JPH0731193B2 - 蛋白質結合ハプテン - Google Patents
蛋白質結合ハプテンInfo
- Publication number
- JPH0731193B2 JPH0731193B2 JP6694186A JP6694186A JPH0731193B2 JP H0731193 B2 JPH0731193 B2 JP H0731193B2 JP 6694186 A JP6694186 A JP 6694186A JP 6694186 A JP6694186 A JP 6694186A JP H0731193 B2 JPH0731193 B2 JP H0731193B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- compound
- protein
- solution
- enzyme
- residue
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
Landscapes
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】 産業上の利用分野 本発明は下記式で表わされる抗てんかん剤の免疫分析、
特に酵素免疫分析（以下EIAという）に利用される蛋白
質結合ハプテンに関する。
特に酵素免疫分析（以下EIAという）に利用される蛋白
質結合ハプテンに関する。
従来技術および本発明が解決せんとする問題点 前記化合物［Ｉ］は有用な抗てんかん剤として知られて
いる［特開昭54−163823］。
いる［特開昭54−163823］。
化合物［Ｉ］の部分てんかん症の治療における血中有効
濃度は約６〜40μg/mlといわれている。各患者に体重当
り同量の化合物［Ｉ］を投与しても一定の血中濃度は得
られない。これは薬剤の吸収，分布，代謝，排泄等に固
体差があるためで、更に併用される他の薬剤との相互作
用による影響も考えられる。このために各患者における
血中濃度を測定して、上記した望ましいレベルを保ち、
できるだけ副作用の発生を少なくするように薬剤を投与
すること（therapeutic drug monitoring）が必要とな
る。
濃度は約６〜40μg/mlといわれている。各患者に体重当
り同量の化合物［Ｉ］を投与しても一定の血中濃度は得
られない。これは薬剤の吸収，分布，代謝，排泄等に固
体差があるためで、更に併用される他の薬剤との相互作
用による影響も考えられる。このために各患者における
血中濃度を測定して、上記した望ましいレベルを保ち、
できるだけ副作用の発生を少なくするように薬剤を投与
すること（therapeutic drug monitoring）が必要とな
る。
以上の理由から、迅速，正確かつ簡便な化合物［Ｉ］の
定量法の開発が望まれている。現在、その定量は高速液
体クロマトグラフィー法（以下HPLC法という）によって
行われているが、分析には多量の被検体（血清の場合0.
5〜1ml以上）が必要であること、抽出操作等の前処理お
よび特殊な専用機器を要するなどの欠点があり、日常の
臨床検査に用いるには問題が多い。
定量法の開発が望まれている。現在、その定量は高速液
体クロマトグラフィー法（以下HPLC法という）によって
行われているが、分析には多量の被検体（血清の場合0.
5〜1ml以上）が必要であること、抽出操作等の前処理お
よび特殊な専用機器を要するなどの欠点があり、日常の
臨床検査に用いるには問題が多い。
化合物［Ｉ］に特異的に結合する抗体を調製することが
できれば、少量の被検体で、前処理が不要な種々の免疫
分析法により化合物［Ｉ］を定量することが可能であ
る。化合物［Ｉ］に対する抗体は、化合物［Ｉ］を動物
に投与しても得られない。化合物［Ｉ］に対する抗体は
ハプテン、すなわち化合物［Ｉ］またはこれに類する化
合物とアルブミンの如き高分子蛋白質との結合物を動物
に非経口投与することにより得られる。しかし、化合物
