JPH07500317A - １，３−オキサチオランヌクレオシド類似体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 １３−オキサチオランヌクレオシド　゛本発明は、ヌクレオシド類似体および医 薬品（こお（するそれらの使用に関する。より詳細には、本発明（±、１．３− オキサチオランヌクレオシド類似体、それらの薬剤処方物、およびウィルス感染 の治療におけるそれらの使用に関する。

ＨＩＶによりもたらされる症状の治療に対して現在認可されている化合物は、３ ′−アジド−３゛−デオキシチミジン（ＡＺＴ、ジドブジベｚｉｄｏｖｕｄｉｎ ｅ）、ＢＷ　５０９Ｕ）のみである。し力）し、このイヒ金物は、重大な副作用 があるため、用ｔ）られ得な０力１、または一旦用いられても、多くの患者では 引続き用（入られ得なｌ、Ｍかのいずれかである。その結果、引続き、ＨＩＶに 対して有効であるが、並行してかなり高い治療指数を有するイし合物力（提供さ れる必要がある。

式（１）の化合物は、 式（１−１）および（＋−２）の２つのエナンチオマーのラセミ体の混合物であ る： 式（＋）の化合物の両エナンチオマーは、予期されない低い細胞毒性を示すが、 驚くべきことに、この化合物の（−）−エナンチオマーは、（＋）−エナンチオ マーよりもより高い活性を示すことが分かった。従って、本発明の第１の局面で は、式（＋）の化合物の（−）（すなわち左旋性）エナンチオマーおよびその薬 学的に受容可能な誘導体が提供される。

（−）−エナンチオマーは、化学名（−）−４−アミノ−５−フルオロ−１−（ ２−ヒドロキシメチル−１，３−オキサチオラン−５−イル）−（ＩＨ）−ピリ ミジン−２−オン（以下、本明細書中では化合物（Ａ））を有する。このエナン チオマーは、式（１−１）に示される絶対立体化学構造を有する。

好ましくは、化合物（Ａ）は、対応する（＋）−エナンチオマーを実質的に含有 しない。すなわち（＋）−エナンチオマーは、約５％Ｗ／Ｗ以下であり、より好 ましくは約２％以下であり、最も好ましくは約１％Ｗ／Ｗ未満の割合で存在する 。

「薬学的に受容可能な誘導体」とは、化合物（Ａ）のいずれの薬学的に受容可能 な塩、エステル、またはそのようなエステルの塩をも意味し、または受容体への 投与の際に化合物（Ａ）を（直接的または間接的に）提供し得るいずれの他の化 合物、または抗ウィルス活性の代謝産物またはそれらの残留物をも意味する。

化合物（Ａ）は、その薬学的に受容可能な誘導体を提供するために、両塩基部分 の官能基およびオキサチオラン環のヒドロキシメチル基で改変され得ることが、 当業者によって明らかである。全てのこのような官能基での改変は、本発明の範 囲内に含まれる。しかし、特に重要な化合物は、オキサチオラン環の２−ヒドロ キシメチル基の改変により得られる薬学的に受容可能な誘導体である。

化合物（Ａ）の好ましいエステルは、２−ヒドロキシメチル基のカルボニル部分 Ｒが以下から選択される化合物を包含する；水素、直鎖または分枝鎖アルキル（ 例えば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｔ−ブチル、ｎ−ブチル）。アルコキ シアルキル（例えば、メトキシメチル）、アラルキル（例えば、ベンジル）、ア リールオキシアルキル（例えば、フェノキシメチル）、アリール（例えば、必要 に応じて、ハロゲン、Ｃ＋−アルキル、またはＣＩ−ａアルコキシで置換された フェニル）；アルキル−またはアラルキルスルホニルのようなスルホネートエス テル（例えばメタンスルホニル）；アミノ酸エステル（例えば、Ｌ−バリル、Ｌ −インロイシル）および−リン酸、ニリン酸、または三リン酸のエステル。

上記のエステルに関して、他に記載されていなければ、好都合に存在するいずれ のアルキル部分も、１〜１６個の炭素原子、特に１〜４個の炭素原子を含有する 。このようなエステル中に存在するいずれのアリール部分も、フェニル基を好都 合に含れていないベンジルエステル、または少なくとも１個のハロゲン（臭素、 塩素、フッ素、またはヨウ素）％Ｃｌ−６アルキル、Ｃ＋−ｅアルコキシ、ニト ロまたはトリフルオロメチル基で置換されたベンジルエステルであり得る。

化合物（Ａ）の薬学的に受容可能な塩は、薬学的に受容可能な無機および有機の 酸および塩基から誘導された塩を包含する。

適当な酸の例には、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、過塩素酸、フマル酸、マレ イン酸、リン酸、グリコール酸、乳酸、サリチル酸、コハク酸、トルエン−ｐ− スルホン酸、酒石酸、酢酸、クエン酸、メタンスルホン酸、ギ酸、安息香酸、マ ロン酸、ナフタレン−２−スルホン酸、およびベンゼンスルポン酸が包含される 。それ自身では薬学的に受容可能ではないような他の酸（例えば、シュウ酸）は 、本発明の化合物およびそれらの薬学的に受容可能な酸付加塩を得る際の中間体 として有用であり得る。

適当な塩基から誘導された塩は、アルカリ金属（例えば、ナトリウム）、アルカ リ土類金属（例えば、マグネシウム）、アンモニウム、およびＮＲ４＋　（ここ で、Ｒはｃｌ−４アルキル）塩を包含する。

以下、本明細書中では、本発明の化合物との記載は、化合物（Ａ）およびその薬 学的に受容可能な誘導体の両方を包含するものとする。

本発明の化合物は、それら自身のいずれかが、抗ウィルス活性を有する、および ／またはこのような化合物に代謝可能である。特に、これらの化合物は、レトロ ウィルスの複製を阻害するのに有効であり、このレトロウィルスには、ＡＩＤＳ の病原因子であるヒト免疫不全ウィルス（ＨＩＴ／’ｓ）のようなヒトレトロウ ィルスが包含される。

本発明の化合物はまた、Ｂ型肝炎ウィルス（ＨＢＶ）に感染した動物（ヒトを含 む）の治療に有用である。

従って、本発明のさらなる局面としては、化合物（Ａ）またはその薬学的に受容 可能な誘導体は、活性のある治療薬として、特に抗ウィルス剤として（例えば、 レトロウィルス感染またはＨＢＶ感染の治療において）の使用が提供される。

さらなる局面または別の局面では、ヒトを含む哺乳類において、ウィルス感染、 特にＨＢＶまたはレトロウィルス（例えば、Ｈｍにより引き起こされる感染の治 療方法が提供される。この方法は、有効量の化合物（Ａ）またはその薬学的に受 容可能な誘導体の投与を包含する。

