JPH07233131A

JPH07233131A - 新規アミノ酸エステルおよび体液中の白血球またはエラスターゼを検出するための検出試薬

Info

Publication number: JPH07233131A
Application number: JP6319986A
Authority: JP
Inventors: Yuji Yagi; 雄次八木
Original assignee: Kyoto Daiichi Kagaku KK
Current assignee: Arkray Inc
Priority date: 1993-12-29
Filing date: 1994-12-22
Publication date: 1995-09-05

Abstract

(57)【要約】【構成】式：Ｘ−Ｏ−Ａ−Ｙ−Ａ−Ｏ−Ｘ［式中、Ｘは、ジアゾニウム塩とカップリングし、呈色
する式：Ｘ−ＯＨで示される化合物のＸ、Ａは、Ｌ−ア
ミノ酸の残基、Ｙは、アミノ酸のＮ−置換基であり、ア
シル基、オキシカルボニル基またはスルホニル基を有す
る化合物から誘導される基を表す。］で示されるエステ
ル。【効果】上記アミノ酸エステルをジアゾニウム塩と共
に体液中の白血球またはエラスターゼの検出に用いる
と、体液に含まれるエステル分解および／またはタンパ
ク質分解活性を持つ酵素に影響されることなく、白血球
またはエラスターゼと特異的に反応するので、白血球ま
たはエラスターゼを精度よく検出できる。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、新規なアミノ酸エステ
ル、およびそれを含んでなる体液中の白血球またはエラ
スターゼ、特に尿中の白血球を検出するための検出試薬
に関する。

【従来の技術】腎臓及び泌尿生殖器の疾病を診断する場
合、尿中白血球の検出、測定は非常に重要である。尿中
白血球の検出は、顕微鏡を用い、一定量の尿中に含まれ
る白血球の数を数えて行っていた。しかし、顕微鏡によ
り白血球数を数える方法は、時間がかかり、作業量が多
く、さらに熟練者によらなければ、精度の高い計数が行
えない。

【０００２】顕微鏡による計数に代わる簡便で精度の良
い方法として、白血球中に存在するエステル分解および
／または蛋白質分解活性を利用した試験方法が開発され
た。例えば特公昭６１−４５９８２号公報に記載されて
いる方法では、基質として置換フェノキシ−アミノ酸エ
ステルを用い、加水分解により遊離した置換フェノール
をジアゾニウム塩により検出する。特公昭６２−４１７
１０号公報に記載された方法では、基質として５−フェ
ニルピロールアミノ酸エステルを用い、加水分解により
遊離した５−フェニルピロールをジアゾニウム塩により
検出する。特公平２−４３４８０号公報に記載された方
法では、基質としてインドキシルアミノ酸エステルを用
い加水分解により遊離したインドキシルをジアゾニウム
塩により検出する。

【０００３】これらの特許公報に記載の方法は、白血球
中に存在するエステル分解および／または蛋白質の分解
活性を利用しており、これらの方法の基礎となる技術と
して、組織化学または細胞化学の分野においてエステラ
ーゼ基質（ナフトールエステル、インドキシルエステル
等）と発色剤（ジアゾニウム塩）を用いた白血球の非特
異的エステラーゼ染色法がすでに確立されていた［例え
ば、ピアーズ（Ｐearse）著「ヒストケミストリー・セ
オレティカル・アンド・アプライド」（Ｈistochemistr
y, Ｔheoctical and Ａpplied）第３版、チャーチル・
リビングストン（Ｃhurchill Ｌivingstone）発行(１９
６８年)、エフ・シュマツル（Ｆ．Ｓchmalzl）、エッチ
・ブラウンシュタイナー（Ｈ．Ｂraunsteinner）、クリ
ニッシェ．ヴォッヒュンシュリフト（Ｋlin．Ｗsch
r．）４６，６４２(１９６８)参照］。

【０００４】しかし、尿中には多様なエステル分解およ
び／または蛋白質分解活性を持つ酵素が存在し、上記方
法の特異性の悪さは明白である［例えば、ダブリュ・ピ
ー・ラーブ（Ｗ.Ｐ.Ｒaab）、クリニカル・ケミストリ
ー（Ｃlin．Ｃhem．）１８(１)、５−２５（１９７２）
参照］。

【０００５】

【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、体液
中の白血球またはエラスターゼを特異的に検出するた
め、白血球またはエラスターゼによって良好に加水分解
されるが、体液中、特に尿中のエステル分解および／ま
たは蛋白質分解活性を持つ酵素に実質的に加水分解され
ない、すなわち、それらの酵素による加水分解が白血球
またはエラスターゼによる加水分解よりも遅いか、また
はそれらの酵素によりまったく分解されない新規アミノ
酸エステル化合物とそれを用いた検出試薬を提供するこ
とにある。

【０００６】

【課題を解決するための手段】すなわち、本発明は、
式：(Ｘ−Ｏ−Ａ−)n−Ｙ（Ｉ） [式中、Ｘは、ジアゾニウム塩とカップリングし、呈色
する式：Ｘ−ＯＨで示される芳香族化合物、複素環化合
物またはそれらの誘導体のＸ、Ａは、Ｌ−アミノ酸の残
基、nは、２以上の整数、Ｙは、アミノ酸のＮ−置換基
であって、炭素数１〜１０の非環状炭化水素または環状
炭化水素、飽和または不飽和複素環化合物、芳香族化合
物、珪素原子数１〜１０の炭化珪素化合物若しくは単糖
または糖鎖が２〜１０のオリゴ糖の単一または複合体よ
り形成される化合物（これらの化合物には置換基が導入
されていてよい。また、複合体形成のために、異原子を
含んでいてもよい。）であり、同一または異なる２以上
のカルボニル基またはスルホニル基を有する化合物から
誘導される。]で示されるアミノ酸エステルを提供す
る。

【０００７】上記式（Ｉ）中、Ｘは、ジアゾニウム塩と
カップリングし、呈色する式:Ｘ−ＯＨで示される芳香
族化合物である。その例としては、フェノールおよびそ
の誘導体: ３−カルバゾロール、２,３−ジ(ジメチルア
ミノ)フェノール、２,４−ジ(ジメチルアミノ)フェノー
ル、４−ジメチルアミノ−２−メトキシフェノール、４
−ジメチルアミノ−２−メチルフェノール、３−ジメチ
ルアミノ−２−メチルフェノール、３−ピペリジノフェ
ノール、３−ジメチルアミノ−５−ピペリジノフェノー
ル、３−メチル−５−ピペリジノフェノール、３−メト
キシ−５−ピペリジノフェノール、３−モルホリノフェ
ノール、３−ジメチルアミノ−５−モルホリノフェノー
ル、３−メチル−５−モルホリノフェノール、３−メト
キシ−５−モルホリノフェノール、３−モルホリノ−５
−ピペリジノフェノール、１,２,３,４−テトラヒドロ
キノキサリン−５−オール、セサモール、８−ヒドロキ
シジュロリジン、フェルリック酸、アンスラフラビン酸
など；エチル−４−ヒドロキシ−６−メチル−２−オキ
ソ−３−シクロヘキサン−１−カルボハイドレート、ト
ロポロン、２−ヒドロキシ−１,４−ナフトキノンな
ど、ナフトールおよびその誘導体: ナフトレゾルシンな
ど；複素環化合物、例えば、４−ヒドロキシクマリン、
２−ヒドロキシピリジン、３−ヒドロキシピリジン、４
−ヒドロキシピリジン、３−デアザウリジン、３−ジメ
チルアミノ−５−ヒドロキシピラゾール、５,６−ジヒ
ドロ−４−ヒドロキシ−６−メチル−２Ｈ−ピラン−２
−オン、５−ヒドロキシウリジン、コージ酸、ミモシ
ン、キサントプテリン、３−インドキシル、３−ヒドロ
キシ−５−フェニルピロール、３−メチル−５−ヒドロ
キシイソキサゾール、５−ジメチルアミノメチル−３−
ヒドロキシイソキサゾール、４,６−ジヒドロキシピリ
ミジン、３−ヒドロキシイソキノリン、レゾルフィンな
どが挙げられる。

【０００８】Ａは、Ｌ−アミノ酸の残基であり、Ｌ−ア
ミノ酸としては、Ｌ−アラニン、Ｌ−バリン、Ｌ−ロイ
シン、Ｌ−グリシンなどが挙げられ、中でもＬ−アラニ
ンが好ましい。nは、２以上の整数であり、好ましくは
２〜４である。

【０００９】Ｙは、アミノ酸のＮ−置換基であり、炭素
数１〜１０の非環状炭化水素または環状炭化水素、飽和
または不飽和複素環化合物（例えば、テトラヒドロフラ
ン、ピロリジン、ピペラジン、フラン、チオフェン、ピ
ロール、ピラゾール、イソキサゾール、イソチアゾー
ル、イミダゾール、オキサゾール、チアゾール、ピリジ
ン、ピラジン、アクリジン、カルバゾール、キノリンな
ど）、芳香族化合物（例えば、ベンゼン、ナフタレン、
アントラセンなど）、珪素原子数１〜１０の有機珪素化
合物、または、単糖（例えば、Ｄ−グルコース、Ｄ−ガ
ラクトース、Ｄ−グルコサミン）または２〜１０個の単
糖が結合したオリゴ糖（例えば、Ｄ−マルトース、Ｄ−
マルトトリオース、Ｄ−ペンタキトビオース）などの単
一または複合体より形成される化合物であり、同一また
は異なる２以上のカルボニル基またはスルホニル基を有
する化合物から誘導される。これらの化合物は、低級の
アルキル基、アルケニル基およびアルコキシ基、アリー
ル基、アミノ基、イミノ基、水酸基あるいはハロゲン原
子などの置換基で置換されていてよい。また、複合体形
成のために、Ｎ、Ｏ、Ｓなどの異原子を含んでいてもよ
い。

