０−結合α−Ｄ−ガラクトピラノ
ース単位に置換されてもよい。
【００３５】精製ＡＳＰ中では５％を超えない微量のキ
シロースが検出されることが多い。存在する場合、キシ
ロースは分枝鎖単位として生じ、酸化（ＫＩＯ4 ）と、
その後の還元（ＮａＢＨ4 ）及び温和な加水分解
（Ｈ+ ）によって除去される。キシロースの存在は、Ａ
ＳＰの生物学的性質がこの成分の存在又は非存在下で実
質的に影響を受けないために、示差的な特徴であるとは
考えられない。
【００３６】ＡＳＰは相対的に均質な化学物質として挙
動する、多分散系（ｐｏｌｙｄｉｓｐｅｒｓｅ）であ
り、ＭＷ／ＭＮ比が通常２より大きく、且つ、ＭＰが１
００〜３００ｋＤａの範囲を有する。
【００３７】ＭＷは重量平均分子量を意味し；ＭＮは数
平均分子量を意味し；そしてＭＰはピーク最大値での分
子量を意味する。
【００３８】ＡＳＰは、アガロースを製造するために紅
藻類から、寒天製造の残留物（水性抽出物）から、ある
いはさらに、かなりの量の、十分には精製されていない
一般的な目的の市販の寒天から直接出発して単離し得
る。
【００３９】特に好ましい硫酸化多糖類は、カラギーナ
ン、ヘパリン、デキストラン硫酸、ペントサンポリサル
フェート、及びＡＳＰである。
【００４０】本発明の硫酸化多糖類は公知の化合物であ
るか、又は公知の化合物又は供給源から公知の方法によ
って得ることができる。
【００４１】本発明組成物中ののＦＧＦ成分と硫酸化多
糖成分との比は、広範に、例えば一般に１：１００〜１
００：１の間で変化し得る。特に硫酸化多糖がカラギー
ナンである場合には、２０：１〜１：２０の比が好まし
い。
【００４２】本発明の医薬組成物の抗ウイルス活性は、
例えば１型及び２型単純ヘルペスに対してｉｎ ｖｉｔ
ｒｏで一般に試験された。
【００４３】試験は一般に、トリプシン処理により単層
の許容細胞（ｐｅｒｍｉｓｓｉｖｅｃｅｌｌｓ）を再懸
濁することによって、及び９６穴平底培養プレート中に
その懸濁液（５％不活性化ウシ胎仔血清を補充したイー
グルの最小必須培地中の１０ｘ１０4 細胞／ｍｌ）を植
えつけることによって実施された。
【００４４】水性溶液中の本発明の生成物質−組成物の
試料を、細胞を添加したウェル中に二重に２倍連続希釈
で分布させ、１５分接触させた後、１００ＴＣＩＣ50ウ
イルス／ウエルで感染させた。図中の点は、細胞変性を
誘発するウイルスを５０％まで減少する（ＣＰＥ ＩＶ
５０）のに必要な薬剤の組み合わせを示し、括弧内の数
字はＦＩＣ指数である。
【００４５】抗ウイルス化合物単独及び併用に関する用
量−応答曲線を作成し、対照の場合の５０％にまで細胞
変性作用を減少させるのに必要な化合物（硫酸化多糖又
はｂＦＧＦ）の濃度（ＣＰＥ ＥＤ50）を算出した。
【００４６】データをプロットし、イソボログラム（ｉ
ｓｏｂｏｌｏｇｒａｍ）法（Ｅｌｉｏｎ Ｇ．Ｂ．ら，
Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２０８，４７７，１９５４）
によって分析した。
【００４７】各ペアに関する阻害濃度分率（ＦＩＣ）、
即ち化合物Ｘ＋化合物Ｙを以下のように算出した： ＦＩＣ Ｘ＝併用の場合の化合物ＸのＣＰＥ ＩＣ50／
化合物Ｘ単独のＣＰＥＩＣ50 ＦＩＣ Ｙ＝併用の場合の化合物ＹのＣＰＥ ＩＣ50／
化合物Ｙ単独のＣＰＥＩＣ５０ 付加的抗ウイルス性（ＦＩＣ Ｘ ＋ ＦＩＣ Ｙ ＝
１）を生じる併用は、イソボログラム上に直線（単一
線）で表わされる。
【００４８】併用により相乗効果が生じた場合（ＦＩＣ
Ｘ ＋ ＦＩＣ Ｙ ＜ １）、表示される線は単一
線の下に移動する。
【００４９】併用により拮抗的活性を生じた場合（ＦＩ
