JPH0722470B2 - 精油の製造方法 - Google Patents
精油の製造方法Info
- Publication number
- JPH0722470B2 JPH0722470B2 JP63053770A JP5377088A JPH0722470B2 JP H0722470 B2 JPH0722470 B2 JP H0722470B2 JP 63053770 A JP63053770 A JP 63053770A JP 5377088 A JP5377088 A JP 5377088A JP H0722470 B2 JPH0722470 B2 JP H0722470B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- essential oil
- adventitious
- medium
- adventitious buds
- plant
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Fats And Perfumes (AREA)
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は、植物の組織を培養し、分化誘導した不定芽か
ら精油成分を製造する方法に関する。
ら精油成分を製造する方法に関する。
精油は、植物体から圧搾、抽出等により得られる物質で
あって、化粧品、香料、食用フレーバー等の分野で広く
用いられている。そして、この精油は一般に栽培した植
物を原料として製造されている。
あって、化粧品、香料、食用フレーバー等の分野で広く
用いられている。そして、この精油は一般に栽培した植
物を原料として製造されている。
近年、植物の組織培養が比較的容易となり、この方法が
植物成分の製造手法として検討されている。そして、ペ
ラルゴニウム属、ゲラニウム属、ルタ属、ヴィオラ属、
メリッサ属、イリス属等の植物について、その不定芽か
ら精油を製造する方法が提案されている(特開昭59−21
3393号、特開昭60−71699号、特開昭60−248188号)。
しかし、アンテミス属に属する植物については、これま
で、全く報告がない。
植物成分の製造手法として検討されている。そして、ペ
ラルゴニウム属、ゲラニウム属、ルタ属、ヴィオラ属、
メリッサ属、イリス属等の植物について、その不定芽か
ら精油を製造する方法が提案されている(特開昭59−21
3393号、特開昭60−71699号、特開昭60−248188号)。
しかし、アンテミス属に属する植物については、これま
で、全く報告がない。
本発明者らは、従来の植物の栽培によるものに比べて気
象条件等の影響を受けず完全に制御された環境下で容易
かつ高収率で精油を製造する方法を開発すべく研究し、
本発明を完成するに至った。
象条件等の影響を受けず完全に制御された環境下で容易
かつ高収率で精油を製造する方法を開発すべく研究し、
本発明を完成するに至った。
〔課題を解決するための手段〕 本発明は、アンテミス(Anthemis)属に属する植物の組
織を培養し、培養物から不定芽を分化誘導せしめ、該不
定芽中に産生蓄積された精油成分を採取する精油の製造
方法である。そして、この不定芽としては増殖に最適な
植物ホルモンを含有する培地で継代培養し増殖したも
の、継代培養したものから選抜した精油高産生株が、加
えて該高産生株を液体培地で大量培養したものがそれぞ
れ使用される。さらに、本発明には、不定芽を継代培養
したものの中から、その形態による目視的選抜及びヘッ
ドスペースガスクロマトグラフィー法(以下HS−GC法と
いう)による選抜により精油高産生株を選抜する精油高
産生株の取得法が含まれる。
織を培養し、培養物から不定芽を分化誘導せしめ、該不
定芽中に産生蓄積された精油成分を採取する精油の製造
方法である。そして、この不定芽としては増殖に最適な
植物ホルモンを含有する培地で継代培養し増殖したも
の、継代培養したものから選抜した精油高産生株が、加
えて該高産生株を液体培地で大量培養したものがそれぞ
れ使用される。さらに、本発明には、不定芽を継代培養
したものの中から、その形態による目視的選抜及びヘッ
ドスペースガスクロマトグラフィー法(以下HS−GC法と
いう)による選抜により精油高産生株を選抜する精油高
産生株の取得法が含まれる。
以下に、本発明を詳しく述べる。
本発明においては、アンテミス属に属する植物に組織を
寒天培地中で培養し、培養物から不定芽を分化誘導し、
この不定芽を最適な植物ホルモンの存在下に継代培養し
て増殖させ、得られる不定芽の中から精油高産生株を選
抜し、この不定芽から精油を製造する。更に原料の不定
