JPH07507312A - 血液型決定基に関するオリゴ糖配糖体の時間依存性投与による炎症の低下 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 血液型決定基に関するオリゴ糖配糖体の時間依存性投与による炎症の低下発明の ＩＹ景 １、発明の分野 本発明は、１型［βＧａ　Ｉ　（１→３）Ｇｌ　ｃＮＡｃ］またはＩｌ型［βＧ ａ１（１−４）ＧＩ　ｃＮＡｃ］核構造を有する血液型決定基（ｂｌｏｏｄ　ｇ ｒｏｕｐｄｅｔｅｒｍｉｎａｎｔｓ）に関するオリゴ糖配糖体の時間依存性投与 による、抗原暴露（投！ｊ）による哺乳動物の２次性免疫応答から発生する炎症 の程度を低下させる方法に関する。 本発明の方法は、Ｉ盟また（鉗型核構造を存する血液型決定基に関連するオリゴ 糖配糖体の投与による感作した哺乳動物の抗原誘発性炎症の低下は、オリゴ糖配 糖！木か投与される時点に決定的に依ｆルでいるという発見に関する。 ２、参考文献 以下の文献や特許出願は、本出願の関連する部分て上ず・１き数字として引用さ れている １、　Ｇａｅｔａ、ｅｔ　ａｌ、、Ｕ、Ｓ、Ｐａｔｅｎｔ　Ａｐｐｌｉｃａｔｉ ｏｎ　５ｅｒｉａｌ　Ｎｏ、０７１５３８，８５３゜ｆｉｌｅｄ　１５　Ｊｕｎ ｅ　１９９０゜２、　Ｐａｕｌｓｏｎ、ｅｔ　ａｌ、、Ｕ、Ｓ、Ｐａｔｅｎｔ　 Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ　５ｅｒｉａｌ　Ｎｏ、０７／６１９．３１９゜ｆｉｌ ｅｄ　２８　Ｎｏｖｅｍｂｅｒ　１９９０゜３、Ｐａｕｌｓｏｎ、　ｅｔ　ａｌ 、、　Ｕ、Ｓ、　Ｐａｔｅｎｔ　Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ　５ｅｒｉａｌ　Ｎｏ 、　０７／６３２，３９O゜ ｆｉｌｅｄ　２１　Ｄｅｃｅｍｂｅｒ　１９９０．４、　８ｒａｎｄｌｅｙ、　 ｅｔ　ａｌ、、　ＰＣＴ　１ｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ　Ｐａｔｅｎｔ　Ａｐｐ ｌｉｃａｔｉｏｎ　Ｎｏ、　ＰbＴ／ＵＳ ９１１０５４１６：　１）ｕｂｌｉｓｈｅｄ　２０　Ｆｅｂｒｕａｒｙ　１９９ ２゜５、　Ｌｏｗｅ、ＰＣＴ　Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ　Ｐａｔｅｎｔ　Ａ ｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ　Ｎｏ、ＰＣＴ／ＵＳ　９１１０７６７８G ｐｕｂｌｉｓｈｅｄ　１４　ＭａＹ　１９９２゜６、ＭｃＥｖｅｒ、　ＰＣＴ　 Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ　Ｐａｔｅｎｔ　Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ　Ｎｏ、 　ＰＣＴ／ＵＳ　９１１０５O５９゜ ｐｕｂｌｉｓｈｅｄ　６　Ｆｅｂｒｕａｒｙ　１９９２゜７、　Ｆｕｒｉｅ、ｅ ｔ　ａｌ、、ＰＣＴ　Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ　Ｐａｔｅｎｔ　Ａｐｐｌｉ ｃａｔｉｏｎ　Ｎｏ、ＰＣＴ／ＵＳ　X２１ ０１９１５、ｐｕｂｌｉｓｈｅｄ　Ｉ　０ｃｔｏｂｅｒ　１９９２゜８、５ｅｅ ｄ、ｅｔ　ａｌ、、ｌ’ｃＴ　Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ　Ｐａｔｅｎｔ　Ａ ｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ　Ｎｏ、ＰＣＴ／ＵＳ　９P１ ０８Ｇ８５．　ｐｕｂｌｉｓｈｅｄ　ＩＩ　Ｊｕｎｅ　１９９２゜９、Ｖｅｎｏ Ｌ　ｅＩａｌ、、　Ｕ、Ｓ、　Ｐａｔｅｎｔ　Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ　５ｅｒ ｉａｌ　Ｎｏ、　０７／７７１，００７゜ｆｉｌｅｄ　２０ｃｔｏｂｅｒ　１０ ９１゜１０、にａｓｈｅａ　ｅｔ　ａｔ、、　Ｕ、Ｓ、　Ｐａｔｅｎｔ　Ａｐｐ ｌｉｃａｔｉｏｎ　５ｅｒｉａｌ　Ｎｏ、　０７／９１４．１７２K ｆｉｌｅｄ　１４　、Ｊｕｌｙ　１９９２゜Ｉｌ、　ＶｅｎｏＬ　ｅｔ　ａｌ、 、　Ｕ、Ｓ、　Ｐａｔｅｎｔ　Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ　５ｅｒｉａｌ　Ｎｏ、 　０７／８８７，７４７K ｆｉ　ｌｅｄ　２２　Ｍａｙ　１９９２゜１２、　Ｒａ１ｃｌｉｆｆｅ、　ｅｔ 　ａｌ、、　Ｕ、Ｓ、　Ｐａｔｅｎｔ　Ｎｏ、　５，０７９，３５３．１ｓｓｕ ｅｄ　７　Ｊａｎｕａ窒■ ＋９９２゜ １３、　１ｐｐｏｌｉｊｏ、　ｅ４　ａｌ、、　Ｕ、Ｓ、　Ｐａｔｅｎｔ　Ａｐ ｐｌｉｃａｔｉｏｎ　５ｅｒｉａｌ　Ｎｏ、　０７／８９５C９３０゜ ｆｉｌｅｄ　９　、Ｉｕｎｅ　１９９２゜１．１．　Ｖｃｎｏｌ、　ａｔ　ａｌ 、、　Ｕ、Ｓ、　ｌ’ａｌｃｎｌ　Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ　５ｅｒｉａｌ　Ｎ ｏ、　０７／８８７．V４Ｇ。 ｆｉｌｅｄ　２２　Ｍａｙ　１９９２゜２３、　Ｒａｊｃｌｉｆｆｅ、　ｅｔ　 ａｔ、、　Ｕ、Ｓ、　５ｅｒｉａｌ　Ｎｏ、　０７／２７８．１０６．　ｆｉｌ ｅｄ　Ｎｏｖｅｍｂ■秩@３０゜ ＋９８８゜ ２７、ＩＥｐｐｅｎｂｅｒｇｅｒ−Ｃａｓｔｏｒｉ、ｅｔ　ａｔ、、Ｇｌｙｃｏ ｃｏｎｊ、Ｊ、、６　：１０１−１１４　（＋９８９）。 ３１、　Ｏｋａｍｏｌｏ、ｅ（ａｔ、、　Ｔｅ１ｒａｌ＋ｅｄｒｏｎ、４Ｇ、　 Ｎｏ、　１７．　ｐｐ、　５８３５−５８３７　（＋９９０j。 ３２、　Ａｂｂａｓ、　ｅｔ　ａｌ、、　Ｐｒｏｃ、　Ｊａｐａｎｅｓｅ−Ｇｅ ｒｍａｎ　Ｓｙｍｐ、　Ｂｅｒｌｉｎ、　ｐｐ、２Ｏ−２１i＋９８８）。 ３７、　Ｒａｔｃｌｉｆｆｅ、　ｅｔ　ａｌ、、　Ｕ、Ｓ、　Ｐａｔｅｎｔ　Ａ ｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ　５ｅｒｉａｌ　Ｎｏ、　０７／２７W．１０６ ｆｉｌｅｄ　Ｎｏｖｅｍｂｅｒ　３０．１９８８゜４２、　Ｊｉａｎｇ、　ｅｔ 　ａｔ、、　Ｕ、Ｓ、　Ｐａｔｅｎｔ　Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ　５ｅｒｉａｌ 　Ｎｏ、　０７／８４８，２２R゜ ｆｉｌｅｄ　Ｍａｒｃｈ　９．　１９９２゜４５、　Ｗｏｌｌｅｎｂｅｒｇ、　 ｅｔ　ａｌ、、　Ｕ、Ｓ、　Ｐａｔｅｎｔ　Ｎｏ、　４，６１２．１３２．１ｓ ｓｕｅｄ　Ｓｅｐｔｅｍｂ■秩@２！。 １９８６゜ ４６、　Ｇｒｅｉｇ、　ｅｔ　ａｌ、、　Ｊ、　ＣｈｅｌＴＬＳｏｃ、、　ｐ、 　８７９　（１９６１）。 ５１、　Ｂｏｄａｎｓｚｋｙ、　ｅｔ　ａｌ、、　Ｔｈｅ　Ｐｒａｃｔｉｃｅ　 ｏｆ　Ｐｅｐｔｉｄｅ　５ｙｎｔｈｅｓｉｓ、　Ｓｐｒｉｎ■■秩| Ｖｅｒｌａｇ　（１９８４）。 ５２．　Ｈｉｇａ、　ｅ（ａｔ、、　Ｊ、　Ｂｉｏｌ、　Ｃｈｅｍ、、　２（ｉ ｏ　：８８３８−８８４９　（１９８５）。 ５３、　Ｂｒｏｓｓｍｅｒ、　ｅｊ　ａｔ、、　Ｂｉｏｃｈｅｍ、　Ｂｉｏｐｈ ｙｓ、　Ｒｅ５ｅａｒｃｈ　Ｃｏｎｖｎｕｍ、、　９６：１Q８２−１２８９ ５９、　ｌｌａｖｅｒｋａｍｐ、　ｅｔ　ａｌ、、　Ｈｏｐｐｅ−３ｅｙｌｅｒ ’ｓ　Ｚ、　Ｐｈｙｓｉｏｌ、　Ｃｈｅｍ、弓３ＣｉＯ：１T９−１６６ （＋９７９）。 ６０、　Ｇｒｏｓｓ、　ｅ（ａｌ、、　Ｇｌｙｃｏｃｏｎｊ、　、１．、４　： １４５−１５６　（１９８７）。 ６１、　ｌＩａｇｅｄｏｒｎ、　ｅｊ　ａｌ、、　Ｘ［ｌ［ｊｈ　Ｃａｒｂｏｈ ｙｄｒ、　Ｓｙｍｐ、［ｊｈａｃａ　（１９８６）　Ａ４゜６２、　Ｚｌ＋１ｒ ａ１．　ｅｊ　ａｔ、、　Ｃａｒｂｏｈｙｄｒ、　Ｒｅｓ、、　１９４：Ｃ１５ −Ｃｌ３　（＋９８９）。 Ｇ３．　Ｂｅ１ｋｈｏｕｙａ、ｅｔ　ａｌ、、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ　Ｌｅｔ ｔｅｒｓ、３９７１−３９８０　（１９９１）。 Ｇ４．５ｉａｌｉｃ　Ａｃ１ｄｓ　ｉｎ　”Ｃｅ１ｌ　Ｂｉｏｌｏｇｙ　Ｍｏｎ ｏｇｒａｐｌ＋ｓ−，５ｃｈａｕｅｒ、Ｃｄ１ｔｏｒ、Ｖｏ戟A１０ （＋９８２）。 ６５、　Ｋｕｋｏｗｓｋａ−しａｔａｌｌｏ、ｅｌ　ａｔ、、Ｇｅｎｅｓ　ａｎ ｄ　Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ、４°１２８８−１３０３（＋X９０）。 ６６、　Ｄｕｍａｓ、　ｅｔ　ａｌ、、　Ｂｉｏｏｒｇ、　Ｍｅｄ、　Ｌｅｔｔ ｅｒｓ、ユニ４２５−４２８　（１９９１）。 （ｉ９．５ＩｅｙＴｒ、　ｅＡ　ａｔ、、　Ａｒｃｈ、　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ、 、　１４６　：１９　（１９８６）。 ７０、７ｉｏ１ａ、、　ｅｔ　ａｌ、、Ｊ、　Ｎｅｕｒｏｉｎｉｎｕｎｏｌ、、 　７　：３１５−３３０　（１９８５）。 ７１、Ｓｍ１ｔｂ、　ｅｔ　ａｔ、、Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｌｎｗｎｕ ｎｉｔｙ、３１：１２９　（１９８０）。 ７７、！１ｌａｚｉｄ、　ｅｔ　ａｔ、、　Ｕ、Ｓ、　Ｐａｔｅｎｔ　Ｎｏ、　 ５．０５９，５３５．　”Ｐｒｏｃｅｓｓ　ｆｏｒ　ｔｈｅＳｅｐａｒａｔｉｏ ｎ　ａｎｄ　Ｐｕｒ山ｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　５ｉａｌｙｌ　Ｔｒａｎｓｆｅｒａ ｓｅｓ”、　１ｓｓｕｅｄ　Ｏｃｔ。 ２２、＋９９２゜ ７８、Ｍａｔｓｕｍｏｊｏ、ｅｔａｔ、、Ａｎａｌ、Ｂｉｏｃｈｅｍ、、１ｌｔ ３：１０３−１１０（１９８１）。 ７９、　Ｓｃｈｍｉｄｔ、　ｅｔ　ａｔ、、　Ｌｉｅｂｉｇｓ　Ａｎｎ、　Ｃｈ ｅｍ、、　１２１−１２４　（＋９９１）８４、　Ｈａｓｅｇａｗａ、　ｅｔ　 ａｌ、、　Ｊ、　Ｃａｒｂｏｈｙｄｒ、　Ｃｈｅａ、　８：ｌ３５−１４４　（ １９８９）。 ８７、　Ｌｅｍｉｅｕｘ、　ｅ）　ａｔ、、　Ｕ、Ｓ、　Ｐａｔｅｎｔ　Ｎｏ、 　４，１３７，４０１　（１９７６）。 ８８、　Ｌｃｍｉｅｕｘ、　ｅｔ　ａｌ、、　Ｕ、Ｓ、　Ｐａｔｅｎｔ　Ｎｏ、 　４．１９５．１７４　（１９７８）。 ９１、Ｌｅｍｉｅｕｘ、ｅｔ　ａｌ、、Ｕ、Ｓ、Ｐａｔｅｎｊ　Ｎｏ、４．７（ ｉ７．８４５　（１９８７）。 ９２、　Ａｌａｉｓ、　ｅｔ　ａｌ、、Ｃａｒｂｏｈｙｄｒ、　Ｒｅｓ、、　２ ０７　：１１−３１　（１９９０）。 ９３、　Ｕｎｖｅｒｚａｇｔ、　ｅｔ　ａｌ、、　、１．　Ａｍｅｒ、　Ｃｈｅ ｍ、　Ｓｏｃ、　１１２：９３０８−９３０９　（１９９０j。 ９４、Ｔｏｏｎｅ、ｅｔ　ａｌ、、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ、Ｎｏ、１７．　４ ５：５３＋３５−５４２２　（１９８９）。 前記すへての文献は、各文献や特許出願か参考のため具体的かつ個別にあたかも 完全に引用されているような程度に、本明細書中に引用される。 ３　技術の現状 傷害、感染、抗原への暴露なとの種々の状況による哺乳動物の炎症を低下させる ための、αＮｅｕ５Ａｃ　（２→３）βＧａ　ｌ　（＋−４）　−［ａ−Ｌ−Ｆ ｕｃ（１−３）］−βＧｌ　ｃＮＡｃ−ＯＲ（ｒシアリルルイス’−ＯＲ」）　 、ａＮｅｕ５Δｃ（２→３）βＧａ　ｌ　（１−３）　−［（Ｚ−Ｌ−Ｆｕｃ　 （＋−４）　］−βＧｌｃＮΔｃ−ＯＲ（ｒシアリルルイス’　−０ＲＪ　）　 、ｃｚＮｅｕ５Ａｃ　（２−”６）βＧａｌ　（１−４）　−［ａ−Ｌ−Ｆｕｃ 　（１−３）］−βＧｌｃＮΔｃ−ＯＲなどの１型または］Ｉヘワ該構造を打す る１１１［波型決定基に関連する異なるオリゴ糖配糖体の哺乳動物への投与は、 特にガエタ（Ｇａｅｊａ）らＩ、ボールソン（Ｐａｕｌｓｏｎ）ら２２、ブラン トレイ（Ｂｒａｎｄｌｅｙ）ら４、ローウニ化ｏｗｅ）６、？クエバー（ＭｃＥ ｖｅｒ）＠、フリエ（Ｆｕｒｉｅ）ら７により開示されている。これらの開示内 容は、哺乳動物の炎症過程の不可欠な過程は、１つまたはそれ以上のセレクチン への白血球の接着であるという事実、およびぞのようなオリゴ糖配糖体は、炎症 反応に関与する１つまたはそれ以上のヒレクチンに接着／結合して、これらのセ レクチンへの白血球の結合を妨害するという発見に基づく。 具体的には血管内皮細胞」二のＥ　ＬＡＭ　−１（Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｕｉ　Ｌ ｅｕｃｏｃｙｔｅ　ＡｄｈｅｓｉｏｎＭｏｌｅｃｕｌｅ　−１：内皮細胞白血球 接着分子−１）の（ｒ在、および／または血管内皮細胞または活性化＋ｌｌＬ小 坂」二のＰＡＤＧＥＭ　（ＢＭＰ−１４０とも呼ぶ）のγγ（Ｅ、および／また は末梢リンパ節および腸間膜リンパ節中の高内皮細静脈上のし一セレクヂンの存 在は、抗原へのた露、心筋梗塞、肺傷害なとの炎症により刺激されると考えられ ている。逆に刺激された血管内皮細胞上のＥＬＡＭ−１および／またはＰＡＤＧ ＥＭ、および／または活性化＋Ｉ＋を小板上のＰＡＤＧＥＭへの、循環白血球（ 例えはなＴ中球、単球なと）の接着は、炎症反応の主要な過程であると考えられ ている。さらにＬ−セレクチンは好中球」二に存在しており、従って炎症過程で 何らかの役割を果たすかも知れないと考えられている。 １型または１１．ｓ’！Ｆｌ構造（例えはシアリルルイス０およびシアリルルイ スＡ）を（ｒする血液型決定基に関連するある種のオリゴ糖配糖体は、ＥＬＡＭ −１’・２２４５６セレクチンおよび他のセレクチンに結合し、Ｉ型またはＩＩ 型型溝構造例えはαＮｅｕ５Ａｃ　（２−＋６）βＧａｌ　（１−４）　−Ｃａ −Ｌ−Ｆｕｃ　（１−３）コ−βＧｌ　ｃＮＡｃ）を有する血液型決定基に関連 するある種のオリゴ糖配糖体は、ＥＬＡＭ−１’セレクチンおよびＰＡＤＧＥＭ ７セレクチンに結合することを証明するインヒドロのデータに基づき、これらの オリゴ糖配糖体は哺乳動物にＴ−防的に１．２．１．　ｔ　または治療的に１． ２．１　＋、　Ｓ、　＠、　？投与された時、ＥＬＡＭ−ｌ　ＰＡＤＧＥＭおよ び／または他のセレクチンと循環する白血球の間の接着をＵ４害して、炎症を低 下させるであろうと提唱された。 疾病、７′炎症状聾において、ガエタ（Ｇａｅｔａ）ら１、ボールソン（Ｐａｕ ｌｓｏｎ）ら２３、そしてブラントレイ（Ｂｒａｎｄｌｅｙ）ら４の文献は、そ の中で開示しているオリゴ糖配糖体の治療投！ｊか、既に疾病／炎１ｉＦ状態に ある患者に実施され得ることを記載している。ガエタ（Ｇａｅｊａ）ら１および ボールソン（Ｐａｕｌｓｏｎ）ら２２の文献によれば、その中で開示しているオ リゴ糖配糖体は、抗原暴露から発生する疾病状態（例えは、リウマチ様関節炎、 喘息、皮膚炎、乾廁、および腸炎（ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ　ｂｏｗｅｌｃｌ ｉｓｅａｓｅ））およびｌ’Ｊ’ｒ’ｒから発生する炎症状聾（例えば、凍傷、 再潅流傷害（ｒｃｐｅｒｆｕｓｉｏｎ　１ｎｊｕｒｙ）、急性白血球性１１＋ｌ ｉ傷害（ａｃｕｔｅ　ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ−ｍｅｄｉａｔｅｄ　ｌｕｎ■ ｉｎｊｕｒｙ）等）を含む種々の疾病／炎症状磐の治療に使用し掛る。ガエタ（ Ｇａｅｔａ）ら１およびボールソン（Ｐａｕｌｓｏｎ）ら２３の文献は特に、１ 町潅流傷害または他の傷害から発生ずる炎症について、その中で開示しているオ リゴ糖配糖体は理想的には傷害後なるへり）Ｉｔ　＜投与されるー＼きことを記 載する。しかし、そのオリゴ糖配糖体を後の抗原暴露後抗原に感作された哺乳動 物に、特にいつ治療投与されるべきかに関して、これらの文献またはブラントレ イ（Ｂｒａｎｄｌｅｙ）ら４、ローウニ（Ｌｏｗｅ）５、マクエバ（ＭｃＥｖｅ ｒ）＠またはフリエ（Ｆｕｒｉｅ）ら７の文献は指釧を与えていない。 本発明は、感（′１された哺乳動物への抗原投！ｊ（７露）の場合の炎症を低ド させるために、血液型決定基に関連するオリゴ糖配糖体は、哺乳動物の抗原投与 に対する二次免疫応答の開始後ではあるか、哺乳動物か最大炎症応答を経験する のに要する時間の半分経過時点またはそれ以前に、投与されなければならないと いう発見に関する。 ［１体的には以下の実施例で記載したデータは、哺乳動物の免疫応答の開始前の Ｉ撃またはＩｉ型ＦＫＰＩＬ造を有する血液型決定基に関連するオリゴ糖配糖体 の投与か、炎症を低下させないということを証明している。さらに、哺乳動物か 抗原暴露に対する最大炎症応答を経験するのに要する時間の半分経過後の時点て のオリゴ糖配糖体の投与は、炎症の最小の低下をもたらす。実際このデータは、 感作された哺乳動物の二次免疫応答か抗原投与に対して開始された後ではあるか 、哺乳動物か抗原投５に対する最大炎症応答を経るのに要する時間の約半分経過 時点またはそ才ｌ以ｔＦｔに、１型または１１型該構造をＴＴする血液型決定基 に関連するオリゴ糖配糖体か投惇される時のみ炎症発生に著しい低下をしたらす ことを証明している。 これらの発見は、ガエタ（Ｇａｅｌａ）らＩ、ボールソン（Ｐａｕｌｓｏｎ）ら ！３、プラントレイ（Ｂｒａｎｄｌｅｙ）ら４の文献は、その中で開示している オリゴ糖配糖体は予防的にまたは治療的に投与され得ると述へているという観点 から、またさらにガエタ（Ｇａｅｔａ）ら１、ボールソン（Ｐａｕｌｓｏｎ）ら ２３、ブラントレイ（Ｂｒａｎｄ　１ｅｙ）ら４、ローウニ（Ｌｏｗｅ）’　、 ７クエハー（ＭｃＥｖｅｒ）’　、フリー１−（Ｆｕｒｉｅ）ら７の文献のいず れも、哺乳動物の抗原投与に対する二次免疫］、と；答から発生する炎症の程度 を低下させるために、そのようなオリゴ糖配糖体か哺乳動物に治療投与されるべ き時点に関していかなる臨界性も開示していないという観点から、特に罵くへき ことである。 発明の要約 上記の観点から、方法の１つの而で本発明は、抗原暴露による哺乳動物の二次免 疫Ｌｔ：答の開始から発生する哺乳動物の炎症の程度を低下させる方法であって 、この哺乳動物の炎症を低下させるのに有効隈の、Ｉ型または１１型咳構造を存 する血液型決定基に関連するオリゴ糖配糖体を投与することよりなる（ただし抗 原暴露に対するＩＱｎ乳動物の二次免疫応答の開始後であるか、抗原繋露に対す る炎症応答か最大に達するのに要する時間の゛１′１分経過時またはそれ以＋ｉ ｉｆに投与される）方法に関する。 別のツノ法の而で本発明は、哺乳動物の抗原暴露による二次免疫ＬＬ、答の開始 から発生する哺乳動物の炎症の程度を低）°させる方法てあって、式Ｉおよび式 １１ （式中、Ｒは水素、Ｍ　０ＲＩ−１２がら７の糖Ｉｊ１位を有するオリゴ糖−Ｏ Ｒ＋　＊、および少なくとも１つの炭素原子をイｆするアグリコン（Ｒ１，は水 素または少なくとも１つの炭素原Ｐを仔するアグリコンである）よりなる群から 選択され；Ｙは酸素、イオウ、および−ＮＨ−よりなる群がら選択され。 Ｒ１は水素、−ＮＨ，、−Ｎ、　、−ＮＨ３Ｏ２Ｈｌ　ＮＲｓ　Ｃ（０）Ｒ４、 Ｎ”Ｃ（Ｒｉ）ｔ、　ＮＨＣＨ（Ｒｓ）ｔ、　ＮＨＲ−１Ｎ（Ｒｅ）！、−０Ｈ １−ＯＲ，、−３（０）Ｒ，、−３（０）！　Ｒｅおよび硫酸塩（式中、Ｒ１は 、水素、炭素原子数１から４のアルキル、−０Ｒ７（Ｒｔは炭素原子数１から４ のアルギル、または水酸基で置換された炭素原子数２がら４のアルキルである） 、および−ＮＲ＝　Ｒｅ　（ＲｓおよびＲ１は、独立に水素および炭素原子数１ から４のアルギルよりなる肝から選択される）よりなるＦｌｌがら選択され、　 。 各Ｒ６は水素および炭素原子数１から４のアルキルよりなる群から選択され、各 Ｒ６は炭素原子数１から４のアルギルである）よりなる群から選択され：Ｒ２ｔ ；を水！、−Ｎ２、−ＮＨ，、−ＮＨＳＯ２Ｈｌ　Ｎ　Ｒ＋　、Ｃ（０）　Ｒ＋ 　−１Ｎ”Ｃ（Ｒ＋＋）！　、　ＮＨＣＨ（Ｒ＋＋）２　、　ＮＨＲ＋ｔ、　Ｎ 　（Ｒｌｓ）ｔ、−ＯＨおよび一〇Ｒ１゜ （式中、Ｒ３゜は、水素、炭素原子数１から４のアルキル、　ＯＲ＋ｓ　（Ｒｌ ｓは炭素原子数１から４のアルキル、または水酸基で置換された炭素原子数２か ら４のアルキルである）、および−ＮＲ１４ＲＩＩ　（Ｒ１４およびＲ１６は、 独立に水素および炭素原子数１から４のアルキルよりなる群から選択される）よ りなる群から選択され、 各Ｒ１＋は水素および炭素原子数１から４のアルキルよりなる群から選択され、 各Ｒ１２は炭素原子数１から４のアルキルである）よりなる群から選択され；Ｒ ２は水素、フルオロ、硫酸塩およびヒドロキシよりなる肝から選択され；Ｘは水 素、Ｌ−フコノル、４−スルホ−し−フコノル、および４−ホスホ−し−フコノ ルよりなる群から選ｖくされ。 ＸＩは水素、ノアリル、硫酸塩、リン酸塩、および−ＣＨＲ，、Ｃ０ＯＨ（Ｒ１ ８は水素、炭素原子−数１から７のアルキルおよび−ＣＯＯＨよりなる群から選 択される）よりなるＩＩＴから選択され： Ｘ、は水素、ソアリル、硫酸塩、リン酸塩、および−ＣＨＲ１＊　ＣＯＯｆ〜（ （Ｒ，１は水素、炭素ハス子数１から７のアルキルおよび−ＣＯＯＨよりなるＩ ｆ７から選打くされる）よりなるＩｆから選択される） のオリコ糖配糖体よりなるｎｌから選択されるオリゴ糖配糖体、および薬剤とし て許容されるその塩の、約０５から約５０ｍｇ／ｋｇを哺乳動物に投与すること よりなる（その投与は抗原Ｐ露に対するｊｕｎ乳動物の二次免疫応答の開始後で あるか、抗原暴露に対する炎症応答か最大に達するのに要する時間の半分経過時 またはそれｌＪ、＋ｉｉｉになされる）方法に関する（（ｌｊＬ、　Ｘか水素な らばＸ、またはＸ、の少なくとも一方は水素てないか、またはＲ７は硫酸塩であ る。さらに、ＸｌおよびＸ、の一方のみかシアリルである）。 さらに別の方法の而で本発明は、哺乳動物の抗原暴露による二次免疫応答の開始 から発生する哺乳動物の炎症の程度を低下させて、抗原への後の暴露に対する哺 乳動物の寛容原性を誘導する方法であって、式１および式１！ （式中、Ｒは水素、糖−０Ｒ８９，２から７の糖中位を有するオリゴ糖−ＯＲｌ ｅ、および少なくとも１つの炭素原子を存するアグリコン（Ｒ１，は水素または 少なくとも１つの炭素原ｒ・をｆ）するアグリコンである）よりなる１１１から 選択され；Ｙは酸素、イオウ、および−ＮＨ−よりなる群から選択され；Ｒ１は 水素、−ＮＨ２、−Ｎ、　、−ＮＨＳＯｓ　Ｈｌ　ＮＲｓ　Ｃ（０）Ｒ４、Ｎ” Ｃ（Ｒｓ　）２　、　ＮＨＣＨ（Ｒｓ　）２　、　ＮＨＲ＊　、　Ｎ　（Ｒｓ　 ）！、−０Ｈ１ＯＲｓ　、　Ｓ　（０）Ｒｅ　、　Ｓ　（０）！　Ｒｅおよび硫 酸塩（式中、Ｒ４は、水素、炭素原子数ｌから４のアルキル、　ＯＲ？　（Ｒ１ は炭素原子数１から４のアルギル、または水酸基で置換された炭素原子・数２か ら４のアルギルである）、および−ＮＲ，Ｒ，（Ｒ，およびＲ１は、独立に水素 および炭素原−ｒ−数１から４のアルキルよりなる１１から選択される）よりな るＩｆＴから選択され、 各Ｒ５は水素および炭素原子数１から４のアルキルよりなる群から選択され、各 Ｒ１は炭素原子数１から４のアルキルである）よりなる群から選択され：Ｒ２は 水素、−Ｎ、　、−ＮＨｔ　、−ＮＨ３Ｏ，Ｈｌ　ＮＲ＋＋Ｃ（０）Ｒ＋−１Ｎ ＝Ｃ（Ｒ＋＋）２　、　ＮＨＣＨ（Ｒｈ）　２、　ＮＨＲ１２、Ｎ　（Ｒ＋２） ｔ、−ＯＨおよび一〇Ｒ１２ （式中、Ｒ１゜は、水素、炭素原子数１から１のアルキル、　ＯＲ＋ｓ　（Ｒｌ ｓは炭素原子数１から４のアルキル、または水酸基で置換された炭素原子数２か ら４のアルキルである）、および−Ｎ　Ｒ＋　ｓ　Ｒｌｓ　（Ｒｌ　４およびＲ ｌｓは、独立に水素および炭素原子数１から４のアルキルよりなる群から選択さ れる）よりなる群から選択され、 各Ｒ１＋は水素および炭素原子数ｌから４のアルキルよりなる群から選択され、 各Ｒ１□は炭素原子数１から４のアルキルである）よりなる群から選択され：Ｒ １は水素、フルオロ、硫酸塩およびヒ１−ロギシよりなる群から選択され；Ｘは 水素、Ｌ−フコノル、４−スルホ−し−フコツル、および４−ボスボート−フコ ノルよりなるｉｐから選択され。 Ｘ、ｌｉ水素、シアリル、硫酸ノー、リン酸塩、および−ＣＨＲ，、Ｃ０ＯＨ（ Ｒ，１は水素、炭本原ｒ数１から７のアルギルおよび−ＣＯＯＨよりなるｌｊＴ がら選Ｕくされる）よりなる群から選ｖくされ。 Ｘ２は水素、：／７１Ｊ　／Ｌ、硫酸塩、１ル酸塩、および−ＣＬ（Ｒ，、Ｃ０ ＯＨ（Ｒ＋＊は水素、炭素ハ；乞子数１から７のアルギルおよび−ＣＯＯＨより なる肝から選択される）よりなる群から選択される） のオリゴ糖配糖体よりなる１１から選択されるオリゴ糖配糖体、および薬剤とし て許容されるその塩の、約０．　５から約５０ｍｇ／ｋｇを哺乳動物に投与する ことよりなる（その投りは抗原暴露に対する哺乳動物の二次免疫応答の開始後で あるが、抗原暴露に対する炎症応答か最大に達するのに要する時間の゛１１分経 過時またはそれ以前になされる）方法に関する（ＩＩｌ、　Ｌ、Ｘが水素ならば Ｘ、またはＸ２の少なくとも一方は水素てないか、またはＲ１は硫酸塩である。 さらに、Ｘ、およびＸ２の一力のみがシアリルである）。 好ましくは、Ｒ，は−ＮＨ，、−Ｎ、　、−ＮＨＣ（０）Ｒ，６てあり、そして Ｒ１は好ましくは−ＯＨまたは硫酸塩である。 好ましくは、Ｘ、はシアリルまたは硫酸塩基である。 Ｘ、かシアリル基であるとき、Ｘは好ましくはフコシル基である。 式Ｉにおいて、Ｘ２が硫酸塩基であるとき、Ｘは好ましくは水素である。 一つの好適な実施態様において、ＩＶまたは１１梨核構造を仔する血液型決定基 に関連するオリゴ糖配糖体は、以下の実施例Ａに記載されるオリゴ糖配糖体Ａ− ＮのＩ！ｔから選択される。 好ましくは、ＩＴ２または１１型核構造を存する血液型決定基に関連するオリゴ 糖配糖体は、哺乳動物か抗原に暴露されてから少なくとも１時間後に哺乳動物に 投与され、さらに好ましくは哺乳動物が抗原に暴露されてから約１から１０時間 後に投与される。別の好適な実施ｇ！様において、ＩＶまたはＩＩ型型溝構造有 する血液へツ決定基に関連するオリゴ糖配糖体は、哺乳動物が抗原に暴露されて から約ｌから５時間後に投与される。 図の部用な説明 図１は、ＩＯμｇのＬｌｌｌ　Ｓ一層タンパク抗原投与の２４時間後に測定され た、ＤＴＨ炎症応答により発生する免疫マウスのフットパッド膨張の増加を示し 、いくつかのマウスは抗原投与の５時間後に、■型またはＩＩ型型溝構造有する 血液型決定基に関連する、１００μｇの異なるオリゴ糖配糖体で処理された。 図２は、２０μｇのＬｌｌｌ　Ｓ一層タンパク抗原投与の２４時間後に測定され た、ＤＴＨ炎症応答により発生する免疫マウスのフッ１−パッド膨張の増加を示 し、いくつかのマウスは１ノ″Ｌ原投！ｊの５時間後に、ＩＶまたはｌ１Ｍ’Ｊ 、＆構造を打する血液型決定基に関連するオリゴ糖配糖体よりなる、種々の用量 の異なるモノ−およびオリゴ糖配糖体て処理された。 図３は、−次免疫から２週間後モしてＬｌｌｌ　Ｓ一層タンバグ抗原投与から１ 週間後の二次抗体応答（すなわち、４９００ｍの０−フェニレンジアミン０．Ｄ 。 の定量により測定された抗体俄によって決定される）と、異なる１１１１１型決 定基に関連するオリゴ糖配糖体か、マウスか抗原投！ｊから５時間後にこれらの オリゴ糖配糖体で処理された時に、これらの応答に及ぼす効果を示す。 図４は、ＩＶまたはＩＫ核槽構造有する血液型決定基に関連するオリゴ糖配糖体 （すなわぢ、ノアリルルイス’−ＯＲ；Ｒ＝８−メトキンカルボニルオクチル） の、Ｌｕ１ｌ　Ｓ一層タンパク抗原投与された免疫マウスの炎症性ＤＴＨ応答に 及はす効果を示し、ここでマウスは抗原投与の前後の種々の時間に１００μｇの シアリルルイス”　−ＯＲで処理された。 図５は、７日日に２０μｇのＬｌｌｌ　Ｓ一層タンパク抗原で抗原投与した５時 間後に、ＩＶまたはＩＩＶ核構造を有する血液型決定基に関連するオリゴ糖配糖 体５ｍｇ／ｋｇを注射した後の、免疫マウスで発生した長期間（８週間）の免疫 抑制を示す。 図６は、７０口に２０μｇのＬｌｌｌ　Ｓ−賢タンパク抗原で抗原投与した５時 間後に、ＩＶまたは！１型該構造を有する血液型決定基に関連するオリゴ糖配糖 体を含む種々の量のモノ−およびオリゴ糖配糖体を注射した後の、免疫マウスで 発生した長期間（６週間）の免疫抑制を示す。 図７は、７［１目に２０μｇのＬｌｌｌ　Ｓ一層タンパク抗原で抗原投！うした 前後の種々の時間に、５ｍｇ／ｋｇのシアリルルイスゝの８−メトキンカルボニ ルオクチル配糖体を注射したｉ（の、免疫マウスて発生した長期間（１０週間） の免疫ＩＩｌ制を示す。 図８は、シアリルルイスゞの８−メトキシカルボニルオクチル配糖体での処理に よりあらかしめ抑制されていた免疫マウスの、ＤＴＨ炎症応答のシンロホスフ７ ミト誘発による回復を示す。 図９は、炎症応答を誘発するのに使用された抗原の性質か、シアリルルイス８の ８−メトキシカルボニルオクチル配糖体のＤ　Ｔ　Ｈｌｊ：答を制鍾する能力に 影響を１−７えないことを示す。 図１０は、ＨＳ　ＶｆＡ：片段ｔｊの２４時間後に測定されたＤＴＨ炎症応答に より発生する免疫マウスのフットバット 時にシアリルルイス１て処理され、少数のマウスは抗原投！ｊの５時間１！ｔに シアリルルイス０て処理された。 ｒ４１１は、−次免疫から２週間１多ぞしてＨ　Ｓ　Ｖ抗原投りから１週間後の 二次抗体応答（すなわぢ、４９０μｍ（７）ｏ−フェニレンジアミンＯ．　Ｄ　 の定量により測定された抗体用によって決定される）、およびシアリルルイス０ の投与時間がこれらのＬコ；答に及ばず影響を示す。 ［４１２は、ＩＴ　ｎｉ７のシアリルルイス８の８−メトキシカルボニルオクチ ル配糖体ての処理により抑制された免疫マウスの、ＤＴＨ炎症応答の、シンロホ スファミＩ・（Ｃ　Ｐ）誘発による回復を示す。 図１３は、ＯＶＡ抗原投与された免疫マウスの炎症Ｄ　Ｔ　Ｈ　ｃ；答に及はす シアリルルイス８の８−メトキシカルボニルオクチル配糖体の影響を示し、ここ でマウスは抗原投与から５時間後に、静脈内投与（ＩＶ）または鼻腔内設＃（Ｉ Ｎ）のどちらかでシアリルルイス８の８−メＩ・キノカルボニルオクチル配糖体 で処理されＩこ。 ［（１４は、ＯＶＡ抗原抗原ｊされた免疫マウスの炎症ＤＴＨ応答に及はすシア リルルイス１の８−メトキシカルボニルオクチル配糖体の影響を示し、ここでマ ウスは抗原投与から５時間ｉ＆に、静脈内投与（ＩＶ）または膵腔内投与（ＩＮ ）のとちらかてｐ１々の量のシアリルルイス８の８−メトキシカルボニルオクチ ル配糖体で処理された。 Ｉｎ＋５△は、２０μｇの０■△ＩＪｔ原投Ｌ３の２４時間後に測定された、Ｄ ＴＨ炎症応答により発生する免疫マウスのフットバットウスと比較されており、 ここで異なる８１のマウスは抗原投与の５時間、１０時間、１２時間、１５時間 、１８時間、および２４時間後に、ｌｌｌ型槽構造有する血液型決定基に関連す る２００μｇのオリゴ糖配糖体［シアリルルイス”−ＯＲ，Ｒ＝−　（ＣＨ２’ Ｉ　、Ｃｏ．ＣＨ，］で処理された。 図１５Ｂは、図１５Ａの感作されたマウスでのシアリルルイスゝ−ＯＲ投与によ る最大炎症の低下パーセントを示し、ここて最大炎症とは、抗原投与直後にＰＢ Ｓのみを投与した場合の、ＯＶＡ抗原投与から２４時間後に発生する炎症と考え た。 図１６は、図１５Ａの感作されたマウスでの抗原投与から４８時間後の、残存す る炎症（フットバット ［４１７は、後にＩＶまたはＩＩ型型溝構造有する血液型決定基に関連するオリ ゴ糖配糖体を調製するのに使用される、部分的にブロックされたＮ−アセチルグ ルコサミン誘導体の合成の反応概略図を示す。 図１８は、後にＩＶまたはＩＩ堅核構造を有する血液型決定基に関連するオリゴ 糖配糖体を調製するのに使用される、ブロックされたフコース誘導体の合成の反 応概略図を示す。 図１９は、後に■撃または＋＋ｑ核構造を（Ｔする血液型決定基に関連するオリ ゴ糖配糖体を調製するのに使用される、部分的にブロックされたガラクトース誘 導体の合成の反応概略図を示す。 図２０は、ガラクトース誘導体の３位に硫酸塩置換基を有する修飾ルイス１化合 物の合成を示す。この概略図で、３−位か選択的に脱ブロックされて次に選択的 に硫酸塩置換基に変換され得るように、ガラクトースの２、３位は差別的にブロ ックされる。 図２１は、ガラクトース単位の３位に硫酸塩置換基を有する修飾ルイス８化合物 の合成を示す。この概略図て、ガラク］・−スの２、３位は差別的にブロックさ れていない。従って、ガラクト一対１位の３−位の脱保護はまた２−位の脱保護 も引き起こして、続く３−位での硫酸塩の形成反応は収率１００９６では進行せ ず、ガラク！・−スの２−位に硫酸塩置換基をＨする少量の生成物が得られるが 、これは次にクロマトグラフィーにより分離される。 図２２は、ガラクトースの３−位に硫酸塩置換基を有する修飾ルイスＸ誘導体の 合成を示し、これは後に脱ブロックされてグルコサミン誘導体を与える６−ベン ノルおよび２−Ｎ−フタロイルブロック化グルコサミンを利用している。 この図において、６−ヘンノルおよび２−Ｎ−フタロイルブロック化グルコサミ ン１５の３，４−ノヒトロキッル基がブロックされていないため、ｌ−ブロモ− ２，ａ、４．　６−チトラアセチルガラクトースＧａｌ（ｌ−”４）βＧ　Ｉ　 ｃ　ＮＨｔ　ＯＲ誘導体４８およびブロックされたβＧａ　Ｉ　（　１−”３’ ）βＧ　Ｉ　ｃ　ＮＨ２　０Ｒ誘導体（図示していない）の両δを生しさせる。 次にこれらの物質は、合成の適切な時点てさらに誘導体化されて、■堅また（鉗 盟核構造を仔する血液）フ決定基に関連するオリゴ糖配糖体のＮ−官能基化誘導 体を与える。 １４２３は、ガラクトースの３−位に硫酸塩置換基を存する修飾ルイス８化合物 の第２の合成を示し、これは２−アミノまたはＮ−官能基化ルイス１誘導体の選 ｕく的調製を可能にする、異なるＮ−フタロイルブロック化グルコサミン中間体 を利用する。この図において、グルコサミンの４−位だけがブロックされていな いため、ブロックされたβＧａｌ　（ｌ−４）βＧＩＣＮＨ２　０Ｒ誘導体７０ （７）みか形成される。 図２４は、ガラクトース単位の３位に硫酸塩置換基を存する修飾ルイス１類似体 の調製を示す。この概略図で、ガラクトースの２、３位は差別的にブロックされ ているため、３−位が選Ｕく的にブロックされて次に選Ｖく的に硫酸塩置換基に 変換され得る。 図２５は、ＧＩｃＮＡｃ−ＯＲの６−アジド誘導体の合成を示す。 図２６は、ＧＩｃＮＡｃの６−アルコキノ誘導体、６−ブロモ誘導体、および６ −デオキシ誘導体の合成を示す。 図２７Ａおよび２７Ｂは、シアリルルイス０　（化合物１　１　２ｂ−ｄ）とシ アリルルイスＡ　（化合物１０８８−ｄ）の類似体の化学−酵素的合成について の一般的反応８８図を示し、図中、Ａｃはアセチルを表し、Ｂｎはベンジルを表 し、そしてＲはー（ＣＨ２　）ｌ　Ｃ０２　ＣＨ．を表す。 図２８は、Ｎ−アセチルグルコサミン単位のＣ−２および／またはＣ−６位を修 飾されたシアリルルイス１の類似体の別の化学−酵素的合成法を示す。 図２９および３０は、Ｉ型およびＩｌｕ構造の合成のための一般的概略図を示す 。 ＋４３１は、Ｎ−アセチルグルコサミン単位のＣ−６位を修飾されたシアリルル イス８およびシアリルルイス８の類似体の化学−酵素的合成のための一般的反応 １！０１３図を示す。 図３２は、Ｎ−アセチルグルコサミンｒ１１−位のＣ−２位を修飾されたシアリ ルルイス１およびシアリルルイス１の類似体の全化学合成のための一般的反応概 略図を示す。 図３３は、Ｎｅｕ５Ａｃの誘導体の合成のために使用される一般的合成概略図を 示す。 図３４は、モノ−およびオリゴ糖配糖体２０３ｂから２０７ａの構造を示す。 図３５は、実施例３８に記載されるオリゴ糖配糖体２０４ｃの合成、および実施 例３９に記載される慴動（モノサソノＪライド）配糖体２３７の合成のための一 般的反応概略図を示す。 図３６は、βＧａｌ　（１→３／４）βＧＩ　ｃＮＡｃａ　（２＋３°）シアリ ルトランスフェラーゼによる、βＧａｌ（１→３）βＧＩｃＮＡｃ−末端構造へ の、Ｎｅｕ５Ａｃおよびその類似体（集合的に「シアル酸」）の酵素的転移を示 す。 図３６はまたソアリル化オリゴ糖配糖体上へのし一フコースの酵素的転移も示す 。 図３７は、βＧａｌ　（１　→３／４）βＧＩ　ｃＮＡｃａ　（２　→３’　） シアリルトランスフェラーゼによる、βＧａｌ（１→４）βＧＩｃＮＡｃ−末端 構造への、Ｎｅｕ５Ａｃおよびその類似体（集合的に「シアル酸」）の酵素的転 移を示す。 図３７はまたシアリル化オリゴ糖配糖体上へのし一フコースの酵素的転移も示す 。 図３８は、βＧａｌ（１→４）βＧ］　ｃＮＡｃａ　Ｃ２−＋６°）シアリルト ランスフェラーゼによる、βＧａｌ（１→４）βＧＩｃＮＡｃ−末端構造への、 Ｎｅｕ５Ａｃおよびその類似体の酵素的転移を示す。 図３９は、βＧａｌ　（１−＝３／４）βＧｌ　ｃＮＡｃａ（２−３’　）シア リルトランスフエラーセによる、βＧａｌ（１→４）βＧｌｃ−（ラクトース） 末端構造への、Ｎｅｕ５ΔＣおよびその類似体の酵素的転移を示す。 図４０は、βＧａ　Ｉ　（１−３）ａＧａ　ｌＮＡｃｃｒ　（２→３’　）シア リルトランスフェラーゼによる、βＧａ　Ｉ　（１−３）ａＧａ　ＩＮＡｃ−　 （　ｒＴＪ　）木端構造への、Ｎｅｕ５ΔＣおよびその類似体の酵素的転移を示 す。 図４１および４２は、シアリル化ハブテンの化学修飾による、シアリルルイス６ の類似体の合成に関する反応概略図を示す。 Ｉ４４３は、シアリル化ハブテンの化学修飾による、シアリルルイス８の類似体 の合成に関する反応１６図を示す。 図４４は、シアリルニ量体ルイス８および内部てモノフコノル化されたその誘導 体に至る合成経路を示す。図４４で、化合物３０１ａの名前はβＧａｌ（１−４ ）βＧｌｃＮΔｃ（１−３）βＧａｌ　（１−４）βＧＩｃＮＡｃ−ＯＲである か、時にノーＮーアセチルラクト→Ｊーミニル四糖と呼ばれる。同様に、図４４ の化合物３０５ａおよび３０５ｂに（ｒ（［する人動部分は、時にＶＴＭ−２エ ピトープまたはＣＤ−６５’と呼はれ、そして３０７ａおよび３０７ｂはノアリ ルニ量体ルイス′と呼はれる。 