JPH0698178B2 - 血小板保存方法及び血小板保存器具 - Google Patents

血小板保存方法及び血小板保存器具

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JPH0698178B2
JPH0698178B2 JP3240245A JP24024591A JPH0698178B2 JP H0698178 B2 JPH0698178 B2 JP H0698178B2 JP 3240245 A JP3240245 A JP 3240245A JP 24024591 A JP24024591 A JP 24024591A JP H0698178 B2 JPH0698178 B2 JP H0698178B2
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Description

【発明の詳細な説明】
【0001】
【産業上の利用分野】本発明は、血小板を長期保存でき
るようにした血小板保存方法及び血小板保存器具に関す
るものである。
【0002】
【従来の技術】感染症、血小板減少症、外傷、放射線障
害などで血小板の補給をする患者に対しては濃厚血小板
(PC:Platelet Concentrate) の成分輸血が必要とな
る。濃厚血小板は血小板を濃厚に含む血漿であり、ドナ
−から採取した血液を遠心分離処理、または、成分献血
によって得ることができる。いずれの方法によっても得
られた血小板の機能は極めて不安定であり、すみやかに
濃厚血小板を患者に輸注する必要がある。
【0003】濃厚血小板の保存方法として、ポリ塩化ビ
ニル(PVC)やポリオレフィン(PO)等のプラスチ
ック製血液バッグ中で室温(22℃)で振盪して液状保
存する方法がある。この液状保存は濃厚血小板の保存有
効期限は血小板機能保持の点から我国において3日間、
諸外国においても5日間とされている。しかも成分献血
により得られた濃厚血小板(フェレ−シスPC)の保存
期間は、更に制限されている。またHLA(リンパ球抗
原)適合血小板は、ドナ−の時間的制約等の理由から、
より状態よく長期にわたって液状保存することが望まれ
ている。
【0004】 このようなことから、本発明者は、特開
昭63−56275号、特開昭63−248382号等
で提案された二重バッグシステムを用いて血小板の長期
液状保存に関して検討を続けてきた。当初、血小板の保
存液として細胞培養用培地(MCDP−151,SIG
MA社)を用い、人血清アルブミンを添加して保存を行
うと、血小板凝集能を高値に維持できることを明らかに
した(特開昭2−255601)。しかし、血小板数保
持、血小板平均容積(MPV)、浸透圧ショック回復率
(%HSR)はPVCバッグ保存の血小板と同程度とい
う結果が得られた。
【0005】これらの原因を探るため、外袋に自己乏血
小板血漿(PPP: Platelet PoorPlasma 血液保存
液CPD加)を注入して血小板保存を行ったところ、血
小板数、MPV、%HSRは顕著な改善が認められた。
この結果から、二重バッグによる血小板保存において血
小板の容量変動を少なくするため血小板と保存液の浸透
圧を平衡させる必要があり、保存液の組成が二重バッグ
による血小板保存性に影響を与えることを知得し、本発
明に至ったものである。
【0006】
【発明が解決しようとする課題】本発明は、ドナ−から
採血した全血を調製して得られた濃厚血小板、または成
分献血により得られた濃厚血小板をその機能を低下させ
ることなく長期間にわたって液状保存することをその目
的とする。
【0007】
【問題点を解決するための手段】 上記課題を解決する