【００１０】本発明のアミノ酸エステルは、公知の方法
を組み合わせることによって次のようにして製造するこ
とができる。まず、本発明の式: (Ｘ−Ｏ−Ａ−)n−Ｙ
を得るために式: (ＨＯ−Ａ−)n−Ｙ、(ＣＨ₃−Ｏ−Ａ)
n−Ｙ、または(ＣＨ₃ＣＨ₂−Ｏ−Ａ)n−Ｙを合成する。
式に示されるＡはアミノ酸残基であり、前物質はフリー
のアミノ酸、またはメチルあるいはエチルエステル体で
ある。Ｙはアミノ酸のＮ−置換基であり、Ｙの前物質と
しては、同一または異なる２以上のカルボン酸またはス
ルホン酸を含む化合物である。

【００１１】合成方法としては、Ｙの前物質であるカル
ボン酸とＡの前物質であるアミノ酸との加熱脱水あるい
はカルボジイミドなどの縮合剤を用いる方法（第４版実
験化学講座２２,１３８〜１４４,２５９〜２６２頁,日
本化学会編,丸善(株),平成４年）、Ｙの前物質である酸
をカルボン酸クロライドやスルホン酸クロライドなどの
酸ハロゲン化物に誘導してから、あるいは酸ハロゲン化
物から合成する方法（同書２２,１４４〜１４６頁）、
Ｙの前物質である酸を酸無水物に誘導してからあるいは
酸無水物から合成する方法（同書２２,１４６〜１４８
頁）、Ｙの前物質としてカルボン酸エステル、ラクトン
から合成する方法（同書２２,１４８〜１５０頁）、Ｙ
の前物質として酸無水物を用いた酸イミドの合成法（同
書２２,１６６〜１７３頁）、Ｙの前物質としてスルホ
ニル関連化合物からのスルホンアミドの合成法（同書２
４,３９４〜４１９）など酸アミド、酸イミドの合成法
として一般によく知られた方法を挙げることができる。
また、一般的に用いられる保護アミノ酸の合成法を利用
することによっても合成することができる（同書２２,
２２８〜２５８頁）。

【００１２】続いて、本発明の式: (Ｘ−Ｏ−Ａ−)n−
Ｙに示されるＡ[アミノ酸残基]のカルボン酸部とＸ−Ｏ
Ｈで示される芳香族化合物または複素環化合物とのエス
テル結合は、鉱酸(硫酸、塩酸など)などの触媒あるいは
カルボジイミドなどの脱水剤を用い、(ＨＯ−Ａ−)n−
ＹとＸ−ＯＨとを直接エステル化する方法（同書２２,
４３〜４５頁）、(ＨＯ−Ａ−)n−Ｙを酸無水物あるい
は酸ハロゲン化物としてＸ−ＯＨと反応させる方法（同
書２２,５０〜５１頁）、また、(ＣＨ₃−Ｏ−Ａ)n−
Ｙ、または(ＣＨ₃ＣＨ₂−Ｏ−Ａ)n−Ｙのアミノ酸エス
テルを用い、Ｘ−ＯＨとエステル交換する方法（同書２
２,５２〜５３頁）など、エステル化反応としてよく知
られた方法によって形成され、これにより最終物である
アミノ酸エステル、式: (Ｘ−Ｏ−Ａ−)n−Ｙが得られ
る。

【００１３】本発明のアミノ酸エステルの代表的な例は
以下のとおりである: ・ブチレン−１,４−ジ[Ｎ−カルボニル−Ｌ−アラニロ
キシ−３−ジメチルアミノ−５−ピペリジノフェノー
ル]（化合物１）・ブチレン−１,４−ジ[Ｎ−カルボニル−Ｌ−バリロキ
シ−３−ジメチルアミノ−５−ピペリジノフェノール]
（化合物２）・ブチレン−１,４−ジ[Ｎ−カルボニル−Ｌ−ロイシロ
キシ−３−ジメチルアミノ−５−ピペリジノフェノー
ル]（化合物３）・ブチレン−１,４−ジ[Ｎ−カルボニル−Ｌ−グリシロ
キシ−３−ジメチルアミノ−５−ピペリジノフェノー
ル]（化合物４）・シクロヘキセン−１,４−ジ[Ｎ−カルボニル−Ｌ−ア
ラニロキシ−３−ジメチルアミノ−５−ピペリジノフェ
ノール]（化合物５）・１,２−ジフェニルビニレン−１,２−ジ[Ｎ−カルボ
ニル−Ｌ−アラニロキシ−３−ジメチルアミノ−５−ピ
ペリジノフェノール]（化合物６）・ベンゼン−１,４−ジ[Ｎ−カルボニル−Ｌ−アラニロ
キシ−３−ジメチルアミノ−５−ピペリジノフェノー
ル]（化合物７）・ベンゼン−１,４−ジ[Ｎ−オキシカルボニル−Ｌ−ア
ラニロキシ−３−ジメチルアミノ−５−ピペリジノフェ
ノール]（化合物８）・ナフタレン−２,６−ジ[Ｎ−カルボニル−Ｌ−アラニ
ロキシ−３−ジメチルアミノ−５−ピペリジノフェノー
ル]（化合物９）・２,２'−ジチオベンゼン−１,１'−ジ[Ｎ−カルボニ
ル−Ｌ−アラニロキシ−３−ジメチルアミノ−５−ピペ
リジノフェノール]（化合物１０）・プロパン−１,２,３−トリ[Ｎ−カルボニル−Ｌ−ア
ラニロキシ−３−ジメチルアミノ−５−ピペリジノフェ
ノール]（化合物１１）・ベンゼン−１,２,４,５−テトラ[Ｎ−カルボニル−Ｌ
−アラニロキシ−３−ジメチルアミノ−５−ピペリジノ
フェノール]（化合物１２）・ピリジン−２,６−ジ[Ｎ−カルボニル−Ｌ−アラニロ
キシ−３−ジメチルアミノ−５−ピペリジノフェノー
ル]（化合物１３）・６,６'−ジチオピリジン−３,３'−ジ[Ｎ−カルボニ
ル−Ｌ−アラニロキシ−３−ジメチルアミノ−５−ピペ
リジノフェノール]（化合物１４）・ベンゼン−１,２,４,５−ジ[Ｎ,Ｎ−ジカルボニル−
Ｌ−アラニロキシ−３−ジメチルアミノ−５−ピペリジ
ノフェノール]（化合物１５）・フラン−３,４−ジ[Ｎ−カルボニル−Ｌ−アラニロキ
シ−３−ジメチルアミノ−５−ピペリジノフェノール]
（化合物１６）・ベンゼン−１−[Ｎ−カルボニル−Ｌ−アラニロキシ
−３−ジメチルアミノ−５−ピペリジノフェノール]−
４−[Ｎ−スルホニル−Ｌ−アラニロキシ−３−ジメチ
ルアミノ−５−ピペリジノフェノール]（化合物１７）・ベンゼン−１,３−ジ[Ｎ−スルホニル−Ｌ−アラニロ
キシ−３−インドール]（化合物１８）・ナフタレン−２,６−ジ[Ｎ−スルホニル−Ｌ−アラニ
ロキシ−３−インドール]（化合物１９）・ジフェニルメタン−４,４'−ジ[Ｎ−スルホニル−Ｌ
−アラニロキシ−３−インドール]（化合物２０）・エチレン−１,２−ジ[Ｎ−(２−オキシエチレン)スル
ホニル−Ｌ−アラニロキシ−３−インドール]（化合物
２１）・テトラ(エチレンジオキシ)−Ｏ,Ｏ'−ジ[Ｎ−(４−ベ
ンゼンスルホニル)−Ｌ−アラニロキシ−３−インドー
ル]（化合物２２）・ナフタレン−１,３,６−トリ[Ｎ−スルホニル−Ｌ−
アラニロキシ−３−インドール]（化合物２３）・ピペラジン−１,４−ジ[Ｎ−エチルスルホニル−Ｌ−
アラニロキシ−３−インドール]（化合物２４）・ベンゼン−１,３−ジ[Ｎ−スルホニル−Ｌ−アラニロ
キシ−２−ピリジン]（化合物２５）・ベンゼン−１,３−ジ[Ｎ−スルホニル−Ｌ−アラニロ
キシ−４−クマリン]（化合物２６）・ベンゼン−１,３−ジ[Ｎ−スルホニル−Ｌ−アラニロ
キシ−トロポロン]（化合物２７）・ベンゼン−１,３−ジ[Ｎ−スルホニル−Ｌ−アラニロ
キシ−３−ジメチルアミノ−５−ピラゾール]（化合物
２８）・ベンゼン−１,３−ジ[Ｎ−スルホニル−Ｌ−アラニロ
キシ−４−(５,６−ジヒドロ−６−メチル−２Ｈ−ピラ
ン−２−オン)]（化合物２９）・ベンゼン−１,３−ジ[Ｎ−スルホニル−Ｌ−アラニロ
キシ−２−(１,４−ナフトキノン)]（化合物３０）

【００１４】本発明の試薬は、本発明のアミノ酸エステ
ルとジアゾニウム塩を必須成分として含有する。本発明
の試薬を製造するには、アミノ酸エステルとジアゾニウ
ム塩と共に試験片製造に通常使用される試薬（緩衝剤、
湿潤剤、界面活性剤など）を揮発性溶剤（例えば水、メ
タノール、アセトン、トルエン、ジメチルホルムアミド
など）に溶解し、この溶液に多孔性不活性担体(例え
ば、ろ紙、ガラス繊維シート、合成不織布、発泡プラス
チックシート、布、金属焼結体など)を含浸し、乾燥す
る（例えば、加熱送風乾燥、凍結乾燥、遠赤外線乾燥な
ど）。

