JPH07155190A - 黄色色素の製造方法 - Google Patents

黄色色素の製造方法

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JPH07155190A
JPH07155190A JP5307737A JP30773793A JPH07155190A JP H07155190 A JPH07155190 A JP H07155190A JP 5307737 A JP5307737 A JP 5307737A JP 30773793 A JP30773793 A JP 30773793A JP H07155190 A JPH07155190 A JP H07155190A
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JP
Japan
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medium
culture
callus
lactuca
yellow pigment
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Pending
Application number
JP5307737A
Other languages
English (en)
Inventor
Yasuki Honda
泰揮 本多
Yusuke Shibuya
祐輔 渋谷
Yorio Sugimura
順夫 杉村
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Kao Corp
Original Assignee
Kao Corp
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Filing date
Publication date
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Pending legal-status Critical Current

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  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

(57)【要約】 【構成】 ラクチュカ属に属する植物を組織培養し、得
られた培養物から黄色色素を採取することを特徴とする
黄色色素の製造方法。 【効果】 この方法によれば食品、化粧品等に用いるこ
とのできる安全性の高い黄色色素が、気候条件に左右さ
れず、短期間に大量に得られる。

Description

【発明の詳細な説明】
【0001】
【産業上の利用分野】本発明は天然色素の製造方法、詳
しくは植物組織培養による天然色素の製造方法に関す
る。
【0002】
【従来の技術】食品や化粧品等の人体に直接触れる製品
の着色に用いられる色素は、その安全性という観点から
使用し得る種類が制限されており、最近では合成着色料
の使用が制限される傾向にある。そのため人体に安全で
あると考えられる天然色素の開発が急がれている。この
ような天然色素は動・植物から抽出して得られるため、
その量は原料となる動・植物組織に依存する。したがっ
て気候条件や社会的影響を受けやすく生産が一定しない
という欠点がある。また一般に色素は動・植物中に微量
に存在するにすぎないため、これを得るには大量の原料
と大規模な装置が必要となる。
【0003】これに対し、近年、植物の組織培養技術を
用いることにより、天然色素を効率よく得る方法が試み
られている。例えば赤色色素については特開昭50−2
4494号公報、特開昭61−166396号公報な
ど、青色色素については特開昭61−260887号公
報、特開昭63−42689号公報など、黄色色素につ
いては特開昭62−257384号公報などが挙げられ
る。
【0004】
【発明が解決しようとする課題】しかしながら、従来用
いられている色素生産植物は、一般に人体に摂取されて
いる植物ではなく、その植物の生産する色素は天然色素
とはいえ、安全性の点から未だ充分とは言い難い。従っ
て、本発明の目的は、食用として広く用いられている植
物の組織培養により、効率よく黄色天然色素を得る方法
を提供することにある。
【0005】
【課題を解決するための手段】上記目的を達成するた
め、本発明者らは、鋭意研究を行った結果、植物資源と
してキク科の食用の植物であるラクチュカ属に属する植
物を採用し、組織培養したところ、原料植物自体にはほ
とんど黄色が観察されないにもかかわらず、多量の黄色
色素が生産されることを見出し、本発明を完成するに至
った。
【0006】すなわち、本発明はラクチュカ属に属する
植物を組織培養し、得られた培養物から黄色色素を採取
することを特徴とする黄色色素の製造方法に係るもので
ある。
【0007】本発明製造方法に用いられるラクチュカ属
に属する植物としては、例えばラクチュカ アングスタ
ーナ(Lactuca angustana)及びラク