図４５は、シアリル　ジ−Ｎ−アセチルラクトサミニルハブテンの外部でモノフ コノル化された誘導体に至る合成経路を示す。 図４６は、モノフコシル化およびモノンアリル化化合物に至る酵素的経路を示す 。 図４７は、その後間４６によりモノフコツル化およびモノンアリル化化合物を調 製するのに使用され得る、二糖３１９の別の化学合成を示す。 図」８は、図４６に記載された酵素的経路か人動配糖体の構造を延長するのにｆ 重用され１することを示す。 好適な実施！１！！様の詳細の説明 上述のとおり、本発明は、感作された哺乳動物の抗原誘発性の炎症を低下させる ためには、哺乳動物の抗原投与に対する二次免疫応答の開始後で、かっ哺乳動物 か最大炎症応答を経験するのに要する時間の半分経過前に、Ｉ型または］１型咳 構造を仔する血液型決定基に関連するオリゴ糖配糖体は投与されなければならな いという発見に関する。 しかし、本発明をさらにＮＹ細に記載するｉｉ＋に下記の川８！１が最υノに定 義される：Ａ．定義 本発明中で使用される下記の用語は以下に与えられる定義を有する：用語「感作 された哺乳動物Ｊは、以前にある抗原に暴露し、従ってその免疫系かその抗原に 教育された（ｅｄｕｃａｔｅｄ）哺乳動物のことをいう。典型的には、哺乳動物 への初回抗原暴露は、そのようなθＪｌ！Ｉｎ露中の炎症は最小にして、後の同 じ抗原暴露に対する哺乳動物の免疫応答をプライム（ｐｒｉｍｅ）または教育す る。 １１語［二次免疫応答」は、以ｎ；ｉに感作された抗原に対する哺乳動物の免疫 応答のエフェクター相（ｅｆｆｅｃｔｏｒ　ｐｈａｓｅ）を意味する。哺乳動物 の二次免疫応答は、典へ１的には抗原暴露時点て炎症を伴う。 用語「抗原」は、哺乳動物に暴露するとその哺乳動物に免疫応答を誘発する、タ ンパク、ペプチド、炭水化物、核酸または他の非内因性物質を意味する。 抗原ｇ露により引き起こされるとηえられる病気は、例えば乾１、喘息、皮膚炎 、リウマチ様関節炎、遅延型過敏症、陽炎（ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ　ｂｏｗ ｅｌ　ｄｉｓｅａｓｅ）、多発性硬化症、ウィルス性肺炎、細菌性肺炎などを含 む。 用語［最大炎症のための時間」は、特定の抗原への暴露により、感作された哺乳 動物の炎症か最大に達するのに典型的に要する時間のことをいう。この時間の長 さは、いくつかの要因（例えば、その哺乳動物が暴露した特定の抗原、抗原に暴 露されたその特定の哺乳動物の種など）に依存する。従って、感作された哺乳動 物の抗原誘発性炎症か最大に達するのに要する時間の長さは、例えば喘息ではり ウマチ様関節炎とは異なっているであろう。 さらに、最大炎症のための時間は各哺乳動物種で多少異なっているであろうが、 ヒトおよび池の哺乳動物での喘息、リウマチ様関節炎、乾廚、ＤＴＨなどを引き 起こす、異なる抗原暴露により最大炎症に達するまでの典型的な時間は、当該分 野で公知であるかまたは当業音か容易に確認できる。例えば、マウスにおけるＤ ＴＨ応答の場合、最大炎症は典型的には抗原暴露の２４時間後である。 用語「Ｉ型または１■型核構造を存する血液型決定基」は、（ａ）βＧａｌ（１ −３）βＧＩｃＮＡｃの１型核ニー糖構造をイｒするか、またはβＧａ１（１− ４）βＧＩｃＮΔＣのＩＩ型核二糖構造を打するオリゴ糖配糖体、またはその類 似体。 （ｂ）２から９の糖弔位を有するオリゴ糖配糖体（ＩＬＩＬ、もしこのオリゴ糖 配糖体か二糖中位のみを仔するならば、口のオリゴ糖配糖体は少なくとも一つの 生理的ｐＨて′ＦＬ荷を帯びる置換基（例えは、硫酸塩基、リン酸塩基またはカ ルボキシル基（例えば、−ＣＨＲ，□Ｃ００Ｈ））をガラクトース単位の２．３ または６位のとこかに存する）；　（Ｃ）末端か還元糖上の−ＹＲ基であるオリ ゴ糖配糖体のいずれかを、ＦＸ味する。 式βＧａｌ　（１−＝３）βＧｌｃＮΔＣおよびβＧａｌ　（１→４）βＧＩｃ ＮＡｃのオリゴ糖は、全ての１型および１１型血液７’ｌ決定基がこの核二糖構 造を含（ｆするため、各／、ヒトｌ望およびＩＩ堅血液型決定基の核構造である 。 核１まｔ：は１１型構造を打する＋ｌｉｔ能型決定型決定基体は、その中にこれ ら三糖構造の一つまたは両方の弔糖＋１を位か、一つまたはそれ以上の官能基（ ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ　ｉ　ｌｙ）を導入および／または除去するために化学修 飾されているものを含む。例えば、この修飾は一〇〇官能基の脱１１１１ｔ（す なわち、チオキシ置換基の形成）、アミン官能基、ハロ官能７４、アット官能基 、アミド官能基、カルバメート官能基、硫酸塩官能基、リン酸塩官能基、カルボ キシル官能基（例えば、−ＣＨＲ、、ＣＯＯｌ（）などの導入を引き起こし得る 。 好適な１型またはｌＩ堅咳構造を（ｆする血液型決定基に関連するオリゴ糖配糖 体は式Ｉおよび１１て表される。 （式中、Ｒは水素、糖−〇Ｒ，，，２から７の糖１１位を有するオリゴ糖−０Ｒ ４、および少なくとも１つの炭素原子を有するアグリコン（Ｒ１，は水素または 少なくとも１つの炭素原子をイｒするアグリコンである）よりなる群から選ｕく され。 Ｙは酸素、イ才つ、および−ＮＨ−よりなる肝から選択され：Ｒ１は水素、−Ｎ Ｈ，、−Ｎ２、−ＮＨ３Ｏ，Ｈｌ−ＮＲ％Ｃ（０）Ｒ４、−Ｎ＝Ｃ（Ｒ１）　２ 、−ＮＨＣＨ（Ｒ，）　２、−ＮＨＲ，、−Ｎ　（Ｒ，）！、−０Ｈ１−ＯＲ＠ 、−３（０）Ｒ，、−３（０）２　Ｒ，および硫酸塩（式中、Ｒ１は、水素、炭 素原子数１から４のアルギル、−ＯＲ，（Ｒ，は炭素原ｆ−数ｌから４のアルギ ル、または水酸Ｊ＆で置換された炭素原子数２から４のアルキルである）、およ び−ＮＲ，Ｒ，（Ｒ，およびＲ９は、独立に水素および炭素原子数１から４のア ルキルよりなる肝から選択される）よりなる群から選択され、 各Ｒ６は水素および炭素原子数１から４のアルギルよりなるｒ！Ｔから選Ｕくさ れ、各Ｒ＠は炭素原子数１から４のアルキルである）よりなる１１から選択され ：Ｒ２は水素、−Ｎ、　、−ＮＨ，、−ＮＨ３Ｏ，Ｈｌ−ＮＲ，、Ｃ（０）Ｒ１ ゜、−Ｎ＝Ｃ（Ｒ１＋）　２、−ＮＨＣＨ（Ｒ１１）　２、−Ｎｌ（Ｒ１２、Ｎ 　（Ｒ１２）２、−ＯＨおよび一０Ｒ１２ （式中、Ｒ１゜は、水素、炭素ｌｉｄ子数１から４のアルギル、　ＯＲ＋−（Ｒ ＋２は炭素原子数１から４のアルキル、または水酸基で置換された炭素原子数２ から４のアルギルである）、および−ＮＲ１４ＲＨ（Ｒ１１およびＲｌｓは、独 立に水素および炭素原子数１から４のアルキルよりなる群から選択される）より なる群から選択され、 各Ｒ１１は水素および炭素原子数１から４のアルキルよりなる群から選択され、 各Ｒ１２は炭素原子数１から４のアルキルである）よりなる群から選択され。 Ｒ３は水素、フルオロ、硫酸塩およびヒ１〜口キソよりなる群から選択され：Ｘ は水素、Ｌ−フコノル、４−スルホ−し−フコツル、および４−ホスホ−し−フ コツルよりなる肝から選択され： Ｘ１は水素、シアリル、硫酸塩、リン酸塩、および−ＣＨＲｌｓ　ＣＯＯＨ（Ｒ ｌｓは水素、炭素原子数１から７のアルキルおよび−ＣＯＯＨよりなる群から選 択される）よりなる群から選択され： Ｘ２は水素、ノアリル、硫酸塩、りン酸塩、および−ＣＨＲ，、Ｃ０ＯＨ（Ｒ１ ゜は水素、炭素原Ｔ数１から７のアルキルおよび−ＣＯＯＨよりなる肝から選Ｕ くされる）よりなる１ｉＴから選択される）のオリゴ糖配糖体よりなる１１工か ら選ｌＪ＜されるオリゴ糖配糖体、および薬剤として３１容されるその塩（但し 、Ｘか水素ならばＸＩまたはＸ、の少なくとも一方は水素てないか、またはＲ１ は硫酸塩である。さらに、ＸｌおよびＸ２の一方のみかシアリルである）。 用語［少なくとも１つの炭素原Ｔ−のアグリコン」は、少なくとも１つの炭素原 子を有する非糖含有残基をいう。好適な実施態様において、そのアグリコン部分 （Ｒ）は、−（Ａ）　−Ｚ’ （式中、Ａは結合、炭素原子数２から１０のアルキレン基、および式−（ＣＨ２ ＣＲ２゜Ｇ）ｎ−の部分（式中、ｎは１から５に等しい整数てあり、Ｒ２゜は水 素、メチル、またはエチルよりなる１１↑から選打くされ、そしてＧは水素、ハ ロゲン、酸素、イオウ、窒素、フェニルおよび１か６３の置換基（アミン、ヒト ロキンル、ハロ、炭素原子数１から４のアルキルおよび炭素原Ｙ数１から４のア ルコキノよりなる肝から構成される装置換されたフェニルよりなるＩｆｆから選 択される）であり。 Ｚ゛は水素、メチル、フェニル、アミノフェノール、ニトロフェノールよりなる 肝から選択され、そして、Ｇか酸素、イオウまたは窒素でなく、そしてＡか結合 でない時、Ｚ゛はさらに一０Ｈ１−３Ｈ１Ｎ　Ｈ２、Ｎ　ＨＲ２１、Ｎ　（Ｒ２ １）２　、　Ｃ（０）ＯＨ１−Ｃ（０）ＯＲ，、、−Ｃ（０）ＮＨ−ＮＨ，、− Ｃ（０）　ＮＨ２、−Ｃ（０）　ＮＨＲ２，、−Ｃ（０）　Ｎ　（Ｒ２，）　２ 　、および＝ＯＲ２２（式中、各Ｒ１１は独立に炭素原子数１から４のアルキル てあり、Ｒ２２は炭素原子−数３から１０のアルケニル基である）よりなる群か ら選択される）よりなる基から選択される。 当該分野で多くのアグリコンか公知である。例えは、バラ−ニトロフェニル基（ すなわぢ、−ＹＲ＝−ＱＣ，Ｈ，ｐＮｏ□）よりなるアグリコンは、エクポーク ゛（Ｅｋｂｏｒｇ）ら１５によって開示されている。合成中の適切な時期に、そ のニトロ基はＮ−トリフルオロアセトアミ トリフルオロアセトアミド に″Ｉ′４能基化するのに使用されるアミノ基を露出する。 イ才つを含（Ｔするアグリコン基は、ダーメン（Ｄａｈｍｅｎ）ら１′によって 開示されている。具体的には、該アグリコンは、請求核分子との置換反応で、種 々の末端官能基（例えは−ＯＣＨ２ＣＨ２ＳＣＨ２ＳＣＯ２　ＣＨ３および一Ｏ ＣＨ．ＣＨ，ＳＣ．Ｈ．−ｐＮＨ，）をイ丁するアグリコン（こなることか示さ れている２−ブロモエチル基から誘導される。 ラーナ（Ｒａｎａ）ら１７は、トリフルオロアセトアミＦ保護ＪＥ，か脱離され て、後に該アグリコン基 １−リフルオロアセトアミＩ・ヘキソルアグリコン（　０　（ＣＨ．）＠−ＮＨ ＣＯＣＦ．）を開示している。 公知アグリコンの他の例には、７−メドキノカルボニルー３．６−ノオキザへブ チルアグリコン”　（−０ＣＨ２−ＣＨ２）、ＯＣＨ２Ｃｏ２ＣＩ，；　２−　 （４−メトキノカルボニルフ゛タンカルポキーサミト）エチル１１アグリコン（ −０ＣＨ２ＣＨ，ＮＨＣ　（０）（Ｃｌ（２　）、Ｃｏ．ＣＨ．　）：Ｊ切なモ ノマーとのラジカル共重合によって共重合体を生成するアリルアグリコン”　（ −０ＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ２　）かある、池のアリルアグリコン２１は公知である［ 例えば、−０　（ＣＨ。 ＣＨ２０）　２ＣＨ，ＣＨ＝ＣＨ，］。さらに、アリルアグリコンは、２−アミ ノエタンチオール２２の存在Ｆて誘導体化されて、アグリコン−　Ｏ　Ｃ　Ｈ□ ＣＨ２　ＣＨ２　ＳＣＨ２　ＣＨ２　ＮＨ２を与える。さらに他のアグリコンは 以後本明細寿中に記載される。 さらに、ラトクリフ（Ｒａｔｃｌｉｆｆｅ）ら３７か示すように、Ｒ基は還元糖 末端にアグリコンを含有する追加の糖−ＯＲ１，またはオリゴ糖−ＯＲ，．てあ ってもよい。 好ましくは、アグリコン部分は離水性基てあり、最も好ましくはアグリコン部分 は、−　（ＣＨ２）＠　ｃｏｏｃＨ＋　、−　（ＣＨ２）、ＯＣＨ．ＣＨ＝ＣＨ ，および−（ＣＨ２　）ｒ　ＣＨ２　０Ｈよりなる群から選Ｕくされる疎水性基 である。 Ｉ堅または１１盟咳構造を有する血液型決定基に関連するオリゴ糖配糖体に有用 な１；１１−位（すなわち糖類）は、例えばグルコース、ガラクトース、Ｎ−ア セチルグルコサミン、Ｎ−アセチル−ガラクト→ノ′ミン、フコース、シアル酸 （以下に定義される）、３−デオキシ−Ｄ、Ｌ−オクッロソン酸（３−ｄｅｏｘ ｙ　−Ｄ、Ｌ　−ｏｃｊｕｌｏｓｏｎｉｃ　ａｃｉｄ）なとの全ての天然および 合成誘導体を含む。それらがピラノースＩ％ｊであることにｔｕｔえて、１【１ を液撃決定）ｌに関連するオリゴ糖配糖体中のすへての糖中位は、ｌであるフコ ースを除いてＤ型である。 用語［シアル酸」または「ノアジル」は、シアル酸およびシアル酸類似体（その ＣＭＰ−誘導体として、βＧａ　ｌ　（１−＝３／４）βＧｌｃＮＡｃｃｒ　（ ２→３）ノアリルトランスフェラーゼおよび／またはβＧａ１（１→４）βＧＩ ｃＮＡｃα（２−６）ソアリルトランスフェラーゼと融和性がある）の全ての天 然に存在する構造を、朽味する。このＩ飄て、ＣＭＰ−誘導体として、酵素に結 合するためにこれらのノアリルトランスフエラーセのともらかに認識されて、Ｉ 型または＋ｔａｔ核構造全構造するオリゴ糖配糖体に転移させるために利用可能 なシアル酸は、これらのノアリルトランスフェラーセと融和性かあるといわれる 。 シアル酸の天然に（′ｒ（Ｅする構造は、例えば５−アセ１−アミド−３，５− ジデオキシーＤ−グリセロ−Ｄ−がラクト一ノヌロピラノソロン酸（ｒＮｅｕ５ Δｃ　＋）、Ｎ−グリコイルノイラミン酸（Ｎｅｕ５Ｇｃ）および９−０−アセ チルノイラミン酸（Ｎｅｕ５，９ＡＣ２）を含む。現在までに知られている天然 に存在するシアル酸の完全なリストはシャウア−（Ｓｃｈａｕｅｒ）”によって 提供される。 シアル酸類似体は、そのような構造に一つ以上の官能基を導入および／または脱 離するため、その中のシアル酸中位か化学的に修飾されているものを含む、シア ル酸の天然にｒ！、在する構造の類似体のことをいう。例えばそのような修飾は 、−０ＨＴ７能基の脱離、アミン官能基の導入、ハロ官能基の導入などを引き起 こし得る。 シアル酸のいくつかの類似体は当該分野で公知であり、例えばＮｅｕ５Ａｃの６ −チオ類似体とともに、９−アジド−Ｎｅｕ５Ａｃ、９−アミノ−Ｎｅｕ５ΔＣ １９−デオギノーＮｅｕ５Ａｃ、９−フルオロ−Ｎｅｕ５Ａｃ、９−ブロモ−Ｎ ｅｕ５Ａｃ、７−デオキシーＮｅｕ５Ａｃ、７−ニピーＮｅｕ５Ａｃ、７，８− ヒス−エビ−Ｎｅｕ５ΔＣ１４−０−メチル−Ｎｅｕ５Ａｃ、４−Ｎ−了セチル ーＮｅｕ５Ａｃ、４．７−シーデオキシーＮｅｕ５Ａｃ、４−オギ′ノーＮｅｕ ５Ａｃを含む。本明細書中でシアル酸の類似体を記載するのに使用した名ｎ；１ は、ロイター（Ｒｅｕｊｅｒ）らｔ４の記載する命名法による。 シアル酸のＣＭＰ−ヌクレオチド誘導体は、天然に存在するシアル酸またはその 類似体のフチジン−５−リン酸＋！！誘導体を意味する。シアル酸かＮｅｕ５Ａ ｃである場合、ＣＭＰ誘導体は式。 用語［フコースｊまたは「フコシル」は、ＧＤＰ−誘導体として、βＧａ１（ｌ →３／４）βＧＩｃＮＡｃα（！→３／４）フコシルトランスフェラーゼと融和 性のし一フコースおよびその類似体を意味する。以下に記載するように、このフ コツルトランスフェラーゼはヒト乳から容易に単離される。さらに、これらのフ コースまたはフコツル化合物は、適切な特異性を持つフコツルトランスフェラー ゼ（例えはクローン化フコツルトランスフェラーゼ６６・＠＠）と融和性であろ うことが企図される。 上記の点に関して、ＧＤＰ−誘導体として、酵素に結合するためにこのβＧａ］ （１→３／４）βＧＩｃＮＡｃα（１→３／４）フコシルトランスフェラーゼに 認識されて、上記式Ｉおよび式ＩＩ　（Ｘ＝Ｈ）に転移させるために利用可能な フコース化合物は、このフコシル１ランスフエラーゼと融和性であるといわれる 。 フコース類似体は、その構造に一つ以」二の官能基を導入および／または脱離す るため、フコース中位か化学的に修飾されているものを含む、フコースの天然に ｒｒ存する類似体および合成の類似体のことをいう。例えばそのような修飾は、 −ＯＨ官能基の脱離、アミン官ｒ１ヒ基の導入、ハロ官能基の導入などを引き起 こし得る。 いくつかのフコースの融和慴類似体は当該分野で公知であり、例えば、３−デオ キシフコース、アラヒノースなと＠７かある。 フコースのＧＤＰ−誘導体は、式 を有するグアノノン５°−（β−α−Ｌ−フコピラノツル）ニリン酸およびその 全ての融和性の塩を意味する。ＧＤＰ−フコースを調製する方法は当該分野で公 知である。しかし、ＧＤＰ−フコースは好ましくはジアン（Ｊｉａｎｇ）ら４？ により合衆国↑ｙ泊出願第０７／８４８，２２３号（その全体か本明細δ中に参 考文献として引用されている）に記載された方法により調製される。 用語［アミノ酸またはポリペブチジル残基」は、適切な型のアミノ酸またはポリ ペブチ１−を、ｌ型またはＩＩ型型槽構造有する血液型決定基に関連するオリゴ 糖配糖体と反応させて得られる生成物を意味し、この配糖体は、アミンかアミノ 酸またはポリペプチド」二のカルボキシル基または活性化カルボキシル基と反応 してアミド結合を形成する条件下の、Ｇ］ｃＮＡｃ弔位の２または６位にアミン 官能基（−ＮＨ，）を有する。使用される特定のアミノ酸またはポリペプチドは 決定的ではない。しかし、好適な実施聾様において、ポリペプチドは約２から約 ５のアミノ酸を含有し、好ましくは約２から３のアミ人酸を含有する。 用語［薬剤として許容される塩」は、塩を形成することか可能な１型またはＩＩ ベクＦｇ、構造を（Ｔ’する血液型決定Ｊ４に関連するオリゴ糖配糖体の、薬剤 として許容される付ＩＪｎ塩を含み、当該分野で公知の種々のイ「機および無機 の対温（ＣＯ聞ｔｅｒｓａｌｔｓ）から誘導され、例えばすＩ・リウム、カリウ ム、カルシウム、マグネシウム、アンモニウム、テトラアルギル了ンモニウムな とを含む。 用語「脱離可能なプロソギング基」または「ブロッキング基」は、ルイス６−Ｙ ＲおよびＬａｃＮＡｃ−ＹＲ化合物のガラクト−ス、Ｎ−アセチルグルコサミン 、シアル酸（カルボン酸部分の水酸基を含む）、フコース等、Ｉ型またはＩＩ型 型溝構造有する血液型決定基に関連するオリゴ糖配糖体の単位の、一つまたはそ れ以上の水酸基に結合すると、これらの水酸基に発生する反応を妨害する任意の 基を意味し、その保護基は水酸基を再構築するため従来の化学的または酵素的方 法で脱離できる。使用される特定の脱離可能なブロッキング基は、決定的ではな いが、好適な脱＃可能なヒドロキシルブロッキング基としては、ベンジル、アセ チル、クロロアセチル、ベンジリジン、ｔ−ブチルジフェニルシリルのような従 来の置換基、およびヒドロキシル基上に酵素的にまたは化学的に導入でき、後に 生成物の性質と融和性のある穏やかな条件下で１ｌｉｙ素的または化学的方法で 選ｕく的に脱離できる（ＴＪのＪ＆を含む。そのように追＋１目的に企図される ブロッキング基の一つは、α−ガラクトシダーゼて酵素的に脱離できるα−ガラ クトースである。 置換基−Ｘ、−Ｘ、および−Ｘ２を定義するために使用される用語「硫酸塩」は 、ガラクトース単位および／またはフコース基の水酸基の酸素とともに硫酸塩基 （すなわち、−０−３（０）、−０Ｈ）を形成する置換基をいう。従ってＸ１Ｘ １またはＸ２か硫酸塩である時、生成する一〇Ｘ、−ＯＸ、および／または−Ｏ Ｘ、基は一〇−３（０）、−ＯＨであり、これはその薬剤として許容される塩（ 例えば、−〇−３（０）　２−０−　Ｎａ′″）を容易に形成することかできる 。 これに反して、Ｒ３について使用される用語「硫酸塩」は、−０−３（０）、− ＯＨ基を意味し、これもまたその薬剤として許容される塩（例えは、−０−３（ ０）　２−０−　Ｎａ”　）を容易に形成することができる。 置換基−Ｘ、−Ｘｌおよび−Ｘ２を定義するために使用される用語「リン酸塩」 は、ガラクトース単位および／またはフコース基の水酸基の酸素とともにリン酸 塩基（すなオつち、−０−Ｐ　（０）−（ＯＨ）、）を形成する置換基をいう。 従ってＸ、Ｘ、またはＸ、がリン酸塩である時、生成する一ＯＸ、　ＯＸ　ｌお よび／または−ＯＸ、基は一〇−Ｐ　（０）−（ＯＨ）　２であり、これはその 薬剤として許容される塩（例えば、−０−Ｐ　（０）−（０−Ｎａ”　）−）を 容易に形成域Ｆの実施例に示すように、Ｉ型または］１盟咳構造を有する血液型 決定基に関連するオリゴ糖配糖体は、そのオリゴ糖配糖体か哺乳動物の二次免疫 応答の開始後であって、抗原暴露に誘発された炎症か最大に達するのに要する期 間の゛１′−分経過時点またはそれ以＊ｔｉｉに投１＝＋されるならば、感作さ れた哺乳動物の抗原誘発性炎症の程度を低下させるのにＧ効である。実施例へ− りのデータは、これらのオリゴ糖配糖体の投与時期の臨界性（決定的な重要ｔｌ ）を実証し、もしＩＳ２または［１９ｉ５構造をイｒする血液型決定基に関連す るオリゴ糖配糖体か哺乳動物の二次免疫応答の開始ｉｉｉに投与されると、炎症 の低下は達成されないことを示す。同様に、これらの実施例はまたＩ！Ｓ’！ま たはＩＩ型型溝構造ｆ丁する血液型決定基に関連するオリゴ糖配糖体か、哺乳動 物の炎症か最大に達するのに要する期間の半分経過時点後に投！うされると、炎 症の低下は最小限しか達成されないことを示す。 さらに、実施例Δ−りはＩ型または１１型核構造を存する血液型決定基に関連す るオリゴ糖配糖体か、免疫系の抗原へのり露後の決定的に重要な期間中に投与さ れると、さらに後からの抗原への暴露に対して寛容を誘導できることを示す。 上記の観Ｔ！工に関して、Ｉ型またはＩＩ型型溝構造有する血液型決定基に関連 するオリ二糖配糖体は、好ましくは抗原暴露の少なくとも約０．５時間後に患者 に投与される、さらに好ましくは、抗原暴露の少なくとも約１から１０時間後に 、さらに一層好ましくは抗原暴露の少なくとも約１から５時間後に、投与される 。 血液型決定基に関連するオリゴ糖配糖体は、約０．５ｍｇから約５０ｍｇ／ｋｇ 体重（好ましくは約０．　５から約５ｍｇ／ｋｇ体重ンの投与量範囲で投与され ると、感作された哺乳動物の抗原誘発性炎症を低下させるのに作動である。使用 される特定の投！ｊ量は、治療されるその特定の抗原誘発性炎症によって、また 例えは炎症の重症度、患者の年齢および一般的状聾、などの要因に依存する担当 医師の判定によって調節される。本明細書中に記載される薬剤組成物は、単回投 与、多数回投与または最大炎症まてに要する期間の半分まての臨界時間の範囲内 で連続的注入て投１＋され得る。 Ｉ型または１１型該構造を仔する血液型決定基に関連するオリゴ糖配糖体は、好 ましくは、〕し経口投与、央腔内投ｆｊ、経皮投！−ｊおよび静脈内投与て投与 されるか、他の投与剤型も企図される。 感作された口１ｎ乳動物の抗原誘発性炎症の抑制を与えることに加えて、Ｉ型ま たはＩＩ型型溝構造打するＩ（１【液へ′！決定基に関連するオリゴ糖配糖体の 投与は、同一抗原からのさらに後の抗原投ｔｊに対する寛容をも与える。この点 に関して、このオリゴ糖配糖体の投与の数週間後の同一抗原による１１ｆ抗原投 Ｌｉは、免疫応答の著しい低１゛をもたらす。 本発明の方法は、好ましくは有効暇の■型または＋Ｉ型型槽構造仔する唾液型決 定基に関連するオリゴ糖配糖体の、非経口投与に使用されるのに適切な薬剤組成 物の使Ｉｎ＋こより達成される。これらの組成物は、患者に投与されるときに上 述のオリゴ糖配糖体の投与量を与えるような、薬剤として不活性な担体（例えば 水、緩衝化生理食塩水なと）およびＩ型またはＩｔ型型槽構造有する血液９’Ｊ 決定基に関連するｆｆ効敵のオリゴ糖配糖体（またはその混合物）よりなる。適 切な薬剤組成物は、追加的に例えは保存剤なとのｆ１意の成分を含打てきる。 また、池の適切な薬剤組成物は、当該分野で公知の経口組成物、経皮組成物また はバンデーノなとの組成物を含んでよい。 さらに、Ｉ型またはＩｆ！５２ＦＵ溝造を仔する血液型決定基に関連するオリゴ 糖配糖体は、リボゾームおよびミセルの一部に組み込まれ、薬剤組成物中に処方 されることかてきる。 Ｃオリゴ糖配糖体の調製 ｌまたはＩ　ｌ　”ｌＦ５．構造を有する血液型決定基に関連するオリゴ糖配糖 体は、完全な化学合成によって、Ｇ　ｌ　ｃＮＡｃ−ＯＲ２ｌｉ構造、ルイスゞ −ＯＲ三糖構造、ＬａｃＮＡｃ−ＯＲ二三糖造、またはその構造の誘導体」ニへ 、１つ以上の糖単位を連続的に付加するためにグリコツＪｕ　ｌ−ランスフェラ ーゼか使用され、そして１つ以上の糖構造に修飾するために化学合成か使用され る化学的／酵素的合成によって、またはＧ］ｃＮΔｃ−ＯＲ糖糖部糖体ら出発す る完全な酵素的合成によって容易に調製される。 １体的には、Ｉ型またはＩＩ型型溝構造有する血液撃決定Ｊんに関連するオリゴ 糖配糖体を調製する酵素的方法は異なる工程で使用される。例えば、Ｌ−フコー スは、適切なフコシルトランスフェラーゼ（例えはヒト乳＋１６．２１　ｉから 容易に得られるβＧａ　ｌ　（Ｉ−３／４）βＧｌ　ｃＮＡｃα（１−３／４） フコシルトランスフェラーゼ）によって、ルイス０、ラクト−ス、Ｎ−アセチル ラクトサミン（ＬａｃＮＡｃ）　、ソアリル化ルイスゞ、ノアリル化うクト−ス 、ソアリル化Ｎ−アセチルラク１−サミン、その適切な誘導体などに、Ｆｉｙ素 的に転移され得る。 ＬａｃＮＡｃ−ＯＲ二三糖、Ｎ−アセチルグルコサミン配糖体（βＧｌｃＮＡｃ −ＯＲ）と公知のウノ乳β−がラクト−ス（ｌ→４）１−ランスフェラーゼから 酵素的に調製されｉする。ルイス゛配糖体（すなわち、βＧａ１（１→３）βＧ １ｃＮＡｃ−ＯＲ）は化学的に調製され１１する。 さらに、スルホ１−ランスフェラーゼは、Ｉ型またはｔｌ型構造のどちらかのが ラクト−スの３−位に硫酸塩化をしたらすために使用され得る。明らかなように 必要てあれは、スルホ転移のｉ（て上述のようにＪＩＪＪなフコノルトランスフ ェラーゼをＩＩ＋いてフコースの転移を行ってもよい。 あるいは、例えは硫酸塩化、リン酸塩化、または−ＣＨＲ＋５ＣＯＯＨ置換Ｌａ ｃＮΔｃ−ＯＲ＋Ｍ造、または硫酸塩化、リン酸塩化、または−ＣＨＲ，、Ｃ０ ＯＨ置換βＧａ１（１→３）βＧｌｃＮΔｃ−ＯＲ構造を化学的に調製して、フ コンル基は必要であれは酵素的に転移され得るというように、化学的および酵素 的方法を組合せてもよい。 化学合成は、完全なオリゴ糖配糖体の調製のために：糖単位を化学的に修飾し、 これを次に化学的にまたは酵素的にオリゴ糖配糖体に結合させるために、または オリゴ糖配糖捧を化学的に調製し、ここに１つ以」二の糖１ｊ位を酵素的に結合 させるために、便利な方法である。 ブロックされた中間体のいくつかの化学合成法はｒｒ在する２１．２１１０゜こ れらの中間体は、当該分野で公知の方法を使用する、１塑またはＩｔ型型溝構造 有する血液へ７決定基に関連するオリゴ糖配糖体の調製に適している。 化学修飾は、木端がラクトースの３および／または６位の硫酸塩またはりし酸塩 基または−ＣＨＲ１，Ｃ０ＯＨの導入、Ｎ−アセチルグルコサミンの２−および ６−位てのｆｌｉ、ガラクト−スの２−位の官能基の導入など、およびシアル酸 および／またはフコースの修飾を含む。この血液型決定基に関連するオリゴ糖配 糖体の調製方法は、ヴエノ（Ｖｅｎｏｔ）ら”　、カシエム（Ｋａｓｈｃｍ）ら １Ｇ、ヴエノ（Ｖｅｎｏｔ）ら１１．う１−グリコ（Ｒａｔｃｌ　１ｆｆｅ）ら １２．イッポリ−１−（１ｐｐｏｌ　ｉ　ｔｏ）らＢ、およびヴエバＶｅｎｏＤ ら１″に記載され、これらは各々その全体か本明細書中に参考のため引用されて いる。 本明細書以下の実施例１から５３および本明細書に添（・１の図１７から４８は 、ＩへりまたはＩ已ツ咳構造をイ１する＋１ａＦｉ’！決定１ｋに関連するオリ ゴ糖配糖体が調製される種々の合成１１１１１１’を図を＋＋Ｔ達する。これら の方法を公知の方法で修飾することにより、池のこのようなオリゴ糖配糖体を得 られる。 以下の説明ては実施例および図同様、還元糖の−ＯＲ基に言及される。しかし、 この基はその調製法か当該分野で公知の−ＮＨＲまたは−ＳＲてもありうること を理解されたい。 Ｃ１糖Ｂツマ−の化学的および化学的／酵素的合成巳−またはＩＩ撃咳構造をイ 丁する１１１［液へ２決定基に関連するオリゴ糖配糖体の合成の化学的方法は当 該分野で公知である。これらの物質は一般に、グルコサミン、フコースおよびガ ラクトースを含む適切に保護された個々の単糖、および適切に保護された個々の 三糖（例えばラクトース−ＯＲ，Ｎ−アセチルラクトサミン−ＯＲまたはβＧａ ｌ　（１→３）βＧｌｃＮＡｃ−ＯＲ中間体）を使用して組み立てられる。 使用される特定の方法は一般に各々合成される個々の構造に応して最適化される 。一般に、Ｉ望またはＩＩ型核溝造を有する血液型決定基に関連するオリゴ糖配 糖体の全てまたは一部の化学合成は、最？７Ｊに還元糖のアノマー炭素原子上に グリコノＦ’（ｇｌｙｃｏｓｉｄｉｃ）結合を形成させる。具体的には、適切に 保護された型の天然にｒｒ（Ｆ、するかまたは化学修飾された糖構造（グリコツ ル供与体）は、ハロゲン化物、トリクロロアセトイミデート 基を導入するために、還元弔位の了ツマー中心て選Ｕく的に修飾される。次に供 与体を、当該分野で公知の触媒条件下で、グリコノ１ル結合か構築される位置に 一つの遊離水酸基を打する、アグリコンまたは適切な型の炭水化物受容体と反応 させる。多種のアグリコン部分は当該分野で公知であり、還元単位のアノマー中 心に正しい配置で付加することができる。炭水化物合成の当該分野で公知の、融 和性のおるブロッキングＪ＆の適切な使用により、合成された警轡造の選択的修 飾、または追加の糖１１位または糖ブロックの受容体構造への追加の付加を可能 にする。 グリコント結合の形成ｉ＆、糖配糖体糖体追加の糖ｌｉｔ位を結合させるために 使用されるか、または選択された位置か化学的に修飾されて、または従来法によ る脱保護後に、酵素的合成に使用される。一般に、天然に存在するかまたは化学 的に修飾された糖１１１４１？、の活況糖体への化学的結合は、文献にＮＹ述さ れる確立した化学を利用することによって達成される。例えば、才力モト（Ｏｋ ａ（２）ｔｏ）ら２＋、了バス（Ａｂｂａｓ）ら３２、ボールセン（Ｐａｕｌｓ ｅｎ）”　、ン！ミツト（Ｓｃｈｍｉｄｔ）”　、フゲヂ（Ｆｕｇｅｄｉ）ら３ ５、カメヤマ（Ｋａｍｅｙａｍａ）ら０およびう１−クリ７（Ｒａｔｃｌｉｆｆ ｅ）ら３７を参照せよ。 同様に、オリゴ糖配糖体の調製のための酵素的方ｌノ；の使用もまた文献に記載 されている２５′１゜ ＣＩ　（ｉ）　ガラクト−ス単位上に硫酸塩、リン酸塩またはカルボキシル置換 基を有する１ヤまたはｌ］型型溝構造有する血液型決定基に関連するオリゴ糖配 糖体の調製 図１７は、ブロックされたＬａｃＮ）Ｌ−ＯＲ，ＬａｃＮＡｃ−ＯＲ１βＧａ１ （１→３）βＧＩｃＮＡｃ−ＯＲ１βＧａｌ　（１−３）βＧ　ｌ　ｃ　ＮＨｔ 　ＯＲなとの構造（これらは、次にＩ型またはＩＩ型型槽構造有する血液を決定 基に関連１するオリゴ糖配糖体、特にそのガラクトース単位上に硫酸塩、リン酸 塩またはカルボキシル置換基を含有するＩ型またはＩＩ型型槽構造有する血液型 決定基に関連するオリゴ糖配糖体を調製するのに使用される）を調製するのに有 用な、グルコサミンおよびＮ−アセチルグルコサミンの無数のブロックされた誘 導体の合成を示す。 具体的には、図１７で、塩酸グルコサミンを１当量の無水酢酸ナトリウムを含有 するジクロロエタンにスラリー化して、ここに無水酢酸を滴下して添加し、添加 の終了後、溶液は約１２−１６時間の間還流して６了シル化化合物１０（α／β の比は約３１）を得る。 あるいは、まず塩酸グルコサミンをメタノールに分取して、１当量の金属ナトリ ウムで処理してＭＣＩを中和する。次に無水フタル酸を急激に反応混合物に添加 して、そのしばらく後にトリエチルアミンを添加してフタルイミド誘導体を得る 。次にこの化合物を単離して、従来技術により無水酢酸／ビリノンでアセチル化 してアミンを保護するフタルイミド・ブロッキング基を４Ｔする過アンル化化合 物１を得る。 そのｉ＆、従来技術によりアグリコンを形成させる。例えば、化合物１０のジク ロロエタン溶液に飽和量の塩化水素を直接バブリングすることよりなる公知の化 学により、化合物１０を１−α−クロロ化合物２に変換する。この点て、化合物 １０を調製するのに使用される溶液は、その溶液を水中に入れて冷却して無水酢 酸および酢酸す１〜リウムを除九し、乾燥して回収した後、この反応に使用され 得る。反しコては一般に約４−６１＋の間にわたり進行して、塩化水素は周期的 に溶液中にバブリングされる（例えば、約１−２１Ｊに１回）。反応終了後、溶 液は約０−５°Ｃて重炭酸すトリウム水溶液に入れて冷却して、有ｔａ層を乾燥 し、溶液を除去した後に生成物を回収して、化合物２　（ｔ、１．　ｃ、て！ス ポット）を得る。 次に化合物２は、１当量のノアン化水銀のｒγ存在下モレキュラーシーブを含有 する無水ジクロロメタン中ての、化合物２０ＨＯ（ＣＨ，）、Ｃ００ＣＨ，との 反応に関する公知の化学により、ｌ−β−（ＣＨ７）、Ｃ００ＣＨ，アグリコン に変換する。この反応は一般に室温で約１２から２４時間の間実施される。反応 終了ｉ＆（ｔ、１．　ｃ　て証明される）、反応溶液をシリカで濾過して、生じ た溶液は反応溶液を冷水に添加することにより冷却する。有機層は回収してヨウ 化カリウム（５重量／体積パーセント）水溶液、次に飽和重炭酸ナトリウム水溶 液で２回洗浄する。次に、生した有機溶液を乾燥して溶液を除去して化合物３を 得る。 次に化合物３の３．４、および６水酸基を、メタノール中てすＩ・リウムメトキ ットとの反応によって脱保護して、Ｎ−アセチルグルコサミン−ＯＲ化合物４を 得る。この化合物を例えば適切な溶媒中の酸性媒体中で４０−５０℃前後で約４ ＝６時間Ｃｍ　Ｈｓ　ＣＨ（ＯＣＨ２）＊と反応させて、４．６−０−ジ保護化 ベンンリデン化合物５を得る。次に、化合物５を適切な溶媒（例えば、ＤＭＦ、 ジクロロメタン）中で触媒量の酸（例えば、ｐ−ｌ・ルエンスルホン酸、ｐＴＳ Ａ）の（？扛下てｐ−メトギノヘンノルＩ・リクロロアセトイミデー１−と反応 させてｐ−メトキンヘンシル保護化３−ヒドロキシ化合物６を得る。化合物６を テトうしトロフラン中のノアノホウ化水素すトリウムて処理し、続いて約Ｏ″Ｃ でＨＣＩ飽和エーテルを滴下して添ＩＪ１１することにより化合物７をｉ！Ｆる 。 あるいは、例えば臭化アリルおよびｌｊ！ＪＩＨ（例えば、水酸化バリウム／酸 化バリウム）との反ＬＬ：によって、化合物５を３−水酸基でブロック化して、 化合物８を得る。化合物８を０°Ｃてテトラヒドロフラン中のノアノホウ化水素 ナトリウムて処理して、続いてＭＣＩ飽和エーテルを１ｔＮＦｉ￥５ＩＪＩＩＬ 、て化合物９を得る。 化合物７および９は、ブロックされたＧＩｃＮＡｃ−ＯＲ糖の４−位にのみ遊離 水酸基を含有するため、後の適切にブロックされたガラクトースとの反応により ブロックされたＩＩｓ’！ＬａｃＮＡｃ−ＯＲｔＭ造［βＧａｌ　（１→４）β ＧｌｃＮＡｃ−ＯＲコか形成される。 化合物５は、ブロックされたＣ、ｌ　ｃＮＡｃ−ＯＲ糖の３−位にのみ遊離水酸 基を含有するため、後の適切にブロックされたガラクトースとの反応によりブロ ックされたＩ型構造［βＧａ　Ｉ　（１−”３）βＣ；Ｉ　ｃＮＡｃ−ＯＲＩか 形成される。 あるいは、室温で２当量の三フッ化ホウ素エーテレート（ＢＦ２ニーテレ−＋− ）の存在Ｔ−て、ジクロロエタン中の１当量のｐ−クロロチオフェノールとの化 合物ｌの反ＬＬ、によって、化合物ｌは化合物！Ｉに変換し得る。 さらに別の実施態様では、化合物１は、化合物２について記載された方法と同様 の方法で、化合物１２（またはブロモ類似体）に変換される。 化合物Ｉ２は、ＨＯ（ＣＨ２）、Ｃ００ＣＨ，の代わりにアルコールが使用され ることを除いては化合物３のと同様な方法で、アルコール（例えば、エタノール 　Ｒ＝Ｃ）（、Ｃ１−１，）どの反応によって化合物１３に変換される。次に化 合物Ｉ３をナトリウムメトキシド／メタノールにより化合物１４に変換し、次に 臭化テトラエチルアンモニウムを含有する還流ｌ・ルエン中て酸化ビス［トリブ チルスズ］と反応させ、続いて臭化ヘンノルど反りこ：させることにより、化合 物１５に変換する。 化合物１５は、ブロックされたＧＩｃＮＡｃ−ＯＲ糖の３−および４−位に遊離 水酸基を含Ｔ丁するため、適切にブロックされたガラクトースとの後の反応によ り、１型構造［βＧａｌ　（１−３）βＧＩ　ｃＮＡｃ−ＯＲＩおよび［１型構 造［βＧａ１（１→４）βＧＩ　ｃＮＡｃ−ＯＲＩの両古が形成され、これらは クロマトグラフィーなとの従来技術により容易に分離される。 ｐ−クロロチオフェノールをエタノール中で０９５当量の水酸化カリウムて処理 し、続いてその溶液を約４０−５０”Ｃ１ｍｌｌ１１熱し、次にこの反応溶液に 約０゜５当暇の化合物２を添加することにより、化合物１６を調製する。反応物 は約１−２時間４０−５０°Ｃに維持して、溶液を冷却することにより生成物１ ６が沈殿し、濾過により回収される。 図１８で、化合物１７−２０の合成は本明細μ中で以下の実施例に記載される。 図１８に示すＬ−フコースからの高度に結晶性のフコース中間体２０を製造方法 は新規である。この方法は、β−フコピラノース四酢酸Ｉ７の生成を最適化して おり、ジクロロエタン（ＤＣＥ）中で約５０−５５°Ｃに維持されたフコースの スラリー液およびほぼ等モル隈（約１１当ｆｉｔ）の酢酸すトリウムに無水酢酸 （ＡｃＯＡｃ）を滴下して添１１１１　シ、この温１免で化合物１７の形成をも たらすのに十分な時間（例えば、約２−３１：１間）撹拌される。反ＬＬ、ｆｆ １合物を水で処理して氷水に入れて冷却し、追加のジクロロメタンで抽出して、 乾燥し、部分的に濃縮して過アシル化化合物１７（１−酢酸塩のβ／αの比　約 ４１）を得る。 次に化合物１７を、適切な溶媒（例えば、ジクロロメタン）中で約１当量のｐ− クロロチオフェノール（ｐ−ＣＩ−Ｐｈ−ＳＨ）および約１から３（好ましくは ２）当量の三フッ化ホウ素ニープレート（ＢＦ、ｏＥｔｔ　）と反応させて、ｐ −クロロフェニル２．　３．　４−トリー〇−アセチルーβ−チオフコピラノシ ド（化合物１８）を得る。使用される反応条件は決定的に重要ではなく、約０° から約２５°Ｃ（好ましくは室温）の温度および約３から約１６時間の反応時間 が使用される。 化合物Ｉ８をセンブレン（Ｚｅｍｐｌｅｎ）条件（ＮａＯＭｅ、ＭｅＯＨ）下て 急激に脱アセチル化して、フコースからの全収率５５−６６９６て、適切な溶媒 （例えば、イソブタノール）から再結晶させて、結晶性生成物としてｐ−クロロ フェニルβ−チオフコビラノンド１９を生成する。