JPH01228413A - 精油の製造方法 - Google Patents
精油の製造方法Info
- Publication number
- JPH01228413A JPH01228413A JP5377088A JP5377088A JPH01228413A JP H01228413 A JPH01228413 A JP H01228413A JP 5377088 A JP5377088 A JP 5377088A JP 5377088 A JP5377088 A JP 5377088A JP H01228413 A JPH01228413 A JP H01228413A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- essential oil
- adventitious bud
- adventitious buds
- adventitious
- purified oil
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
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Landscapes
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Fats And Perfumes (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔産業上の利用分野〕
本発明は、植物の組織を培養し、分化誘導した不定芽か
ら精油成分を製造する方法に関す、る。
ら精油成分を製造する方法に関す、る。
精油は、植物体から圧搾、抽出等により得られる物質で
あって、化粧品、香料、食用フレーバー等の分野で広く
用いられている。そして、この精油は一般に栽培した植
物を原料として製造されている。
あって、化粧品、香料、食用フレーバー等の分野で広く
用いられている。そして、この精油は一般に栽培した植
物を原料として製造されている。
近年、植物の組織培養が比較的容易となり、この方法が
植物成分の製造手法として検討されている。そして、ベ
ラルゴニウム属、ゲラニウム属、ルタ属、ヴィオラ属、
メリッサ属、イリス属等の植物について、その不定芽か
ら精油を製造する方法が提案されている(特開昭59−
213393号、特開昭60−71699号、特開昭6
0−248188号)。しかし、アンテミス属に属する
植物については、これまで全く報告がない。
植物成分の製造手法として検討されている。そして、ベ
ラルゴニウム属、ゲラニウム属、ルタ属、ヴィオラ属、
メリッサ属、イリス属等の植物について、その不定芽か
ら精油を製造する方法が提案されている(特開昭59−
213393号、特開昭60−71699号、特開昭6
0−248188号)。しかし、アンテミス属に属する
植物については、これまで全く報告がない。
本発明者らは、従来の植物の栽培によるものに比べて気
象条件等の影響を受けず完全に制御された環境下で容易
かつ高収率で精油を製造する方法を開発すべく研究し、
本発明を完成するに至った。
象条件等の影響を受けず完全に制御された環境下で容易
かつ高収率で精油を製造する方法を開発すべく研究し、
本発明を完成するに至った。
本発明は、アンテミス(An themis)属に属す
る植物の組織を培養し、培養物から不定芽を分化誘導せ
しめ、該不定芽中に産生蓄積された精油成分を採取する
精油の製造方法である。そして、この不定芽としては増
殖に最適な植物ホルモンを含有する培地で継代培養し増
殖したもの、継代培養したものから選抜した精油間産生
株が、加えて該高産生株を液体培地で大量培養したもの
がそれぞれ使用される。さらに、本発明には、不定芽を
継代培養したものの中から、その形態による目視的選抜
及びヘッドスペースガスクロマトグラフィー法(以下M
S−GC法という)による選抜により精油間産生株を選
抜する精油間産生株の取得法が含まれる。
る植物の組織を培養し、培養物から不定芽を分化誘導せ
しめ、該不定芽中に産生蓄積された精油成分を採取する
精油の製造方法である。そして、この不定芽としては増
殖に最適な植物ホルモンを含有する培地で継代培養し増