Ｃ Ｘ ＋ ＦＩＣ Ｙ ＞ １）、線は単一線の上に
移動する。
【００５０】図中の点は、細胞変性を誘発するウイルス
を５０％まで低減する（ＣＰＥ ＩＣ５０）のに必要な
薬剤併用を示し、括弧内の数字はＦＩＣ指数である。
【００５１】ＨＳＶ−１に対するλカラギーナンとｂＦ
ＧＦ（内部コードＦＣＥ ２６１８４）の種々の組み合
わせのｉｎ ｖｉｔｒｏ効果を図１に報告する。
【００５２】種々の濃度のλカラギーナン（１〜０．０
１５ｍｃｇ／ｍｌ）と一定濃度のｂＦＧＦ（１００−５
０−２５−１２．５ ｎＭ）とを併用して得られた結果
を、線ーーー□ーーー、及び‐‐‐‐□‐‐‐‐で表わ
す。
【００５３】種々の濃度のｂＦＧＦ（２００〜３．１２
ｎＭ）と一定濃度のλカラギーナン（０．５−０．２５
−０．１２５−０．０６ｍｃｇ／ｍｌ）の抗ウイルス作
用を、線−○−、及び・・・・○・・・・で表わ
す。
【００５４】両方の場合において、相乗効果は、２５ｎ
ＭのｂＦＧＦ及び０．０８２ｍｃｇ／ｍｌの濃度のカラ
ギーナンを含有する組み合わせによって示される最良の
相乗作用を伴って得られる。
【００５５】ＨＳＶ−２に対するλカラギーナン及びｂ
ＦＧＦ（内部コードＦＣＥ２６１８４）の種々の組み合
わせのｉｎ ｖｉｔｒｏ効果を、図２に報告する。
【００５６】種々の濃度のλカラギーナン（０．２〜
０．００３ｍｃｇ／ｍｌ）と一定濃度のｂＦＧＦ（１０
０−５０−２５−１２．５ ｎＭ）とを併用して得られ
た結果を、線ーーー□ーーー、及び‐‐‐‐□‐‐‐‐
で表わす。
【００５７】種々の濃度のｂＦＧＦ（２００〜３．１２
ｎＭ）と一定濃度のλカラギーナン（０．１−０．０５
−０．０２５−０．０１２５ｍｃｇ／ｍｌ）の抗ウイル
ス効果を、−○−、及び・・・・○・・・・で表わ
す。
【００５８】両方の場合において、相乗効果は、１２
３．５ｎＭのｂＦＧＦ及び０．０１２５ｍｃｇ／ｍｌの
濃度のλカラギーナンを含有する組み合わせによって構
成される最良の組み合わせによって得られる。
【００５９】ＨＳＶ−１に対するペントサンポリサルフ
ェートとｂＦＧＦ（内部コードＦＣＥ ２６１８４）の
種々の組み合わせのｉｎ ｖｉｔｒｏ効果を図３に報告
する。
【００６０】種々の濃度のペントサンポリサルフェート
（１０〜０．１５ｍｃｇ／ｍｌ）と一定濃度のｂＦＧＦ
（１００−５０−２５−１２．５ ｎＭ）とを併用して
得られた結果を、線−□−、及びー・ー・ー□ー・
ー・ーで表わす。
【００６１】種々の濃度のｂＦＧＦ（２００〜３．１２
ｎＭ）と一定濃度のペントサンポリサルフェート（５−
２．５−１．２５−０．６ｍｃｇ／ｍｌ）の抗ウイルス
効果を、線−○−、及びー・ー・ー□ー・ー・ーで
表わす。
【００６２】両方の場合において、相乗効果は、７１．
４ｎＭのｂＦＧＦ及び０．６ｍｃｇ／ｍｌの濃度のペン
トサンポリサルフェートを含有する組み合わせによって
示される最良の相乗作用に伴って得られる。
【００６３】ＨＳＶ−１に対するデキストラン硫酸
（Ｍ．Ｗ．８０００）及びｂＦＧＦ（内部コードＦＣＥ
２６１８４）の種々の組み合わせのｉｎ ｖｉｔｒｏ効
果を、図４に報告する。
【００６４】種々の濃度のデキストラン硫酸（１０〜
０．１５ｍｃｇ／ｍｌ）と一定濃度のｂＦＧＦ（１００
−５０−２５−１２．５ ｎＭ）とを併用して得られた
結果を、−○−、及び・・・・○・・・・で表わす
が、これは相乗効果が得られたことを示す。最大効果
は、１２．５ｎＭのｂＦＧＦと３．９ｍｃｇ／ｍｌのデ
キストラン硫酸を併用することにより達成される。
【００６５】ＨＳＶ−１に対する硫酸化多糖類ＡＳＰ
（ロット番号８６８２／５４）及びｂＦＧＦの種々の組
み合わせのｉｎ ｖｉｔｒｏ効果を、図５に報告する。
