JPH0689037B2

JPH0689037B2 - ＧｎＲＨ拮抗物質

Info

Publication number: JPH0689037B2
Application number: JP59252800A
Authority: JP
Inventors: ロジヤー・ウイリアム・ロースク; ジヤン・エドワール・フレデリツク・リベール; ワイリー・ウオーカー・ベール・ジユニアー
Original assignee: Salk Institute for Biological Studies
Current assignee: Salk Institute for Biological Studies
Priority date: 1983-11-29
Filing date: 1984-11-29
Publication date: 1994-11-09
Anticipated expiration: 2009-11-09
Also published as: HUT36143A; DK164409B; DK567084A; KR850004113A; US4689396A; EP0143573B1; US4547370A; PT79473A; IE843043L; AU3472484A; IL73364A0; GR81042B; DD235874A5; IE57910B1; ATE39701T1; ES8604265A1; PH19971A; HU200785B; JPS60136598A; ZA848305B

Description

【発明の詳細な説明】本発明はヒトを含む哺乳動物の脳下垂体からの生殖腺剌
激ホルモンの放出を抑制するペプチド類に関し、また排
卵および／または生殖腺からのステロイド分泌を調節す
るための医薬組成物に関する。より詳細には、本発明は
生殖腺機能並びにステロイド系ホルモン（プロゲステロ
ンおよびテストステロン）の放出を抑制するペプチド類
に関する。

発明の背景視床下部で産生されるホルモンの１種は生殖腺剌激ホル
モン（特にLH）の分泌を誘発する因子として作用し、こ
のホルモンについて本明細書ではGnRHと呼ぶことにする
が、これはまたLH−RHおよびLRFとも呼ばれている。GnR
Hは単離され、そして次の構造：ｐ−Glu−His−Trp−Ser−Tyr−Gly−Leu−Arg−Pro−G
ly−NH₂ を有するデカペプチドであると性状決定がなされた。

ペプチドとは２個以上のアミノ酸を含み、一方のアミノ
酸のカルボキシル基が他方のアミノ酸のアミノ基に結合
している化合物のことである。先に示したGnRHに関する
式はペプチドの慣用表示法に従つており、アミノ基は左
にそしてカルボキシル基は右に表示されている。アミノ
酸残基の位置はアミノ酸残基に左から右へと番号をつけ
ることによつて識別される。GnRHの場合は、グリシンの
カルボキシル基のヒドロキシル部分がアミノ基(NH₂)で
置換されている。個々のアミノ酸残基の略号は慣用的で
あつてアミノ酸の通俗名に基づいており、例えばｐ−Gl
uはピログルタミン酸、Hisはヒスチジン、Trpはトリプ
トフアン、Serはセリン、Tyrはチロシン、Glyはグリシ
ン、Leuはロイシン、Argはアルギニン、Proはプロリ
ン、Pheはフエニルアラニン、そしてAlaはアラニンを表
わす。これらのアミノ酸はバリン、イソロイシン、ト
レオニン、リジン、アスパラギン酸、アスパラギン、グ
ルタミン、システイン、メチオニンおよびプロリンと共
に自然界に存在する。すなわち蛋白質を構成する通常の
アミノ酸である。グリシンを除いて、本発明ペプチドの
アミノ酸類は特に指示がない限りＬ−立体配置である。

雌性哺乳動物の排卵抑制を希望する理由が多々存在し、
この排卵抑制のためにGnRHの正常な機能に拮抗するGnRH
類似体が投与されてきた。この理由のために、GnRHに拮
抗するGnRH類似体は避妊薬としてまたは妊娠時期を調節
するためのそれらの使用可能性について研究されつつあ
る。この種の拮抗物質はまた雄性哺乳動物の生殖腺剌激
ホルモンの分泌を調節するにも有用であることが見い出
されており、雄の避妊薬として使用することができる。
生体内で産生されるGnRHに強力に拮抗しかつLHの分泌お
よび哺乳動物の生殖腺からのステロイド類の放出を抑制
するペプチド類を提供することが望まれている。

