JPH0718865B2 - 水性液体のイオン強度又は比重の測定法及びその試薬 - Google Patents
水性液体のイオン強度又は比重の測定法及びその試薬Info
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Description
定法及びその方法を実施するための試薬である。
比重計、尿比重計、ピクノメータ及び屈折計による測定
が知られている。これらの方法は、十分に正確ではある
が、高価な器具による出費が要求され、かつ器具の必要
な掃除と目盛調整によつて時間と費用の問題を含む。
測定は比較的簡単である。試験片は、適当な試薬を含む
試験領域を有する。この測定は試験片を被検尿中に浸漬
し、試験領域の変色を観察することによつて簡単に行わ
れる。試験片は、更に他の尿検査、例えば、相応した多
くの相互に分離された試験領域をもつユニバーサル試験
片中でグルコース、リンパ球、血液等の検査と組合せる
ことのできる利点を提供する。従つて尿の比重測定は、
時間をかけることなく1工程でこれらのパラメーターの
測定と共に行われる。評価は、器具を使つても実施でき
る。
第4,015,462号明細書に記載されている。担体マトリツ
クスは、液体を含有し、滲透圧により破壊されうるマイ
クロカプセルを具えており、この様なマトリツクスは低
いオスモル濃度の試験溶液に接すると半透性の壁膜材料
から成るマイクロカプセルの静水力学的圧力が上昇す
る。このことはマイクロカプセルを破壊させる。このマ
イクロカプセルの破裂及びそれに由来する液体中に溶け
た色素の放出がマトリツクスを変色させる。色の強度
は、試料液のオスモル濃度もしくは比重に比例する。こ
の方法の欠点は、マイクロカプセルを備えた担体のマト
リツクスの使用にある。それというのも、これの製造
は、正確性が必要であるために非常に困難であるからで
ある。
法は、米国特許(US−A)第4,318,709号及びこれに対
応する西ドイツ国特許(DE−A)第29 44 980号明細
書に記載されている。これらにおいては試料は弱酸性又
は弱塩基性の少くとも50%中和された高分子電解質ポリ
マー及び指示薬を含有する試薬と混合する。これの基礎
となる原理は、水溶液の比重とイオン高度の比例性にあ
る。
質ポリマーと称されている。その例として、ポリアクリ
ル酸もしくはポリビニールアミンが挙げられている。
機酸によつて中和された弱塩基性の高分子電解質ポリマ
ー及び指示薬を含む試薬が記載されている。
くとも1個のカルボキル基がアンモニウム塩の形で存在
する弱酸性高分子電解質ポリマー及び指示薬を含有する
試薬が開示されている。
ン強度又は比重測定試薬が記載されている。これは、弱
酸性又は強塩基性の高分子電解質ポリマーと並んで、少
くとも6.5のpH価を保証する緩衝剤並びにpH指示薬を含
有している。
法は、しかしながらpHの急激な変化によつて一度生じた
呈色が時間とともに変色する欠点を有する。すなわち1
分後に読みとる比重の値が2分又は5分後に読みとる値
と著しく異なる結果をもたらす。
任意の患者達によって該試験が実施され、かつ試験片の
メーカーによつて設定された時間通りに評価が行われな
い場合には、健康状態が重大な誤つた解釈に導かれる可
能性がある。
果を提供するイオン強度又は比重を測定する方法の必要
性が生じた。
ても迅速かつ信頼性のある方法を提供することであつ
た。
のpH変化を測定し、かつ評価することによる水性液体の
イオン強度及び比重を測定する本発明による方法で解決
され、これは、該試薬がpH−指示薬を含有し、並びに少
くとも1種のpH−緩衝剤を含むが、高分子電解質ポリマ
ーを含まないか又は少くとも1種のpH−緩衝剤及び/又
は少くとも1種の錯体形成剤を含むことを特徴とする。
比重が本発明の方法で測定される水性液体は、本質的に
は水からなつている。この液体の他の成分は溶解した及
び/又は溶解していない成分である。溶解した成分は、
イオン性及び非イオン性物質である。溶解していない成
分は難溶性化学物質であつてよいが、他の成分例えば生
体物質の例えば細胞であつてもよい。この液体は、任意
のpH価を有していてよい。3〜13有利に4〜9のpH価を
もつ液体を検査するのが有利である。他のpH価をもつ液