［Ｉ］の３位のスルファモイル部分を介して結合した化
合物［Ｉ］と高分子蛋白質との結合物を動物に非経口投
与して得た抗体は、後記比較例１に示すように免疫分析
に適さないものであった。
できれば、少量の被検体で、前処理が不要な種々の免疫
分析法により化合物［Ｉ］を定量することが可能であ
る。化合物［Ｉ］に対する抗体は、化合物［Ｉ］を動物
に投与しても得られない。化合物［Ｉ］に対する抗体は
ハプテン、すなわち化合物［Ｉ］またはこれに類する化
合物とアルブミンの如き高分子蛋白質との結合物を動物
に非経口投与することにより得られる。しかし、化合物
［Ｉ］の３位のスルファモイル部分を介して結合した化
合物［Ｉ］と高分子蛋白質との結合物を動物に非経口投
与して得た抗体は、後記比較例１に示すように免疫分析
に適さないものであった。
免疫分析に用いる化合物［Ｉ］に対する抗体は、化合物
［Ｉ］（非標識抗原）および標識された化合物［Ｉ］
（標識抗原）の双方とほぼ同じ強さで反応することが要
求される。更に、抗体は化合物［Ｉ］と類似する化合
物、例えば化合物［Ｉ］の代謝物と反応しないことが必
要である。抗体が非標識抗原よりも標識抗原とはるかに
強く反応するとか、化合物［Ｉ］以外の化合物と反応す
るときは、免疫分析そのものが成立しないこともある。
このような免疫分析に適した化合物［Ｉ］に対する抗体
は未だ調製されていない。
［Ｉ］（非標識抗原）および標識された化合物［Ｉ］
（標識抗原）の双方とほぼ同じ強さで反応することが要
求される。更に、抗体は化合物［Ｉ］と類似する化合
物、例えば化合物［Ｉ］の代謝物と反応しないことが必
要である。抗体が非標識抗原よりも標識抗原とはるかに
強く反応するとか、化合物［Ｉ］以外の化合物と反応す
るときは、免疫分析そのものが成立しないこともある。
このような免疫分析に適した化合物［Ｉ］に対する抗体
は未だ調製されていない。
問題を解決するための手段 本発明は一般式 ［式中、Ｔは蛋白質残基を意味し、Ｘは結合基を意味す
る］ で表わされる蛋白質結合ハプテン（以下、単に結合物と
いう）に関する。
る］ で表わされる蛋白質結合ハプテン（以下、単に結合物と
いう）に関する。
ここにおいて、Ｔで表わされる蛋白質残基の例として
は、ウシ血清アルブミン、グロブリン、ヘモシアニンな
どの免疫原としての蛋白質残基あるいはβ−Ｄ−ガラク
トシダーゼ、ペルオキシダーゼ、リパーゼ、アルカリフ
ォスファターゼ、グルコース−６−ホスフェートデヒド
ロゲナーゼ等の酵素標識剤としての酵素蛋白質残基が挙
げられる。
は、ウシ血清アルブミン、グロブリン、ヘモシアニンな
どの免疫原としての蛋白質残基あるいはβ−Ｄ−ガラク
トシダーゼ、ペルオキシダーゼ、リパーゼ、アルカリフ
ォスファターゼ、グルコース−６−ホスフェートデヒド
ロゲナーゼ等の酵素標識剤としての酵素蛋白質残基が挙
げられる。
更に具体的な結合物［II］の例としては、一般式［II］
における結合基Ｘが次式で表わされる場合が挙げられ
る。
における結合基Ｘが次式で表わされる場合が挙げられ
る。
［(U)p(U1)q(U2)r−Ｗ−(CH2)n−Ｚ−］ （式中、Ｚは単結合、−NH−、−Ｓ−、−Ｏ−、−CO−
または低級アルキレン基を意味し、かつＺはベンズイソ
キサゾール環の５、６または７位と結合している。
または低級アルキレン基を意味し、かつＺはベンズイソ
キサゾール環の５、６または７位と結合している。
ｎは０ないし３の整数であり、Ｗは＝Ｎ−、−NH−また
は−Ｓ−であり、Ｕは＝CH−であり、U1は低級アルキレ
ン基であり、U2はフェニレン基または であり、ｐ、ｑおよびｒは０ないし２の整数である。但
し、Ｕ、U1、U2の順序は任意である。）特に好ましい結
合物［II］は、Ｚがベンズイソキサゾール環の５または
６位に結合している場合である。結合基Ｘを介して結合
している蛋白質残基Ｔと化合物［Ｉ］に対応する部分
（以下ハプテン部分という）との結合割合は、一般式
［II］には表示されていないが、前者１モル相当に対し