さらなる局面または別の局面では、ウィルス感染の治療に対する医薬品の製造の ための、化合物（Ａ）またはその薬学的に受容可能な誘導体の使用が提供される 。

本発明の化合物はまた、以下のＡＩＤＳ関連症状の治療に有用である；例えば、 ＡＩＤＳ関連合併症（ＡＩＤＳ−ｒｅｌａｔｅｄ　ｃｏｍｐｌｅｘ）（ＡＲＣ） 、進行性全身リンパ節病（ＰＧＬ）、ＡＩＤＳ関連神経系症状（例えば、痴呆ま たは局所不全対麻痺）、抗旧Ｖ抗体陽性および■ＩＶ陽性症状、カポージ肉腫、 血小板減少、プルプレア、および関連の日和見性の感染（例えば、誼組肚ｕ■ｉ ｓ　ｃａｒｉｎｉｉ）。

本発明の化合物はまた、抗旧Ｖ抗体または旧Ｖ抗原陽性である個体の臨床的疾患 の進行の妨げ、および以後ＨＩＶに曝されることに対する予防に有用である。

化合物（Ａ）またはその薬学的に受容可能な誘導体はまた、インビトロでの生理 学的な液体（例えば、血液または精液）のウィルス汚染を妨げるのにも用いられ 得る。

本発明の化合物はまた、Ｂ型肝炎ウィルスに感染した動物（ヒトを含む）の治療 に有用である。

本明細書中の治療との記載は、既知の感染または症状の治療だけでなく予防をも 意味することが、当業者によって明らかである。

さらに、本発明の化合物の治療に用いるのに必要な量は、選択される特定の化合 物に加えて、投与の経路、治療されるべき症状の性質、および患者の年齢および 症状によって変化し、最終的には係っている医師または獣医の判断による。しか し、一般には、適切な投与量は、１日当り約０．１〜約７５０ｍｇ／体重ｋｇの 範囲内で、好ましくは０．５〜６ｏＢ／ｋｇ／日の範囲内で、最も好ましくは１ 〜２０ｍｇ／ｋｇ／日の範囲内である。

所望の投与量は、便宜上、１回の投与量であるか、または適当な間隔をあけて投 与される分割された投与量として（例えば、１日につき２回、３回、４回または それ以上の副投与量（ｓｕｂ−ｄｏｓｅｓ）として）与えられ得る。

この化合物は、便宜上、単位投与量剤型で投与される；例えば、この化合物は、 単位投与量剤型当り１０〜１５００ｍｇ、好都合には２０〜１０００ｍｇ、最も 好都合には５０〜７００ｍｇの活性成分を含有する。

理想的には、活性成分は、活性化合物のピーク血漿１ｉ１１度に達するまで投与 されるべきであり、この濃度は、約１〜約７５μＭ、好ましくは約２〜５０μＭ １最も好ましくは約３〜３０μＭである。

このことは、活性成分（必要に応じて生理食塩水中の）０．１〜５％溶液を腹腔 内注射することにより、または活性成分約１〜約１００＋ａｇを含有するポーラ スとして経口投与することにより、達せられ得る。約０，０１〜約５．０ｍｇ／ 　ｋｇ／時間を提供する継続的注入により、または活性成分的０．４ｍｇ〜約１ ５ｍｇ／ｋｇを含有させる断続的注入により、望ましい血液レベルが維持され得 る。

治療における使用で、本発明の化合物は、未加工の化学物質として投与され得る ことが考えられるが、一方薬剤処方物として活性成分を存在させることが好まし い。

従って、本発明はさらに、化合物（Ａ）またはその薬学的に受容可能な誘導体と 、１個またはそれ以上の薬学的に受容可能な担体、および必要に応じて他の治療 的および／または予防的成分と、を共に含有する薬剤処方物を提供する。担体は 、処方物の他の成分に適合性であるという意味で「受容可能」でなければならず 、それらの受容体に対して有害であってはならない。

薬剤処方物としては、経口、直腸、鼻、局所（頬および舌下を含む）、腟、また は非経口（筋肉内、皮下、および静脈を含む）の投与に対し適切なもの、または 吸入またはガス注入法による投与に対し適切な形態が包含される。処方物は、適 当なところに、好都合には個別の投与量単位で与えられ得、薬学の分野で周知で ある方法のいずれによっても調製され得る。全ての方法は、活性化合物を、液体 担体または最終的に分けられた固体担体またはその両方と結合させる工程、次い で、必要に応じて、生成物を所望の処方物に成形する工程を包含する。

経口投与に適切な薬剤処方物は、好都合には、それぞれ予め決められた量の活性 成分を含有する個別の単位（例えば、カプセル、カシェ剤、または錠剤（ｔａｂ ｌｅｓ））として；粉末または顆粒として；溶液、懸濁液、または乳濁液として 与えられ得る。この活性成分はまた、ポーラス、砥削、またはペーストとして与 えられ得る。経口投与のための錠剤およびカプセル剤は、結合剤、充填剤、潤滑 剤、崩壊剤、または湿潤剤のような通常の賦形剤を含有し得る。錠剤は、当該分 野で周知である方法に従って被覆され得る。経口用の液状調製物は、例えば、水 性または油性の懸濁液、溶液、乳濁液、シロップ、またはエリキシルの形態であ り得るか、または使用前に水または他の適切なビヒクルで構成させるための乾燥 製品として与えられ得る。このような液状調製物は、懸濁化剤、乳化剤、非水性 ビヒクル（これは食用オイルを包含し得る）、または防腐剤のような便宜的な添 加剤を含有し得る。

本発明の化合物はまた、非経口投与（例えば、注射、例えばポーラス注射または 持続注入）のために処方され得、アンプル、予め充填された注射器、少量注入で 、または添加した防腐剤を有する種々の投与量用の容器（ｍｕｌｔｉ−ｄｏｓｅ 　ｃｏｎｔａｉｎｅｒｓンによって、単位投与量剤型で与えられ得る。組成物は 、油性または水性のビヒクル中で、懸濁液、溶液、または乳濁液のような形態を とり得、懸濁化剤、安定化剤および／または分散剤のような処方剤（ｆｏｒｍｕ ｌａｔｏｒｙ　ａｇｅｎｔｓ）を含有し得る。

あるいは、活性成分は、使用前に適切なビヒクル（例えば、滅菌されており発熱 因子を含有しない水）を有する構成の、無菌状態での単離または滅菌状態での固 形化により、または溶液からの凍結乾燥により得られる粉末状であり得る。

表皮への局所投与のために、本発明の化合物は、軟膏、クリーム、またはローン ヨンとして処方され得るか、または経皮吸収の硬骨剤（ｔｒａｎｓｄｅｒｍａｌ 　ｐａｔｃｈ）として処方され得る。軟膏およびクリームは、例えば、水性また は油性の基剤で、適切な増粘剤および／またはゲル化剤を添加して、処方され得 る。ローションは、水性または油性の基剤で処方され得、さらに、一般に、１つ またはそれ以上の乳化剤、安定化剤、分散剤、懸濁化剤、増粘剤、または着色剤 を含有する。

口腔内への局所投与に対して適切な処方物は、香味基剤（通常、スクロース、ア ラビアゴム、またはトラガヵント）中に活性成分を含有するロゼフジ；不活性基 剤（例えばゼラチンおよびグリセリンまたはスクロースおよびアラビアゴム）中 に活性成分を含有する香錠；および適切な液体担体中に活性成分を含有するうが い薬を包含する。