【００６６】種々の濃度のＡＳＰ（ロット番号８６８２
／５４）（０．８〜０．１２５ｍｃｇ／ｍｌ）と一定濃
度のｂＦＧＦ（１００−５０−２５−１２．５ ｎＭ）
とを併用して得られた結果を、線−□−、及び‐‐
‐‐□‐‐‐‐で表わす。
【００６７】種々の濃度のｂＦＧＦ（２００〜３．１２
ｎＭ）と一定濃度のＡＳＰ（ロット番号８６８２／５
４）（０．２−０．１−０．０５−０．０２５ｍｃｇ／
ｍｌ）の抗ウイルス効果を、‐‐‐‐○‐‐‐‐、及び
・・・・○・・・・で表わす。
【００６８】両方の場合において、相乗効果は、２５〜
５０ｎＭのｂＦＧＦ及び０．０１２５〜０．０５ｍｃｇ
／ｍｌのＡＳＰ（ロット番号８６８２／５４）を含有す
る組み合わせによって構成される最良の組み合わせによ
って得られる。
【００６９】ＨＳＶ−２に対するＡＳＰ（ロット番号８
６８２／５４）及びｂＦＧＦの種々の組み合わせのｉｎ
ｖｉｔｒｏ効果を、図６に報告する。
【００７０】種々の濃度のＡＳＰ（ロット番号８６８２
／５４）（０．８〜０．０１２５ｍｃｇ／ｍｌ）と一定
濃度のｂＦＧＦ（１００−５０−２５−１２．５ ｎ
Ｍ）とを併用して得られた結果を、線ーーー□ーーー、
及び‐‐‐‐□‐‐‐‐で表わす。
【００７１】種々の濃度のｂＦＧＦ（２００〜３．１２
ｎＭ）と一定濃度のＡＳＰ（ロット番号８６８２／５
４）（０．２−０．１−０．０５−０．０２５ｍｃｇ／
ｍｌ）の抗ウイルス効果を、−○−、及び・・・・
○・・・・で表わす。
【００７２】両方の場合において、相乗効果は、１２．
５〜２５ｎＭのｂＦＧＦ及び０．０２６〜０．０４７ｍ
ｃｇ／ｍｌのＡＳＰ（ロット番号８６８２／５４）を含
有する組み合わせによって構成される最良の作用によっ
て得られる。
【００７３】図１〜６を参照すると、その調製が以下の
実験の項に記載されているｂＦＧＦ（ＦＣＥ ２６１８
４）は、１５３〜１５４個のアミノ酸を有するヒトｂＦ
ＧＦ、正確にはａ）ヒトｂＦＧＦに関して前に示した１
４６個のアミノ酸及び上記（ｉｖ）に示したような７個
のアミノ酸のＮ−末端伸長の配列を有する１５３アミノ
酸分子、並びにｂ）ヒトｂＦＧＦに関して前に示した１
４６個のアミノ酸及び上記（ｉｉｉ）に示したような８
個のアミノ酸のＮ−末端伸長の配列を有する１５４アミ
ノ酸分子のほぼ５０：５０の混合物を表わす。
【００７４】同様の結果は、その他のｂＦＧＦ形態、例
えば本明細書の６ページに示すヒトｂＦＧＦ１４６アミ
ノ酸形態によっても得られる。
【００７５】本発明の医薬組成物は、一つ又はそれ以上
の上記の成長因子、一つ又はそれ以上の上記の硫酸化多
糖類、例えばそれらの医薬上許容可能な塩、及び一つ又
はそれ以上の医薬上許容可能な賦形剤を含有し得る。
【００７６】本発明の繊維芽細胞成長因子の医薬上許容
可能な塩の例は、医薬上許容可能な無機酸、例えば塩
酸、臭化水素酸、硫酸、燐酸との塩、並びに医薬上許容
可能な有機酸、例えば酢酸、クエン酸、マレイン酸、リ
ンゴ酸、コハク酸、アスコルビン酸、及び酒石酸との塩
である。
【００７７】本発明の硫酸化多糖類の医薬上許容可能な
塩の例としては、医薬上許容可能な無機塩基、例えば水
酸化ナトリウム又はカリウムのようなアルカリ金属水酸
化物、あるいは水酸化カルシウムのようなアルカリ土類
金属水酸化物が挙げられる。本発明組成物の２つの成分
を、任意の好適な方法で組み合わせてよい。２成分系と
しての組み合わせを提供し得るけれども、両成分を互い
に共通の賦形剤中で混合させて１成分系を生じさせるの
が好ましい。
【００７８】賦形剤は、この目的に慣用的な又は好適な
任意の媒質である。
【００７９】本発明の組成物は、例えば局所的、非経口