ための本発明の手段は、血小板を液状保存する方法であ
って、血小板と、重炭酸ナトリウム及びグルコースを含
み、かつ浸透圧調整剤を添加した血小板保存液とを半透
膜を介して接触させ、血小板と血小板保存液の浸透圧差
を平衡させた状態で血小板と血小板保存液に振盪を付与
しながら血小板を保存することを特徴とする。
【0008】 また、この血小板保存方法を実施する器
具は、血小板を液状保存するための器具であって、血小
板を保存する半透膜の内袋と、この内袋を内挿する外袋
と、前記内袋と外袋の空間部に収容される血小板保存液
とを有し、前記血小板保存液は重炭酸ナトリウム及びグ
ルコースを含んでおり、かつ前記内袋内の血小板との浸
透圧差を平衡させるための浸透圧調整剤を添加したもの
であることを特徴とする。
【0009】前記半透膜の素材としては、例えば再生セ
ルロ−ス、セルロ−スアセテ−トなどのセルロ−ス系
膜、またはポリアクリロニトリル、ポリメチルメタクリ
レ−ト、ポリスルホン、ポリカ−ボネ−ト、ポリアミ
ド、ポリエチレン、ポリプロピレン等のポリオレフィン
などの合成膜である。また外袋は例えばポリ塩化ビニ
ル、酢酸ビニル共重合体、ポリオレフィン等の軟質プラ
スチック材を用いることができる。
【0010】浸透圧調整剤とは例えばデキストラン、ポ
リエチレングリコ−ル、ポリビニルリドン等があげられ
るが濃圧血小板と保存液の浸透圧を平衡させる物質であ
ればよい。デキストランの分子量が40,000の場
合、血小板保存液に対する添加量は2.5〜3.0W/V
%であり、好ましくは2.5W/V %である。デキストラ
ン添加量が2.5W/V %以下では血小板数の減少、MP
Vの増大、%HSRの低下が認められ、3.0W/V %以
上では濃厚血小板へ保存液の混入が多くなり、血小板の
容量が増大する。2.5W/V %のときコロイド浸透圧に
よる血小板の容積変動が最も小さい。
【0011】血小板保存液としては、Holme 、Murphy、
Rockが処方したもの等があり、なかでも重炭酸ナトリウ
ム及びグルコ−スを含んでいるHolme 処方が好ましい。
Holme 処方は保存液のpHが長期間安定し、血小板機能が
良好に維持される。また重炭酸ナトリウムは解離してHC
O3となり、血漿のバッファ−系を補うことになる。
【0012】
【実施例】次に本発明の実施例について具体的に説明す
る。図1は本実施例で使用される血小板保存用二重バッ
グの構成図である。1は外袋、2はこの外袋に内挿され
た内袋であり、外袋1と内袋2の間には保存液を収容す
る空間部が形成されている。
【0013】 外袋1は二枚の軟質合成樹脂の周囲を袋
状にシールして作られたものであり、下端部には複数の
操作口3が設けられている。また外袋1のコーナー部の
シール部には、後述するロータリーアジテータへの取り
付け穴4がそれぞれ開口されている。
【0014】内袋2はチュ−ブ状半透膜の両端開口部を
シ−ルして作られたものであり、上端部には血小板を注
出入を行うための操作口3が外袋1の外部に突出するよ
うに設けられている。また内袋2は全体が保護ネット5
で覆われており、内袋2の外面と外袋1の内面が密着し
ないように、所定の空間を保持できるように構成されて
いる。
【0015】本実施例の外袋1は軟質ポリ塩化ビニルで
構成され、そのシ−ト厚は0.4mm、容量は2.000
lである。また内袋2は半透性セロファン膜で構成さ
れ、膜厚20μm 、分画分子量10.000、容量は1
00mlである。
【0016】図2は本実施例で使用されるロ−タリ−ア
ジテ−タの斜視図であり、駆動機構、制御機構等が内蔵
されたボックス10と、このボックス10に所定の角度