担体が固体である、直腸投与に対して適切な薬剤処方物は、最も好ましくは、単 位投与量の串刺として与えられる。適切な担体は、カカオ脂および通常当該分野 で用いられる他の物質を包含し、そしてこの串刺は、好都合には、活性化合物と 軟化または融解した担体とを混合し、次いで冷却し、型にいれて成形することに より形成され得る。

膣投与に適切な処方物は、活性成分に加えて、当該分野において適当であると知 られるような担体を含み、ペッサリー、タンポン、クリーム、ゲル、ペースト、 フオーム、またはスプレーとして与えられ得る。

鼻腔内投与のために、本発明の化合物は、液体スプレーまたは分散可能な粉末と して、または滴の形態で用いられ得る。

滴は、水性または非水性の基剤で処方され得、さらに、１つまたはそれ以上の分 散剤、安定化剤、または懸濁化剤を含有し得る。液体スプレーは、好都合には、 加圧容器（ｐｒｅｓｓｕｒｉｚｅｄ　ｐａｃｋｓ）で供給される。

吸入による投与のために、本発明の化合物は、好都合には、注入器、噴霧器、ま たは加圧容器、またはエアロゾルスブレ−を供給させる他の通常の手段により供 給される。加圧容器は、適切な高圧ガス（例えば、ジクロロジフルオロメタン、 トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、二酸化炭素、また は他の適切な気体）を含有し得る。加圧エアロゾルの場合では、投与量単位は、 計量された量を供給するバルブをとりつけることにより決定され得る。

あるいは、吸入またはガス注入による投与のために、本発明の化合物は、乾燥粉 末組成物の形状をとり得、例えば、化合物と、適切な粉末の基剤（例えばラクト ースまたはデンプン）との粉末混合物である。粉末組成物は、例えば、カプセル またはカートリッジまたは例えばゼラチンまたはブリスターパック中の単位投与 量剤型で与えられ得、ここから吸入またはガス注入の補助によって粉末が投与さ れ得る。

所望ならば、活性成分の持続放出を行うのに適合した上記の処方物が用いられ得 る。

本発明の薬剤組成物はまた、抗菌剤または防腐剤のような他の活性成分を含有し 得る。

本発明の化合物はまた、他の治療薬（例えば、他の抗感染剤）と組合せて用いら れ得る。特に、本発明の化合物は、既知の抗ウィルス剤と一緒に用いられ得る。

従って、本発明は、さらなる局面では、化合物（Ａ）またはその生理学的に受容 可能な誘導体を、他の治療学的に活性な薬剤、特に抗ウィルス剤と一緒に含有す る組合せを提供する。

上述の組合せは、使用のためには、便宜上、薬剤処方物の形で与えられ得、従っ て、本発明のさらなる局面は、上記で定義された組合せをその薬学的に受容可能 な担体と一緒に含有する薬剤処方物を包含する。

このような組合せの使用における適切な治療薬は、非環式ヌクレオシド（例えば 、アシクロビルまたはガンシクロビル）、インターフェロン（例えばα、β、ま たはγ−インターフェロン）、腎排出インヒビター（例えば、プロベネシド）、 ヌクレオシド運搬インヒビター（例えば、ジピリダモール）、２°、３゛−ジデ オキシヌクレオシド（例えば、ＡＺＴ、　２°、３°−ジデオキシシチジン、２ ゛、３°−ジデオキシアデノシン、２°、３°−ジデオキシイノシン、２’、３ ’−ジデオキシシチジン、２°、３°−ジデオキシ−２°、３−ジデヒドロチミ ジンおよび２°、３゛−ジデオキシ−２゛、３゛−ジデヒドロシチジン）、免疫 調整剤（例えば、インターロイキン−２（ＩＬ−２）および顆粒球マクロファー ジコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）　’）、エリトロポエチン、アンプリゲン （ａｍｐｌ　ｉｇｅｎ）、チモモジュ１ノン（ｔｈｙｍｏｍｏｄｕ　ｌ　ｉｎ） 、チモペンチン（ｔｈｙｍｏｐｅｎｔｉｎ）、ホスカルネット（ｆｏｓｃａｒｎ ｅｔ）、リノイビリン、およびＣＤ４レセプターに対する旧Ｖ結合のインヒビタ ー（例えば、可溶性ＣＤ４、ＣＤ４フラグメント、ＣＤ４ハイブリッド分子）、 グリコジル化インヒビター（例えば、２−デオキシ−〇−グルコース、カスタノ スペルミン（ｃａｓｔａｎｏｓｐｅｒｍｉｎｅ）、および１−デオキシノジリマ イシン）を含有する。

このような組合せの個々の成分は、個別にまたは組み合わされた薬剤処方物とし て、続けてまたは同時に投与され得る。

化合物（Ａ）またはその薬学的に受容可能な誘導体力（、同じウィルスに対して 別の治療薬と組み合わせて用０られる場合、各化合物の投与量は、この化合物力 ５単独で用へ１られる場合と同じであるか、または異なり得る。適当な投与量（ よ、当業者によって容易に理解される。

化合物（Ａ）およびその薬学的に受容可能な誘導体（ま、類似の構造を有する化 合物の調製につ０て当該分野で知られる（Ａずれの方法によっても調製され得る 。例え（ｆ、その方法（ま欧州特許公開第０３８２５２６　Ａ２号に記載されて ０る。

本明細書中、以下に記載するある種の方法で、化合物（Ａ）の所望の立体化学が 、光学的に純粋な開始物質で開始すること、または合成における任意の好都合な 段階でラセミ体の混合物を分離することのいずれかによって得られ得ることカタ 、当業者に明らかである。全ての方法の場合（こおｔ）で、光学約６こ純粋な所 望の生成物は、各反応の最終生成物の分離により得られ得る。

このような１つの方法では、式（ｖＩｌ＋）の１．３−オキサチオランは適当な 塩基と反応する： ここで、アノマー基りは置換可能な基である。適切な基Ｌ（よ、−０Ｒ（ここで 、Ｒはアルキル基（例えば、メチルのようなＣ＋−ｓアルキル基）であるが、ま たはＲはアシル基（例えば、アセチルのようなｃｌ−６アルキル基）またはハロ ゲン（例えば、ヨウ素、臭素、または塩素）である）を包含する。

式（ＶＩ　Ｉ　Ｉ＞の化合物は、好都合には、相溶性の溶媒（例えば、塩化メチ レン）中で、ルイス酸（例えば、四塩化チタン、トリメチルシリルトリフレート 、トリメチルシリルヨーダイト（ＴＭＳＩ）、またはスズ（ＩＶ）化合物（例え ば、５ｎｃＩ４）　）を用いて、（ヘキサメチルジシラザンのようなシリル化剤 で予めシリル化させた）５−フルオロ−シトシンまたはその適当なピリミジン塩 基前駆体と反応する。

（以下余白） 式（Ｗｉｌｌ）の１．３−オキサチオランは、例えば、式（Ｖｌｌ）のアルデヒ ドと式（Ｖｌ）のメルカプトアセタールとを、相溶性の有機溶媒（例えば、トル エン）中で酸触媒（例えば、塩化亜鉛などのルイス酸）の存在下で反応させるこ とによって、調製され得る。