【００１５】すべての試薬を一回の含浸、乾燥工程で処
理してもよいが、通常は第一工程にて、水溶性成分（例
えば、緩衝剤、湿潤剤、界面活性剤など）を含浸、乾燥
し、続いて第２工程において揮発性の有機溶剤を主とし
て水溶性の低いアミノ酸エステルとジアゾニウム塩など
を含浸、乾燥する。

【００１６】得られた試験片はこのままでも使用可能で
あるが、適当な大きさに裁断し、プラスチックなどの支
持体に両面テープ、接着剤、ホットメルト樹脂などある
いは物理的方法により固定して用いてもよい。ただし、
本試薬を製造する方法は、この含浸法に限定されるもの
ではない。

【００１７】含浸液中の各試薬の濃度としては、アミノ
酸エステルとジアゾニウム塩がそれぞれ０.１〜１０mmo
l／Ｌ、好ましくは０.５〜５mmol／Ｌ含まれるのがよ
い。また、体液の測定時に本試薬へ体液を含有させた場
合、本試薬内のpＨが６〜１１、好ましくはpＨ７〜９と
なるように上記含浸液中に緩衝剤を添加するのが好まし
い。また、本試薬を製造する方法として、合成ポリマー
（例えば、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリド
ン、メチルビニルエーテル／無水マレイン酸共重合体、
アミノアルキルメタアクリレートコポリマー、ヒドロキ
シプロピルセルロース、カルボキシメチルセルロースな
ど）あるいは天然高分子（ゼラチン、アルギン酸、セル
ロース、キチン、デンプン、プルランなど）にアミノ酸
エステル、ジアゾニウム塩または試験片製造に通常使用
される試薬（緩衝剤、湿潤剤、界面活性剤など）を混合
し、打錠機などにより錠剤に成形し試験片とすることも
できる。また、揮発性溶剤を用いて上記混合物を均一溶
液または懸濁状溶液とし、プラスチックシートまたはフ
ィルムに塗布し、乾燥して本試薬を製造することもでき
る。

【００１８】本試薬を用いて体液を測定する場合、本試
薬と体液との混合物の中にアミノ酸エステルとジアゾニ
ウム塩がそれぞれ０.１〜１０mmol／Ｌ、好ましくは０.
５〜５mmol／Ｌの濃度となるよう本試薬中に各試薬を含
有させるのがよい。また、混合物中のpＨが６〜１１、
好ましくはpＨ７〜９となるように本試薬に緩衝剤を添
加するのが好ましい。混合物中には、エステル化合物と
ジアゾニウム塩がそれぞれ０.１〜１０mmol／Ｌ、好ま
しくは０.５〜５mmol／Ｌ含まれる。測定系のpＨは、一
般に６〜１１、好ましくは７〜９である。

【００１９】ジアゾニウム塩は特に限定されない。しか
し、一般に体液中の成分、特には尿中のピリルビンやウ
ロビリノーゲンと反応、発色せず、また、アミノ酸エス
テル[式:(Ｘ−Ｏ−Ａ)n−Ｙ]とも反応せず、アミノ酸エ
ステルの加水分解によって生ずるＸ−ＯＨと縮合して着
色化合物を生じる必要がある。例えばp−ジアゾ−Ｎ,Ｎ
−ジエチル−m−トルイジン、１−ジアゾ−２−ナフト
ール−４−スルホン酸、５−ジアゾメルドラム酸、２−
メトキシ−４−モルホリノベンゼンジアゾニウム、ファ
ーストブラック−ＢＢ、ファーストブラック−ＲＲ、フ
ァーストレッド−ＩＴＲ、ファーストレッド−ＫＬ、フ
ァーストレッド−ＲＣ、ファーストレッド−ＴＲ、ファ
ーストレッド−ＡＬ、ファーストレッド−ＰＤＣ、ファ
ーストコリンス−Ｖ、ファーストガーネット−ＧＢＣ、
ファーストブラック−Ｋ、ファーストバイオレット−
Ｂ、ファーストレッドバイオレット−ＬＢなどが挙げら
れる。

【００２０】

【発明の効果】本発明のアミノ酸エステルをジアゾニウ
ム塩と共に体液中の白血球またはエラスターゼの検出に
用いると、体液に含まれるエステル分解および／または
タンパク質分解活性を持つ酵素に阻害されることなく、
白血球またはエラスターゼと特異的に反応するので、白
血球またはエラスターゼを精度よく検出できる。

【００２１】

【実施例】次に、実施例を示し、本発明をより具体的に
説明する。

【００２２】実施例１ブチレン−１,４−ジ[Ｎ−カルボニル−Ｌ−アラニロキ
シ−３−ジメチルアミノ−５−ピペリジノフェノール]
(化合物１)の合成ブチレン−１,４−ジ[Ｎ−カルボニル−Ｌ−アラニン] Ｌ−アラニン２.００g(２２.５mmol)をピリジン３０ml
に溶かし、０℃に冷却した後、アジピン酸ジクロライド
溶液[アジピン酸ジクロライド１.３７g(７.５mmol)をク
ロロホルム２０mlに溶解]を攪拌しながら少しずつ加え
た。１時間、０℃に保った後、室温で更に１６時間攪拌
した。反応液をクロロホルム３００mlに注ぎ、氷冷下１
Ｎ塩酸水で水層のpＨを１〜２とした。分液後、クロロ
ホルム層を希塩酸で５回、水で５回それぞれ洗浄した。
無水硫酸マグネシウムで乾燥後、濾過し、減圧下濃縮し
て標記化合物１.８９４g(６.５６mmol)を得た。収率:８
７.５％。Ｈ−ＮＭＲ(δppm,ＣＤＣl₃):１.３５(d，Ｊ＝６.６Ｈ
z,６Ｈ)，１.５０−１.９０(m,４Ｈ)，２.１０−２.６
０(m,４Ｈ)，４.１５(q，Ｊ＝６.６Ｈz,２Ｈ)，５.２０
−５.６０(m,２Ｈ)

【００２３】３−ジメチルアミノ−５−ピペリジノフェ
ノール１,３,５−トリヒドロキシベンゼン二水和物２５.０g
(１５４mmol)をジメチルホルムアミド２６９mlに溶解さ
せた。水１１６mlを加え均一とした後、５０％ジメチル
アミン水溶液１７.６g(１９５mmol)を加え、室温で４８
時間攪拌した。減圧下濃縮して残渣４７.０gを得た。残
渣をシリカゲルカラムクロマトグラフにて分離精製して
３−ジメチルアミノレゾルシノール１７.５g(１１４mmo
l)を得た。収率:７４.２％。続いて、３−ジメチルアミノレゾルシノール１７.５gを
ピペリジン１７５mlに溶解し、オートクレイブ(１８０
℃)中にて１２時間反応した。過剰のピペリジンを減圧
回収し、残渣を１４.８g得た。残渣をシリカゲルカラム
クロマトグラフにて３回分離精製して標記化合物４.０g
(１８.２mmol)を得た。収率:１６.０％。Ｈ−ＮＭＲ(δppm,ＣＤＣl₃):１.４０−１.８０(m,６
Ｈ)，２.８５(s,６Ｈ),２.９−３.２(m,４Ｈ),５.７０
−６.００(m,４Ｈ)

【００２４】ブチレン−１,４−ジ[Ｎ−カルボニル−Ｌ
−アラニロキシ−３−ジメチルアミノ−５−ピペリジノ
フェノール] ブチレン−１,４−ジ[Ｎ−カルボニル−Ｌ−アラニン]
１.５０g(５.２mmol)を塩化チオニル２０mlに懸濁させ
９０分加熱攪拌した。減圧下塩化チオニルを留去し、粗
ブチレン−１,４−ジ[Ｎ−カルボニル−Ｌ−アラニルク
ロライド]１.６９g(５.２mmol)を得た。粗収率１００
％。粗ブチレン−１,４−ジ[Ｎ−カルボニル−Ｌ−アラ
ニルクロライド]１.６９g(５.２mmol)をクロロホルム３
０mlに溶かした。３−ジメチルアミノ−５−ピペリジノ
フェノール３.４４g(１５.６mmol)をピリジン５０mlに
溶かし、０℃に冷却した後、上記粗ブチレン−１,４−
ジ[Ｎ−カルボニル−Ｌ−アラニルクロライド]溶液を攪
拌しながら少しずつ加えた。１時間、０℃に保った後、
室温で更に２４時間攪拌した。反応液をクロロホルム３
００mlに注ぎ、希塩酸、５％炭酸水素ナトリウム水溶
液、水でそれぞれ５回洗浄した。無水硫酸マグネシウム
で乾燥後、濾過し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲル
カラムクロマトグラフにて分離精製して標記化合物２.
３７g(３.４２mmol)を得た。収率:６５.８％。アジピン
酸ジクロライドからの収率:５７.６％。Ｈ−ＮＭＲ(δppm,ＣＤＣl₃):１.４０−１.９０(m,２２
Ｈ)，２.１０−２.６０(m,４Ｈ)，２.８７(s,１２Ｈ)，
２.９０−３.２０８(m,６Ｈ)，４.２０(m,２Ｈ)，５.７
０−６.００(m,６Ｈ）