発明の概要本発明はヒトを含む哺乳動物の生殖腺剌激ホルモンの放
出を抑制するペプチド類を提供し、また雄性および雌性
哺乳動物の生殖腺からのステロイド類の放出を抑制する
方法を提供する。改良されたGnRH類似体はGnRHに対して
拮抗し、そして哺乳動物の生殖過程において阻害作用を
有する。これらの類似体は早発思春期症、ホルモン依存
性腫瘍、月経困難症および子宮内膜症などの種々の情況
下で生殖腺剌激ホルモンおよび性ホルモンの産生を阻害
するのに使用することができる。

一般に、本発明によれば、ヒトを含む哺乳動物の脳下垂
体からの生殖腺剌激ホルモンの分泌を強力に抑制し、か
つ／また生殖腺からのステロイド類の放出を阻害するペ
プチド類が合成された。これらのペプチド類はGnRHの類
自体であり、例えばβ−（２−ナフチル）Ｄ−アラニン
（以後β−Ｄ−2NAL）のような１位置換、Ｄ−Trpのよ
うな３位置換、Tyrの代わりにArgまたはＤ−Argの５位
置換、当該分野で一般に知られるような６位のＤ−異性
体置換、および２位の特異的置換基が存在する。１位置
換基はそのα−アミノ基がアセチル（Ac）またはアクリ
ル（Acr）を含むように修飾されてもよく、またそれは
修飾されなくてもよい。修飾されたＤ−Pheが２位に存
在し、そしてベンゼン環に存在する特異的修飾の結果と
して、特にα炭素原子をメチル化する場合には、増大し
た拮抗作用を与える。水素原子に代わるただ１つの置換
はバラ位すなわち４位においてなされ、この場合クロル
およびフルオルが好適である。このＤ−Phe残基には２
つの置換、すなわちα炭素原子を１つそしてベンゼン環
に１つの置換（例えばＣ^αMe−4Cl−Ｄ−Phe）が好まし
い。Ｄ−TyrまたはＤ−Argは６位に存在するのが有利で
ある。７位および10位の置換は任意に行われる。

これらのペプチド類はLHの放出を非常に強力に抑制する
のでしばしばGnRH拮抗物質と呼ばれる。これらのペプチ
ド類は発情前期に極めて低レベルで投与する場合雌性哺
乳動物の排卵を阻止し、また妊娠後すぐに投与するなら
ば受精卵の吸収を引き起こすのに効果的である。これら
のペプチド類はまた雄性哺乳動物の避妊処置に対しても
有効である。

発明の開示本発明のペプチド類は詳細には次式： X-R₁-R₂-R₃-Ser-R₅-R₆-R₇-Arg-Pro-R₁₀ （式中、Ｘは水素、AcrまたはAcであり；R₁はβ−Ｄ−2
NAL、デヒドロProまたは4Cl−Ｄ−Pheであり；R₂はCl−
Ｄ−Phe、Ｆ−Ｄ−PheまたはＣ^αMe−Cl−Ｄ−Pheであ
り；R₃はＤ−Trpまたはβ−Ｄ−2NALであり；R₅はArgま
たはＤ−Argであり；R₆はＤ−Tyr、β−Ｄ−2NALまたは
Ｄ−Argであり；R₇はLeuまたはNMLであり；そしてR₁₀は
Gly−NH₂、NHCH₂CH₃またはＤ−Ala−NH₂である）で表わされる。

β−Ｄ−NALはβ炭素原子がナフチルで置換されたアラ
ニンのＤ−異性体を意味し、３−Ｄ−NALとも記す。好
ましくはそのβ−炭素原子がナフタレンにその環構造の
２位で結合していることを意味するβ−Ｄ−2NALが用い
られる。しかしβ−Ｄ−1NALも同等物と考えられる。NM
LはLeuのα−アミノ基にメチル置換が存在することを意
味する。