再度、使用される反応条イ１ は決定的に重要ではなく、約１５°から約３０″Ｃの温度および約１から約１０ 時間の反応時間か使用される。 次に化合物１９を、塩化ヘンノルまたは見比ベンノルで容易にベンノル化して、 フコースから全収率４５−５０９６で、ｐ−クロロフェニル２．　３．　４−１ ・り一。 −ヘンシル−β−チオフコビラノソ１−（化合物２０）を得る。０１１例と同様 に、使用される反り乙１条件は決定的に重要ではなく、約１５°から約３０″Ｃ の温度および約２４から約４８時間の反応時間が使用される。一般に少なくとも ３当量の塩化ヘンノルまたは臭化ベンジルか使用され、反応は一般に少なくとも 約４−５当景の適切な塩基（例えば、水酸化カリウム、ＫＯＨ）の存在下で適切 な不活性溶媒（例えは、ジントギノスルホキソト、ＤＭＳＯ）中で実施される。 好適な実施態様では、約３当ｍの塩化ヘンシルまたは臭化ベンジルの添加の前に 、約３当ｑの塩ノ、６を反Ｌａ、系に添加する。約１８時間後、追加の１．　５ 当量の塩基および追加の１当にの塩化ヘンノルを添加する。 中線な試薬、筒中なＪＪ法および高段に結晶性の生成物は、これまで不明細書中 てしはしばゼ・要とされたクロマトグラフィーをイ・用のものとする。 化合物２＋−２４の合成は、例えはマツダ（Ｍａｔｔａ）ら３３の記載する公知 技術によって実施される。マツダ（Ｍａｔｔａ）ら■の方法では、化合物２３を ３−アセチル（化合物２４）または４−アセチルブロッキング基（図示していな い）のいずれかに変換する。次に、これらの化合物の両方を、ｏ′ｃてピリノン ／ジクロロメタン中で塩化クロロアセチルでアセチル化することにより、クロロ アセチルブロッキング基により、残（Ｔする水酸基でこれらの化合物をブロック する。これにより差別的に保護した３、４−水酸基を存する化合物が生成する。 いずれかの化合物のクロロアセチルブロッキング基を、ピリジン／エタノール（ ６：　Ｉ）中てヂオ尿素て処理して、合成中の適切な時点て選択的に除去し反応 させて、以下に記載される方法で硫酸塩またはリン酸塩を形成させる。 化合物２６−３１の合成は図１９に示され、本明細ｍ中以下の実施例に記載さｔ する。この図で化合物２６．２７．２８、および３６の合成は、前述され図１８ に例示される化合物１７．１８．１９、および２ｏの合成と平行して起きる。こ の点に関して、ベンジル４．６−０−ベンジリデン−２−０−ベンゾイル−３− 〇−クロロアセデルーβ−Ｄ−チオガラクトピラノシド（化合物３１）は、クロ マトグラフィーの必要な（生成された。Ｄ−ガラク１−−ス五酊酸２６は、Ｄ− ガラクト−スおよび約等Ｂル贋（例えば、約１１当隈）の酢酸すトリウノ、（Ｎ ａＯＡｃ）を、ジクロロエタン（ＤＣＥ）中てスラリーにして加熱し還流して、 少なくとも５当量の無水酢酸（ＡｃＯＡｃ）を還流溶液（約８０−８５°Ｃ）に 滴下して添加し、反応系をこの温度で十分な時間（約１６−３２時間）維持して 化合物２６を形成させることにより生成される。この方法は、β−Ｄ−ガラクト −ス五酊酸酢酸の収率を最適化して、本明細書中のｉｆｆ述の公知方法の発熱を 制御する。 ｎｉ１述の化合物１７に関する方法と同様に溶液を処理した後、生成物をジクロ ロメタン中で約等モル量のベンジルメルカプタン（Ｐｈ−ＣＨ２−３Ｈ）および 約１から３当量（好ましくは２当伝）の三フッ化ホウ素ニーテレ−１〜（ＢＦ、 ・０Ｅｔ２）で処理する。反１．ζ条ｆｌは決定的に重要てはなく、反応は好ま しくは約０°Ｃから約３０°Ｃて約６から１６時間実施し、熱メタノールまたは 熱イソプロパツールから結晶化１組５５−６５９６のヘンノル２．　３．　４． 　６−テ１ヘラ−０−アセチルβ−Ｄ−チオガラクトピラノノド（化合物２７） を得る。 センブレン（Ｚｅｍｐｌｅｎ）条件（ナトリウムメトギフト／メタノール）下で 脱アセチル化して化合物２８を得る。脱アセチル化反応条件は決定的に重要では なく、反応は一般に室温で約２から約１５時間実施する。脱アセチル化反応の終 了（ｔ。 １、ｃ　てＩＩ！定する）？＆、溶液は酸性イオン交換樹脂で中和し、濾過し、 蒸留乾固して化合物２８を得る。残渣を熱アセトンから結晶化して、生成物をジ メチルホルムアミドまたはアセトニトリルに分取して、１から２当量（好ましく は１゜４当量）のベンズアルデヒドツメチルアセタールおよび約０２５から３重 量パーセントのｐ−１−ルエンスルホン酸（化合物２８に基づく）で処理する。 反応条件は決定的に重要ではなく、好ましくは反応は室温で実施し、一般に約１ ２から２４時間で終了する。中和後、ヘンシル４．６−０−ベンジリデンβ−Ｄ −チオガラクトピラノシド２９を単離し、熱イソプロパツールから結晶化する。 約１から３（好ましくは２）当量の塩化クロロアセチルを、ベンジル４．６−０ −ヘンノリデンβ−Ｄ−チオガラクトピラノント２９を含有するジメチルホルム アミｌ’（ＤＭＦ）溶液に添加しクロロアセチル化することにより、ヘンシル４ ゜６−０−ヘンノリアン−３−０−クロロアセチル−β−Ｄ−チオガラクトビラ ノント３０を調製する。ＤＭＦ溶液を約−４０°から−Ｉ５°Ｃ（好ましくは一 ２５’Ｃ）に維持しながら、この塩化クロロアセチルを滴下して添加する。この 条件下で、ＤＭＦの使用により、追加の塩基の必要なく化合物２９の選択的なり ロロアセチル化か可能になることか予期せずに発見された。この反応は−゛般に 約１（］−２２４時で終了する。 ヘンノル４．６−０−ヘンシリγシー３−０−クロロアセチル−β−Ｄ−チオガ ーラクトビラノノト（化合物３（））は、！！、ｉ基を含イ［する適切な溶媒（ 例えば、ビリノン／塩化メチレン）中で約０１から約１重量パーセントのツメチ ルアミノビリノン［ＤＭＡＰ］を触媒として、少なくとも１当爪（ぞして好まし くは約２当晴）のＪ−化ベンゾイルでヘンブイル化される。この反応条件は決定 的に重要ではなく、好ましくは反応は約Ｏ″Ｃから約３０°Ｃてそして約１から 約４時間（好まし・；は室温で２時間）実施して、結晶性のヘンツル４．６−０ −ベンジリデン２−０−へン゛ブイルー３−〇−クロロアセチノし−β−Ｄ−千 オブｊラク１ヘビラノソト（化合物３１）か、ガ→り１・−スからの全収率約Ｉ Ｑ−２０？６て得られる。 この方法の仔ｆ１１な占は、以後の組立の後、ブロックした中間体は１ｌｉＩ− ＋１ｔに脱ブロツク化され、そして硫酸塩化またはリン酸塩化により修飾される ことである。この物質は結晶性てあり、この方法はタロマドグラフィーの必要か ない。 Ｉ型またはｌＩ型型槽構造存する血液摩決定基に関連するオリゴ糖配糖体のガラ クトース部分の硫酸塩およびリン酸塩もまた、化合物３２を用いてこれらの化合 物の合成法で調製し？ｑる。この化合物３２は化合物２９の２．３−水酸基の両 方を直接へンゾイル化することにより調製される。しかし脱ブロツク後、ガラク ト−スの２もよび３水酸基の両方か硫酸塩化およびリン酸塩化に利用可能であり 、選択性は十分てはない。選択性は例えは硫酸塩化反応を低温（例えば、−５０ ’Ｃ）で実施することにより、改善される。 化合物２９は、化合物３１の調製についての１１１１述の方法と同様に、２，３ −ジベンゾイル保護化合物３２に変換できる。この場合、一般に３−５当量の塩 化ベンゾイルか使われる。 化合物３１および３２は、臭化テトラアンモニウム臭素を用いる公知の方法（ノ ルハーグ（Ｎｏｒｂｅｒｇ）ら■）により化合物３３および３２ａ（Ｕ！４２１ に示す）に変換される。 あるいは、化合物３Ｉは、化合物３１を８０９６の耐酸／水に約５０°Ｃて約１ −２時間接触させることにより化合物３４に変換される。次に化合物３４を、ジ クロロメタン中て無水耐酸／ピリジンて処理することにより化合物３５に変換す る。 別の実施態様では、化合物３２を、ンアノホウ化水素すトリウムおよび塩化セリ ウムで処理して、ヘンツルー２．３−０−ジベンゾイル−４−〇−ベンジルーβ −Ｄ−千オガラクトビラノット は６−水酸基でクロロアセチル化される。＋９またはｕｙｔの基本骨格の形成後 、クロロアセチル基は選１フ＜的に脱離され（前述のとおり）、次にリン酸塩化 されるかまたは硫酸塩化して６−リン酸塩または６−硫酸塩誘導体を与える。 １１鼎構造の合成 Ｍ２Ｏは、ブロックした基本骨格を合成する一つの方法を説明するか、これはブ ロックしたルイスＸヤ構造に随ｎ．＋，変換てきるｌ４翳ゑ構造を存する血液望 決定基に関連するオリゴ糖配糖体を調製するのに使用する。 具体的には図２０て、ガラクトースの２、３水酸基は差別的にブロックされるた め、合成概略図の適切な時点てガラクトースの３−位のクロロアセチル保護基は 選択的に脱離されて硫酸塩、リン酸塩または一〇Ｃ）ｆＲ．、ｃＯＯＨ基に変換 される。また、前述のようにクロロアセチル保護基は選択的に、ガラクトースの ６−位に置かれ、選択的に脱離しうるため、硫酸塩、リン酸塩または一ＯＣＨＲ ＩＩＣＯＯＨ基をガラクトースの６−位に形成することは可能である。 具体的には図２０で、化合物７および化合物３３を化合させて化合物３７を形成 する。これは化合物７と約１．５当量の化合物３３をモレギュラーソーブを含イ ｒするジクロロエタンに溶解させて、ここに約１当量（化合物７に基づく）の２ 。 ６−ノーｔ−ブチル−４−メチルピリノンを添加することによって達成される。 反１，コ、物は室温で３０分間撹拌して、次に一５０°Ｃに冷却する。わずかに 過剰（例えは、杓ｉ　２当量）の１−リフルオロメタンスルホン酸銀を含有する 無水トルエン溶液をこの溶液に添加して、反応物を２時間−１５°Ｃまて加熱し 、この温度でさらに５時間維持する。 この時、モレキュラーシーブはセライト（Ｃｅｌｉｌｅ）を通して濾過により除 去して、回収した溶液は飽和重炭酸す１・１戸ジノ、溶液に添加することにより 冷却する。次にｆｆ機抽出物は水、０．５ＮのＨＣＩ、そして水で洗浄する。次 に有機溶液を乾燥し、真空下で濃縮して化合物３７の粗生成物を得る。次にこれ はへギサシー酢酸エチル（１：　Ｉ）を溶出液として用いるシリカゲルのカラム クロマトグラフィーのような従来技術によって精製する。 必要であれば、ルイス１構造は化合物３７がら調製し１ｑる。具体的には、化合 物３７を含有するジクロロメタン溶液に過剰のジクロロジシアノキノン（ＤＤＱ ）を添加するか、これは選Ｕく的にｐ−メトキノヘンシル保護基を脱離して化合 物３８を勾える。この化合物を、臭化水銀または臭化鋼および約１−１．５容量 パーセン１−のＤＭＦを含有するジクロロメタン中で、過剰の化合物２０（約１ ゜３−１．５当爪）によりフコノル化して、ブロックしたルイス”化合物３９を 得る。＋１を離しクロマトグラフィーした後、化合物３９をチオ尿素で処理して クロロアセチル基を脱離させて、その化合物をＤＭＦ中でｏ′ｃて２時間三酸化 イ才つ／ピリジン複合体により処理して化合物４１を１する。次に化合物４１の ブロッキング基を従来技術により脱離させて、ガラク］・−ス単位の３−位に硫 酸塩基を有するルイス８類似体を得る。しがしこの実施態様では、化合物４１の ベンゾイル基（Ｂｚ）の脱離は、ＧＩｃＮＡｃ単位の−ＮＨＡｃ基の部分的な脱 アシル化、そして他の部分的な副反応を伴うことが見い出された。従って、純粋 な化合物４１を得るためにはクロマトグラフィーが必要である。いずれにしても 、上記反応のフコツル化において、フコノル化の必要はない。 あるいは、化合物２５（または前述の化合物２５の３−クロロアセチル類似体、 図示していない）を、上記合成の化合物２ｏの代わりに使用することができる。 ガラクト−スの３−水酸基およびフコースの４−水酸基のクロロアセチルブロッ キング基の脱離は、二値酸塩化またはニリン酸塩化ルイス′誘導体を調製する簡 便な経路を与える。 別の実施善様では、化合物４ｏは、最初に適切な塩基（例えば、酸化銀、水酸化 バリウム、水素化すＩ・リウム）を添加し、次にブロモＰｉ１酸ベンジル（Ｂ　 ｒ　ＣＨ２ＣＯＯＢ　ｎ　）かまたは他の同様の酢酸塩（例えば、ＢｒＣＨＲ＋ ｒ　Ｃ００Ｂｎ、式中、Ｒ１８は炭素原子数１から７のアルキルまたは−ＣＯＯ Ｂｎである）を、例えばＤＭＦのような適切な溶媒中の反応媒体に添加すること によりアルギル化し得る。反応終了後、従来の水素化技術によりベンジルエステ ルは容易に脱離され、ついてに他のベンノル保護基およびベンジリデン保護基も 脱離する。ナトリウムメトキシド／メタノールで処理するとガラクトースの３− 位に置換した 一０ＣＲ２ＣＯＯＨ（または−０ＣＨＲ，、Ｃ００Ｈ１式中Ｒ，、は炭素原子数 １から７のアルギルまたは−Ｃ００Ｈである）が得られる。同様の型の化学反応 は、適切なブロッキング基を使用してガラクトースの６−水酸基またはフコース の４−水酸基で行われる。 別の実施！７！！襟では、化合物４ｏを公知の方法２０で処理して３−Ｉノン酸 塩化合物を得る。具体的には化合物４ｏを、ピリジン中で０″Ｃで、ノフェニル ホスホロクロリデ−１・および４−ツメチルアミノピリノン（１：　Ｉ）で処理 する。溶液は０゜５時間で室温までの加温し１５時間撹拌する。次に生じた化合 物は、従来条件（最初に炭素上のＰｄを有するＥｔＯＨ中てＨ，と１５時間、そ して次にＰｔＯ２を有するＥｔＯＨ中てＲ２と３時間）下で水素化して、ガラク トースの３−位のリン酸塩誘導体を得る。さらに脱保護してガラクトースの３− 位にリン酸塩を有する修飾ルイス８を導き、これを精製して、この化合物の溶液 をナトリウム型のＤｏｗｅｘ５０ｘ８と接触させて二ナトリウム塩に変換させる 。 明白なように、前述の方法はガラクトースの６−位にリン酸塩または一０ＣＨＲ ，、Ｃ０ＯＨ基を、またはフコースにリン酸塩基を導入するために使用すること もてきる。 図２１は、保護した１１型基本骨格の合成と、これらの保護した基本骨格の保護 したルイス１構造への随時の変換のための別の方法を示す。この図で、ガラクト ースの２．３水酸基は差別的にブロックされておらず、従って生じる化合物４５ （およびＩ型類似体）は、３−硫酸塩（クロマトグラフィーで精製可能な２−硫 酸塩および２．３−二値酸塩との混合物の一部として）を調製するのに有用であ るか図２０に記載した合成１！！１１１５図はと用途は広くない。 いずれにしても、図２１ては、化合物７および約１．　６−１．　７当量の化合 物３２ａを、モレキュラーシーブを含有するジクロロメタンに溶解して、ここに 約１当＃ｔ（化合物７に基づく）の２，６−ジーｔ−ブチル−４−メチルピリジ ンを添加する。反応物は室温で３０分間撹拌して次に一５０″Ｃに冷却する。次 にこの溶液に、わずかに過剰（例えば、約１．２当Ｍ）のトリフルオロメタンス ルホン酸銀をｈｆｆする無水トルエン溶戚を添加して、反りこ、物の２時間−１ ５°Ｃに加温し、この温度でさらに５時間維持する。 反１．こ、終Ｊ″ｉＬ反１．こ：系を処理して化合物４２の粗生成物を得る。次 にこれを例えはトルエン−酢酸エチル（１：　ｌ）を溶出液として用いてシリカ ゲルのカラムクロマトグラフィーのような従来技術により精製する。 必要な場合は、化合物４２からルイス′溝造を調製することができる。具体的に は、化合物４２を含ｆ１するジクロロメタン溶液に過剰のシクロロッジアノキノ ン（ＤＤＱ）を添加すると、ｐ−メトギンヘンンル保護基が選択的に脱離されて 化合物４３か１１ｔられる。この化合物は、臭化水銀または臭化鋼および約１２ 容量パーＵントのＤＮＩＦを含有するジクロロメタン中で、過剰の化合物２０（ 約１−３当雀そして好ましくは約１．　３−１．　５当量）によりフコツル化す ることにより、プロ、りしたルイス１化合物４４を与える。これを処理しクロマ トグラフィーした後、化合物４４はナトリウムメトキット／メタノールで処理し て、ガラクトースの２，３〜位のヘンゾイルブロソキング基を脱離して化合物４ ５を得る。 次にこの化合物を、ＤＭＦ中で一５０°から０°Ｃて２時間、三酸化イ才つ／ピ リノン複合体で硫酸塩化して化合物４６を得る。化合物４６は３−硫酸塩、２− 硫酸塩、および２．３−二値酸塩の混合物として生成するか、これはクロマトグ ラフィ＝（例えは、ソリ力のカラムタロマドグラフィー）により分離される。脱 離＋１１能な保護基の従来法の脱保護により、ルイス１のガラクトースの３−位 の硫酸塩誘４１４：（化合物４７）か得られ、これを陰イオン交換樹脂（ナトリ ウム型）に通してナトリウム塩を（’Ｊる。 この工程での３−硫酸塩の生成の選択性を改善するために、より低温（例えば、 −５００から一３０°Ｃ）か使用される。あるいは、化合物４５を典Ｖ的条件下 でクロロアセチル化し、２−および３〜クロロアセチル保護基の混合物を得る。 この混合物をクロマトグラフィーにより分離して、得られた精製成分は選択的に ２−または３−硫酸塩生成物を調製するのに使用される。 さらに、本発明の方法に、ラクトース構造４０のグルコース部分の２−ヒドロキ シに適切なブロッキング基を置くことだけで、ＬａｃＮＡｃの代わりにラクトー スを使用し得る。ラクト−スの差別的プロラギングによ頃ガラクト−スの３およ び／または６位に選択的に脱＃１丁能なブロッキング基を有する組成物が得られ る。次にこの化合物は３および／または６位が選択的に脱ブロックされて、３お よび／または６硫酸塩、リン酸塩または一０ＣＨＲ，、Ｃ０ＯＨに誘導体化され る。 その１組成るブロッキング基を脱離させてフコシル単位を酵素的に添１ｔｕする （下記参照）。 Ｉ型清造の合成 図２０および２１はＩＩ型型槽構造有する血液型決定基に関連するオリゴ糖配糖 体の合成を示し、Ｉ型槽構造を有する血液型決定基に関連するオリゴ糖配糖体は 、図２４に示すように、適切にブロックしたＧＩｃＮＡｃ−ＯＲ構造を使用する ことにより、同様なＪノ法で容易に調製される。βＧａ１（１→３）βＣ；Ｉｃ ＮＡｃ−０Ｒ１ｕ＋ｌＩＩ造およびその誘導体は、例えば化合物５および３５か ら調製される。 具体的には、化合物３５をまず公知の方法（ノルバーブ（Ｎｏｒｂｅｒｇ）ら′ ）により、約０°Ｃて臭素（Ｂｒ＝）および臭化テトラエチルアンモニウム（Ｅ ｔ＋　Ｎ”　Ｂｒ−）を用いて１−α−ブロモ誘導体に変換する。約１．　５当 量のこの化合物および化合物５を、モレキュラーシーブを含有するジクロロメタ ン（Ｃｌ　２ＣＨ２）に溶解して、ここに約１当量（化合物５に基づく）の２． ６−ノーｔ−ブチル−４−メチル−ピリジンを添加する。反応物は室温で３０分 間撹拌して、次に一５０°Ｃに冷却する。わずかに過剰（例えば、約１．２当量 ）のトリフルオロメタンスルホン酸銀（トリフル酸＃１１）を含有する無水トル エン溶液をこの溶液に添＋ＪＩ比で、反１．コ物を２時間−１５°Ｃに加温し、 この温度でさらに５時間維持する。その後、溶液の室温に戻し、−晩撹拌する。 この時、ピリノンとジクロロメタンを添加し、モレキュラーシーブをセライト（ Ｃｅｌｉｌｅ）を通す濾過により除去して、回収される溶液を飽和重炭酸ナトリ ウム溶へのＹ刊Ｉｌ＋により冷却する。次に（ｒ機抽出物を水、０．５ＮＩ−Ｉ ＣＩ水溶液、そして水で洗浄する。次に打機溶液を乾燥し、真空）で濃縮して粗 生成物を得て、これを例えはヘキサン−酢酸エチル（１１）を溶出液とするシリ カゲルのカラムクロマトゲラフィーのような従来技術により精製して、化合物８ ０をｉ！）る。化合物８０のベンジリデン保護基を８０９６酢酸水溶液（ＡｃＯ Ｈ／Ｈ２０）で処理することにより選択的に脱離して、化合物８１を得る。化合 物８１を、約−２０°Ｃでピリジン中の無水酢酸で処理することにより、ＧＩｃ ＮＡｃ−１１’−位の６−水酸基を選択的にアセチル化して、化合物８２（すな わち、８−メＩ・キシカルボニルオクチル−２−アセトアミド− ６−ジー〇−アセチル−βーＤーガラク１ーピラノソノい−６−〇ー了セチルー ２ーデオキシーβ−Ｄ−グルコピラツノ１へ）を得る。次にこの化合物を例えば 前述の化合物３８と同様の方法で化合物２０てフコノル化して化合物８３をｉｑ て、次にｉｉｉｉ述の化合物４０、４１、および４７について記載した方法で脱 ブロックして硫酸塩化し、化合物８４、８５、および８Ｇを得る。 あるいは、化合物３２を、＋ｉｉｆ述のように公知の方法（ノルバーブ（Ｎｏｒ ｂｒｇ）ら１９）によりｌ−α−ブロモ誘導体に変換し、？ｌられた化合物はン 了ノホウ化水素すトリウムおよび塩化セリウ１、て処理して、ヘンツルー２．１ ０−ジベンゾイル−４−〇ーベンジルーβ−Ｄ−チ才ガラタトピラノント（図示 していない）を得る。次に、この化合物は６−水酸基をクロロアセチル化して、 前述の方法て化合物５と反応させて、８−メトキシカルボニルオクチルー２ーア セｉ・アミド−３（４−０−ベンゾイル−６−クロロアセチル−２．　３−）− ｏ−ベンゾイル−β−Ｄ−がラフＩ・ピラノツル）−６−０−アセチル−２−デ オキシ−βーＤーグルコビラツノ１〜を得る。次にこの化合物を前述の化合物８ ２て記載した方法で処理して、ガラクトースの６−位に硫酸塩、リン酸塩あるい は一Ｏ　（ＣＨＲ，、ＣＯＯＨ）置換基を有するＩ型詰導体を得る。 さらに別の実施態様ては、Ｉ型およびｌｌヤ構造の両者とも、当該分野で公知の 適切な条件下で化合物１５および化合物３３を化合させることにより同時に作成 される。例えば、化合物Ｉ５および約１　５当量の化合物３３を、モレキュラー シーブを含有するジクロロメタンに添加して、ここに約１当量（化合物１５に基 口＜）の２．　６−ジーｔ−ブチル−４−メチルピリジンを添ＩＪＩＩする。反 応物を室温で３０分間撹拌して、次に一５０°Ｃに冷却する。わずかに過剰（例 えば、約１。 ２当敲）のトリフルオロメタンスルホン酸銀を含有する無水トルエン溶液をこの 溶液に添加して、反応物を２Ｉｌ′＋′間−Ｉ５°Ｃに１１１１温し、この温度 でさらに５時間維持する。その後、溶液を室温に戻し、−晩撹拌する。 この時、ピリジンおよびジクロロメタンを添加し、モレキュラーシーブをセライ Ｉ・（Ｃｅｌｉｔｅ）を通ず濾過により除去して、回収される溶液を飽和重炭酸 ナトリウム溶液に添加して冷却する。有機抽出物を水、０．５ＮＨＣＩ水溶液、 そして水で洗浄する。次に０機溶液を乾燥し、真空トて濃縮すると■型および１ １型溝造の両者を含有する粗生成物か得られ、これは例えばへギザンー耐酸エチ ル（ｌ。 ｌ）を溶出液とするシリカゲルのカラムクロマトグラフィーのような従来技術に より分離および精製される。 この反りこ；て（！トられるＩｖ溝構造１１堅（間造の比は、Ｇ１　ｃＮＨｔ化 合物１５の２−ＮＡｃ誘導体を使用することにより改善できる。化合物１５をヒ ドラノンど反応させて、得られた生成物を無氷山酸／ピリジンでアセデル化して 、ナトリウムメトギント／メタノールで処理することにより３，４−水酸基を脱 了セチル化することにより、この化合物は容易に調製される。 ３Ｄ　酵素反応 前述のＩ撃またはＩＩ撃核構造を有する血液型決定基に関連するオリゴ糖配糖体 の化学合成以外に、適切にブロックしたＩ型［βＧａｌ（１−＝３）βＧＩ　ｃ ＮＡｃ−ＯＲ］および１］型［βＧａｌ（１−”４）βＧ］　ｃＮＡｃ−ＯＲ］ 構造およびぞの誘導体は、選択的に脱ブロックされて、ガラクトースの３−位に 水酸基を与え、次に硫酸塩化、リン酸塩化するか、または−Ｏ　Ｃ　Ｈ　Ｒ　１ ｔ　Ｃ　Ｏ　Ｏ　Ｈに変換する（各々前述）。次に得られた化合物は全体に脱ブ ロックされて、例えばβＧａｌ（１→３／４）βＧＩＣＮＡＣ（Ｚ　（１→３／ ４）フコシル１ヘランスフエラーゼ４１を使用してフコツル化される。このよう なフコツルトランスフェラーゼを使用する時には、この三糖のガラン１ヘース単 位は６−ヒドロキシル置換基を含Ｙ丁しなけれはならないことは理解される。 ルイスＡ構造形成のためのにＩｃＮＡｃの４−位への酵素的転移、およびルイス ８構造形成のためのＧｌｃＮＡｃの３−位へのフコースの酵素的転移は、そのヌ クレオチド（ＧＤＰ）誘導体をあらカルめ合成する必要かある。ＧＤＰ−フコー スの合成は、好ましくはジアン（Ｊｉａｎｇ）ら４２の記載する方法で実施し、 これは以Ｆの実施例に例示される。 適切なフコノルトランスフェラーゼ（例えば、βＧａｌ（１→３／４）βＧ１ｃ ＮΔＣα（１→３／４）フコシル１ヘランスフエラーゼ）の（Ｔ（Ｅ下で、誘導 体化したβＧａｌ　（１→４）βＧＩｃＮＡｃ−ＯＲ化合物のＣ；ＩＣＮＡＣの ３位にフコースか転移、または誘導体化したβＧａｌ（１→３）βＧＩｃＮΔｃ −ＯＲ化合物の４−位にフコースか転移する条件ドて、ＧＤＰ−フコース（ＧＤ Ｐ−ＦｕＣ）を、βＧａｌ　（１−４）βＧＩｃＮＡｃ−ＯＲまたはβＧａｌ　 （１−”３）βＧＩｃＮΔｃ−ＯＲ　（それらの：Ａ導体を含む）と化合して、 各々ルイス１またはルイスＡ構造か形成される。 当該分野で公知の適切なフコノル化条件は、適切なｐＨおよび温度条イ′１（例 えはｐｉｅ．　５および温度３０°と４５°Ｃの間、好ましくは３５°から４０ °Ｃ）の適切な緩衝液（例えは５０ｍＭカコノル酸ナトリウｌ、）中で、誘導体 化しこβＧａｌ（１−４）βＧｌ　ｃＮＡｃ−ＯＲ　（または代わりに誘導体化 したβＧａｌ（＋−３）βＧＩｃＮＡｃ−ＯＲ化合物９とＧＤＰ−フコースの混 合物に、フコシル１ヘランスフエラーゼを添加して、約１２時間から４日間イン キュへ−１・することを含む。得られたフコノル化生成物は、Ｈ　Ｐ　Ｌ　Ｃ、 イオン交換−、ゲル−、逆相−または吸着クロマ１−ダラフイーからなる従来方 法を用いて単離および精製される。 また、脱ブロックしたｌ型およびＩｔ型１１１造か、適切なスルホトランスフエ ラーセの使用により硫酸塩化されることも企図される。 あるいは、ガラクトース単位の２および／または３−位に硫酸塩、リン酸塩また はカルホキツル置換基を含イ１する１１型構造は、公知のβＧａｌ（１→４）β ＧＩｃＮΔＣα（２−６）ノアリルトランスフエラーセの使用によりシアリル化 して、ガラクトース単位上の６−ソアリル誘４（４を形成する。しかし、」二足 のとおり、そのようなノアリル化構造は、βＧａ　］　（１−”３／４）βＧＩ ｃＮＡｃα（１−３／４）フコンルｌーランスフエラーセの使用によりＧｌ　ｃ ＮＡｃの３−位にフコツル誘導体を形成するために使用することはできない。 ２Ｅ．ＧｌｃＮＡｃの２および／または６位の修飾図２２および２３は、Ｉヘラ またはＩＩ型型槽造を（了する血液型決定基に関連するオリコ糖配糖体のグルコ サミン中位−１−に２−アミノ置換基を保持（例えば、βＧａｌ（１→３）βＧ ＩｃＮΔｃ−ｏＲまたはβＧａ　Ｉ　（１→４）βＧＩｃＮＡｃ−ＯＲの誘導体 であって、ＧＩｃＮＡｃのＮＡｃ基はアミンに変換されている）するための、異 なる２つの合成法を示す。後述するように、グルコサミン単位上のアミノ基の保 持は、異なる２−置換誘導体の簡便な調製を可能にする。また、明白なように、 図２２および２３て見い出される方法は、ＧＩｃＮＡｃ単位上にＮＨＡｃ基を残 しながら、３−硫酸塩、３−リン酸塩、３−ＣＨＲ，、ＣＯＯＨ、６−硫酸塩、 ６−リン酸塩、および６−ＣＨＲ，、ＣＯＯＨの選択的形成を可能にする。 図２２において、化合物ｌ、１３、１４、および【５は上記方法で調製され、図 １７に例示される。同様に、ｌ−α−ブロモ−２．　３，　４．　６−チトラア セチルーガラクトースはまず、ガラクトースの過アセチル化誘導体（化合物２６ ）を形成することにより調製される。次に化合物２６を公知の方法（ＨＢｒ／酊 酸、約０″Ｃから２０″Ｃ）で１−α−ブロモ誘導体に変換して、ｌ−α−ブロ モ−２。 ３、４．　６−チトラアセチル化がラフ１ーースを得る。 １−α−ブロモ−２．　３，　４．　６−チトラアセチル化ガラク１ーース（約 １．２から約１．５当量）を、約−５０°Ｃて、過剰の硫酸カルシウム、約４当 量の炭酸銀および約０．５当量のトリプル酸銀の存在下で、ジクロロメタン中の 化合物１５の溶液に滴下して添加する。反応物を一３０°Ｃまて加温し、その温 度で約１−３１１間維持する。次にメタノールの添加により反応を停止させて、 室温まで加温し、セライｌ−（Ｃｅｌｉｔｅ）で濾過する。濾液は重炭酸すｌ・ リウム水溶液およびエチレンンアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）で洗浄する。回収した 溶液を乾燥して、真空下で除去して、Ｉ型構造（図示していない）およびＵ．Ｘ ｔ溝構造化合物４８）の両者を含有する粗生成物を？〒る。この残渣をノリ力ゲ ルカラノ４のクロマ１へグラフィーにかけてｌ−ルエン　アセトン　メタノール （２０：３：ｌ）て溶出して化合物４８をＩ型類似体（図示していない）として 得る。 便宜上、以降の反応は化合物４８について示すが、同し反応が１型類似体にも実 施しうることは理解される。 これらＩｌｕ　（またはＩ！’＋叩）＋Ｍ造をフコノル化してルイス１槽造（ま たはルイスＡ構造）をｉｔ＋ようとするならば、ト記のように達成される。化合 物２０を一２０°Ｃて約１時間ジクロロメタン中の１当量の臭素と反応させて、 化合物２０の１−α−ブロモ誘導体を？ＩＬる。次にこの溶液を冷重炭酸すＩ・ リウム水溶液で反応を停止する。ｆ１機溶液を室温で真空１；て、乾燥し濃縮し て、元の体積の約半分にする。約２当量のこの化合物を、さらに約２当量の臭化 水銀（ＨｇＢｒｔ　）　、モレキュラーノーブおよび臭化テトラエチルアンモニ ウムをさらに含存する化合物４８０ジクロロメタン溶液に添加する。反応物を室 温で約４８時間撹拌して、溶液をセライト（Ｃｅｌｉｔｅ）で濾過して、濾液を 水、５９６ＥＤＴΔ溶液、飽和重炭酸ナトリウム水溶液、そして水で洗浄する。 次に有機層を乾燥させて、溶媒は真空下で除去すると化合物４９か得られ、これ はシリカゲルのクロマトグラフィーにより精製される。 化合物４９を従来法のセンブレン（Ｚｅｍｐｌｅｎ）条イ１て化合物５０に変換 して、次に化合物５０を従来方法（例えは、ヘンズアルデヒドジメチルアセター ル、ＤＭＦ、ｐＴｓΔ）により化合物５１に変換する。次に、化合物５１を室温 で約１−５時間酢酸ヒドラジンで処理して化合物５２を得て、これをメタノール 中で無水トリフルオロ酊酸と接触させて化合物５３に変換する。あるいは、化合 物５２は、この合成の便利な点として、下記の方法でこのアミンをアミド、カル バメート、尿素、−ＮＨ３Ｏ，Ｈ基なとに変換させるのに役立つ。 次に化合物５３を化合物４５の前述の方法と同次に法で硫酸塩化する。あるいは 、化合物５３を、前述の化合物２９の方法で化合物５３の３−水酸基をクロロア セチル基に変換することにより、ガラクトースの２．３水酸基を差別的にブロッ クして、化合物５４を得る。化合物５４はｎＩＩ述の条件下で残りの遊離水酸基 をヘンノルｚｋてブロックするように処理して、化合物５５を得る。次に、化合 物５５は、上記の（化合物４０を得る）化合物３９の方法と同し方法で千オ尿素 で選択的に脱ブロックして、化合物５６を得る。化合物５６を、前述の方法て選 択的に硫酸塩化して化合物５７を得る。あるいは、化合物５６を、ピリジン中で ０℃て、ジフェニルホスホロクロリゾ−１・と４−ジメチルアミノピリジン（１ ：　１）との反応により、ガラクトース上の３−リン酸塩基に変換する。この溶 液を０゜５時間で室温まで加温し、１５時間撹拌する。次に？１ｔられた化合物 は従来条件（まず炭素上のＰｄを有するＥｔＯＨ中てＲ２と１５時間、そして次 にＰ　ｔ　Ｏｘを有するＥｔＯＨ中でＲ２と３時間）下で水素化して、ガラクト ースの３−位のリン酸塩誘導体を得る。さらに脱保護してガラクトースの３−位 にリン酸塩置換基を有する修飾ルイス８化合物を得て、これを精製して、この化 合物の溶液をＤｏｗｅｘ５０ｘ８のナトリウム型と接触させて二ナトリウム塩に 変換する。化合物５６はまた上記方法で−ＣＨＲｕＣｏｏｔ−ｔにも変換される 。 最後に、化合物５７は従来技術により脱ブロックして化合物６０を得るが、これ はＧＩｃＮＡｃ糖の代わりに２−アミノグルコース糖単位を有し、さらにガラク トース糖単位の３−位に硫酸塩または他の置換基を存するルイス１類似体である 。 上記の場合、２−位にペンジルブロツギング基を使用することは、この基は他の ベンジル保護基同様容易に水素化条件下で除去されるため、さらに有効な合成法 を与える。 図２３は図２２に示す化学と多少類似するが、Ｇ　１　ｃ　Ｎ　Ｈ＊誘導体の３ −水酸基かブロックされている（化合物６９）ため、この合成はＩＩ型構造のみ を与える。 特に、図２３で、化合物１３はｎｉＩ述の方法で調製される。次にこの化合物は 従来技術（すトリウムメトキシド／メタノール）により脱アセチル化して、化合 物１４を与え、これは従来技術でベンジリデン化されて化合物６６を与える。次 に化合物６６を、ジメチルホルムアミド中で約−２０℃から２０″Ｃで塩化ベン ジル特に水素化すトリウムて処理して化合物６７を得る。化合物６７のベンジリ デン基は、約８０°Ｃて約１−４時間８０％酢酸水溶液で除去して、化合物６８ を得る。 次にこの化合物は、ジクロロメタン中で約＝ｌＯ°Ｃで、約等モル量の塩化アセ チル／ピリジンの使用により、選択的に６−位をアセチル化して、化合物６９が 得られる。約１．　３当量の２．６−ジーｔ−ブチル−４−メチルピリジンおよ び約１．３当量のトリフル酸銀の存在下で、約−３０°Ｃに維持したジクロロメ タン中の化合物６９の溶液に、約１．　２−１．　５当量のｌ−α−ブロモ−２ ，３，４゜６−テトラアセチル化がラクト−ス（ｉ：：ｆ述）を、滴下して添加 する。反応物は一３０°Ｃて１時間維持して、次に５°Ｃ１Ｊｌｌ温し、そのま ま約２時間維持する。次に陵応はメタノールの添加により停止１６させて、室温 まてＩＪ１１温し、セライト（Ｃｅｌｉｔｅ）で濾過する。濾液は重炭酸すトリ ウム水溶液で洗浄する。回収される溶液を乾燥させて真空Ｆて除去して、化合物 ７０を含汀する粗生成物を得て、これを酢酸エチル　ヘキサン（１：２）て溶出 するシリカゲルカラムのクロマトグラフィーにより精製して化合物７０を得る。 次にヘンノル保護基は水素化（ＣＪ−の８２／Ｐｄ）により除去して化合物７１ を１！？る。化合物７１は、１ｉｉｉ述の化合物４８（図６に示するように化合 物４９を１１トるため）と同し方法てフコノル化して化合物７２を辱る。化合物 ７２を前述の従来技術により脱アセチル化して化合物７３を得る。化合物７３は 従来方法（例えは、ヘンズアルデヒドノメチルアセタール、ＤＭＦ、ｐＴＳＡ） により化合物７４に変換して、続いて約−５０″Ｃから約−２０°Ｃに維持した ジクロロメタン中で約１′２１ｍの塩化アセチル／ビリノンにより、部分的に保 護したＧｌ　ｃＮＨ２誘導体の６−位を選択的にアセチル化する。化合物７４を 、化合物５３を処理して化合物６０を得たのと同一方法（前述）て化合物７９に 変換する。 あるいは、化合物７４の遊離水酸基はＯ１ｆ述の方法で塩化アセチル／ピリジン でアセチル化して、ノアノホウ化水素すトリウムおよび塩化セリウムまたは塩化 アンモニウムによりベンジリデン基を選択的に開裂して、ガラクトース部分」二 の２゜３−ジアセチル−４−ベンジル−６−ヒト泊キノ誘導体（図示していない ）を得る。この化合物をガラクト−スの６−位で官能基化して、この位置に硫酸 塩、リン酸塩または−ＣＨＲ１，Ｃ００）（基を含ｆ１させる。 」二足り外に、カップリングの前にＧＩｃＮＡｃ単位の２．６位を修飾して、こ の（・Ｌ置か修飾したＩ型およびｌ］ヘフ構造を（”ｆて、さらに前述の方法で 随時修飾して硫酸塩、りン酸塩または−ＣＨＲ，，Ｃ０ＯＨ置換構造を生成する 。ヴエノ（Ｖｅｎｏｊ）らの１９９２年５月２２目に出願の合衆国特許出願第０ ７／８８７，７４７号（代理人登録番号第０００４７５−０１１、発明の名称［ 修飾ルイス５化合物」）、およびヴエバＶｅｎｏ１）らの１９９２年５月２２日 に出願の合衆国特許出願第０７／８８７，７４６号（代理人登録番号第０００４ ７５−０２９号、発明の名称は［修飾ルイス０化合物」）に示すように、Ｉ型（ Ｒ造［βＧａ１（１→３）βＧｌ　ｃＮＡｃ−ＯＲＩおよびＩＩ型構造［βＧａ １（１→３）βＧｌｃＮＡｃ−ＯＲ，ＬａｃＮＡｃ−ＯＲ１上のＧＩｃＮＡＣ部 分の２および／または６−位の修飾は、脱ブロックした化合物へのβＧａ１（１ →３／４）βＧｌｃＮＡＣα（ｌ→３／４）フコノルトランスフエラーゼの使用 を可能にする。これら両方の出願の開示は、参考のためその全体か本明細書中に 引用されている。 ｉ、ＧＩｃＮＡｃの２−位の修飾 ＧＩｃＮＡｃの２−位の修飾は種々の方法て達成される。例えば、公知の３７２ −アジド−２−チオキシ−グルコース−ＯＲ化合物（例えば、４．　５．　６− １−リアセチルグルカルのアジ！・二１・口出により調製される）は従来技術３ ７により、脱離６丁能な保護基（すなわち、Ｓｉ　（Ｃ＋　Ｈｓ　）２　ｔＢｕ ）て６位を保護し、次に前述の方法で適切なブロックしたガラクトース化合物と 化合して、ブロックしたβＧａ１（１→３）βＧ　Ｉ　ｃＮｓ　ＯＲおよびβＧ ａ１（１−＝４）βＧ　Ｌ　ｃ　Ｎ）−ＯＲ誘導体の混合物を与え、これは従来 技術により容易に分離される。 ｌへ７または１１９Ｆと構造をイＴする血液ヘラ決定基に関連するオリゴ糖配糖 体の合成中のＪＩＪＪな時期に、アント基はアミノ基に還元されて、Ｎ−トリフ ルオロアセトアミド て除去されて、それによりアミノ基を露出させる。 アミノ基はまた従来方法により誘導体化して、　ＮＲ＋＋Ｃ　（０）Ｒ＋。、− ＮＨＳＯ．　Ｈ、Ｎ＝Ｃ　（Ｒ＋＋）　ｔ　、ＮＨＣＨ　（Ｒ．）　ｔ　、ＮＨ Ｒ＋ｔ、および−Ｎ　（Ｒ，２）　２基を与える。例えば、−ＮＲ２基は従来技 術を用いて、以下のものと反応てきる カルボン酸、酸無水物または酸塩化物と反応してアミドを与える。あるいは、目 的の酸をイナズ（Ｉｎａｚｕ）ら４３の報告のように活性化して、次にアミノ基 と反応させる。このカルボン酸、酸無水物、酸塩化物、または活性化酸は、水素 または炭素原子数１から４のアルキルであるＲ１。基（すなわち、　ＮＲ　＋　 ＋　Ｃ　（０）　Ｒ　ｌｅ置換基の一部ノを与えるように選択される；アルデヒ ドまたはケトン（炭素原子数１から４まで）と、制御したｐＨて反応してイミン ［　Ｎ＝Ｃ　（Ｒ１＋）　２　］を形成し、これを（例えは、シアノホウ化水未 すトリウムで）還元して、ベルノタス（Ｂｅｒｎｏｔａｓ）ら１４の報告のよう にアルキルアミン置換基［すなわち、　ＮＨＣＨ（Ｒｉ１）ｔ　］を得る：エチ レンカーボネーｌ−またはプロピレンカーボネートの様な環状カーボネートと反 応して、それらか該アミンとの反応で開環して、ウォーレンバーグ（Ｗｏｌ　ｌ ｅｎｈｅｒｇ）ら６か合一゛に国特沿’４，６１２．