Ｃ６Ｈ５Ｃ０□ＣＨ２ＣＨＯ（ｖｌｌ）式（Ｖｌ）のメルカプトアセタールは、 当該分野で周知の方法（例えば、Ｇ、　Ｈｅ５ｓｅおよび１．　Ｊｏｒｄｅｒ、 　Ｃｈｅｗ、　Ｂｅｒ、、　８５．９２４−９３２頁（１９５２））によって調 製され得る。

式（Ｖｌｌ）のアルデヒドは、当該分野で周知の方法（例えば、Ｅ、Ｇ、　Ｈａ ｌｌｏｑｕｉｓｔおよびＨ，Ｈｉｂｂｅｒｔ、　Ｃａｎ、Ｊ、　Ｒｅ５ｅａｒｃ ｈ、　８゜１２９−１３６頁（１９３３））によって調製され得る。都合よ＜Ｃ ′！、粗製のアルデヒドｍｌ）は、結晶性の重亜硫酸塩添加付加物への変換、次 いで遊離のアルデヒドへの再変換によって精製され得る。

第二の方法においては、この化合物（Ａ）は、式（ＩＸ）の化合物の塩基相互変 換によって得られる。

ここで、Ｂは５−フルオロ−シトシンに変換可能な塩基である。

このような相互変換は、単純な化学的な形質変換（例えば、ウラシル塩基のシト シンへの変換）またはデオキシリボシルトランスフェラーゼを用いた酵素的な変 換によって行われ得る。塩基相互変換に関するこのような方法および条件は、ヌ クレオシド化学の分野においてよく知られている。

第三の方法においては、式（Ｘｌ）の化合物は、ヌクレオシド化学の分野におい てよく知られている方法によって、芳香族性のＮｌ２基を５−フルオロ−シトシ ン塩基に変換することによって化合物（Ａ）に変換され得る。

上記で記載の反応の多くは、ヌクレオシド合成に関する分脈内で広く報告されて きており（例えば、Ｎｕｃｌｅｏｓ’ｄｅ　ａｌ。

ｓ−Ｃｈｅｍｉｓｔｒ　Ｂｉｏｌｏ　ａｎｄＭｅｄｉｃａｌＡ　１ｉｃａｔ’ｏ ｎｓ、　Ｒ，Ｔ、　Ｗａｌｋｅｒら編、　Ｐｌｅｎｕｍ　Ｐｒｅｓｓ、　Ｎｅｗ 　Ｙｏｒｋ　（１９７９）　１６５−１９２頁およびＴ、　Ｕｅｄａ、勤ｙ土山 エユＬカ回ｌ坦匡亜ａｎｄ■ｄ旦山１競・第１巻、　Ｌ、Ｂ、　Ｔｏｖｎｓｅｎ ｄ編、　Ｐｌｅｎｕｍ　Ｐｒｅｓｓ、　Ｎｅｗ　Ｙｏｒｋ　（１９８８）。

１６５−１９２頁）、この開示内容は、本明細書中に参考として援用されている 。

上記反応が、保護官能基を有する開始物質の使用を必要とし得るか、または都合 よ（使用し得ること、そして従って脱保護が、中間工程または最終工程に必要と されて、所望の化合物が得られることは、明らかである。官能基の保護および脱 保護は、通常の手段を用いて行われ得る。従って、例えば、アミン基は、アラル キル（例えば、ベンジル）、アシル、アリール（例えば、２，４−ジニトロフェ ニル）、またはシリルから選択される基によって保護され得、次いで行われる保 護基の除去は、所望ならば、標準的な条件を用いて適切に、加水分解または水素 化分解により行われる。水酸基は任意の通常の水酸基の保護基を用いて保護され 得る。このことは、例えば、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ　Ｇｒｏｕ　ｓ　ｉｎ　Ｏｒ 　ａｎｉｃ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒ　、Ｊ、Ｆ、Ｗ、ＭｃＯｍｉｅ編、　Ｐｌｅｎｕ ｗ＋　Ｐｒｅｓｓ、　Ｎｅｗ　Ｙｏｒｋ　（１９７３）またはＴ、Ｗ、　Ｇｒｅ ｅｎｅ。

Ｐｒｏｔｅｃｔｅｄ　Ｇｒｏｕ　ｓ　ｉｎ　Ｏｒ　ａｎｉｃ　Ｓ　ｎｔｈｅｓｉ ｓ、　Ｊｏｈｎ　Ｗｉｌｅｙ　ａｎｄＳｏｎｓ、　Ｎｅｗ　Ｙｏｒｋ　（１９８ １）に記載されている。適切な水酸基の保護基の例としては、アルキル（例えば 、メチル、ｔ−ブチルまたはメトキンメチル）、アラルキル（例えば、ベンジル 、ジフェニルメチルまたはトリフェニルメチル）、複素環式基（例えば、テトラ ヒドロピラニル）、アシル（例えば、アセチルまたはベンゾイル）およびシリル 基（例えば、トリアルキルシリル（例えば、ｔ−ブチルジメチルシリル））が包 含される。これらの水酸基の保護基は、通常の方法によって除去され得る。従っ て、例えば、アルキル、シリル、アシルおよび複素環式基は、加溶媒分解、例え ば、酸性条件または塩基性条件下での加水分解によって除去され得る。トリフェ ニルメチルのようなアラルキル基は加溶媒分解、例えば、酸性条件下での加水分 解によって同様に除去され得る。ベンジルのようなアラルキル基は、例えば、Ｂ Ｆ３／エーテレートおよび無水酢酸で処理し、次いでこの合成の適切な段階で、 形成される酢酸基を除去することにより、開裂され得る。シリル基はマタ、フッ 化物イオン源（例えば、テトラ−ｎ−ブチルアンモニウムフルオライド）を用い て都合よく除去され得る。

上記方法において、化合物（Ａ）は、一般に、シス異性体とトランス異性体との 混合物として得られる。このシス異性体は、興味深い化合物である。

これらの異性体は、物理的な手段、例えば、シリカゲルのクロマトグラフィー、 あるいは直接または適切なその誘導体（例えば、酢酸エステル（これは、例えば 、無水酢酸と共に調製される））についての分別品出によって分離され、分離後 、次いでその粗生成物に変換により戻される（例えば、メタノール性のアンモニ アで脱アセチル化することにより行われる）。

本発明の化合物の薬学的に受容可能な塩は、米国特許第４゜３８３．１１４号に 記載のように調製され得、その開示内容は、本明細書中に参考として援用されて いる。従って、例えば、化合物（Ａ）の酸付加塩を調製することが望まれるとき 、上記工程のいずれの生成物も、通常の方法を用いて、得られる遊離塩基を適切 な酸で処理するごとにより、塩に変換され得る。薬学的に受容可能な酸付加塩は 、遊離塩基と適切な酸とを、必要に応じて適切な溶媒（例えば、エステル（例え ば、酢酸エチル）またはアルコール（例えば、メタノール、エタノールまたはイ ソプロパツール））の存在下で反応させることにより調製され得る。無機の塩基 性塩は、その親化合物と適切な塩基（例えば、アルコール（例えば、メタノール ））とを反応させることにより調製され得る。薬学的に受容可能な塩はまた、化 合物（Ａ）の他の塩（これは、他の薬学的に受容可能な塩を包含する）から、通 常の方法を用いて調製され得る。