本発明のペプチド類は基本的な溶液合成法により、ある
いはクロルメチル化樹脂、メチルベンズヒドリルアミン
（MBHA）樹脂またはベンズヒドリルアミン（BHA）樹脂
を使用する固相合成法により合成することができる。固
相合成法は米国特許第4211693号に詳細に記載される方
法で、ペプチド鎖にアミノ酸を順次付加させることによ
つて実施される。好適には、当技術分野でよく知られた
側鎖保護基がSer、TyrおよびArgに付加され、また場合
によりTrPにも付加され、その後これらのアミノ酸は樹
脂に結合したペプチド鎖にカツプリングされる。この種
の方法は十分に保護されたペプチド樹脂中間体を与え
る。

本発明の中間体は次式： X¹-R₁-R₂-R₃(X²)-Ser-(X³)-R₅(X⁵)-R₆(X⁴またはX⁵)-R₇-
Arg(X⁵)-Pro-X⁶ で表わされ、ここでX¹はポリペプチドの段階的合成法の
技術分野で有用であることが知られているα−アミノ保
護基であり、意図するペプチド組成のＸが特定のアシル
基である場合にはその基を保護基として使用することも
できる。X¹に包含されるα−アミノ保護基には（１）ア
シル型保護基、例えばホルミル（For）、トリフルオル
アセチル、フタリル、ｐ−トルエンスルホニル（To
s）、ベンゾイル（Bz）、ベンゼンスルホニル、ｏ−ニ
トロフエニルスルフエニル（Nps）、トリチルスルフエ
ニル、ｏ−ニトロフエノキシアセチル、アクリル（Ac
r）、クロルアセチル、アセチル（Ac）およびγ−クロ
ルブチリル；（２）芳香族ウレタン型保護基、例えばベ
ンジルオキシカルボニル（Ｚ）およびｐ−クロルベンジ
ルオキシカルボニル、ｐ−ニトロベンジルオキシカルボ
ニル、ｐ−ブロムベンジルオキシカルボニルおよびｐ−
メトキシベンジルオキシカルボニルなどの置換ベンジル
オキシカルボニル；（３）脂肪族ウレタン型保護基、例
えばｔ−ブチルオキシカルボニル（Boc）、ジイソプロ
ピルメトキシカルボニル、イソプロピルオキシカルボニ
ル、エトキシカルボニルおよびアリルオキシカルボニ
ル；（４）シクロアルキルウレタン型保護基、例えばシ
クロペンチルオキシカルボニル、アダマンチルオキシカ
ルボニルおよびシクロヘキシルオキシカルボニル；
（５）チオウレタン型保護基、例えばフエニルチオカル
ボニル；（６）アルキル型保護基、例えばアリル（Al
y）、トリフエニルメチル（トリチル）およびベンジル
（Bzl）；（７）トリアルキルシラン型保護基、例えば
トリメチルシラン；がある。Ｘが水素である場合の好適
なα−アミノ保護基はBocである。

X²は水素またはインドール窒素のための保護基（例えば
ホルミルまたはベンジル）である。しかし、多くの合成
においてTrpを保護する必要はない。

X³は水素またはSerのアルコール性ヒドロキシル基のた
めの保護基であり、アセチル、ベンゾイル、テトラヒド
ロピラニル、ｔ−ブチル、トリチル、ベンジルおよび2,
6−ジクロルベンジルよりなる群から選択される。ベン
ジルが好適である。

X⁴は水素またはテトラヒドロピラニル、ｔ−ブチル、ト
リチル、ベンジル、ベンジルオキシカルボニル、４−ブ
ロムベンジルオキシカルボニルおよび2,6−ジクロルベ
ンジルよりなる群から選択されるTyrのフエノール性ヒ
ドロキシル基のための保護基である。2,6−ジクロルベ
ンジルが好適である。

X⁵はArgの窒素原子のための保護基であり、ニトロ、To
s、ベンジルオキシカルボニル、アダマンチルオキシカ
ルボニルおよびBocよりなる群から選択される。これと
は別にX⁵は水素であつてもよく、これはアルギニンの側
鎖窒素原子に保護基が存在しないことを意味する。Tos
が好適である。

