JPH07255305A - 植物組織又は幼植物体の培養方法 - Google Patents
植物組織又は幼植物体の培養方法Info
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- JPH07255305A JPH07255305A JP8220494A JP8220494A JPH07255305A JP H07255305 A JPH07255305 A JP H07255305A JP 8220494 A JP8220494 A JP 8220494A JP 8220494 A JP8220494 A JP 8220494A JP H07255305 A JPH07255305 A JP H07255305A
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Landscapes
- Cultivation Of Plants (AREA)
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【目的】本発明は、植物組織又は幼植物体を無糖培地で
光独立栄養培養するに際し、培養器内へ雑菌が侵入して
も、その繁殖を抑制して、植物組織又は幼植物体の培養
を円滑に行なうことができる、植物組織又は幼植物体の
培養方法を提供するものである。 【構成】本発明は、植物組織又は幼植物体を、ｐＨ３．
０〜４．５に調整した無糖培地で、光照射下及び炭酸ガ
ス含有空気雰囲気下に培養することを特徴としている。
光独立栄養培養するに際し、培養器内へ雑菌が侵入して
も、その繁殖を抑制して、植物組織又は幼植物体の培養
を円滑に行なうことができる、植物組織又は幼植物体の
培養方法を提供するものである。 【構成】本発明は、植物組織又は幼植物体を、ｐＨ３．
０〜４．５に調整した無糖培地で、光照射下及び炭酸ガ
ス含有空気雰囲気下に培養することを特徴としている。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は植物組織又は幼植物体の
培養方法に関する。植物組織又は幼植物体を培養器内で
培養し、培養して得られた植物体を培養器から取り出し
て栽培することが行なわれている。本発明は上記のよう
な植物組織又は幼植物体の培養方法の改良に関するもの
である。
培養方法に関する。植物組織又は幼植物体を培養器内で
培養し、培養して得られた植物体を培養器から取り出し
て栽培することが行なわれている。本発明は上記のよう
な植物組織又は幼植物体の培養方法の改良に関するもの
である。
【０００２】
【従来の技術】従来、植物組織又は幼植物体の培養方法
として一般に、植物組織又は幼植物体を、糖類を含有す
る有糖培地を入れた培養器内で従属栄養培養することが
行なわれている。ところが、かかる従来法には、その性
質上、培地が雑菌汚染を受け易く、これにより植物組織
又は幼植物体の培養に重大な支障をきたすという問題が
ある。
として一般に、植物組織又は幼植物体を、糖類を含有す
る有糖培地を入れた培養器内で従属栄養培養することが
行なわれている。ところが、かかる従来法には、その性
質上、培地が雑菌汚染を受け易く、これにより植物組織
又は幼植物体の培養に重大な支障をきたすという問題が
ある。
【０００３】そこで従来、植物組織又は幼植物体の培養
方法として、植物組織又は幼植物体を、糖類を含有しな
い無糖培地を入れた培養器内で光独立栄養培養すること
が提案されている（特開昭５４−５２７８７、特開平１
−１６５３１５、特開平４−２６２７２０、特開平５−
１５３６３）。ところが、かかる従来法でも、実際のと
ころ、培地が雑菌汚染を受け、これにより植物組織又は
幼植物体の培養に重大な支障をきたすという問題があ
る。
方法として、植物組織又は幼植物体を、糖類を含有しな
い無糖培地を入れた培養器内で光独立栄養培養すること
が提案されている（特開昭５４−５２７８７、特開平１
−１６５３１５、特開平４−２６２７２０、特開平５−
１５３６３）。ところが、かかる従来法でも、実際のと
ころ、培地が雑菌汚染を受け、これにより植物組織又は
幼植物体の培養に重大な支障をきたすという問題があ