１３２号に報告したように ＨＯ−アルキレン−〇Ｃ（０）Ｎｌ−（−置換基（式中、アルキレンは炭素原子 −数２から４である）をイ」するカルバメーＩ・基を形成する。 りｏｏポルメート［ずなわぢ、ＣＩ　Ｃ（０）　ＯＲ，、］と、グブレイブＧｒ ｅｉｇ）ら１によって開示されｔこ方法で反応する。この場合、該クロロポルメ −１−は、炭、１：原１“数１から４のアルギルであるＲ１．基を在する。 ｉ＋Ｖｆｆ、化中間体ニ至ル０＝ｃ　（０−Ｃｓ　Ｈ４−ｐＮＯｚ　）　２　ト 反ＬＬ；シテ、これが次にアミン（ＨＮＲ１ｔＲ＋ｓ）と反応して、ビエカルス カーバルトスゼウィッチ（Ｐｉｅｋａｒｓｋａ−Ｂａｒｊｏｓｚｃｗｉｃｚ）ら ４７によ−）で記載されたように尿素［Ｎ　ＨＣ（０）　Ｎ　ＲＩ４Ｒ、ａ　］ を得る。 べ戸イトつ（Ｉ’ｃｆｉｌｏｕ）”か記載したように、トリメチルアミン、三酸 化イ才つ（Ｓｏ、）と反応して、−Ｎｌ（Ｓｏ、ＨＪｋを形成する。そして誘導 体化蟻酸または他の物質と反応して、ホルムアミｌ”　（−Ｎｌｌ−ＣＨＯ）’ ”を形成し、これはさらに官能基化されてイソシアノ（−Ｎ＝Ｃ＝Ｏ）となり、 水素化トリブチルスズ（Ｂｕｓ　５ｎＨ）”てデオキソ誘導体に還元される。 あるいは、該２−デオギン（Ｒ，＝Ｈ）および２−アルコギングルコース配糖体 〔すなオっち、ＮＡｃか−Ｈ（デオキソ）または−ＯＲ，２（アルコギン〕で置 換されたＧＩｃＮＡｃの誘導体］は、トルムテッ（Ｔｒｕｎｒｔｅｚ）ら４″に よって提唱されたものと同様な合成概略を用いて調製される。具体的には、公知 のグルコースの３．４．６−ｌ・リアノル化１．　２−オル１〜エステルを従来 法の条件下で脱アシル化して、グルコースの１．２−オルトエステルを得る。次 にこの化合物を、従来技術を用いてグルコースの３．　４．　６１−リベンジル Ｉ、２−オルトエステルに変換する。得られる化合物の１．２−オルトエステル を次に従来技術で開いて、グルコースの１−α−ブロモ−２−アセチル−３，４ ，６−１−リベンジル誘導体のような保護化グリコノル供Ｊｊ体を得る。次にこ の１−α−ブロモ誘導体を従来技術て配糖体（−ＯＲ）に変換し、次に２−アセ チル基を除去する。２位は、従来法による２−デオキソの形成か可能であり、例 えばまず１当量の塩基の存在下て二硫化炭素とヨウ化メチルで処理して＝Ｃ（Ｓ ）ＳＣＨ，誘導体を形成し、続いて水素化ｌ・リブチルスズと反ＬＬ；させて２ −アルコキンか調製される。２−デオキシグルコース配糖体または２−アルコギ ングルコース配糖体を得るために残りの保護基は除去し、これらは０１１述のお よび図１に示した方法でアグリコン形成の必要なく誘導体化することかてきる。 ｉｉ、ＧＩｃＮＡｃの６位の修飾 図２６に示すように、ＧＩｃＮＡｃ−ＯＲの６−デオキソ誘導体は、３−ヒドロ ギノ位を除去可能なペンゾイルブロソギング基（Ｂｚ）で保護した公知のベンジ リデン環ブロックした糖（８−メトキシカルボニルオクチル−２−アセトアミド −４，６−０−ヘンノリテン−２−デオキソ−β−Ｄ−グルコピラノシド）■か ら、ピリジン中で無水安り香酸または塩化ベンゾイルと反応させて合成する。 この化合物を四基化炭１（ＣＣ１，）中で６５°ＣてＮ−プロモザクシニミドお よび炭酸バリウムと反応させてさらに変換すると、３．４−ジベンゾイル−６− ブロモ−ＧｌｃＮＡｃ−ＯＲ化合物かＩｆられる。次にこの化合物は、ＡＩＢＮ （アブヒスーイソブチロニｌ−リル）の（ｒ（Ｊ：Ｔて１１０″Ｃて（ＣＩ　Ｈ ｓ　）３　ＳｎＨど反応させ、次にメタノール／す１〜リウムメトキノ１−で処 理することにより３．４−ジベンジル−６−１才ギノーＧＩｃＮＡｃ−ＯＲに変 換される。次にこの化合物は従来技術により脱保護されて、６−デオキソＧＩｃ ＮＡｃ−ＯＲ配糖体か得られるか、これはｉｊ！述のおよび図１７に示した方法 でアグリコンの形成の必要なく誘導体化することかできる。 該ＧＩｃＮΔｃ−ＯＲの６−アジド誘導体は、図２５に記載の方法で調製する。 具体的にはＧ　Ｉ　ｃＮＡｃ　−ＯＲ（化合物８７）を（ＣＨ，Ｏ）　２ＣＨ− Ｃ，Ｈ４ｐ　−ＯＣＨ３と反応させてｐ−メトギソヘンジリノンでブロックした 化合物８８に変換する。次にこの化合物を、４−ＣＨ，Ｏ−Ｃ，Ｈ，−ＣＨｔ　 Ｂｒと反応させて３−ヒＩ・ロキノ位て保護し、Ｘか４−ＣＨ，ｏ＝ｃｓ　Ｈ４ −ＣＨ，−である化合物８９を得る。化合物８９は水中て約４５”Ｃて酢酸（Ａ ｃＯＨ）と反応させて、４および６位の一部を脱保護して、化合物９０を得る。 化合物９ｏのピリジン中の塩化メシル（ＭｓＣＩ／ｐｙ）との反応により、６− メシル化誘導体（化合物９１）を調製する。次にツメチルホルムアミド（Ｄ〜１ Ｆ）中てアジ化すトリウ１、ど反１．こ、させて６−アット誘導体（化合物９２ ）を形成し、３−プロソキンゲ基をジクロロシソアノキノン（ＤＤＱ）で除去す ると化合物９３が生じる。 ６−メノル化合物９１は、公知の化学でアルコキノ置換基などを含む（［、ｔの 多くの６−置換体にも誘導体化することかできる。 ６−丁ノド化合物９２は、前述の方？Ａで１ヤまたはＩＩ型型溝構造打する血液 へ２決定基に関連するオリゴ糖配糖体の合成の適切な時点で６−アミノに誘導体 化することかできる。次に６−アミノ誘導体は、従来法でさらに官能基化して− ＮＲ，Ｃ（０）Ｒ，、−ＮＨ３Ｏ，Ｈｌ−Ｎ＝Ｃ（Ｒ−）２、−ＮＨＣＨ（Ｒｉ 　）　２、−ＮＨＲ，および−Ｎ　（Ｒ−）２を得る。例えば該−ＮＨ２基は従 来技術を用いて以下のものと反照、てきるカルホン酸、酸無水物または酸塩化物 と反しシソてアミ１−をｉする。あるいは、目的の酸をイナズ（ｌｎａｚｕ）ら ４３の報告のように活１″ｉ化して、次にアミノ７、Ｈと反応させる。このカル ボン酸、酸無水物、酸塩化物、または活性化した酸は、水素または炭Ｊ二瞭１“ −数１から４のアル４ルであるＲ、Ｊ！（すなわち、−ＮＲ，Ｃ＜０）Ｒ，置換 法の一部）をｉ！）るように選択する。 アルデヒ！・またはケ］・ン（炭ＸｆＩ７子数１から４まで）と、制御したｐＨ て反応させて−イミン［−Ｎ＝Ｃ（Ｒ５）　２　］を形成し、これを（例えば、 シアノホウ化水素すトリウムて）還元して、ヘルノタス（Ｂｅｒｎｏｊａｓ）ら ４４の報告のようにアルキルアミン置換基［すなわち、　ｌ’Ｈ−ＩＣＨ（Ｒ− ）２　］を得る。 エチレンカーホ不−１・またはブロビレンカーホネー１〜の様な環状カーボネー トと反１ｊ、：　して、それらか該アミンとの反応で開環して、つす−レンバー グ（Ｗｏｌｅｎｂｅｒｇ）ら１５か合衆国特許４，６１２，１３２号に報告した ように■−１０−アルギレノーＱＣ（０）ＮＨ−置換基（式中、アルキレンは炭 素原Ｔ−数２から４である）をｆｆするカルハメ−１・基を形成する。 クロロホルメート［すなオつち、ＣＩＣ（０）ＯＲ，］と、グブレイブＧｒｅｉ ｇ）ら４６か開示した方法で反ＬＬ：する。この場合、該クロロホルメ−１・は 炭素原子数１から４のアルギルであるＲ７基を有する。 活性化中間体に至るＯ＝Ｃ（０−ＣＩ　Ｈ４−１’）ＮＯ２）ｔと反応して、こ れが次にアミン（ＨＮＲ＋　Ｒｉ　）と反ＬＬ、して、ピエカルスカーバルトス ゼウィッチ（Ｐｉｅｋａｒｓｋａ−Ｂａｒｔｏｓｚｃｗｉｃｚ）ら４７か記載し たように尿素［−ＮＨＣ（０）ＮＲＩ　Ｒｓ　］を得る。 ｐＨ９，５でトリメチルアミン、三酸化イオウ（ＳＯ２）　と反応し、ペティト ウ（Ｐｅｔｉｔｏｕ）”か記載したように−ＮＨ３Ｏｚ　Ｈ基を形成する。そし て誘導体化した蟻酸または池の物質と反応して、ホルムアミド（−ＮＨ−ＣＨＯ ）”を形成し、これはさらに官能基化されてイソシアノ（−Ｎ＝Ｃ＝Ｏ）どなり 、水素化トリブチルスズ（Ｂｕｓ　５ｎＨ）”てデオキソ誘導体に還元する。 ＧＩｃＮＡｃの６−アルコキノ置換基は、図２６に記載の方法で調製できる。 具体的にはＧＩｃＮＡｃ　−ＯＲ（化合物８７）をアセトニトリルてＣａ　Ｈ， ＣＩ（　（ＯＣＨ−　）２と反応させて、４．６一ジ保護ベンジリジン化合物９ ４を１！７る。次に、化合物９４を臭化ベンジル（Ｂｎ）および水素化すトリウ ムとツメチルホルムアミドの（ｆ（］斗−て約０°Ｃて反応させて、３位にベン ジル保護！Ｊ，すなわち化合物９５を１１トる。化合物９５を約８０−９０”Ｃ て酢酸および水と接触させて４、６位を脱保護して化合物９６を得る。化合物９ ６を酸化ジブチルスズ［（Ｂｕ）　２ＳｎＯ］およびＲｓＢｒと反応させて、６ −アルコキノ置換基９７を得る。従来法のパラジウム／炭素中の水素によるベン ジル基の脱保護で化合物９８か生成する。 別の実施態様では、化合物９４をピリジン中で［Ｃ．Ｈｓ　Ｃ　（０）］　２　 ０ど反応させて、３位にベンゾイル保護基（Ｂｚ）、すなわち化合物９９を得る 。化合物９９を四１巴化炭素中てＮ−プロモサクソニミトと反応させると、６− ブロモ化合物１００か生成する。化合物＋００を１−ルエン中水素化トリブチル スズ［（Ｂｕ）　３ＳｎＨ］と反応させて６−デオキソ化合物１００ｂを得るか 、これは従来法のメタノール中のす）・リウムメトキノトてのヘンシル基の脱保 護の後、６−デオキソ化合物１００ｃを得る。 ６−ＳＲ．化合物は、６−メシル誘導体（化合物９１）からチオ酢酸カリウム＜ ＣＨ，Ｃ　（０）Ｓ−　Ｋ’　）と反応させて６位にチオ酢酸誘導体を得る。次 にこの誘導体を穏やかな塩基で処理して６−３Ｈ誘導体を生成させる。６−３Ｈ はハロゲン化アルキル（例えば、ＣＨ，Ｂｒ）と反応させて一３Ｒ，誘導体を得 るが、これは次に、部分的にまたは全部か酸化して、６−スルホンまたは６−ス ルホキント誘導体、−３（０）Ｒ，および−３（０）２Ｒ１（式中Ｒ６は炭素原 子数１から４のアルキルである）か得られる。 ＣＩ　（ｉｉ）　ｌ型またはＩＩ型型槽造をｆＴする血液型決定基に関連するオ リゴ糖配糖体を調製するための代替法 Ｉ型または］１型核摺造を存する血液型決定基に関連するオリゴ糖配糖体を調製 するための代替法は、公知の化学を使用して行う。さらに、いくつかのｌ型ある いは１１型の柱構造は、酵素的にルイス１およびルイス１構造に、シアリル化ｌ 型または１１撃構造に、そしてシアリルルイス１およびシアリルルイス１構造に 変換する。 以下の説明は、これらの構造中のＮ−アセチルグルコサミン（Ｇｌ　ｃＮＡｃ） （１１位の２および／または６位を、および／またはガラクトース単位の２位を 、修飾したシアリルルイス５およびシアリルルイス８の調製法に関する。しかし 、当業汁であれば、ルイス９およびルイス′の場合には単にシアリル化工程を省 くことにより、そしてシアリル化ｌ型または１］型構造の場合には単にフコシル 化工程を省くことにより、修飾したルイス８およびルイスｘＩｌｌｔ造またはシ アリル化ｌ型または］１型溝造を容易に調製できることは理解される。 Ｎ−アセチルグルコサミン（ＧＩ　ｃＮＡｃ）単位の２および／または６位を、 および／またはガラクトース単位ｔ位の２位を修飾したシアリルルイス８の誘導 体は、まずＮ−アセチルグルコサミン（ＧｌｃＮＡｃ）単位の２および／または ６位を、および／またはガラクト−ス単位の２位を修飾したβＧａｌ　（１−４ ）βＧｌｃＮＡｃ−ＯＲ基本骨格またはβＧａｌ　（１→３）βＧｌｃＮＡｃ− ＯＲ基本骨格を合成することにより調製される。次にこれらの基本骨格を、βＧ ａ１（１−３／４）βＧ］　ｃＮＡｃａ　（２−３）　ノアリルトランスフエラ ーゼおよびβＧａ１（１→３／４）βＧｌｃＮＡｃα（ｌ→３／４）フコシルト ランスフェラーゼまたは他の適切なノアリルーまたはフコノルトランスフエラー セを用いて逐次シアリル化およびフコシル化する。この点に関して、このシアリ ルトランスフェラーゼは、ガラクトースの３．４、および６位に水酸基、および ■型構造てｌ；ＥＧ　Ｉ　ＣＮＡｃ単位の４−位に水酸基、または１］型構造て はＧｌｃＮＡｃ単位の３−位に、水酸基の存在を必要とすることは以前に開示さ れている１日４゜同様に、このフコノルトランスフエラーセか、ガラクト−スの ６位に水酸基、および■型構造ではＧ　Ｉ　ｃ　ＮＡ　ｃ　ｊｌ’−位の４−位 に水酸基、または１１型構造てはＧＩｃＮＡｃ単位の３−位に水酸基の存在を必 要とすることは以１ｉｉｉに開示されている目１４゜しかし、βＧａｌ　（１→ ３／４）βＧｌ　ｃＮＡｃａ　（２→３）シアリルトランスフェラーゼおよびβ Ｇａ　ｌ　（１−３／４）βＧＩ　ｃＮＡｃａ　（１→３／４）フコシルトラン スフェラーゼの両方とも、ＧＩｃＮＡｃ単位の２．６位で部分的置換、および■ 型およびｌｌ型構造のガラクトース単位の２位で部分的置換を許容する一目４゜ このようなン了すルトランスフエラーゼおよびフコシルトランスフェラーゼの使 用は、そのシアリルおよび／またはフコシル基のいずれかに修飾を有するものを 含むシアリルルイス８およびシアリルルイス１の類似体の簡便な合成法を提供す る。例えば、このようなシアリルトランスフェラーゼの使用は、Ｎｅｕ５Ａｃま たはＮｅｕ５Ａｃ融和性のある類似体の基本骨格（Ｈ造への転移を可能にする１ ；一方ぞのようなフコツルトランスフェラーゼの使用は、フコースおよびその融 和性のある類似体の基本骨格構造への転移を可能にする。 これらのシアリルルイス８誘導体および少数のケースでシアリルルイス１誘導体 を調製するための代替法の一般的反応概略図は、図２７Ａ−３３に記載される。 シアリルルイス１のみか開示される場合に、実施例に例証するようにシアリルル イス１誘導体を調製するためにも、同様の方法が利用できることは理解される。 具体的には、図２７に記載する三糖１０４は公知の化合物であり、ラトクリフ（ Ｒａｔｃｌ　１ｆｆｅ）ら１２・３７により開示されている。この化合物は当該 分野て公知の従来法の工程により誘導体化されて、実施例に記載の三糖１１１ｂ 、ｌ１ｌｃ、およびｌ１ｌｄを与える。 具体的には、三糖１０４のベンジルエステル（−ＣＯＯＢｎ）を大気圧で酢酸エ チル（ＣＨ２ＣＯ２Ｃｔ　Ｈａ　）中て炭素上の５９６パラジウム（Ｐｄ／Ｃ） の存在下で水素（Ｒ７）化し、続いてメタノール中のナトリウムメトキシド（Ｃ Ｈｈ　ＯＮａ、ＣＨｓ　ＯＨ）により脱−〇−アセチル化すると、三糖１１１ｂ か得られる。元のままの２−アジド基を除去するために、最初の工程に酢酸エチ ルを溶媒どして使用することは好ましい。この工程で非常に少量の不純物か生成 するか、これは従来法の分離技術（例えは、クロマ１−グラフィー）により分離 できる。 あるいは、ピリノン、水およびトリエチルアミンの混合物中ての硫化水素（Ｈ， Ｓ）による四糖１０４の２−アジ１−基の還元により、２−アミノ三糖１０９か ？１１られた。ヘンツルエステル（−ＣＯＯＢｎ）の還元、続いて脱−０−アセ チル化（ｔｉｉｆ述）により三糖１１１ｃか生しる。 三糖１１１ｄは、まずメタノール（ＣＨ，ＯＨ）中で無水プロピオン酸［（ＣＨ ２ＣＨ２Ｃｏ）２０］を用いて、三糖１０９をＮ−プロピオニル化し、三糖＋１ ０を？することにより得られる。三糖１１０は少量の対応する４−０−プロピオ ニル化物質を佳うか、これは従来法の分離技術（例えば、クロマトグラフィー） により分離できる。ｎＩＩ述のようにアセチルおよびヘンシル保護基を脱離して 、三糖１　ｌ　１　ｄ　ヲｉ！）ル。 三糖１１１ｃはまたｉ羨宋方Ｉノ、により誘導体化して、−ＮＲ＋＋Ｃ（０）Ｒ ｈｏ、−ＮＨ３Ｏ＋　）（、Ｎ＝Ｃ（Ｒ１１）　−、ＮＨＣＨ（ＲｌＩ）　２　 、ＮＨＲ１２、および−Ｎ　（Ｒ，、）、基、およびアミノ酸またはポリペプチ ド残基誘導体を得る。 例えは、−ＮＨ，基は従来技術を用いて、以下のものと反応できるカルホン酸、 酸無水物または酸塩化物と反応してアミドを得る。あるいは、目的の酸をイナズ （Ｉｎａｚｕ）ら４２のｆｖ告のように活性化して、次にアミノ基と反応させる 。このカルボン酸、酸無水物、酸塩化物、または活性化した酸は、水素または炭 素原子数１から４のアルギルであるＲ１゜基（すなわち、−ＮＲ，、Ｃ（０）Ｒ １ｏ置換基の一部）を得るように選択する。 了ルデヒトまたはケトン（炭素原子数１から４まで）と、制御したｐＨてイミン ［−Ｎ＝Ｃ（Ｒ，、）　２］を形成し、これを還元（例えば、シアノホウ化水素 す１−リウムて）して、ヘルノタス（Ｂｅｒｎｏｔａｓ）ら４４の報告のように アルキルアミン置１９！基［すなわち、　ＮＨＣＨ（ＲＩＩ）２コを得る。 エチし、カーボネートまたはブロビレンカーホネートの様な環状カーボネートと 反応して、それらか該アミンとの反応で開環して、つオーレンハーグ（Ｗｏｌ　 ｌｅｎｂｅｒｇ）ら１５力恰衆国特許４，６１２，１３２号に報告したようにＨ Ｏ−アルキレン−〇Ｃ（０）ＮＨ−置換基（式中、アルキレンは炭素原Ｔ−数２ から４である）を存するカルハメ−１・基を形成する。 クロロホルメート［すなわち、ＣＩＣ（０）ＯＲＢ’ｌと、ブレイブ（Ｇｒｅｉ ｇ）ら６か開示した方法で反りこ：する。この場合、該クロロホルメ−１・は炭 素原子数１から４のアルキルであるＲ＋ｚＭを有する。 活性化中間体を１！）るＯ＝Ｃ（ＯＣ−Ｈ４ｐＮＯ２）ｘと反応して、これが次 にアミン（ＨＮ　ＲＩ　４　Ｒ＋　−）と反応して、ビエカルスカーバルトスゼ ウィッチ（Ｐｉｅｋａｒｓｋａ−Ｂａｒｔｏｓｚｅｗｉｃｚ）ら４７か記載した ように尿素［Ｎ　ＨＣ（０）　Ｎ　Ｒｌ　４　Ｒ１ｓ　］を得る。 トリメチルアミン、三酸化イオウ（Ｓｏ、）と反応し、ペテイトウ（Ｐｅｌｉｊ ｏｕ）”か記載したように−ＮＨ３（ｈＨ基を形成する。そして誘導体化蟻酸ま たは他の物質と反応して、ホルムアミド（−ＮＨ−ＣＨＯ）”を形成し、これは さらに官能基化されてイソシアン（−Ｎ＝Ｃ＝Ｏ）となり、水素化１リブチルス ズ（Ｂｕ３Ｓｎｌｌ）”てデオキシ誘導体に還元する：ボーダンスキー（Ｂｏｄ ａｎｓｚｋｙ）らＳｌか報告するように酸基が活性化されたアミノ酸またはポリ ペプチド部分と反応する。 次に三糖１１１ｂ、１ｌｌｃ、および１１１ｄおよびそれらから誘導される誘導 体は、ＧＤＰ−フコース（ＧＤＰ−Ｆｕｃ）の存在下で、適切な三糖をβＧａ１ （＋−３／４）βＧＩｃＮＡｃα（ｌ→３／４）フコシルトランスフェラーゼと 接触させることにより、シアリルルイス８の類似体である四糖＋＋２ｂ、１１２ ｃ、およびｌ１２ｄを得る。 図２８は、適切に誘導体化したβＧａｌ　（＋−４）βＧＩｃＮＡｃ−ＯＲ構造 から、この構造の逐次の酵素的シアリル化およびフコシル化による、シアリルル イス１類似体を調製するための一般的反応概略図を示す。図２８は、Ｎ−アセチ ル−グルコサミン（Ｇ１ｃＮ八ｃＮへ造の２または６位の修飾のみを示す。しか し、修飾を組み合わせて、Ｎ−グルコサミンの２および６位の両方で修飾できる ことは理解される。さらに、図２８はガラクト−スの２位に２−水酸基のみを示 すか、この位置は水素またはフルオロて置換されていてよいことも理解される。 このような置換がラタト−ス化合物は当Ｒｂ分デＦて公知である。図に記載の反 応におけるこれらのガラクトース化合物の置換により、シアリルルイス８類似体 における修飾ガラクト−スｌｌｊ位か得られる。 酵素的シアリル化 図２８で、シアリル化はβＧａ　ｌ　（１−３／４）βＧｌ　ｃＮＡｃａ　（２ →３）シアリル１〜ランスフエラーセ［すな才）ち、βＧａ１（１→３／４）β ＧＩｃＮＡＣα（２→３）ＳＴＩの使用により行オ）れる。α−ノアリル（２→ ３）βＧａ１−形成のための、ガラクト−スの３−位へのソアル酸の酵素的転移 は、あらかしめそのヌクレオチド（ＣＭＰ）の合成（すなわち、活性化）を要す る。ノアル酸の活性化は通常、酵素であるＣＭＰ−ノアル酸合成酵素を使用して 行オ）れるが、これは容易に入ｆ可能であり、文献に種々のンアル酸類似体（例 えは、９−置換Ｎｅｕ５Δｃｓ２６３６″′−６７，７−ニビーＮｅｕ５Δｃ６ １．７，８−ビス−エビ−Ｎｅｕ５Δｃ　Ｓ　ｌ、４−０−メチル−Ｎｅｕ５Δ Ｃ０，４−デオキソ−Ｎｅｕ５Δｃ６０．４−アセトアミド−Ｎｅｕ５Ａｃ＠２ ．７−デオキツーＮｅｕ５Ａｃ”、４．７−ジブオキシーＮｅｕ５Ａｃ”、Ｎｅ ｕ５Ａｃの６−チオ誘導体１、およびＮｅｕ５０Ｈ（ＫＤＮ））の活性化の実例 か記載されている。 Ｎｃｕ５ＡｃのＣＭＰ誘導体（すなわら、ＣＭＰ−Ｎｅｕ５Ａｃ）として図２８ に示される、得られたＣＭＰ−ノアル酸類似体は、βＧａ１（１→３／４）βＧ ］ｃＮＡｃα（２−３）ソアリルトランスフエラーセの存在ドて、ソアル酸かガ ラクト−スの３位に転移されてαＮｅｕ５Ａｃ　（２→３）βＧａ１−結合を形 成する条件下で、誘導体化したβＧａ１（１→４）βＧＩｃＮＡｃ−ＯＲ化合物 と化合さ第１る。当該分野で公知の適切な条件は、適切な緩衝液（例えば０．　 ＩＭカコンノルナトリウム）中で適切な条件のｐＨおよび温度（例えばｐＨ６， ５から７５、および温度２５と４５°Ｃの間、好ましくは３５−４０°Ｃ）で、 １２時間から４日間インキュベートしながら、誘導体化したβＧａ１（１→４） βＧＩ　ｃＮＡｃ−ＯＲ化合物およびＣＭＰ−ンアル酸の混合物へ、シアリルト ランスフエラーセを添ＩＪＯすることを含む。得られたシアリル化生成物は、Ｈ ＰＬＣ、イオン交換−、ゲル−１逆相−または吸着クロマ１〜グラフイーからな る従来方法を用いて単離およびｆｒｌ製される。 酵素的フコシル化 図２８で、フコシル化はβＧａ　Ｉ　（１→３／４）βＧｌ　ｃＮＡｃａ　（１ →３／４）フコノルトランスフェラーゼ［すなわち、βＧａｌ　（１−３／４） βＧｌｃＮＡｃａ　（１→３／４）ＦＴ］の使用により行オ）れる。αＦｕｃ　 （１−３）βＧＩｃＮＡｃを形成するためのＧＩｃＮＡｃの３−位へのフコース の酵素的転移は、あらかしめヌクレオチド（ＧＤＰ）誘導体の合成を要する。Ｇ ＤＰ−フコースの合成は好ましくはシアン（Ｊｉａｎｇ）ら４２か記載した方法 で行われ、これは本明細書の以Ｆの実施例に記載する。 ＧＤＰ−フコース（Ｃ；ＤＰ−ＦＩＪＣ）は、βＧａｌ　（１−３／４）βＧＩ ｃＮＡｃα（１−３／４）フコシルトランスフェラーゼの存在下で、フコースが シアリル化βＧａ１（１−＝４）βＧＩｃＮＡｃ−ＯＲのＧＩｃＮＡｃ単位の４ 位に転移されて、βＧａ１（１→４）βＧｌｃＮＡｃ基本骨格を誘導体化したα Ｎｅｕ５Ａｃ　（２−３）βＧａ　Ｉ　（１→４）［ｃｒＦｕｃ　（１→３）］ βＧＩｃＮＡｃ−ＯＲ化合物（ンアル酸かαＮｅｕ５Ａｃの時）を形成する条件 下で、シアリル化βＧａ１（１−＝４）βＧｌｃＮＡｃ−ＯＲ化合物と化合され る。当該分野で公知の適切な条イ′１は、適切な緩衝戚（例えは５０−のカコジ ル酸すトリウム）中で適切な条件のｐＨおよび温度（例えはｐＨ６，５および温 度３０と４５°Ｃの間、好ましくは３５−４０°Ｃ）で、１２時間から４日間イ ンキュベートしながら、誘導体化したαＮｅｕ５Ａｃ　（２−３）βＧａ１（１ −４）βＧＩｃＮＡｃ−ＯＲ化合物（ンアル酸かαＮｅｕ５Ａｃの時）とＧＤＰ −フコースの混合物へ、フコシルトランスフェラーゼを添加することを含む。得 られたシアリル化およびフコシル化生成物は、ＨＰ　Ｌ　Ｃ、イオン交換−、ゲ ル−１逆相−または吸着クロマトグラフィーからなる従来方法を用いて単離およ び精製される。 三糖１１１ｂ−ｄの場合は、これら三糖の調製フコシル化は、パルシック（Ｐａ ｌｃｉｃ）ら２５に従って行う。生成物はその文献に示すように精製される。三 糖１１１ｂ−ｄの構造は３００ＭＨｚての’Ｈ−ｎ、ｍ、ｒ、により、そして生 したシアリルルイス８化合物１１２ｂ−ｄは５００λｌ１ｌｚての’Ｈ−ｎ、ｍ 、ｒ、により確認した。 図２９は、糖モノマーから出発するβＧａ１（１−”３）βＧＩｃＮＡｃ−ＯＲ およびβＣ；ａｌ（１→４）βＧｌｃＮΔｃ−ＯＲ構造の特定の三糖誘導体の化 学合成を示す。この点に関して、がラフＩ・−スどＧＩｃＮＡｃ−ＯＲ単位の化 学結合は、βＧａｌ　（１−３）βＧＩ　ｃＮＡｃ−ＯＲ（Ｉ型基本骨格）とβ Ｇａ１（１→４）βＧｉｃＮΔｃ　−ＯＲ（Ｉｆ型基本骨格）の両者をもたらす か、これらは従来法の精製技術（すなわち、クロマトグラフィー）により分離さ れる。 ■を体的には、図２９で、公知のＨ，２７２−アジＩ・化合物＋１６は従来技術 １！３７によりＩＩＱＩｉｌｌｔｉｉｆ能な保、：ｌ＆　（ずなわら、Ｓ　ｌ　 （Ｃｍ　Ｈｓ　）　２　ｔ　Ｂｕ）て６位を保護する。次（ここの３Ｍｊ＃１本 ＋１７を、トリメヂルノリルトリフルオロメタンスノしボン酸（ＴＭＳＯＴｆ） の（ｒ扛下て、ガラクト−スの全アノル化誘導体＋１８と化合させて、次にデト ラヒトロフラン中のＪ！！化アジアンモニウムＨ２Ｃｌ　）、フッ化カリウｌ、 （ＫＦ）を添加する。この反応により、１およびｌＩヤ誘導体の混合物（すなわ ち、βＧａｌ　（１→３）βＧＩｃＮΔｃ−ＯＲおよびβＧａ１（１−”４）β ＧＩｃＮΔｃ−ＯＲ誘導体）である化合物＋１９と１２１か生しるか、これらは 従来技術（例えはクロマトグラフィー）により分離される。 次に誘４体＋１９または１２１のいずれかを、メタノール中のすトリウムメ１− キントの混合物（ＣＨ，ＯＮａ／ＣＨ，ＯＨ）て脱保護して、各々誘導体＋２０ １）まタハＩ　２２　ｂ　ヲｉ！）ルカ１．＝１ｔラバｎｉｌ述ノ三糖１１１ｃ と１ｌｌｄ（７）方法と同様の方ｉＪ＝に従って、各々アミン誘導体１２０ｃま たは１２２ｃに、または各々プロピオン酸（Ｐｒ）誘導体１２０ｄまたは１２２ ｄに変換される。 あるいは、誘導体１１９または１２１は、従来技術によりトソル化されて、ＧＩ ｃＮＡｃ誘導体の６−位に１−シル基を与える。このトノル誘導体は、適切な桟 試りを用いる置換反応による６−ハロ置換基、または水素化ビス−トリブチルス ズなとの（ｒ在トてハロゲン化アルキルを用いるアルキル化により６−アルコキ ン置換基を形成するのに使用することかできる。 さらに図２９には示さないか、２−デオキシ（Ｒ２＝Ｈ）および２−アルコキノ ゲルコース誘導体は、トルム１ツ（Ｔｒｕｍｊｅｚ）ら″か引用したのと同様の 合成厚ｒ、仁、！ｔＪｌｉ’ｌを使用して調製される。具体的には、公知のグル コースの３．　４．　６−トリアノル化１．　２−オル１〜エステルを、従来法 の条件下て脱アシル化してグルコースのＩ＋　２−オル）−エステルを（’する 。次にこの化合物は従来技術を用いてグルコースの３．　４．　６−ドリヘンジ ル！、２−オルトエステルに変換する。得られた化合物の１．　２−オル１−エ ステルを、従来技１ホｆにより開裂して、保護したグリコリル供！ｊ体（例えば グルコースの１−α−プロ１１−−２−アセチル−３，４，６＝１−リヘンノル 誘導体）を１ｑる。このＩ−α−プロＴ：誘導体は従来技術によりグリコント（ −ＯＲ）に変換して、次に２−アセチル基を除去する。２−位は、従来法（例え ば、まず１当量の塩基のｒγ存在下二硫化炭素とヨウ化メチルで処理して−Ｃ（ Ｓ）ＳＣＨ，誘導体を形成させて、続いて水素化トリブチルスズと反応させる） により、２−デオキシの形成または２−アルコキンの調製に利用てきる。 図３０は、βＧａｌ　（１−３）βＣ；Ｉ　ｃＮＡｃ−ＯＲとβＧａｌ　（１− ４）βＧｌｃＮΔｃ−ＯＲのＧＩｃＮＡｃ単位の６−チオキシ誘導体（化合物１ １４５と１Ｉ５ｂ）、およびβＧａｌ　（１−４）βＧｌｃＮΔｃ−ＯＲのＧｌ ｃＮＡＣの６−ブロモ誘導体（化合物１１５ａ）の合成を示す。６−デオキシ化 合物１１４１〕と１１５ｂは、公知のヘンジリデン環でブロックした糖（８−メ トキン力ルポニルオり−ｆ°ル２−アセトアミドー、−β−Ｄ−グルコビラノン ド）から合成されるか、これは、ビリノン中で無水安息香酸との反応により脱離 可能なヘンゾイルブロノキング基（Ｂ　ｚ）て、３−ヒ１ヘロキン位で保護さ第 １る。この化合物は、四塩化炭素（ＣＣＶ．）中て６５°Ｃて、Ｎ−プロモサク シニミトと炭酸バリウムとの反応によりさらに変換して、３．４−ノヘンゾイル ー６ーブロモーＧＩｃＮＡｃ化合物を導く。次に、この化合物を、＋１０°Ｃて ＡＩＢＮ（アゾヒスーイノブチロニ１ーリル）の存在下で、（Ｃ＋　Ｈ＋　）ｓ 　ＳｎＥ（どの反応により３，４−ジベンゾイル−６−デオキシ−ＧＩｃＮＡｃ に変換して、続いてメタノール／ナトリウムメトキットで処理する。 得られる６−デオキシＧＩｃＮＡｃ配糖体は、１位に適切な脱離基を有するがラ フ１〜−スの公知の２．　３．　４．　６−チトラアソル化誘導体と反応して、 β結合を片３成する。適切な脱離基は、α−ブロモとα−トリクロロアセトアミ デート−Ｃ　（＝ＮＨ）　ＣＣ　Ｉ　、　］を含む。反応は、β結合形成を促進 する触媒の存在下で実施する。適切な触媒には、前駆体か臭化ガラクトツルであ る時にはテトラ−Ｎ−メチル尿素の存在下のトリフルオロメタンスルホン酸銀， および供与体かがラフ１−ノル１−リタロロアセトアミデ−１・である時には三 フッ化ホウ素エーテレートか含まれる。この反しｖにより、βＣａ１（１−３） βＧｌｃＮＡｃ−ＯＲとβＧａ１（１−４）βＧ！ｃＮＡｃ−ＯＲ保護化化合物 の混合物か生じるか、これらは従来技術（例えば、クロマトグラフィー）により 単離そして分離される。 脱離ｉ■能な保護基の脱離により化合物１１４ｂまたは１１５ｂか得られる。 また、図３０に示すように、６−プロモーＧＩｃＮＡｃ配糖体前駆体は、適切な 脱＃１基を１位にイ１するガラクトースの公知の２．　３．　４．　６−テトラ アシル化誘導体と反Ｌａ：　してβ結合を形成し、６−ブロモ化合物への経路を 与える。適切な脱Ｍ基には、ａＣ（”ＮＨ）ＣＣＩ２かあり、反応は化合物＋１ ５ａ（すなわち、ＧＩｃＮＡｃ単位の６−位にブロモ基を有するβＧａｌ　（１ −”４）βＧＩｃＮＡｃ−ＯＲ）を調製するために利用した方法と同し方法で実 施する。 図３１と３２は、ラトクリフ（Ｒａｔｃｌ　１ｆｆｅ）ら１２１７か記載した方 法の一つを使用することによる、ＱＩｃＮＡｃ誘導体の６−位（図３１）または ２−位（図３２）を修飾した、α−シアリル（２→３）βＧａ１（１−４）βＧ ｌｃＮＡｃ−ＯＲとα−シアリル（２−３）βＧａｌ　（１→３）βＧｌｃＮＡ ｃ−ＯＲ誘導体の化学合成を示す。 具体的には、図３１に示すように、ＧＩｃＮＡｃ−ＯＲの適切な６−置換誘導体 は、上記のように公知の′。配糖体１２７から、または上記に詳述した、公知の ベンジリデン環でブロックした糖の図３０に記載した型（これは配糖体１２７か ら誘導する）から、調製する。次に６−誘導体化ブロックした物質（図５に記載 ）を、従来方法を使用して脱ブロックして、ＧｌｃＮＡｃの６−誘導体である化 合物＋２８を得る。 次に化合物１２８を当該分野で公知ｌ″３７の方法て三糖１２９ｂと化合させて 、Ｎｅｕ５Ａｃおよびガランｉ・−ス単位に従来法の脱離可能なブロッキング基 を有する三糖＋３０と１３１を得る。具体的には、化合物１２９ｂを、三糖１２ ９ａから公知の方法により合成して、適切な触媒（例えば［ＢＰ、・０（Ｃ＝　 Ｈ＝）２　］　）の存（「下で化合物＋２８と反応させて、各々対応する三糖１ ３０と１３１の混合物をｉτする。化合物１３０：１３１の比は、置換基Ｒ１の 性質と反Ｌコニ条件に依（Ｙする。いずれにしても、三糖＋３０と１３１は、ク ロマトグラフィーを含む従来技術により典型的に分離および精製される。三糖＋ ３０と１３１のブロッキング基の脱離もまた、従来法（すなわち、炭素上のパラ ジウムの存在下で水素添加し、続いてメタノールの存在下でナトリウムメトキシ ドで処理する）であり、これにより三糖αＮｅｕ５Ａｃ　（２→３）βＧａ１（ １→３）βＧＩ　ｃＮＡｃ−ＯＲＩ　２３とａＮｅｕ５Ａｃ　（２−３）βＧａ ｌ　（１−４）βＧ１ｃＮＡｃ−ＯＲＩ　２５を得る。三糖１２３と１２５のフ コシル化は、好ましくはβＧａ　Ｉ　（１−”３／４）βＧｌｃＮＡｃｃｒ　（ Ｉ　→３／４）フコシルトランスフェラーゼ［βＧａ　ｌ　（１−３／４）βＧ −１ｃＮＡｃａ　（１→３／４）ＦＴ〕の存在下て、ＧＤＰ−フコース（ＧＤＰ −Ｆｕｃ）て実施して、Ｃ；ＩｃＮＡｃｌｊ位の６−位を修飾したシアリルルイ ス６類似体１２４、またはシアリルルイス８類似体１２６を得る。 Ｒ３置換基かアジｌ’　（−Ｎ２　、この合成は以下に記載する）の時、この置 換基はｔｉｉｒ述のように単糖レベル（図３１に示す）か、または三糖＋３０ま たはＩ３１のしベルて、さらに他の適切なＲ１置換基に官能基化する。例えば、 三糖１３０または＋３１のＲ１基がアジド基であれば、この基は三糖１３０また は＋３１の中で官能基化されて、＋ｉｉｉ述のアミノ、アミド、イミノなどの置 換基を与える。 いずれにしても、官能基化は一般に、目的の官能基か他の意図する反応を妨害し ない合成のある時点に行われる。例えば、単糖＋２８中のＲ１官能基が三糖１２ ９ｂと単糖１２８の間のカプリング反応を妨害するのであれば、この官能基は三 糖１３０または１３１に導入される。 図３２で、適切なＧＩｃＮＡｃ−ＯＲの２−置換６−保護誘導体（化合物１３２ ）は、例えば、図２９に示す公知のブロックした糖！１７から調製する。 次に化合物＋３２を、当該分野で公知の方法（例えばラトクリフ（Ｒａｔｃｌｉ ｆｆｅ）ら１２３７か記載した方法）を用いて、三糖１２９ａまたは＋２９ｂと 化合して、Ｎｅｕ５Ａｃ、Ｇａ　Ｉ、およびＧＩｃＮＡｃ単位の６−位に従来法 の脱離可能なブロッキング基を有する三糖を得る。具体的には、化合物１２９ｂ を三糖１２９ａから合成して、適切な触媒（例えば［ＢＦ、・Ｏ（ＣＩ　Ｈｓ　 ）　ｔ　］　）の存在下で化合物１３２と反応させて、各々対応する１型または ＩＩ型結合三糖の混合物を得る。■型とＩＩ型化合物の比は、置換基Ｒ２の性質 および反応条件に依存する。 いずれにしても、これらの三糖は、クロマトグラフィーを含む従来技術により典 型的に分離そして精製される。これら保護した■型またはＩＩ型三糖のとちらか のフコノル化は、この三糖の適切なフコツル供与体（例えばラトクリフ（Ｒａｔ ｃｌ　１ｆｆｅ）ら１２３７か記載した臭化テｉ・ラーＯ−ヘンジルーフコピラ ノシル）との反応により行われる。ｉすられた四糖１のブロッキング基の脱離も また従来法で行われ、これによりＧＩｃＮＡｃ単位の２−位を修飾したノアリル ルイス８とシアリルルイス６類似体を得る。 あるいはそして好適な実施聾様ては、フコシル化は、脱保護した三糖をβＧａ１ （１→３／４）βＱＩｃＮＡｃα（１→３／４）フコシルトランスフェラーゼ［ βＧａｌ　（Ｉ−３／４）βＧＩ　ｃＮＡｃａ（Ｉ−３／４）ＦＴ］の存在下で 、ＧＤＰ−フコース（ＧＤＰ−Ｆｕｃ）と接触させて、ＧＩｃＮＡｃ単位の２− 位を修飾したノアリルルイス５あるいはシアリルルイス１類似体を得ることによ り行われる。 上記のように、Ｒ２置ｉ９！基かアジド（−Ｎ、）の時、この置換基は、前述の ようにｔｐ糖レしルかまたは保護した三糖レベルで、さらに他の適切なＲ２置換 基に官能基化される。例えは、保護した三糖のＲ７基かアジド基であれば、この 基はこの三糖の中てＴｉ能基化されて、ｎｉｊ述のアミ人アミド、イミノなとの 置換基を与える。官能基化は、一般に目的の官能基か他の意図する反応を妨害し ない合成のある時点に行われる。例えば、単糖１３２中のＲ２官能基か三糖１２ ９ｂと単糖１３２の間のカップリング反応を妨害するならば、この官能基はその 保護した三糖に導入される。 ＧＩｃＮＡｃの６−位の他の誘導体は、当該分野で認められる方法て調製され、 次にこれらの化合物はガラクトースに結合して、βＧａ１（１→３）βＧＩｃＮ Ａ　ｃ　（’）　ＲＪ導体どβＧａｌ　＜１−４）βＧＩｃＮＡｃ−ＯＲ誘導体 を形成して、これらは従来技術（例えは、クロマトグラフィー）により分離され る。次に、βＧａ　ｌ　（１−”３）βＧｌｃＮΔｃ−ＯＲとβＧａ１（１→４ ）βＧｌｃＮＡｃ−ＯＲ誘導体は、ｎｉｊ述のとおりノアリル化およびフコシル 化されて、６−位を修飾されたノアリルルイス１およびシアリルルイス８誘導体 を与える。 」−記のτ范に関して、６位にクロロ、ブロモ、ヨウＩ−置換基を有する化合物 １２８は、ヘルクホウヤ（Ｂｅｌｋｌ＋ｏｕｙａ）ら６３か報告した方法を用い て、未修飾のＧｌｃＮＡｃ−ｏＲの直接ハロゲン化により調製される。 ＧｌｃＮＡｃ−ＯＲの６−アジド誘導体は、図２５で前述方法で調製する。また ｉｉｉ述したように、６−アジド化合物は、上記三糖１０３について記載した方 法て、１ヘフまたはＩＩヘツ核槽構造（ｆする血ｆｆＬ型決定基に関連するオリ ゴ活況糖体の合成の適切な時点で、６−アミノに誘導体化される。さらに、また 前述したように、６−アミノ誘導体は従来法でさらに官能基化されて、−ＮＨ３ Ｏ，Ｈ。 −ＮＲｓ　Ｃ（０）Ｒ，、−Ｎ＝Ｃ（Ｒｓ　）！　、−ＮＨＣＨ（Ｒａ　）、ｔ 、−ＮＨＲ，および−Ｎ　（Ｒ，）２またはアミノ酸またはポリペプチド残基誘 導体を与える。 ＧＩｃＮＡｃの６−アルコキン、６−ブロモ、および６−デオキシ誘導体は、図 ２６に記載した方法で調製する。 ６−フルオロ化合物は、公知の化学７２により、化合物４９をピリジン中で塩化 メシルと反応させて６−メシル化物を形成させて、このフｙ化テトラエチルアン モニウムとの反１．Ｌ、により、６−フルオロ誘導体を？１１ることにより調製 される。 水素および炭素上のパラジウムにより３−ベンジル基を脱保護すると、化合物４ ０の６−チオキシ６−フルオロ誘導体が得られる。 上記の反応す晶は、多くのＧＩｃＮＡｃの２−または６ｆｔ換誘導体を記載して いる。しかし、これらの修飾を組み合わせて、２−および６−位の両方に置換基 か得られることは明白である。二置換を望む場合には、合成の適切な時点て修飾 し、お互いに融和性を保つようにする。つまり、２−位の修飾は６−位の修飾に 注意して行わなければならないということを意味する。これは、当該分野の通常 の技術範囲内である。 さらに前述したように、目的の２および／または６誘導体化物ｖｔ（特に２−ア ノｉ・の）への修飾は、後の反応と非融和性の官能基を導入しないように、合成 経路の適切な時点て行われる。しかし、ＧＩｃＮＡｃの６−置換誘導体の場合、 βＧａｌ　（１−４）結合はＵＯＰ−ガラクトースと市販のＧＩｃＮΔＣβ（＋ −４）がラクトシルトランスフェラーゼを使用して形成されるか、これは６位で 修飾を受容することか知られている７３．。 