X⁶はGly−Ｏ−CH₂−〔樹脂支持体〕;O−CH₂−〔樹脂支
持体〕;D−Ala−Ｏ−CH₂−〔樹脂支持体〕;Gly−NH−
〔樹脂支持体〕;D−Ala−NH−〔樹脂支持体〕；およびG
lyまたはＤ−AlaのOH、エステル、アミドおよびヒドラ
ジド、またはProに直接結合したOH、エステル、アミド
およびヒドラジド；よりなる群から選択される。

X²〜X⁵のための側鎖保護基を選択する規準は、その保護
基が合成の各段階でα−アミノ保護基の除去のために選
択された反応条件下でその試薬に対して安定でなければ
ならないということである。その側鎖保護基はカツプリ
ング条件下で切り離されてはならず、しかもこの保護基
は意図するアミノ酸配列の合成の完了時点でペプチド鎖
を変性させない反応条件下に除去可能でなければならな
い。

X⁶がGly−Ｏ−CH₂−〔樹脂支持体〕,D−Ala−Ｏ−CH₂−
〔樹脂支持体〕またはＯ−CH₂−〔樹脂支持体〕である
場合に、ポリスチレン樹脂支持体の多数の官能基のうち
１つのエステル部分が表示されている。X⁶がGly−NH−
〔樹脂支持体〕またはＤ−Ala−NH−〔樹脂支持体〕で
ある場合に、GlyまたはＤ−Alaはアミド結合によりBHA
樹脂またはMBHA樹脂に結合されている。

最終の式においてＸがAcまたはAcrである場合、最後の
アミノ酸のＤ−NALをペプチド鎖にカツプリングさせる
前にAcまたはAcrを付加させることによりそれをＤ−NAL
のα−アミノ基のためのX¹保護基として使用することが
できる。しかし、反応は樹脂に担持させたペプチド（側
鎖基を保護したままでα−アミノ基の保護基を除去した
もの）を用いてジシクロヘキシルカルボジイミド（DC
C）の存在下に酢酸と、より好ましくは無水酢酸と反応
させることにより、あるいは当技術分野でよく知られた
他の適当な反応により実施するのが有利である。

完全に保護されたペプチドはアンモクリシスによりクロ
ルメチル化樹脂支持体から切り離されて、完全に保護さ
れたアミド中間体を生成する。このペプチドの保護基の
除去は、ベンズヒドリルアミン樹脂からのペプチドの開
裂と同様に、フツ化水素酸（HF）を用いて０℃で行うこ
とができる。有利にはHFでの処理に先立つてペプチドに
アニソールが添加される。HFを真空下に除去した後、樹
脂から切り離しかつ保護基を除去したペプチドはエーテ
ルで処理し、デカントし、希酢酸で抽出して凍結乾燥さ
れる。

ペプチドの精製はCMCカラムでのイオン交換クロマトグ
ラフイー、続いて次の溶離剤:n−ブタノール;0.1N酢酸
（1:1容量比）を用いてSephadexG−25を充填したカラム
での分配クロマトグラフイーにより、あるいは当技術分
野でよく知られたHPLCを使用することにより行うことが
できる。