殖したもの、継代培養したものから選抜した精油間産生
株が、加えて該高産生株を液体培地で大量培養したもの
がそれぞれ使用される。さらに、本発明には、不定芽を
継代培養したものの中から、その形態による目視的選抜
及びヘッドスペースガスクロマトグラフィー法(以下M
S−GC法という)による選抜により精油間産生株を選
抜する精油間産生株の取得法が含まれる。
以下に、本発明を詳しく述べる。
本発明においては、アンテミス属に属する植物の組織を
寒天培地中で培養し、培養物から不定芽を分化誘導し、
この不定芽を最適な植物ホルモンの存在下に継代培養し
て増殖させ、得られる不定°芽の中から精油間産生株を
選抜し、この不定芽から精油を製造する。更に原料の不
定芽としては上記精油間産生株を液体培地中で大量培養
したものを用いることができる。
寒天培地中で培養し、培養物から不定芽を分化誘導し、
この不定芽を最適な植物ホルモンの存在下に継代培養し
て増殖させ、得られる不定°芽の中から精油間産生株を
選抜し、この不定芽から精油を製造する。更に原料の不
定芽としては上記精油間産生株を液体培地中で大量培養
したものを用いることができる。
本発明で使用されるアンテミス属に属する植物としては
アンテミス・ノビリス(八nthemis nobol
is)。
アンテミス・ノビリス(八nthemis nobol
is)。
アンテミス・チンクトリア(八nthemis tin
ctoria)。
ctoria)。
アンテミス・アルペンシス(八nthemis arv
ensis)+アンテミス・コチュラ(八nthemi
s cotula)が挙げられる。そして、植物体とし
ては葉、茎、根の断片のいずれでもが使用できる。植物
の組織から不定芽を分化誘導する培地としては、植物組
織培養において通常使用されるもの、例えば、リンスマ
イヤー・スクーグ(LS)培地、ムラシゲ・スクーグ培
地、B5培地、ニッチ&ニッチ培地、ホワイト培地等が
使用されるが、好ましくはLS培地が用いられる。そし
て、実際に培養するに際しては、これら基本培地にit
!I、ビタミン類及び植物ホルモンを添加して用いる。
ensis)+アンテミス・コチュラ(八nthemi
s cotula)が挙げられる。そして、植物体とし
ては葉、茎、根の断片のいずれでもが使用できる。植物
の組織から不定芽を分化誘導する培地としては、植物組
織培養において通常使用されるもの、例えば、リンスマ
イヤー・スクーグ(LS)培地、ムラシゲ・スクーグ培
地、B5培地、ニッチ&ニッチ培地、ホワイト培地等が
使用されるが、好ましくはLS培地が用いられる。そし
て、実際に培養するに際しては、これら基本培地にit
!I、ビタミン類及び植物ホルモンを添加して用いる。
植物ホルモンとしては、例えばインドール−3−酢酸(
IAA) 、インドール−3−酪酸(TBA)、α−ナ
フタレン酢酸(NAA) 、2.4−ジクロロフェノキ
シ酢酸(2゜4−D)等のオーキシン類、カイネチン(
Kn)、6−ベンジルアデニン(6−BA)等のサイト
カイニン類等が挙げられ、これらオーキシンとサイトカ
イニンを組み合せて使用される。特に好ましい組み合せ
はオーキシン:サイトカイニンが10−6M: 10−
’Mである。この培地中で明下20〜30°C1好まし
くは25°Cで2〜3週間培養することによりカルス化
し、不定芽及び不定根の誘導が起る。光の条件は200
0〜3000ルツクスの光照射を用いる。
IAA) 、インドール−3−酪酸(TBA)、α−ナ
フタレン酢酸(NAA) 、2.4−ジクロロフェノキ
シ酢酸(2゜4−D)等のオーキシン類、カイネチン(
Kn)、6−ベンジルアデニン(6−BA)等のサイト
カイニン類等が挙げられ、これらオーキシンとサイトカ
イニンを組み合せて使用される。特に好ましい組み合せ
はオーキシン:サイトカイニンが10−6M: 10−
’Mである。この培地中で明下20〜30°C1好まし
くは25°Cで2〜3週間培養することによりカルス化
し、不定芽及び不定根の誘導が起る。光の条件は200
0〜3000ルツクスの光照射を用いる。
この不定芽は新芽を含む葉2〜3枚の小さい株に分けて
継代培養して増殖を行うが、そのときの培地としては上
記基本培地が用いられる。そして、その際使用する植物
ホルモンの組成により異なった形態(葉の形、色等)の