的、静脈内、鞘内、又は経口経路で投与し得る。
【００８０】特に好ましい投与経路の一つは、例えば、
ＨＳＶ１ウイルスによって引き起こされる皮膚及び／又
は眼感染の、あるいは例えばＨＳＶ２によって引き起こ
される生殖器感染の、あるいはＨＲＳＶによって引き起
こされる呼吸器感染の治療に用いられる局所的経路であ
る。
【００８１】局所投与に適した組成物は、例えば皮膚科
学的治療のためのクリーム、ペースト、軟膏、又はロー
ション；膣感染の治療のための坐薬又はペッサリー；眼
感染の治療のための点眼薬；あるいは呼吸器系の感染の
治療のための、特に例えば新生児のＨＲＳＶ感染の治療
のためのエーロゾルである。
【００８２】これらの処方物は、公知の技術によって製
造し得る。例えば、クリーム、ペースト、軟膏、及びロ
ーションは、活性成分を慣用的油性又は乳化性賦形剤と
混合することによって得られる。静脈内又は鞘内投与に
適した組成物は、例えば滅菌水性溶液又は滅菌等張生理
食塩水である。非経口投与に適した組成物は、例えば活
性成分、及び例えば滅菌水、オリーブ油、グリコール、
例えばプロピレングリコールのような医薬上許容可能な
担体、並びに所望により適量の塩酸リドカインを含有す
る懸濁液又は溶液である。経口投与に適した処方物は、
例えば、活性成分を例えば希釈剤、例えばラクトース、
デキストロース等；滑沢剤、例えばシリカ、タルク、ス
テアリン酸等；結合剤、例えばデンプン、崩壊剤、例え
ばアルギン酸及びアルギン酸塩；並びにこの種の処方物
に一般に用いられるその他の賦形剤である。
【００８３】一般に、本発明の医薬組成物は、公知の技
術を用いて、また、ガレヌス製剤の分野で一般に用いら
れる手法によって製造し得る。
【００８４】有効な用量は、治療すべき病理学的状態、
用いる処方物の種類、患者の症状、及び治療期間に依っ
ている。局所投与に適した処方物は、例えばクリーム、
ペースト、軟膏、ローション、膣ペッサリー、坐薬、及
び点眼薬である。
【００８５】以下の実施例は、本発明のＦＧＦ成長因子
及びその類似体の製造方法を示すが、本発明はこれに限
定されない。
【００８６】
【実施例】実施例１ ｂ−ＦＧＦ（ＦＣＥ ２６１８４）の製造 ｂ−ＦＧＦに関する合成ＤＮＡ配列、及びこのような配
列を保有する発現プラスミドの作製を、欧州特許出願公
開第３６３６７５号に記載の手順にしたがって実施し
た。発酵及び精製工程は、以下のように実施した： （ａ）発酵工程 パスツール研究所コレクション（ｔｈｅ Ｉｎｓｔｉｔ
ｕｔｅ Ｐａｓｔｅｕｒ ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ）から
入手した細菌株Ｂ型Ｅ．ｃｏｌｉをｂ−ＦＧＦをコード
するヒト遺伝子及びテトラサイクリン耐性遺伝子の両方
を保有するプラスミドで形質転換した。この形質転換株
を用いて、組換え非グリコシル化ｈ−ｂ−ＦＧＦ（ヒト
ｂ−ＦＧＦ）を産生した。この細菌株のＭａｓｔｅｒ
ＣｅｌｌＢａｎｋ（１５の凍結乾燥バイアル）及びＷｏ
ｒｋｉｎｇ Ｃｅｌｌ Ｂａｎｋ（Ｗ．Ｃ．Ｂ．）（−
１９０℃の液体窒素中に貯蔵した７０バイアル）を調製
した。Ｗ．Ｃ．Ｂ．の１本のバイアルの内容物を、発酵
段階のための接種物として用いた。
【００８７】発酵工程は、４ ｌの培養培地を充填した
１０ ｌの発酵器内で実施した。
【００８８】株選択の条件を維持するために、塩酸テト
ラサイクリンを培地に加えた。
【００８９】３７℃で２０時間増殖させた後、最終菌体
量は４２±２ｇ／ｌ（乾燥重量）、ｂ−ＦＧＦの産生量
は比較ゲル電気泳動によって測定して２５００±５００
ｍｇ／ｌであった。
【００９０】細菌を大量に増殖させるために、発酵段階
中は純粋酸素を豊富にする必要があった。