【００２５】実施例２ブチレン−１，４−ジ[Ｎ−カルボニル−Ｌ−バリロキ
シ−３−ジメチルアミノ−５−ピペリジノフェノール]
(化合物２)の合成Ｌ−アラニンをＬ−バリンに置き換え、原料のモル量、
モル比、反応時間、温度など諸条件を実施例１と合わせ
標記化合物を合成した。収量:２.６２g(３.５０mmol)。
アジピン酸ジクロライドからの収率:５９.３％。Ｈ−ＮＭＲ(δppm,ＣＤＣl₃):１.４０−１.９０(m,１６
Ｈ)，２.００−２.７０(m,４Ｈ)，２.８８(s,１２Ｈ)，
２.９０−３.２０(m,８Ｈ)，３.９７(d，Ｊ＝４.８Ｈz,
２Ｈ)，４.７０−４.９０(m,２Ｈ)，５.６０−６.１０
(m,８Ｈ)

【００２６】実施例３ブチレン−１,４−ジ[Ｎ−カルボニル−Ｌ−ロイシロキ
シ−３−ジメチルアミノ−５−ピペリジノフェノール]
(化合物３)の合成Ｌ−アラニンをＬ−ロイシンに置き換え、原料のモル
量、モル比、反応時間、温度など諸条件を実施例１と合
わせ標記化合物を合成した。収量:２.５５g(３.２８mmo
l)。アジピン酸ジクロライドからの収率:５４.２％。Ｈ−ＮＭＲ(δppm,ＣＤＣl₃):１.０８(d，Ｊ＝６.０Ｈ
z,１２Ｈ)，１.２０−１.９０(m,２２Ｈ),２.１０−２.
６０(m,４Ｈ)，２.８３(s,１２Ｈ)，２.９０−３.２０
(m,８Ｈ)，４.６０−４.９０(m,２Ｈ)，５.６０−６.０
０(m,８Ｈ)

【００２７】実施例４ブチレン−１,４−ジ[Ｎ−カルボニル−Ｌ−グリシロキ
シ−３−ジメチルアミノ−５−ピペリジノフェノール]
(化合物４)の合成Ｌ−アラニンをＬ−グリシンに置き換え、原料のモル
量、モル比、反応時間、温度など諸条件を実施例１と合
わせ標記化合物を合成した。収量:１.９５g(２.９４mmo
l)。アジピン酸ジクロライドからの収率:５６.５％。Ｈ−ＮＭＲ(δppm,ＣＤＣl₃):１.４０−１.９０(m,１６
Ｈ)，２.１０−２.６０(m,４Ｈ)，２.８８(s,１２Ｈ)，
２.９０−３.２０(m,８Ｈ)，３.７５(s,４Ｈ),5.６０−
６.１０(m,８Ｈ)

【００２８】実施例５シクロヘキセン−１,４−ジ[Ｎ−カルボニル−Ｌ−アラ
ニロキシ−３−ジメチルアミノ−５−ピペリジノフェノ
ール](化合物５)の合成シクロヘキセン−１,４−ジカルボン酸クロライドシクロヘキセン−１,４−ジカルボン酸１.２９g(７.５m
mol)を塩化チオニル２０mlに懸濁させ９０分加熱攪拌し
た。減圧下塩化チオニルを留去し、粗シクロヘキセン−
１,４−ジカルボン酸クロライド１.７９g(７.５mmol)。
粗収率:１００％。以下、アジピン酸ジクロライドを粗
シクロヘキサン−１,４−ジカルボニルクロライドに置
き換え、原料のモル量、モル比、反応時間、温度など諸
条件を実施例１と合わせ標記化合物を合成した。収量:
２.２４g(３.１１mmol)。シクロヘキサン−１,４−ジカ
ルボン酸からの収率:５０.４％。Ｈ−ＮＭＲ(δppm,ＣＤＣl₃):１.１０−２.６０(m,２０
Ｈ)，２.８４(s,１２Ｈ)，２.９０−３.５０(m,１０
Ｈ)，４.００−４.３０(m,２Ｈ)，５.５０−６.００(m,
８Ｈ)

【００２９】実施例６１,２−ジフェニルビニレン−１,２−ジ[Ｎ−カルボニ
ル−Ｌ−アラニロキシ−３−ジメチルアミノ−５−ピペ
リジノフェノール](化合物６)の合成シクロヘキセン−１,４−ジカルボン酸を１,２−ジフェ
ニルビニレン−１,２−ジカルボン酸無水物に置き換
え、原料のモル量、モル比、反応時間、温度など諸条件
を実施例５と合わせ標記化合物を合成した。収量:２.２
９g(２.８１mmol)。１,２−ジフェニルビニレン−１,２
−ジカルボン酸無水物からの収率:３４.０％。Ｈ−ＮＭＲ(δppm,ＣＤＣl₃):１.４０−１.７０(m,１８
Ｈ)，２.８５(s,１２Ｈ)，２.９０−３.２０(m,８Ｈ)，
４.２３(m,２Ｈ)，５.７０−６.００(m,８Ｈ)，７.４０
−７.７０(m,１０Ｈ）

【００３０】実施例７ベンゼン−１，４−ジ[Ｎ−カルボニル−Ｌ−アラニロ
キシ−３−ジメチルアミノ−５−ピペリジノフェノー
ル](化合物７)の合成アジピン酸ジクロライドをテレフタル酸ジクロライドに
置き換え、原料のモル量、モル比、反応時間、温度など
諸条件を実施例１と合わせ標記化合物を合成した。収
量:２.００g(２.８０mmol)。テレフタル酸ジクロライド
からの収率:４２.１％。Ｈ−ＮＭＲ(δppm,ＣＤＣl₃):１.４０−１.７０(m,１８
Ｈ)，２.８１(s,１２Ｈ)，２.９０−３.２０(m,８Ｈ)，
４.２０(m,２Ｈ)，５.７０−６.００(m,８Ｈ)，８.０５
(s,４Ｈ)

【００３１】実施例８ベンゼン−１,４−ジ[Ｎ−オキシカルボニル−Ｌ−アラ
ニロキシ−３−ジメチルアミノ−５−ピペリジノフェノ
ール](化合物８)の合成シクロヘキセン−１,４−ジカルボン酸をベンゼン−１,
４−ジオキシカルボン酸に置き換え、原料のモル量、モ
ル比、反応時間、温度など諸条件を実施例５と合わせ標
記化合物を合成した。収量２.１４g(２.８７mmol)。ベ
ンゼン−１,４−ジオキシカルボン酸からの収率:４３.
１％。Ｈ−ＮＭＲ(δppm,ＣＤＣl₃):１.４０−１.７０(m,１８
Ｈ)，２.７８(s,１２Ｈ)，２.９０−３.２０(m,８Ｈ)，
４.２０(m,２Ｈ)，５.７０−６.００(m,８Ｈ)，６.９０
−７.３０(s,４Ｈ)

【００３２】実施例９ナフタレン−２,６−ジ[Ｎ−カルボニル−Ｌ−アラニロ
キシ−３−ジメチルアミノ−５−ピペリジノフェノー
ル](化合物９)の合成シクロヘキセン−１,４−ジカルボン酸をナフタレン−
２,６−ジカルボン酸に置き換え、原料のモル量、モル
比、反応時間、温度など諸条件を実施例５と合わせ標記
化合物を合成した。収量:２.２７g(２.９８mmol)。ナフ
タレン−２,６−ジカルボン酸からの収率:３７.２％。Ｈ−ＮＭＲ(δppm,ＣＤＣl₃):１.４０−１.７０(m,１８
Ｈ)，２.８７(s,１２Ｈ)，２.９０−３.２０(m,８Ｈ)，
４.３１(m,２Ｈ)，５.７０−６.００(m,８Ｈ)，７.６５
−８.１０(m,４Ｈ)，８.６５(s,２Ｈ)

【００３３】実施例１０２,２'−ジチオジベンゼン−１,１'−ジ[Ｎ−カルボニ
ル−Ｌ−アラニロキシ−３−ジメチルアミノ−５−ピペ
リジノフェノール](化合物１０)の合成シクロヘキセン−１,４−ジカルボン酸を２,２'−ジチ
オジ安息香酸とし、原料のモル量、モル比、反応時間、
温度など諸条件を実施例５と合わせ標記化合物を合成し
た。収量:２.４０g(２.８１mmol)。２,２'−ジチオジ安
息香酸からの収率３１.７％。Ｈ−ＮＭＲ(δppm,ＣＤＣl₃):１.４０−１.７０(m,１８
Ｈ)，２.８８(s,１２Ｈ)，２.９０−３.２０(m,８Ｈ)，
４.３３(m,２Ｈ)，５.７０−６.００(m,８Ｈ)，７.００
−８.２０(m,８Ｈ)

【００３４】実施例１１プロパン−１,２,３−トリ[Ｎ−カルボニル−Ｌ−アラ
ニロキシ−３−ジメチルアミノ−５−ピペリジノフェノ
ール](化合物１１)の合成シクロヘキセン−１,４−ジカルボン酸をプロパン−１,
２,３−トリカルボン酸に置き換え、原料のモル量、モ
ル比、反応時間、温度など諸条件を実施例５と合わせ標
記化合物を合成した(ただし、粗プロパン−１,２,３−
トリカルボン酸クロライドとプロパン−１,２,３−トリ
[Ｎ−カルボニル−Ｌ−アラニン]の仕込量はそれぞれ
５.０mmolと３.４７mmolとした)。標記化合物１.３４g
(１.３５mmol)を得た。プロパン−１,２,３−トリカル
ボン酸からの収率:１７.４％。Ｈ−ＮＭＲ(δppm,ＣＤＣl₃):１.４０−１.７０(m,２７
Ｈ)，２.７０−３.３０(m,１Ｈ)，２.４０−２.７０(m,
４Ｈ)，２.８２(s,１８Ｈ)，２.９０−３.２０(m,１２
Ｈ)，４.１８(m,３Ｈ)，５.７０−６.１０(m,１２Ｈ）