後者が１〜50モル相当である。両者の結合割合は結合反
応時において後述の化合物［III］や結合剤の種類を変
えるとか、これらの使用割合を変えるとか、または反応
条件を変えることにより調節できる。
は−Ｓ−であり、Ｕは＝CH−であり、U1は低級アルキレ
ン基であり、U2はフェニレン基または であり、ｐ、ｑおよびｒは０ないし２の整数である。但
し、Ｕ、U1、U2の順序は任意である。）特に好ましい結
合物［II］は、Ｚがベンズイソキサゾール環の５または
６位に結合している場合である。結合基Ｘを介して結合
している蛋白質残基Ｔと化合物［Ｉ］に対応する部分
（以下ハプテン部分という）との結合割合は、一般式
［II］には表示されていないが、前者１モル相当に対し
後者が１〜50モル相当である。両者の結合割合は結合反
応時において後述の化合物［III］や結合剤の種類を変
えるとか、これらの使用割合を変えるとか、または反応
条件を変えることにより調節できる。
結合物を常法によりウサギ，モルモット，ヤギの如き哺
乳動物に繰り返し非経口投与すれば化合物［Ｉ］に対す
る抗体が得られる。
乳動物に繰り返し非経口投与すれば化合物［Ｉ］に対す
る抗体が得られる。
本発明の結合物を抗体を得るための免疫原として用いる
ときには、ハプテンがより多くの割合で結合するように
条件を設定するのがよい。この場合の蛋白質残基Ｔは、
反応の結果少々変性していても特に問題はない。
ときには、ハプテンがより多くの割合で結合するように
条件を設定するのがよい。この場合の蛋白質残基Ｔは、
反応の結果少々変性していても特に問題はない。
蛋白質残基が酵素残基である本発明の結合物を免疫原と
して用いることは可能である。しかし、高価な酵素をこ
のような目的で用いることは好ましいことではない。か
かる結合物はEIA法における酵素標識抗原として用いる
のが好ましい。酵素標識抗原としての本発明の結合物
は、酵素残基１モル相当に対してハプテン部分が１〜10
モル相当、好ましくは１〜５モル相当から構成される。
この場合、両者の結合は酵素活性が失活しないような緩
和な条件下で行われる。
して用いることは可能である。しかし、高価な酵素をこ
のような目的で用いることは好ましいことではない。か
かる結合物はEIA法における酵素標識抗原として用いる
のが好ましい。酵素標識抗原としての本発明の結合物
は、酵素残基１モル相当に対してハプテン部分が１〜10
モル相当、好ましくは１〜５モル相当から構成される。
この場合、両者の結合は酵素活性が失活しないような緩
和な条件下で行われる。
一般式［II］で表わされる本発明の結合物は、例えば次
の一般式［III］ ［式中、Ｙは直接あるいは結合剤により蛋白質と結合し
得る基を意味する］ で表わされる化合物と先に挙げた蛋白質とを結合させる
ことにより得られる。通常、蛋白質と化合物［III］と
の結合は結合剤の助けをかりることにより行われる。化
合物［III］における官能基Ｙと結合剤の種類はこの分
野で通常用いられるものが選択される。なお、化合物
［III］と蛋白質とがスルファモイル部分を介して結合
することはできるだけ避るべきである。そのためには適
切な官能基Ｙおよび結合剤を選択するとか、化学当量よ
りも少い量の結合剤を用いるとか、あるいは緩和な結合
条件を選ぶ、とかが行われる。例えば、官能基Ｙとして
Ｈ−Ｗ′−(CH2)n−Ｚ−（Ｚおよびｎは前掲と同じであ
り、Ｗ′は−NH−または−Ｓ−である）で表わされる基
を選択し、そして結合剤としてグルタルアルデヒドや次
式で表われるマレイミド誘導体を選択すれば、不適当な
結合物の生成が少くてすむ。
の一般式［III］ ［式中、Ｙは直接あるいは結合剤により蛋白質と結合し
得る基を意味する］ で表わされる化合物と先に挙げた蛋白質とを結合させる
ことにより得られる。通常、蛋白質と化合物［III］と
の結合は結合剤の助けをかりることにより行われる。化
合物［III］における官能基Ｙと結合剤の種類はこの分