チュカ サティーバ(Lactuca sativa)
から選ばれるものが挙げられる。具体的にはチシャ(L
actuca sativa L.)、カキチシャ(L
actuca angustana hort.)、タ
マチシャ(Lactuca sativa var.c
apitata L.)、タチチシャ(Lactuca
sativa var.longifolia La
m.)、チリメンチシャ(Lactuca sativ
a var.crispa L.)が挙げられ、このう
ちチリメンチシャが特に好ましい。
【0008】本発明においては、かかるラクチュカ属に
属する植物組織から誘導されるカルスを培地で培養し、
その培養物から黄色色素を採取するのが好ましい。従っ
て、まず、ラクチュカ属に属する植物組織からカルスを
誘導する。
【0009】カルス誘導に用いる植物組織は、葉、茎、
根などの植物体の一部及び無菌的に発芽させた幼植物の
子葉、胚軸、根などのうちいずれを用いてもよい。また
使用される培地はなんら格別である必要はなく、植物の
組織培養に通常に用いられる培地でよい。例えばMur
ashige−Skoogの培地、Linsmaier
−Skoogの培地、Gamborgの培地、Whit
eの培地、Tuleekeの培地、Nitsch &
Nitschの培地及びこれらの改変培地などが用いら
れうる。カルス誘導をより促進させるために、必要に応
じて植物ホルモンが添加される。植物ホルモンとして
は、例えば、2,4−ジクロロフェノキシ酢酸(2,4
−D)、α−ナフチル酢酸(NAA)、インドール酢酸
(IAA)、インドール酪酸(IBA)等のオーキシン
類;フルフリルアミノプリン(カイネチン)、ベンジル
アデニン(BA)、イソペンテニルアミノプリン(2i
P)等のサイトカイニン類;ジベレリン類(GA3)等
が挙げられる。その中でもオーキシン類単独、又はオー
キシン類とサイトカイニン類を組み合せた場合に良好な
結果が得られる。カルス誘導に必要な植物ホルモン濃度
はオーキシン類は1×10-4M〜1×10-7M、サイト
カイニン類は5×10-5M〜5×10-7Mが好ましい。
【0010】カルス誘導培地には上記の基本培地と植物
ホルモンの他に炭素源として糖が加えられる。糖として
は、たとえばグルコース、フルクトース、マンノース、
キシロース、アラビノース、ラムノース、フコース、サ
ッカロース等が挙げられ、これらのうち1種又は2種以
上を用いることができる。その濃度は1〜6重量%が好
ましい。誘導されたカルスは上記のカルス誘導培地で同
じ形態を維持したまま培養を続けることができる。
【0011】黄色色素を製造するためには、カルスを寒
天培地等の固体培地又は液体培地で培養するが、就中、
液体培地で培養するのが好ましい。基本培地としてはカ
ルス誘導培地と同じものすなわちMurashige−
Skoogの培地、Linsmaier−Skoogの
培地、Gamborgの培地、Whiteの培地、Tu
leekeの培地、Nitsch & Nitschの
培地及びこれらの改変培地などが用いられうる。上記培
地に植物ホルモンを添加することにより黄色色素が効率
よく得られる。植物ホルモンとしては例えば、2,4−
D、NAA、IAA、IBA等のオーキシン類;カイネ
チン、BA、2iP等のサイトカイニン類;GA3等の
ジベレリン類等が挙げられる。その中でもオーキシン類
単独、若しくはオーキシン類とサイトカイニン類を組み
合せた場合に良好な結果が得られる。その濃度は用いる
植物ホルモンによってやや異なるが基本的にオーキシン
類は1×10-4M〜1×10-7M、サイトカイニン類は
5×10-5M〜5×10-7M、ジベレリン類は5×10
-5M〜1×10-7Mが好ましい。色素生産用培地は上記
の基本培地と植物ホルモンの他に炭素源として糖が加え
られる。糖としては、たとえばグルコース、フルクトー
ス、マンノース、キシロース、アラビノース、ラムノー
ス、フコース、サッカロース等が挙げられる。色素生産
は添加する炭素源の種類により強く影響されるものでは
なく、通常これらのうち1種又は2種以上を用いること
ができる。その濃度は1〜6重量%が好ましい。培養法
は特に制限されないが、通常20〜30℃、暗所で10
〜30日間振とう培養を行うのが好ましい。
【0012】このようにして培養された細胞は黄色色素
を生産するようになる。生産された黄色色素は細胞内部
から培地中へも生産されるようになる。そのため得られ
た培養物から黄色色素を採取するには、例えば培養物か
ら遠心分離又は濾過等によりカルスを集め、有機溶剤等
により抽出する方法、カルスを新たな培地に移した後培
地から色素を抽出する方法、培養物全てを有機溶剤で抽
出する方法等が可能である。黄色色素を抽出するための
有機溶剤としては、エーテル、ヘキサン、酢酸エチル等
の通常の有機溶剤が用いられうる。液体培地により培養
を行った場合には、細胞を濾別した後、培養液から直接
有機溶剤を用いて色素を抽出することができる。そのた
め液体培地から濾別された細胞は引き続き培養に供する
ことができるので、連続して色素生産をすることが可能
である。