【００３５】実施例１２ベンゼン−１，２,４,５−テトラ[Ｎ−カルボニル−Ｌ
−アラニロキシ−３−ジメチルアミノ−５−ピペリジノ
フェノール](化合物１２)の合成シクロヘキセン−１,４−ジカルボン酸をベンゼン−１,
２,４,５−テトラカルボン酸に置き換え、原料のモル
量、モル比、反応時間、温度など諸条件を実施例５と同
条件とし(ただし、粗ベンゼン−１,２,４,５−テトラカ
ルボン酸クロライドとベンゼン−１,２,４,５−テトラ
[Ｎ−カルボニル−Ｌ−アラニン]の仕込量はそれぞれ
３.７５mmolと２.６mmolとした)、標記化合物１.２５g
(０.９３mmol)を得た。ベンゼン−１,２,４,５−テトラ
カルボン酸からの収率１７.５％。Ｈ−ＮＭＲ(δppm,ＣＤＣl₃):１.４０−１.７０(m,３６
Ｈ)，２.９３(s,２４Ｈ)，２.９０−３.２０(m,１６
Ｈ)，４.３８(m,４Ｈ)，５.７０−６.２０(m,１６Ｈ)，
８.００(s,２Ｈ)

【００３６】実施例１３ピリジン−２,６−ジ[Ｎ−カルボニル−Ｌ−アラニロキ
シ−３−ジメチルアミノ−５−ピペリジノフェノール]
(化合物１３)の合成粗シクロヘキセン−１,４−ジカルボン酸クロライドを
ピリジン−２,６−ジカルボン酸クロライドに置き換
え、原料のモル量、モル比、反応時間、温度など諸条件
を実施例５と合わせ標記化合物を合成した。収量:２.５
２g(３.５３mmol)。ピリジン−２,６−ジカルボン酸ク
ロライドからの収率:４７.３％。Ｈ−ＮＭＲ(δppm,ＣＤＣl₃):１.４０−１.７０(m,１８
Ｈ)，２.７７(s,１２Ｈ)，２.９０−３.２０(m,８Ｈ)，
４.１３(m,２Ｈ)，５.６５−６.０５(m,８Ｈ)，８.３８
(s,３Ｈ)

【００３７】実施例１４６,６'−ジチオジピリジン−３,３'−ジ[Ｎ−カルボニ
ル−Ｌ−アラニロキシ−３−ジメチルアミノ−５−ピペ
リジノフェノール](化合物１４)の合成シクロヘキセン−１,４−ジカルボン酸を６,６'−ジチ
オジニコチン酸に置き換え、原料のモル量、モル比、反
応時間、温度など諸条件を実施例５と合わせ標記化合物
を合成した。収量:１.９２g(２.２５mmol)。６,６'−ジ
チオジニコチン酸からの収率:２０.６％。Ｈ−ＮＭＲ(δppm,ＣＤＣl₃):１.４０−１.７５(m,１８
Ｈ)，２.７５(s,１２Ｈ)，２.８０−３.２０(m,８Ｈ)，
４.１５(m,２Ｈ)，５.７０−６.００(m,８Ｈ)，７.６０
−８.４０(m,４Ｈ)，８.９５(s,２Ｈ)

【００３８】実施例１５ベンゼン−１,２,４,５−ジ[Ｎ,Ｎ−ジカルボニル−Ｌ
−アラニロキシ−３−ジメチルアミノ−５−ピペリジノ
フェノール](化合物１５)の合成ベンゼン−１,２,４,５−ジ[Ｎ,Ｎ−ジカルボニル−Ｌ
−アラニン] トルエン３０mlに１,２,４,５−ベンゼンテトラカルボ
ン酸無水物２.１８g(１０mmol)とＬ−アラニン１.７８g
(２０mmol)を加え、トルエン還流下３０分間激しく攪拌
した。反応液を５％炭酸水素ナトリウム水溶液、希塩
酸、水でそれぞれ５回洗浄した。無水硫酸マグネシウム
で乾燥後、濾過し、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカ
ラムクロマトグラフにて分離精製して標記化合物３.０
８g(８.５４mmol)を得た。収率:８５.４％。Ｈ−ＮＭＲ(δppm,ＣＤＣl₃):１.３８(d，Ｊ＝６.６Ｈ
z,６Ｈ)，４.２１(q，Ｊ＝６.６Ｈz,２Ｈ)，８.０５(s,
２Ｈ) 以下、ブチレン−１,４−ジ[Ｎ−カルボニル−Ｌ−アラ
ニン]をベンゼン−１,２,４,５−ジ[Ｎ,Ｎ−ジカルボニ
ル−Ｌ−アラニン]に置き換え、原料のモル量、モル
比、反応時間、温度など諸条件を実施例１と合わせ標記
化合物を合成した。収量:２.６５g(３.４６mmol)。１,
２,４,５−ベンゼンテトラカルボン酸無水物からの総収
率:５６.９％。Ｈ−ＮＭＲ(δppm,ＣＤＣl₃):１.４５−１.７５(m,１８
Ｈ)，２.８２(s,１２Ｈ)，２.９５−３.２５(m,８Ｈ)，
４.３８(m,２Ｈ)，５.９０−６.２０(m,６Ｈ)，８.１０
(s,２Ｈ）

【００３９】実施例１６フラン−３，４−ジ[Ｎ−カルボニル−Ｌ−アラニロキ
シ−３−ジメチルアミノ−５−ピペリジノフェノール]
(化合物１６)の合成シクロヘキセン−１,４−ジカルボン酸をフラン−３,４
−ジカルボン酸に置き換え、原料のモル量、モル比、反
応時間、温度など諸条件を実施例５と合わせ標記化合物
を合成した。収量:２.２９g(３.２６mmol)。フラン−
３,４−ジカルボン酸からの総収率:４６.１％。Ｈ−ＮＭＲ(δppm,ＣＤＣl₃):１.３５−１.６５(m,１８
Ｈ)，２.７４(s,１２Ｈ)，２.８０−３.１０(m,８Ｈ)，
４.１３(m,２Ｈ)，５.６０−５.９０(m,８Ｈ)，８.５１
(s,２Ｈ)

【００４０】実施例１７ベンゼン−１−[Ｎ−カルボニル−Ｌ−アラニロキシ−
３−ジメチルアミノ−５−ピペリジノフェノール]−４
−[Ｎ−スルホニル−Ｌ−アラニロキシ−３−ジメチル
アミノ−５−ピペリジノフェノール](化合物１７)の合
成ベンゼン−１−[Ｎ−カルボニル−Ｌ−アラニン]−４−
[Ｎ−スルホニル−Ｌ−アラニン] ニトロベンゼン１００mlに４−スルホ安息香酸４.０４g
(２０mmol)を懸濁させ、五塩化リン８.３２g(４０mmol)
を注意しながら少しずつ添加した。攪拌しながら徐々に
加熱し、還流下５時間攪拌した。室温まで冷却した後、
激しく攪拌しながら多量の氷水中に添加した。３０分間
そのまま攪拌し、ニトロベンゼン層を分液した。続い
て、Ｌ−アラニン５.３４g(６０mmol)を氷冷した２mol
／l 水酸化ナトリウム水溶液１００mlに溶かした。激し
い攪拌下、０〜５℃に保ちながら上記ニトロベンゼン層
をゆっくり滴下した。２４時間、同温で攪拌した後、ニ
トロベンゼン層を分液し、ニトロベンゼン層を５％炭酸
水素ナトリウム水溶液、希塩酸、５％炭酸水素ナトリウ
ム水溶液、水でそれぞれ５回洗浄した。無水硫酸マグネ
シウムで乾燥後、濾過し、減圧濃縮した。残渣をシリカ
ゲルカラムクロマトグラフにて２回分離精製して標記化
合物１.８０g(５.２２mmol)を得た。収率:２６.１％。Ｈ−ＮＭＲ(δppm,ＣＤＣl₃):１.３４(s,３Ｈ)，１.４
１(s,３Ｈ)，４.００−４.３０(m,２Ｈ)，５.４０−６.
１０(m,２Ｈ)，８.１２(ｄ，Ｊ＝３.０Ｈz,４Ｈ)

【００４１】ベンゼン−１−[Ｎ−カルボニル−Ｌ−ア
ラニロキシ−３−ジメチルアミノ−５−ピペリジノフェ
ノール]−４−[Ｎ−スルホニル−Ｌ−アラニロキシ−３
−ジメチルアミノ−５−ピペリジノフェノール] 以下、ブチレン−１,４−ジ[Ｎ−カルボニル−Ｌ−アラ
ニン]をベンゼン−１−[Ｎ−カルボニル−Ｌ−アラニ
ン]−４−[Ｎ−スルホニル−Ｌ−アラニン]に置き換
え、原料のモル量、モル比、反応時間、温度など諸条件
を実施例１と合わせ標記化合物を合成した。収量:２.５
０g(３.３４mmol)。４−スルホ安息香酸からの総収率:
１６.８％。Ｈ−ＮＭＲ(δppm,ＣＤＣl₃):１.３７(s,３Ｈ)，１.４
５(s,３Ｈ)，４.０５−４.３５(m,２Ｈ)，５.４５−６.
１５(m,２Ｈ)，８.０６(ｄ，Ｊ＝３.２Ｈz,４Ｈ)