野で通常用いられるものが選択される。なお、化合物
［III］と蛋白質とがスルファモイル部分を介して結合
することはできるだけ避るべきである。そのためには適
切な官能基Ｙおよび結合剤を選択するとか、化学当量よ
りも少い量の結合剤を用いるとか、あるいは緩和な結合
条件を選ぶ、とかが行われる。例えば、官能基Ｙとして
Ｈ−Ｗ′−(CH2)n−Ｚ−（Ｚおよびｎは前掲と同じであ
り、Ｗ′は−NH−または−Ｓ−である）で表わされる基
を選択し、そして結合剤としてグルタルアルデヒドや次
式で表われるマレイミド誘導体を選択すれば、不適当な
結合物の生成が少くてすむ。
（式中、Ｒはフェニレン基または低級アルキレン基を意
味する）。
味する）。
なお、化合物［III］はジャーナル オブ メディシナ
ル ケミストリー（J.Medicinal Chem.）22、（２）180
（1979）に記載の方法またはこれに準ずる方法等により
製造できる。
ル ケミストリー（J.Medicinal Chem.）22、（２）180
（1979）に記載の方法またはこれに準ずる方法等により
製造できる。
かくして得られる本発明の結合物は化合物［Ｉ］の免疫
分析における抗体を得るための免疫原として、またEIA
法における酵素標識抗原として有用である。
分析における抗体を得るための免疫原として、またEIA
法における酵素標識抗原として有用である。
具体例 次に実施例、参考例および比較例を挙げて本発明を更に
詳細に説明する。
詳細に説明する。
実施例１ ウシ血清アルブミン結合物の調製 ウシ血清アルブミンの0.2Mリン酸緩衝溶液（pH7、50mg/
2.5ml）に５−アミノ−３−スルファモイルメチル−1,2
−ベンズイソオキサゾールの0.1N塩酸溶液（15mg/0.5m
l）を加え、さらに重炭酸水素ナトリウム粉末を添加しp
Hを７に調節する。攪拌下、0.02Mグルタルアルデヒド2.
5mlを滴下し、室温で２時間攪拌する。つぎに1Mリジン
溶液（pH7.5）0.25mlを添加して反応を停止し、0.9％塩
化ナトリウム水溶液2lに対し一昼夜透析し、さらに水2l
に対して一昼夜透析する。これを凍結乾燥して免疫原で
あるウシ血清アルブミン結合物39.2mgを得る。
2.5ml）に５−アミノ−３−スルファモイルメチル−1,2
−ベンズイソオキサゾールの0.1N塩酸溶液（15mg/0.5m
l）を加え、さらに重炭酸水素ナトリウム粉末を添加しp
Hを７に調節する。攪拌下、0.02Mグルタルアルデヒド2.
5mlを滴下し、室温で２時間攪拌する。つぎに1Mリジン
溶液（pH7.5）0.25mlを添加して反応を停止し、0.9％塩
化ナトリウム水溶液2lに対し一昼夜透析し、さらに水2l
に対して一昼夜透析する。これを凍結乾燥して免疫原で
あるウシ血清アルブミン結合物39.2mgを得る。
参考例１ 抗体の調製 実施例１で得た結合物を0.9％塩化ナトリウム水溶液に
溶解して１％溶液となす。これに等容量のフロインドの
完全アジュバントを加えて乳化したものをウサギの足蹠
左右１ケ所、背部皮下８ケ所にそれぞれ0.1mlずつ注射
する。２週間後に背部皮下５ケ所に0.1mlずる注射す
る。その後２週間毎に６回注射し、最終注射の10日後に
頸動脈から全血を採取し、常法により抗体（抗血清）を
得る。
溶解して１％溶液となす。これに等容量のフロインドの
完全アジュバントを加えて乳化したものをウサギの足蹠
左右１ケ所、背部皮下８ケ所にそれぞれ0.1mlずつ注射
する。２週間後に背部皮下５ケ所に0.1mlずる注射す
る。その後２週間毎に６回注射し、最終注射の10日後に
頸動脈から全血を採取し、常法により抗体（抗血清）を
得る。
実施例２ 酵素結合物（酵素標識抗原）の調製 大腸菌由来β−Ｄ−ガラクトシダーゼ（ベーリンガー社
製）水溶液（10mg/ml）0.1mlを0.2Mリン酸緩衝液（pH
7）1mlと５−アミノ−３−スルファモイルメチル−1,2
−ベンズイソオキサゾールの0.1N塩酸溶液（5mg/ml）0.