不定芽が得られる。即ち、植物ホルモンとしてIBA
10−’M、 BA10−’M ;IBA 10−
’M、 BA 10−6M 、 NAA t
o−’M、 BA 10−’M などを用いたと
ころ、その不定芽の形態が3種類に分類された。
継代培養して増殖を行うが、そのときの培地としては上
記基本培地が用いられる。そして、その際使用する植物
ホルモンの組成により異なった形態(葉の形、色等)の
不定芽が得られる。即ち、植物ホルモンとしてIBA
10−’M、 BA10−’M ;IBA 10−
’M、 BA 10−6M 、 NAA t
o−’M、 BA 10−’M などを用いたと
ころ、その不定芽の形態が3種類に分類された。
母植物に近い形態のタイプl1葉の分岐があまり無いタ
イプl1葉と茎の区別がつかないタイプ■の3種類であ
る。その形態的分類では、第1表に示す通りタイプ■で
のみ良好な精油成分が産生じた。したがって、タイプl
の不定芽の増殖に好適な植物ホルモンは、例えばIBA
: 10−’MとBA:10−”〜10〜7Mとを組
み合せたものである。
イプl1葉と茎の区別がつかないタイプ■の3種類であ
る。その形態的分類では、第1表に示す通りタイプ■で
のみ良好な精油成分が産生じた。したがって、タイプl
の不定芽の増殖に好適な植物ホルモンは、例えばIBA
: 10−’MとBA:10−”〜10〜7Mとを組
み合せたものである。
不定芽を増殖して得られる株の中から精油の高産生株を
選抜するためには、不定芽の形態及び精油成分をMS−
GC法(恩田宣彦:ぶんせき、並。
選抜するためには、不定芽の形態及び精油成分をMS−
GC法(恩田宣彦:ぶんせき、並。
12(1987) )にかけて行った。従来、精油成分
の分析には蒸留や溶媒抽出等の煩雑な操作及び多量の試
料が必要であるが、このM S −G C法では少量の
試料で節単にかつ短時間で分析が可能である。
の分析には蒸留や溶媒抽出等の煩雑な操作及び多量の試
料が必要であるが、このM S −G C法では少量の
試料で節単にかつ短時間で分析が可能である。
この精油高産生株は、液体培地においても大量培養する
ことができる。この液体培地は次の組成から成る。
ことができる。この液体培地は次の組成から成る。
(液体培地組成)
(1)基本培地 LS培地の濃度の1〜1/2倍(2
) ショ糖 3% (3) ホルモン IBA 10−’MBA
10−’M (4)窒素源 アンモニア態窒素/硝酸態窒素=1
75〜1/11 培養は、25°Cで7〜10日間明所(2000〜30
00ルツクス)下で行う。
) ショ糖 3% (3) ホルモン IBA 10−’MBA
10−’M (4)窒素源 アンモニア態窒素/硝酸態窒素=1
75〜1/11 培養は、25°Cで7〜10日間明所(2000〜30
00ルツクス)下で行う。
このようにして得られた不定芽はアンテミス属の植物と
同様の精油成分を含有しており、これら不定芽から、例
えば石油エーテル等の溶媒を用いて抽出する方法、水蒸
気蒸留法等、通常使用される公知の方法により精油成分
が容易に取得できる。
同様の精油成分を含有しており、これら不定芽から、例
えば石油エーテル等の溶媒を用いて抽出する方法、水蒸
気蒸留法等、通常使用される公知の方法により精油成分
が容易に取得できる。
(発明の効果〕
本発明の方法は、従来の栽培によるものに比べて気象条
件等の影響を受けず、完全に制御された環境の下で短期
間に高収率かつ多量に精油を製造することができる。ま
た、原料として使用する精油高卒生不定芽株が形態の目
視選抜及びHS −GC法により容易に選抜できる。
件等の影響を受けず、完全に制御された環境の下で短期
間に高収率かつ多量に精油を製造することができる。ま
た、原料として使用する精油高卒生不定芽株が形態の目
視選抜及びHS −GC法により容易に選抜できる。
実施例 1
(1)不定芽の分化誘導
水洗したアンテミス・ノビリスの葉を70%のエタノー
ルで1分間、予備滅菌し、次いで1%アンチホルミンで
5〜10分間滅菌した。次に滅菌蒸留水で薬剤を完全に
除去した葉を無菌的に約5+mn角に細断し、外植片と
した。この細断葉を植物ホルモンとして、オーキシン(
IBAまたはNAA)の10−5M〜l0−6とサイト
カイニン(B八またはカイネチン)の10−’M〜10