【００４２】実施例１８ベンゼン−１,３−ジ[Ｎ−スルホニル−Ｌ−アラニロキ
シ−３−インドール](化合物１８)の合成ベンゼン−１,３−ジ[Ｎ−スルホニル−Ｌ−アラニン] Ｌ−アラニン２.００g(２２.５mmol)を水酸化ナトリウ
ム水溶液(水２０mlに水酸化ナトリウム１.５０gを溶解)
に溶解させ、また、ベンゼン−１,３−ジスルホン酸ク
ロライド２.０６g(７.５mmol)はトルエン２０mlに溶解
させた。反応液を氷冷、攪拌し内温を１５℃以下に保ち
ながら、ベンゼン−１,３−ジスルホン酸クロライド溶
液を徐々に滴下した。反応液を１５℃以下に保ち、３時
間攪拌した。反応中、１mol／l 水酸化ナトリウム水溶
液で反応液のpＨを９に調製した。氷冷下１Ｎ塩酸水で
水層のpＨを１〜２とした。沈澱を濾取し、希塩酸で５
回、水で５回それぞれ洗浄した。減圧乾燥して標記化合
物２.０６g(５.４１mmol)を得た。収率:７２.１％。Ｈ−ＮＭＲ(δppm,ＣＤＣl₃):１.５２(ｄ，Ｊ＝７.２Ｈ
z,６Ｈ)，４.３０−４.５０(m,２Ｈ)，５.３０−５.７
０(m,２Ｈ)，７.９５−８.３５(m,４Ｈ)

【００４３】ベンゼン−１,３−ジ[Ｎ−スルホニル−Ｌ
−アラニロキシ−３−インドール] ブチレン−１,４−ジ[Ｎ−カルボニル−Ｌ−アラニン]
をベンゼン−１,３−ジ[Ｎ−スルホニル−Ｌ−アラニ
ン]に置き換え、原料のモル量、モル比、反応時間、温
度など諸条件を実施例１と合わせ粗ベンゼン−１,３−
ジ[Ｎ−スルホニル−Ｌ−アラニロキシクロライド]２.
１７gを得た。粗収率:１００％。インドキシルアセテー
ト４.００g(２２.８mmol)をメタノール８５mlに溶か
し、窒素気流下で水酸化ナトリウム水溶液(水４６mlに
水酸化ナトリウム３.６５g(９１.３mmol)溶解)を加え、
室温で３０分間攪拌した。クエン酸水溶液(水３４mlに
クエン酸９.７２g)を加え、減圧濃縮でメタノールを除
去した後、析出してきた黄緑色の結晶を濾取し乾燥し
た。得られた３−ヒドロキシインドール１.５２g(１１.
４４mmol)を窒素気流下、テトラヒドロフラン２４mlお
よびピリジン１１.２mlに溶かし、氷冷下トリフルオロ
酢酸１.５６mlおよび無水硫酸マグネシウム６３０mgを
加えた。粗ベンゼン−１,３−ジ[Ｎ−スルホニル−Ｌ−
アラニロキシクロライド]２.１７g(５.２mmol)をテトラ
ヒドロフラン１６mlに溶かし、０℃で３−ヒドロキシイ
ンドール溶液に加えた後、同温で１時間、室温で１６時
間攪拌した。反応液を酢酸エチル３００mlに入れ、０.
２mol／l クエン酸水溶液で４回、水で１回洗浄した。
無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、濾過し、濾液を減
圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフに
て３回分離精製することによって標記化合物０.７９g
(１.２９mmol)を得た。収率:２４.８％、ベンゼン−１,
３−ジスルホン酸クロライドからの収率:１７.９％。Ｈ−ＮＭＲ(δppm,ＣＤＣl₃):１.４３(ｄ，Ｊ＝７.２Ｈ
z,６Ｈ)，４.００−４.４０(m,２Ｈ)，５.４０−６.０
０(m,２Ｈ)，６.７０−７.４０(m,１０Ｈ)，７.95-8.３
５(m,６Ｈ)

【００４４】実施例１９ナフタレン−２,６−ジ[Ｎ−スルホニル−Ｌ−アラニロ
キシ−３−インドール](化合物１９)の合成ベンゼン−１,３−ジスルホン酸クロライドをナフタレ
ン−２,６−ジスルホン酸クロライドに置き換え、原料
のモル量、モル比、反応時間、温度など諸条件を実施例
１８と合わせ標記化合物を合成した。収量:０.５７g
(０.８７mmol)を得た。ナフタレン−２,６−ジスルホン
酸クロライドからの収率:１６.８％。Ｈ−ＮＭＲ(δppm,ＣＤＣl₃):１.４７(ｄ，Ｊ＝７.２Ｈ
z,６Ｈ)，４.００−４.４０(m,２Ｈ)，６.７０−７.４
０(m,１０Ｈ)，５.４０−６.００(m,２Ｈ)，７.８０
（s,２Ｈ)，８.１３(s,４Ｈ)，７.９０−８.３０(m,２
Ｈ)

【００４５】実施例２０ジフェニルメタン−４,４'−ジ[Ｎ−スルホニル−Ｌ−
アラニロキシ−３−インドール](化合物２０)の合成ベンゼン−１,３−ジスルホン酸クロライドをジフェニ
ルメタン−４,４'−ジスルホン酸クロライドに置き換
え、原料のモル量、モル比、反応時間、温度など諸条件
を実施例１８と合わせ標記化合物を合成した。収量:０.
６０g(０.８６mmol)を得た。ナフタレン−２,６−ジス
ルホン酸クロライドからの収率:１６.６％。Ｈ−ＮＭＲ(δppm,ＣＤＣl₃):１.５５(ｄ，Ｊ＝７.１Ｈ
z,６Ｈ)，３.７０−３.９０(m,４Ｈ)，４.３５(q，Ｊ＝
７.１Ｈz,２Ｈ)，６.９０−７.５５(m,１２Ｈ)，７.３
０（d，Ｊ＝１０Ｈz,４Ｈ)，７.７６(d，Ｊ＝１０Ｈz,
４Ｈ)

【００４６】実施例２１エチレン−１,２−ジ[Ｎ−(２−オキシエチレン)スルホ
ニル−Ｌ−アラニロキシ−３−インドール](化合物２
１)の合成ベンゼン−１,３−ジスルホン酸クロライドをエチレン
−１,２−ジ(２−オキシエタン)スルホン酸クロライド
に置き換え、原料のモル量、モル比、反応時間、温度な
ど諸条件を実施例１８と合わせ標記化合物を合成した。
収量:０.６０g(０.９３mmol)。ナフタレン−２,６−ジ
スルホン酸クロライドからの収率:１７.８％。Ｈ−ＮＭＲ(δppm,ＣＤＣl₃):１.５２(ｄ，Ｊ＝２.４Ｈ
z,６Ｈ)，３.２０−３.４０(m,４Ｈ)，３.４５(s,４
Ｈ)，３.６０−３.９０(m,４Ｈ)，４.４０−４.５０(m,
２Ｈ)，５.８０(d，Ｊ＝２.４Ｈz,２Ｈ)，７.００−７.
３０(m,８Ｈ)，７.４６(d，Ｊ＝２.４Ｈz,２Ｈ)，８.３
５(s,２Ｈ)

【００４７】実施例２２テトラ(エチレンジオキシ)−Ｏ,Ｏ'−ジ[Ｎ−(４−ベン
ゼンスルホニル)−Ｌ−アラニロキシ−３−インドール]
(化合物２２)の合成ベンゼン−１,３−ジスルホン酸クロライドをテトラ(エ
チレンジオキシ)−Ｏ,Ｏ'−ジ[Ｎ−(４−ベンゼンスル
ホン酸)クロライド]に置き換え、原料のモル量、モル
比、反応時間、温度など諸条件を実施例１８と合わせ標
記化合物を合成した。収量:０.７８g(０.９０mmol)を得
た。ナフタレン−２,６−ジスルホン酸クロライドから
の収率:１７.４％。Ｈ−ＮＭＲ(δppm,ＣＤＣl₃):１.４６(ｄ，Ｊ＝７.２Ｈ
z,６Ｈ)，３.６０(s,１６Ｈ)，４.００−４.４０(m,２
Ｈ)，５.６７(d，Ｊ＝９.６Ｈz,２Ｈ)，６.６５(d，Ｊ
＝９.８Ｈz,４Ｈ)，７.６２(d，Ｊ＝９.８Ｈz,４Ｈ)，
６.７０−７.４０(m,１０Ｈ)，８.６５(d，Ｊ＝３.０Ｈ
z,２Ｈ)

【００４８】実施例２３ナフタレン−１,３,６−トリ[Ｎ−スルホニル−Ｌ−ア
ラニロキシ−３−インドール](化合物２３)の合成ベンゼン−１,３−ジスルホン酸クロライドを１,３,６
−ナフタレントリスルホン酸クロライドとし、原料のモ
ル量、モル比、反応時間、温度など諸条件を実施例１８
と同条件とし標記化合物を合成した。ただし、粗ナフタ
レン−１,３,６−トリスルホン酸クロライドとナフタレ
ン−１,３,６−トリ[Ｎ−スルホニル−Ｌ−アラニン]の
仕込量はそれぞれ５.０mmolと３.４７mmolとした。収
量:０.５９g(０.６４mmol)。粗ナフタレン−１,３,６−
トリスルホン酸クロライドからの収率:１８.５％。Ｈ−ＮＭＲ(δppm,ＣＤＣl₃):１.４８(ｄ，Ｊ＝７.２Ｈ
z,９Ｈ)，４.０５−４.４５(m,３Ｈ)，５.４０−６.０
０(m,３Ｈ)，６.７０−７.４０(m,１５Ｈ)，７.７０−
８.２０(m,５Ｈ)，８.４０−８.６５(m,３Ｈ)