る。
【０００４】植物組織又は幼植物体は培養器内で培養さ
れ、該培養器は培養室内に置かれる。しかし、培養器は
相応に密封されているものの、完全に気密化されている
というわけではなく、また培養室内の雰囲気は相応に菌
管理がなされているものの、完全に無菌化されていると
いうわけでもない。実際のところは、培養中に、空気中
に浮遊している雑菌が培養器内へ侵入するのを避けられ
ないのである。特に、培養した幼植物体を他の培養器へ
移植するに際しては、これをクリーンベンチ内で行なう
としても、作業者や使用する道具に付着している雑菌が
培養器内へ侵入し易い。培養器内へ雑菌が侵入し、繁殖
すると、植物組織又は幼植物体の培養に重大な支障をき
たす。
れ、該培養器は培養室内に置かれる。しかし、培養器は
相応に密封されているものの、完全に気密化されている
というわけではなく、また培養室内の雰囲気は相応に菌
管理がなされているものの、完全に無菌化されていると
いうわけでもない。実際のところは、培養中に、空気中
に浮遊している雑菌が培養器内へ侵入するのを避けられ
ないのである。特に、培養した幼植物体を他の培養器へ
移植するに際しては、これをクリーンベンチ内で行なう
としても、作業者や使用する道具に付着している雑菌が
培養器内へ侵入し易い。培養器内へ雑菌が侵入し、繁殖
すると、植物組織又は幼植物体の培養に重大な支障をき
たす。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】本発明が解決しようと
する課題は、植物組織又は幼植物体を無糖培地で光独立
栄養培養する従来法でも、培養器内へ雑菌が侵入して繁
殖するのを避けられず、これにより植物組織又は幼植物
体の培養に重大な支障をきたす点である。
する課題は、植物組織又は幼植物体を無糖培地で光独立
栄養培養する従来法でも、培養器内へ雑菌が侵入して繁
殖するのを避けられず、これにより植物組織又は幼植物
体の培養に重大な支障をきたす点である。
【０００６】
【課題を解決するための手段】しかして本発明者らは、
上記の課題を解決するべく研究した結果、培養器内へ雑
菌が侵入するのを避けられない実情の下では、培養器内
へ雑菌が侵入しても、それが繁殖するのを抑制すること
が肝要であり、そのためには、植物組織又は幼植物体を
無糖培地で光独立栄養培養するが、この際に所定のｐＨ
域に調整した無糖培地を用いるのが有効であることを見
出した。
上記の課題を解決するべく研究した結果、培養器内へ雑
菌が侵入するのを避けられない実情の下では、培養器内
へ雑菌が侵入しても、それが繁殖するのを抑制すること
が肝要であり、そのためには、植物組織又は幼植物体を
無糖培地で光独立栄養培養するが、この際に所定のｐＨ
域に調整した無糖培地を用いるのが有効であることを見
出した。
【０００７】すなわち本発明は、植物組織又は幼植物体
を、ｐＨ３．０〜４．５に調整した無糖培地で、光照射
下及び炭酸ガス含有空気雰囲気下に培養することを特徴
とする植物組織又は幼植物体の培養方法に係る。
を、ｐＨ３．０〜４．５に調整した無糖培地で、光照射
下及び炭酸ガス含有空気雰囲気下に培養することを特徴
とする植物組織又は幼植物体の培養方法に係る。
【０００８】本発明において対象となる植物組織又は幼
植物体は、サラダ菜、アスパラガス等の野菜類、イチ
ゴ、メロン等の果実類、ラン、バラ、ユリ、シクラメン
等の花卉類の組織（細胞）又は該組織を培養した幼植物
体（幼苗）である。
植物体は、サラダ菜、アスパラガス等の野菜類、イチ
ゴ、メロン等の果実類、ラン、バラ、ユリ、シクラメン
等の花卉類の組織（細胞）又は該組織を培養した幼植物
体（幼苗）である。
【０００９】本発明では、培養器に無糖培地を入れ、該
無糖培地で植物組織又は幼植物体を光独立栄養培養す
る。培養器は透明のガラス製又はプラスチックス製の密
封可能な光透過性のもので且つガス交換が可能なものを
用いる。かかる培養器に無糖培地を入れる。無糖培地は
固体培地又は液体培地のどちらでもよいが、液体培地が
好ましい。追肥に便利であるからである。無糖培地は、
無機塩を含有する、ｐＨ３．０〜４．５に調整したもの