芽としては上記精油高産生株を液体培地中で大量培養し
たものを用いることができる。
寒天培地中で培養し、培養物から不定芽を分化誘導し、
この不定芽を最適な植物ホルモンの存在下に継代培養し
て増殖させ、得られる不定芽の中から精油高産生株を選
抜し、この不定芽から精油を製造する。更に原料の不定
芽としては上記精油高産生株を液体培地中で大量培養し
たものを用いることができる。
本発明で使用されるアンテミス属に属する植物としては
アンテミス・ノビリス(Anthemis nobolis),アンテミ
ス・チンクトリア(Anthemis tinctoria),アンテミス
・アルベンシス(Anthemis arvensis),アンテミス・
コチュラ(Anthemis cotula)が挙げられる。そして、
植物体としては葉、茎、根の断片のいずれでもが使用で
きる。植物の組織から不定芽を分化誘導する培地として
は、植物組織培養において通常使用されるもの、例え
ば、リンスマイヤー・スクーグ(LS)培地、ムラシゲ・
スクーグ培地、B5培地、ニッチ&ニッチ培地、ホワイト
培地等が使用されるが、好ましくはLS培地が用いられ
る。そして、実際に培養するに際しては、これら基本培
地に糖類、ビタミン類及び植物ホルモンを添加して用い
る。植物ホルモンとしては、例えばインドールー3−酢
酸(IAA)、インドールー3−酪酸(IBA)、α−ナフタ
レン酢酸(NAA)、2,4−ジクロロフェキシ酢酸(2,4−
D)等のオーキシン類、カイネチン(Kn)、6−ベンジ
ルアデニン(6−BA)等のサイトカイニン類等が挙げら
れ、これらオーキシンとサイトカイニンを組み合せて使
用される。特に好ましい組み合せはオーキシン:サイト
カイニンが10-6M:10-6Mである。この培地中で明下20〜
30℃、好ましくは25℃で2〜3週間培養することにより
カルス化し、不定芽及び不定根の誘導が起る。光の条件
は2000〜3000ルックスの光照射を用いる。
アンテミス・ノビリス(Anthemis nobolis),アンテミ
ス・チンクトリア(Anthemis tinctoria),アンテミス
・アルベンシス(Anthemis arvensis),アンテミス・
コチュラ(Anthemis cotula)が挙げられる。そして、
植物体としては葉、茎、根の断片のいずれでもが使用で
きる。植物の組織から不定芽を分化誘導する培地として
は、植物組織培養において通常使用されるもの、例え
ば、リンスマイヤー・スクーグ(LS)培地、ムラシゲ・
スクーグ培地、B5培地、ニッチ&ニッチ培地、ホワイト
培地等が使用されるが、好ましくはLS培地が用いられ
る。そして、実際に培養するに際しては、これら基本培
地に糖類、ビタミン類及び植物ホルモンを添加して用い
る。植物ホルモンとしては、例えばインドールー3−酢
酸(IAA)、インドールー3−酪酸(IBA)、α−ナフタ
レン酢酸(NAA)、2,4−ジクロロフェキシ酢酸(2,4−
D)等のオーキシン類、カイネチン(Kn)、6−ベンジ
ルアデニン(6−BA)等のサイトカイニン類等が挙げら
れ、これらオーキシンとサイトカイニンを組み合せて使
用される。特に好ましい組み合せはオーキシン:サイト
カイニンが10-6M:10-6Mである。この培地中で明下20〜
30℃、好ましくは25℃で2〜3週間培養することにより
カルス化し、不定芽及び不定根の誘導が起る。光の条件
は2000〜3000ルックスの光照射を用いる。
この不定芽は新芽を含む葉2〜3枚の小さい株に分けて
継代培養して増殖を行うが、そのときの培地としては上
記基本培地が用いられる。そして、その際使用する植物
ホルモンの組成により異なった形態(葉の形、色等)の
不定芽が得られる。即ち、植物ホルモンとしてIBA10
-6M,BA10-6M;IBA10-5M,BA10-6M;NAA10-5M,BA10-6Mなど
を用いたところ、その不定芽の形態が3種類に分類され
た。
継代培養して増殖を行うが、そのときの培地としては上
記基本培地が用いられる。そして、その際使用する植物
ホルモンの組成により異なった形態(葉の形、色等)の
不定芽が得られる。即ち、植物ホルモンとしてIBA10
-6M,BA10-6M;IBA10-5M,BA10-6M;NAA10-5M,BA10-6Mなど
を用いたところ、その不定芽の形態が3種類に分類され
た。
母植物に近い形態のタイプI,葉の分岐があまり無いタイ
プII,葉と茎の区別がつかないタイプIIIの3種類であ
る。その形態的分類では、第1表に示す通りタイプIで
のみ良好な精油成分が産生した。したがって、タイプI
の不定芽の増殖に好適な植物ホルモンは、例えばIBA:10
-6MとBA:10-6〜10-7Mとを組み合わせたものである。