化合物（Ａ）は、リン酸化剤（例えば、ＰＯＣｌ２）または適切なエステル化剤 （例えば、酸ハライドまたは酸無水物）と、適切に反応させることにより、薬学 的に受容可能なホスフェートまたは他のエステルに変換され得る。化合物（Ａ） のエステルまたは塩は、例えば、加水分解によって、親化合物に変換され得る。

最終生成物、またはその中間体または開始物質は、当該分野で周知のいかなる適 切な方法によっても分離され得る：例えば、Ｅ、Ｌ、Ｅｌｉｅｌ、Ｓｔｅｒｅｏ ｃｈｅｍｉｓｔｒ　ｏｆ　Ｃａｒｂｏｎ　Ｃｏｍ　ｏｕｎｄｓ。

ＭｃＧｒａｖ　Ｈｉｌｌ　（１９６２）およびＳ、Ｈ，Ｗｉｌｅｎ、　Ｔａｂｌ ｅｓ　ｏｆ　Ｒｅ５ｏｌｖｉ■」左１」を参照のこと。

このように、例えば、化合物（Ａ）は、適切な固定相（例えば、アセチル化β− シクロデキストリンまたは三酢酸セルロース）および適切な溶媒（例えば、エタ ノールなどのアルコールまたは、例えば、酢酸トリエチルアンモニウムなどの水 溶液）を用いてキラルＨＰＬＣによって得られ得る。あるいは、これらの化合物 は、適切な酵素（例えば、シチジンデアミナーゼ）による酵素で媒介されたエナ ンチオマーに対する選択的な異化（ｅｎｚｙｍｅ　＋１ｅｄｉａｔｅｄ　ｅｎａ ｎｔｉｏｓｅｌｅｃｔｉｖｅ　ｃａｔａｂｏｌｉｓｍ）、または５−ヌクレオチ ダーゼによる適切な誘導体の選択的な酵素分解作用によって分離され得る。分離 が酵素的に行われるとき、この酵素は、溶液中で、またはさらに都合よくは固定 された形態中で用いられ得る。酵素は当該分野に周知のいずれの方法（例えば、 樹脂（例えば、Ｅｕｐｅｒｇｉｔ　Ｃ）上に吸着すること）でも固定され得る。

本発明は、以下の実施例によってさらに述べられる。これらの実施例は本発明を 限定することを決して意図するものではない。全ての温度は摂氏である。

生温ｌり一 ±−シスー２−ヒドロキシメチルー５−５°−フルオロシトシン−１゛−イル− １３−オキサチオラン ベンゾイルオキシアセトアルデヒド（２１６，３３ｇ、　１．３２ｍｏｌ）をピ リジン（３７３ｍ１．４．６１ｍｏＬ）に溶解し、そしてこの溶液に１．４−ジ チアン−２，５−ジオール（１００，３１ｇ、　０．６６ｍｏｌ）を加えた。こ の不均一な混合物を６０−６５°Ｃ窒素雰囲気下で１時間攪拌した。この反応の 終わりに、完全な溶液を得た。この反応混合物にジクロロメタン（６５ｈ＋１） を加え、そしてそれを塩−氷浴で０℃まで冷却した。この溶液に、塩化アセチル （２８１ｍｌ、　３．９５＋＋＋ｏｌ）を−滴ずつ０−５°Ｃで１．５−２時間 にわたって加えた。この反応混合物を０−５℃で３０分間攪拌し、次いでそれを 冷却した（０°Ｃ）飽和重炭酸ナトリウム溶液上に注意深く注いだ。この有機層 を分離した。この水層をジクロロメタン（３ｘ　２００ｍ１）で抽出した。合わ せた有機層を、飽和重炭酸ナトリウム溶液（３Ｘ　２００ｍ１＞およびブライン （２００ｍｌ＞で洗浄した。この溶液を硫酸ナトリウムで乾燥し、そして真空中 で濃縮した。ベンゼンで共沸蒸留することにより、痕跡量のピリジンを除去した 。粗製の生成物３２ｏ。

７９ｇを得た。この生成物をＫｕｇｅｌｒｏｈｒ蒸留または短いシリカゲルカラ ムを通した濾過により精製した。［溶媒系二へ牛サン／酢酸エチル（３／１）］ 。

（ｉｆ）シス−およヒトランス−２−ベンゾイルオキシメチル−５−Ｎ４−アセ チル−５−フルオロ−シトシン−１゛−イル−１３−オキサチオラン ５−フルオロシトシン（４，３０ｇ、　３３．３ｍｍｏｌ）、ヘキサメチルジシ ラザン（２５ｍｌ）および硫酸アンモニウム（１２０ｍｇ）を、シトシンが溶解 するまで（３時間）還流下で沸騰させ、次いで２時間さらに還流した。へ牛すメ チルジサラザンを真空でエバボレートし、そしてこの残留物にトルエン（１００ ｍｌ＞を加えて、溶媒を共にエバボレートした。得られたビス（トリメチルシリ ル）−フルオロシトノンのジクロロメタン（４０ｍｌ）溶液を、アルゴン下で予 め調製された、２−ベンゾイルオキシメチル−５−アセトキシ−１，３−オキサ チオラン（８，５３７ｇ、　３０．３＋ｕ＋ｏｌ）の乾燥ジクロロメタン（１０ ０＋ａｌ）溶液および分子ふるい（４Ａ、　２ｇ）中にアルゴン下で加え、モし て０℃で２０分間冷却した。この混合物に、Ｏ”Ｃで、［（トリフルオロメタン −スルホニル）オキシ］トリノチルシラン（ａｍｌ。

３１ｍｍｏｌ）を加え、そして得られた溶液を室温で２時間攪拌した。

濾液をブライン３００ｍ１で２回および蒸留水で１回振盪した。有機層を硫酸マ グネシウムで乾燥し、濾過し、そして乾燥状態までエバボレートした。このこと により、粗製の５−フルオロ−シトシン誘導体（１０、Ｉｇ）が得られた。Ｒ＋ ＝０．５７（ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯ■）９：１）。

この残留物をさらに精製せずに次の工程でアセチル化した。

５００ｍ１の丸底フラスコ中でアルゴン下で、この粗製の物質を乾燥ジクロロメ タン（１２ｈｌ）に溶解した。この溶液に、トリエチルアミン（１２，７ｍ１． ９１．１ｇｍｏｌ）およびジメチルアミノピリジン（ｌｌ１ｍｇ、　Ｏ，’１ｍ ｍｏｌ）を加えた。次いで、このフラスコを、アルゴン下で１時間水浴中に浸漬 した。この冷却したフラスコ中に、酢酸ナトリウムから蒸留した無水酢酸（４， ３ｍｌ、　４５＋＋＋ｍｏｌ）を注入した。この混合物を一晩攪拌し、次いで飽 和重炭酸ナトリウム溶液を含有する三角フラスコ中に注意深く移した。次いで、 この生成物を蒸留水、次いでブライン溶液で洗浄した。塩化メチレン部分を乾燥 し、そして高真空下で乾燥状態までエバボレートすることにより、アセチル化し たα／β混合物が無色の泡状物として得られ、それは乾燥後９．６ｇであった。