【００９１】（ｂ）初期精製 細胞（微生物）を、遠心分離によって全発酵ブロスから
分離した。その結果得られたペレットを塩化ナトリウム
を含有する燐酸ナトリウム緩衝液中に再懸濁した。細胞
を効率よく破壊するために、高圧ホモジナイザーに最低
３回は通す必要があった。その結果生じた細胞溶解物を
遠心分離によって清澄にし、次の工程のために上清を集
めた。
【００９２】（ｃ）精製 清澄化上清をセファロース（商標）Ｓ Ｆａｓｔ Ｆｌ
ｏｗ（陽イオン交換体）のカラムに入れ、燐酸塩緩衝液
に溶解した塩化ナトリウム上昇濃度勾配を用いて生成物
をこのカラムから溶離した。生成物を、燐酸塩緩衝液に
溶解した塩化ナトリウム上昇濃度勾配を用いて溶離する
ことによって、ヘパリンセファロース（商標） ６ Ｂ
上でさらに精製した。最後に、セファデックス（商標）
Ｇ２５樹脂上で緩衝液交換を行なって、大量の生成物緩
衝液（燐酸ナトリウム−ＥＤＴＡ）中で本物質を得た。
【００９３】（ｄ）カラム消毒 セファロース Ｓ Ｆａｓｔ Ｆｌｏｗ及びセファデッ
クスＧ２５カラムを、水酸化ナトリウム溶液で洗浄して
消毒した。あるいは、ヘパリンセファロースを、３Ｍ
塩化ナトリウムを含有する溶液，ｐＨ ８．５及びｐＨ
５．５で洗浄した。
【００９４】実施例２ ｂ−ＦＧＦ断片の製造 式： Ｈ−Ｐｈｅ−Ｐｈｅ−Ｐｈｅ−Ｇｌｕ−Ａｒｇ−Ｌｅｕ
−Ｇｌｕ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ａｓｎ−Ｔｙｒ−Ａｓｎ−
Ｔｈｒ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｔ
ｙｒ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｒｐ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ａｌ
ａ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−ＮＨ2 を有するｂ−ＦＧＦの９３〜１２０断片の合成を、ペプ
チド合成機及びＭＢＨＡ樹脂を用いて、連続段階で実施
した。樹脂との結合は、米国特許第４２９２３１３号に
記載の手法にしたがって、ＢＯＣ−Ｖａｌを介して得ら
れた。樹脂と結合した後、０℃でトリフルオロ酢酸を用
いて処理するためにアミノ保護基を除去した。脱保護及
びその後の中和の後、米国特許第３，９０４，５９４号
に記載の手法にしたがって樹脂上に段階的にペプチド鎖
を作製した。
【００９５】同様の方法を用いて、以下のペプチドを製
造した： １）式： Ｈ−Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ａｓｎ
−Ｔｙｒ−Ａｓｎ−Ｔｈｒ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−
Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｒｐ−Ｔ
ｙｒ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−ＮＨ
2 を有するｂ−ＦＧＦの９７〜１２０断片； ２）式： Ｈ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ａｓｎ−Ｔｙｒ−Ａｓｎ−Ｔｈｒ
−Ｔｙｒ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−
Ｔｙｒ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｒｐ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ａ