1mlの混液に添加し混合する。これを攪拌しながら1.5％
グルタルデヒド水溶液0.1mlを添加し室温で30分間攪拌
する。この溶液を0.02Mリン酸緩衝液（pH7）−0.9％塩
化ナトリウム水溶液で平衡化したセファデックスG25
（ファルマシア社製）カラム（２×25cm）にかけ同緩衝
液で溶出し、5mlずつ分画する。酵素活性の高い６〜８
番目の分画を集め、pM30膜（アミコン社製）で限外濾過
し、膜上に残った残渣を同緩衝液100mlで洗浄後、8mlの
0.9％塩化ナトリウム−0.1％ウシ血清アルブミン−0.04
Mリン酸緩衝液（pH7）（以下緩衝液Ａという）で洗い出
して最終容量8mlとなしたものを酵素標識抗原液として
冷所保存する。
製）水溶液（10mg/ml）0.1mlを0.2Mリン酸緩衝液（pH
7）1mlと５−アミノ−３−スルファモイルメチル−1,2
−ベンズイソオキサゾールの0.1N塩酸溶液（5mg/ml）0.
1mlの混液に添加し混合する。これを攪拌しながら1.5％
グルタルデヒド水溶液0.1mlを添加し室温で30分間攪拌
する。この溶液を0.02Mリン酸緩衝液（pH7）−0.9％塩
化ナトリウム水溶液で平衡化したセファデックスG25
（ファルマシア社製）カラム（２×25cm）にかけ同緩衝
液で溶出し、5mlずつ分画する。酵素活性の高い６〜８
番目の分画を集め、pM30膜（アミコン社製）で限外濾過
し、膜上に残った残渣を同緩衝液100mlで洗浄後、8mlの
0.9％塩化ナトリウム−0.1％ウシ血清アルブミン−0.04
Mリン酸緩衝液（pH7）（以下緩衝液Ａという）で洗い出
して最終容量8mlとなしたものを酵素標識抗原液として
冷所保存する。
参考例２ EIA法による化合物［Ｉ］の定量 試薬 標準抗原溶液 化合物［Ｉ］をメタノールに溶解し、100μg/mlの溶液
となす。用時、これを緩衝液Ａで希釈して標準抗原溶液
となす。
となす。用時、これを緩衝液Ａで希釈して標準抗原溶液
となす。
酵素標識抗原溶液 実施例２で得た酵素標識抗原液を緩衝液Ａで100倍希釈
する。
する。
抗体溶液 参考例１で得た抗血清を緩衝液Ａで1000倍希釈する。
不溶化第二抗体溶液 抗ウサギ1gGヤギ血清（マイルス社製）と乳酸菌（ラク
トバチルス プランタラム ATCC-8014）の細胞壁とを
グルタルアルデヒドを用いて特開昭52-117419号明細書
の実施例１に開示された方法に準じて結合し、調製す
る。
トバチルス プランタラム ATCC-8014）の細胞壁とを
グルタルアルデヒドを用いて特開昭52-117419号明細書
の実施例１に開示された方法に準じて結合し、調製す
る。
洗浄液 0.9％塩化ナトリウム水溶液 蛍光酵素基質溶液 0.15mM4−メチルウンベリフェリル β−Ｄ−ガラクト
ピラノシド−1mM塩化マグネシウム−緩衝液Ａからなる
溶液。
ピラノシド−1mM塩化マグネシウム−緩衝液Ａからなる
溶液。
反応停止溶液 0.1Mリン酸カリウム−水酸化ナトリウム溶液（pH11） 操作 試験管に被検体液100μｌ、試薬100μｌおよび試薬
100μｌをとり混合し、37℃で温置する。30分後、試薬
200μｌを加え同温度でさらに温置する。15分後、試
薬4mlを加えた後、10分間遠心分離（3000rpm）する。
上清を除去後、沈殿に500μｌの緩衝液Ａおよび100μｌ
の試薬を加え、37℃で温置する。10分後、試薬2.5m
lを加え、励起波長365nm、蛍光波長448nmにおける蛍光
強度を測定する。
100μｌをとり混合し、37℃で温置する。30分後、試薬
200μｌを加え同温度でさらに温置する。15分後、試
薬4mlを加えた後、10分間遠心分離（3000rpm）する。
上清を除去後、沈殿に500μｌの緩衝液Ａおよび100μｌ
の試薬を加え、37℃で温置する。10分後、試薬2.5m
lを加え、励起波長365nm、蛍光波長448nmにおける蛍光
強度を測定する。
参考例３ 交差反応と標準曲線 被検体として種々濃度の化合物［Ｉ］または種々濃度の
下記化合物ａないしｃを用い、参考例２同様のEIAを行
い第１図の結果を得た。第１図に示すように化合物
［Ｉ］と化合物ａ〜ｃの間には交差性は認められなかっ
た。なお、第１図における化合物［Ｉ］についての線は
標準曲線に相当する。
下記化合物ａないしｃを用い、参考例２同様のEIAを行
い第１図の結果を得た。第１図に示すように化合物
［Ｉ］と化合物ａ〜ｃの間には交差性は認められなかっ
た。なお、第１図における化合物［Ｉ］についての線は
標準曲線に相当する。
化合物ａ（化合物［Ｉ］の代謝物） ３−カルボキシ−1,2−ベンズイソオキサゾール 化合物ｂ（化合物［Ｉ］の代謝物） ３−（Ｎ−アセチルスルファモイルメチル）−1,2−ベ