プII,葉と茎の区別がつかないタイプIIIの3種類であ
る。その形態的分類では、第1表に示す通りタイプIで
のみ良好な精油成分が産生した。したがって、タイプI
の不定芽の増殖に好適な植物ホルモンは、例えばIBA:10
-6MとBA:10-6〜10-7Mとを組み合わせたものである。
不定芽を増殖して得られる株の中から精油の高産生株を
選抜するためには、不定芽の形態及び精油成分をHS−GC
法(恩田宣彦:ぶんせき、66,12(1987))にかけて行
った。従来、精油成分の分析には蒸留や溶媒抽出等の煩
雑な操作及び多量の試料が必要であるが、このHS−GC法
では少量の試料で簡単にかつ短時間で分析が可能であ
る。
選抜するためには、不定芽の形態及び精油成分をHS−GC
法(恩田宣彦:ぶんせき、66,12(1987))にかけて行
った。従来、精油成分の分析には蒸留や溶媒抽出等の煩
雑な操作及び多量の試料が必要であるが、このHS−GC法
では少量の試料で簡単にかつ短時間で分析が可能であ
る。
この精油高産生株は、液体培地においても大量培養する
ことができる。この液体培地は次の組成から成る。
ことができる。この液体培地は次の組成から成る。
(液体培地組成) (1)基本培地 LS培地の濃度の1〜1/2培 (2)ショ糖 3% (3)ホルモン IBA 10-6M BA 10-7M (4)窒素源 アンモニア熊窒素/硝酸熊 窒素=1/5〜1/11 培養は、25℃で7〜10日間明所(2000〜3000ルックス)
下で行う。
下で行う。
このようにして得られた不定芽はアンテミス属の植物と
同様の精油成分を含有しており、これら不定芽から、例
えば石油エーテル等の溶媒を用いて抽出する方法、水蒸
気蒸留法等、通常使用される公知の方法により精油成分
が容易に取得できる。
同様の精油成分を含有しており、これら不定芽から、例
えば石油エーテル等の溶媒を用いて抽出する方法、水蒸
気蒸留法等、通常使用される公知の方法により精油成分
が容易に取得できる。
本発明の方法は、従来の栽培によるものに比べて気象条
件等の影響を受けず、完全に制御された環境の下で短時
間に高収率かつ多量に精油を製造することができる。ま
た、原料として使用する精油高産生不定芽株が形態の目
視選抜及びHS−GC法により容易に選抜できる。
件等の影響を受けず、完全に制御された環境の下で短時
間に高収率かつ多量に精油を製造することができる。ま
た、原料として使用する精油高産生不定芽株が形態の目
視選抜及びHS−GC法により容易に選抜できる。
実施例1 (1)不定芽の分化誘導 水洗したアンテミス・ノビリスの葉を70%のエタノール
で1分間、予備滅菌し、次いで1%アンチホルミンで5
〜10分間滅菌した。次に滅菌蒸留水で薬剤を完全に除去
した葉を無菌的に約5mm角に細断し、外植片とした。こ
の細断葉を植物ホルモンとして、オーキシン(IBAまた
はNAA)の10-5M〜10-6とサイトカイニン(BAまたはカ
イネチン)の10-5M〜10-6Mとの組合わせで、それぞれ
添加した3%のショ糖1%の寒天を含むph5.6に調節し
たLS培地上に置床し、25℃で2000〜3000ルックスの光照
射下で培養を行ないカルスを形成せしめ、2〜3週間後
に不定芽及び、または不定根が分化誘導した。
で1分間、予備滅菌し、次いで1%アンチホルミンで5
〜10分間滅菌した。次に滅菌蒸留水で薬剤を完全に除去
した葉を無菌的に約5mm角に細断し、外植片とした。こ
の細断葉を植物ホルモンとして、オーキシン(IBAまた
はNAA)の10-5M〜10-6とサイトカイニン(BAまたはカ
イネチン)の10-5M〜10-6Mとの組合わせで、それぞれ
添加した3%のショ糖1%の寒天を含むph5.6に調節し
たLS培地上に置床し、25℃で2000〜3000ルックスの光照
射下で培養を行ないカルスを形成せしめ、2〜3週間後
に不定芽及び、または不定根が分化誘導した。
(2)不定芽の継代培養及び精油高産生株の選抜この不
定芽から葉2〜3枚を含む新芽のある小さな株を選抜し
同じ培地及び培養条件で3〜4週間継代培養した。各培
地で得られる不定芽の形態(葉の形、色等)及びHS−GC
の結果は第1表の通りである。この結果についてはHS−
GCによって得られたクロマトグラムのピーク高さから成
分量を求め、クトマトグラムに表われた成分全量に対す
る百分率で表示した。このことからタイプIが精油の高
産生株であることが判った。この結果から判る通り、継
代培養した不定芽の中から精油の高産生株が目視的に容
易に選抜できる。
定芽から葉2〜3枚を含む新芽のある小さな株を選抜し
同じ培地及び培養条件で3〜4週間継代培養した。各培