【００４９】実施例２４ピペラジン−１,４−ジ[Ｎ−エチルスルホニル−Ｌ−ア
ラニロキシ−３−インドール](化合物２４)の合成ベンゼン−１,３−ジスルホン酸クロライドをピペラジ
ン−１,４−ジエチレンスルホン酸クロライドに置き換
え、原料のモル量、モル比、反応時間、温度など諸条件
を実施例１８と合わせ標記化合物を合成した。収量:０.
４７g(０.６９mmol)を得た。ピペラジン−１,４−ジエ
チレンスルホン酸クロライドからの収率:１３.５％。Ｈ−ＮＭＲ(δppm,ＣＤＣl₃):１.４３(ｄ，Ｊ＝７.２Ｈ
z,６Ｈ)，２.５０−３.３０(m,１６Ｈ)，３.９５−４.
３５(m,２Ｈ)，５.４０−６.００(m,２Ｈ)，６.７０−
７.４０(m,１０Ｈ)，８.５５−８.７５(m,２Ｈ)

【００５０】実施例２５ベンゼン−１,３−ジ[Ｎ−スルホニル−Ｌ−アラニロキ
シ−２−ピリジン](化合物２５)の合成ベンゼン−１,３−ジ[Ｎ−スルホニル−Ｌ−アラニロキ
シクロライド]２.１７g(５.２mmol)（実施例１８を参
照）をクロロホルム３０mlに溶かした。２−ヒドロキシ
ピリジン１.４８g(１５.６mmol)をピリジン３０mlに溶
かし、氷冷した。攪拌下、反応液を１０℃以下に保ちな
がらクロロホルム溶液を滴下した。同温にて１時間反応
させた後、室温で２４時間攪拌した。反応液をクロロホ
ルム３００mlに注ぎ、希塩酸、５％炭酸水素ナトリウム
水溶液、水でそれぞれ５回洗浄した。無水硫酸マグネシ
ウムで乾燥後、濾過し、減圧下濃縮した。残渣をシリカ
ゲルカラムクロマトグラフにて２回分離精製して標記化
合物１.５８g(３.４２mmol)を得た。収率:６５.８％。
ベンゼン−１,３−ジスルホン酸クロライドからの収率:
４７.４％。Ｈ−ＮＭＲ(δppm,ＣＤＣl₃):１.５８(s,６Ｈ)，４.２
５−４.５５(m,２Ｈ)，５.６０−６.００(m,２Ｈ)，６.
２０−６.８０(m,４Ｈ)，７.４０−７.６０(m,４Ｈ)，
７.９５−８.３５(m,４Ｈ)

【００５１】実施例２６ベンゼン−１,３−ジ[Ｎ−スルホニル−Ｌ−アラニロキ
シ−４−クマリン](化合物２６)の合成２−ヒドロキシピリジンを４−ヒドロキシクマリンに置
き換え、原料のモル量、モル比、反応時間、温度など諸
条件を実施例２５と合わせ標記化合物を合成した。収
量:５.７３g(３.１０mmol)。ベンゼン−１,３−ジスル
ホン酸クロライドからの収率:５９.６％。Ｈ−ＮＭＲ(δppm,ＣＤＣl₃):１.５２(s,６Ｈ)，４.３
０−４.６０(m,２Ｈ)，５.６０−６.００(m,２Ｈ)，５.
７３(s,２Ｈ)，７.１０−８.３５(m,１２Ｈ)

【００５２】実施例２７ベンゼン−１,３−ジ[Ｎ−スルホニル−Ｌ−アラニロキ
シ−トロポロン](化合物２７)の合成２−ヒドロキシピリジンをトロポロンに置き換え、原料
のモル量、モル比、反応時間、温度など諸条件を実施例
２５と合わせ標記化合物を合成した。収量:１.８１g
(３.５０mmol)。ベンゼン−１,３−ジスルホン酸クロラ
イドからの収率:６７.３％。Ｈ−ＮＭＲ(δppm,ＣＤＣl₃):１.４８(s,６Ｈ)，４.２
５−４.５５(m,２Ｈ)，５.５０−６.００(m,２Ｈ)，６.
８０−７.５０(m,１０Ｈ)，７.９０−８.３５(m,４Ｈ）

【００５３】実施例２８ベンゼン−１，３−ジ[Ｎ−スルホニル−Ｌ−アラニロ
キシ−３−ジメチルアミノ−５−ピラゾール](化合物２
８)の合成２−ヒドロキシピリジンを３−ジメチルアミノ−５−ヒ
ドロキシピラゾールに置き換え、原料のモル量、モル
比、反応時間、温度など諸条件を実施例２５と合わせ標
記化合物を合成した。収量:１.２８g(２.４３mmol)。ベ
ンゼン−１,３−ジスルホン酸クロライドからの収率:４
６.７％。Ｈ−ＮＭＲ(δppm,ＣＤＣl₃):１.４８(s,６Ｈ)，２.６
５(s,１２Ｈ)，４.２５−４.５５(m,２Ｈ)，５.４０−
６.００(m,２Ｈ)，７.６０(s,２Ｈ)，７.９０−８.３５
(m,４Ｈ)

【００５４】実施例２９ベンゼン−１,３−ジ[Ｎ−スルホニル−Ｌ−アラニロキ
シ−４−(５,６−ジヒドロ−６−メチル−２Ｈ−ピラン
−２−オン](化合物２９)の合成２−ヒドロキシピリジンを５,６−ジヒドロ−４−ヒド
ロキシ−６−メチル−２Ｈ−ピラン−２−オンに置き換
え、原料のモル量、モル比、反応時間、温度など諸条件
を実施例２５と合わせ標記化合物を合成した。収量:１.
８４g(３.４９mmol)。ベンゼン−１,３−ジスルホン酸
クロライドからの収率:６７.２％。Ｈ−ＮＭＲ(δppm,ＣＤＣl₃):１.１５(ｄ，Ｊ＝５.４Ｈ
z,４Ｈ)，１.４４(s,６Ｈ)，２.２０−２.５０(m,４
Ｈ)，３.１０−３.７０(m,２Ｈ)，４.２５−４.５５(m,
２Ｈ)，５.４０−６.００(m,２Ｈ)，５.７８(s,２Ｈ)，
７.９０−８.３５(m,４Ｈ)

【００５５】実施例３０ベンゼン−１,３−ジ[Ｎ−スルホニル−Ｌ−アラニロキ
シ−２−(１,４−ナフトキノン)](化合物３０)の合成２−ヒドロキシピリジンを２−ヒドロキシ−１,４−ナ
フトキノンに置き換え、原料のモル量、モル比、反応時
間、温度など諸条件を実施例２５と合わせ標記化合物を
合成した。収量:２.０７g(３.３４mmol)。ベンゼン−
１,３−ジスルホン酸クロライドからの収率:６４.３
％。Ｈ−ＮＭＲ(δppm,ＣＤＣl₃):１.４８(s,６Ｈ)，５.６
０−５.８０(m,２Ｈ)，７.８０−８.５５(m,１４Ｈ)

【００５６】実施例３１尿中白血球およびエラスターゼを検出する試験紙１）試験紙の作成０.４mol/lホウ酸水溶液と０.４mol/lホウ砂水溶液を混
合しpＨ８とした。この緩衝液５０mlにポリビニルピロ
リドン（Ｋ−３０）０.５gとラウリル硫酸ナトリウム
０.０５gを溶かした後、瀘紙（東洋瀘紙社製、Ｎo.５１
４Ａ）１０×１０cmを浸せきし、循環式送風乾燥機にて
８０℃、３０分間乾燥した（試験紙−Ｉ）。ｎ−デカノ
ール１.２g、１−ジアゾ−２−ナフトール−４−スルホ
ン酸１２.５mg（０.０５mmol）およびアミノ酸エステル
（０.０５mmol）をメタノール５０mlに溶かした後、試
験紙−Ｉを浸せきし、循環式送風乾燥機にて５０℃、１
５分間乾燥した（試験紙−II）。得られた試験紙−IIを
５×５mmに裁断し、両面テープを用いて白色ポリエチレ
ンテレフタレートシート（厚さ：１００μm，５×７０m
m）の一端に貼り、試験片とした。アミノ酸エステルと
して化合物−１〜４（実施例１〜４参照）を用いた。２）試料濃度が１０mg/lとなるように下記酵素を０.１mol/lトリ
ス塩酸緩衝液（０.０１mol/l塩化カルシウム；pＨ７.
８）に溶解し、各酵素液とした。α−キモトリプシン
（シグマ社製，牛膵臓）、トリプシン（シグマ社製，牛
膵臓）、カテプシン（シグマ社製，牛膵臓）、ズブチリ
シン（ベーリンガー・マンハイム社製，バチルス・ズブ
チリス）、エラスターゼ（シグマ社製，ヒト白血球）、
ブチルコリンエステラーゼ（シグマ社製，ヒト血清）ヒト全血より白血球（好中球）を分離精製し、生理食塩
水中に200個/μlとなるよう調整し、白血球溶液とし
た。３）測定試験紙を試料に浸した後、直ちに引き上げ余剰の試料を
瀘紙にて吸引させ、３７℃の恒温器にて２分間反応させ
た。試料としてトリス緩衝液を用いた場合を対照とし、
各試験紙の発色を目視判定した。なお、トリス緩衝液を
用いた場合には、反応中試験紙の色変化はなかった。４）結果目視判定結果を表−１に示す。この結果より、本発明の
アミノ酸エステルが白血球あるいはエラスターゼに対し
特異的に加水分解を受けるのは明白である。