−6Mとの組合わせで、それぞれ添加した3%のシ=J
[と1%の寒天を含むpH5,6に調節したLS培地上
に置床し、25°Cで2000〜3000ルツクスの光
照射下で培養を行ないカルスを形成せしめ、2〜3週間
後に不定芽及び、または不定根が分化誘導した。
ルで1分間、予備滅菌し、次いで1%アンチホルミンで
5〜10分間滅菌した。次に滅菌蒸留水で薬剤を完全に
除去した葉を無菌的に約5+mn角に細断し、外植片と
した。この細断葉を植物ホルモンとして、オーキシン(
IBAまたはNAA)の10−5M〜l0−6とサイト
カイニン(B八またはカイネチン)の10−’M〜10
−6Mとの組合わせで、それぞれ添加した3%のシ=J
[と1%の寒天を含むpH5,6に調節したLS培地上
に置床し、25°Cで2000〜3000ルツクスの光
照射下で培養を行ないカルスを形成せしめ、2〜3週間
後に不定芽及び、または不定根が分化誘導した。
(2)不定芽の継代培養及び精油高産生株の選抜この不
定芽から葉2〜3枚を含む新芽のある小さな株を選抜し
同じ培地及び培養条件で3〜4週間継代培養した。各培
地で得られる不定芽の形態(葉の形、色等)及びH3−
GCの結果は第1表の通りである。この結果については
H3−GCによって得られたクロマトグラムのピーク高
さから成分Nを求め、クロマトグラムに表われた成分全
量に対する百分率で表示した。このことからタイプIが
精油の高産生株であることが判った。この結果から判る
通り、継代培養した不定芽の中から精油の高産生株が目
視的に容易に選抜できる。
定芽から葉2〜3枚を含む新芽のある小さな株を選抜し
同じ培地及び培養条件で3〜4週間継代培養した。各培
地で得られる不定芽の形態(葉の形、色等)及びH3−
GCの結果は第1表の通りである。この結果については
H3−GCによって得られたクロマトグラムのピーク高
さから成分Nを求め、クロマトグラムに表われた成分全
量に対する百分率で表示した。このことからタイプIが
精油の高産生株であることが判った。この結果から判る
通り、継代培養した不定芽の中から精油の高産生株が目
視的に容易に選抜できる。
この方法で得られる不定芽を培養し、精油を製造した結
果につきその培養条件、増殖度、精油の成分等を第2表
に示す。
果につきその培養条件、増殖度、精油の成分等を第2表
に示す。
(来夏以下余白)
なお、第1表および第2表において、不定芽の増殖度、
香気の官能試験及び精油成分の分析は次の方法により行
った。
香気の官能試験及び精油成分の分析は次の方法により行
った。
(1)不定芽の増殖度(倍)
培養開始時の切片(又は培養物)の新鮮型(g)(2)
香気の官能試験 不定芽を手指で押しつぶし香気を10人の専門員によっ
て臭覚により判定した。対照は原植物とした。その平均
値を以って官能評価とした。
香気の官能試験 不定芽を手指で押しつぶし香気を10人の専門員によっ
て臭覚により判定した。対照は原植物とした。その平均
値を以って官能評価とした。
評価基準:
1、原植物の精製成分の臭いなし
2、 かすかに有り3、
有り4・
強し 5、 非常に強しく3)精油成
分の分析 ヘッドスペースガスクロマトグラフィー(Its−GC
)を用い、クロマトグラムのピークの高さから成分量を
求め、クロマトグラムに表われた成分全量に対する百分
率で表示した。定性分析はガスクロマトグラフィー及び
質量分析計により標準物質との保持時間及びマススペク
トルを比較する事により行った。
有り4・
強し 5、 非常に強しく3)精油成
分の分析 ヘッドスペースガスクロマトグラフィー(Its−GC
)を用い、クロマトグラムのピークの高さから成分量を
求め、クロマトグラムに表われた成分全量に対する百分
率で表示した。定性分析はガスクロマトグラフィー及び
質量分析計により標準物質との保持時間及びマススペク
トルを比較する事により行った。
(測定条件)
1)ガスクロマトグラフィー
機 種: HP5890Aガスクロマトグラフカラム:
DB−WAXヒューズド・シリカ・キャピラリーカラ
ム(径0.25mmX60m)検出器: FID インジェクション温度:250°C オーブン温度=70°C−180°C(4°C/min
で昇温)キャリアガス流1jt(lle) : 0.7