で装着された回転板11を備えており、回転板11はボ
ックス10に内蔵された駆動機構により回転するように
なっている。回転板11の四隅には前記保存バッグを固
定するための止め具12を備えており、血小板保存用二
重バッグは、外袋1の取り付け穴4を止め具12に挿入
して回転板11に固定される。なお止め具12は取付位
置調整溝13に沿って移動可能になっている。
【0017】実験方法は、常法に従い全血から調製した
濃厚血小板を、上記血小板保存用二重バッグの内袋2に
操作口6を通して100ml注入した。また外袋1にはHo
lme処方(表1参照)にデキストラン(MW:40,00
0)を添加し、pHを7.0に調整した血小板保存液50
0mlと無菌エア−500mlを操作口3から注入し、外袋
1と内袋2の空間部に収容した。
【0018】この血小板保存用二重バッグを上記ロ−タ
リ−アジテ−タに固定し、回転板11を回転(5rpm )
させて血小板保存用二重バッグに振盪を付与しながら2
2℃の恒温室内で2週間保存した。
【0019】また比較例として、市販の濃厚血小板保存
用PO(ポリオレフィン)バッグ(600ml,プレトバ
ッグ)を用い、前述と同じように調製した濃厚血小板を
100ml注入し、血小板振盪機で水平往復振盪(60rp
m )を付与しながら22℃の恒温室内で2週間保存し
た。
【0020】上述の条件に従って保存した濃厚血小板を
サンプリングし、pH及びガス分圧、血小板数及びMP
V、%HSR及び凝集能を測定した。pH及びガス分圧
は、pH/血液ガス分析装置により測定した。血小板数及
びMPVはコ−ルタ−カウンタ−を用いて測定した。
【0021】また%HSR及び凝集能については、サン
プリングした濃厚血小板をあらかじめ凍結保存しておい
たPPPで希釈し、多血小板血漿(PRP: Platelet
PoorPlasma ,平均血小板濃度3.5×105 個/μ
1,pH7.4)を調製し、試液とした。%HSRは、分
光光度計を用いてPRP1.4に蒸留水0.7mlを加え
たときの610nmにおける5分間の透過率の変化から求
めた。また凝集能はCaCl2 (最終濃度3mM)存在下、A
DP(最終濃度10μM )、コラ−ゲン(最終濃度5μ
g/ml)単独またはADP(5μM )とコラ−ゲン(1μ
g/ml)の共存刺激による10分間の最大凝集率を血小板
凝集能測定装置で測定した。以下これらの実験結果を述
べる。
【0022】[pH及びガス分圧]図3に示すように、本
発明バッグにより保存した場合、濃厚血小板のpHの変動
は少なく、14日目まで安定し、7〜7.3の間に維持
された。これに対し、従来バッグは3日目まで比較的安
定していたが、以後低下し、さらに7日目以降はpHは急
激に低下し、14日目には6.00±0.07に低下し
た。
【0023】濃厚血小板の炭酸ガス分圧PCO2、酸素ガス
分圧PO2 は、図4及び図5に示すように、従来バッグに
比べ本発明バッグが常に高値を示したが、10日目まで
同様の変化であった。10日目以降、本発明バッグでは
PCO2は徐々に低下したが、14日目まで残存し、PO2
上昇している。これに対し、従来バッグでは7〜10日
目からPCO2は上昇し、14日目にPCO2、PO2 共に空気と
の飽和値に近い値を示した。
【0024】[血小板数及びMPV]血小板数の変動は
図6に示すように本発明バッグによる保存が従来バッグ
保存より常に高値を示した。血小板総数は初日10.1
0±3.23×1018個/バッグが14日目には本発明
バッグで8.40±2.84×1010個/バッグ(初日
の83.04±4.54%)、従来バッグで7.72±
1.75×1010個/バッグ(初日の77.94±7.