ンズイソオキサゾール 化合物ｃ（化合物［Ｉ］の異性体） ２−スルファモイルメチル−1,3−ベンズイソオキサゾ
ール 参考例４ 血清中の化合物［Ｉ］の定量 化合物［Ｉ］を含有するヒト血清の３検体を緩衝液Ａで
50〜800倍まで希釈し、これを参考例２のEIA法で測定し
た。その結果、希釈倍数と測定値の間には原点を通る直
線関係が成立することが認められた。またこのヒト血清
検体に試験管あたり20ngの化合物［Ｉ］を添加したもの
についてEIA法で測定した。その結果、添加回収率は平
均99.8％と良好であった。
ンズイソオキサゾール 化合物ｃ（化合物［Ｉ］の異性体） ２−スルファモイルメチル−1,3−ベンズイソオキサゾ
ール 参考例４ 血清中の化合物［Ｉ］の定量 化合物［Ｉ］を含有するヒト血清の３検体を緩衝液Ａで
50〜800倍まで希釈し、これを参考例２のEIA法で測定し
た。その結果、希釈倍数と測定値の間には原点を通る直
線関係が成立することが認められた。またこのヒト血清
検体に試験管あたり20ngの化合物［Ｉ］を添加したもの
についてEIA法で測定した。その結果、添加回収率は平
均99.8％と良好であった。
参考例５ HPLC法とEIA法との比較 34例のヒト血清中の化合物［Ｉ］をEIA法ならびにHPLC
法（高速液体クロマトグラフィー法）で測定した。その
結果、両法には良好な相関関係が成立すことが認められ
た。
法（高速液体クロマトグラフィー法）で測定した。その
結果、両法には良好な相関関係が成立すことが認められ
た。
比較例１ 次の試薬を用いるほかは参考例２と同様な方法（比較
法）で患者血清中の化合物［Ｉ］を定量した。
法）で患者血清中の化合物［Ｉ］を定量した。
抗体：次の結合物を動物に投与して得られた抗体； （式中BSAは牛血清アルブミン残基を意味する。） 酵素標識抗原； （式中β−Ｄ−Galはβ−Ｄ−ガラクトシダーゼ残基を
意味する。） また同一検体について参考例２のEIA法（本発明法）お
よびHPLC法によっても化合物［Ｉ］を定量した。その結
果を次表に示す。
意味する。） また同一検体について参考例２のEIA法（本発明法）お
よびHPLC法によっても化合物［Ｉ］を定量した。その結
果を次表に示す。
前表に示すように、本発明法による定量結果はHPLC法の
それと極めてよく一致した。しかし比較法は、HPLC法と
必ずしも一致しなかった。
それと極めてよく一致した。しかし比較法は、HPLC法と
必ずしも一致しなかった。
【図面の簡単な説明】 第１図は抗体に対する化合物［Ｉ］および化合物［Ｉ］
の構造類似化合物の交差性を表わす。
の構造類似化合物の交差性を表わす。
Claims (5)
- 【請求項１】一般式 ［式中、Ｔは蛋白質残基を意味し、Ｘは結合基を意味す
る］ で表わされる蛋白質結合ハプテン。 - 【請求項２】一般式 ［式中、ＴおよびＸは前掲と同じものを意味する］ で表わされる特許請求の範囲第１項記載の蛋白質結合ハ
プテン。 - 【請求項３】Ｔがウシ血清アルブミン残基である特許請
求の範囲第１項記載の蛋白質結合ハプテン。 - 【請求項４】Ｔが酵素残基である特許請求の範囲第１項
記載の蛋白質結合ハプテン。 - 【請求項５】酵素残基がβ−Ｄ−ガラクトシダーゼ残基
である特許請求の範囲第４項記載の蛋白質結合ハプテ
ン。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP6792385 | 1985-03-29 | ||
| JP60-67923 | 1985-03-29 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS626168A JPS626168A (ja) | 1987-01-13 |
| JPH0731193B2 true JPH0731193B2 (ja) | 1995-04-10 |
Family
ID=13358919
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP6694186A Expired - Lifetime JPH0731193B2 (ja) | 1985-03-29 | 1986-03-25 | 蛋白質結合ハプテン |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0731193B2 (ja) |
-
1986