ｌａ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−ＮＨ2 を有するｂ−ＦＧＦの１００〜１２０断片； ３）式： Ｈ−Ｔｙｒ−Ａｓｎ−Ｔｈｒ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ
−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｒｐ−
Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｎ
Ｈ2 を有する１０３〜１２０断片； ４）式： Ｈ−Ｔｙｒ−Ａｓｎ−Ｔｈｒ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ
−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｒｐ−
Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｔ
ｈｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ｇｌ
ｙ−Ｐｒｏ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ
−Ｇｌｎ−Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−
Ｌｅｕ−Ｐｒｏ−Ｍｅｔ−Ｓｅｒ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｓ
ｅｒ−ＮＨ2 を有する１０３〜１０６断片； ５）式： Ｈ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｔｙｒ
−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｒｐ−Ｔｙｒ−ＮＨ2 を有する１０６〜１１５断片； ６）式： Ｈ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｔｙｒ
−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｒｐ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ａｌａ−
Ｌｅｕ−ＮＨ２ を有する１０６〜１１８断片； ７）式：Ｈ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｓｅｒ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ
−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｒｐ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−
Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−ＮＨ２ を有する１０６〜１２０断片； ８）ｂ−ＦＧＦの１０６〜１２５アミド化断片； ９）ｂ−ＦＧＦの１０６〜１３０アミド化断片； １０）ｂ−ＦＧＦの１０６〜１３５アミド化断片； １１）ｂ−ＦＧＦの１０６〜１４０アミド化断片； １２）ｂ−ＦＧＦの１０６〜１４６アミド化断片； １３）ｂ−ＦＧＦの１０７〜１１０アミド化断片。
【００９６】実施例３ ＡＳＰ（ロット番号８６８２／５４）の抽出及び精製 ４５４ｇのＢａｃｔｏ−Ａｇａｒ（商標）Ｄｉｆｃｏを