酢酸エチル：メタノール（９：　１　）を用いたこの物質のフラッシュクロマト グラフィーにより、純粋なトランス型のタイトルの化合物３．１ｇ、　？、ｌｌ ｓｍｏｌ（４６％）および純粋なシス型のタイトルの化合物３．５ｇ、　８．９ ｍｍｏｌ（３０％）が得られた。

トランス−異性体：酢酸エチル：メタノール（９：１）において、　Ｒ＋ｌＩ０ ．６５ Ｕ、　Ｖ、　：　（ＭｅＯＨ）ラムダの最大値：　３０９ｒｖ’Ｈ−ＮＭＲ６（ ｐｐｍ　ＣＤＣｌ３）８．７７　（ｂ、　ＩＨ；　Ｃ，’−Ｎｉｉ−Ａｃ）８． ０６　（ｍ、　２Ｈ；　’ｉｙ　ｇ　１１％　）７．７０　（ｄ、　ＩＨ；　Ｃ ６’−１ｉ、　ＪｃＦｇ６．３　Ｈｚ）７−６２　（ｍ、−ＩＨ＋　％　３　’ １％　）７．４９　（ｍ、　２Ｈ；　五仇＆　）６．５１　ｔａａ、　ＩＨ；　 ｃ５−ａ）５．９１　（ｄｄ、　１）！；　Ｃ２ｄｌ）４．４８　（ｄｄ、　２ Ｈ；　Ｃ２−Ｃ１１２０ＣＯＣ６Ｈ３）３．６６　（ｄｄ、　１Ｈ；　Ｃ４−１ （）３．３４　（ｄｄ、　ＩＨ；　Ｃ４−■）２．５６　（ｓ、　３Ｈ；　ＮＨ −ＣＯＣ３，）（以丁侘ム） シス−異性体：酢酸エチル：メタノール（９：１）において、ＲｒｌＩＯ９５８ Ｕ、　Ｖ、　：　（ＭｅＯＨ）ラムダの最大値：　３０９ｉｍ”Ｈ−ＮＭＲ６（ ｐｐｍ　ＣＤＣｌ、）８．１２　（ｂ、ＩＨ；　Ｃ，’−Ｎｌ−ＡＣ）８−０６ 　（ｍ＝　２Ｍ；　１５１４％−）７．８７　（ｄ、１Ｈ；　Ｃ６’−７ｉ、Ｊ Ｃｌ　ｍ６．２Ｈｚ）６．３２　（ｄｄ、　１８；　Ｃ６−１１）５．４７　（ ｄｄ、　ＩＨ；　Ｃ２−１１）４．７３　（ｄｄ、　２Ｈ；　ＣＣ２−５Ｊ２０ ＣＯＣ６，）３．６２　（ｄｄ、　１８；　Ｃ４−Ｈ）３．１９　（ｄｄ、　Ｉ Ｈ；　Ｃ４−１ｉ）２．５５　（Ｓ、　３８；　ＮＨ−ＣＯＣｆｉ３）（ｉｉｉ ）　＋　−シス−ヒドロキシメチル−５−５°−フルオロシトシン−１°−イル −１３−オキサチオラン シス−２−ベンゾイルオキシメチル−５−（Ｎａ−アセチル−５°−フルオロシ トシン−１°−イル）−１，３−オキサチオラン１．２ｇ（３，０５ｍｍｏｌ） をメタノール性のアンモニア３０ｍ１中で０℃で１時間、次いで、室温で一晩攪 拌した。この混合物を減圧下でエバボレートした。この残留物を無水エーテルで ２回（２ｘ　３ｈｌ）こねた。この固形の残留物を無水エタノールで再結晶して 、純粋なシス型のタイトルの生成物６５５ｎ＋ｇ（２，６４ｍ＋ｎｏ１．８７％ ）を得た：　ｍ、ｐ、　２０４−２０６°Ｃ；酢酸エチル：メタノール（９：１ ）におけるＲｒ＝０．２１゜所望の化合物を１■、＋３Ｃ−ＮＭＲオヨびＵ、　 Ｖ、　５　ムダ最大（１（Ｈｚ０）２８０゜９ｉｍにより同定した。

シス−異性体： ’Ｈ−ＮＭＲ６（ｐｐｍ　ＤＭＳＯ−ｄ６）６．１６　（ｔ、　１Ｈ；　Ｃ，− Ｈ）５．４３　（ｔ、　ＩＨ；　Ｃ２−Ｃ）Ｉ２−ＯＨ）５．１９　（ｔ、　１ Ｈ；　Ｃ２−Ｈ）３．７７　（ｍ、　２）１；　Ｃ２−ＣＨ２０Ｈ）８６．８２ 　３６．８０　８６．フッ　６２．３２尖立且土 ｍ−４−アミノー５−フルオロー１−２−ヒドロキシメチル−１３−オキサチオ ラン−５−イルーＩＨ−ビ１ミジンー２−オン（ｉ）　士　ンスー２−ヒドロキ シメチル−５−５−フルオロシトシン−１°−イル−１３−オキサチオランモノ ホスフェート０℃まで冷却した乾燥トリメチルホスフェート（１０ｍｌ）中の中 間体１　（５００ｍｇ、　２．０２４ｍｍｏｌ）の攪拌混合物に、オキシ塩化リ ン（１，２２ｍ１．１３．１＋Ｉｎ＋ｏｌ）を１滴ずつ加えた。この反応混合物 をその温度で１時間攪拌し、次いで氷水中で急冷した。この冷却した混合物のｐ Ｈを、ＩＮ水酸化ナトリウム水溶液を添加することによって３に調整し、次いで 、チャコールカラム（５ｇ、　ＤＡＲＣＯ）に通し、水、次いでエタノールおよ びアンモニア水（１０：１０：１の比）で溶離した。粗製のモノホスフェートを 含有する画分を合わせ、エバボレートし、その後、ＤＥＡＥ　５ｅｐｈａｄｅｘ 　Ａ２５（ＨＣＯ３型）１５ｇを含有するカラムに通した。溶離を水（３００ｍ ｌ）、Ｏ，ＩＭ−ＮＨａ　ＨＣＯ３（３００１１１）および０．２Ｍ　ＮＨ４Ｈ ＣＯ３（１００ｍｌ）のグラジェントで管理した。水（３０ｍｌ）で希釈した後 、適切な画分をエバボレートすることにより、（±）シス−２−ヒドロキシメチ ル−５−（５°−フルオロシトシン−１−イル）−１，３−オキサチオランモノ ホスフェートを白色の固体として得たニ 一１°−イル−１３−オキサチオラン グリシン緩衝溶液［水（１０＋ａｌ）中グリシン（５２，６ｍｇ）および塩化マ グネシウム（１９ｍｇ）］　３＋ｍｌ中（±）−シス−２−ヒドロキシメチル− ５−（５−フルオロシトシン−１°−イル）−１，３−オキサチオランモノホス フェート（１００ａ＋ｇ、　０．２９＋ｕ＋ｏｌ）の溶液に、５−ヌクレオチダ ーゼ［Ｓｉｇｍａ、　２９ユニット／＋ｇで３．５＋ａｇ］を一度に加えた。得 られた混合物を３７°Ｃで振盪しながらインキュベートした。この反応をｔｌＰ Ｌｃ［溶離液として０．２Ｍリン酸ナトリウムを用いたα−酸糖タンパク質（Ａ ＧＰ）のキラルカラム（ｐＨ７、流速０．１５＋ｍｌ／分）］によって、異なる 間隔においてモニターした。２．５時間後、（＋）−エナンチオマーのみが認め られた。さらに酵素（２＋ｍｇ）を加え、そしてインキュベーションをさらに３ 時間続けた。ＨＰＬＣ分析により、この（＋）−エナンチオマーの選択的および 完全な加水分解が明らかに示された。得られた混合物をＤＥＡＥ　５ｅｐｈａｄ ｅｘ　Ａ−２５（ＨＣＯａ型）カラムに通した。溶離を水（１５５＋ａｌ）、次 いで０．１および０１２Ｍ　ＮＨ４ＨＣＯ３（各１０ｈｌ）で管理した。第一の 溶離されたヌクレオシドを含有する適切な画分を合わせ、そして濃縮した。