【００５７】

【表１】

【００５８】実施例３２尿中白血球およびエラスターゼを検出する試験紙１）試験紙の作成実施例３１と同様に試験紙を作成した。ただし、次の点
を変更した。瀘紙：ワットマン社製，３ＭＭＣＨＲジアゾニウム塩：２−メトキシ−４−モルホリノベンゼ
ンジアゾニウム塩１６.２mg（０.０５mmol）アミノ酸エステル：化合物−１８,１９,２０,２１,２２
（それぞれ実施例１８,１９,２０,２１,２２参照）２）比較用試験紙の作成本発明のアミノ酸エステルに対する比較としてＮ−トシ
ルアラニルオキシ−３−インドール（特公平２−４３４
８０号公報参照）を用いた試験片を作成した。Ｎ−トシ
ルアラニルオキシ−３−インドールは、特公昭５９−３
４７５号公報の実施例６に記載の方法により合成した。
比較用試験紙としては、上記１）試験紙の作成に基づ
き、アミノ酸エステルをＮ−トシルアラニルオキシ−３
−インドール（０.０５mmol＝１８mg）に置き換え作成
した。３）試料実施例３１と同様。加えて、尿検体として正常尿（白血
球陰性）と膿尿（尿沈渣法において約２０個/hpf）を準
備した。４）測定試験片に試料８μlを滴下し、恒温器で３７℃、１分間
反応させた後、日本電色工業(株)色差計ＳＺ−Σ９０を
用い、５６０／７５０nmの二波長反射率（Ｒ％）を測定
した。５）結果結果を表−２に示す。

【００５９】

【表２】表−２の結果より、反射率の差：ΔＲ％＝（試料のＲ
％）−（ブランクのＲ％）（ブランク：尿試料の場合は
正常尿、酵素液の場合はトリス緩衝液とする）をみれ
ば、本発明のアミノ酸エステルを用いた試験片がエラス
ターゼおよび白血球に対し良好に発色していることがわ
かる。一方、比較用試験片でもエラスターゼおよび白血
球に対し発色していることが確認できるが、蛋白質分解
酵素であるα−キモトリプシン、トリプシン、ズブチリ
シンの各溶液においても発色が確認された。したがっ
て、本発明のアミノ酸エステルを用いた試験片がエラス
ターゼおよび白血球に対し高い特異性を有することが明
らかである。

【００６０】実施例３３尿中白血球およびエラスターゼを検出する試験片１）試験片の作成ｎ−デカノール１０gをアセトン５００mlに溶かし、瀘
紙粉末Ａ（東洋瀘紙）４.０mgを添加した。室温で１０
分間放置した後、瀘取し、バットに広げ循環式送風乾燥
機にて４０℃、２０分間乾燥した。乾燥後、ポリ袋に移
し粉末を十分ほぐした（粉末−Ｉ）。２−メトキシ−４
−モルホリノベンゼンジアゾニウム塩４.９mg、ホウ酸
２５４mg、ホウ砂２９６mg、ラウリル硫酸ナトリウム２
０mgおよび無水ケイ酸（和光純薬）８００mgを乳鉢で粉
砕、混合した。ポリエチレン袋に移し、粉末−Ｉ１６
００mgを加え、十分に混合した。打錠機にて予備打錠
（試料：２００mg，直径：１３mm，圧力：５t）した
後、再度乳鉢で粉砕、混合した。これをふるいにより５
０〜２００μmに分粒した（粉末−II）。必要に応じア
ミノ酸エステルを乳鉢で粉砕し、ふるいにより５０〜２
００μmに分粒した。粉末−IIとアミノ酸エステル（０.
０１５mmol）をポリエチレン袋に移し、十分に混合した
後、打錠機にて打錠（試料：１００mg，直径：１３mm，
圧力：１t）した。アミノ酸エステルとして化合物−１
１〜１５（実施例−１１〜１５参照）を使用した。２）試料実施例３２に同じ。３）測定試験片に試料５０μl滴下し、恒温器で３７℃、２分間
反応させた後、日本電色工業(株)色差計ＳＺ−Σ９０を
用い、５４０／７５０nmの二波長反射率（Ｒ％）を測定
した。４）結果測定結果を表−３にまとめた。実施例３２同様、表−３
の結果より、反射率の差：ΔＲ％＝（試料のＲ％）−
（ブランクのＲ％）（ブランク：尿試料の場合は正常
尿、酵素液の場合はトリス緩衝液とする）をみれば、本
発明のアミノ酸エステルを用いた試験片がエラスターゼ
および白血球に対し良好に、かつ特異的に発色している
ことがわかる。また、試験紙に限らず本実施例のごとき
試験片においてもエラスターゼおよび白血球が検出でき
ることがわかる。

【００６１】

【表３】

【００６２】実施例３４尿中白血球およびエラスターゼを検出する試験片１）試験片の作成０.１moｌ／ｌホウ酸（０.１mol/l塩化カリウム含有）
５０mlと０.１mol/l水酸化ナトリウム３.９mlを混合
し、精製水で１００mlとした。この緩衝液１０mlにポリ
ビニルアルコール（分子量：１３０００〜２３０００）
１.５gとポリエチレングリコール（４０００）０.５gを
溶かした（溶液−Ｉ）。サンドブラスト処理した白色ポ
リブチレンテレフタレートシート（厚さ：５０μm）に
溶液−Ｉを２００μmの厚さで塗工し、循環式送風乾燥
機にて６０℃、３０分間乾燥した（フィルム−Ｉ）。フ
ァーストレッド−ＲＣ２７.３mg（０.１mmol）とアミ
ノ酸エステル（０.１mmol）をメタノール１０mlに溶か
した（溶液−II）。ｎ−デカノール５０mgをメタノール
１０mlに加えた後、ポリビニルピロリドン（Ｋ-９０）
１.５gとポリエチレングリコール（４０００）０.５gを
溶かした（溶液−III）。溶液−IIと溶液−IIIを混合し
た後、フィルム−Ｉの上に２００μmの厚さで塗工し、
循環式送風乾燥機にて５０℃、２０分間乾燥した（フィ
ルム−II）。得られたフィルム−IIを５×５mmに裁断
し、両面テープを用いてポリエチレンテレフタレートシ
ート（厚さ：１００μm，５×７０mm）の一端に貼り、
試験片とした。アミノ酸エステルとして化合物−２６，
２７，２９，３０（実施例−２６，２７，２９，３０を
参照）を使用した。２）試料実施例３１に同じ。３）測定試験片に試料５μl滴下し、恒温器で３７℃、２分間反
応させた。試料としてトリス緩衝液を用いた場合を対照
とし、各試験片の発色を目視判定した。なお、トリス緩
衝液を用いた場合には、反応中試験紙の色変化はなかっ
た。４）結果目視判定結果を表−４に示す。

【００６３】

【表４】この結果より、本発明のアミノ酸エステルが白血球ある
いはエラスターゼに対し良好に、かつ特異的に発色して
いることがわかり、有用な基質で有ることがわかる。ま
た、試験紙や錠剤状試験片に限らず本実施例のごときフ
ィルム状試験片においてもエラスターゼおよび白血球が
検出でき、各種の検出試薬への応用の多様性がある。

─────────────────────────────────────────────────────

【手続補正書】

【提出日】平成７年３月６日

【手続補正１】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】請求項１

【補正方法】変更

【補正内容】

【手続補正２】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】０００６

【補正方法】変更

【補正内容】

【０００６】

【課題を解決するための手段】すなわち、本発明は、
式：(Ｘ−Ｏ−Ａ−)n−Ｙ（Ｉ） [式中、Ｘは、ジアゾニウム塩とカップリングし、呈色
する式：Ｘ−ＯＨで示される芳香族化合物、複素環化合
物またはそれらの誘導体のＸ、Ａは、Ｌ−アミノ酸の残
基、nは、２以上の整数、Ｙは、アミノ酸のＮ−置換基
であって、炭素数１〜１０の非環状炭化水素または環状
炭化水素、飽和または不飽和複素環化合物、芳香族化合
物、珪素原子数１〜１０の有機珪素化合物若しくは単糖
または糖鎖が２〜１０のオリゴ糖の単一または複合体よ
り形成される化合物（これらの化合物には置換基が導入
されていてよい。また、複合体形成のために、異原子を
含んでいてもよい。）であり、同一または異なる２以上
のカルボニル基またはスルホニル基を有する化合物から
誘導される。]で示されるアミノ酸エステルを提供す
る。

フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号庁内整理番号ＦＩ技術表示箇所Ｃ０７Ｄ 231/52 295/12 Ｚ 307/68 309/32 311/18 405/14 ２０９Ｃ１２Ｑ 1/04 6807−4Ｂ 1/37 6807−4Ｂ

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】式：(Ｘ−Ｏ−Ａ−)n−Ｙ [式中、Ｘは、ジアゾニウム塩とカップリングし、呈色
する式：Ｘ−ＯＨで示される芳香族化合物、複素環化合
物またはそれらの誘導体のＸ、Ａは、Ｌ−アミノ酸の残
基、nは、２以上の整数、Ｙは、アミノ酸のＮ−置換基
であって、炭素数１〜１０の非環状炭化水素または環状
炭化水素、飽和または不飽和複素環化合物、芳香族化合
物、珪素原子数１〜１０の炭化珪素化合物若しくは単糖
または糖鎖が２〜１０のオリゴ糖の単一または複合体よ
り形成される化合物（これらの化合物には置換基が導入
されていてよい。また、複合体形成のために、異原子を
含んでいてもよい。）であり、同一または異なる２以上
のカルボニル基またはスルホニル基を有する化合物から
誘導される。]で示されるアミノ酸エステル。
【請求項２】式中のＡが、Ｌ−アラニンである請求項
１記載のアミノ酸エステル。
【請求項３】式中のnが、２である請求項１記載のア
ミノ酸エステル。
【請求項４】式中のＡがＬ−アラニンであり、式中n
が２である請求項１記載のアミノ酸エステル。
【請求項５】請求項１〜４のいずれかに記載のアミノ
酸エステルとジアゾニウム塩とを含んでなる、体液中の
白血球またはエラスターゼを検出するための試薬。