以下の実施例は、本光明を説明するために提伊されるものであり、決して本発明 の範囲を限定するためてはない。他に記載のない限り、温度は全て摂氏温度で表 す。また、下記に特に定義しない限り、実施例中で使用する略語は一般に認めら れる意味をイｒする 入＝オンダストローム（Ａｎｇｓｔｒｏｍｓ）ＡＢ＝ＡＢパターン ＡＴＰ−アデノノン三リン酸 ａＸ＝軸結合（アギノヤル） １）　ｓ　＝広い一重項 ＢＳＡ＝ウシ血Ｍアルブミン ｂ　ｔ−広い三ｆｆｉ：項 ＣＤＰ−ノヂジンニリン酸 ”Ｃ−ｎ、　ｍ、ｒ、　＝Ｃ”核磁気共鳴ｄ：ニニＨ，ｒＲｒ頁 ｄｄ−二重項の二重項 ｄｄｄ−二取項の二爪項の一二市項 ＤＤＱ＝ノクロロノソアノキノン Ｄ　Ｔ　［（＝遅延型過敏症 ｅｑ＝赤道結合（エカトリアル） ｇ−ダラム ’Ｈ−ｎ、　ｍ、ｒ、　＝プロトン核磁気共鳴ｍ−多重項 ｍＬ＝ミリリットル ｑ＝四重項 ｔ、１．　Ｃ，”’薄層クロマトグラフィーＵ＝単位 ＡＧＩＸ８（蟻酸塩型）＝イオン交換樹脂ＡＧＩＸ８（蟻酸塩型）、バイオ−ラ ット・ラボラトリーズ（Ｂｉｏ−Ｒａｄ　１．ａｈｏｒａｔｏｒｉｅｓ）、リッ チモンｌ”（Ｒｉｃｌｎｎａｎｄ）、カリポルニア州より入手可能。 Ｄｏｗｅｘ　５０Ｗ　Ｘ　８　（Ｈ’Ｕ）＝イオン交換樹脂Ｄｏｗｅｘ　５０Ｗ Ｘ　８　（Ｈ’　！＜ｌり　、ダウ・ケミカル（Ｄｏｗ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ）、 ミツドランド（ＩＪｉｄｌａｎｄ）、ミノガン化より人Ｔｉ’１Ｉｒｉ臨 ＩＲ−１２０（Ｈ”　Ｎ）＝アンバーライト樹脂、ローム＆ハース（Ｒｏｈｍ　 ＆　Ｈａａｓ）、フィラデルフィア（Ｐｌ＋ｉ　１ａｄｅｌｐｈｉａ）、ペンシ ルバニア州より入手可能。 ＩＲ−Ｃ５０（Ｈ’撃）＝イオン交換樹脂ＩＲ−Ｃ５０（）ド型）、ローム＆ハ ース（Ｒｏｈｍ　＆　）Ｉａａｓ　、フィラデルフィア（Ｐｂｉｌａｄｅｌｐｈ ｉａ）、ペンシルバニア州より入手可能。 市販の成分は、製造１省および適宜注文番号によりリスト化されている。幾つか の製造１古は、以トのとおりである。 アマーンヤム（Ａｍｅｒｓｈａｍ）　＝アマーノヤム１プＪナダンーＩ６（八ｍ ｅｒｓｈａｍ　Ｃａｎａｄａ　Ｌｉｍ１ｔｅｄ）、オンタリオ（０口ｔａｒｉｏ ）　、カナダバイオラット（ＢｉｏＲａｄ）＝バイオラッド・ラボラトリーズ（ Ｂｉｏ−Ｒａｄ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）、リッチモント（Ｒｉｃｈｍｏ口 ｄ）、カリフォルニアＡ月−ロン（Ｉａｔｒｏｎ）＝ヤ１ヘロン・ラボラトリー ズ（Ｉａｔｒｏｎ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）　、東京、日本 メルク（Ｍｅｒｃｋ）　＝イー・メルク社（Ｅ、　Ｍｅｒｃｋ　ＡＧ）　、ダー ムスタット（Ｄａｒｍｓ　ｔａｄ　ｔ）、トイソ ミリポア（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）　＝ミリボアー＋−ポレーション（Ｍｉｌｌｉ ｐｏｒｅ　Ｃｏｒｐ、）　、ベットフｔ　−１”（Ｂｅｄｆｏｒｄ）　、？サヂ ューセッ′ソベルーフリーズＨハイオロジカルズ（Ｐｅｔ−Ｆｒｅｅｚｅ　Ｂｉ ｏｌｏｇｉｃａｌｓ）＝ペルーフリーズ社（Ｐｅｔ−Ｆｒｅｅｚｅ）、ロジャー ス（Ｒｏｇｅｒｓ）、アーカンサスファルマソア（Ｐｈａｒｍａｃｉａ）　＝フ ァルマシア・バイオシステムズ社（ＰｈａｒｍａｃｉａＢｉｏｓｙｓｔｅｍｓ、 ［ｎｃ、）　、ビス力タウエー（Ｐｉｓｃａｊａｗａｙ）、ニュージャージーザ ーハ（Ｓｅｒｖａ）　＝サーバーフッインビオヘミ力（Ｓｅｒｖａ　Ｆｅｉｎｂ ｉｏｃｈｅｍｉｃａ）、ハイデルベルク（ｌｌｅｉｄｅｌｈｃｒｇ）、トイ゛ソ シグマ（Ｓｉｇｍａ）　＝：／グマ・ケミカル社（Ｓｉｇｍａ　Ｃｈｅｍｉｃａ ｌ　Ｃｏｍｐａｎｙ）、セントルイス（Ｓｔ、　Ｌｏｕｉｓ）、ミズーリ ウ（−タープ（Ｗａｔｅｒｓ）＝つＡ−タープ・アソノエー日１：　（Ｗａｔｅ ｒｓ　Ａｓ５ｏｃｉａｔｅｓ。 Ｉｎｃ、　）、メルクｔ−１”（λ１ｉｌｆｏｒｄ）　、？ザチューセソッ以ｔ “の実施例において、実施例△−ＬはＩＭまたは１１型核構造を有する血液型お よび後の同一抗原投与に対して誘発される寛容を記載し、実施例１−は１型また はｉｌｌ型槽構造ｆｆする血液１％′！決定基に関連するオリゴ糖配糖体および その成分の合成を火を記載する。 実施例Ａ　ＤＴＨ炎症応答の阻害 ＤＴＨ炎症応答は、スミスとノ才う（Ｓｍｉｌｔ＋　ａｎｄ　Ｚｉｏｌａ）”に よって記載された、マウスのフットパフ１・膨張評価法（ｆｏｏｔｐａｄ　５ｉ ｖｅｌ　Ｉｉｎｇ　ａｓｓａｙ）を用いて測定された。 筒中に述へると、Ｂａ１ｂ／ｃマウスのｎＮ各約１９−２０グラム）を、強い炎 症ｆｉ、　Ｄ　Ｔ　Ｔ−Ｉ　Ｌｉ、：答を誘発することか知られているクロス１ −リジウム・ザーモヒトロスルフリカム（Ｃｌｏｓｌｒｉｄｉｕｍ　ｊｈｅｒｍ ｏｌ＋ｙｄｒｏｓｕｌｆｕｒｉｃｕｍ）　Ｌ　Ｉ　Ｉ　Ｉ　−６９から得られる 細菌性表面タンパク１１であるＬｌｌｌ　Ｓ一層タンパクで、またはこれも強い 炎症性ＤＴ■−■応答を誘発することか知られている２０μｇのアジュバント（ ＤＤＡ　臭化ノメチルノオクタデノルアンモニウム）を含有する１００μｇのＯ ＶＡ抗原で免疫した。７［１後、各ＨＴのマウスに、１０μｇのＬｌｌｌ　Ｓ一 層タンパクまたは２０μｇのＯＶＡ抗原（アジュバントなし）てフットパット− 抗原投与をした。生じた炎症性フットパット膨張は、ミツ１−ヨ・エンジニアリ ング（Ｍ山＋１ｏｙｏ　Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ）のマイクロメーターで抗原投 与から２４時間後に測定しｔこ。 Ｉｖおよび１１型核構造をイｆする血液型決定基に関連するオリゴ糖配糖体の、 ＤＴＨ応答に及はす影響を評価するため、マウスの群に１００μｇの以下のＩＭ または］］型型構造を（ｒする血液型決定基に関連するオリゴ糖配糖体の投与を しｔ二ｌ　αＮｅｕ５Ａｃ　（２−３）βＣ；ａ　ｌ　（＋−３）　−［ａ−Ｌ −Ｆｕｃ　（１−４）１−βＧｌｃＮＡｃ−ＯＲ（シアリルルイス１またはＣｌ ９．９）２、ｃｒＮｅｕ５Ａｃ　（２−３）βＧａｌ　（１−３）βＧｌｃＮＡ ｃ−ＯＲ（シアリルルイス０またはシアリルＬｅＣ）３、ｃｒＮｅｕ５Ａｃ　（ ２→３）βＧａｌ　（１−４）βＧｌｃＮＡｃ−ＯＲ（シアリルＬａｃＮＡｃ） ４　βＧａ　ｌ　（１−４）　−［ａ−Ｌ−Ｆｕｃ　（１−３）　］−βＧＩｃ ＮＡｃ−ＯＲ（ルイス０−ＯＲまたはＣｌ９．９）５　αＮｅｕ５△Ｃ（２→３ ）βＧａｌ　（１−４）　−［ａ−Ｌ−Ｆｕｃ　（１−３）１−βＧｌｃＮＡｃ −ＯＲ（シアリルルイス８またはシアリルＬｅＸ）Ｒ＝−（ＣＨ２）、ＣＯ２Ｃ ＨＩ これら化合物は、抗原投与から５時間後に尾静脈に溶液として注射した。対照群 は未処理のまま、または１００μｇのリン酸緩衝化生理食塩水（ＰＢＳ）を投与 した。この実験結果は図１に示す。シアリルルイス８−ＯＲを注射したマウスは 、対照マウスに比較してフットパット膨張か最も低下した。シアリルルイス１− ＯＲ、シアリルルイス０−ＯＲ、ルイス”−０Ｒ１およびシアリルＬａｃＮＡｃ −ＯＲ（構造はシアリル−ルイス′に関連）を注射したマウスも、対照マウスの フットバット膨張に比較して膨張の低下を示した。図２に示すように、ＩＭまた はＩＫ溝構造ないα−シアリル−ＯＲ１β−ノアリル−ＯＲまたは「Ｔ」三糖［ βＧａ　ｌ　（１→３）　αＧｌ　ｃＮＡｃ−ＯＲＩは、本質的に対照マウスで 観察されたフットパット膨張の範囲であった。 追加のオリゴ糖配糖体は、２０μｇのＯＶΔ抗原を抗原投与に用いて、感作した 哺乳動物の抗原誘発炎症（ＤＴＨ応答）を低下する能力に関して、上述の方法で 試験した。これら実験の結果は以下に示される抗原　化合物　投与時間°　％炎 症低トー５０ＶＡＡ５時間　〜７６ １　抗原投与後の時間 ５　実施例Ｈにより測定した低下０６ 化合物Ａ＝ｃｚＮｅｕ５Ａｃ　（２＋３）βＧａｌ　（１−４）βＧｌｃＮＡｃ （１→３）βＧａ　Ｉ　（１−４）［ａ−Ｉ、−Ｆｕｃ　（１−３）］　βＧＩ ｃＮＡｃ−ＯＲ（ＣＤ−６５） 平行分析の中で、１００μｇの数種の１型または１１型核構造を有する血液型決 定基に関連するオリゴ糖配糖体を、感作した哺乳動物の抗原誘発炎症（ＤＴＨ応 答）を低下させる能力に関して、２ＯＲｇのＯＶＡ抗原を抗原投与に用いて上述 の方法で試験した。これらオリゴ糖配糖体の投与は抗原投与から５時間後に行わ れた。これら実験結果は以下に示す 化合物Ｃ＝ノアリルルイス”　−ＯＲ（ａＮｅｕ５Ａｃ　（２−＋３）βＧａ１ （１−４）　−［ａ−Ｌ−Ｆｕｃ　（１−３）　］−βＧＩ　ｃＮＡｃ−ＯＲ） 化合物Ｄ＝ＳＯ，−ルイス’−０Ｒ（ルイス”　−ＯＲのがラクト−スの３位に 硫酸塩置換基かある） 化合物Ｅ＝ＳＯ，−ＬａｃＮＡｃ−ＯＲ（ＬａｃＮＡｃ−ＯＲのガラクトースの ３位に硫酸塩置換基かある） 化合物Ｆ−シアリルルイスＡ−ＯＲ（ａＮｅｕ５Ａｃ　（２−＋３）βＧａ１（ ＋−３）　−［ａ−Ｌ−Ｆｕｃ　（１−４）　］−βＧＩ　ｃＮＡｃ−ＯＲ）化 合物Ｃ＝ＳＯ，−ルイスＡ−ＯＲ（ルイス’　−ＯＲのガラクトースの３位に硫 酸塩置換基かある） 化合物Ｈ＝シアリルルイスＣ−０Ｒ（αＮｅｕ５Ａｃ　（２→３）βＧａ１（＋ −３）βＧ　ｌ　ｃＮＡｃ　−ＯＲ’）化合物１＝ＳＯ，−ルイス’−０Ｒ（ル イス’　−ＯＲのガラクトースの３位に硫酸Ｉｊ！置換基かある） 化合物Ｊ＝シアリルＬａｃＮＡｃ−ＯＲ（ｃｚＮｅｕ５Ａｃ　（２−＋３）βＧ ａ１（１−４）βＧＩｃＮＡｃ−ＯＲ）　（〜純度７０９６、約３０９６の３− 硫酸塩および２，３−ジ硫酸塩を含ｆｆする） Ｒ＝−（ＣＨ，）、Ｃｏ□ＣＨ３ ”　実施例Ｈによる低−ト９６ 別の平行分析において、１００μｇの数種の■型または■１型核構造を有する血 液型決定基に関連するオリゴ糖配糖体を、感作した哺乳動物の抗原誘発炎症（Ｄ ＴＨ応答）を低下させる能力に関して、ｌＯμｇのＯＶＡ抗原を抗原投与に用い て−上述の方法で試験した。これらオリゴ糖配糖体の投１ｊは、抗原投与から５ 時間後に行われた。これら実験結果は以Ｆに示す：化合物Ａ＝ＣＤ−６５ 化合物Ｃ＝シアリルルイス’　−ＯＲ（αＮｅｕ５Ａｃ　（２＋３）βＱａｌ（ １−４）　−［ａ　−Ｌ−Ｆｕｃ　（１−３）　］−βＧＩ　ｃＮＡｃ−ＯＲ） 化合物Ｄ＝ＳＯ＊−ルイス”−０Ｒ（ルイス１−ＯＲのガラクトースの３位に硫 酸塩置換基がある） 化合物Ｆ＝シアリルルイスＡ−ＯＲ（ａＮｅｕ５Ａｃ　（２−３）βＧａ１（１ −３）　−［ａ−Ｌ−Ｆ’ｕｃ　（１→４）　］−βＧＩ　ｃＮＡｃ−ＯＲ）化 合物に＝２　Ｎ３−シアリルルイス’　−ＯＲ（αＮｅｕ５Ａｃ　（２−＋３） βＧａ　］　（１−４）−［ａ−Ｌ−Ｆｕｃ　（１−３）］−βＧＩ　ｃＮｓ　 ＯＲ）化合物Ｌ＝２−Ｎ、−シアリルルイス’　−ＯＲ（αＮｅｕ５Ａｃ　（２ →３）βＧａ　Ｉ　（１−”３）　−［ａ−Ｌ−Ｆｕｃ　（ｌ→４）　］−βＧ 　ｌ　ｃ　Ｎ＊　ＯＲ）化合物Ｍ＝２　ＮＨ２：／アリルルイス”　−ＯＲ（ｃ ｒＮｅｕ５Ａｃ　（２−＝３）βＧａ　Ｉ　（１→４）−［ａ−Ｌ−Ｆｕｃ　（ １→３）］−βＧＩ　ＣＮＨ２０Ｒ）化合物Ｎ＝２−ＮＨ，−シアリルルイス’ 　−ＯＲ（αＮｅｕ５Ａｃ　（２−＝３）βＧａ　Ｉ　（１−”３）−［ａ−Ｌ −Ｆｕｃ　（ｌ→４）］−βＧ　Ｉ　ｃ　Ｎ１（２ＯＲ）Ｒ＝−（ＣＨ，）、Ｃ ｏ、ＣＨ。 １　実施例Ｈによる低下９６ 上記結果は、Ｉ型または１］型核構造をイｆする血液型決定基に関連するオリゴ 糖配糖体は、感作した哺乳動物の抗原誘発炎症を低下させるのに有効であること を示す。 実施例Ｂ　ＤＴＨ炎症応答抑制の用爪依γγ性上記実施例Ａて記載したように６ 肝のマウスに、Ｌｌｌｌ−３一層タンパクで一次免疫および抗原投与を行った。 抗原投与から５時間後、群に１０．２５．５０．７５、または１００μｇのノア リルルイス’　−ＯＲ（Ｒ＝−（ＣＨ２）。 Ｃｏ、ＣＨ，）を１打する＋００μｍの溶液またはＰＢＳを静脈注射した。各投 与般■のＤＴＨ応答は抗原投与から２４時間後に測定し、図２に示しである。Ｐ ＢＳまたは１ＯＲｇのシアリルルイス１投与肝では本質的にＰＢＳ−処理対照と 同一範囲のフットパット膨張てあったか、２５．５ｏ、７５または＋００ｔ１ｇ のシアリルルイス１投与肝ではフットパット膨張の低下か示された（それぞれＰ ＢＳ対照の７８．６９．７５および５６９６）。 実施例ＣＬｌｌｌ−Ｓ一層タンパクに対する抗体応答の抑制の欠如−次免疫から ２週間後（抗原投与から１週間）に、Ｌｌｌｌ−３一層タンパクにｒｔする二次 抗体Ｌコー答を、免疫し、抗原投与し、そしてシアリルルイス”　−ＯＲ、シア リルルイスＡ−ＯＲ、ノアリルルイス’−ＯＲ、ルイス”−０Ｒ１およびシアリ ルＬａｃＮＡｃ−ＯＲ（Ｉ摩または１１型基本骨格構造を有する血液型決定基に 関連するオリゴ糖配糖体）を静脈投与したマウスの８ｔがらの血清について、測 定した。 ノ才う（Ｚｉｏｌａ）ら７０か記載したように抗体価は固相酵素免疫測定法（Ｅ ＩＡ）を用いて測定した。簡ｉ白こ述へると、マギンソープ（Ｍａｘｉｓｏｒｂ ）Ｅ　Ｉ　Ａプレートのｌウェルにつき２μｇのＬｌｌｌ−３一層タンパクを添 加した。室温で一晩インキユベートした後、ウェルを反転させて未吸着の抗原を 除去した。次に各ウェルに、２！’６　（ｗ／ｖ）のウシ血清アルブミンおよび ２９６　（ｖ／ｖ）のツイーン２０を１打するリン酸緩衝化生理食塩水で調製し た、２００μｍの種々の希釈のマウスの血清を加えた。室温で■時間ｉ＆、ウェ ルを反転させて溶液を除去し、ウェルを、室温で蒸留脱イオン水て４回洗浄した 。次に西洋ワサビペルオキシダーゼに結合した、ヤギ抗マウス免疫グロブリン抗 体を各ウェルに添加した（リン酸緩衝化生理食塩水／アルブミン／ツイーン２０ て調製したｌ　：　２０００希釈の２００μｍの溶液）。室温で１時間後、ウェ ルは再度反転し洗浄し、そして各ウェルに２００μｌの酵素基質溶液（０，１Ｍ クエン酸ナトリウム／リン酸緩衝液で新たに溶解した３ｍｇ／ｍｌの０−フェニ レンジアミンおよび０　、　０２９６（ｖ／ｖ）の過酸化水素、ｐＨ５，５）を 加えた。室温暗所で酵素反応が３０分間進行した後、５０μｍの２Ｎ塩酸を各ウ ェルに添加し、ＣＤ４．。値を測定した。 図３は、Ｌｌｌｌで免疫化および抗原投与し、シアリルルイス’−ＯＲ，シアリ ルルイス’−ＯＲ、ルイス８−ＯＲ、シアリルルイス’−０Ｒ１およびシアリル ＬａｃＮＡｃ−ＯＲで処理し、上記実施例へに記載したようにフットバット張て 試験したマウスの、６段階の希釈系列の１１１［清で測定した抗体価を図式的に 説明する。図３に示す希釈曲線は、Ｌｌｌｌ−Ｓ一層タンパクに対する抗体の発 生はこれらの化合物による処理により阻害されないか、あるいは影響されないこ とを示す。 実施例Ｄ　抗原投与に対する化合物Ｉｌｌの投与時期Ａ　実施例りのこの部分の 目的は、Ｉ型またはＩＩ型型槽構造有する血液型決定基に関連するオリゴ糖配糖 体を、抗原誘発炎症を低下させるために感作した哺乳動物に予防的にまたはｒａ 療的に投与できるかどうかを決定することであった。 ■体的には、実施例Ａに記載したようにＬｌｌｌ−Ｓ−１１ｔタンパつて免疫し 抗原投与したＢａｌｂ／ｃマウスの群に、ＰＢＳ　（１００μ＋）中のｌｏＯμ ｇの：／７’Ｊルルイスｘ　ＯＲ　［Ｒ＝　（ＣＨｔ　）ｓ　Ｃｏｔ　ＣＨｉ　 ］溶液を抗原投与に対して異なる時点て注射した。一つの群には抗原投与の１時 間前にノアリルルイス８−ＯＲを投与し，別のＩＴには、抗原投与の直後、第３ 群は抗原投与から１時問渣、ぞして第４８１は抗原投−！ｊから５時間後に投与 した。抗原投与直後にＰＢＳ（１００μＬ）を投与した対照Ｉ！ｌも設けた。 この実験結果は図４に示す。抗原投ｔｊの１時間ｉｉｉ？または直後にシアリル ルイス１−ＯＲを投与したマウスては、Ｄ　Ｔ　Ｔ（応答は抑制されなかった。 抗原投与の１時間後または５時間後にシアリルルイス”−ＯＲを投与した群は、 ＰＢＳ処理対照に見られるフソトパソ１−膨張の６８または５９９６を示した。 従って、このデータは、哺乳動物の抗原誘発炎症を低下させるには、Ｉ撃または ＩＩ型型槽構造有するＩｆＩＬ液型決定型決定に関連するオリゴ糖配糖体を、免 疫応答の開始以降に投与することか必要だということを示している。 Ｂ　実施例りのこの部分の目的は、抗原誘発炎症を低下させるために、■型また はＩＩ型型溝構造（ｆする血液型決定基に関連するオリゴ糖配糖体を、感作した 哺乳動物に治療的にとの時点て投Ｌｊできるかを決定することであった。この点 に関し５て、この実験に用いた抗原誘発炎症は、抗原暴露から２４時間後に最大 の炎症を！ｊえることか知られているマウスのＤＴＨｌｊ、答である。 具体的には、実施例へに記載したと同様の方法てＯＶ△抗原て免疫し抗原投与し たＢａ１ｂ／ｃマウスの群に、抗原投与に対して異なる時点に、ＰＢＳ（１００ μｌ）中のマウス当り２００μｇのシアリルルイス”　−ＯＲ［Ｒ＝−（ＣＨ， ）、ＣＯ，ＣＨＩ　］溶液を注射した。一つの肝のマウスには抗原投与の５時間 後にシアリルルイス８−ＯＲを投与し、別の群には、抗原投与の１０時間後、第 ３肝は抗原投１４から１２時間後、第４１１は抗原投与から１５時間後、第５肝 は抗原投与から１８時間後、そして第６ｎＴは抗原投与から２４時間後に投与し 、抗原投与の直後にＰＢＳ（１００μＬ）を投与した対照１１も設けた。 この実験の結果は図１５Ａ、１５Ｂ、および１６に示す。具体的には、図１５Ａ は、ＯＶＡ抗原投与に対するＤＴＨ応答から発生するフットパットを説明する。 この図に説明された結果は図１５Ｂに図式的に表し、ＯＶＡ抗原で抗原投与しＰ ＢＳて処理したマウスか炎症の増加をきたすのに比較して、シアリルルイス８− ＯＲかマウスに投与される時点て炎症の低下か発生することを示す。 具体的には、図１６は、抗原投与から１２時間後またはそれ以前にオリゴ糖配糖 体をマウスに投与する時のみ、著しい低下（＞２０９６の炎症低下）か生しるこ とを説明している。シアリルルイス１−ＯＲか品用ｆｆｌ（２００μｇ）である こと、および比較的炎症低下か小さいことから、１５時間後の約１２９６の低Ｆ は、意味かあるとは弯えられない。１８および２４時間後の低Ｆは１０９６以下 であった。 マウスの最大のＤＴＨ炎症は抗原投与から約２４時間後に生しるため、実施例り のこの部分の結果は、抗原投与に対する炎症ＬＬ：答が最大に達するのに要する 時間のＴ分経過時またはそれ以１１１１に、Ｉ型または！１！Ｓ’！核構造を有 する血液型決定基に関連するオリゴ糖配糖体を、哺乳動物に投与しなけれはなら ないごどを示す。 図１６は抗原投与したマウスの４８時間後の残存する炎症の程度を示す。この占 ，に関して、ＤＴ■■応答から発生する炎；１１−は一般に抗原投１．ｊから７ ２時間後には終了することにＺ１意すべきである。 上記実施例へ−〇をー・まとめに考えると、感作した哺乳動物の抗原誘発炎症を 作動に低Ｆさせるためには、ＩヤまたはＩＩ型型溝構造有する血液３ツ決定基に 関連する口効量のオリゴ糖配糖体ての処理は、抗原に対する哺乳動物の二次免疫 応答の開始後であって、抗原ｆ２１ｊに対する炎症応答か最大に達するのに要す る時間の゛１′分経過時またはそれ以前になされなけれはならないことが、確立 されている。 実施例Ｅ　抗［Ｑ投与から６、８、またはＩＯ週間後のＤＴＨ炎症応答の抑制の 持続 ！　実施例へのシアリルルイス”−ＯＲ、シアリルルイスＡ−ＯＲ、ルイス１− ＯＲ、シアリルルイスｃ−ＯＲ、およびシアリルＬａｃＮＡｃ　−ＯＲで処理し た同一のマウスの群に、一次免疫から８週間後にＬｌｌｌ−Ｓ一層タンパクを再 び抗原投与した。未処理対照は通常程度のフットパット全ての肝はフッドパ・川 −膨張の低下を示した。具体的には、対照マウスの膨張程度に比較した処理マウ スの膨張１７度は次のとおりてあった　シアリルルイス１−ＯＲ、５９９６．ル イス’−ＯＲ、６９９６．シアリルＬａｃＮＡｃ−ＯＲ、７８０６：　ン７’Ｊ ル４イス’−ＯＲ，７８９６；　および）７’Ｊ／Ｌ／ＬイスＡ−ＯＲ，６９９ ６（図５参照） 最−刀の抗原投！ｉ（−次免疫から１週間後）から５時間後に与えられたシアリ ルルイス’−ＯＲ、シアリルルイスＡ−ＯＲ、ルイス”−ＯＲ、シアリルルイス ０−ＯＲ、およびシアリルＬａｃＮＡｃ−ＯＲの抗炎症効果は、−次免疫から８ 週間後にはいくぶん弱くなった．しカル、ルイス”　−ＯＲ　（シアリル基を含 ｆ丁しない唯一の誘導体）の２ＪＩ里は、１１ｉ　１１’Ｌ：ＩＩ＋ｊ投Ｌｉの 時にも最すノの抗原投与の時と同しように強かった。 感作したマウスの抗原誘発炎症の抑制を与えることに加えて、」−記データは、 本発明のＩヤまたはＩＫ咳槽構造ａする血液型決定基に関連するオリゴ糖配糖体 による処理は、同−抗ＩＩ；（により後の抗原投（ｉに対する寛容もｔｙえるこ とを示している。 １１、シアリルルイス”　−ＯＲ　（ｌ　Ｏｕｇ、２５μｇ、５　ｏμｇ、７５ μｇ、１００μｇ）、またはαまたはβ−シアリル−ＯＲ　（Ｒ＝８−メトキノ カルボニルオクチル）（１００μｇ）または１００μｇのＴ−三糖−ＯＲ（Ｒ＝ ８−メトキノカルボニルオクチル）で実施例日で処理したマウスと同一のｍＶに 、−次免疫から６週間後に再び抗原を投与した。最初の抗原投与から５時間後に α−シアリル−ＯＲ、βーノ了りルーＯＲまたはＴ−三糖−ＯＲで処理したマウ スては、ＰＢＳ処理灯照と同様のフットパット アリルルイス１−ＯＲで処理したマウスは、対照マウスの示した膨張の９０から ６５０６の範囲のフットパット １１１、実施例Ｃて最初の抗原投−りの１時間０１１、または５時間１絽こ１０ ０μｇのシアリルルイス’−ＯＲで処理したマウスと同一の群に、−次免疫から １０週間後に再び抗原を投！ｊした。実験誤差の範囲内で、抗原投与の前または 少し後に処理したマウスのフｙｌ・バット膨張はＰＢＳ処理マウスと同一であっ たか、元々抗原投４ｊの１時間または５時間後に処理したマウスは、ＰＢＳ処理 した対照で観察された値のわずか約６６０６を示した（図７）。 この実鴇例の結果は図５−７に示し、これらはＩ型またはｌＩＶ核構造を有する 血液’ｕ′！決定基に関連するオリゴ糖配糖体は、処理から少なくとも１０週間 同−抗１東ての抗原投与に対する寛容を与えることを示す。 追！１１１のオリゴ糖配糖体を、感作した哺乳動物の抗原誘発炎症（ＤＴＨ応答 ）に’（ｆする寛容を誘導する能力について上述の方法で試験した。これら実験 結果は以下に示す 抗原　化合物　投（ｊ時間°　抗原再投与の週　炎症低下６６ｂＬｌｌＩＡ５時 間　Ｉ＋　４０９６ ＳＣ　８　５時間　６　５８９６ ＳＣ＝　２０７１ｇのスーパーギヤリア（ＳｕｐｅｒＣａｒｒｉｅｒ）Ｌｌｌｌ −Ｉ（１７１ｇのＬＩｌｉＳ一層タンパク化合物Ａ＝αＮｅｕ５Ａｃ　（２−＋ ３）βＧａｌ　（Ｉ−４）βＧＩｃＮＡｃ（Ｉ→３）βＧａｌ　（１−４）ｒａ −Ｌ−Ｆｕｃ　（１−３）］βＧＩｃＮＡｃ−ＯＲ（ＣＤ−６５） 化合物Ｂ二ＳＯ３−ルイスに一ＯＲ（ルイス’　−ＯＲのがラフ１〜−スの３位 に硫酸塩置換基かある） 実施例Ｆ　化合物ＩＩＩの８−メトキシカルボ：、ルオクチル配糖体により誘導 される抑制に及はすノクロホスファミト処理の効果文献にはサブレノザー細胞は マウスのノクロホスファミト（Ｃ　Ｐ）処理によって除Ｊ（できると記載されて きた。ＣＰが、シアリルルイス０の８−メトギンカルボニルオクチル配糖体に誘 導される細胞性炎症応答の抑制を調節できるが否かを決定する実験を行った。 具体的には、この実施例では、上述のと同様な方法でシアリルルイス”　−ＯＲ （Ｒ＝８−メトキノカルボニルオクチル）での処理によってＤＴＨ炎症応答に対 してあらかしめ抑制し寛容化した免疫マウスを用いる。免疫の１４０ｉ＆，マウ スに２　０　ｏｍｇ／ｋｇのＣＰを注射し、次に免疫の１７日後にマウスに２０ μｇのＬｌｌｌ−Ｓ一層タンパク抗原を抗原投与した。抗原投与から２４時間後 、フッドパ、・１・膨張の増加を測定（ｍｍ−’）することで、ＤＴＨ応答の範 囲を確認した。 この実験結果は図８に示され、Ｌｌｌｌ−Ｓ一層タンパク抗原での抗原投与前に ＣＰを注射すると、あらかしめシアリルルイス”−ＯＲで免疫抑制処理をしたマ ウスのＤＴＨ炎症応答を復帰させることを示している。これら結果はこのオリゴ 糖配糖体に誘導される寛容は、ＣＰ感受性ザブレッサーＴ−細胞に媒介されるこ とを示唆している。 実施例Ｇ　シアリルルイス１０８−メトギ刀ノルボニルオクチル配糖体に誘導さ れる抑制効果に及ぼす抗原推進（ｄｒｉｖｉｎｇ）　ＤＴＨ炎症性応答の影響コ ノ実施例は、ノＴ’Ｊルルイス’　ＯＲ［Ｒ＝　（ＣＨ２）＋　Ｃｏｔ　ＣＨＩ 　］に誘導される抑制効果に及はす抗原推進（ｄｒｉｖｉｎｇ）　ＤＴＨ炎症性 応答の影響を評価する。マウスは、実施例Ａに概説されるようにＳ一層Ｌｌｌｌ 、４１純庖疹ウィルスＩ　（ＨＳＶ　Ｉ）およびカチオン化つノ血ｉ＋ｆｆアル ブミン（スーパーギヤリア（ＳｕｐｅｒＣａｒｒｉｅｒ　”）　、ビ了−ス（Ｐ ｉｅｒｃｅ）、ロックフォード（Ｒｏｃｋｆｏｒｄ）、イリノイ州）で免疫した 。図９に示すように、炎症性応答を誘導するのに使用される抗原の性質は、シア リルルイス１−ＯＲかこの応答を制御する能力に影響しないよってある。 実施例Ｈ抗原による免疫または抗原投与に対するシアリルルイス１投与のタイミ ングの影響 Ｂａ１ｂ／ｃメスマウスの４昨を、実施例Ａ記載に下記の修飾をした方法でＨ３ Ｖ抗原で一次免疫および抗原投与したり第１ＪＩＴは２０ｇｇ／マウスの不活Ｆ ｌ化■ヘゲ中純庖疹ウィルス（ＨＳＶ）で免疫し、次に７［：ｌｉ＆２０μｇの ＨＳＶて抗原投与した。 ２）第２群は２０ｇｇ／マウスのＨＳＶて免疫し、次に７日後２０μｇ／マウス のＨＳＶて抗原投与し、次に１００μｇ／マウスのシアリルルイス”　−ＯＲ［ Ｒ＝−（ＣＨｔ　）、Ｃｏ、ＣＨ，］を抗原投与から５時間後に静脈注射した。 ３）第３群は２０ｇｇ／マウスのＩ］ｓＶて免疫し、１００μ＋（７）ＰＢＳ中 （７）１００μｇ／マウスのシアリルルイス１−ＯＲを同一部位に静脈注射した 。７０ｒ＆、マウスに２０ｇｇ／マウスのＨ３Ｖ単体てフッｉ・パッド抗原投与 した。 ４）第４群のマウスは１００μＩのＰＢＳで免疫し、７日？＆２０μｇ／マウス のＨＳＶて抗原投与した。これは抗原投与の間フ引・パットに引き起こした物理 的傷害により生しるフットパッド膨張のパックグラウンドレベルを与える。 ＤＴＨ炎症りこ：答の程度は、抗原投与から２４時間後にミツトヨ・エンジニア リング（Ｍｉｔｕｔｏｙｏ　Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ）のマイクロメーターでフ ットパットことによって測定した。 図１０は観察されたフットパット この実施例および実施例しについて低下パーセントは以下の式によって計算した ： ＋００　−　１００　Ｘ　処理したマウスの膨張　−　ｂｋｇ膨張未処理マウス の膨張　−　ｂｋｇ膨張 「処理したマウス」は、抗原に追加して化合物投与を受けたマウスである。 「未処理マウスＪは化合物投与を受けないマウスである。バックグラウンド（ｂ ｋｇ）　膨張は、抗原または化合物なしのＰＢＳ単体で免疫し、抗原で抗原投与 したマウスで観察される膨張のレベルである。 シアリルルイス′−ＯＲをＨＳＶでの免疫と同時に同一部位に注射したマウスは 、ＨＳＶて免疫しＨＳＶて抗原投与したマウスに比較して、フットパッド膨張の ５０９６低下を示した。ＨＳＶでフットパットルイス０−ＯＲを注射したマウス は、ＨＳＶて免疫しＨＳＶで抗原投与したマウスに比較してフットパッド膨張の 約８６．７９６低下を示した。 この実施例の結果は、ＩＬ！またはＩｎｎ槽構造有する血液型決定基に関連する オリゴ糖配糖体が、抗原投与の５時間後にマウスに与えられるならば、抗原に対 する免疫応答を抑制てきるということを示すｎｉｉ記の実施例を支持する。この 実施例は、免疫と同時にマウスに与えられる１型またはｌＩｕＦＡＩ造を有する 血液型決定基に関連するオリゴ糖配糖体か、抗原に対する免疫系の感作を阻害す ることがてきることをも示す。いかなる理論にも制限されることなく、これらの 化合物は、Ｔヘルパー細胞か抗原提供細胞を認識する能力を妨害し、免疫系か抗 原に教育されるのを阻害することか企図される。 実施例Ｉ　ＨＳＶに対する抗体応答に及はすシアリルＬｅＸの効果４群のマウス を実施例Ｈに記載されたように処理した。ＨＳＶ抗原に対する二次抗体応答は、 −次免疫から２週間後（抗原投与から１週間後）に、実施例Ｈに記載した群のマ ウスから得た血清て測定した。 抗体価は、ＨＳＶ抗原かＬｌｌｌ−Ｓ一層タンパクの代わりに使われたほかは実 施例Ｃに記載されたとおりに測定した。 図１１は、実施例Ｈに記載されたように免疫した群のマウスからの６段階の希釈 系列の血清で測定された抗体価を、図式的に説明する。最初の２群の結果はＬｌ ｌｌ−Ｓ一層タンパク抗原の実施例Ｃて得られた結果と相関した。抗原投与の５ 時間後にシアリルルイス８−ＯＲでマウスを処理しても、抗体応答に影響しなか った。しカル、免疫時にシアリルルイス”−ＯＲで処理したマウスは、ＨＳＶ抗 原に対する抗体し仁、答の著しい低下を示した。いかなる理論にも制限されるこ となく、上記結果は、■型またはＩＩ！！２該構造を有する血液型決定基に関連 するオリゴ糖配糖体（例えば、シアリルルイス”−ＯＲ）か、抗体応答に関係す るヘルパーＴ細胞を妨害して、免疫系か抗原に関して教育されるのを阻害すると いう事実により、説明される。 実施例ＪＳＩｅＸ免疫抑制の誘導に及ぼすンタロホスファミト処理の影響」二足 実施例Ｆて記載したように、サプレッサー細胞は、シクロホスファミド゛（Ｃ　 Ｐ）てマウスを処理することにより除去することかできる。具体的には、この実 施例は、あらかしめＬＩＩＩＳ一層タンパク抗原での処理によってＤＴＨ炎症１ 忘答を抑制し、寛容化した免疫マウスを使用する。１む１のＢａｌｂ／Ｃマウス を２０ｇｇ／マウスのＬＩ　Ｉ　Ｉｓ一層タンパクで免疫した。７日後、この肝 のマウスは２０ｇｇのＬＩＩＩＳ一層タンパつてフッＩ・パット抗原投！フした 。第２肝のマウスは２０ｇｇのＬｌｌｌタンパクおよび１００μｇのシアリルル イス１−ＯＲ　［Ｒ＝−　（ＣＦ−（２　）、Ｃｏｔ　ＣＩ（、］て同一部位に 免疫し、７日後２０μｇのＬ　Ｉ　Ｉ　ｌでフットバット抗原投与した。第３群 のマウスは、免疫の２日前に２　（］　Ｏｍｇ／ｋｇのＣＰを腹腔内注射した。 次にこの群は、２肝に関して記載されたように免疫して抗原投与した。第４群の マウスは、２０ｇｇ／マウスのＬｌｌＩおよび１００１１ｇ／マウスのＴ−三糖 −〇Ｒで同一部位に免疫して、第１群に関して記載したようにフッ；・パッド抗 原投与した。第５群は１００μｍのＰＢＳて免疫して、次に第」肝に関して記載 されたようにフットバット抗原投与した。 結果は図１２に示した。これらの結果は、Ｉ型またはＩＩ型型槽構造有する血液 型決定基に関連するオリゴ糖配糖（４（例えば、〕了リすルイスｆ−ＯＲ）は抗 原に対する免疫応答を抑制できるという、実施例［−１で記載された結果を追認 する。 さらにこの実施例は、免疫時にこれらの化合物で処理することによる免疫応答の 抑制が、免疫の■ｉｆにノクロホスファミトて処理することにより除去しうろこ とを示し、これはノクロホスファミ１〜感受性サプレッサーＴ−細胞の関与を示 唆している。 実施例Ｋ　ＯＶＡにより誘導されるＤＴＨ炎症応答抑制に及ぼすフットバッド抗 原投ｌｉ後の化合物投！う部位の影響 雌のＢａｌｂ／ｃマウスの群（８−１　２週齢、体重約２０−２５ｇ）を、１０ ０μｌのＰＢＳ　（リン酸緩衝化生理食塩水）中の、１００μｇのＯＶＡ　（ア ルブミン、鶏卵、シグマ、セントルイス、ミズーリ州）および２０ｇｇのＤＤＡ 　（臭化ジメチルジオクタシルアンモニウム、イーストマン・コダック、ロチニ スター、ニューヨーク州）で、マウスの後肢筋への筋肉内投与で免疫した。 免疫から７１１後、各ＪＩＴのマウスに２０μｍのＰＢＳ中の２０ｇｇのＯＶＡ でフン１−バット抗原投与した。生した炎症性フッ１−パット膨張は、抗原投与 から２４時間後にミツトヨ・エンジニアリング（Ｍｉｔｕｔｏｙｏ　Ｅｎｇｉｎ ｅｅｒｉｎｇ＞のマイクロメーターで測定した。 Ｉ型またはＩＩ型種核構造有する唾液型決定基に関連するオリゴ糖配糖体の投与 方法か炎症性ＤＴＨ応答の抑制に及は゛す効果を評価するために、シアリルルイ ス”　−ＯＲ　［Ｒ＝−　（Ｃ）（２　）ｓ　Ｃｏｔ　ＣＨｓ　］を異なる経路 で投与した。あるｎＴのマウスには、フットバット抗原投与から５時間後に２０ ０μｌのＰＢＳ中の１００μｇ／マウスのシアリルルイス１−ＯＲの静１派注射 、または２０μｍのＰＢＳ中の１００μｇ／マウスのシアリルルイス”　−ＯＲ の鼻腔内投与（この操作の時マウスを軽く麻酔した）のいずれかを行った。 化合物を鼻腔内投与する方法は、スミス（Ｓｍｉｔｈ）ら７１に記載されており 、これは参考のため引用されている。簡単に述へると、マウスはメトフエイン（ Ｍｅｔｏｆａｎｅ）　（ピントマンームウア社（Ｐｉｔｍａｎ−Ｍｏｏｒｅ　Ｌ ｔｄ．　）、ミシソーガ（Ｍｉｓｓｉｓｓａｕｇａ）　、オンタリオ、カナダ） で麻酔し、そして５０μｍ滴の化合物をマウスの鼻孔上に置き、吸入させる。対 照肝は未処理のまま、または２００μｌのＰＢＳを静脈注射て与え、または５０ μｍのＰＢＳをｎ−腔内投与て与える。この実験結果は図１３に示される。この 結果は、抗原投与から５時間後に、■型または［１堅Ｆｆｉ構造を仔する血液型 決定基に関連するオリゴ糖配糖体を鼻腔内投与すると、免疫応答抑制を起こすこ とを示している。 実施例Ｌ　ＯＶＡにより誘導されるＤＴＨ炎症応答抑制のフットパッド抗原投与 漫の投与時間依ｒｒ性 雌のＢａ１ｂ／ｃマウスの群（８−１２週齢、体重約２０−２５ｇ）に、１゜Ｏ μＩのＰＢＳ　（リン酸緩衝化生理食塩水）中の２０ｇｇのＤＤＡを、マウスの 後肢筋へ筋肉内投与して免疫した。免疫から７［１後、マウスに２０μｌのＰＢ Ｓ中の２０ｇｇのＯＶＡをフットパット ５、７または１０時間後、マウスに２００μｍのＰＢＳ中の１００μｇ／マウス ツノアリルルイス”　−ＯＲ　［Ｒ＝−　（ＣＨ２　）＊　ＣＯ２　Ｃｌｌｉ　 ］または２００μｌのＰＢＳのみの静に？ｌ射、あるいは５０μｌのＰＢＳ中の １００μｇ／マウスのシアリルルイス１＝ＯＲまたは５０μｍのＰＢＳのみの体 腔内投与（この操作の時マウスを軽く麻酔した）のいずれかを行った。炎症性フ ットパッド膨張は、２４時間後ミツトヨ’工７シニアリング（Ｍｉｔｕｊｏｙｏ 　Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ）のマイクロメーターで測定した。 ＴＱ＋４はこの実験結束を示す。具体的には、ＯＶＡ抗原投与から７時間ｉ＆　 （鼻睦内投！ｊおよび静脈ｔ１射の両方とも）にシアリルルイス８−ＯＲを投与 したものは、実施例１■に記載された式を用いて３１すすると、陽性χ１照マウ スに比較して７０　−　７　４　０６フノトバノト 後にシアリルルイス１−ＯＲを静脈注射および弁腔内投与したものは、それぞれ ６３０６および５４９６膨張の低′Ｆ−を示した。フットバット抗原投与から１ ０時間後にシアリルルイス”−ＯＲを静脈ｔ１テ射および体腔内投与したものは 、それぞれ５８９６および３２０６膨張の低下を示した。 上記実施例Ａ−Ｌのデータは、抗原に対する免疫応答の治療および感作した哺乳 動物（マウス）の後のその抗原による抗原投与に対する寛容性の誘導における、 １型またはＩＩＫ２核構造を任する血液へ２決定基に関連するオリゴ糖配糖体の 有効性を確立している。マウスの免疫系はヒ）・の免疫系の良いモデルだという 事実から、ぞのようなオリゴ糖配糖体はヒトの免疫ＬＬ；答を治療することにも 有効であろう。 上記実施例で記載された方法に従って、他の１型またはＩｌｌ型槽構造存する血 液型決定基に関連するオリゴ糖配糖体は、これら実施例に記載されたオリゴ糖配 糖体の代わりに使用するだけて、抗原に対する細胞性免疫応答を抑制するために 使用することかできるだろう。 合成 以下−の実施例１−５３は、多くのＩ型または１］型核構造を有する血液型決定 基に関連するオリゴ糖配糖体の合成を説明する。　゛実施例Ｉ−２４は、図１７ がら２６に記載されるように、■型または１１型咳構造をイ１する血液型決定基 に関連するオリゴ糖配糖体を調製するのに使用される単糖、三糖、および三糖の 合成を説明する。 実施例１　ベンジル−２−〇−へレゾイル−４．６−０ーベンジリデン−３−０ −クロロアセチル−β−Ｄ−チオガラクトピラノシド（化合物３１）の合成還流 濃縮器イ１の２０Ｌの撹利反応器、発熱マントル（ｍａｎｔｌｅ）およびＩＬの 添加ロート（ａｄｄｉｔｉｏｎ　ｆｕｎｎｅｌ）を乾燥させる。この反応器にＩ ＯＬのジクロロエタンを充填する。反応２Ｋを撹拌し始め、１ｋｇのＤ−ガラク トースおよび５００ｇの無水酢酸す）・リウムをジクロロエタン＋ｌ＋ｌこ充填 する。このスラリーを加熱し還流させる。この反応混合物に、４Ｌの無水酢酸を 反応器上のＩＬの添加ロートを用いて滴下して加える。２−４時間の添加時間の 間還流を維持する。撹拌と還流状聾ての混合物の加熱を−・晩続ける。 反Ｌコニ終了（ｔ．　１．　Ｃ．によって決定される）後、反応器の加熱を止め ２５０ｍしの水を添加ロー１・を用いてゆっくり滴下して加える。この反応は非 常に激しいか、水をゆっくり添加することで制御される。反応物を１−２時間撹 拌する。５０Ｌの撹拌反応器に３ＯＬの冷水を充填して、撹拌を開始する。２０ Ｌの反応器の内容物を２ＯＬのポリエチレンバケツにあけて、５０Ｌの反応器中 の撹拌氷水に注ぐ。この混合物を２０分間撹拌する。下層の有機層を２　０　１ ．、のポリエチレンハケツにあける。５０Ｌの反応器中の水層をさらに５Ｌのジ クロロメタンで抽出する。ジクロロメタン抽出物を最初のｆＴｆｉ層と混合する 。水層をポリエチレンバケツにあけ、水性廃物として廃棄する。 混合した有機層を５０Ｌの反応器に戻し、５Ｌ部の氷水で１０分間、２回抽出す る。有機層を清浄な２ＯＬのポリエチレンバケツにあける。水層を廃棄して、有 機層を５ＯＬの反応器に戻して、撹拌し、そしてＩｋｇの無水硫酸すトリウムを １川える。