を用いる。ｐＨ３．０未満では、侵入した雑菌の繁殖を
抑制することはできるが、植物組織又は幼植物体の培養
それ自体に支障をきたし、逆にｐＨ４．５超では、侵入
した雑菌の繁殖を充分に抑制することができない。
無糖培地で植物組織又は幼植物体を光独立栄養培養す
る。培養器は透明のガラス製又はプラスチックス製の密
封可能な光透過性のもので且つガス交換が可能なものを
用いる。かかる培養器に無糖培地を入れる。無糖培地は
固体培地又は液体培地のどちらでもよいが、液体培地が
好ましい。追肥に便利であるからである。無糖培地は、
無機塩を含有する、ｐＨ３．０〜４．５に調整したもの
を用いる。ｐＨ３．０未満では、侵入した雑菌の繁殖を
抑制することはできるが、植物組織又は幼植物体の培養
それ自体に支障をきたし、逆にｐＨ４．５超では、侵入
した雑菌の繁殖を充分に抑制することができない。
【００１０】無糖培地は抗菌剤を添加したものを用いる
のがより有効である。かかる抗菌剤としては、ポリリジ
ン、ペニシリン、ゲンタマイシン、次亜塩素酸ナトリウ
ム等があり、ポリリジンの場合は０．１〜１０％の濃度
となるように、またペニシリンの場合は１０〜１００ｐ
ｐｍの濃度となるように、更にゲンタマイシンの場合は
１〜１００ｐｐｍの濃度となるように添加したものを用
いるが、次亜塩素酸ナトリウムを０．２５〜１０ｐｐｍ
の濃度となるように添加したものを用いるのが好まし
い。これらの抗菌剤は侵入した雑菌の繁殖を抑制すると
いうよりもむしろ侵入した時点で雑菌を殺すのに効果が
あり、この意味で次亜塩素酸ナトリウムはより効果があ
る。次亜塩素酸ナトリウムを添加する場合、その濃度が
０．２５ｐｐｍ未満では充分な効果が得られず、逆に１
０ｐｐｍ超では植物組織又は幼植物体の培養それ自体に
支障をきたす。
のがより有効である。かかる抗菌剤としては、ポリリジ
ン、ペニシリン、ゲンタマイシン、次亜塩素酸ナトリウ
ム等があり、ポリリジンの場合は０．１〜１０％の濃度
となるように、またペニシリンの場合は１０〜１００ｐ
ｐｍの濃度となるように、更にゲンタマイシンの場合は
１〜１００ｐｐｍの濃度となるように添加したものを用
いるが、次亜塩素酸ナトリウムを０．２５〜１０ｐｐｍ
の濃度となるように添加したものを用いるのが好まし
い。これらの抗菌剤は侵入した雑菌の繁殖を抑制すると
いうよりもむしろ侵入した時点で雑菌を殺すのに効果が
あり、この意味で次亜塩素酸ナトリウムはより効果があ
る。次亜塩素酸ナトリウムを添加する場合、その濃度が
０．２５ｐｐｍ未満では充分な効果が得られず、逆に１
０ｐｐｍ超では植物組織又は幼植物体の培養それ自体に
支障をきたす。
【００１１】植物組織又は幼植物体を、ｐＨ３．０〜
４．５に調整した無糖培地で、好ましくは更に次亜塩素
酸ナトリウムを０．２５〜１０ｐｐｍの濃度となるよう
に添加した無糖培地で、光照射下及び炭酸ガス含有空気
雰囲気下に光独立栄養培養する。光独立栄養培養が可能
な条件であれば、光強度及び炭酸ガス濃度は特に制限さ
れないが、光強度２０〜５００μmol／ｍ2／ｓの光照射
下及び炭酸ガス濃度３００〜７０００ｐｐｍの炭酸ガス
含有空気雰囲気下に光独立栄養培養するのが好ましい。
植物組織又は幼植物体の培養を促すことができるからで
ある。培養器内の炭酸ガス濃度は、培養器内の雰囲気ガ
スの換気、培養器内への炭酸ガス含有空気の通気によっ
て保持することができる。
４．５に調整した無糖培地で、好ましくは更に次亜塩素
酸ナトリウムを０．２５〜１０ｐｐｍの濃度となるよう
に添加した無糖培地で、光照射下及び炭酸ガス含有空気
雰囲気下に光独立栄養培養する。光独立栄養培養が可能
な条件であれば、光強度及び炭酸ガス濃度は特に制限さ
れないが、光強度２０〜５００μmol／ｍ2／ｓの光照射
下及び炭酸ガス濃度３００〜７０００ｐｐｍの炭酸ガス
含有空気雰囲気下に光独立栄養培養するのが好ましい。
植物組織又は幼植物体の培養を促すことができるからで
ある。培養器内の炭酸ガス濃度は、培養器内の雰囲気ガ
スの換気、培養器内への炭酸ガス含有空気の通気によっ
て保持することができる。
【００１２】
試験区分１ 培養器として、容量３００mlの三角フラスコに１００ml
の粒状ロックウールを入れ、ゴム栓で密栓したものを用