２ｍＭアジ化ナトリウムを含有する６ ｌの０．５Ｍ
ＮａＣｌ水溶液中に懸濁し、室温で２時間、激しく攪拌
した。ガラスウールを通して濾過して得た水性抽出物
（４４００ｍｌ）を、３７ｍｌの５ Ｍ ＮａＣｌ、２
４ｍｌの２ Ｍ 硫酸ナトリウム、及び３３０ｍｌの臭
化セチルトリメチルアンモニウム（ＣＴＡＢ）の６％
（ｗ／ｖ）水溶液に３０分間わずかに暖めながら（４０
℃）、攪拌しながら添加し、室温に少なくとも２時間放
置して凝集させた。０．５Ｍ ＮａＣｌの存在によっ
て、ペクチン及び低電荷密度の硫酸化多糖類（Ｄ．Ｓ．
＜０．３）の沈殿が防止された。
【００９７】簡単に遠心分離して沈殿物を集め、４０℃
で一晩攪拌しながら６４０ｍｌの４Ｍ ＮａＣｌに溶解
した。残留アガロース及び不溶性不純物を遠心分離で除
去した。
【００９８】硫酸ナトリウム（１４ｍｌ，２Ｍ）、ＣＴ
ＡＢ（４６ｍｌ，６％）、及び２０４０ｍｌの水を順次
およびゆっくり透明上清（７００ｍｌ，４Ｍ ＮａＣｌ
に再溶解したものから）に添加し、よく混合して、塩化
ナトリウム濃度を１Ｍに下げて、均質に沈殿するよう促
した。攪拌しながら加温（４０℃，３０分）して、室温
に放置（≧２時間）した後、上方に遠心分離する沈殿物
を集めて、３００ｍｌの４Ｍ ＮａＣｌに再溶解させた
（４０℃で一晩攪拌しながら）。
【００９９】メタノール（１６８５ｍｌ）を、適度に攪
拌しながら透明溶液（３１５ｍｌ）にゆっくり添加し
て、硫酸化多糖類をそのナトリウム塩として沈殿させ、
全ＣＴＡＢ及び大半のＮａＣｌを上清（２０００ｍｌ，
８４％ＭｅＯＨ）中に残存させた。イオン交換を完了さ
せる場合は、少なくとも２時間は攪拌し続けた。
【０１００】濾過して沈殿物を集め、１５０ｍｌの水に
溶解して（総容量１８０ｍｌ）、濾過して完全に透明に
し（０．４５μｍ）、８４％ＭｅＯＨ中で再び沈殿させ
て（１０００ｍｌのＭｅＯＨを添加することによっ
て）、全ＮａＣｌを除去した。最後に９５％ＭｅＯＨ
（３５０ｍｌで２回）及び１００％ＭｅＯＨ（３００ｍ
ｌ）で洗浄し、乾燥して、Ｄ．Ｓ．≧０．６の硫酸化多
糖類の精製ナトリウム塩を収率１．０％（４．４ｇ，ロ
ット番号８６８２／５４，Ｄ．Ｓ．＝０．８５）で得
た。
【図面の簡単な説明】
【図１】この図は、ＨＳＶ−１に対するλカラギーナン
とｂＦＧＦ（内部コードＦＣＥ２６１８４）の種々の組
み合わせのｉｎ ｖｉｔｒｏ効果を示す。
【図２】この図は、ＨＳＶ−２に対するλカラギーナン
とｂＦＧＦ（内部コードＦＣＥ２６１８４）の種々の組
み合わせのｉｎ ｖｉｔｒｏ効果を示す。
【図３】この図は、ＨＳＶ−１に対するペントサンポリ
サルフェートとｂＦＧＦ（内部コードＦＣＥ ２６１８
４）の種々の組み合わせのｉｎ ｖｉｔｒｏ効果を示
す。
【図４】この図は、ＨＳＶ−１に対するデキストラン硫
酸（Ｍ．Ｗ．８０００）とｂＦＧＦ（内部コードＦＣＥ
２６１８４）の種々の組み合わせのｉｎ ｖｉｔｒｏ効
果を示す。
【図５】この図は、ＨＳＶ−１に対する硫酸化多糖類Ａ
ＳＰ（ロット番号８６８２／５４）及びｂＦＧＦの種々
の組み合わせのｉｎ ｖｉｔｒｏ効果を示す。
【図６】この図は、ＨＳＶ−２に対するＡＳＰ（ロット
番号８６８２／５４）とｂＦＧＦの種々の組み合わせの
ｉｎ ｖｉｔｒｏ効果を示す。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 ルイーサ・ガロフアノ イタリー国、20052・モンツア（ミラン）、 ビア・エツトレ・フエラモスカ・ヌメロ・ 29 (72)発明者 カルロ・バテイステイーニ イタリー国、20026・ノバテ・ミラネーゼ （ミラン）、ビア・デ・アミチス・ヌメ ロ・５ (72)発明者 パオロ・カルミナテイ イタリー国、20131・ミラン、ビア・ジヨ バンニ・パツチーニ・ヌメロ・24 (72)発明者 ギイ・マツエ イタリー国、20148・ミラン、ビア・ベシ オ・ヌメロ・11