ｉ２時間撹拌して、次に溶液を清浄な２０Ｌのポリエチレンバケツに あけ、４Ｌの真空濾過セット［またはコレクターに接続した大きなブフナー（Ｂ ｕｃｈｎｅｒ）　］を用いて溶液を濾過する。 濾液を８Ｌに濃縮して、次に撹拌器、ＩＬの添加ロー１−および冷却浴（−ｊの 清浄な２　Ｏ　Ｌの反応器に移す。溶液のレベルが温度調節源（ｔｈｅｒｍｏ＊ ｅｌ　ｌ）より下であれば溶媒を添加する。冷却浴を用いて有機溶液をｏ′ｃま て冷却する。この冷溶液に７２４ｇのヘンノルメルノＪブタンを充填する。ＩＬ の添加ロー１−を用いて、全量１、ＩＬの無色三フッ化ボウ素ニーテレ−１・を ゆっくり滴下して２時間にわたり添ｔｕｔする。添加終了後４λ度を０°Ｃに卸 持しながら反しコニ物を３−４時間撹拌する。 反りこ、の終了はシリカゲルのｌ　］、ｃ　て確認する。［反ＬＬ、物は一晩放 置してもよい。コ 反１，詩昆合物を清浄な２ＯＬのポリエチレンバケツにあける。５０Ｌの反応器 に＋５Ｌの飽和炭酸すｌ・リウム溶液を充填する。２０Ｌのポリエチレンバケツ を、ガス放出か過激になりすぎない速度で、ゆっくり撹拌する炭酸溶液にゆっく りと移し入れる。溶液を２０分間撹拌して、次に撹拌速度を１胃させる。ガス放 出が止んだら、溶液全体に２４−３６時間で空気を吹き込む。有機層を清浄な２ ＯＬのポリエチルンハケツにあけて、トラフトを３−５Ｉ、のジクロしコメタン で抽出し、この溶液を同一の２ＯＬのポリエチレンハケツにあける。 臭いか減少したら、有機溶液を４Ｌの真空濾過セラ１へを用いて濾過して、濾液 を２ＯＬのロトハノブ（ｒｏｔｏｖａｐ）て減圧下て蒸発させる。７Ｌのメタノ ールをロタハノプ（ｒｏｔｏｖａｐ）フラスコに導入し、残清かロタパップ浴て 温メタノールに溶解するまで加熱する。フラスコは回転させ冷却させる。冷水水 をロタパップ浴に添＋１［比、フラスコを数時間ゆっくり回転させる。フラスコ をロトハソブがら除去Ｉ−、白色結晶性生成物を４Ｌのｒｔ空濾過七ソ１へを用 いて濾過する。 ヘンシル２，　３，　４．　６−テトラ−０−アセチルーβ−Ｄ−千オブｆラク １−ピラノ−件（〜＋．　３ｋｇ）を、撹拌モーター付の清浄な乾燥した２ＯＬ の反ｃＬ：　ｉ！３に充填し、７Ｌの無水メタノールを添ＩＪＩ比てこの物質を 溶解する。溶液は３ｇの新たに表面処理したナトリウムで処理して、２時間撹拌 する。反応物は、ベンジル２。 ３、４．　６−チトラー０ーアセチルーβーＤーチオガラクトピラノントの保持 さｔ］た試料を用いて、８０　２０酢酸エチル　メタノール（Ｖ／Ｖ）を溶出液 としてシリカゲルのｔ．　１．　Ｃ．て確認される。出発物質かｒＴ在しないこ とか反応の終了を示す。 ５０ｇの新訂メタノールで洗浄したＨ’イオン交換樹脂が添加して、反応物を１ ５分間撹拌する。ｐＨは、ｐＨ試験紙を用いて中性溶液であることを確認する。 樹脂は減圧下で濾過して、メタノールは２０Ｌの口１−パップを用いて減圧下で 除ｄｅする。残渣には、２ＯＬのフラスコに５ＬのアセＩ・ンを添加して、溶液 は加温して還流する。残渣は溶解して、室温まで冷却し、氷を浴に添加し、溶液 を冷却しながら一晩回転させる。８００−９００ｇのベンジルβーＤーチオガラ クトピラノシドか結晶化し、これを濾過し、真空下で乾燥させる。 ８Ｌの無水アセ１−二トリルに、８００ｇのヘンシルβ−Ｄ−チオガラクトビラ ノーＸ．６００ｇのヘンズアルデヒドノメチルアセタールおよび２−５ｇのｐ− １−ルエンスルホン酸を添加する。溶液を室温で一晩撹拌する。反応の進行度は ｔ。 １ｃ．て確認する。終了後、反応物はトリエチルエミンを添加してｐＨ７にする 。アセｌ−二（・リル隈は最小にし、７Ｌのイソプロパツールを添加し、混合物 を還流温度付近まで加熱する。大部分の生成物は、数時間の加温後熱イソプロパ ツールに移行する。混合物を冷却し水を浴に添加し、冷却を一晩続けることによ り、沈殿物か生じる。濾過および乾燥後、７６０ｇのヘンシル−４．６−０−ベ ンジリデン−βーＤーチオガラクトピラノンドか１ｑられる。 １８０ｇのベンジル−４．６−０−ヘンジリデンーβ−Ｄ−チオガラクトビラノ ントを、無水ＤＭＦに溶解し、被覆反応器に入れた。反応器は再循環冷却浴を用 いて冷却して温度を一２５°Ｃに維持して、反応混合物を撹拌しながら１０８ｇ の塩化クロロアセチルで３時間にオフたり滴下処理した。この温度で撹拌は２４ 時間続け、次に反応物を数倍量の冷重炭酸溶液の中へ入れて冷却した。生成物を 塩化メチレン中に抽出し、水で数回洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、蒸発乾固 した。生成物をイソプロパツールから結晶化した。収量：　１２５ｇのベンジル ４。 ６−０−ヘンノリチン−３−〇−クロロアセチル−βーＤーチオガラクトピラノ ン１− ５ｇのヘンノル４．６−０−ベンジリデン−３−〇−クロロアセチル−βーＤー チオガラクトピラノントを、室温で塩化メチレン／ピリジン中の３当量の塩化ベ ンゾイルおよび触媒量のジメチルアミノピリジンを用いてベンゾイル化した。 溶液を冷型炭酸すトリウム溶液の中へ入れて冷却し、有機層は飽和硫酸鋼溶液で 洗浄してピリジンを除去し、有機層を乾燥し蒸発させる。残渣を熱プロパツール 中に分取して、ベンジル４．６−０−ヘンノリテン−２−０−ベンゾイル−３− 〇−クロロアセチルーβ−Ｄ−チ才ガラクトピラノソドは溶液から結晶化する。 ’Ｈ−ｎ、　ｍ、ｒ、（ＣＤＣＩ＋）　δ＝７．９６．７．　４　（２ｍ、ｌ　 ５Ｈ。 芳晶族）、５．７９　（ｔ、ＩＨ，Ｈ−２）、５．　５　（ｓ、ＩＨ，ＣＨ）、 ５．２（ｑ、ＩＨ，Ｈ４，Ｊｌ２　９．９Ｈ２，ＪＬＩ　３．３Ｈ２）、４．　 ５　（ｍ。 ２Ｈ）、４．　４　（ｄ、ＩＨ）、３．　９９　（ｍ、５Ｈ）、３．　５５　（ ｓ、ＩＨ）。 実施例２　臭化４．６−０−ベンジリデン−２，３−ノー〇−ベンゾイル−β− Ｄ−ガラクトピラノノル（化合物３２Ａ）の合成ベンジル−４；　６−０−ペン ノリデンーβ−Ｄ−チオガラクトピラノソド（ｌＯｇ）をＩｏｏｍＬのジクロロ メタンに溶解して、６．３５ｇのピリジンを添加した。この溶液に９ｇの塩化ベ ンゾイルをＭ’Ｆにより添加し、１時間後５０ｍｇのジメチルアミノピリジンを 溶液に添＋１１ＬＬ混合物をさらに２−４時間撹拌した。反応の進行度はシリカ ゲルのｔ、１．　Ｃ，によって確認した。反応混合物を飽和重炭酸すトリウム溶 液の中へ入れて冷却し、有機抽出物を水、５９６硫酸銅溶液、水で洗浄し、乾燥 し溶媒を蒸発させて、ヘンシル−４，６−０−ベンジリデン−２゜３−ノー０− ヘンシイルーβ−Ｄ−チオガラクトピラノシト（化合物３２）を単離した。残渣 はイソプロパツールから結晶化して、ＩＯ，７ｇの化合物３２が得た。 化合物３２（ヘンシル−４，６−０−ベンジリデン−２，３−ジー０−ヘンシイ ルー／３−［）−チオガラクトビラ／シ１’）（９，８９ｇ）を、１００ｍＬの ジクロロメタンに溶解し、０°Ｃに冷却し、ＩＯｍＬのジクロロメタン中で臭素 （２，８５ｇ）の溶液で処理した。１５分ｉ＆、１．８ｇの臭化テトラエチルア ンモニウムを混合物に添加し、混合物を室温て２−３時間撹拌した（続いてシリ カゲルのｔ。 １ｃ、）。過剰の臭素を消滅させるため少量のシクロヘキサンを添加し、反応混 合物を冷飽和重炭酸ナトリウム溶液の中に入れて冷却し、水で洗浄し、乾燥し、 溶液量を３０ｍＬに低下させた。この化合物３２ａのジクロロメタン溶液を、そ れ以上の単離および／または精製なしに化合物４２の合成に直接使用した。 実施例３　ｐ−クロロフェニル２．　３．　４−トリー０−ベンジル−β−Ｌ− チオフコピラノノド（化合物２０）の合成 ２Ｌの三つｉ丸底フラスコ、還１ＡｔＤ縮器および５００ｍＬの添加ロートを乾 燥する。次に窒素を流して冷却する。フラスコに１０００ｇのＬ−フコース、５ ００ｇの無水酢酸ナトリウムおよび８００ｍＬの無水ジクロロエタンを充填する 。混合物を撹拌しなから５０°Ｃに加熱する。添加ローＩ・に４００ｍＬの無水 酢酸を充填する。この撹拌している温（５０″ｃ−５５°Ｃ）スラリー中に、あ まり反応物を冷却しない速度で、無水酢酸を滴下して添加する。添加が終了した ら、反応の進行度をｔ、１．　Ｃ，て確認するため、２４時間毎に反応混合物か ら一部を取りながら、混合物を７２時間この温度で撹拌する。 反応の終了が明らかになったら２００ｍＬの水を３０分にわたり温撹拌混合物に 滴下して添加して、この温度で１時間撹拌する。この操作は残存無水酢酸を酢酸 に変換する。反ＬＬ、混合物を３−４１Δ爪の水に入れ冷却する。４１機層を除 去して水層を４Ｌのジクロロメタンで抽出する。−緒にした有５を２Ｌ部の水で ３回逆流洗浄（ｂａｃｋｗａｓｂ）する。ｆＴＢ！Ｗを硫酸ナトリウム上て乾燥 して、減圧下で約５Ｌまで濃縮する。 有機層に９２５ｇのｐ−クロロチオフェノールを添加する。有機層を冷水で冷却 する。ｐ−クロロチオフェノールと酢酸フコースの混合物に１．７２ｋｇの三フ ッ化ホウ素エーテレートを滴下して添加する。次に、反応混合物を周囲の温度に させて、混合物を６時間（−晩でもよい）撹拌する。反応混合物から少量を除去 して、重炭酸すトリウム溶液に入れて冷却する。一旦ｃｏ、放出が止んだら、反 応の終了をｔ、１．　Ｃ，により確認する。終了であれば、全反応混合物をＩＬ の飽和重炭酸ナトリウムに入れて冷却して、ＣＯｔ放出の終了後有機層を分離す る。 有機層を分離して、この層に１時間空気を吹き込む。 次に分離したｆｆ機成層硫酸す］・リウム上て乾燥して、蒸発乾固させる。残渣 を２Ｌの丸底フラスコ中のＩＬの無水メタノールに分取して、Ｉｇの新たに表面 を処理したナトリウムで処理する。反［ｔを窒素下で数時間維持してそしてｔ、 １゜Ｃて酢酸基の除去を確認する。反応物をＨ′″イオン交換樹脂で中和し、濾 過し、そして減圧下て蒸発させる。残渣を最少量の熱イソブタノールに分取して 一晩Ｏ°Ｃて冷ｊ４Ｎｔｔにｐ−クロロフェニル−β−Ｌ−チオフコビラノソド を結晶化する。 収量：　１０６１０ ６Ｏクロロフェニル−β−Ｌ−チオフコピラノシドを７Ｌの無水ジメチルスルポ キソトに溶解する。この溶液に６００ｇの粉末ＫＯＨを添加して反応混合物を３ ０分間撹拌する。塩化ヘンノル（１，２７５Ｌ）を撹拌溶液に滴下て添加して混 合物を室温で一晩撹拌する。ｔ、１．　Ｃ，か反応の未完了を示したｉＬさらに ３００ｇの粉本Ｋ　０　＋−［を反応ｌ昆含物に添Ｉｎ比で、続いて３０分後４ ２５ｍＬの塩化ヘンシルを添加する。ｔ、１．　Ｃ，か反応終了を示すまで溶液 を室温で撹拌する。 ２４時間１（に反シコ；か完了しない場合、粉末ＫＯＩＩおよび続いて２００ｍ Ｌの塩化ヘンシルを添ＩＪＨする。反応物を数倍量の水中に入れて冷却し、塩化 メチレンで抽出し、水で２回逆流洗浄し、乾燥し蒸発させる。残渣を熱ヘキサン に分取する。ｐ−クロロフェニル２．　３．　４−トリー０−ヘンツルーβ−Ｌ −チオフコ−ビラノットか結晶化するので、これを濾過して真空下で乾燥する。 収量　１．　３ｋｇ。 ’Ｈ−ｎ、ｍ、ｒ、　（ＣＤＣＬ　）　。　δ＝７．　５７　（ｍ、ｌ　９Ｈ， 芳香族）、４、　９９　（ｄ、１１１）−４，６５（ｍ、５１１）、４．　５５ 　（ｄ、ｌｔｌ、Ｊｌ、２９．５Ｈｚ）、３．　９８　（ｔ、ＩＨ）、３．　５ ５　（ｍ、３Ｈ）、１．　２６　（ｄ。 ３）１．　ｔＪｓ、＋　６．２Ｈｚ、　Ｈ−６）。 実施例４８−メトキンカルボニルオクチル−２−アセトアミド−４，６−ジー０ −へレジリチン−２−デオキシーβ−Ｄ−グルコピラノンｌ’　（化合物５）の 合成 ２０＋、のガラス反１．コ、器に８Ｌのジクロロエタン、ＩＬの無水酢酸および １ｋｇの無１に酢酸すトリウムを充填した。この撹拌混合物に１ｋｇの塩酸グル コサミンを添加し混合物を還流した。さらに３．５Ｌの無水酢酸をその還流溶液 に３−４時間にｂたり滴下して添加し、溶液の還流を３６時間続けた。還流の最 後の１時間にこの溶液に２００ｍＬの水を滴下して添加した。次に反応物を冷却 し、５０Ｌの撹拌反応器中の３５Ｌの氷水に添加した。を成層を取り出し、次に 追加の２ＯＬの水で２回目の水洗をした。０′機層を硫酸ナトリウム上で乾燥し 、濾過し、無水気体ＨＣＩで２時間飽和した。反応をＨｌおきに１時間ＭＣＩ飽 和させて６０間靜装した。塩化２−アセトアミＦ−２−デオギノ−３，４，６− トリー〇−アセチルーβ−Ｄ−グルコビラノシルを、氷冷重炭酸すトリウム溶液 の中へ入れて冷却して単離した。有機層を硫酸すトリウム上で乾燥し、褐色固体 になるまで蒸発させた。 ４００グラムの塩化２−アセトアミド−２−デオキシ−３，４，６４リ−〇−ア セチルーβ−Ｄ−グルコピラノシルを、２００ｇの活性化モレキュラーシーブを 含ｎする２Ｌの無水ジクロロメタンに溶解し７た。２６６ｇの８−メトキシカル ボニルオクタツールを、３１７ｇのシアン化水銀と一緒に反応混合物に充填した 。溶液を室温て２４時間急激に撹拌した。ｔ、１．　Ｃ，による反応終了の６＊ 認後反応混合物をソリ力のブフナーロ−１・て濾過し、打機層を水で２回、５９ ６ヨウ化カリウム溶液て２回、および重炭酸すトリウムの飽和溶液で２回洗浄し た。溶液を、硫酸ナトリウム上で乾燥し、蒸発乾固させた。残渣を無水メタノー ルに分取し、１ｇの新鮮ナトリウム断片で処理し、次に室温で一晩撹拌した。８ −メトキシカルボニルオクチル２−アセトアミド−ノシ１−の溶液を酸性イオン 交換樹脂て中和し、濾過し、蒸発させて、イソプロパツール／ンイソブロピルエ ーテルから結晶化後、２１８ｇの生成物を得た。 ２００グラムの８−メトキンカルボニルオクチル２−アセトアミド−２−デオギ シーβ−Ｄ−グルコピラノシトを、１．２Ｌの無水ジメチルホルムアミドに溶解 し、＋６９ｍＬのジメトキシトルエンル）およびＩ−２ｇのｐ−トルエンスルホ ン酸で処理した。反応物を撹拌し４０°Ｃに５時間加熱し、次にｔ．　１．　ｃ ．によって終了を確認した。反応の終了か明らかになった時に、混合物をトリエ チルアミンで中和し、数倍量の氷水の中へ入れて冷却し、ジクロロメタン中に抽 出し、水で数回逆流洗浄（ｂａｃｋｗａｓｈ）　した。有機層を硫酸すトリウム 上で乾燥し、蒸発乾固させ、熱イソプロパツールに分取した。冷却後８−メトキ シカルボニルオクチル−２−アセトアミド−４．６−０−ベンジリデン−２−デ オキシーβ−Ｄ−グルコピラノシ１−か沈殿する。これを濾過し、乾燥して１０ ６ｇの生成物を冴る。’Ｈ−ｎ．ｍ．ｒ．　（ＣＤＣＬ）：δ＝７．　４　１　 （ｍ，　５Ｈ，芳香族）、６．　１　Ｉ　（ｄ，　ＩＨ．　ＮＨ）　、５．　５ 　（ｓ。 ＩＩ（、ＣＨ）、４．　６３　（ｄ，　ＩＨ．Ｈ−１，Ｊ，２　７．　４Ｈｚ） 、２．　２９（ｔ、２Ｈ）、！、９９　（ｓ、３Ｈ，Ａｃ）、１．　５８　（ｍ 、４Ｈ）、Ｉ、２９（ｂｓ、８Ｈ）。 実施例５８−メトキンカルボニルオクチル２−アセトアミド−３−ｏ−ｐ−メ） −キノベンジル−４，６−０−ベンジリデン−β−Ｄ−グルコピラノシト（化合 物６）の合成 無水ジクロロメタン（１００ｍＬ）中の化合物５（１７，５ｇ、〜３１ＴＩＴ１ ０１）および触媒礒のｐ−１−ルエンスルホン酸（化合物５に基づいて０２５か ら３重量）（−セント）の撹拌溶液に、ｐ−メトキノベンジルトリクロロアセ１ 〜イミド（２５ｍｌ、のＣ）（２Ｃ１，中にｌＯｇ）の溶液を滴ドして添１ａＩ シた。反応混合物を室温で一晩撹拌した。トリエチルアミンを添加して反応を停 止させ、有機層を重炭酸すトリウム溶液て洗浄し、有機層を乾燥し、蒸発乾固さ せた。熱エタノール中で結晶化させて２０　ｇのＣＩ的の生成物を得た。’Ｈ− ｎ、ｍ、ｒ、（ＣＤＣＩｓ）：δ＝７．　５６−６、　９０　（ｍ、９Ｈ，芳香 族）、５．　６０　（ｄ、ＩＨ，ＮＨ）、５、　３０　（ｓ、ＩＨ，ＰｈＣＨ） 、４．　９４　（ｄ、ＩＨ，Ｊｌ、２　Ｂ、ＯＨ２゜Ｈ−１）、３．８０　（ｓ 、　３Ｈ，ＣＨｓ　）、３．６０　（ｓ、　３Ｈ，ＣＨｈ　Ｐｈ）、２、　３０ 　（Ｌ　２Ｈ，Ｃ１（、ＣＯ）、　１．　９０　（ｓ、３Ｈ，ΔｃＮＨ）、　１ ．８０−１．　Ｉ　Ｏ（ｍ、ｌ　２Ｈ，（ＣＨ，＋　）　＊　）。 実施例６８−メトキソカルポニルオクチルー２−アセトアミド−２−デオキシ− ３−Ｑ−ｐ−−メ１−キソヘンシルー６−０−ベンジル−２−β−Ｄ−グルコビ ラノット頁化金化合物７合成 ２００ｍ１の無水ＴＨＦ中の化合物６　（１５，０ｇ、−３ｍｍｏｌ）の撹拌溶 液に、１１０ｇのシアノホウ化水素すトリウム、ＩＯｇのモレキュラーソープ４ 人および５ｍｇのメチルオレンジを添加した。溶液を一１Ｏ°Ｃまて冷却して、 次にエーテル性１−酸を溶液か酸性になるまで滴下して添ＩＪＩ＋する。反応終 了時ジクロロメタン（２００ｍＬ）で希釈して、セライト（Ｃｅｌｉｔｅ）て濾 過して、重炭酸ナトリウム水溶液（２×ｌ　ＯＯｍｌ）および水（２ｘｌＯＯｍ Ｌ）て逐次洗浄して、次に溶媒を乾燥させてシロップ状になるまで蒸発させる。 シリカゲルを吸着剤として用い、ヘキサン　酢酸エチル、エタノール（２０：Ｉ Ｑ：ｌ）で溶出するカラムクロマトグラフィーで混合物を精製することにより、 ７か収率７０％で得られた。１）（−ｎ、ｍ、ｒ、（ＣＤＣＬ）　δ＝７．　４ ０−６．　９０　（ｍ、９Ｈ，芳香族）、５、　７０　（ｄ、ＩＨ，ＮＨ）、４ ．　６４　（ｄ、ＩＨ，Ｊ、、２　８．　ＯＨ２，Ｈ−１）、３．８６　（ｓ、 ３Ｈ，ＣＨ＝　Ｏ）、３．６８　（ｓ、３Ｈ，ＣＨ２０Ｐｈ）、２、　３０　（ ｔ、２Ｈ，ＣＨ２Ｃｏ）、１．　９０　（ｓ、：Ｎ−（、ＮＨＡｃ）、１．８０ −ｉ、Ｉ　Ｏ（ｍ、ｌ　２Ｈ，（ＣＨＩ　）＋　）。 実施例７８−メ１〜キシカルボニルオクチル２−アセトアミｌ’−２−チオキシ −３−ｏ−ｐ−メ１〜キシヘンシル−４−０−（４，６−０−ベンジリデン−２ ，３−〇−ンベンゾイルーβ−Ｄ−ガラク１−ピラノシル）−６−０−ベンジル −２＝デ才キンーβ−Ｄ−グルコピラノノド（化合物４２）の合成化合物７　（ Ｉ　Ｏ，６１ｇ、ｌ　９．　７ｍｗｎｏｌ）と化合物３２Ａ（化合物７に基づき １．６−４．７当量）および２５０Ｌのジクロロメタン中の２．６−ソーｔ−ブ チル−４−メチルピリジン（３，１１ｇ、Ｉ　５．　２ｍｗｎｏｌ）の溶液、お よび４０ｇのモレキュラーソープ（４人）を室温で３０分間撹拌し、次に窒素下 で一５０°Ｃまて冷却した。トルエン（４０ｍＬ）中のトリフル酸銀（４，４７ ｇ、１７．３ｍｗｎｏｌ）の無水溶液を撹拌混合物に添加した。混合物を２時間 の間に−１５°Ｃまて加温し、さらに５時間−１５°Ｃに保持した。最後には混 合物を室温まで加温し、−晩撹拌した。３ｍＬのピリジンと２５０ｍＬのジクロ ロメタンを混合物に添加し、セライ１−（Ｃｅｌｉｔｅ）Ｊ二て濾過し、濾液を 飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（２００ｍＬ）　、次に水（２００ｍＬ）　、塩 酸（０５Ｎ、２００ｍＬ）および水（２００ｍＬ）で洗浄して、真空で濃縮した 。６０ｇの化合物８を白色結晶として、酢酸エチル−ジエチルエーテル−ヘキサ ンから結晶化した。母液を濃縮し、クロマトグラフィー（３００ｇシリカゲル、 ）・ルエン　酢酸エチル（１：　１）　）で精製し、４５ｇの純粋な化合物４２ か得られた。全収量は、Ｉ　０．　５ｇ　（６８９６）であった。ＲｆＯ，４８ （メタノール：ジクロロメタン、４９６）。　’　Ｈ−ｎ　。 ｍ、ｒ、（ＣＤＣＩ＝）　δ　５．　８０　（ｔ、ＩＨ，＋Ｊ２’＋２’　Ｉ　 １．　ＯＨｚ、Ｈ−２°　）、５．５２　（ｓ、ＩＨ，ＣＨＰｈ）、５．　２５ 　（ｄｄ、Ｉ　Ｈ１Ｊ２．４４．０Ｈｚ、Ｈ−３°）、４．　８８　（ｄ、ＩＨ ，Ｊ、１．　Ｉ　１．　ＯＨｚ、Ｈ−１’）、４．　７０　（ｄ、ＩＨ，Ｊ、。 ２　９．０Ｈｚ、Ｈ−１）、３．　７８　（ｓ。 ２Ｈ，ＣＨ３０）、３．　６４　（ｓ、３Ｈ７ＣＨ３０ＰＩ〕）。 実施例８８−メｌ〜ギンカルボニルオクチル２−アセトアミ１〜−４−０−　（ ４゜６−〇−ヘンノリデンー２’、３’　−）−〇−ヘンシイルーβ−Ｄ−がラ クｌ−−ピラノノル）−６−０−ヘンシル−２−デオギンーβ−Ｄ−グルコピラ ノシド（化合物４３）の合成 水で飽和したジクロロメタン（１０ｍＬ）中の化合物４２（３５０ｍｇ、１８５ μｍｏｌ　）の撹拌溶液に、ＤＤＱ　（１２６ｍｇ、０．　５ｍｗｎｏｌ）を、 添加した。室温で２時間１組反Ｌｔか終了して有機者を重炭酸すトリウム水溶液 および水で逐次洗浄して、乾燥して濃縮した。カラＩ、クロマトグラフィーによ り目的の化合物４３は収率８５０６てｉｖられた。　’Ｈ−ｎ、ｍ、ｒ、（ＣＤ ＣＩｓ）：δ　５．６５　（ｄｄ。 ＩＨ，Ｊ、、、　１０．８Ｈｚ、Ｈ−２’　）、５．６１　（ｄ、ＩＨ，Ｊ３． 。 ４、　０Ｈｚ、　Ｈ−３’　）、４．　（ｉ８　（ｄ、ＩＨ，Ｊｌ、２Ｉ１．　 ０ｌ−（Ｚ、　Ｈ−１゛　）　、　４．　Ｇ２　（ｄ、　ＩＨ，Ｊ、、２　１０ Ｈｚ、Ｈ−１）　、　３．　６０　（ｓ、３■七　Ｃ００ＣＨ，）。 実施例９８−メトギノカルポニルオクチル２−アセｌ〜アミ１〜−３　０　（２ ゜３．４、−トリー０−ヘンツルーα−Ｌ−フコピラノシル’）　−４−０−（ ４，Ｇ−０−へレジリデン−２，３−）−〇−ベンゾイルーβ−Ｄ−ガラクトピ ラノノル）−４３−０−ヘンツルー２−デオキッーβ−Ｄ−グルコピラノシト（ 化合物４４）の合成 １０ｍＬの無水ジクロロメタン中の臭化、ｍ（第二銅）（４０ｇ、ｌ　７．　７ ｍｗｎｏｌ）と５ｇのモレキュラーソープ４人の混合物に、１．２ｍＬの無水Ｄ ＭＦおよび臭化テ］・ラエチルアシモニウム（１，８５ｇ、８．　８ａｎｌ）を 添加した。このｉｆｌＭを室温で１時間撹拌して、次に３０ｍＬの無水ジクロロ メタン中の化合物４３（５０ｇ、５．　７５ｍｗｎｏｌ）どチオフコンＦ２０　 （７，５ｇ、ｌ　１．　８ｎｖｎｏｌ）の溶液を０°Ｃて３０分間滴下して添加 した。この混合物を室温て４８時間撹拌して、最後に５ｍ（、のメタノールを添 加して３０分間撹拌した。さらに、反応混合物に３ｍｌのピリノン、ＩｏｏｍＬ の酢酸エチルおよび１００ｍＬのトルエンを添加した。混合物をセライトパット プか得られｔこ。シリカゲルのカラムクロマトグラフィーてＦ７製して、）−ル エン酢酸エチル（２　ｌ）で溶出して化合物４４を８６０６の収率て得た。　’ Ｈ−ｎ。 ｍ．　ｒ．　（ＣＤＣＩｓ　）　：δ　５．　８０　（ｄｄ，　ＩＨ，　Ｊ２’ ＋＋’　Ｉ　１．　ＯＩ−（Ｚ。 ｉｔ−２’　）、５．　６０　（ｓ，　ＩＨ．　ＣＨＰｈ）、５．　５０　（ｄ ，　ＩＨ，　ＮＨ）、５、１０　（ｄｄ，　ＩＮ．Ｊ．、　４．　０１１ｚ．Ｈ −３’　）、３．　６０　（ｓ，　３Ｈ。 ＯＣＨ３）、１．　２０　（ｄ．　３１−１．　ＣＨＩ　、ニア１−７．）。 実施例１０　８−メトキンカルボニルオクチル２−アセトアミｌ’−　３　−０ −　（２。 ３、４，　−ｌ−’Ｊ　−Ｄ−ペン’ｈＬ−ａ−Ｌ−）：ｆｆヒ−７／ノル）　 −４　−０　−　（４．　６−〇ーヘンジリデンーβ−Ｄ−がラクトピラノシル ）−６−０−ベンジル−２−デオギノーβ−Ｄ−グルコピラノノド（化合物４５ ）の合Ｉ戊化合物４　４　（２　０　０ｍｇ）を、メタノール中て２０ｍＬのす ］−　ＩＪ　ｒ’ｙムメトキシドで処理した。３時間後、ｔ．　１．　Ｃ．　（ ＋ールエンー酢酸エチル、１　ｌ）は出発物質の消失およびそれよりゆっくり動 くスポットの出現を示した。この溶液をアンバーライ］・樹１１ｆｆｌＲ’１２ ０Ｈ“て中和して、溶媒を減圧下で蒸発させて相当な収量の粗化合物４５を与え た。生成物をシリカゲルでトルエン−酢酸エチル（２　１）を溶出液としてｔｒ ’＋製した。　’Ｈ−ｎ．ｍ．ｒ．　（ＣＤＣＩｘ　）：６７、＋５−７．　５ ５　（芳香族，２５）Ｄ、５．０２　（ｄ，ＩＨ，ＮＨ）、５．５８　（ｓ．　 Ｉ　Ｈ．ＣＨ−ベンジリデン）、５．　Ｏｆｌｉ　（ｄ．　ＩＨ，　Ｊｌ．、ｒ 　７．　０Ｈｚ．Ｈ−じ）、４．　９５　（ｄ，　ＩＨ，　Ｊｌ，、３．　８Ｈ ｚ，　Ｈ　Ｉ’　）、４、８５　（ｄ．　ＩＨ，Ｊ．２　＝９．　０Ｈｚ．Ｈ− １）、３．　６２　（ｓ，　３１土ＣＯＯＣＨ，　）、！．　０　（ｄ．　２Ｈ ，　Ｆｕｃ−ＣＨ２　）実施例Ｉ＋　８−メトギンカルボニルオクチル２ーアセ １ヘアミｌ”３−０−　（α−Ｌ−フコピラノツル）−４−０−　（３−０−硫 酸塩−β−Ｄ−がラクトピラノシル）−２−デオキシーβ−Ｄ−グルコビラノッ ト（化合物４７）の合成ジオール（１００ｍｇ、化合物４５）を、５ｍＬの無水 ツメチルボルムアミドに溶解した。ピリソン二三酸化イ才つ複合体（１２０ｍｇ ）をこの溶液に添加して、反Ｌコニ混合物を室温で１時間撹拌した。反応物のｔ ．　１．　ｃ　によってジオール（ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ　８０：２０中のＲ， ＝０．２８）の消失をモニターしたつ溶媒を蒸発乾固させて５０ｍＬのメタノー ル中に分取し、Ｎａ”″樹脂で処理してナトリウム塩に変換した。シリカゲルの カラムクロマトグラフィーで精製して６５ｍｇの化合物４６か？ワられ、これを 炭素上＋　０９６ｐｄ（ＯＨ）２て直接水素化して化合物４７を？！トな。”Ｃ −ｎ、ｍ、ｒ、（Ｄｚ　Ｏ）：δ　１０３．９４　（Ｃ−ｌ、Ｇａ１）、１０３ ．４４　（ＣＩ、ＧＩｃＮＡｃ）、１０１．０７　（Ｃ−１゜Ｆｕｃ）、８２． ７　（Ｃ−３，Ｇａ１）、６３．８３　（Ｃ−６，Ｇａｐ）、６２゜２　（Ｃ６ ，ＧＩｃＮＡｃ）、５４．５５　（Ｃ−Ｎ、ＧｌｃＮＡｃ）、１７．７５（Ｃ６ −Ｆｕｃ）。 実施例１２　臭化２−０−ベンゾイル−４，６−０−ベンジリデン−３−０−ク ロロアセチル−α−Ｄ−がラクトビラノシル（化合物３３）の合成化合物３２（ ベンノル４．１０−ベンジリデン−２−〇−ベンゾイルー３＝クロロアセチル− β−Ｄ−チオガラクトビラノソド）（８，８７ｇ）を１００ｍＬのジクロロメタ ンに溶解して、０″Ｃに冷却し、ＩＯｍＬのジクロロメタン中の臭素（２，７ｇ ）溶液て処理した。１５分後、この混合液に１．７ｇの臭化テトラエチルアンモ ニウムを添加して、混合物を室温で２から３時間撹拌した（続いてシリｈゲルの ｔ、１．　Ｃ，）。少隈のシクロヘギサンを添加して過剰の臭素を消滅させ、反 応混合物を冷飽和重炭酸すトリウム溶液の中へ入れて冷却し、水で洗浄し、乾燥 し、化合物３３のジクロロメタン溶液を与えるために溶液散を３０ｍＬに低ドさ せた。この溶液は化合物３８の合成に直接使用できた。 実施例１３８−メトキシカルボニルオクチル２−アセトアミド−４−ｏ−（２’ −０−ヘンシイルー４°、６°−〇−ヘンノリデンー３′−〇−クロロアセチル −β−Ｄ−がラクトピラノシル）−６−０−ベンジル−２−デオキシ−３−〇− ｐ−メトキソヘンジルーβ−Ｄ−グルコビラノット（化合物３７）の合成化合物 ７　（５，０ｇ、０．　９ｍｍｏｌ）と化合物３３（１，４から１．　５当量− 実施例１２より）および５０ｍＬのジクロロメタン中の２．６−ジーｔ−ブチル −４−メチルビリノン（１，７８ｇ、１．　Ｏｎｗｎｏｌ）の溶液およびモレキ ュラーンーブ（４人）を、室温で３０分間撹拌し、次に窒素下で一５０″Ｃまて 冷却した。トルエン（ＩＯｍＬ）中の無水トリフル酸銀（３，３ｇ、１．　５ｍ Ｌ）の溶液を撹拌混合物に添加した。この混合物を２時間にわたって一１５°Ｃ まて加温し、さらに５時間−１５°Ｃに保持して、次に室温まで加温して、−晩 撹拌した。ＩｍＬのピリジンと１００ｍＬのジクロロメタンを混合物に添加して 、セライト（Ｃｅｌｉｔｅ）上で濾過し、濾液を重炭酸ナトリウム水溶液（１０ ０ｍＬ）て、次に水（１００ｍＬ）、塩酸（０゜５Ｎ、ｌｏｏｍＬ）および水（ １００ｍＬ）で洗浄して、真空で濃縮した。シリカゲルを吸着剤としてヘキサン 、酢酸エチル（１：　Ｉ）で溶出するカラムクロマトグラフィー（３００ｇ、ト ルエン）により粗混合物を精製して、５．２ｇの純粋な化合物３７を得た。’Ｈ −ｎ、ｍ、ｒ、（ＣＤＣＩｓ　）　δ　５．　８５　（ｄ、Ｉｌｌ、　ＮＨ）、 ５．　６２　（ｔ、ＩＨ，Ｊｒ、ｒ　ｌ　０．　８Ｈｚ、　Ｈ２’　）、５゜５ ２　（ｓ、ＩＨ−ＣＨ−ベンジリデン）、５．０８　（ｄｄ、ＩＨ，Ｊｉ＋４’ 　４Ｈｚ、Ｈ−３’）、４．　８５　（ｄ、ＩＨｌＪｒ、ｒ　Ｉ　１．　ＯＨｚ 、　Ｈｌ’　）、４、　６８　（ｄ、ＩＨ，Ｊ、、、９．　０Ｈｚ、　Ｈ−１） 、３．７２および３．６４（２ｓ、６Ｈ，０ＣＨｚおよびＣ００ＣＨｚ　）　； １３Ｃ−ｎ、　ｍ、ｒ、：１５９゜０（芳香族　ｃ−ｐ−メ１−ギシル）、１６ ５．　１５　（Ｃ＝０．　クロロアセチル）、１６７、　１２　（ｃ−０，アセ チル）、１７４．　２　（ｃ＝０．　Ｃ００ＣＨｓ　）、９９．６１（ｃ−１） 、１００．２６　（ｃ−１”）、Ｉ　Ｏ１，Ｏ（ＰｈＣＨ）。 化合物３７を次に実施例８と同一方法でＤＤＱで処理して、化合物３８をほぼ開 眼の収量て得た。 実施例１４　８−メトキシカルボニルオクチル２−アセトアミド−３−０−（２ ゜３、．４４リ−０−ベンジル−α−Ｌ−フコピラノノル）−４−０−（２−０ −ベンゾイル−４，６−０−ベンジリデン−３−〇−クロロアセチルーβ−Ｄ− ガラクトピラノシル）−６−０−ベンジル−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラ ノノド（化合物３９）の合成 チオフコソド２ｏ（４ｇ）を無水ジクロロメタン（５０ｍＬ）中で撹拌して、臭 素（０，６０ｇ）を添加した。混合物を−２０”Ｃまで冷却した。臭化物への変 換は１時間で終了して反応混合物を冷重炭酸ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥し 、ＩＯｍＬに濃縮して、アルコール３　Ｂ　（２，９７ｇ、　３．　５６ｎｍｏ ｌ）　、　ＣｕＢｒｘ（２，３９ｇＬ臭化テ臭化テトラエチルアンモニウム２４ ｇＬジメチルホルムアミド（ＩｍＬ）中のモレキュラーシーブ４人（４ｇ）を無 水ジクロロメタン（７５ｍＬ）中に含４Ｔするフラスコ中に注入した。この混合 物を室温で４８時間撹拌して、その？＆ｔ、１．　ｃ、てアルコール３８の消失 とより早く動くスポット（ＲｆＯ，５６、トルエンニ酢酸エチル２：ｌ）を示し た。普通の処理の後、粗混合物をカラムクロマトグラフィーによって精製して化 合物３９　（４，２ｇ、収率約８００６）を得た。　’Ｈ−ｎ、ｍ、ｒ、（ＣＤ Ｃ１ｚ　）：δ　７．　ｌ−８゜０（ｍ、芳香族−３０８）、５．５Ｂ、５．　 ６１　（ｍ、２Ｈ，ＮＨおよびＣＨ−ベンジリデン、オーバーラツプ）、５．　 ５６　（ｄ、ＩＨ，Ｊｌ−，２−７，０Ｈｚ。 Ｈ−１）、４．　９８　（ｄ、ＩＨ，Ｊ、、　８．　ｏＨｚ、Ｈ−１）、４．９ ５（ｄ、ＩＨ，Ｊ、、、２．　３．８Ｈｚ、Ｈ−１°　）、３．　６５　（ｓ、 ３Ｈ。 Ｃ００ＣＨ，）および１．ｌ　（ｄ、３Ｈ，ＣＨ，−Ｆｕｃ）。 次に化合物３９をチＡ尿素の処理により脱クロロアセデル化して、０°Ｃて２時 間ツメチルポルＩ、アミド中の三酸化イ才つ／ピリジン複合体で硫酸塩化して化 合物４１を１する。次に化合物４１上のブロック基を従来技術で除去して化合物 ４７をｔ７える。 実施例１５２−チオキシ−２−フタルイミド−１，３，４，６−チトラー０−ア セチルーβ−Ｄ−グルコビラノット（化合物ｌ）の合成塩酸（Ｄ＋）グルコサミ ン（１００ｇ、０．　４６ｍｏｌ　）を、メタノール（０゜５Ｌ）中の等モル量 の金属すトリウムから調製した、メタノール中のすトリウムメトキントの溶液に 添加した。生した混合物を、等モル当量の無水フタル酸およびトリエチルアミノ （８０ｍＬ）で処理した。次に混合物を２時間撹拌し、濾過し、固形分を真空で １２時間乾燥した。乾燥固形分をピリノン（３００ｍＬ）に溶解し、無水酢酸（ ２００ｍＬ、２．　ｌ　ｍｏｌ）て処理した。混合物を室温で４８時間撹拌し、 次に氷水混合物の中に入れて冷却し、生した沈殿物を濾過し、濃縮し、ジエチル エーテ７Ｌから結晶化して、９８．　３ｇ　（４５０６）の標題の化合物を？ｑ だ。　’Ｈ−ｎ、ｍ、ｒ、（ＣＤＣＩｓ）：δ　７．　７５　（ｍ、４ｈ、芳香 族）、６．４５（ｄ、ＩＨ，＋（−１，Ｊ、、２　９．０Ｈｚ）、５．　８５　 （ｔ、ＩＨ）、５．１５（１，ＩＨ）、４４　（ｔ、ＩＨ）　、４．３　（ｑ、 ＩＨ）、４．　１　（ｑ、ＩＨ）、４、　００　（ｒｎ、ＩＨ）、２０５．２０ ０．１．９５、ｌ、８０　（４ｓ、＋２比４Ａｃ）ｏ　”Ｃ−ｎ、　ｒｎ、　ｒ 、　（ＣＤＣ１ｚ）６８９．７　（Ｃ−１）、７２６．７０゜５．６８．３　（ ３Ｃ，Ｃ−３，Ｃ−４，Ｃ−５）、６１４５（Ｃ−６）、５３．４２　（Ｃ−２ ） 実施例１６　臭化２−デオキソ−２−フタルイミトー３．　４．　６−トリー〇 −アセチルーβ−Ｄ−グルコピラノノル（化合物＋２）の合成２−デオキシ−２ −フタルイミド−１，３，４，６−テトラーＯ−アセチルーβ−Ｄ−グルコピラ ノソｌ’ｌ（２０ｇ、４１．　９ｎｗｎｏｌ）を、酢酸＜３０９６．２００ｍＬ ）中の臭化水素溶液で処理して、室温て２時間撹拌した。次に混合物を氷水混合 物中に注ぎ、ジクロロメタンて抽出した。抽出物をＮａＨＣＯ，溶液および水で 洗浄して、続いてＭ　ｇ　Ｓ　Ｏ＊で乾燥した。混合物を濾過し、乾燥し、真空 で濃縮して化合物１２をドラインロツブ（化合物１２）として得た。 実施例１７　エチル２−デオキシ−２−フタルイミド−３，４，６−トリー０− アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシド（化合物１３）の合成実施例１６からの臭 化２−デオキシ−２−フタルイミド−３，４，６−トリー〇−アセチルーβ−Ｄ −グルコピラノシル（化合物１２）を無水エタノール中に分取して、無水エタノ ール（２００ｍＬ）　、シアン化水銀（１３，７ｇ、５５ｍｍｏｌ）て直接処理 して、室温で４８時間撹拌した。次に混合物を濾過して濃縮した。残渣を２００ ｍＬのジクロロメタン中に分取して、１０９６ヨウ化カリウムの溶液、５０６重 炭酸ナトリウム、水で洗浄し、Ｍｇ５ＯＪ上で乾燥し、濃縮してンロノブにした 。 実施例１８　エチル２−チオキシ−２−フタルイミド−β−Ｄ−グルコビラノッ ト（化合物１４）の合成 実施例１７からのエチル２−デオキシ−２−フタルイミド−３，４，６−トリー 〇−アセチルーβ−Ｄ−グルコピラノノド（化合物＋３）を、１００ｍＬの無水 メタノール中に分取して、１００ｍｇの金属すトリウムて処理した。この溶液を 室温で２４時間撹拌し、次にアンバーライｌ−［Ｒ−１２０（Ｈ＋）　］　Ｉｌ ｌで中和して、濾過し、真空で蒸発乾固させた。この化合物は化合物１５および 化合物６６の調製に使用できた。 実施例１９　エチル２−デオキシ−２−フタルイミド−６−０−ベンジル＝β− Ｄ−グルコビラノント（化合物１５）の合成化合物＋４（２，１ｇ、６．　２３ ｍｍｏｌ）を１００ｍＬのトルエン中に分取した。 これに酸化ヒス（トリブチルスズ）　（２，２２ｍＬ、４．　３５ｎｗｎｏｌ） および臭化テトラブチルアンモニウム（０，９８３ｇ、３．　０５ｎｖｎｏｌ） を添加した。混合物を１５０°Ｃて４時間１ｍ熱して、そしてトルエン（５０ｍ Ｌ）を混合物から蒸留した。 反応混合物を室温まで冷却して、臭化ベンジル（２，１７ｍＬ、ｌ　８．　２７ Ｈｗｎｏｌ）を添加し、反応物を３６時間！１０°Ｃに加熱した。トルエンを蒸 発して、残渣を酢酸エチル（２２ｍＬ）に分取し、重炭酸す！−リウム水溶液、 飽和塩化す１−リウム溶液および水で逐次洗浄した。有機−を乾燥し、蒸発乾固 させて、粗固形分を得た。シリカゲルのカラムクロマトグラフィーにより精製し 、結晶性固体１５（１４ｇ、７０９６）を１！トた。’Ｈ−ｎ、ｍ、ｒ、（ＣＤ ＣＩｓ）：δ　７．　３−８゜１（９Ｈ，芳香族）、４．５　（ｄｄ、２Ｈ，Ｃ ）（、Ｐｈ）、５．１８　（ｄ、ｌｔ（。 Ｊｌ、２　１０．０Ｈｚ、Ｈ−１）、４．　３６　（ｄｄ、ＩＨ，Ｈ−３）　、 　４．　２５（ｄｄ、　Ｈ，Ｊ２．ｌ　ｔｏ、ＯＨｚ、　Ｊｔ、ｓ　８．　ＯＨ ｚ、　Ｈ−２）および１゜０　（ｔ、３Ｈ，ＣＨ，） 実施例２０　エチル６−０−ベンジル−２−デオキシ−２−フタルイミド−３− 〇−（２，３，４−１−リーＯ−ヘンシルーα−Ｌ−フコピラノツル）−４−０ −（２，３，４，６−チトラー〇−了セチルーβ−Ｄ−ガラクトピラノノル）− β−Ｄ−ダルコビラノノト（化合物４９）の合成ジクロロメタン（５０ｍＬ）中 の化合物１５（２，４９ｇ、５．　７１ｍｗｎｏｌ）の撹拌溶液に、無水ＣａＳ Ｏ４（７，５ｇ）、トリフルｆＷ（０，７３ｇ、２．８ｍｍｏ　ｌ　）および炭 酸銀（７０ｇ、２５．７ｎｎ＋ｏｌ）を添加して反応混合物を一５０°Ｃに冷却 した。無水ジクロロメタン（１５ｍＬ）中の２．　３．　４．　６−テＩ・シア セチル−１−α−ブロモガラクト−ス（３，５ｇ、８．　５ｍｍｏｌ）を滴下ロ ートを通して滴下して添加した。反応混合物を一３０°Ｃまて加温して４８時間 撹拌し、次にメタノール（５ｍＬ）を添力１比て反応を停止させ、混合物を室温 まで加温させた。 セライト（Ｃ，ｅｌｉｔｅ）パットての濾過後、濾液を重炭酸水溶液および５９ ６ＥＤＴＡ溶液て洗浄した。真空で溶媒を蒸発させて赤褐色のンロソブを得て、 これをトルニレ　アセＩ・ン　ＭｅＯＨ（２０：　３　：　ｌ）を溶出液として ノリ力でクロマトグラフィーにかけて化合物４Ｂ　（Ｒｆ　０．５２Ｂ）を主化 合物として得た。 千オフコノｌ”２０　（１，５ｇ、２．　８ｍｍｏｌ）を、−２０°Ｃまて冷却 した無水ジクロロメタン（５０ｍＬ）中で撹拌し、臭素（０，４０ｇ）を添加し た。１時間で臭化物への変換を終了して反し―昆合物を冷重炭酸水溶液で洗浄し 、乾燥し、５０ｍＬに濃縮して、ジクロロメタン（５０ｍＬ）中の化合物４８　 （Ｉｇ、１．　４ｎｉｎｏｌ）、ＨｇＢｒ２　（１，０８ｇ、３ａ＋ｏｌ）　、 モレキーユラーノーブ４人（２ｇ）および臭化テ１〜ラエチルアンモニウム（１ ｇ）を含有するフラスコ中に注入した。混合物を室温で４８時間撹拌した。ｔ、 １．　ｃ　は、より早く動くスポットを示した。 反応混合物をセライト（Ｃｅｌｉｔｅ）で濾過して、濾液を水、５９６ＥＤＴＡ 、飽和重炭酸ナトリウム水溶液、水で洗浄して、次に硫酸ナトリウム」二で乾燥 し、濾過し、真空で蒸発乾固させた。粗生成物のノリ力ゲルクロマトグラフィー による精製で、標題の化合物４９　（１，２ｇ、７０？６、トルエン、アセトン ＋ＭｅＯＨ２０＋３：１中のＲｆ　Ｏ，Ｇ６９）を得た。 ’Ｈ−ｎ、ｍ、ｒ、（ＣＤＣＩｓ　）：δ　７．　００−７．　