いた。ゴム栓には直径１０mmの孔を開け、該孔に除菌フ
ィルタを被着した。培地として、ｐＨ２．５、３．０、
３．５、４．０、４．５、５．０又は５．５に調整し
た、合計７区分の、無機塩のみを含有するＭＳ液体培地
を用いた。培養器及び合計７区分の各培地をオートクレ
ーブで滅菌した後、開栓して、培養器に各培地を８０ml
入れた。クリーンベンチ内又は培養室内で、培養器に別
に培養しておいた発芽後５か月目の胡蝶蘭の幼苗を１６
苗移植し、密栓した。合計７区分の各培地毎に、同様の
移植をそれぞれ１００個行なった。移植後、各培養器を
培養室内に置き、室内の雰囲気の炭酸ガス濃度を５００
ｐｐｍに保持し、２５℃で、明期の光強度が２５μmol
／ｍ2／ｓである１２時間明期の条件下に、４か月間培
養した。培養後、合計７区分の各培地毎に、雑菌汚染の
発生率（％）を調査し、その結果を表１に示した。また
培養後に雑菌汚染が認められなかったものについて、合
計７区分の各培地毎に、幼苗の活着率（％）及び平均生
体重（ｇ）を調査し、その結果を表２に示した。
の粒状ロックウールを入れ、ゴム栓で密栓したものを用
いた。ゴム栓には直径１０mmの孔を開け、該孔に除菌フ
ィルタを被着した。培地として、ｐＨ２．５、３．０、
３．５、４．０、４．５、５．０又は５．５に調整し
た、合計７区分の、無機塩のみを含有するＭＳ液体培地
を用いた。培養器及び合計７区分の各培地をオートクレ
ーブで滅菌した後、開栓して、培養器に各培地を８０ml
入れた。クリーンベンチ内又は培養室内で、培養器に別
に培養しておいた発芽後５か月目の胡蝶蘭の幼苗を１６
苗移植し、密栓した。合計７区分の各培地毎に、同様の
移植をそれぞれ１００個行なった。移植後、各培養器を
培養室内に置き、室内の雰囲気の炭酸ガス濃度を５００
ｐｐｍに保持し、２５℃で、明期の光強度が２５μmol
／ｍ2／ｓである１２時間明期の条件下に、４か月間培
養した。培養後、合計７区分の各培地毎に、雑菌汚染の
発生率（％）を調査し、その結果を表１に示した。また
培養後に雑菌汚染が認められなかったものについて、合
計７区分の各培地毎に、幼苗の活着率（％）及び平均生
体重（ｇ）を調査し、その結果を表２に示した。
【００１３】
【表１】
【００１４】
【表２】
【００１５】試験区分２ オートクレーブで滅菌した後の、ｐＨ４．５に調整した
ＭＳ液体培地に、次亜塩素酸ナトリウムを、０．１、
０．２５、０．５、１．０、５．０、１０．０又は１
５．０ｐｐｍとなるように添加し、次亜塩素酸ナトリウ
ム０ｐｐｍの無添加区を含め、合計８区分の培地を用い
たこと以外は試験区分１の場合と同様に移植し、培養し
た。培養後、合計８区分の各培地毎に、雑菌汚染の発生
率（％）を調査し、その結果を表３に示した。また培養
後に雑菌汚染が認められなかったものについて、合計８
区分の各培地毎に、幼苗の活着率（％）及び平均生体重
（ｇ）を調査し、その結果を表４に示した。
ＭＳ液体培地に、次亜塩素酸ナトリウムを、０．１、
０．２５、０．５、１．０、５．０、１０．０又は１
５．０ｐｐｍとなるように添加し、次亜塩素酸ナトリウ
ム０ｐｐｍの無添加区を含め、合計８区分の培地を用い
たこと以外は試験区分１の場合と同様に移植し、培養し
た。培養後、合計８区分の各培地毎に、雑菌汚染の発生
率（％）を調査し、その結果を表３に示した。また培養
後に雑菌汚染が認められなかったものについて、合計８
区分の各培地毎に、幼苗の活着率（％）及び平均生体重
（ｇ）を調査し、その結果を表４に示した。
【００１６】
【表３】
【００１７】
【表４】
【００１８】
【発明の効果】既に明らかなように、以上説明した本発
明には、植物組織又は幼植物体を無糖培地で光独立栄養
培養するに際し、培養器内へ雑菌が侵入しても、その繁
殖を抑制して、植物組織又は幼植物体の培養を円滑に行
なうことができるという効果がある。
明には、植物組織又は幼植物体を無糖培地で光独立栄養
培養するに際し、培養器内へ雑菌が侵入しても、その繁
殖を抑制して、植物組織又は幼植物体の培養を円滑に行
なうことができるという効果がある。
Claims (4)
- 【請求項１】 植物組織又は幼植物体を、ｐＨ３．０〜