47%)であった。
【0025】MPVは、図7に示すように本発明バッグ
保存で1〜3日目まで増大するが、それ以降はほぼ安定
し、14日目で7.12±0.29μm3であった。これ
に対し、従来バッグ保存では5日目まで初日の値をほぼ
維持していたが、以降増大し、7日目から著しく増大し
た。そして14日目には8.66±0.36μm3の値を
示した。
【0026】[%HSR]%HSRは図8に示すよう
に、本発明バッグ、従来バッグとも7日目までは同程度
を示した。しかしそれ以降は本発明での%HSRの低下
は緩やかであり、14日目に初日の76%程度を維持し
ていたのに対し、従来バッグでは7日目以降急激に低下
し、14日目には浸透圧の変化に対する反応は失われ
た。
【0027】[凝集能]凝集能は、図9、図10及び図
11に示すように、ADP、コラ−ゲン単独、及びAD
Pとコラ−ゲン共存刺激のいずれの場合も10日目まで
同様の低下傾向を示した。10日目以降、本発明バッグ
保存ではADP単独及びADPとコラ−ゲン共存刺激の
凝集は、10日目から14日目までほぼ一定値を示し
た。これに対し従来バッグ保存では7〜10日目からい
ずれの刺激による凝集も急激に低下し、14日目には刺
激に対する反応は失われた。
【0028】
【表1】
【0029】上述した本発明バッグにより血小板を保存
すれば、代謝機能を維持しながら血小板機能も保持され
ることになる。また濃厚血小板は内袋2の半透膜を介し
て外袋1の半透膜を含めた大きな容量の状態で保存さ
れ、血漿のバッファ−能、代謝産物の蓄積等の許容範囲
が広がり、実験結果では少なくとも2週間以上の液状長
期保存が可能であった。
【0030】
【発明の効果】 以上説明した本発明によれば、重炭酸
ナトリウム及びグルコースを含み、かつ浸透圧調整剤を
添加した血小板保存液と血小板を半透膜を介して接触さ
せることにより、血小板機能を保持しながら濃厚血小板
を液状で長期間保存することができる。
【図面の簡単な説明】
【図1】本発明の血小板保存バッグの構成図。
【図2】本発明で使用されるロ−タリ−アジテ−タ−の
斜視図。
【図3】本発明の血小板保存法による血小板のpH測定結
果を従来例と比較したグラフ。
【図4】本発明の血小板保存法による血小板の炭酸ガス
分圧測定結果を従来例と比較したグラフ。
【図5】本発明の血小板保存法による血小板の酸素ガス
分圧測定結果を従来例と比較したグラフ。
【図6】本発明の血小板保存法による血小板の血小板数
測定結果を従来例と比較したグラフ。
【図7】本発明の血小板保存法による血小板の血小板平
均容積測定結果を従来例と比較したグラフ。
【図8】本発明の血小板保存法による血小板の浸透圧シ
ョック回復率測定結果を従来例と比較したグラフ。
【図9】本発明の血小板保存法による血小板のADP刺
激による凝集率測定結果を従来例と比較したグラフ。
【図10】本発明の血小板保存法による血小板のコラ−
ゲン単独刺激による凝集率測定結果を従来例と比較した
グラフ。
【図11】本発明の血小板保存法による血小板のADP
とコラ−ゲン共存刺激による凝集率測定結果を従来例と
比較したグラフ。
【符号の説明】
1 外袋 2 内袋 3 外袋操作口 5 内袋保護メッシュ 6 内袋操作口
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 一戸 和則 神奈川県相模原市横山台1丁目26番地7号 川澄化学工業株式会社 相模原事業所内 (72)発明者 太田 哲夫 神奈川県相模原市横山台1丁目26番地7号 川澄化学工業株式会社 相模原事業所内 (72)発明者 丸山 鴨 神奈川県相模原市横山台1丁目26番地7号 川澄化学工業株式会社 相模原事業所内

Claims (2)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項1】 血小板を液状保存する方法であって、血
    小板と、重炭酸ナトリウム及びグルコースを含み、かつ
    浸透圧調整剤を添加した血小板保存液とを半透膜を介し
    て接触させ、血小板と血小板保存液の浸透圧差を平衡さ
    せた状態で血小板と血小板保存液に振盪を付与しながら
    血小板を保存することを特徴とする血小板保存方法。
  2. 【請求項2】 血小板を液状保存するための器具であっ
    て、血小板を保存する半透膜の内袋と、この内袋を内挿
    する外袋と、前記内袋と外袋の空間部に収容される血小
    板保存液とを有し、前記血小板保存液は重炭酸ナトリウ
    ム及びグルコースを含んでおり、かつ前記内袋内の血小
    板との浸透圧差を平衡させるための浸透圧調整剤を添加
    したものであることを特徴とする血小板保存器具。
JP3240245A 1991-08-28 1991-08-28 血小板保存方法及び血小板保存器具 Expired - Fee Related JPH0698178B2 (ja)

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