８　（芳香族２ ４Ｈ）、５、　３５　（ｄ、ＩＨ，Ｊ、、、　９．　０Ｈｚ、Ｈ−］）、５．　 １５　（ｄ、ＩＨ。 Ｊｂｚ　３．８Ｈｚ、ＨＩ　Ｆｕｃ）、４．　３５　（ｄｄ、ＩＨ，Ｊｒ、ｒ　 ｌ　Ｏ。 ＯＨｚ、　Ｈ−３’　）　、２．　１　（ｓ、３Ｈ，アセチルＣＨ，）、１．　 ９５　（ｓ、６Ｈ，アセチルＣＨ３）、１．　９０　（Ｓ、３Ｈ，了セチルＣＨ ３）、１．　ｌ　（ｔ。 ３Ｈ，ＣＨ３）および０．　６　（ｄ、３Ｈ，ＣＨ２−Ｆｕｃ）ａ　”Ｃ−ｎ、 　ｍ、ｒ。 δ　１６８、ｌ　７０　（Ｃ＝Ｏ，フタルイミドおよびアセチノリ、１０１．０ （Ｃ−１，Ｇａ１）、１００．０　（Ｃ−１，ＧｌｃＮＰｈｔｈ）、９７．　７ 　（ＣＩ　Ｆｕｃ）、２０．６　（ＣＨｚ　ＣＨｌ）および１５．　９８　（Ｃ −６−ＦｕＣ） 実施例２１　エチル２−アセトアミド−６−０−アセチル−３−〇−ベンジルー ２−デオキシーβ−Ｄ−グルコピラノシトの合成酢酸水溶液（８０９６，１５０ ｍＬ）中の化合物９０（以下に記載する、２ｇ、４゜６８ｍｗｎｏりの溶液を８ ０°Ｃて２時間ＩＪＩＩ熱した。次に混合物を蒸発させて、生じた固形分はＰ２ Ｏ５上、高真空で乾燥した。乾燥固体を、ｌＯｏＣから５°Ｃて、ジクロロメタ ン（１００ｍＬ）中の塩化アセチル（０，３３ｍＬ、４．　７ｍｍｏｌ）とピリ ジン（１０ｍいて選択的にアセチル化した。次に混合物をジクロロメタン（５０ ｍＬ）で希釈し、ＮａＨＣＯ，水溶液で洗浄し、Ｍ　ｇ　Ｓ　Ｏ＋上で乾燥し、 蒸発させた。残渣をＥＴｏＡｃ・ヘキサン、３：ｌ（ｖ：ｖ）を溶出液として用 いてシリカゲルカラムてクロマトグラフィーし、０．　８２　ｇ　（４６９６） の標題の化合物をｔ＊ｆこ　、’Ｈ−ｎ、ｍ、　ｒ、　（３００ＭＨ２，ＣＤＣ ｌ３　）　：　δ　７．　３　（ｍ、　５Ｈ。 芳香族Ｌ　５．　６７（１）ｓ、Ｉｔ−ｔ、　ＮＨ）、４．　８６　（ｄ、ＬＨ ，Ｈ−１）、４゜７５　（ｍ、２＋（）、　４．　４８　（ｑ、ＩＨ）、４．　 ２７　（ｄ、ＩＨ）、４．　１　（ｔ。 ＩＨ）、３．８５　（ｍ、ＩＨ）、３．５　（ｍ、３Ｈ）、３．　１６　（ｍ、 ＩＨ）、２、　７０　（ｂｓ、ＩＨ，ＯＨ）　、２．　１　（ｓ、３Ｈ，Ａｃ） 、１．９　（ｓ、３８゜ＡＣ）、１．　Ｉ　８　（１，３）Ｌ　ＣＨ＊　）　、 ”Ｃ−ｎ、ｍ、ｒ、（ＣＤＣｌ＋　）６９９．４５　（Ｃ−１）、７９，８５． ７４．５　（ＣＨｌ　ｐｈ）　、？３．７．７１０９．６５．２５　（Ｃ６）、 ６３．３６　（ＣＨｔ　）、５７．７　（Ｃ−２）、２３．６　（Ａｃ）、２０ ．８６　（Ａｃ）、１５．０Ｇ　（ＣＨ３）実施例２２　エチル６−０−アセチ ル−３−〇−ベンジルー２−デオキシー２−フタルイミド−β−Ｄ−グルコビラ ノント（化合物６９）の合成実施例１８からのエチル２−チオキシ−２−フタル イミド−β−Ｄ−グルコピラノソ１へ（化合物１４）の溶液を、無水アセトニト リル（１００ｍＬ）に分取して、ヘンズアルデヒ１−ツメチルアセクール（９， ６ｇ）と触媒隈のｐ−トルエンスルホン酸（ｌ　００ｍｇ）で処理した。混合物 を室温で１７時間撹拌して、次にトリエチルアミンでｐ　ｌ−（７に中和した。 混合物を蒸発させ、熱ヘキサンから結晶化して、１２．７ｇのエチル４．６−０ −ベンジリデン−２−デオキシー２−フタルイミド−β−Ｄ−ダルコビラノノト （化合物６６）を得た。 化合物６６（ｌｏｇ）を−５°Ｃて無水ツメチルホルムアミド（ＤＭＦ）に溶解 して、１．　Ｉ　ｇ　（４６，６ｍｏｌ）の水素化ナトリウムと臭化ベンジル（ ５，４６ｍＬ、２２ｎｎｏｌ）て処理した。混合物を０°Ｃて２時間撹拌し、次 に２０ｍ１のメタノールでゆっくり処理し、次にゆっくり室温にしてＨＣＩ　（ ＩＮ）でｐＨ７に処理して、−ジクロロメタンで３回抽出した。有Ｂ！層を無水 硫酸マグネシウム上て乾燥し、次に濾過し７、乾燥するまで濃縮して熱エタノー ルに分取して７．２ｇの化合物６７を得た。酢酸水溶液（８００６，２００ｍＬ ）中の化合物６７　（５，４３ｇ、Ｉ　Ｏ。 ５０ｎｎｏｌ）を８０°Ｃて２時間加熱した。混合物を蒸発させて、生じた固体 をＰ、０．上て高真空て乾燥した。乾燥固体をジクロロメタン（２００ｍい中の 塩化アセチル（０，８ｍ１５、ｌ　１．　０ｎｙｎｏｌ）およびビリノン（１０ ｍｌ、）て−１０°Ｃから０°Ｃて選択的にアセチル化した。次に混合物をジク ロロメタン（１０ｍＬ）て希釈し、Ｎ　ａ　ＨＣＯｓ水溶液で洗浄し、Ｍｇ５Ｏ ＜上で乾燥して、蒸発させた。残渣をＥｔＯＡｃ　ヘキサン、ｌ：２（ｖ：ｖ） を溶出液として用いて、シリカゲルカラムでクロマトグラフィーにかけて、３． 　５ｇ　（７１９６）の化合物６９を得た：　’Ｈ−ｎ、ｍ、ｒ、（３００ＭＨ ｚ、ＣＤＣｌ＋）：６７．７　（ｍ、　４Ｈ。 芳香族）　、７．　０　（ｍ、５Ｈ，芳香族）、５．　１６　（ｄ、ＩＨ，Ｈ− １）、４７（ｄ、ＩＨ）、４．　５　（ｍ、２Ｈ）　、４．　２　（ｍ、３Ｈ） 　、３．　８　（ｍ、ＩＨ）、３．　６　（ｍ、２Ｈ）、３．　４５　（ｍ、Ｉ Ｈ）、２．　９　（ｂｓ、ＩＨ。 ＯＨ）　、２．１　（ｓ、３Ｈ，Ａｃ）、１．　９５　（ｔ、３Ｈ，Ｃｔ（ｓ　 ）　−”Ｃｎ。 ｍ、ｒ、（ＣＤＣｌ　ｚ　）　δ　９８．０９　（Ｃ−１）、７８．４５．７４ ．５．７３．９．７１７．６５．Ｉ、６３．　Ｉ、　５５．　５．２０．８７（ ＡＣ）、■４、　９２　（Ｃ１−１３）。 実施例２３　エチル６−０−アセチル−３−ヘンシル−２−デオキシ−２−フタ ルイミド−４−０−（２，３，４，６−テトラ−０−アセチルーβ−Ｄ−ガラク １−ノル）−β−Ｄ−グルフピラノノト（化合物７０）の合成モレキュラーノー ブ（３人、ＩｇＬ２．６−シーｔｅｒｔ−ブチル−４−メチルビリジン（４５ｍ ｇ、０．　２２ｎｎｏｌ）およびトリフル酸ｍ（５７ｍｇ、０．２２■０１）を 含有するジクロロメタン（１０ｍい中の化合物９（８０ｍｇ、０．１７ｍｗｎｏ ｌ）の撹拌溶液に、−３０℃で窒素下でジクロロメタン（５ｍＤ中の臭化２゜３ 、　４．　６−テ１−シー０−アセチルーα−Ｄ−ガラクトシルを添加した。混 合物をこの温度て１時間撹拌し、２時間にわたり５°Ｃまて加温した。次に混合 物をジクロロメタン（ｌｏｍｌ、）で希釈し、濾過して、不溶性物質をジクロロ メタン（５ｍｌ）で洗浄した。混合した濾液を飽和炭酸水素す１−リウム水溶液 および水で洗浄し、Ｍｇ５Ｏ＋Ｊ二で乾燥し、そして濃縮した。残渣をシリカゲ ルカラムて、酢酸エチル　ヘキサン、ｌ：２（ｖ：ｖ）を溶出液として用いてク ロマｌ−グラフィーして１２０ｍｇ　（８０９６）のけ題の化合物を得プ二　’ Ｈ−ｎ、ｍ、ｒ、（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ５）　−δ　７．６８．６．　９６ 　（２ｍ、９Ｈ，芳香族）、５３（ｍ、２Ｈ）、５．　Ｉ　３　（ｄ、ｌ）１． 　ＨＩ’　、Ｊｌ、、８．　０Ｈｚ）、４゜９９　（ｑ、　ＩＨ）、４．８２　 （ｄ、　ＩＨ）、４．　Ｇ２　（ｄ、　ＩＨ，Ｈ−１゜Ｊｌ、＋　７．７Ｈｚ） 、４．　５４　（ｄ、ＩＩ（）、４．　４２　（ｄ、ＩＨ）、４３（ｑ、　ｌ　 Ｈ）　、４．　Ｉ　５　（ｍ、２ｌ−（）　、　３．　９　９　（ｍ、２Ｈ）　 、　３．　８７　（ｍ。 ２Ｈ）、３．　７２　（ｍ、２Ｈ）、３．４６　（ｍ、ｌｈＬ　２．＋５．２． １２．２，０９．２．００．１．９８　（５ｓ、１５Ｈ，５ＸＡｃ）、１．００ 　（ｔ、３Ｈ，ＣＨ，）、’″Ｃ−ｎ、ｍ、ｒ、（ＣＤＣＩ＋　）：δ　１０１ ．２．９７．８（Ｃ−１，Ｃ−１’　）、ｌ　４．　８５　（ＣＨｓ　）。 この化合物を耐酸ヒドラジンと接触させ、無水１’ｌ’ｌ酸／ピリジンまたは池 のアセチル化試薬でアセチル化して糖（化合物９０）を得ることにより、上記化 合物６７の２−アミンを再生することかできる。 実施例２４　エチル２−アセトアミド−６−〇−アセチルー２−デオキシー４− ０−　（２，３，４，６−チトラー０−アセチルーβ−Ｄ−ガラクトシル）−３ −〇−（２，３，４−トリー〇−ベンジルーα−Ｌ−フコシル）−β−Ｄ−グル コピラノシトの合成 モレキュラーシーブ（３人、１ｇ）、臭化テトラエチルアンモニウム（４１ｍｇ 。 ０、ｌ　９５ｍｍｏｌ）　、ジメチルホルムアミド（０、１ｍＬ）そしてジイソ プロピルエチルアミン（０，０８７ｍＬ、０．　５ｍｍｏｌ）を含有するジクロ ロメタン（２ｍい中の御粘９０（８０ｍｇ、０．１２９（１）ｏｆ）の撹拌溶液 に、室温て窒素トて、ジクロロメタン（２ｍＬ）中の臭化２．　３．　４−１− リーＯ−ベンジルフコツル（１３０ｍｇ、０、　２６ｎｗｎｏｌ　実施例９によ る）を添加した。混合物を室温で窒素下で７２時間撹拌して濾過し、不溶性物質 をジクロロメタン（１０ｍＬ）て洗浄した。混合した濾液を飽和炭酸水素ナトリ ウム水溶液および水で洗浄してＭ　ｇ　Ｓ　Ｏ４上で乾燥し、濃縮した。残渣を 酢酸エチル・ヘキサン（３：１）（ｖ：ｖ）を溶出液として用いてノリ力ゲル力 ラムのクロマトグラフィーにかけてｌ　Ｉ　５ｍｇ　（９０９６）の標題の三糖 を得た　’Ｈ−ｎ、ｍ、ｒ、（３００ＭＨｚ、ＣＤＣＬ　）：δ　７，３０　（ ｍ、Ｉ　５Ｈ，芳香族）、６．　００　（ｄ、ＩＨ，ＮＨ，Ｊ　８．　０Ｈｚ） 、５゜３８　（ｄ、ＩＨ，ＨＩ　Ｆｕｃ、Ｊｌ、２３．３ｌ−１ｚ）、５．１４ 　（ｄ、ＩＨ。 ＨＩ　Ｇｌｃ、Ｊｌ、２　７．８Ｈ２）、５．　１　（ｍ、ＩＨ）、４．　９８ 　（ｍ。 ２Ｈ）、４．　８０　（ｍ、６Ｈ）、４．　４０　（ｍ、２Ｈ）、４．　３３　 （ｑ、ＩＨ）、４、ｌ　（ｍ、、５Ｈ）、３．　７７　（ｍ、７Ｈ）、３．　４ ８　（ｍ、ＩＨ）、２．０９．２．０７．２．０１．２．００．１．９７　（５ ＸＡｃ、１５Ｈ）、１．　８０　（ｓ。 ３Ｈ，ＮＡｃ）、１．　ｌ　８　（ｄ、３Ｈ，Ｈ６Ｆｕｃ、Ｊｉ、ｓ　６．　６ Ｈｚ）、１．０８７　（ｔ、３Ｈ，ＥｔのＣＨｓ　）ｏ　１２Ｃ−ｎ、　ｍ、　 ｒ、（ＣＤＣＩｓ　）　：δ　９９．８７（Ｃ−Ｉ　Ｇａ１）、９９．１９（Ｃ −Ｉ　Ｇｌｃ）、９７．１８（Ｃ−ｌ　Ｆｕｃ）、１６．６７　（Ｃ−６Ｆｕｃ ）、１４．７９　（ＥｔのＣＨ，） 実施例２５−３０は図２７から３２に記載されるように、修飾シアリルルイス１ およびシアリルルイスＡ構造の合成を例示する。シアリルルイス１はＩｍｍ槽構 造含有しており、一方シアリルルイス１は［１型咳構造を含有する。 実施例２５−３０で使用される一般的方法およびこれらの実施例で用いられるシ アリルトランスフェラーゼとフコシルトランスフェラーゼの調製法は以下に記載 される・ 一般的方法 シリカゲル（メルク（Ｍｅｒｃｋ）、６０　Ｆ２１４）のあらかじめ被覆プレー トを、分析用ｔ、１．　Ｃ，て使用し、エタノール中の５９６硫酸溶液を噴霧後 黒化（ｃｈａｒｒｉｎｇ）させてスポットを検出した。シリカゲル６０（メルク （Ｍｅｒｃｋ）、２３０−４００メツシユ）をカラムクロマトグラフィーに使用 した。イヤトロビーズ（Ｉａｔｒｏｂｅａｄｓ）はヤトｒｙ　ン（Ｉａｔｒｏｎ ）製てあった（注文番号　６ＲＳ−８０６０）。 ミレックスーＧＶ（Ｍｉｌｌｅｘ−ＧＶ）フィルター（０，２２μｍ）はミリボ ア（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）製てあった。ＣＩＩセップーパック（Ｃｕ　５ｅｐ− Ｐａｋ）カートリッジおよびバルクＣ＋　ｓ　シリカゲルはウォーターズ・アソ シェート（Ｗａｔｅｒｓ　Ａｓ５ｏｃｉａｔｅｓ）製てあった。 市販の試薬を化学反応に使用して、溶媒を通常の手順に従って精製し乾燥した。 他に記載かなければ、反応混合物はジクロロメタンによる希釈、および重炭酸す トリウムの希釈溶液、続いて水による洗浄で処理した。硫酸マグネシウム上で乾 燥後、溶媒を浴の温度３５°Ｃまたは必要ならそれより低い温度で真空下で蒸発 させて除去した。 池に記載がなければ、　’Ｈ−ｎ、ｍ、ｒ、は３００ＭＨ２または５００ＭＨｚ で、ＣＤＣ１，中のテトラメチルシランかＤ２０中の２．２２５にセットしたア セトンを内部標準として用いて、周囲温度で記録した。化学シフトおよびカップ リング定数（分裂か観察される）はこれらが−次であるかのように報告して、部 分的ｎ、　ｍ、ｒ、データのみか報告される。”Ｃ−ｎ、ｍ、ｒ　スペクトルは 、ＣＤＣＬ中のテトラメチルソランかり、Ｏ中の６７．４にセリトンたジオキサ ンを参照として、７５．５ＭＨｚで記録した。 凍結ラット肝はペルーフリーズ・バイオロジカルズ（Ｐｅｔ−Ｆｒｅｅｚｅ　Ｂ ｉｏｌｏｇｉｃａｌｓ）製てあった。セファロース（Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ）　６ Ｂ、　Ｄｏｗｅｘ　ｌ　−Ｘ８はファルマソア（Ｐｈａｒｍａｃｉａ）製てあり 、ＣＤＰおよびＣＭＰ−Ｎｅｕ５Ａｃはシグマ（Ｓｉｇｍａ）製てあった。ＧＤ Ｐ−フコースは以下に記載されるように化学合成によって１１られた。池の全色 パフ物質は、分析用のグレー１〜で市販のものであった。 予備実施例へ　βにａ　Ｉ　（１→３／４）βＧｌ　ｃＮＡｃａ　（２→３）シ アリルトう、スフェラーゼの調製 βＧａ　ｌ　（１−３／４）βＧＩｃＮΔｃｃｒ（２−＋３）シアリルトランス フェラーゼ［（ＥＣ２，４，９９，５）、時々［α（２−３）ＳＴＪと呼ばれる ］およびβＧａｌ　（１−＝４）βＧＩ　ｃＮＡｃａ　（２→６）シアリルトラ ンスフェラーゼ［（ＥＣ２，４，９９，１）、時々「α（２→６）ＳＴＪ　と呼 ばれる］を、ワインスタイン（Ｗｅｉｎｓｌｅｉｎ）ら７′に従って、１・１月 ・ン（Ｔｒｉｊｏｎ）ＣＦ−５４（シグマ（Ｓｉｇｍａ）　）を用いて、ラット 肝（ＧＯＯｇ）から抽出した。トリトン抽出物からの酵素を部分的に精製して、 スティチャー（Ｓｔｉｃｈｅｒ）らの方法７６の修飾７７による、チバクロン青 Ｆ３ＧＡ−セファ０−ス（Ｃｉｂａｃｒｏｎ　Ｂｌｕｅ　Ｆ３ＧＡ−３ｅｐｈａ ｒｏｓｅ）で濃縮した。この界面活性剤抽出物（３Ｌ、３．５ｍｇタンパク／糺 ）を、ｌ０ｍＭのカコジル酸ナトリウム（ｐＨ６，５）、０．１５ＭのＮａＣｌ 、２５９６のグリセロール、０１？６のト１月・ンＣＦ−５４（緩衝液Ａ）２部 （緩衝液への間に洗浄工程か入る）中で平衡化した、セファロース６Ｂに結合し たチバクロン青Ｆ３ＧＡ（ザーハ（Ｓｅｒｖａ）　）　（ディージ（Ｄｅａｎ） およびワトソン（Ｗａｔｓｏｎ）”に従って調製される）のカラム（８／２０ｃ ｍ）にかけた。このカラムは同一の緩衝液でタンパクか溶出しなくなるまで洗浄 して、次に２．０ＭのＮａＣｌを含有する緩衝液Ａで溶出した。シアリルトラン スフェラーゼを含有する活性分画を集めてアミコン（Ａｍｉｃｏｎ）　Ｐ　Ｍ　 ３０膜で限外濾過により濃縮して、２００倍量の緩衝液入に対して透析した。α （２−３）ＳＴをα（２→６）ＳＴから分離して、ハブテンのＮ−サタシニミノ シルステルを利用する当該分野で認識される技術を使用して、マジト（Ｍａｚｉ ｄ）ら７７の開示したハブテン（βＧａ１（１→３）βＧＩｃＮＡｃＯ（ＣＨｚ 　）−Ｃ００Ｈ）を、マッモｌ−（Ｍａｌｓｕｍｏｔｏ）”の記載した活性化セ ファ０−スに共ａ結合して得られたマトリックス（Ｌｅｃ−セファロース）のア フィニティクロマトグラフィーで精製した。〜Ｉ　６０ｍＵのα（２→３）ＳＴ および２゜４Ｕのα（２→６）ＳＴ　（約８６０ｍｇタンパク）を含有する、部 分的に上記色素クロマ１−グラフィーにより精製したこのシアリルトランスフェ ラーゼを、流速５ｍＬ／時で、２．　５ｆｆ！ｌのＣＤＰを含有する等隈の緩衝 液入で希釈した。緩く結合したタンパクを除去するために、平衡化緩衝液でカラ ムを洗浄した。酵素活性測定は、α（２→３）ＳＴが適用時および次の洗浄工程 の間カラムに強く吸着するが、大部分の不活性タンパクおよびα（２→６）ＳＴ は遅滞なく溶出されることを示した。次にα（２−３）ＳＴを、０．２Ｍのラク トースを含有する緩衝液入でカラムから溶出した。α（２→３）ＳＴを含ず丁す る分画（各２ｍＬ）を集め、アミコンＰＭ３０膜の小カラム（〜Ｉ　ｍＬ）に濃 縮した。この濃縮物を２００倍量の５０面のカコジル酸す］−リウム（ｐＨ６， ５）、０．２５ＭのＮａＣｌ、５０９６のグリセロール、０．＋０６の１・１月 ・ンＣＦ−５４に対して透析して、−２０℃で保存した。この調製物（比活性２ ．７Ｕ／ｍｇタンパクまで８２，０００倍に精製した）を、βＧａ１（１→４） βＧＩ　ｃＮＡｃ−０−（ＣＨ２）＊　Ｃ００ＣＨｓ（化合物２２ａ）を受容体 として予備シアリル化を実行して、生成物を’Ｈ−ｎ。 ｍ、ｒ　分光分析およびｔ、１．　ｃ、により分析すると、α（２→６）ＳＴ不 活性全く見られなかった。 予備実施例Ｂ　ヒト乳からのβＧａｌ　（１→３／４）βＧ］ｃＮＡｃａ　（＋ −＞３／４）フコノルトランスフェラーゼの調製（ＥＣ２，４，１，６５）この 酵素は、パルシック（Ｐａｌｃｉｃ）ら２５の記載したＧＤＰ−ヘキサノールア ミン・セファロースのアフィニティクロマトグラフィーを用いた方法に従って、 ルイスａ４ｂ＋　トナーから得たヒト乳から精製した。 実施例２５　出発物質の合成　受容体の合成：化合物２０ｂ、２０ｃ、２２ｂ、 ２２ｃ、２２ｄ　（図２９） △、８−メトキンカルボニル２．　３．　４．　６−テトラ−０−アセチルーβ −Ｄ−がラクトピラノツルー（１→３）−０−２−アジド−２−デオキソ−β− Ｄ−グルコピラノント（化合物１１９）および８−メトギシカルボニル２．　３ ．　４．　６−テ１〜ラー０−アセチル−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１→ ４）−０−２−了ノト−２−デオギンーβ−Ｄ−グルコビラノット（化合物１２ １）の調製無水塩化メーｆルン（５ｍＬ）中のスルホン酸トリメチルシリルｉ・ リフルオロメタ：／（０，４６０ｇ、１．９４ｏｗｎｏｌ）溶液を、２２°Ｃて 撹拌しているジクロロメタン中の化合物１７′２（１，２０ｇ、１．　９４ｏｗ ｎｏｌ）　、化合物＋８　（０，７５７ｇ。 １、　９４ｍｍｏｌ）そしてモレギュラーノーブ４人（２ｇ）の混合物に滴下し て注入した。２時間ｉ＆、１−リエチルアミンの添加により反応を停止させて、 混合物を濾過して通常とおり処理した。回収した物質を、ヘギサンと酢酸エチル の３．１混合物を溶出液としてノリ力ゲル（１５０ｇ）のクロマトグラフィーに かけて、β（ｌ→３）とβ（＋−４）三糖（１，ＩＯｇ、６０９６）の混合物か 得られるか、この段階ては両ｔは分離てきなかった。 塩化テＩ・ラエチルアンモニウム（０，ｌ　９６ｇ、１．　Ｉ　８ｍｍｏｌ）と 無水フッ化カリウｌ、（０，２９９ｇ、５．　Ｉ　５ｎｗｎｏｌ）を、無水アセ トニトリルの１、記三糖（０．４６０ｇ、０．　４　８　７１ＴＩＩｌｌ）Ｉ） の混合物溶液に添加した。２２°Ｃて２４時間１８、酢酸（　１　−　５ｍｌ） を添加して溶奴を真空で蒸発させた。残渣をクロｌ：ｆｆ：ｆ：ルム（２０ｍＬ ）に溶解して、重炭酸す］・リウムの希釈溶液、次に水で洗浄した。回収した相 物質を酢酸エチルとへキサンの１．１混合物を溶出液どして用いるノリ力ゲル（ ３６ｇ）のクロマ１−グラフィーにかけて（１→４）、三糖Ｉ２１（１５７ｍｇ 、４６９６）と（１→３）三糖１１９（９６ｍｇ、２８％）を得た。 三糖１２１　：　［α］Ｄ２ｏ　＋６．　９°　（ｃ　１．０，ＣＨＣＩｔ）　 ’Ｈ　ｎ。 ｍ．ｒ．　（ＣＤＣｌ２）　５．３８１　（ｄ，ＩＨ，Ｊｒ．４　３．５Ｈｚ， Ｈ−４゛）、５．　２２２　（ｄｄ，　ＩＨ，　、Ｌ，ｒ　８．　０Ｈｚ，　Ｊ ｒ．ｒ　１０．　０Ｈｚ．　Ｈ−２’　）、５．　０１４　（ｄｄ，　ＩＨ．　 Ｈ−３’　）、４．　６２８　（ｄ，　ＩＨ．　Ｈ−１’　）　、　４．　２５ ７　［ｍ，　Ｈ−ｌ　（ｄ，　Ｊｌ，２　８．　０Ｈｚ）を含む］、３、４２０ −３．６４０　［ｍ．ＣＯ．ＣＨ＋　（ｓ，３．６５０）を含む］、２。 ２２７　（ｔ，２Ｈ，Ｊ　７．５Ｈｚ．ＣＨ２　ＣＯ２　）、２．＋５０、２． １００（２）、　１．　９５０　（３ｓ．　＋２８，　４　０ΔＣ）、　１．　 ６００　（ｍ，　４Ｈ．　メチ（／ン）、１．３００　（ｍ，８ｉ（、メチレン ）：ニー糖１１９：　［α］Ｄ”−１−７．８°　（ｃ　ｌ，　ＣＨＣＩｓ　） 　’Ｈ−ｎ．　ｍ。 ｒ．　（ＣＤＣＬ）　５．３５９　（ｄ．ＩＨ，Ｊ．、４．　３．２Ｈｚ）、５ ．２２５　（ｄｄ，ＩＨ，Ｊ．、２　８．０，Ｊｔ．ｓ　ｌＯＨｚ，Ｈ−２’　 ）、５。 ０１３（ｄｄ，　目土　Ｈ−３°　）、４．　５２４　（ｄ．　ＩＨ．Ｈ−１’ 　）、４．　３００　（ｄ，　Ｊｌ，２　８．　ＯＨｚ，　Ｈ　Ｉ）、３．　６ ２８　（ｓ，　３Ｈ。 ＣＯ□ＣＨ．　）、２．２３０　（ｔ，　２Ｈ，　Ｊ　７。５Ｈｚ．　ＣＨ２　 Ｃｏｔ　）、２。 １５０、２　０８０、２　０００、１．９２０　（４ｓ，１２Ｈ，４　０Ａｃ） 、１、６００　（ｍ．４比　メチレン）、１．３００　（ｍ，８１（、メチレン ）。 同定目的で両三糖をピリジンと無水耐酸の混合物中て６了セチル化した。 １２１の過アセチル化誘導体　５．３１４　（ｄｄ．ＩＨ，Ｊｒ，４　３．５。 、■い，＜　ｌＨｚ，　Ｈ　４’　）、５．　０４７　（ｄｄ，　ＩＨ，　Ｊ， 、、、、８．　Ｏ。 Ｊｔ．３　１０．０Ｈｚ，Ｈ−２’）、４．８７０−４。９７０　ｒｍ，　２Ｈ ，　Ｈ−３．　４．　９２３　（ｄｄ，　、Ｌ．、、〜Ｊｒ，ｃ　ｌ　Ｏ．ＯＨ ｚ）および［Ｉ−３。 （４，９０３，ｄｄ）を含む］、４．　４２０　［ｍ，　２Ｈ．　Ｈ−１’　（ ｄ）を含む］、４．３００　（ｄ，Ｊｌ＋２　８．ＯＨｚ．Ｈ−１）、３．６２ ７［ｍ。 Ｃｏｔ　ＣＨｙ　（ｓ．３．＋３２７）を含む］、３．３３５　（ｄｄ，ＩＨ， Ｈ−２）、２、２３０　（ｔ，Ｊ　７．５Ｈｚ，ＣＨ．Ｃｏ．）、２　０８０、 ２，０７０、２、０５０、２．０１０、１．　９８０、１．　９３６　（５ｓ， 　ｌ　８Ｈ，　６０Ａｃ）、１．５７０　（ｍ．４Ｈ．　メチレン）、１．　２ 　１　０　（ｍ，　８１−（、メチレン）。 化合物＋１９の過アセチル化誘導体　５．１２ｏ　（ｄｄ，ＩＨ，Ｊｓ，４　３ 。 ５、Ｊ，、、、　１．ＯＨｚ．）（−４’）、５．　０８０　（ｄｄ．　ＩＨ， 　Ｊｌ．ｔ７、８，Ｊｒ．２　ＩＱ．ＯＨｚ，Ｈ　２’　）、４．９８０　（ｄ ｄ．ＩＨ，Ｈ−３゛　）　、４．　８７５　（ｄｄ，　ＩＨ，　Ｊ．、、〜Ｊ． ，，　〜Ｉ　Ｏ．　ＯＨｚ，　Ｈ−４）　、４、７　１　５　（ｄ，　ＩＨ，　 Ｈ−１°）、４．２５７　（ｄ，ＩＨ，Ｊ，、、８．０Ｈｚ，Ｈ−１）、３．６ ２７　（ｓ，３Ｈ，ＣＯ．ＣＨ．）、３．　３２０　（ｄｄ，　ＩＨ．　Ｊｔ， ３　ＩＱ．　ＯＨｚ．　ｔ（　２）、２．　２３０　（ｔ．　Ｊ　７．　５Ｈｚ 。 ＣＨ２ＣＯ２　）、２．０８０、２、０５０、２　０２０、２．０１０、１．９ ７０、　（６ｓ，＋８Ｈ，６　０Ａｃ）、１．６００　（ｍ，４Ｈ，　メチレン ）、１。 ２５０　（ｍ．８Ｈ，　メチレン）。 Ｂ　８−メトキンカルボニルオクチルβ−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１−３） −Ｏ−２−アジド−２−デオキシーβ−Ｄ−グルコピラノシド（化合物＋２０１ ））の調製 メタノール中のすトリウムメｉーキットの触媒量の各駅溶液を、メタノール（２ ｍＬ）中の化合物＋１９　（０．０４５ｇ、（］、０　６　４ｍｍｏｌ）の溶液 に添加した。２２°Ｃて５時間後、Ｄｏｗｅｘ　５０Ｗｘ８（）（’″撃）で中 和および濾過して、溶媒を真空下て蒸発させて純粋な１２０ｂ（３０ｍｇ、８８ ９６）を得た，　［　α］　、　ｔ６−１１　７°　（ｃ　Ｏ．　６５，　Ｈ２ 　０）　’Ｈ−ｎ．　ｍ．　ｒ．　（ＣＤ＊　ＯＤ。 ＤＯＨ：　４．８０）　δ　４．　４５　（ｄ，　ＩＨ，　Ｊ　７，　ＯＨｚ） および４．３４　（ｄ，ＩＨ，Ｊ　７．５Ｈｚ）：Ｈ−１およびＨ−１’　、３ ．　６　１　（ｓ。 ｃｏ２ｃｒ−ｔ，＞、２．２７　（ｔ，２ｔ（、Ｊ　７．５Ｈｚ，ＣＨ２　ＣＯ ２）、１。 ５８　（ｍ，　４）（）および１．３（］　（ｍ，８Ｈ）　メチレン。 Ｃ　８−メトキンカルボニルオクチルβ−Ｄ−ガラクトピラノシル−（＋−３） −〇ー２ーアミノー２ーγ第４′ノーβ−Ｄ−グルコピラノシ１　（化合物１２ ０Ｃ）の調製 化合物１２０ｂ　（０．０１８ｇ、０．　０　３　４ｎｗｎｏｌ）を、大気ＩＥ で６時間メタノール（２ｍｌ）中の炭素（５ｍｇ）上の５０６バラシウムの存在 下で水素化した。セライト（Ｃｅｌｉｔｅ）で濾過したｉＬ溶媒を蒸発させて、 残渣をクロロホルムとメタノールの混合物を溶出液として用いるイヤトロビーズ （Ｉａｔｒｏｂｅａｄｓ）　（２ｇ）のクロマトグラフィーにかけて純粋な化合 物１　２０ｃを得た：　［α］．，２０ー４．　２。 （ｃ　０．　４８　）（２０）　：　’Ｈ−ｎ．　ｍ．　ｒ．　（Ｄ２０，　４ ．　８０のＤＯＨ）：δ　４　５６および４．　４８　（２ｄ，各ＩＨ．　Ｊ　 ７．　５Ｈｚ）・Ｈ−１およびＨ１’　、３．　７０　（Ｓ．　ＣＯ２　ＣＨ３ 　’）、２．　９０　（〜ｔ．　ＩＨ，　Ｊ　９．　５Ｈｚ．　Ｈ　２．）　、 　２．　３９　（ｔ，　２　ト（、Ｊ　７．　５Ｈｚ，　ＣＨ２　ＣＯ２　）　 、　１．　６２　（ｍ．　４＋（）および１．３５　（ｍ．８Ｈ）：メチレン。 Ｄ　８−メ）−ギノカルポニルオクチルβ−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１−４ ）−〇ー２ーアシ１ーー２ーデオキシーβ−Ｄ−グルコピラノシＩ・（化合物１ ２２ｂ）の調製 メタノール中のナトリウムメトキシ１〜′の触媒量の希釈溶液を、メタノール（ ２ｍＬ）中の化合物＋２１　（０．０２７ｇ、０．　３８ｍｍｏｌ）の溶液に添 加した。２２°Ｃて５時間ｉ＆、Ｄｏｗｅｘ　５０Ｗｘ８（）Ｉ”型）で中和お よび濾過して、溶媒を真空下で蒸発させた。残渣をクロロポルムとメタノールの ６５・３５混合物を溶出液として用いるイヤトロビーズ（ｌａｔｒｏｂｅａｄｓ ）のクロマ１−グラフィーにかけて化合物＋　２２ｂをｉ！ｔた（０．０１９ｇ 、９２９６）　；　［α］。２６−１２．４。 （ｃ　Ｏ．　７３　ＣＨ３　０Ｈ）　；用−ｎ．　ｍ．　ｒ，　（ＣＤ．　ＯＤ ，　ＤＯＨ）　：６　４、３２　（ｄ，　ＩＨ，　Ｊ　７．　５Ｈｚ）および４ ．　３０　（ｄ，　ＩＨ，　Ｊ　８０Ｈｚ）：Ｈ−１およびＨ−１’　、３．６ ０　（Ｓ，ＣＯ２　ＣＨＩ）、３．１３（ｄｄ．　Ｊｌ．２　Ｂ．　Ｏ，　Ｊｔ ，、　１０．　０Ｈｚ，　Ｈ−２）、２．　２７　（ｔ，　２Ｈ，　Ｊ　７．　 ５Ｈｚ．　ＣＨ２　ＣＯｔ　）、１．　５６　（ｍ，　４Ｈ）および１．２９（ ｍ，　８Ｈ）　メチレン。 Ｅ　８−メトキンカルボニルオクチルβ−Ｄ−がラフ１−ピラノンルー（１−４ ）−〇ー２ーアミノー２ーデオキソーβ−Ｄ−グルコピラノシト（化合物１２２ Ｃ）の調製 化合物＋２２ｂ　（０．０１６ｇ、０．　２９ｍｍｏｌ）を２２°Ｃて５時間、 メタノール（５ｍＬ）中の炭素（１０ｍｇ）上の５９６バラジウ１６の存在下で 水素化した。セライト（Ｃｅｌｉｔｅ）で濾過した後、溶媒を蒸発させて残渣を クロロホルムおよびメタノールの８・２混合物を溶出液として用いてイヤトロビ ーズ（Ｉａｔｒｏｂｅａｄｓ）　（０．　２５ｇ）のクロマトグラフィーにかけ て純粋な１２２Ｃを得た；　［α］。１０２。 ８°　（ｃ　Ｏ．　４２　ｆ（２０）。 Ｆ　８−メトキンカルボニルオクチルβ−Ｄ−がラクトピラノシル−（１→４） −〇ー２ーデオキシー２ープロピオンアミド−β−Ｄ−グルコピラノシド（化合 物＋２２６）の調製 化合物＋２１　（０．０１７ｇ、０．　０　３　２ｎｗｎｏｌ）を大気圧で８時 間、メタノール（８ｍＬ）中の炭素（５ｍｇ）上の５９６パラジウムの存在Ｆて 水素化した。セライト（Ｃｅｌｉｔｅ）での濾過および溶媒の蒸発後、残渣を少 量のトリエチルアミン（０。 １５０ｍＬ）を含ずｒする無水メタノール（３ｍＬ）に溶解した。無水プロピオ ン酸（０．　１５０ｍＬ）を添加して、混合物を２２°Ｃて４時間撹拌したｉ＆ ，溶媒を乾燥するまで蒸発させた。残渣を、２２°Ｃで１８時間、ピリジンと無 水酢酸の２：ｌ混合物中てアセチル化した。メタノールの添加後、混合物を通常 とおり処理して溶媒の蒸発後、残渣を酢酸エチルとヘキサンの１：１混合物を溶 出液として用いてシリカゲルのクロマトグラフィーにかけて純粋な化合物１２２ ｄのヘキサ−〇−酢酸塩を得た；　’Ｈｎ、　ｍ、ｒ、（ＣＤＣＩｓ　）　：　 ５．５０　（ｄ、ＩＨ，Ｊ９．５Ｈｚ、ＮＨ）、５．３２　（〜ｄ、Ｊｒ、４　 ３．５Ｈｚ、Ｈ４°）、５．０７　（ｍ、２Ｈ，Ｈ−２’およびＨ−３）、４． 　９３　（ｄｄ、ＩＨ，Ｊｒ、−１０，０Ｈｚ、Ｈ−３°）　、４．　４５　（ ｍ、３Ｈ，Ｈ−１およびＨ−１°を含む）、３．６３　（ｓ、Ｃｏ２ＣＨＩ　） 、２．　２５７　（ｔ、２Ｈ，Ｊ　７．　５゜ＣＨ２Ｃ０２）、２．１３７　（ ｄｑ、Ｊ　１．０および７．５Ｈｚ、ＮＨＣＨｔ）、２．１１．２，０７．２． 　０２　（３）、１．９３　（４ｓ、＋２Ｈ，６０Ａｃ）、１．５４０　（ｍ、 ’４Ｈ）、１．２５　（ｍ、８Ｈ）：メチレン、１．　０９　（ｔ、２Ｈ，ＮＨ ＣＨ２ＣＨ，）。 上記三糖を、触媒量のすトリウムメトギシド溶液を含有する無水メタノール（ｌ 　ｍＬ）中で脱−〇−アセチル化した。Ｄｏｗｅｘ　５０Ｗｘ８（Ｈ”型）樹脂 て中和および濾過ｉＬ溶媒を蒸発させて純粋な１２２ｄを得た。［α］　Ｄ！０ 　−１８．０°　（ｃＯ，４３、ＣＩ（、ＯＨ）；　’Ｈ−ｎ、ｍ、ｒ、（ＣＤ ｓ　ＯＤ。 ４、　８０（７）ＤＯＨ）　：δ　４．　３６　（ｄ、ＩＨ，Ｊ　８．　０Ｈｚ ）および４．３３　（ｄ、ＩＨ，Ｊ　７．５Ｈｚ）：Ｈ−１およびＨ−１°、３ ．　６０　（ｓ。 Ｃ０２ＣＨ，）、２．２６　（ｔ、２Ｈ，Ｊ　７．５Ｈｚ、ＣＨｔＣＯ，）、２ ゜１８　（ｑ、　２Ｈ，Ｊ　７．５Ｈ２，ＮＨＣＯＣＨ２）、Ｉ、　５１　（ｍ 、　４Ｈ）および１．　２６　（ｍ、８Ｈ）　：メチレン、１．　０９　（ｔ、 ３Ｈ。 ＮＨＣＯＣＨ，ＣＨ，）。 実施例２６　シアリル化三糖類の合成（化合物１１１ｂ、ｌ１ｌｃ、および１１ １ｄ、図２７Ａ） Δ、８−メトキノカルボニルオクチル（５−アセトアミド−３，５−ジデオギシ ーＤ−グリセロ−α−Ｄ−がラフ１−−２−ノヌロピラノシロン酸）−（２→３ ）−〇−（β−Ｄ−ガラクトピラノシル）−（ｌ→４）−０−（２−アジド−２ −デオキシ−β−Ｄ−グルコビラノント）（三糖１１１ｂ）の調製公知のｌ三糖 １０４（６０，８ｍｇ、０．　０５ｎｗｎｏｌ）を、２２°Ｃで炭素上の５％の パラジウムの存在下で１時間酢酸エチル（１，５ｍＬ）中で水素化して中間体の 遊離酸（シアル酸）を得た。［α］ゎ”−１８，６°　（ｃ、０．　３１　クロ ロホルム）。この生成物を２２°Ｃで１６時間、メタノール中の触媒量のすトリ ウムメトキット Ｐ２てクロマトグラフィーシて三糖１１１ｂを得た（　１　０．　４ｍｇ，　５ 　５９ｃｉ）。 ［ｃｒｌ　ｏ　！′６．　５°　（ｃ．　０．　１７，水）。’Ｈ−ｎ．ｍ．ｒ ．データは以下に報告される。 ８、８−メトキシカルボニルオクチル（ベンジル−５−アセトアミド−４，７。 ８、９−テトラ−０−アセチル−３．５−ジデオキシ−Ｄ−グリセロ−αーＤー ガラクトー２ーノヌロピラノシロン酸）＝（２→３）−０−　（２．４．６−ト リー〇ーアセチルーβ−Ｄ−ガラクト−ピラノシル）−（ｌ→４）−０−　（６ −０−アセチル−２−アミノ−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシド）（三 糖１０９）の調製 硫化水素の気泡を、ピリジン（３２ｍＬ）、水（４．　８ｍＬ）およびトリエチ ルアミン（１．　３ｍＬ）の混合物中の三糖１０４（４００ｍｇ、０．　３２ｎ ｗｎｏｌ）の溶液に通した。２２°Ｃで１６時間後、混合物を乾燥するまで蒸発 させ、トルエンと共蒸発（ｃｏ−ｅｖａｐｏｒａｔｅｄ）させて粗三糖（４３０ ｇ）を得る。少量のこの物質（８５。 ９ｍｇ，　Ｏ，’　０　７ｍｎ＋ｏｌ）をクロマトグラフ４−（１０：Ｉ，トル エン：エタノール）して、１０９（５５ｍｇ、７０９６）を得た。［α］　ｏ　 ＋２　５．　９°　（ｃ．　０。 ２２、りＣＩロホルム）；　’Ｈ−ｎ．ｍ．ｒ．　（ＣＤＣＩｓ　）：６　７． 　２５−７。 ４　５　（ｍ．　５Ｈ．芳香族）、５．　４８０　（ｍ，　Ｈ−８”、５．　４ ２　（ｄ．　Ｊ　１２、ｓｔ−ｔｚ，ベンシリ、ツタ）とオーバーラツプ）、５ ．３４０　（ｄｄ，ＩＨ。 Ｊ，、、ｑ−　２．５，Ｊ−、−８．５Ｈｚ．Ｈ　７”）、５．０５２（ｍ，ベ ンジリック（ｄ）およびＨ−２°を含む　ｄｄ　（Ｊｒ．ｒ　８．　Ｏ．　Ｊｔ ・、、・　ｌＯ．ＯＨｚ）、５．０００　（ｄｄ，　ＩＨ，Ｊｒ．ｃ　３．５Ｈ ｚ．Ｈ　４°）、４、９０４　（ｄ，　ＩＨ．Ｊ　１０．ＯＨｚ，ＮＨ）、４． ８６０　（ｄｄｄ，　ＩＨ。 Ｊｚ−−−、ａ−　４．５，Ｊｌ−ａ＋＋＋４−　１２．５，Ｊａ，、ｒ　Ｉｆ ．ＯＨｚ，Ｈ−４”Ｌ　４．６４０　［ｍ，２Ｈ，Ｈ−１’　およびＨ−３′　 を含む）、３．６６０（ｓ，３Ｈ．ＯＣＨ．）、２．７８０　（ｄｄ，Ｊ，、、 　〜Ｊ．，．　８．５Ｈｚ　Ｈ−２）、２．６０４　（ｄｄ，ＩＨ，Ｊｒ．、、 ｓ−、、　１３．０１（ｚ，Ｈ−３”）、２、３００　（ｔ．Ｊ　７．５Ｈｚ， ＣＨ２ＣＯ２　）、２．２６０、２，１７０、２、１１５、２．０８０　（３） 、２　０５０、１．９８５、１．　８３０　（７ｓ。 ２７Ｈ，８　０Ａｃ，Ｉ　ＮＡｃ）、１．６７０　（ｔ．ＩＨ，Ｊ　Ｈ−３ｅｑ ）、１、６００　（ｍ，６Ｈ，　メチレン）、１．２４０　（ｍ，８Ｈ，　メチ レン）。 Ｃ　８−メトキシカルボニルオクチル（５−アセトアミド−３．５−ジデオキシ −Ｄ−グリセロ−α−り一がラクト−２−ノヌロピラノシロン酸）−（２→３） −〇−（β−Ｄ−ガラクトーピラノンル）シルｌ→４）−０−　（２−アミノ− ２−デオキシーβ−Ｄ−グルコビラノット）（三糖１１１ｃ）の調製純粋な１０ ９（５３ｍｇ、０．　０４ｍｍｏりの溶液を、２２℃て１時間メタノール中で、 炭素上の５０６パラジウムの存在下で水素化する。触媒を濾過してメタノールを 蒸発させると、ノアル酸中間体（４４ｍｇ）、［α］　ｏ　＋ｌ　１．　３°　 （Ｃ．０、２２、水）か得られる。この化合物を２２°Ｃて２４時間、メタノー ル中の触媒量のすトリウムメトキット を蒸発させて残った物質をバイオゲル（ＢｉｏＧｅｌ）　Ｐ　２のクロマトグラ フィーにより精製すると三３１１　１　１　ｃ　（２　９．　５ｍｇ、９９９６ ）、［ｃｒｌ．＋５．５°　（ｃ，　０。 ２２、水）か得られる。’Ｈ−ｎ．ｍ．ｒ　データは以下に報告される。 Ｄ．　８−メトキノカルボニルオクチル（ヘンシル−５−アセ１−アミド−４． ７。 ８、９−テトラ−０−アセチル−３，５−ソデオキソーＤーグリセロ−α−Ｄ− がラクト−２−ノヌロビラノンロン酸）−（２→３）　−０−　（２．　４．　 ６−１−ジ−０−アセチル−β−Ｄ−がラフ１−ーピラノシル）−（１→４）− ０−（６−０−アセチル−２−デオキソ−２−Ｎ−プロピオンアミｉ・−β−Ｄ −グルコピラノシト）（三糖１１Ｏ）の調製 粗アミノ化合物１０９（９８ｍｇ、０．　０８ｍｍｏｌ）を、ピリジンと水の混 合物（ビリノン対水の比は約１０：ｌ）中の粗アミノ三糖１０９の溶液に、無水 プロピオン酸を１０分にオ）たり滴下して添加することによって、Ｎ−プロピオ ン酸化される。混合物を２２°Ｃて一晩撹拌し、真空で蒸発させ、トルエンで共 蒸発させて残渣を尋で、クロマトグラフィー（＋００：１０、トルエン：エタノ ール）により三糖１　１　０　（７４．　４ｍｇ、７１９６）を得る。［ｆｆ］ 　Ｄ　＋Ｉ　Ｏ．　３°　（ｃ．　０。 １７、クロロホルム）；　’Ｈ−ｎ．ｍ．ｒ．　（ＣＤＣＩｚ　）：δ　７．４ ００（ｍ，　５Ｈ，芳香族Ｌ　５．５４３　（ｄ，ＩＨ，７．５Ｈｚ，ＮＨ）、 ５．４８０　（ｍ，　ＩＨ．　Ｈ−８”）、５．　４４０　（ｄ，　ＩＨ．　Ｊ 　１２．　５Ｈｚ，ベンジリック）、５．３４１　（ｄｄ．　ＩＨ，Ｊｒ．ｔ− 　２．５．ＪＴ−、１−　８．５Ｈｚ。 Ｈ−７”）、４．　４９０−５．　１　００　［ｍ，　３Ｈ，ベンジリック（５ ．０５＋。 ｄ，Ｊ　１２．５Ｈｚ）、ｆＩ−２’　（５，０３８，ｄｄ，Ｊｌ．ｒ　８．０ ９Ｊｚ，ｚ　１０．ＯＨｚ）を含むコ、４、８５９　（ｄｄｄ．ＩＨ．Ｊｌ．、 、、４。 ４、６，Ｊｒ．、、＜、１２．５，Ｊａ．、ｖ　１０．５Ｈｚ．Ｈ　４”）、４ ．６１０−４．　６９　［ｍ．　２Ｈ．　Ｈ−１°　（ｄ）およびＨ−３’　（ ｄｄ）を含む］、３、５８０　３．７００　［ｍ，２Ｈ，ＯＣＨｓ　（ｓ．３． ６６８）を含む］、２。 （＋０２　（ｄｄ，　ｌ）−Ｌ　Ｊｓ−−−、ｔ−−−　１２．　５Ｈｚ，Ｈ　 ３”　ｅｑ）、２．　１５０　２、３３０　［ｍ．　ｌ　ＯＨ，　ＣＨｘ　ＣＯ ２　（ｔ，　Ｊ　７．　５Ｈｚ）　。 ＮＨＣＯＣｌｆＬ　（ｑ，Ｊ　７．５）［ｚ）およびアセチル（２．　２６０， 　２．　１８０、２ｓ）を含む］、２．０８８　（４）、２．０１３８、１．　 ９８７、１．　８３８（４ｓ．２１Ｈ，アセチル）、１．６６２　（ｔ．ＩＨ， Ｈ−３”　ａｘ）、１．　５７０　（ｍ，６Ｈ，　メチレン）、１．２４０　（ ｍ，８Ｈ，　メチレン）、１．１３０（ｔ，３Ｈ．ＣＨ２ＣＨ．　）。 Ｅ　８−メトキシカルボニルオクチル（５−アセトアミド−３．５−ジデオキシ −Ｄ−グリセロ−αーＤーガラクトー２ーノヌロピラノシロン酸）−（２→３） −〇−（β−Ｄ−ガラクトピラノシル）−　（＋−４）−０−　（２−デオキシ −２−Ｎ−プロピオンアミド−β−Ｄ−グルコピラノシト）（Ｉｌｌｄ）の調製 三糖！１０（７１ｍｇ、０．　０５５ｎｗｎｏｌ）は、三糖１１１ｃの合成で示 した方法と同一方法で水素化して、中間体（６４ｍｇ、９７９６）、［α］。− ２２．６。 （ｃ，　０．　２３，　クロロホルム）を得る。この物質を通常とおり脱−〇ー アセチル化して、回収した物質をバイオゲル（ＢｉｏＧｅｌ）　Ｐ　２のクロマ トグラフィーにより＋　１　１ｄ　（３９ｍｇ、８３９ｇ）、［ｃｒｌ　、　− ８．　５°　（ｃ．　０．　２，水）を得た。 ’Ｈ−ｎ．ｍ．ｒ　データは以下に報告される。 実施例２７　シアリル化三糖類（化合物１０７ｂ，１０７ｃ、および＋０７ｄ。 図２７Ｂ）の合成 Ａ、８−メトキシカルボニルオクチル（５−アセトアミド−３，５−ジデオキシ −Ｄ−グリセロ−α−Ｄ−がラフ１−−２−ノヌロビラノシロン酸）−（２→３ ）−Ｏ−ＣＢ−Ｄ−ガラクトビラ／シル）−（１→３）−０−（２−アジドー２ −デオキシーβ−Ｄ−グルコピラノシド）（三糖＋０７ｂ）の調製公知の目玉糖 １０３　（６０，８ｍｇ、　０．　