体でもそれらのpH価が酸又は塩基の添加によつて定量の
前又はその間にこれらの範囲にもたらされる場合には、
該液体を検査することも可能である。
95〜2有利に0.99〜1.2の値の範囲の比重に対して使用
することができる。
は、体液例えば汗や尿に対して特に好適である。殊に尿
の検査に好適であることが立証されている。即ち、この
場合、1.00〜1.04の価の尿の比重も4.5〜8.0の尿のpH価
も、通例本発明の方法にとつて有利な範囲に存在するの
で、つまり何等の予備的な操作を加えることなく尿試料
に試薬を加えることができる。
又は少くとも1種の錯体形成を含む。pH緩衝剤は当業者
に公知の物質である。pH緩衝剤は、弱酸とこの酸の実質
的に完全に解離された塩との混合物もしくは弱塩基との
この塩基の実質的に完全に解離された塩との混合物であ
る。このことは、例えばレンプのヘミー・レキシコン
(Rmpps Chemie Lexikon)、第8版、5巻に緩衝剤
(Puffer)の標題のもとに明らかにされている。そこに
は加えられた酸及び塩基に対するこれら緩衝剤の溶液の
作用も記載されており;緩衝液のpH価は、酸又は塩基の
添加に際しても殆ど変化しない。
定に際して使用するための試薬として水溶液中のpH価が
4及び12の間、有利には5.5と10の間にあるpH−緩衝剤
が好適である。これらの中で、できるだけ小さい活量係
数(Aktivittkoeffizienten)を有する緩衝剤が有利
である。この活量係数は、高い有効荷電を有するイオン
から構成されている緩衝剤において特に小さい。水溶液
中におけるイオン及び緩衝剤の活量係数は、公知である
か又公知の方法で簡単に測定できる〔F.Seel,Grundlage
nder analylischen Chemie,verlag Chemie,Weinheim;Br
oschre“Buffer"der Firma Calbiochem.1985、12〜15
頁〕。緩衝剤でそれの0.1Mの濃度における活量係数が1
より小さく、かつ有利には0.9より小さい緩衝剤が特に
有利であることが証明されている。
ンを含有する緩衝液である:燐酸塩、硼酸塩、炭酸塩、
クエン酸塩、ジエチルマロン酸塩、ニトリロ−トリス−
メチレン燐酸塩。同様に両性イオン性の緩衝剤例えばグ
リシン緩衝剤又は2−(N−モノホリノ)エタンスルホ
ン酸(MES)も好適である。
ながら反応する化学物質である。イオンとの錯体形成の
際に少くとも1個のプロトンを遊離する錯体形成剤が特
に有利である。
クリプタンデン、ポダンデン及び弱酸又は弱塩基性の基
例えばカルボキシル又はアミノ基を有する多座配位子
(Mehrzhninge Liganden)である。1分子当り最高1
個のイオンと錯結合できる錯体形成剤が有利である。イ
オン強度もしくは比重を特に正確に把握するためには、
この錯体形成剤は、液体中に存在するなるべくすべての
イオン例えば尿中に屡々存在する陽イオン例えばアルカ
リ及びアルカリ土類金属イオンと特に錯体を形成するこ
とのできる状態になければならない。本発明の方法でpH
価の測定のためにpH指示薬を使用する場合には、無色の
錯体形成剤の使用が有利である。従つて錯体形成剤とし
ては、例えば次の化合物が好適である。
ザ−15−クラウン−5、ヘキササイクレン−三硫酸塩、
クリプトフイツクス222 (Kryptofix 222 )、クリプ
トフイツクス221 、クリプトフイツクス211 、 −多座配位子: エチレンジアミン四醋酸、ニトリロ三醋酸、ジエチレン
トリアミン五醋酸、ジ−2−アミノエトキシ−エタン四
醋酸、ヘキサメチレンジニトリロ四醋酸、ニトリロ二醋
酸、N−メチルアミノ二醋酸。
のイオン強度又は、比重の測定のために、主として1種
以上の錯体形成剤からなる試薬を用いてこの方法を実施
するのが特に有利である。この場合に、該試薬は、かな
らずしもpH緩衝剤を含む必要はない。
これらの塩類に含有する液体の比重を測定すべき場合に
は、少くとも1種のpH緩衝剤を含む試薬が有利である。
この場合は、その液体に含まれうる非イオン性化合物の
比重に体する貢献も考慮される。これに加えて、該試薬
は1種以上の錯体形成剤を含有していてもよい。尿の検
査のためには、試料に対して等量の水で溶かして有利5.