【0013】
【発明の効果】このように黄色色素を含有する細胞を増
殖し、長期に渡って継代培養しても細胞形態や増殖率、
色素含量は変化しない。そのため気候条件に左右され
ず、短期間に大量の黄色色素を得ることができる。ま
た、暗所で培養された細胞により得られた色素は、クロ
ロプラスト等の緑色色素が混入することが無く均質にな
りうる。本黄色色素は食品、化粧品等の着色料として、
例えばジュース、ワイン等の飲料、羊かん等の菓子、ゼ
リー等の冷菓、口紅、アイシャドウ等のメイクアップ用
化粧品等に用いることができる。
【0014】
【実施例】次に実施例を挙げて本発明を更に詳細に説明
するが、本発明はこれに限定されるものではない。
【0015】実施例1 (a)カルスの誘導:チリメンチシャ(Lactuca
sativa var.crispa L.)の種子
を70%エタノール溶液で1分間滅菌し、更に1%次亜
塩素酸ナトリウム溶液で10分間滅菌した後、滅菌水で
洗浄した。滅菌処理された種子は、発芽用培地上に播種
した。発芽用培地としては植物ホルモンを含まないLi
nsmaier−Skoogの培地に0.8%となるよ
うに寒天を加えた固形培地とし、炭素源としては3%シ
ュークロースを添加した。この培地を0.1NのKOH
でpH5.7に調整し、オートクレーブによる滅菌を行い
用いた。25℃、暗所で無菌的に発芽させ、発芽後3日
目に無菌幼植物を採取し、胚軸部分を切取りカルス誘導
用培地に置床した。カルス誘導培地は、0.8%寒天を
含むLinsmaier−Skoogの培地を用いた。
植物ホルモンとしては、オーキシンとして10-6M N
AA、サイトカイニンとして10-6M BAを添加し
た。炭素源としては3%シュークロースを添加した。こ
の培地を0.1NのKOHでpH5.7に調整した後、前
述の方法で滅菌した。培養は25℃、暗所で行った。約
30日間の培養の後、外殖片からやや黄色を帯びたカル
スが誘導された。
【0016】(b)カルスの継代培養:(a)において
誘導されたカルスは誘導用培地と同一の培地を用いて同
一条件下で培養され約30日おきに新しい培地に移植さ
れた。 (c)生産培養:(b)において10代以上継代培養さ
れたカルスについて、色素生産用液体培地を用いて振と
う培養を行った。色素生産用培地としては、Linsm
aier−Skoogの培地に、植物ホルモンをオーキ
シンとして10 -5M NAA、サイトカイニンとして1
0-6M BAを添加した。炭素源としては3%シューク
ロースを添加した。この培地を0.1NのKOHでpH
5.7に調整した後、前述の方法で滅菌して用いた。培
養は500ml容三角フラスコに250mlの培地を入れ、
カルスを新鮮重で5g摂取して、25℃、暗所、100
rpmで30日間行った。培養開始後、数日のうちにカル
スは濃い黄色となり増殖を続けた。この際培地も黄色を
帯び培養を続けるに伴い黄色も濃くなった。
【0017】(d)色素の抽出:(c)において30日
間培養を行った後、培養物を濾別し、新鮮重で約50g
のカルスを得た。このカルスは酢酸エチル200mlを用
いて抽出を行った。更に同一の抽出操作を2回繰り返
し、得られた抽出液を合せ、ロータリーエバポレーター
で濃縮乾固した。得られた黄色色素は約0.1gであっ
た。
【0018】(e)色素の精製:(d)において得られ
た黄色色素抽出物0.1gをシリカゲルカラムクロマト
グラフィによりヘキサン、酢酸エチルを用いて溶出し、
分画精製を行い、0.002gの鮮やかな黄橙色の結晶
が得られた。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 庁内整理番号 FI 技術表示箇所 C12R 1:91)

Claims (2)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項1】 ラクチュカ属に属する植物を組織培養
    し、得られた培養物から黄色色素を採取することを特徴
    とする黄色色素の製造方法。
  2. 【請求項2】 ラクチュカ属に属する植物が、ラクチュ
    カ アングスタナ(Lactuca angustan
    a)及びラクチュカ サティーバ(Lactuca s
    ativa)から選ばれるものである請求項1記載の黄
    色色素の製造方法。
JP5307737A 1993-12-08 1993-12-08 黄色色素の製造方法 Pending JPH07155190A (ja)

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JP5307737A JPH07155190A (ja) 1993-12-08 1993-12-08 黄色色素の製造方法

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JP5307737A JPH07155190A (ja) 1993-12-08 1993-12-08 黄色色素の製造方法

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