残留した固形物を、溶離液として酢酸エチル、メタノール（４、５：０．５）を 用いたシリカの短いカラムで精製し、次いでＨＰＩ、Ｃ（上記の条件を用いた） によって分離した。これにより純粋な（＋）−シス−２−ヒドロキシメチル−５ −（５°−フルオロシトシン−１°−イル）−１，３−オキサチオラン（２３ｏ ＋ｇ、　０．０９３ｍｍｏｌ、　３２％）を白色の固体として得た： （ａ　）２１６＊　１２３°Ｃ［ｃ、　１．００．　Ｍｅｎ）１３　ｍ、ｐ、　 １８５６Ｃ）ｆＭＲ５（ｐｐｍＣＨ２０Ｈ）、　３．５０　（ｄｄ、　ＩＨ，Ｃ ，Ｈ）、　３．３７　（ｄｄ、　１Ｍ、　Ｃ，Ｈ）。

（以下余白） （ｆｉｔ）ｌ−シス−２−ヒドロキシメチル−５−５−フルオロシトシン工程（ ｉ　ｉ）で述べられた第二の溶離されたヌクレオシドを含有する５ｅｐｈａｄｅ ｘカラムからの適切な画分を合わせ、そして減圧下でエバボレートした。残留物 を水２ｍｌで希釈し、そしてアルカリホスファターゼ（Ｓｉｇ＋ｌａ、　ｌｉｏ ユニット／ｍｌで１ｍ１）で処理し、次いで３７℃で１．５時間インキュベーシ ョンした。次いで、溶媒をエバポレートし、そして残留物を、溶離液としてＥｔ ＯＡｃ　：ＭｅＯＨ（４：１）を用いたシリカゲルのカラムクロマトグラフィー 、次いでＨＰＬＣ（上記と同様の条件を用いた分離）によって精製した。

これにより以下の化合物が得られた：純粋な（−）−シス−２−ヒドロキシメチ ル−５−（５−フルオロシトシン−１′−イル）−１，３−オキサ中間体２およ び実施例２は、式（Ａ）の化合物を調製する代ゎ５−７７Ｌ／　オＯシ）　シフ 　（１５５ｍｇ、　１．２ｍ１ｏ１ツノＣＩ（２ｃ１２（１ｍＬ）懸濁液に、室 温でアルゴン雰囲気下で、２．４．６−コリジン（０，３１７ｉＬ。

２、４＋＋ｍｏｌ）およびｔ−ブチルジメチルシリルトリフルオロメタン−スル ホネート（０，５５１ｉＬ、　２．４ｍｍｏｌ）を連続して加えた。得られた混 合物を１５分間攪拌し、そして透明な溶液を得た。（１°Ｒ，２°Ｓ、５°Ｒ） −メンチル−５Ｒ−アセトキシ−１，３−オキサチオラン−２３−カルボキシレ ート（３３０ｍｇ、　１ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２　（０，５＋ｍＬ）溶液、次 いで、ヨードトリメチルシラン（０，１５６ａ＋Ｌ、　１．１ｍｍｏｌ）を導入 した。３時間攪拌を続けた。この混合物をＣＨ２Ｃｌ２　（２０＋ａＬ）で希釈 し、そして飽和ＮａＨＳＯ３水溶液、水、ブラインで連続して洗浄し、次いで濃 縮した。残留物をエーテル−へ牛サン（１：１．１０ｍＬ）および飽和Ｎ　ａＨ ｃＯ３水溶ｅ、（２ｍＬ）中に取り、１５分間室温で攪拌した。水層を除去し、 そして有機相を遠心分離して白色の固形物を得た。この固形物をヘキサン（３ｘ ５ｍＬ）で洗浄し、次いで真空下で乾燥した。このようにして得られた生成物（ １’　Ｒ，２’　Ｓ、　５’　Ｒ）　−メンチル−５Ｓ−（Ｓ”−フルオロシト シン−１−イル）−１，３−オキサチオラン−２３−カルボキンレート（３５０ ｍｇ、　８８％）は、（１’Ｒ，２°Ｓ、５°Ｒ）−メンチル−５Ｓ−（Ｓ−フ ルオロシトシン−１−イル）−１，３−オキサチオラン−２３−カルボキシレー ト約６％（ＮＭＲ）を含有していた。この物質をＭｅＯＨ／ＣＴｏＣＩ２／ベン ゼンから再結晶して結晶の生成物を得た： （以下余白） ［ａｌ。＋２２°　（ｃ、　０．１９．　ＭａＯＨ）；　ｍ、ｐ、　２１６−２ １８°Ｃ＃’ＨＮ’ＫＲ（ＣＤＣＩ、）　６　０．７８　（ｄ、コＨ，Ｊ−７Ｈ ｚ）、０．９１　（ｔ、６Ｈ，Ｊ−７，コ　Ｈｚ）。

１．００　（ｍ、２Ｈ）、１．コ９−２．０４　（ｍ、７Ｈ）、１１２　（ｄｄ 、ＩＨ，Ｊ−６，６Ｈ２，６，１Ｈｚ）、コ、５２　（ｄｄ、ＬＨ，Ｊ−４，７ Ｈｚ、６．１　Ｈｚ）、４．７９　（ｄｔ。

：１６．６．　４０．５．　４７．２．　７７．１．　７９．１．　９０．８． 　１２６．３　（ｄ、、７−３３　Ｈｚ）。

１コア、１　（ｄ、Ｊ−２４４Ｈｚ）、１５４．２．　１５８．３　（ｄ、、ｆ −１５Ｈｚ）、１７０．１゜尖ＪＬｆ引１ ２３−ヒドロキシメチル−５Ｒ−５−フルオロシトシン−１゛−イル−１」ゴし 七九ｆｔユヱ 水素化リチウムアルミニウム（ＩＯＢ、　０．５４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ　（１ｍ ｌ、）懸濁液に、室温でアルゴン雰囲気下で、（１°Ｒ，２°Ｓ、５°Ｒ）−メ ンチル−５Ｒ−（５−フルオロシトシン−１−イル）−１，３−オキサチオラン −２Ｓ−カルボキンレート（５４ａ＋ｇ、　０．１３５＋＋ｍｏｌ）のＴＨＦ　 （２ｍＬ）溶液をゆっくりと加えた。この反応混合物を３０分間攪拌させ、次い で過剰のメタノール（２ｍＬ）で急冷し、次いでシリカゲル（３ｇ）を加えた。