8m/m111スプリット比: 1/20 2)ヘッドスペースサンプラー 機種: HP19395A 保温温度ニア5°C 保温時間:90分 3)質量分析 機種: HP59970C イオン化電圧: 70eV イオン源温度:260”C マスフィルタ:双曲線四重極 実施例2 実施例1で得られた精油の高産生株の新芽を含み葉が2
〜3枚ついた株を、IBAIO−’M、 BAIO−’
M。
DB−WAXヒューズド・シリカ・キャピラリーカラ
ム(径0.25mmX60m)検出器: FID インジェクション温度:250°C オーブン温度=70°C−180°C(4°C/min
で昇温)キャリアガス流1jt(lle) : 0.7
8m/m111スプリット比: 1/20 2)ヘッドスペースサンプラー 機種: HP19395A 保温温度ニア5°C 保温時間:90分 3)質量分析 機種: HP59970C イオン化電圧: 70eV イオン源温度:260”C マスフィルタ:双曲線四重極 実施例2 実施例1で得られた精油の高産生株の新芽を含み葉が2
〜3枚ついた株を、IBAIO−’M、 BAIO−’
M。
を添加して、3%ショ糖を加え、更にアンモニア態窒素
と硝酸態窒素を1対5から1対11の比率にし、基本培
地の濃度が1倍〜%倍であるリンスマイヤー・スクーグ
培地(pH5,6)に投入し、25°Cで2000〜3
000ルツクスの光照射下で、100r、p、m。
と硝酸態窒素を1対5から1対11の比率にし、基本培
地の濃度が1倍〜%倍であるリンスマイヤー・スクーグ
培地(pH5,6)に投入し、25°Cで2000〜3
000ルツクスの光照射下で、100r、p、m。
の振とう培養を行った。
培養後2日後から、不定芽の茎基部より、新たな不定芽
が出現し、以後その数が増加した。
が出現し、以後その数が増加した。
10日後の培養結果を実施例2として、表2に示す。表
2より液体培養によって得られた不定芽(実施例2)は
、実施例1と比べて、増殖度が良い。
2より液体培養によって得られた不定芽(実施例2)は
、実施例1と比べて、増殖度が良い。
又、栽培によって得られる植物と同等な組成の精油が得
られた事がわかる。
られた事がわかる。
実施例3
実施例2と同様な高生産株を、実施例2と同様の培地に
投入した。ただし、本実施例においては、振とう培養の
代わりに、細かい泡(ガラスフィルター〇2程度)で通
気培養を行った。
投入した。ただし、本実施例においては、振とう培養の
代わりに、細かい泡(ガラスフィルター〇2程度)で通
気培養を行った。
10日培養後の結果を実施例3として第2表に示す。実
施例2と比べて、良好な増殖が得られ、かつ栽培によっ
て得られる植物と同等な組成の精油が得られたことがわ
かる。
施例2と比べて、良好な増殖が得られ、かつ栽培によっ
て得られる植物と同等な組成の精油が得られたことがわ
かる。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 1、アンテミス属に属する植物の組織を培養し、培養物
から不定芽を分化誘導せしめ、該不定芽中に産生蓄積さ
れた精油成分を採取することを特徴とする精油の製造方
法。 2、不定芽が増殖に最適な植物ホルモンを含む培地で継
代培養し、増殖されたものであることを特徴とする請求
項1記載の精油の製造方法。 3、不定芽が増殖に最適な植物ホルモンを含む培地で継
代培養したものから選抜した精油高産生株であることを
特徴とする請求1記載の精油の製造方法。 4、不定芽が液体培地中で大量培養して得られたもので
あることを特徴とする請求項1記載の精油の製造方法。 5、不定芽を継代培養したものの中から、その形態によ
る目視的選抜及びヘッドスペースガスクロマトグラフィ
ー法による選抜により精油高産生株を選抜することを特
徴とする精油高産生株の取得法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP63053770A JPH0722470B2 (ja) | 1988-03-09 | 1988-03-09 | 精油の製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP63053770A JPH0722470B2 (ja) | 1988-03-09 | 1988-03-09 | 精油の製造方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH01228413A true JPH01228413A (ja) | 1989-09-12 |