- 1986-03-25 JP JP6694186A patent/JPH0731193B2/ja not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS626168A (ja) | 1987-01-13 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JPS5928864B2 (ja) | バルビツ−ル酸抗原およびそれに対して特異な抗体 | |
| US5712101A (en) | Immunochemical detection of in vivo advanced glycosylation endproducts | |
| JPS59119264A (ja) | 非酵素的にグルコシル化された蛋白質及び蛋白質フラグメントの測定用免疫試験方法、それに用いる試薬系、試験キツト、試験具及び抗体並びにそれに関連した免疫原 | |
| JPS61172064A (ja) | 変性されたタンパク質分析物、とくにＨｂ Ａ↓１ｃの免疫アツセイ、およびそれに対する抗体 | |
| US4207307A (en) | Simultaneous immunoassay of multiple antigens and assay for cocaine metabolites | |
| EP0196007B1 (en) | Desmosine derivatives and reagent for preparing artificial antigens | |
| JPH09119929A (ja) | 膵島アミロイドポリペプチドに対する抗体 | |
| TANIMORI et al. | Enzyme immunoassay of neocarzinostatin using β-galactosidase as label | |
| EP0292656A1 (en) | Novel pair of monoclonal antibodies to insulin-like growth factor I permits immunometric assay for IGF-I | |
| JP2001516567A (ja) | 抗原の免疫原性および抗体の特異性を改善する方法 | |
| JPH0780913B2 (ja) | 完全無傷なプラコラーゲンペプチド（▲ｉｉｉ▼型）およびプロコラーゲン（▲ｉｉｉ▼型）の選択的な免疫学的測定法 | |
| US5856106A (en) | Determination of antibody production against administered therapeutic glycoproteins, especially monoclonal antibodies | |
| JPH0115826B2 (ja) | ||
| JP2968910B2 (ja) | １α，２５（ＯＨ）２ビタミンＤ３に対する抗体及びその用途 | |
| US6814951B1 (en) | Acetaldehyde and malondialdehyde protein adducts as markers for alcohol liver disease | |
| JPH0731193B2 (ja) | 蛋白質結合ハプテン | |
| JP5329994B2 (ja) | 試料中のエクオールの免疫測定法 | |
| JP2789208B2 (ja) | Ｍｈｐｇに対する抗体の製造法 | |
| JPH0123060B2 (ja) | ||
| JPH048748B2 (ja) | ||
| Gempel et al. | Production and characterization of antibodies against carboxymethyllysine-modified proteins | |
| JPS6045598A (ja) | トリチウム化サイモシンβ４による免疫定量法 | |
| JPH0317300B2 (ja) | ||
| JP3479453B2 (ja) | 尿中テガフールの測定法 | |
| JPH02176464A (ja) | 薬物とタンパクとの結合物 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| S533 | Written request for registration of change of name |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313533 |
|
| R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |
|
| EXPY | Cancellation because of completion of term |