Claims (12)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】エンベロープ保有ウイルスによって引き起
    こされるウイルス感染の予防又は治療に用いるための、
    繊維芽細胞成長因子、抗ウイルス活性を有する硫酸化多
    糖、及び任意の医薬上許容可能な一種以上の賦形剤を含
    有する抗ウイルス活性を有する共働性医薬組成物。
  2. 【請求項２】繊維芽細胞成長因子が塩基性繊維芽細胞成
    長因子（ｂ−ＦＧＦ）又はその類似体である請求項１記
    載の医薬組成物。
  3. 【請求項３】類似体が塩基性繊維芽細胞成長因子完全分
    子の断片である請求項２記載の医薬組成物。
  4. 【請求項４】抗ウイルス活性を有する硫酸化多糖がカラ
    ギーナン、ヘパリン、デキストラン硫酸、ペントサンポ
    リサルフェート、マンナン硫酸、デルマタン硫酸、超硫
    酸化されたヘパリン、超硫酸化されたデルマタン、及び
    紅藻類（ＡＳＰ）に属する海藻が産生するアガロース型
    硫酸化多糖から成る群から選択される請求項１記載の医
    薬組成物。
  5. 【請求項５】硫酸化多糖がカラギーナン、ヘパリン、デ
    キストラン硫酸、ペントサンポリサルフェート、及び紅
    藻類（ＡＳＰ）に属する海藻が産生するアガロース型硫
    酸化多糖である請求項４記載の医薬組成物。
  6. 【請求項６】ウイルスがα、β、又はγ型ヘルペスウイ
    ルス、オルトミキソウイルス又はパラミキソウイルス、
    トロピカルウイルス又はレトロウイルスである請求項１
    記載の医薬組成物。
  7. 【請求項７】α型ヘルペスウイルスが単純ヘルペスウイ
    ルス（ＨＳＶ）又は水痘帯状疱疹ヘルペスウイルスであ
    り、β又はγ型ヘルペスウイルスがサイトメガロウイル
    スであり、オルトミキソウイルスがインフルエンザウイ
    ルスであり、パラミキソウイルスがヒトＲＳウイルス
    （ＨＲＳＶ）であり、トロピカルウイルスがセムリキ森
    林熱ウイルスであり、レトロウイルスがヒト免疫不全ウ
    イルス（ＨＩＶ）又はモロニー肉腫ウイルス（ＭＳＶ）
    である請求項６記載の医薬組成物。
  8. 【請求項８】単純ヘルペスウイルスがＨＳＶ−１又はＨ
    ＳＶ−２ウイルスである請求項７記載の医薬組成物。
  9. 【請求項９】医薬上許容可能な賦形剤中で繊維芽細胞成
    長因子と硫酸化多糖を混合する工程を包含する、請求項
    １記載の医薬組成物の製造方法。
  10. 【請求項１０】エンベロープ保有ウイルスによって引き
    起こされるウイルス感染の予防又は治療に有用な医薬品
    の製造における、請求項１〜８のいずれか一項に記載の
    共働性組成物の使用。
  11. 【請求項１１】繊維芽細胞成長因子、硫酸化多糖、及び
    医薬上許容可能な賦形剤を含有する医薬組成物。
  12. 【請求項１２】エンベロープ保有ウイルスによって引き
    起こされるウイルス感染の予防又は治療のための医薬品
    の製造のための、繊維芽細胞成長因子及び抗ウイルス活
    性を有する硫酸化多糖を含有する共働性医薬組成物の使
    用。
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