| JPH0722470B2 JPH0722470B2 (ja) | 1995-03-15 |
Family
ID=12952050
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP63053770A Expired - Lifetime JPH0722470B2 (ja) | 1988-03-09 | 1988-03-09 | 精油の製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0722470B2 (ja) |
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0637A (ja) * | 1992-06-17 | 1994-01-11 | P C C Technol:Kk | 植物組織培養による高生産株の取得方法及び該株を用い た二次代謝産物の取得方法 |
| CN103222946A (zh) * | 2011-09-27 | 2013-07-31 | 沈志荣 | 一种含美洲接骨木提取物、番石榴提取物和水解珍珠的瞬透生肌水组合物的制备方法 |
| CN103222943A (zh) * | 2011-09-27 | 2013-07-31 | 沈志荣 | 一种含三色堇花提取物、番石榴提取物和水解珍珠的瞬透生肌水组合物的制备方法 |
| CN103230352A (zh) * | 2011-09-27 | 2013-08-07 | 沈志荣 | 一种含植物提取物和水解珍珠的化妆水组合物的制备方法 |
| CN103239371A (zh) * | 2011-09-27 | 2013-08-14 | 沈志荣 | 一种含黄春菊提取物和人参根提取物的化妆水组合物的制备方法 |
| CN103340811A (zh) * | 2011-09-27 | 2013-10-09 | 沈志荣 | 一种含美洲接骨木提取物、三色堇花提取物和水解珍珠的瞬透生肌水组合物 |
| CN103340810A (zh) * | 2011-09-27 | 2013-10-09 | 沈志荣 | 一种含可可果/海藻复合提取物、人参根提取物和水解珍珠的化妆水组合物 |
-
1988
- 1988-03-09 JP JP63053770A patent/JPH0722470B2/ja not_active Expired - Lifetime
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| BIO INDUSTRY=1985 * |
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0637A (ja) * | 1992-06-17 | 1994-01-11 | P C C Technol:Kk | 植物組織培養による高生産株の取得方法及び該株を用い た二次代謝産物の取得方法 |
| CN103222946A (zh) * | 2011-09-27 | 2013-07-31 | 沈志荣 | 一种含美洲接骨木提取物、番石榴提取物和水解珍珠的瞬透生肌水组合物的制备方法 |
| CN103222943A (zh) * | 2011-09-27 | 2013-07-31 | 沈志荣 | 一种含三色堇花提取物、番石榴提取物和水解珍珠的瞬透生肌水组合物的制备方法 |
| CN103230352A (zh) * | 2011-09-27 | 2013-08-07 | 沈志荣 | 一种含植物提取物和水解珍珠的化妆水组合物的制备方法 |
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Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0722470B2 (ja) | 1995-03-15 |
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