地で得られる不定芽の形態(葉の形、色等)及びHS−GC
の結果は第1表の通りである。この結果についてはHS−
GCによって得られたクロマトグラムのピーク高さから成
分量を求め、クトマトグラムに表われた成分全量に対す
る百分率で表示した。このことからタイプIが精油の高
産生株であることが判った。この結果から判る通り、継
代培養した不定芽の中から精油の高産生株が目視的に容
易に選抜できる。
この方法で得られる不定芽を培養し、精油を製造した結
果につきその培養条件、増殖度、精油の成分等を第2表
に示す。
果につきその培養条件、増殖度、精油の成分等を第2表
に示す。
なお、第1表および第2表において、不定芽の増殖度、
香気の官能試験及び精油成分の分析は次の方法により行
った。
香気の官能試験及び精油成分の分析は次の方法により行
った。
(1)不定芽の増殖度(倍) (2)香気の官能試験 不定芽を手指で押しつぶし香気を10人の専門員によって
臭覚により判定した。対照は原植物とした。その平均値
を以って官能評価とした。
臭覚により判定した。対照は原植物とした。その平均値
を以って官能評価とした。
評価基準: 1.原植物の精製成分の臭いなし 2. 〃 かすかに有り 3. 〃 有り 4. 〃 強し 5. 〃 非常に強し (3)精油成分の分析 ヘッドスペースガスクロマトグラフィー(HS−GC)を用
い、クロマトグラムのピークの高さから成分量を求め、
クロマトグラムに表われた成分全量に対する百分率で表
示した。定性分析はガスクロマトグラフィー及び質量分
析計により標準物質との保持時間及びマススペクトルを
比較する事により行った。
い、クロマトグラムのピークの高さから成分量を求め、
クロマトグラムに表われた成分全量に対する百分率で表
示した。定性分析はガスクロマトグラフィー及び質量分
析計により標準物質との保持時間及びマススペクトルを
比較する事により行った。
(測定条件) 1)ガスクロマトグラフィー 機種:HP5890Aガスクロマトグラフ カラム:DB−WAXヒューズド・シリカ・キャピラリーカラ
ム(径0.25mm×60m) 検出器:FID インジェクション温度:250℃ オープン温度:70℃〜180℃(4℃/minで昇温) キャリアガス流量(He):0.78ml/min スプリット比:1/20 2)ヘッドスペースサンプラー 機種:HP19395A 保温温度:75℃ 保温時間:90分 3)質量分析 機種:HP59970C イオン化電圧:70eV イオン源温度:260℃ マスフィルタ:双曲線四重極 実施例2 実施例1で得られた精油の高産生株の新芽を含み葉が2
〜3枚ついた株を、IBA10-6M,BA10-7M,を添加して、3
%ショ糖を加え、更にアンモニア態窒素と硝酸態窒素を
1対5から1対11の比率にし、基本培地の農度が1倍〜
1/2倍であるリンスマイヤー・スクーグ培地(pH5.6)に
投入し、25℃で2000〜3000ルッスクの光照射下で、100
r.p.m.の振とう培養を行った。
ム(径0.25mm×60m) 検出器:FID インジェクション温度:250℃ オープン温度:70℃〜180℃(4℃/minで昇温) キャリアガス流量(He):0.78ml/min スプリット比:1/20 2)ヘッドスペースサンプラー 機種:HP19395A 保温温度:75℃ 保温時間:90分 3)質量分析 機種:HP59970C イオン化電圧:70eV イオン源温度:260℃ マスフィルタ:双曲線四重極 実施例2 実施例1で得られた精油の高産生株の新芽を含み葉が2
〜3枚ついた株を、IBA10-6M,BA10-7M,を添加して、3
%ショ糖を加え、更にアンモニア態窒素と硝酸態窒素を
1対5から1対11の比率にし、基本培地の農度が1倍〜
1/2倍であるリンスマイヤー・スクーグ培地(pH5.6)に
投入し、25℃で2000〜3000ルッスクの光照射下で、100
r.p.m.の振とう培養を行った。
培養後2日後から、不定芽の茎基部より、新たな不定芽
が出現し、以後その数が増加した。
が出現し、以後その数が増加した。
10日後の培養結果を実施例2として、表2に示す。表2
より液体培養によって得られた不定芽(実施例2)は、
実施例1と比べて、増殖度が良い。又、栽培によって得
られる植物と同等な組成の精油が得られた事がわかる。
より液体培養によって得られた不定芽(実施例2)は、
実施例1と比べて、増殖度が良い。又、栽培によって得
られる植物と同等な組成の精油が得られた事がわかる。
実施例3 実施例2と同様な高産生株を、実施例2と同様の培地に
投入した。ただし、本実施例においては、振とう培養の
代わりに、細かい泡(ガラスフィルターG2程度)で通気
培養を行った。
投入した。ただし、本実施例においては、振とう培養の