こうして本発明はまた次式： X-R₁-R₂-R₃-Ser-R₅-R₆-R₇-Arg-Pro-R₁₀ （式中、Ｘは水素、AcrまたはAcであり；R₁はβ−Ｄ−2
NAL、デヒドロProまたは4Cl−Ｄ−Pheであり；R₂はCl−
Ｄ−Phe、Ｆ−Ｄ−PheまたはＣ^αMe−Cl−Ｄ−Pheであ
り；R₃はＤ−Trpまたはβ−Ｄ−2NALであり；R₅はArgま
たはＤ−Argであり；R₆はＤ−Tyr、β−Ｄ−2NALまたは
Ｄ−Argであり；R₇はLeuまたはNMLであり；そしてR₁₀は
Gly−NH₂、NHCH₂CH₃またはＤ−Ala−NH₂である）で表わされるペプチドまたはその無毒性塩の製造方法を
提供し、その方法は（ａ）次式： X¹-R₁-R₂-R₃(X²)-Ser-(X³)-R₅(X⁵)-R₆(X⁴またはX⁵)-R₇-
Arg(X⁵)-Pro-X⁶ 〔式中、X¹は水素またはα−アミノ保護基であり；X²は
水素またはTrpのインドール窒素のための保護基であ
り；X³は水素またはSerのアルコール性ヒドロキシル基
のための保護基であり；X⁴は水素またはTyrのフエノー
ル性ヒドロキシル基のための保護基であり；X⁵は水素ま
たはArgの窒素原子のための保護基であり；そしてX⁶はG
ly−Ｏ−CH₂−（樹脂支持体）、Ｏ−CH₂−（樹脂支持
体）、Ｄ−Ala−Ｏ−CH₂−（樹脂支持体）、Gly−NH−
（樹脂支持体）、Ｄ−Ala−NH−（樹脂支持体）、Gly−
NH₂、NHCH₂CH₃、およびGlyまたはＤ−Alaのエステル、
アミドおよびヒドラジドよりなる群から選択される〕で表わされる中間体化合物を生成すること；（ｂ）基X¹
〜X⁵のうち１個またはそれ以上を除去しかつ／またX⁶に
含まれる樹脂支持体から切り離し、所望により得られた
ペプチドをその無毒性塩に変換すること；から成つてい
る。

本発明のペプチド類は体重1kgあたり100μｇ以下の用量
で、発情前期の日の正午頃に投与する場合、雌ラツトの
排卵を抑制するのに有効である。長期にわたる排卵抑制
のためには、体重1kgあたり約0.1〜2.5mgの範囲の投与
量を用いる必要があるかもしれない。これらの拮抗物質
はまた規則的に雄性哺乳動物へ投与する場合避妊薬とし
ても有効である。これらの化合物はテストステロンレベ
ルを低下させるかもしれない（このことは正常で性的に
活動している雄にとつて望ましくない結果である）の
で、GnRH拮抗物質と共に置換量のテストステロンを投与
することが適切だろう。また、これらの拮抗物質は先に
示したように他の目的のために生殖腺刺激ホルモンおよ
び性ステロイドの産生を調節する際にも使用することが
できる。

実施例次式： Ac-R₁-R₂-R₃-Ser-Arg-R₆−Leu−Arg−Pro−R₁₀でわ表わ
される第１表に示すようなペプチド類を既述の固相法で
製造した。

第１表１つの例として、〔Ac−β−Ｄ−2NAL¹、Ｃ^αMe−4Cl−
Ｄ−Phe²、Ｄ−Trp³、Arg⁵、Ｄ−Arg⁶、Ｄ−Ala¹⁰〕−G
nRHと記述される上記ペプチドNo.1の代表的な固相合成
法を以後に述べる。このペプチドは次式： Ac−β−Ｄ−2NAL−CMe−4Cl−Ｄ−Phe−Ｄ−Trp−Ser
−Arg−Ｄ−Arg−Leu−Arg−Pro−Ｄ−Aia−NH₂ で表わされる。

BHA樹脂を使用し、そしてBoc−保護Ｄ−Alaが３倍過剰
のBoc誘導体および活性化試薬としてDCCを用いてCH₂Cl₂
中で２時間にわたつてその樹脂ヘカツプリングされた。
アラニン残基はアミド結合でBHA樹脂へ結合した。

各アミノ酸残基のカツプリング後、洗浄、保護基の除去
および次のアミノ酸残基のカツプリングは初めに約5gの
樹脂を用いて自動合成装置により次のスケジユールに従
つて行われた。

工程13の後、合成が手動で行われるならばニンヒドリン
試験用にアリコートを採取し、もしこの試験が陰性であ
る場合には次のアミノ酸のカツプリングのために工程１
へ戻り、そしてこの試験が陽性またはわずかに陽性であ
る場合には工程９〜13へ戻つてこれらの工程を繰り返
す。