得られたスラリーをシリカゲルカラムクロマトグラフィ（ＥｔＯＡ（−ヘキサン −ＭｅＯＨ，１：１：１）にかけて、粘着性のある固形物を得た。この固形物を トルエンで共沸的に乾燥して、ＩＨ，Ｊ−４，コ、１１．９　Ｈｚ）、コ、４２ 　（ｄｄ、１Ｈ、？−５，３，１１，９Ｈｚ）、３．７６実ｍ 生ｍシ１性 （ｉ）区ｌΔ二しＩＬ性 実施例１の化合物の抗ウィルス活性を以下の細胞系における旧Ｖ−１に対して測 定した。

Ｃ８１６６細胞、ヒトＴ−リンパ芽球腫性皮疹（Ｔ−１ｙｍｐｈｏｂｌａｓｔｏ ｉｄ）細胞系を、ＨＩＶ−１株１１Ｆで感染させた。

ＭＴ−４細胞、ヒトＴ−細胞の白血病性貧血細胞系を、ＩＩＩＶ−１株ＲＦで感 染させた。

Ｃ８１６６細胞の抗ウィルス活性をシンシチウム形成の阻害（Ｔ。

ｃｈｉｋｕｒａらのＹｉｒｏｌｏｇＬ　１６４．５４２−５４６）によって測定 し、そしてＭＴ−４細胞における抗ウィルス活性をホルマザン変換の阻害［Ｂａ ｂａら、Ｂｉｏｃｈｅｍ　Ｂｉｏ　ｈ　ｓ　Ｒｅｓ　Ｃｏｍｍｕｎ、、１４２． １２８−１３４頁　（１９８７）；　Ｍｏｓｓｍａｎ、　Ｊ、　１ｍｍｕｎ、　 Ｍｅｔｈ、、　６５．５５−５７頁（１９８３）によって測定した］。また、抗 ウィルス活性を、エナンチオマーの存在下および非存在下で合成される旧Ｖ　ｐ ２４抗原の量を分析することにより測定した。

（以下余白） その結果を以下の表１および２に示す：表」− ５０％抗ウイルス活性（μｇ／ｍｌ） 細胞　ＭＴ−４Ｃ８１６６ ウイルス（ＨＩＶ−１）　ＨＩＶ−Ｉ　ＲＦ　ＨＩＶ−Ｉ　ＲＦ（＋）−エナン チオマー　＞１　０．０４（−）−エナンチオマー　０．１４　０．００１８中 間体１　０．０６５　０．０１３ ＡＺＴ　Ｏ，００３８ 表」工 ＨＩＶ　ｐ２４合成の５０％阻害Ｃμｇ／ｍｌ）細胞　Ｃ８１６６ ウイルス　ＲＦ （＋）−エナンチオマー　０．１ （−）−エナンチオマー　０．００２２中間体１　０．０１１ ＡＺＴ　Ｏ，０１？ （ｉｔ）裡１目１注 実施例１の化合物およびラセミ化合物（中間体１）の細胞毒性を２つのＣＤ４細 胞系（Ｈ９およびＣＥＭ）で測定した。

９６ウエルマイクロタイタープレート中で、試験用の化合物を１００μｇ／ｒｘ 　ｌから０．３μｇ／＋１（最終濃度）に連続して希釈した。

薬物を含んでいないコントロールを含むプレートの各ウェルに、３．６Ｘ１０’ 細胞を植え付けた。３７°Ｃで５日間インキニベーションした後、細胞懸濁液の サンプルを除去し、そして血球計において細胞以外のトリバンブルーを数えるこ とにより、生存細胞の数を測定した。

その結果を表３に示す。

表１ ５０％細胞毒性（μｇ／ｍｌ） 化合Ｕ　１偏１　旺風見 （＋）−エナンチオマー　２１７　３３４（−）−エナンチオマー　１４８　２ ９６中間体１　１７３　２３２ 補正書の写しく翻訳文）提出書（特許法第１８４条の８）隻 平成６年１月３１日

Claims (20)

【特許請求の範囲】
1. １．（−）−４−アミノ−５−フルオロ−１−（２−ヒドロキシメチル−１，３ −オキサチオラン−５−イル）−（１Ｈ）−ピリミジン−２−オンまたはその薬 学的に受容可能な誘導体。
2. ２．前記化合物に対応する（＋）−エナンチオマーを実質的に含まない、請求項 １に記載の化合物。
3. ３．前記化合物の（＋）−エナンチオマーが、約５％ｗ／ｗ以下の量で存在する 、請求項１に記載の化合物。
4. ４．前記化合物の（＋）−エナンチオマーが、約２％ｗ／ｗ以下の量で存在する 、請求項１に記載の化合物。
5. ５．前記化合物の（＋）−エナンチオマーが、約１％ｗ／ｗ未満の量で存在する 、請求項１に記載の化合物。
6. ６．実質的に純粋な形態の請求項１に記載の化合物。
7. ７．請求項１から６のいずれか１項に記載の化合物を、その薬学的に受容可能な 担体と共に含む、薬剤組成物。
8. ８．治療に使用するための、請求項１から６のいずれか１項に記載の化合物。
9. ９．ウイルス感染の治療用の薬剤の製造のための、請求項１から６のいずれか１ 項に記載の化合物の使用。
10. １０．ＨＩＶ感染の治療用の薬剤の製造のための、請求項１から６のいずれか１ 項に記載の化合物の使用。
11. １１．Ｂ型肝炎感染の治療用の薬剤の製造のための、請求項１から６のいずれか １項に記載の化合物の使用。
12. １２．請求項１から６のいずれか１項に記載の化合物の有効量の投与を包含する 、ウイルス感染を受けているかまたはウイルス感染を受けやすい、ヒトを含む哺 乳類の治療方法。
13. １３．前記（＋）−エナンチオマーも含有する混合物から（−）−エナンチオマ ーを分離することを包含する、請求項１から６のいずれか１項に記載の化合物を 調製する方法。
14. １４．前記化合物の混合物がラセミ体の混合物である、請求項１１に記載の方法 。
15. １５．前記分離がキラルＨＰＬＣにより行われる、請求項１１または請求項１２ に記載の方法。
16. １６．前記ＨＰＬＣが、固定相としてアセチル化β−シクロデキストリンまたは 三酢酸セルロースを用いる、請求項１３に記載の方法。
17. １７．前記分離が、酵素で媒介されたエナンチオマーに対する選択的な異化によ って行われる、請求項１１または請求項１２に記載の方法。
18. １８．前記酵素が固定化された形態で用いられる、請求項１５に記載の方法。
19. １９．前記酵素がシチジンデアミナーゼである、請求項１５または請求項１６に 記載の方法。
20. ２０．前記酵素が５′−ヌクレオチダーゼである、請求項１５または請求項１６ に記載の方法。