代わりに、細かい泡(ガラスフィルターG2程度)で通気
培養を行った。
10日培養後の結果を実施例3として第2表に示す。実施
例2と比べて、良好な増殖が得られ、かつ栽培によって
得られる植物と同等な組成の精油が得られたことがわか
る。
例2と比べて、良好な増殖が得られ、かつ栽培によって
得られる植物と同等な組成の精油が得られたことがわか
る。
Claims (1)
- 【請求項1】アンテミス属に属する植物の組織を、オー
キシンとしてIBAを10-6M,サイトカイニンとしてBA10-6
Mを添加したLS寒天培地にて培養し、培養物から母植物
に近い形態を有する不定芽を分化誘導せしめ、該不定芽
中に産生蓄積された精油成分を採取することを特徴とす
る精油の製造方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP63053770A JPH0722470B2 (ja) | 1988-03-09 | 1988-03-09 | 精油の製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP63053770A JPH0722470B2 (ja) | 1988-03-09 | 1988-03-09 | 精油の製造方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH01228413A JPH01228413A (ja) | 1989-09-12 |
| JPH0722470B2 true JPH0722470B2 (ja) | 1995-03-15 |
Family
ID=12952050
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP63053770A Expired - Lifetime JPH0722470B2 (ja) | 1988-03-09 | 1988-03-09 | 精油の製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0722470B2 (ja) |
Families Citing this family (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0637A (ja) * | 1992-06-17 | 1994-01-11 | P C C Technol:Kk | 植物組織培養による高生産株の取得方法及び該株を用い た二次代謝産物の取得方法 |
| CN103222946B (zh) * | 2011-09-27 | 2015-04-15 | 沈志荣 | 一种含美洲接骨木提取物、番石榴提取物和水解珍珠的瞬透生肌水组合物的制备方法 |
| CN103230352B (zh) * | 2011-09-27 | 2014-08-20 | 沈志荣 | 一种含植物提取物和水解珍珠的化妆水组合物的制备方法 |
| CN103222943B (zh) * | 2011-09-27 | 2015-03-25 | 沈志荣 | 一种含三色堇花提取物、番石榴提取物和水解珍珠的瞬透生肌水组合物的制备方法 |
| CN103340811B (zh) * | 2011-09-27 | 2015-03-25 | 浙江欧诗漫生物股份有限公司 | 一种含美洲接骨木提取物、三色堇花提取物和水解珍珠的瞬透生肌水组合物 |
| CN103340810B (zh) * | 2011-09-27 | 2015-03-25 | 浙江欧诗漫生物股份有限公司 | 一种含可可果/海藻复合提取物、人参根提取物和水解珍珠的化妆水组合物 |
| CN103239371B (zh) * | 2011-09-27 | 2014-07-30 | 沈志荣 | 一种含黄春菊提取物和人参根提取物的化妆水组合物的制备方法 |
-
1988
- 1988-03-09 JP JP63053770A patent/JPH0722470B2/ja not_active Expired - Lifetime
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 山田康之編集「植物培養細胞の変異と選抜」1985,P.57−59,P.74・77 |
| 萩森学,BIOIndugthy,vol.2,No.12,1985,P.54−60 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH01228413A (ja) | 1989-09-12 |
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