上記スケジユールは最初のアミノ酸を結合させた後に本
発明ペプチドの各アミノ酸をカツプリングさせるために
用いられた。Ｎ^αBoc−β−Ｄ−2NALは1980年11月18日
付の米国特許第4234571号に詳しく記載されるような当
技術分野でよく知られた方法により製造した。Argの側
鎖はTosで保護した。OBzlはSerのヒドロキシル基のため
の側鎖保護基として用い、そして2,6−ジクロルベンジ
ルはペプチドNo.2を合成する際にＤ−Tyrのヒドロキシ
ル基のための側鎖保護基として用いた。Trpは保護しな
かつた。Ｍ^αBoc−β−Ｄ−2NALは最後のアミノ酸とし
て導入した。Boc−Arg（Tos）およびBoc−Ｄ−Trpはど
ちらもCH₂Cl₂中で低い溶解性を示したので、DMF:CH₂Cl₂
混合物を使用してカツプリングさせた。

Ｎ−末端においてα−アミノ基の保護基を除去した後、
ジクロルメタン中大過剰の無水酢酸を使用してアセチル
化を行つた。樹脂からのペプチドの開裂および側鎖保護
基の完全な除去はHFを用いて０℃で極めて容易に行われ
た。HF処理に先立つてスキヤンベンジヤーとしてアニソ
ールほ加えた。真空下でHFを除いた後、樹脂は50％酢酸
で抽出し、その洗液を凍結乾燥して粗ペプチド粉末を得
た。

次いで、ペプチドの精製がCMCのイオン交換クロマトグ
ラフイー（WhatmanCM32、メタノール／水50:50の混合溶
媒中0.05〜0.3MNH₄OAcの勾配を使用）、続いて次の溶解
剤:n−ブタノール;0.1N酢酸（1:1容量比）を用いるゲル
過カラムでの分配クロマトグラフイーにより行われ
た。

このペプチドは種々の異なる溶剤系を用いる薄層クロマ
トグラフイー、および燐酸トリチルアンモニウム水溶液
とアセトニトリルとを用いる逆相高圧液体クロマトグラ
フイーにより均質であると認められた。得られた精製ペ
プチドのアミノ酸分析は、ペプチド鎖の各アミノ酸のた
めの整数値を実質的に示して、用意した構造式と一致し
た。旋光度は光電偏光計で測定して、▲〔α〕²² _D▼＝
−2.2°±１（ｃ＝１、50％酢酸）であつた。

既述のペプチド類は雌ラツトの排卵抑制についてのそれ
らの有効性を確認するために生体内で試験された。この
試験では、Spragut−Dawley種の成熟した雌ラツトの特
定数（すなわち10匹、体重が各々225〜250gであるも
の）にトウモロコシ油中のペプチド10μｇを発情前期の
日の正午頃に注射した。発情前期は発情期（排卵）前の
午後である。別の雌ラツト群を対照として使用し、この
群にはペプチドを投与しなかつた。対照の雌ラツトは各
々発情期に排卵したが、処理されたラツトはこれらのう
ちどれも排卵しなかつた。この結果として、ペプチドは
極めて少用量で雌ラツトの排卵抑制に対して有意に効果
的であると考えられ、またこのペプチドは約10μｇの用
量で完全に効果的であると考えられた。追加の試験がよ
り少ない用量またはより多い用量で行われ、その結果を
下記の第II表に示した。表中、旋光度の値はすべてｃ＝
1.50％酢酸の条件下で測定した。

次式： Ac−Ｄ−2NAL−4Cl−Ｄ−Phe−Ｄ−3PAL−Ser−Arg−Ｄ
−Glu（AA）−Leu−Arg−Pro−Ｄ−Ala−NH₂ （AA＝アニソール内転）のペプチドについて、毒性試験を行った。

雌雄各12匹のラットを用い、GMPの基準にしたがって、3
0日間の試験を実施した。用いたペプチドの用量は、5
0、250または1250μg/kg体重であった。ペプチドを30日
間皮下に注射した。第31日にラットを解剖して、血清学
的、血液学的ならびに顕微鏡および肉眼による組織学的
研究を実施した。

すべての動物は、すべての用量について耐性を示し、ま
た、明らかな全身的効果は認められなかった。すべての
ラットは実験期間中生存した。

次に、このペプチドについて、同じ試験を90日間にわた
り実施したところ、すべての動物は、すべての用量につ
いて耐性を示し、明らかな全身的効果は認められなかっ
た。また、すべてのラットは実験期間中生存した。