5より大きいpH価を有する試薬組成物を選択すべきであ
る。
るのが好都合である。従つて緩衝剤として、pHの緩衝作
用をこえてイオン錯体形成作用をも有する物質を選択す
ることも非常に有利である。このような物質には、例え
ばニトリロトリス(メチレンホスホン酸)及びペンタナ
トリウム三燐酸(Na5P3O10)である。
と同量の水中に溶かした後のpH価が被検液体のpH値とほ
ぼ同一か又はそれよりも大きくなる陽に選択するのが有
利である。最適のpH価は、専門家により直ちに、僅かな
実験によつて調べることができる。
単に成就することができる。次いで、含浸液のpH価を、
含浸の前に適当に調節する。例えば尿の比重測定用の試
薬においては、6〜11のpH価、有利には7〜9に調節す
る。
の量をこれらと試験液に混合した量に対する)は、試料
液中の試薬のこれら物質の最終濃度が合計0.005〜1.0mo
l/有利には0.005〜0.2mol/になる様に選択する。試
薬の存在する形は、測定にとつて本質的に重要ではな
い。例えばこの試薬は粉末、錠剤又は溶液の形で使用す
ることができる。
収性担体上に被覆物として施与するのが有利である。有
利な担体は、多孔性坦体材料又はフリースである。フリ
ースとは、線維から成る紙状の坦体と解する。試薬で含
浸された吸収性担体を使用するのが有利であり、この
際、吸収性坦体を試薬溶液で含浸し、乾燥させる。こう
して、全表面、有利には内面上にも試薬被膜が生じる。
に例えば試験片上に直接施与されていてもよい。更にこ
の試薬は通常の添加剤例えば安定剤、架橋剤又は膨張剤
を含有していてもよい。
形を得るのに有利な方法で行なう。試薬が吸収可能な坦
体上に被覆物として施与される場合には、単に、坦体を
液体と接触するだけでよい。この場合、液体は坦体中に
分散し、試薬を放出する。この溶解の経過は、本発明方
法の試薬によつて特に迅速かつ完全に進行する。それと
いうのも、この試薬は、易溶性の低分子物質であるから
である。
イオン強度又は比重に依存するpH価が生じる。
方法、例えばpH電極を用いて行うこともできる。pH−指
示薬を用いる測定が特に有利である。それというのもこ
の測定は、眼によつても付加的な器具を用いることもな
く実施できるからである。
すpH−指示薬を使用することが前提である。このような
pH−指示薬及びその色調変化域は公知である。尿のイオ
ン強度及び比重の測定のためには、4〜12のpK価を有す
るpH−指示薬が好適である。その中でも、ブロムチモル
ブルー又はチモルブルーが特別に好適であることが証明
されている。
かじめ加えておいてもよいし又は試薬と液体との混合後
又はその間に加えることもできる。加えた指示薬の量
は、色変化が明瞭に測定される様な量にする。試薬と試
料液体との混合物中の指示薬の有利な濃度は、0.1〜100
mmol/有利には1〜50mmol/である。
例えば2つの互に不溶の又は僅かに可溶の液相中で実施
することができ、その際、試薬の少くとも一部が非水相
中に存在するが、次の様な場合、即ち試薬と液体もしく
はその成分との反応の間にすべての試薬特にpH緩衝剤も
しくは錯体形成剤及び場合によつてはpH−指示薬が1相
中、有利には水相中に溶解している場合が有利である。
この場合には反応は特に迅速に進行する。
ができる。例えば、測定されたpH価に該当イオン強度又
は比重を、検量曲線を用いて割当てることができる。夫
々異なるが既知のイオン強度もしくは異なるが既知の比
重を有する比較可能な溶液に対するpHを測定することに
よつて、検量曲線を得る。pH−指示薬を用いる眼でpH測
定を行う際には、発色を、例えば、1連の既知のイオン
強度又は比重の液体に対して得られた色、例えばカラー
スケール(Farbskala)で得られ又把握された色と比較
することもできる。
いうちに行うことができる。本発明の方法は、測定され
たpH価が混合後5分間にわたり常に一定である利点を有
する。このことは、評価に比較的長い時間が要求される
か、又は最初の評価の直後に確認のために評価をもう1
度繰り返さなければならない際に重要である。
上で測定する方法である。この試験片は、試薬の溶液に
よつて含浸され乾燥されたフリースから成る試験領域を
有する。試薬としては、pH緩衝剤、例えば水に溶かす場
合に8のpH価を有する燐酸緩衝剤、錯体形成剤、例えば
ニトリロ三醋酸及びpH−指示薬例えばブロムチモルブル
ーからなる混合物を使用する。試験領域を被検尿と接触
させる、例えば試験片を尿中に浸漬し、試験領域が濡れ
たら直ちに取り出す。試験領域に認められる色を、試験
片に添付の見本の色と比較する。その際、比重に関する
価は、見本の個々の色に関連している。測定すべき比重
は一致した色をもつ見本に関連している価を有する。
の試験片の製造 セルロースフリース(タイプ23SL、Schleicher−Schl
l社)を、次の組成の水溶液で含浸した: ニトリロ−トリス(メチレンホスホン酸):120mM ブロムチモルブルー:0.15重量% この溶液を、3.5Nのテトラメチルアルモニウムヒドロオ
キシド水溶液でpH価を8に調整した。このフリースを乾
燥させ、5×5mmの大きさに切断した。この様にして製
造した試験領域をプラスチツク片(100×5mm)上にはり