４．５に調整した無糖培地で、光照射下及び炭酸ガス含
有空気雰囲気下に培養することを特徴とする植物組織又
は幼植物体の培養方法。 - 【請求項２】 抗菌剤を添加した無糖培地で培養する請
求項１記載の植物組織又は幼植物体の培養方法。 - 【請求項３】 抗菌剤として次亜塩素酸ナトリウムを
０．２５〜１０ｐｐｍの濃度となるように添加した無糖
培地で培養する請求項２記載の植物組織又は幼植物体の
培養方法。 - 【請求項４】 光強度２０〜５００μmol／ｍ2／ｓの光
照射下及び炭酸ガス濃度３００〜７０００ｐｐｍの炭酸
ガス含有空気雰囲気下に培養する請求項１、２又は３記
載の植物組織又は幼植物体の培養方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP8220494A JPH07255305A (ja) | 1994-03-28 | 1994-03-28 | 植物組織又は幼植物体の培養方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP8220494A JPH07255305A (ja) | 1994-03-28 | 1994-03-28 | 植物組織又は幼植物体の培養方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH07255305A true JPH07255305A (ja) | 1995-10-09 |
Family
ID=13767901
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP8220494A Pending JPH07255305A (ja) | 1994-03-28 | 1994-03-28 | 植物組織又は幼植物体の培養方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH07255305A (ja) |
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1070450A1 (en) | 1999-07-21 | 2001-01-24 | Nisshinbo Industries, Inc. | Method for plant tissue culture |
| KR100340728B1 (ko) * | 2000-06-21 | 2002-06-20 | 윤여중 | 식물조직배양시 곰팡이 및 세균 발생을 억제하는 방법 및그 살균제 조성물 |
| WO2005058022A1 (fr) * | 2003-12-19 | 2005-06-30 | Yongtai Zhang | Dispositif combine pour la reproduction de tissus vegetaux sans sucre et procede associe |
| CN102726290A (zh) * | 2011-04-12 | 2012-10-17 | 山东省烟台农业学校 | 消除组织培养苗污染的方法 |
| JP2013111024A (ja) * | 2011-11-29 | 2013-06-10 | Excel Clean Techno Co Ltd | 植物栽培用ゲル培地および植物栽培方法 |
| WO2020203947A1 (ja) * | 2019-03-29 | 2020-10-08 | キリンホールディングス株式会社 | 有用物質を蓄積する植物体 |
-
1994
- 1994-03-28 JP JP8220494A patent/JPH07255305A/ja active Pending
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1070450A1 (en) | 1999-07-21 | 2001-01-24 | Nisshinbo Industries, Inc. | Method for plant tissue culture |
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