全てのペプチドは極めて少用量で雌性哺乳動物の排卵を
抑制するのに有効であると考えられる。これらのペプチ
ドは薬学的に受容される無毒性塩、例えば酸付加塩また
は金属錯体（例えば亜鉛、バリウム、カルシウム、マグ
ネシウムまたはアルミニウムとの錯体、本明細書ではこ
れらの錯体を付加塩と考える）、もしくはこれらの２つ
の組合せの形で投与することができる。酸付加塩の例と
しては塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、燐酸塩、硝酸
塩、酸塩、フマル酸塩、グルコン酸塩、タンニン酸
塩、マレイン酸塩、酢酸塩、クエン酸塩、安息香酸塩、
コハク酸塩、アルギル酸塩、リンゴ酸塩、アスコルビン
酸塩、酒石酸塩などがある。活性成分が錠剤の形で投与
される場合には、錠剤は結合剤（例えばトラガカント、
トウモロコシデンプンまたはゼラチン）；崩壊剤（例え
ばアルギン酸）；および滑沢剤（例えばステアリン酸マ
グネシウム）を含む薬学的に受容される希釈剤を含有す
ることができる。液剤の形での投与が望まれる場合に
は、甘味剤および／または風味剤を薬学的に受容される
希釈剤の一部として用いてもよく、また等張食塩水また
は燐酸緩衝液での静脈内投与を行うこともできる。

医薬組成物は通常そのペプチドを薬学的に受容される慣
用担体と共に含有するだろう。一般に投与量は静脈内に
投与する場合患者の体重1kgあたり約１〜100μｇのペプ
チドであり、経口投与量はこれより多くなるだろう。結
局、これらのペプチド類を用いての患者の治療は他のGn
RH拮抗物質を使用する臨床治療と同じ方法で行われる。

これらのペプチド類は生殖力抑制を達成するために、そ
してまた生殖腺活動の可逆的抑制を必要とする場合、例
えば早発思春期症の管理のためにあるいは放射線療法ま
たは化学療法の期間中に、静脈内、皮下、筋肉内、経口
的、鼻腔内または膣内に投与される。有効投与量は投与
形体および治療すべき哺乳動物の種類により変化するだ
ろう。１つの代表的な剤形の例はペプチドを含有する生
理的食塩水であり、この溶液は体重1kgあたり約0.1〜2.
5mgの範囲の用量を提供するように投与される。ペプチ
ドの経口投与は固体または液体のいずれかの形で与えら
れる。

本発明は好適な実施態様について記述してきたが、当技
術分野で通常の知識を有する者に明らかであるような変
更ならびに修正は特許請求の範囲で説明する本発明の範
囲から逸脱することなくなし得ると理解すべきである。
例えば、ペプチドの有効性を著しく減ずることのない当
技術分野でよく知られた他の置換は本発明のペプチド類
に対しても用いられるかもしれない。例として、Gly−O
CH₃、Gly−OCH₂CH₃、Gly−NHNH₂およびSar−NH₂（Sar＝
サルコシン）はR₁₀のために特定したアミノ酸残基の同
等物と考えられる。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者ジヤン・エドワール・フレデリツク・リベールアメリカ合衆国カリフオルニア州92037, ラ・ホーラ，ブラツクゴールド・ロード 9674 (72)発明者ワイリー・ウオーカー・ベール・ジユニアーアメリカ合衆国カリフオルニア州92037, ラ・ホーラ，バルデズ 1643