つけた。
chll社)を次の組成の水溶液で含浸した。
乾燥させ、5×5mmの大きさに切断した。この様にして
製造した試験領域をプラスチツク片(100×5mm)上には
りつけた。
次の組成の水溶液で含浸した。
た。この様にして製造した試験領域をプラスチツク片
(100×5mm)上にはりつけた。
chll社)を次の組成の水溶液で含浸した: 燐酸2水素ナトリウム 60mM 2−(N−モルホリノエタンスルホン酸(MES) 40mM
ビスアミノエチルグリコールエーテルN,N,N′,N′4醋
酸 0.75重量% ブロムチモルブルー 0.15重量% この溶液を10N苛性ソーダでpH価8に調整した。
た。その様にして製造した試験領域をプラスチツク片
(100×5mm)上にはりつけた。
次の組成の溶液で含浸した: 燐酸2水素ナトリウム 30mM ニトリロ3醋酸 0.2重量% ブロムチモルブルー 0.1重量% 溶液を10N苛性ソーダでpH価8に調整した。
の様にして製造した試験領域をプラスチツク片(100×5
mm)上にはりつけた。
Schll社)を次の組成の水溶液で含浸した: エチレンジアミン4醋酸 0.2重量% 燐酸2水素ナトリウム 30mM ブロムチモルブルー 0.1重量% この溶液を10N苛性ソーダでpH価8に調整した。
た。この様にして製造した試験領域をプラスチツク片
(100×5mm)上にはりつけた。
Schll社)を次の組成の水溶液で含浸した: ジエチルマロン酸 50mM ニトリロ三醋酸 0.5重量% ブロムチモルブルー 0.15重量% この溶液を3.5Nのテトラメチルアムモニウムヒドロオキ
シド溶液でpH価を8に調整した。
た。この様にして製造した試験領域をプラスチツク片
(100×5mm)上にはりつけた。
秒、1分、2分もしくは5分後に色を尿に関して既知の
比重で得たカラースケールの色と比較した。比重に関す
る上記の測定時間に得られた価は同じであつた。該比重
はピクノメータによつて測定された尿の比重と一致し
た。
Claims (7)
- 【請求項1】液体を適当な試薬と混合し、該液体のpH価
を測定及び評価することにより水性液体のイオン強度及
び比重を測定する方法において、該試薬は、 (i)少なくとも1種のpH−指示薬及び少なくとも1種
のpH−緩衝物質(但し高分子電解質ポリマーを含まな
い)、 (ii)少なくとも1種のpH−指示薬及び少なくとも1種
の錯体形成剤、又は (iii)少なくとも1種のpH−指示薬、少なくとも1種
の錯体形成剤及び少なくとも1種のpH−緩衝物質(但し
高分子電解物質を含まない)、 を含有することを特徴とする、水性液体のイオン強度又
は比重を測定する方法。 - 【請求項2】該試薬を吸収可能の担体に含浸することを
特徴とする、請求項1記載の方法。 - 【請求項3】pH−緩衝物質は0.1Mの濃度で、1より小さ
い活量係数を有することを特徴とする、請求項1又は2
に記載の方法。 - 【請求項4】水溶液のイオン強度又は比重を測定する試
薬において、これは (i)少なくとも1種のpH−指示薬及び少なくとも1種
のpH−緩衝物質(但し高分子電解質ポリマーを含まな
い)、 (ii)少なくとも1種のpH−指示薬及び少なくとも1種
の錯体形成剤、又は (iii)少なくとも1種のpH−指示薬、少なくとも1種
の錯体形成剤及び少なくとも1種のpH−緩衝物質(但し
高分子電解物質を含まない)、 を含有することを特徴とする、水性液体のイオン強度又
は比重を測定する試薬。 - 【請求項5】吸収可能の担体に含浸されていることを特
徴とする、請求項4記載の試薬。 - 【請求項6】pH−緩衝物質は、0.1Mの濃度で、1より小
さい活量係数を有することを特徴とする、請求項4又は
5に記載の試薬。 - 【請求項7】プラスチック片とその上に固定され、試薬
で含浸された吸収性担体からなる水性液体のイオン強度
又は比重を測定する試験片において、試薬として請求項
4記載の試薬を使用していることを特徴とする試験片。
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|---|---|---|---|
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| DE3823151.4 | 1988-07-08 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0266451A JPH0266451A (ja) | 1990-03-06 |
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Family Applications (1)
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|---|---|---|---|
| JP1174300A Expired - Lifetime JPH0718865B2 (ja) | 1988-07-08 | 1989-07-07 | 水性液体のイオン強度又は比重の測定法及びその試薬 |
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