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】次式： X-R₁-R₂-R₃-Ser-R₅-R₆-Leu-Arg-Pro-R₁₀ （式中、Ｘは水素またはAcであり；R₁はβ−Ｄ−2NAL、
デヒドロProまたは4Cl−Ｄ−Pheであり；R₂はCl−Ｄ−P
he、Ｆ−Ｄ−PheまたはＣ^αMe−Cl−Ｄ−Pheであり；R₃
はＤ−Trpまたはβ−Ｄ−2NALであり；R₅はArgまたはＤ
−Argであり；R₆はＤ−Tyr、β−Ｄ−2NALまたはＤ−Ar
gであり；そしてR₁₀はGly−NH₂またはＤ−Ala−NH₂であ
る）で表されるペプチドまたはその無毒性塩。
【請求項２】R₅がArgである特許請求の範囲第１項記載
のペプチド。
【請求項３】ＸがAcであり、R₁がβ−Ｄ−2NALであり、
R₃がＤ−Trpである特許請求の範囲第１項または第２項
記載のペプチド。
【請求項４】R₂がＣ^αMe−４−Cl−Ｄ−Pheである特許
請求の範囲第１〜３項のいずれかに記載のペプチド。
【請求項５】R₆がＤ−Argである特許請求の範囲第４項
記載のペプチド。
【請求項６】R₆がＤ−Tyrである特許請求の範囲第４項
記載のペプチド。
【請求項７】R₆がβ−Ｄ−2NALである特許請求の範囲第
１〜３項のいずれかに記載のペプチド。
【請求項８】R₂が4Cl−Ｄ−Pheである特許請求の範囲第
１〜３項のいずれかに記載のペプチド。
【請求項９】R₁₀がＤ−Ala−NH₂である特許請求の範囲
第１〜８項のいずれかに記載のペプチド。
【請求項１０】R₅がArgであり、R₁、R₂、R₃、R₆およびR
₁₀が以下のいずれかである特許請求の範囲第１項記載の
ペプチド。
【請求項１１】次式： X-R₁-R₂-R₃-Ser-R₅-R₆-Leu-Arg-Pro-R₁₀ （式中、Ｘは水素またはAcであり；R₁はβ−Ｄ−2NAL、
デヒドロProまたは4Cl−Ｄ−Pheであり；R₂はCl−Ｄ−P
he、Ｆ−Ｄ−PheまたはＣ^αMe−Cl−Ｄ−Pheであり；R₃
はＤ−Trpまたはβ−Ｄ−2NALであり；R₅はArgまたはＤ
−Argであり；R₆はＤ−Tyr、β−Ｄ−2NALまたはＤ−Ar
gであり；そしてR₁₀はGly−NH₂またはＤ−Ala−NH₂であ
る）で表されるペプチドまたはその無毒性塩を活性成分
として有効量含有し、さらに、薬学的に受容される無毒
性希釈剤を含有する生殖腺刺激ホルモンの分泌を調節す
るための医薬組成物。
【請求項１２】次式： X-R₁-R₂-R₃-Ser-R₅-R₆-Leu-Arg-Pro-R₁₀ （式中、Ｘは水素またはAcであり；R₁はβ−Ｄ−2NAL、
デヒドロProまたは4Cl−Ｄ−Pheであり；R₂はCl−Ｄ−P
he、Ｆ−Ｄ−PheまたはＣ^αMe−Cl−Ｄ−Pheであり；R₃
はＤ−Trpまたはβ−Ｄ−2NALであり；R₅はArgまたはＤ
−Argであり；R₆はＤ−Tyr、β−Ｄ−2NALまたはＤ−Ar
gであり；そしてR₁₀はGly−NH₂またはＤ−Ala−NH₂であ
る）で表されるペプチドまたはその無毒性塩の有効量を
含む、排卵および／または生殖腺からのステロイド分泌
を調節するための医薬組成物。
【請求項１３】R₂がＣ^αMe−４−Cl−Ｄ−Pheであり、R
₃がＤ−Trpである特許請求の範囲第12項記載の組成物。
【請求項１４】R₁がβ−Ｄ−2NALである特許請求の範囲
第12項または第13項記載の組成物。
【請求項１５】R₅がArgであり、R₆がＤ−Argである特許
請求の範囲第14項記載の組成物。
【請求項１６】R₅がArgであり、R₆がＤ−Tyrである特許
請求の範囲第14項記載の組成物。
【請求項１７】R₁₀がＤ−Ala−NH₂である特許請求の範
囲第12〜16項のいずれかに記載の組成物。
【請求項１８】ＸがAcである特許請求の範囲第12〜17項
のいずれかに記載の組成物。