０５ｎｗｎｏｌ）を２２℃で１時間、炭素（ ６０ｍｇ）、ｉ−の５９６のパラジウムの存在下て酊階エチル（１，５ｍＤ中で 水素化して、中間体の遊離酸（ソアル酸）　（５７，６ｍｇ、９８．８９６）、 ［α］。−１４７°　（ｃ、０．　１８．　りｏロホルム）；ｉ、ｒ、（クロロ ホルム）：２１２０ｃｎｒ’　（Ｎｚ　）を得た。この中間体を２２°Ｃて１６ 時間、メタノール中の触媒量のすトリウムメトキノｌ−゛を用いて脱−〇−アセ チル化した。バイオレックス−７０（ＢｉｏＲｅｘ−７０）　（バイオラット（ ＢｉｏＲａｄ）製）弱酸性樹脂（Ｈ”！！？）で中和して濾液の蒸発＋＆、残渣 をバイオゲル（ＢｉｏＧｅｌ）　Ｐ　２てクロマトグラフィーして三糖１０７ｂ 　（３６，６ｍｇ、　８８９６）、［α］Ｉ、−１ｏ、ｌ’　（Ｃ，０，３２， 水）を得た。　’Ｈ−ｎ、ｍ、ｒ、データは以下に報告される。 Ｂ　８−メトキノカルボニルオクチル（ベンジル−５−アセトアミド−４，７゜ ８．９−テトラ−０−アセチル−３，５−ジデオギシーＤ−グリセローα−Ｄ− ガラクトー２−ノヌロピラノソロン酸）−（２→３）−０−（２，４，６−トリ ー〇−アセチルーβ−Ｄ−ガラクトピラノノル）−（１→３）−０−（６−０− アセチル−２−アミノ−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシド）（三糖１０ ５）の調製 硫化水素の気泡を、ピリジン（４０ｍＬ）、水（６ｍＬ）およびトリエチルアミ ン（１，５ｍＬ）の混合物中の三糖１０１０３（５００、ｏ、４ｎｗｎｏｌ）の 溶液に通した。 ２２°Ｃて１６時間後、混合物を乾燥するまで蒸発させ、トルエンと共蒸発（ｃ ｏ−ｅｖａｐｏｒａｔｅｄ）させて粗生成物（４５０ｍｇ）をｉ！ｔた。少量の この物質（１０５ｍｇ）のクロマトグラフィー（１０：Ｌｌ・ルエンーエタノー ル）により四糖１０１０５（８６，７５９６）、［αＬ”−２１，１’　（Ｃ， ０，０２，クロロホルム）を（！？た。　’Ｈ−ｎ、ｍ、ｒ、（ＣＤＣＩｇ）： δ　７．　３２−７．　４５　（ｍ。 ５■］、芳香族）、５．４８４　（ｄｄｄ、ＩＨ，Ｊ、。、、−８，５，Ｊ、− 、、・、２゜５、　Ｊ、−、ｒ−５，５Ｈｚ、　Ｈ８”）、５．　４１８　（ｄ 、ＩＨ，Ｊ　１２．２Ｈｚ、　ベンジリック）、５．　２９１　（ｄｄ、ＩＨ， Ｊｃ・、ｔ−２，７Ｈｚ、Ｈ−７”）、５．０８０　（ｄｄ、　Ｊ、、、８．０ ．　Ｊｒ、ｒ　１０．０Ｈｚ、　Ｈ−２’　）、５．　０２２　（ｄ、ＩＩＩ、 Ｊ　１２．　２Ｈｚ、ベンジリック）、４．９８０　（ｂｄ、ＩＨ，Ｊｒ、ｒ　 ３．５Ｈｚ、　Ｈ４’　）、４．８９０　（ｄ、ＩＨ。 ＪｒＮｅ　ｌ　０．５Ｈｚ、　ＮＨ）、４．８２９　（ｄｄｄ、ＩＨ，ＪＳ−、 、、、、４゜５、　Ｊｒ−−、ｒ　１２．５．　Ｊｃ−ｓ−ＩＱ、　５Ｈｚ、　 Ｈ４”）、４．７３９（ｄ、ＩＨ，Ｊｌ、ｒ　８．　ＯＨ２，ＨＩ’　）、４． ６７０　（ｄｄ、ＩＨ。 Ｊｒ、３１０．３．　Ｊｓ、ｒ　３．５Ｈｚ、　Ｈ３’　）、３．６３５　（ｓ 、　３Ｈ，ＯＣＨ，）、２．８５１　（ｄｄ、ＩＨ，Ｊｌ、２　Ｂ、　５．　Ｊ ｌ、ｓ　９．５Ｈｚ、　Ｈ２）　、２．　５８６　（ｄｄ、ＩＨ，Ｊｒ、−、ｓ −、、＋　３．０Ｈｚ、　Ｈ−３”　ｅｑ）、２．２６５　（ｔ、ＩＨ，７，５ Ｈ２，ＣＨＩ　Ｃｏｔ　）、２．２２２．２、＋５０．２．０６０．２．　０５ ０．２．　０４５．２．　０４０．２．　０１８、ｌ　９５８．１．８０５　（ ９ｓ、各３Ｈ，８０Ａｃ、ｌ　ＮＨＡｃ）、１．６５０　（ｔ、ＩＨ，ＩＩ　３ ”　ａｘ）、１．５（ｉ４　（ｍ、Ｇ＋１．　メ・ｆルン）、１．　３００　（ ｍ、８Ｈ，メチレン）。 Ｃ，８−メトキンカルボニルオクチル（５−アセトアミド−３，５−ジデオキシ −Ｄ−グリセロ−α−Ｄ−ガラクトー２−ノヌロピラノシロン酸）−（２→３） −〇−（β−Ｄ−ガラクト−ピラノツル）−（ｌ→３）−０−（２−アミノ−２ −デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシド）（三糖１０７ｃ）の調製メタ／−ル（ １ｍＤ中の純粋な三糖１０５　（８２ｍｇ、　０．　０７ｍｍｏｌ）　０）溶液 を、炭素（８２ｍｇ）上の５９６バラノウムの存在下で２２°Ｃて１時間水素化 した。触媒を濾過して蒸発させると、中間体（７６ｍｇ）、［α］、２°＋６． 　０’　（ｃ、０゜４、クロロホルム）か得られた。この化合物（７２ｍｇ、　 ０．　０６ｒｒｔｒｒｏｌ）を、メタノール（３ｍＬ）中の触媒量のすｌ・リウ ムメトキンドを用いて２２°Ｃで２４時間脱−〇−アセチル化した。酢酸で中和 後、溶液を蒸発させて残った物質をバイオゲル（ＢｉｏＧｅｌ）　Ｐ　２のクロ マトグラフィーにより精製して三糖１０７ｃ　（４５，５ｍｇ）　、８８９６、 ［ｃｒ］ｏ６．３°　（ｃ、０．　３５．水）を得た。’Ｈ−ｎ、ｍ。 ｒ、データは以下に報告される。 Ｄ　８−メＩ・ギノカルポニルオクチル（ベンジル−５−アセトアミド−４，７ ゜８．９−テ］・ター０−アセチル−３，５−ノデ才キシーＤ−グリセロ−α− Ｄ−ブｆラクト−２−ノヌロビラノノロン酸）−（２→３）−０−（２，４，６ −トリー〇−了セチルーβ−Ｄ−ガラクトピラノシル）−（ｌ→３）−０−（Ｇ −０−アセデル−２−チオキシ−２−Ｎ−プロピオンアミド−β−Ｄ−グルコピ ラツノＩ・）（三糖１０６）の調製 無水プロピオン酸（０，５ｍいを、ピリジン（９，５ｍＬ）と水（０，９ｍＬ） の混合物中の粗アミノ三糖１０５　（１４０ｍｇ、　０．　ｌ　ｌｎｗｎｏｌ） の溶液に、１ｏ分にわたり滴下して添加した。混合物を２２°Ｃて一晩撹拌し、 真空で蒸発させ、トルエンで共蒸発させて残渣を得て、クロマトグラフィー（１ ００：１０、トルエン　エタノール）により、少量の４−〇−プロピオン酸化三 糖を含ａする三糖１０１０６（ｌｌＯ，７２９６）を得た。　’Ｈ−ｎ、ｍ、ｒ 、（ＣＤＣＩｓ　）：δ　７゜３１０−７．　４５０　（ｍ、５Ｈ，芳香族）、 ５．　８１２　（ｄ、ＩＨ，Ｊ　８．　ＯＨｚ、ＮＨ）、５．　４５　［ｍ、　 Ｈ−８−およびベンジリック（ｄ、Ｊｌ２．５Ｈｚ、ＮＨ）を含む］、５．　２ ８０　（ｄｄ、　Ｊｒ、７−　２．　７．　Ｊｒ、ｒ　８゜５＋−１ｚ、　Ｈ− ７”　Ｌ　５．　３００　［ｍ、ベンジリック（ｄ）を含むコ、３．６３ｏ　（ ｓ、３Ｈ，ＯＣＨ，）　、　２．　５７８　（ｄｄ、　ＩＨ，Ｊ、−、、、、４ ，５゜Ｊｒ、、、ｒ、、　１３．０Ｈｚ、Ｈ３”　ｅｑ）、２．２６２（ｔ、２ Ｈ，Ｊ７゜５Ｈｚ、ＣＨ＝　ＣＯ２）、２．２００　（ｑ、ＮＨＣＯＣＨ＊　） 、２．１４７．２゜０６０．２．０４５　（５）、１．９５５．１．８００　（ ５ｓ、２７Ｈ，８０Ａｃ、Ｉ　ＮＡｃ）、１．６３０　（ｔ、ＩＨ，Ｊ、−、、 ，４−１３，０Ｈｚ、Ｈ−３“）、１．　５７０　（ｍ、６Ｈ，メチレン）、１ ．　２４０　（ｍ、８Ｈ，メチレン）、１．　Ｉ　３０　（ｔ、７．５Ｈ２，Ｃ ＯＣＨ２ＣＨｓ　）。 Ｅ　８−メトキシカルボニルオクチル（５−アセトアミド−３，５−ジデオキシ −Ｄ−グリセロ−α−Ｄ−ガラクトー２−ノヌロビラノンロン酸）−（２→３） −〇−β−Ｄ−ガラクトーピラノシル−（Ｉ→３）−０−（２−デオキシ−２− Ｎ−プロピオンアミド−β−Ｄ−グルコピラノシド）（三糖１０７ｄ）の調製三 糖１０１０６（１０５，０，０８２ｍｍｏｌ）を、ｌ０７ｃの合成で示した方法 と同一方法で脱保護した。バイオゲル（ＢｉｏＧｅｌ）　Ｐ　２のクロマトグラ フィーにより１０７ｄ　（６０，８ｍｇ、９５９６）、［αｌｂ”１６．６°　 （ｃ、０．　３２．水）を得た。　’Ｈ−ｎ、ｍ、ｒ、データは以Ｆｆ：？ｉｌ 告される。 実施例２８　予備的フコシル化 ｉ、ＧＤＰ−フコースの合成 Ａ　リン酸水素ビス（テトラ−ｎ−ブチルアンモニウム）の調製水酸化テトラ− ｎ−ブチルアンモニウム（４０９６水溶液、ｗ／ｗ、約１５０ｇ）を、ｐＨが７ に達するまで、リン酸（８５９６水溶液、ｗ／ｗ、１８ｇ、０゜１５５ｍｍｏｌ ）の水溶液（１５０ｍＬ）に滴下して添加した。次に水を真空下で蒸発させてノ ロツブとして、これを無水アセトニトリル（２Ｘ４００ｍＬ）と、さらに無水ｌ ・ルエン（２ｘ４００ｍＬ）と共蒸発させた。生じた白色固体（７５ｇ）を真空 下て乾燥させて、使用時まで真空下で五酸化リン上に保存した。 Ｂ　β−Ｌ−フコピラノシルー１−リン酸の調製無水アセトニトリル ンモニウム）　（５８ｇ，　１２７．　８１ｍＯＩ）を、室温て窒素下でモレキ ュラーシーブ（４人、２０ｇ）のｒγ存在下１時間撹拌した。無水トルエン（１ ００ｍＬ）中のトリーＯーアセチルフコンルー１−臭化物（新たにヌーネッ（Ｎ ｕｎｅｚ）ら■の方法て、３１ｇ、９３ｏｗｎｏｌの四酢酸しーフコースから調 製される）の溶液を、０°Ｃに冷却した上記溶液に約０．５時間滴下して添加し た。０°Ｃでさらに１時間後、混合物を室温にして３時間撹拌した。ｔ．　ｉ． 　Ｃ．　（ＩＩＩ、トルエン：酢酸エチル）は、ベースライン上の主スポットと 、より早く動く数種の小さいスポットを示した。 混合物をセライト（Ｃｅｌｉｔｅ）のパッド上で濾過して（さらにアセトニトリ ルて洗浄した）、溶媒を真空下で蒸発させて赤色のシロップを得た。この物質を 水（４００ｍＬ）に溶解して、酢酸エチルで抽出した（２５０ｍＬ、２回）。次 に水層を真空下で蒸発させて黄色のソロツブか残り、ここに水酸化アンモニウム ＜２５９６水溶液、２００ｍＬ）を添加した。混合物を室温で３時間撹拌して、 そのｆ＆ｔ．　］。 ｃ．　（６５：３５：８、クロロホルム：メタノール：水）はベースラインスボ ツ１−を示した。溶媒を真空下で蒸発させて黄色のシロップを得て、これを水（ ４００ｍシ）で希釈した。この溶液のｐｉ−ｔを確認して、もし必要ならは少量 の塩酸の添１１によって７にした。溶液をゆっくりイオン交換樹脂Ｄｏｗｅｘ　 ２ｘ８　［２００−４００メｙ’／ユ、５Ｘ４５ｃｍ、メタノール（８００ｍＬ ）、水（１２００ｍＬ）、重炭酸アンモニウム（ＩＭ、ｌ　６００ｍＬ）および 水（１２００ｍＬ）による樹脂の逐次洗浄によって調製した重炭酸塩型］のカラ ムに吸収させた。次にカラムに水（１０００ｍｌ）を流して、続いて重炭酸アン モニウムの溶液（０，５Ｍ、２．３ｍＬ／分、−晩）を流した。溶出物を分画（ １５ｍＬ）に集めて、生成物をｔ、１゜０５　ブレー１−にスボｙ　ｈしたｉ＆ 、黒化させて検出した。分画２ｏがら５７をプールし、真空下で蒸発させると白 色固体が残り、これをさらに水（３Ｘ３００ｍＬ）て共蒸発させて、最後の５０ ｍＬを凍結乾燥して、次に残ｉ１を真空ポンプで乾燥して、β−Ｌ−フコピラノ シルシルーリン酸（９，５ｇ、４０９６）を、　ｌ）（ｎ。 ｍ、ｒ　スペクトルてδ＝１．９４０に一重項で同定される、少量の酢酸アンモ ニラｌ、を含（Ｔするβとαアノマー０月２：ｌ混合物として得た。この生成物 をゆっくりＤｏｗｅｘ　５Ｘ８樹脂（＋００−２００メツシユ、ｌ−リエチルア ンモニウ１．ヘッ）のカラムに流し、水で溶出して、溶出物の凍結乾燥後に粘着 性ゴムとし”Ｃβ−Ｌ−フコピラノンルー１−リン酸のヒス−トリエチルアンモ ニウム塩を得ｔこ。’Ｈ−ｎ、ｍ、ｒδ４．８４０（ｄｄ、Ｊｌ、！＝Ｊ１．ｒ ＝７．５Ｈｚ。 Ｈ−１）、３．　８２　（ｑ、ＩＨ，Ｊｉ、ｓ　６．　５Ｈｚ、Ｈ５）　、　３ ．　７５０（ｄｄ、ＩＨ，、Ｌ、＋　３．　５．　Ｊ４＋ｓ　１．　ＯＨｚ、Ｈ −４）、３．６７９（ｄｄ、ＩＨ，Ｊ２．２　１０．　０１（ｚ、Ｈ−３）、３ ．５２０　（ｄｄ、ＩＨ，Ｈ−２）、１．　９４０　（ｓ、酢酸塩）、１．　２ ６　（ｄ、　Ｈ−６）。３．　２０　（Ｑ。 と少量のトリエチルアミンを消失するかも知れないトリエチルアンモニウム塩で あることを示す。”Ｃ−ｎ、ｍ、ｒ　δ：９８．　３　（ｄ、Ｊｃ、＋−３，４ Ｈｚ。 Ｃ−１）、７２．　８　（ｄ、Ｊｃ２ｐ　７．　５Ｈｚ、Ｃ２）、１６．４　（ Ｃ−６）；”Ｐ−ｎｍｒ　δ　＋２．６　（ｓ）。 β−Ｌ−フコピラノノルシルーリン酸は、水中２２°Ｃて長期保存（１０以上） するとゆっくり分解するよってある。従って、この物質を２２°Ｃまたはそれ以 上の温度で水溶液として放置、扱い、保ｒｒシてはならない。この場合、この物 質を一１８°Ｃて保持し、次の工程で使用する前に五酸化リン上で真空下で乾燥 させた。 Ｃ，グアノシン５°　−（β−１−フコピラノノル）−二リン酸の調製グアノノ ン５゛−（β−１−フコピラノシル）−二リン酸は、β−Ｌ−フコピラノツルー １−リン酸から、以Ｆに述へる当該分野で認められている２つの異なる方法を用 いて調製した 方法　＃１ β−Ｌ−フコピラノンルー１−リン酸とグアノシン５°　−モノホスホモルホリ デート（４−モルホリン−Ｎ、　Ｎ’　−ジ−シクロへキノルー力ルポギサミジ ン塩、ソグマ社（Ｓｉｇｍａ）より入手可能、セントルイス、ミズーリ、ｒＧＭ Ｐ−モルホリゾート」）を、ヌー不ツ（Ｎｕｎｅｚ）の原方法８０の最近の修飾 ｆｆ１．ＩＩに記載されたように反応させた。次にトリーｎ−オクチルアミン（ ０，８００ｇ、アルドリッチ・ケミ力Ａ４１：（Ａｌｄｒｉｃｈ　Ｃｈｅｍｉｃ ａｌ　Ｃｏｍｐａｎｙ）、ミルウォーキー、ライスコンシン）を、無水ピリジン （ｌｏｍＬ）中のβ−Ｌ−フコピラノシルー１−リン酸（トリエチルアンモニウ ム塩、１．　ＯＯｇ、約２．　２０ｍｍｏｌ）の混合物に、窒素下で添加して溶 媒を真空下で除Ｊｅした。フラスコには乾燥空気しか入らないように注意して、 このｆ順を３回繰り返した。ＧＭＰモルホリゾート（２，４ｇ、約３゜３０ｎｗ ｎｏｌ）を無水ジメチルホルムアミドとピリジンの１．１混合物（ＩＯｍＬ）に 溶解した。溶媒を真空下で蒸発させて、この操作を上記のとおり３回繰り返した 。 残渣を溶媒の同一混合物（２０ｍＬ）に溶解して、この溶液を粉砕したモレキュ ラーシーツ（４人、２ｇ）と共に反応フラスコに添加した。混合物を室温で窒素 下で撹拌した。ｔ、１．　ｃ、（３：５：２．２５％水酸化アンモニウム水溶液 、イソプロパツールおよび水）は、出発物質のＧＭＰ−モルホリゾ−１−（Ｒｆ −０゜８、Ｕ、　Ｖ、　）　、グアノノン５°　−（β−１−フコピラノシル） −二リン酸（Ｒｆ　〜０．　５、Ｕ、Ｖ　および黒化（ｃｈａｒｒｉｎｇ））の スポットを示し、続いて出発物質のフコース−１−リン酸（Ｒｆ−０，４４、黒 化（ｃｈａｒ自口ｇ））のティリング・スポットを示した。さらにＵ、　Ｖ、活 性の小スポットも存在した。室温で４０間撹拌後、黄色の混合物をトルエンと共 蒸発して、黄色の残渣をさらに真空ポンプて一晩乾燥させて、０１ｒＦ−な残ｆ Ｌ（２，４３ｇ）を得た。次に水（ＩＯｍＬ）をフラスコ中に添加して黄色の混 濁溶液を得て、これをＡＧ　５０Ｗ−ＸＩ２（バイオラット（ＢｉｏＲａｄ）製 ）樹脂（＋００−２００メツシユ、２５ｘ１．５ｃｍ、Ｎａ３型）のカラムの上 に添力１比た。ボイド容積のＬ水で生成物が溶出した。ｔ。 １、ｃ　ブレー１・にスポットした浚のＵＶ、と黒化（ｃｈａｒｒｉｎｇ）の両 昔で活性な分画を回収して、この溶ｎｋをｎ空ドて一晩凍結乾燥して粗物質（１ ，９（ｉｇ）をｉＵｆこ。 この残渣を水（全体てｌｏｍＬ）に溶解して、あらがしめ水、メタノールおよび 水（各２５０ｍＬ）による洗浄で調整した、叫水性Ｃ１１シリカゲル（つ１−タ ープ（Ｗａｔｅｒｓ）Ｉ、２．５ｘ３０ｃｍ）のカラムにゆっくり吸収させた。 次にこのカラムに水を流しく０．　４ｍＬ／分）で、溶出物を分画（０，８ｍＬ ）に集めて、ｔ、Ｉ。 ｃ、（３：５・２．２５０６水酸化アンモニウム水溶液、イソプロパツールおよ び水）で確認した。β−Ｌ−フコピラノツルー１−リン酸（Ｒｆ−０，５４、黒 化（ｃｈａｒｒｉｎｇ））は、２９から４５分画に溶出した。強いＵ、　Ｖ、活 性スポット（Ｒｆ〜０５１）を示す生成物は、主に４６から６５分画に溶出した 。高Ｒｆまたは低Ｒｆを１１する他の小さなＵ、　Ｖ、活性スポットも観察され た。グアノシン５°−（β−１−フコピラノシル）−二リン酸（Ｒｆ−０，６２ ）を１存する５９から８６分画もまた、細いＵ、　Ｖ　活性スボッ１−（Ｒｆ〜 ０．５７）を示した。５９から８６分画をプールし、−晩凍結乾燥して、グアノ シン５°　−（β−１−フコピラノシル）−二リン酸の濃縮された０、３５３ｇ の物質を得た。　ＩＨ−ｎ、　ｍ、ｒ　は、この物質か、δ＝４．１２およびδ ＝５．０５にシグナルを持つ少量の不純物で汚染されていることを示していた。 ２９から４５分画および４７から５７分画を別々にプールして凍結乾燥して、β −Ｌ−フコーピラノツルー１−リン酸（各々０．２６４ｇおよび０．２２３ｇ、 第２分画は少量の不純物を１汀する）か回収された。時に、適切な分画のプール することにより、少量のグアノノン５゛−（β−１−フコピラノツル）−二リン 酸か高純度に（’Ｈ−ｎ、　ｍ、ｒ、　）得られる。一般に、グアノシン５°　 −（β−Ｉ−フコピラノノル）−二リン酸中に濃縮された全ての物質を、最少量 の水に溶解して、あらかしめ大量のメタノール続いて水で洗浄して再生した同一 カラムに流した。精製したグアノノン５′−（β−１−フコピラノシノリ−二リ ン酸を１仔する分画（ｔ、１．　ｃ、　）をプールして、真空下で凍結乾燥して 、白色の綿毛状物’ｉＱ　（１８７ｍｇ、Ｉ　６！’６）が？１トられた。　’ １１−ｎ、　ｍ、ｒ、は過去に報告されたデータ、１と同一であった。 方法　＃２ β−Ｌ−フコピラノツルー１−リン酸とグアノシン５°　−モノホスホモルホリ ゾ−１−（４−モルホリン−Ｎ、　Ｎ’　−シーツクロへキシル−カルボキサミ ジン塩、ｒＧＭＰ−モルホリゾート」）を、ヌーネツ（Ｎｕｎｅｚ）の原方法Ｉ ０に記載されたように無水ピリジン中で反応させた。次にβ−Ｌ−フコピラノン ルー１−リン酸（Ｉ・リエチルアンモニウム塩、０．５２８ｇ、約１．１８ｍＬ ）を、無水ピリジン（２０ｍＬ）に溶解して、溶媒を真空下で除去した。フラス コには乾燥空気しか入らないように注、轡して、このＬ順を３回繰り返した。Ｇ ＭＰモルポリデー１−（１゜２ｇ、約１．　６５ｎｗｎｏｌ）とピリジン（２０ ｍＬ）を反応フラスコ中に添加し、溶媒を真空下で蒸発させて、上記のとおりこ の操作を３回繰り返した。ピリジン（２０ｍＬ）を最終残渣に添ＩＪＩ１１．て 、この不均一な混合物を室温で窒素下で３から４日間撹拌した。不溶性の塊か形 成され、これを場合によっては超音波で破砕した。 反応をｔ、１．　Ｃ，て追跡して、第一の方法で記載したように処理してＧＤＰ −フコース（１２０ｍｇ、ｌ　６９６）を得た。 １１、酵素的条件 βＧａｌ　（！−３／４）βＧＩｃＮＡｃ　（１−３／４）フコソルトランスフ エラーセを、パルノック（Ｐａｌｃｉｃ）ら２５か記載したＧＤＰ−ヘキサノー ルアミン・セファロースのアフィニティクロマトグラフィーを用いる方法に従っ て、ヒト乳から精製した。酵素反応は、カコジル酸ナトリウム緩衝液（＋　００ ｈｍ、　ｐＨ６゜５）　、ＭｎＣ＋２　（１０１１ｆＪ）　、ＡＴＰ　（１，６ ｍＭ）　ＮａＮ＋　（１，６ｍＭ）を用いて、プラスチック管中て３７°Ｃて実 施した。最終反応混合物をＨ２０（５ｍＬ）で希釈して、報告された２５ように ＣＩＩセップーパック（Ｃ，□５ｅｐ−Ｐａｋ）カートリッジ上に適用した。Ｈ ２Ｃ（３０ｍＬ）で洗浄後、生成物をＣＨｓ　ＯＨて溶出して溶媒を蒸発させた 。残渣をＣＨＣｌ、　、ＣＨ，ＯＨとＨ２Ｃの６５：３５：５混合物に溶解して 、イヤトロヒーズ（Ｉａｔｒｏｂｅａｄｓ）の小カラム（０，２００から０．５ ００ｇ）上に適用した。同一の溶媒混合物で洗浄後、生成物を同一溶媒の６５・ ３５８および／または６０：４０：ＩＱ混合物で溶出した。適切な分画（ｔ、Ｉ 。 Ｃ，）をプールして、溶媒を真空下で蒸発させて、残渣をＨｔＯてＡＧ　５０Ｗ ｘ８　（Ｎａ’　Ｋッ）（バイオラット（ＢｉｏＲａｄ）製）の小カラムに流し 、真空中で凍結乾燥後生成物を回収した。四糖類の’Ｈ−ｎ、Ｂ１．データを以 下に報告する・ １目、フコノル化反応 Ａ　８−メトキノカルボニルオクチル（５−アセトアミド−３，５−シープオキ シーＤ−グリセロ−α−Ｄ−ガラクト−２−ノヌロビラノンロン酸）−（２−３ ）−０−Ｂ−Ｄ−カラン１−ピーｙｌシル−（ｌ−４）−０［（？−Ｌ−７ｍ］ ピラノンルー（１−３）−０−］　−（］２−アンドー２−デオキソーβ−Ｄグ ルコビラノット）（四糖１１２ｂ）の調製 三糖１１　ｌ　ｂ　（７，７ｍｇ）　、ＧＤＰ−フコース（１８ｍｇ）　、フコ ツルトランスフェラーゼ（２０ｍＵ）そして子牛小腸アルカリ性ホスファターゼ （ＩＯＵ）を、緩衝液（２ｍＬ）中で７２時間インキュベー１化だ。単離および 精製してｌｌ２ｂ（２，８４ｍｇ）を１；ｔた。 ８、　８−メ］・キノカルボニルオクチル（５−アセ１−アミド−３，５−ジデ オキシ−Ｄ−グリセロ−α−Ｄ−がラクト−２−ノヌロビラノソロン酸）−（２ −３）−Ｏ−Ｂ−Ｄ−ガラクｔ−−ピラ／ツルー　（１−４）　−〇−［（Ｚ− Ｌ−７ｍｌピラノツルー（１−３）−０−］　−（］２−アミノー２−デオキシ ーβ−Ｄグルコビラノット）（四ａｌｉｌ１２ｃ）の調製 三糖Ｉ　Ｉ　１　ｃ　（８，４ｍｇ）　、ＧＤＰ−フコース（１８ｍｇ）　、フ コツルトランスフェラーゼ（２０ｍＵ）そして子牛小腸アルカリ性ホスファター ゼ（ＩＯＵ）を、緩衝液（２ｍＬ）中で６７時間インキュへ一１化だ。単離およ び精製してｌｌ２ｃ（２，４６ｍｇ）を得た。 Ｃ，８−メトキノカルボニルオクチル（５−アセトアミド−３，５−ノーデオキ シーＤ−グリセロ−α−Ｄ−がラフｌ−−−２−ノヌロピラノシロン酸＞　−（ ２−３）　−０−／３−Ｄ−カランｔ・−ビラ）ツル−（１−４）−０−ｒａ− Ｌ−７：］ピラノンルー（１−３）−〇−コー（２−Ｎ−プロピオンアミド−２ −デオキソ−β−Ｄ−ダルコビラノノト）（四糖１１２ｄ）の調製三糖１１１　 ｄ　（８，３ｍｇ）　、ＧＤＰ−フコース（１８ｍｇ）、フコノルトランスフェ ラーゼ（１８ｍＵ）そして子牛小腸アルカリ性ホスファターゼ（ＩＯＵ）を、緩 衝液（２ｍＤ中で７２時間インキュベートした。単離および精製してｌｌ２ｄ（ ６，１７ｍｇ）を得た。 Ｄ、８−メトキシカルボニルオクチル（５−アセトアミド−３，５−ジ−デオキ ソ−Ｄ−グリセロ−α−Ｄ−がラクト−２−ノヌロビラノシロン酸）−（２→３ ）−〇−β−Ｄ−がラクトピラノンルー（Ｉ→３）−０−［α−Ｌ−フコピラノ ツルー（１→４）−０−］　−（］２−アンドー２−デオキシーβ−Ｄグルコビ ラノット）（四糖１０８ｂ）の調製 三糖１０７ｂ　（８，７ｍｇ）　、Ｃ；ＤＰ−フコース（１８ｍｇ）、フコシル トランスフェラーゼ（＋８ｍＵ）そして子牛小腸アルカリ性ホスファターゼ（Ｉ ＯＵ）を、緩衝液（２ｍｌ）中で６８時間インキュベートした。単離および精製 して四糖１０８ｂ　（４，４２ｍｇ）を得た。 Ｅ、８−メトキシカルボニルオクチル（５−アセトアミド−３，５−シープオキ シーＤ−グリセロ−α−Ｄ−がラクト−２−ノヌロビラノソロン酸）−（２→３ ）−〇−β−Ｄ−ガラクＩ・−ピラノシル−（＋−３）−０−［α−Ｌ−フコピ ラノツルー（１→４）−０−］　−（］２−アミノー２−デオギソーβ−Ｄグル コビラノン１−）（四糖１０８ｃ）の調製三糖１０７　ｃ　（９，５ｍｇ）　、 ＧＤＰ−フコース（１８ｍｇ）、フコシルトランスフェラーゼ（＋８ｍＵ）そし て子牛小腸アルカリ性ホスファターゼ（ＩＯＵ）を、緩衝液（２，８ｍＬ）中で ６０時間インキュベートした。単離および精製して四糖１０８ｃ　（４，９４ｍ ｇ）を得た。 Ｆ、８−メトキシカルボニルオクチル（５−アセトアミド−３，５−ジーデオキ シーＤニグリセローα−Ｄ−ガラクト−２−ノヌロビラノソロン酸）−（２−３ ）−〇−β−Ｄ−ガラクトーピラノシル−（１→３）−０−［α−Ｌ−フコピラ ノンルー（１→４）−０−］　−（］２−Ｎ−プロピオンアミドー２−デオギシ ーβＤ−グルコビラノット）（四糖１０８ｄ）の調製三糖＋　０７ｄ　（８，４ ｍｇ）　、ＧＤＰ−フコース（１８ｍｇ）、フコツルトランスフェラーゼ（１， ９，４ｍＵ）そして子牛小腸アルカリ性ホスファターゼ（１０Ｕ）を、緩衝液（ ２ｍＬ）中で７２時間インキュベートした。単離および精製して四糖１０８ｄ　 （５，８１ｍｇ）を？ＩＩた。 表Δは、化合物＋１１１）、１１１ｃ、１１１ｄ、１１２ｂ、１１２ｃ、および ｌｌ２ｄの、　’Ｈ−ｎ、ｍ、ｒ　データを！ｊえる、一方表Ｂは、化合物１０ ７ｂ。 １０７ｃ、１０７ｄ、ｌ０８ｂ、ｌ０８ｃ、および１０８ｄの’Ｈ−ｎ、ｍ、ｒ 。 データを与える。 実施例２９　受容体１１４ａの合成 Ａ、８−メトキシカルボニルオクチルβ−Ｄ−がラフ１−ピラノシル−（Ｉ→３ ）−〇−２−アセ１−アミドー６−プロ’Ｅ−２，６−シーデオキツーβ−Ｄ− グルコビラノット（化合物１１４ａ）の調製 四１ｍ化炭素（２ｍＬ）中ノ化合物１１３ｓｏ（０，０６１ｇ、０．　０７５ｎ ｖｎｏｌ）、炭酸バリウム（０，０２０ｇ、０．１冊ｏｆ）およびＮ−プロモサ クシニミド（０゜０１６ｇ、０．　０９ａｗｎｏｌ）の混合物を、記載１ｔのと おり２時間還流した。適切な処理の後回収した粗物質を、ヘキサンと酢酸エチル の１・１混合物を溶出液として用いるシリカゲル（６ｇ）のクロマトグラフィー によって純粋なブロモ誘導体（３６ｍｇ、５４９６）を得た。 無水メタノール中の少量のこの物質（０，０１９ｇ、０．　０２１ｍｍｏｌ）を 、２２°Ｃて３時間触媒量のナトリウムメトキッドを用いて脱−〇−アセチル化 した。 Ｄｏｗｅｘ　５ＯＷｘ８　（Ｈ’　！！’りでの中和および濾過１組溶媒を真空 下で蒸発させて残ｒＮをクロロホルムとメタノールの１０１混合物を溶出液とし て用いてイヤトロビーズ（ｌａｔｒｏｂｅａｄｓ）　（２ｇ）でクロマトグラフ ィーして、純粋な三糖（０，０１２ｇ、９９９６）を得た。これはわずかに水溶 性であった。この物質を水酸化ナトリウムの０．２５Ｎの溶液を用いて２２°Ｃ て１時間鹸化した。 Ｄｏｗｅｘ　５０Ｗｘ８（Ｈ’型）での中和および濾過後、溶液を真空下で凍結 乾燥して三糖１１４ａを得た＋　［α］ｏ”　Ｉ　１．　４°　（ｃ　Ｏ，＋２ ．　ＨｚＯ）。 上記したように、血液型決定基に関連するオリゴ糖配糖体をリボゾームの一部と して哺乳動物の患者に投与することができる。下記の実施例はそのようなリボ１ −ムの一調製法について述へる。 実施例３０　シアリルルイス１類似体を含有する集合体の合成例えばリボゾーム とミセルのような集合体は、■型またはＩＩ型型槽構造有する血液型決定基に関 連するオリゴ糖配糖体を取り込むように調製し得る。具体的には、そのようなオ リゴ糖配糖体の集合体への取り込みは、集合体に取り込まれるアグリコン部分か 十分に疎水性であることか要求される。この疎水性アグリコンは、糖を集合体に 取り込む能力を増加させるような、種々の分子団（ナフチル、置換ナフチル、オ クチル、等）によって延長される−（ＣＩ−（、）＊　Ｃ００ＣＨｓ（Ｘ≧２） を含んでよい。 そのような集合体では、オリゴ糖配糖体の疎水性アグリコン基は集合体の脂質部 分に分配され、オリゴ糖基は一般に水相に分配される。 そのような集合体の調製法は当該分野て公知である。例えば、本明細書中に参考 文献として引用されている合衆国特許第４．５２２，８０３号を参照せよ。 実施例３１−４３は、図３３から４３に記載する修飾シアリルルイス８とシアリ ルルイスＡ＋Ｍ造の合成を説明する。 実施例３１−４３に使われた一般的方法と各方法は以下のとおりであるニ一般的 Ｊｊ法 実施例３１−４３の一つまたはそれ以上の実施例において、あらかじめ被覆した ノリノＪゲル（メルク（Ｍｅｒｃｋ）、６０　Ｆ２６４）のプレートを、分析用 ｔ、Ｉ。 Ｃて使用して、エタノール中の５０６硫酸溶液を噴霧して黒化させてスポットを 検出した。シリカゲル６０（メルク（Ｍｅｒｃｋ）、４０−６３μｍ）をカラム クロマ１−グラフィーに（重用した。イヤトロビーズ（Ｉａｔｒｏｂｅａｄｓ） はヤトロン（ｌａけｏｎ）製てあった（ｔ、ｌ：交番５；−６Ｒｓ−ｇｏＧｏ） 。ミレックスーＧＶ　（Ｍｉｌｌｅｘ−ＧＶ）フィルター（０，２２μｍ）はミ リボア（Ｍｉ　Ｉ　ｌ　１ｐｏｒｅ）製てあった。Ｃ１１セツプーバノク（Ｃ＋ ＊　Ｓｅｐ　Ｐａｋ）カー１−リッジおよびバルクＣ１ｍシリカゲルはウォータ ーズ・アソノエート（Ｗａｔｅｒｓ　Ａｓ５ｏｃｉａｔｅｓ）製てあった。 市販の試薬を化学反応に使用して、溶媒を通常の手順に従って精製し乾燥した。 他に記載かなければ、反応混合物をジクロロメタンによる希釈、そして重炭酸す トリウド 上での乾燥後、溶媒を浴の温度３５°Ｃまたは必要であればそれより低い温度て 、真空下で蒸発させて診去した。 １也に記載かなけれは、　’Ｈ−ｎ．ｍ．ｒ　を、３００ＭＨｚ（）゛ルーカー （Ｂｒｕｋｅｒ）Ａ〜ｉ−３００）で、ＣＤＣ１．中のテトラメチルシランかＤ ２０中の２、２２５にセットしたアセトンを内部標準として用いて、周囲の温度 で記録した。化学ラクトおよびカップリング定数（分裂か観察される）は、これ らか−次であると見なして報告し、部分的ｎ．　ｍ．　ｒ　データのみを報告し た。１２Ｃ−ｎ。 ｍ．　ｒ．スペクトルは、７５．５ＭＨｚでＣＤＣｌ２中のテトラメチルシラン かり．Ｏ中の６７、４にセリトンたジオキサンを参照として記録した。 Ａ．Ｎｅｕ５Ａｃ誘導体の合成 他に記載かなけれは、Ｎｅｕ５Ａｃの誘導体は、必要なら出発物質に適切な置換 をして、公知方法に従って調製した。以下の誘導体は文献に報告された方法の１ ２３３は、Ｎｅｕ５ΔＣの誘導体の合成に使用した一般的合成概略図を示す。 以−トの実施例３＋−３４に下線（１アラビア数字て参照した化合物は、表１と 図３３に記載される。 実施例３１　５−アセトアミド− グリセロ−Ｄ−がラクト−２−ノヌロピラノンロン酸（９　Ｎ２　Ｎｅｕ５Ａ５ ７ｎｍｏｌ）を、ジクロロメタン（８ｍＬ）中のベンジルアルコール（５．０ｍ Ｌ、４８、２ｎｎｏｌ）　、モレキュラーソーブ４人（１８．５ｇ、粉砕）、無 水炭酸銀（４。 ２ｇ、＋５．　２混ｗｎｏｌ）の混合物に添加した。混合物を暗所で４日間撹拌 して、ジクロロメタン（５０ｍＬ）で希釈し、セライト（Ｃｅｌｉｊｅ）で濾過 した。通常どおり処理した１！１，残渣をヘキサンと酢酸エチルの３　２混合物 を溶出液として用いてシリカゲルのクロマトグラフィーにかけた。次に生成物を 同一溶媒の４．５混合物で溶出して、純粋な物質（１．　９６ｇ、６０９６）お よび少量の不純物を含有する０．　３　３ｇ　（１　０９６）の物質を得た。　 ’Ｈ−ｎ．　ｍ．　ｒ．　：５．　４３６　（ｄｄｄ，　ＩＨ，Ｊｔ，−　８． 　５，　Ｊｌ，、２．　５，　ＪＩ，−　５．　５Ｈｚ，　Ｈ　８）、５、３１ ７　（ｄｄ，ＩＨ．Ｊ．、、　１．８Ｈｚ．Ｈ−７）、５．１１０（ｄ，ＩＨ， Ｊ．、、、’　９．５Ｈｚ，ＮＨ）、４．８４９　（ｄｄｄ，ＩＨ，ＪＩ４　１ ２。 ｏ，　Ｊ．、。、　４，５，Ｊ．、、９．５Ｈｚ，Ｈ−４）、４，７８８、４， ３９７　（ＡＢ，２Ｈ，Ｊ，、、　１２．０Ｈｚ，ヘンシリツク）、３．　６４ ２　（ｓ。 Ｃｏ２ＣＨ，　）、２．６２９　（ｄｄ，ＩＨ，Ｊ．、、、、、、　１２．５Ｈ ｚ，Ｈ−３ｅｑ）、２．＋４０．２．１１３．２，０１７．１．９９７．１．　 ８５７　（５ｓ。 １５Ｈ，４０Ａｃ、Ｉ　ＮＡｃ）、１．　９８６　（ｄｄ、ＩＨ，Ｈ−３ａｘ） 。 上記物質（１，５ｇ、２．　５８ｍｍｏｌ）を２２°Ｃて５時間、触媒量のｔト リウムメトキノ１−を３存する無水メタノール（２０ｍＬ）中て脱−０−アセチ ル化した。 Ｄｏｗｅｘ　５０Ｘ８　（Ｈ’型）での脱イオン化後、溶媒を蒸発させて生成物 ２３ユ（１，Ｏｇ、ｌ’６）か残るが、これは次の−１，稈に使用した；　’Ｉ Ｉ−ｎ。 ｍ、ｒ、（ＣＤＣＩｓ　）　：　４．　８１５および４．　６１９　（ＡＢ、２ Ｈ，Ｊ、、。 １１．５ｔ（ｚ、ペンツリック）、３．８０２　（Ｓ、ＣＯ２Ｃ）Ｉ−）、３． ５８２（ｄ　ｄ、口先　Ｊｉ、＊　９．　０．、Ｌ、ｔ　０．　５Ｈｚ、Ｈ−６ Ｌ　２．　７５２（ｄｄ、ＩＨ，Ｊｉ−−、＋、、　１２．　５．Ｊｚ、−４４ ，５Ｈｚ、Ｈ３ｅｑ）、２、　０３９　（ｓ、３１−（、Ｎ　ΔＣ）、　１．　 ８６１　（ｄｄ、ＩＨ，Ｊ、、、、、ｌ　Ｉ。 ＯＨｚ、Ｈ−３ａｘ）。 ピリジン（０、Ｉ　ｍＬ）中のバラ−１−ルエンスルホニルクロリＩ：’　（０ ，ｌ　２５　ｇｌｏ、６５ｍｍｏｌ）溶液を、０℃てピリジン（１、ｌ　ｍＬ） 中の２３９　（０，２４８ｇ、０、　６０ｍｍｏｌ）　、４−ジメチル−アミノ ピリジン（０，ＯＩｇ）溶液の中へ注入した。０°Ｃて４時間撹拌１組メタノー ル（０，ＩＯｍＬ）を添加して混合物を無水トルエンと共蒸発させた。残渣をす ぐに、アセトニトリルを溶出液として用いてシリカゲルのクロマトグラフィーに かけて、まだ少量の不純物を３存するトシル酸塩（０，２１ｇ、６２９６）を？ ！ｔた。ジメチルホルムアミド（０，５ｍＬ）中のこの物質（０，２１ｇ、０． 　３７ｍｍｏｌ）の溶液に、アジ化ナトリウム（０，１９ｇ、２、　９２ｍｍｏ ｌ）を添加した。混合物を６５°Ｃて１８時間撹拌した後、セライト（ＣｅｌＨ ｅ）で濾過し、溶媒を真空下で蒸発した。残渣を酢酸エチルとアセトニトリルの ６１混合物を溶出液として用いてシリカゲルのクロマｌ−グラフィーによって生 成物２４０　（０，１３６ｇ、８５９６）を得た：ｉ、ｒ、　ｃｍ−’　２１１ ０　（Ｎ２　）　；　’Ｈｎ、　ｍ、ｒ、：　５．　７７５　（ｄ、’Ｈ，Ｊａ 、ｓｏ　９．　ＯＨｚ。 ＮＨ）、４．８１６および４．４７０（ΔＢ、２Ｈ，Ｊ、、＝　ｌ　１．　５Ｈ ｚ、ペッツリック）、３．７３８　（ｓ、ＣＯ，ＣＨ，）、２．８７１　（ｄｄ 、ＩＨ。 Ｊｚ−、＋　４．８．Ｊ）、、１．、１３．０Ｈｚ、Ｈ３ｅｑ）、２．０８６　 （ｓ。 ３Ｉ−（、ＮＡｃ）、１．　９６４　（ｄｄ、ＩＨ，Ｊ２ａｙ、４　１１．５） （ｚ、Ｈ３ａＸ）。 」−記化合物主土μ（０，１０５ｇ、０．　２４ｍｗｎｏｌ）を２２°Ｃて３時 間、０２５Ｎの水酸化すトリウム水溶液（２ｍＬ）中に放置した。Ｄｏｗｅｘ　 ５０ｘ８（Ｉｔ’型）の添加によりｐＨを６にして濾過後５、二の物質を凍結乾 燥して次に回収し、クロロホルム、メタノール、水の６５：３５：５混合物を溶 出液として用いてイヤトロビーズ（［ａｔｒｏｂｅａｄｓ）のクロマトグラフィ ーにがけた。適切な分画から生成物（０，０８７ｇ、８６９６）が得られた。コ ノ化合物（０，１００ｇ。 ０、　２３５ｍｗｎｏｌ）を、０．０２５Ｎの塩酸（３ｍい中で８ｏ″Ｃて６時 間加熱した。 溶液を水酸化ナトリウムで中和して次に凍結乾燥した。生成物をクロロホルム、 メタノール、水の６５：３５：５混合物を用いてイヤトロビーズ（１ａｔｒｏｂ ｅａｄｓ）（０，６０ｇ）のクロマトグラフィーにかけて、２０１ｂ　（０，０ ６７ｇ、８５０６）を得た；　’Ｈ−ｎ、　ｍ、ｒ、＋　４．　］　］０６−３ 　８９５　（ｍ、５Ｈ）、３゜６３９　（ｄｄ、ＩＨ，、Ｌ、＋　３．０．、Ｌ 、、Ｉ　３．ＯＨｚ、Ｈ−９）、３゜５２８　（ｄｄ、Ｉ）（、Ｊｒｌ　６．Ｏ Ｈｚ、Ｈ９”）、２．　２４９　（ｄｄ。 ＩＨ，、Ｊｓ、−４４，５，Ｊｓ−−、ｘ、、１２．５Ｈｚ、Ｈ３ｅｑ）、２． ０９０　（ｓ、３Ｈ，ＮＡｃ）、　１．　８５２　（ｄ、ＩＨ，、Ｌ、、ａ　ｌ 　１．　ＯＨｚ、Ｈ−３ａ　ｘ）。 実施例３２５−プロピオンアミド−３，５−ジデオキシ−Ｄ−グリセロ＝Ｄ−ｍ ｍｏ１）の溶液を、２２°Ｃて０５時間、続いて９５°Ｃて７時間放置した。次 に■Ｒ−Ｃ５０樹１１Ｆｒ（Ｈ”型）の添加によって、ｐＨを７．５に調整した 。樹脂の濾過した後に得られた濾液を、真空下で蒸発させて残渣を五酸化リン上 で乾燥させｔこ。 次に無水プロピオン酸（０，１２ｍＬ、　０．　９４（１）ｏｆ）を、無水メタ ノール（１゜５ｍＬ）とトリエチルアミン（０，２ｍＬ）の混合物中の上記生成 物の懸濁液の中へ注入して０°Ｃて撹拌した。３時間後、さらに無水プロピオン 酸（０，０２５ｍＬ。 ０゜ｌ　９５ｍｗｎｏｌ）を添加して、混合物を０″Ｃてさらに２時間撹拌した 。混合物をメタノールと共蒸発させて、水の中の残渣の溶液（２ｍＬ）をＤｏｗ ｅｘ　５０Ｘ８　（１１”　１％９．６ｇ）に通した。回収した分画を真空下で 蒸発させ、残渣をクロロホルｌ、どメタノールの３１混合物を溶出１（ｋとして 用いてイヤトロビーズ（Ｉａｌｒｏｈｅａｄｓ）　（５ｇ）のクロマｌ−グラフ ィーにより２４±（０，０６４６ｇ、８６．５０６）を得た。　’Ｈ−ｎ、　ｍ 、ｒ、：　４．　８００．４．　５７８　（ＡＢ、２Ｈ，Ｊ、、、、Ｉ　１．　 Ｏ［（ｚ、ヘンシリツク）、３．　５８０　（ｄｄ、ＩＨ，Ｊｓ＋＠９、　０． 　Ｊ、、ｔ　１．　０ｌ−１ｚ、Ｈ−６）、２．　７７６　（ｄｄ、ＩＨ，Ｊｓ −、ａ４、　５．ＬＬ＊ｅ、ｌａｍ　１２．　５Ｈｚ、Ｈ−３ｅｑ）、２．　３ １６　（Ｑ、２Ｈ，Ｊ水（５ｍＤ中の」１記ヘンノル配糖体（０，１１５ｇ、０ ．　２７８ｍｍｏｌ）を、活性炭」二の５０６パラ、ノウム（ｌｏｍｇ）の存在 下で、２２°Ｃて５時間大気圧で水素化した。しライト（Ｃｅｌ　ｉ　ｌｅ）に よる濾過、続いてミリボア（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）フィルターによる濾過ｉ＋ｔ ！？’＊＃ｔだ溶出物を、凍結乾燥して化合物２０１ｆ　（０，０７４ｇ、８２ ．５”６）を得た：　’Ｈ−ｎ、　ｍ、ｒ、：　３．　７２−４．　Ｉ　Ｏ（ｍ 、　Ｉ（−４゜−５，−７，−８，９）、３．６１４（ｄｄ、　！Ｈ，ＪＩ１． ．　６．　５゜Ｊｑ、、ｓｂ　ｌ　１．　７５ｔ１ｚ、　ｔｌ　！Ｊａ）　、３ ．　５３０　（ｄｄ、ＩＨ，Ｊｓ、ｓ　９゜０　、Ｌ、ｉ　１．　ＯＨｚ、　＋ （−６）、２．２５０−２．４００　［ｍ、２ＨＣＴｊ２ＣＯ（ｑ、２．　３１ ５．　Ｊ　７．　５Ｈｚ）およびＨ−３ｅｑ　（ｄｄ。 ＪＩ＋＋＋、１ｍｍ　ｌ　！、５Ｈｚ、Ｊｌｅａ、Ｊ　４．　５［（ｚ）を含む ］、Ｉ、８８０　（ｔ。 １１■、Ｊ、、、、、、、　Ｉ　１．　５Ｈｚ、Ｈ−３ａｘ）、　＋、ｌ　３０ 　ｃｔ、３Ｈ。 ＣＨ，）。 実施例３３５−アセトアミド−３，５−シデオキシーＤ−ガラクト−２−オクｌ 去にｒ；ｅ　・）か、報告された物質とは異なる出発物質を用いる。訂紹■こは 、２，２−ノメトキップロパン（３ｍＬ）中の２３９　（０，５２ｇ、０．　１ ．２５ｍｗｎｏｌ）の懸濁液を、パーラトルエンスル：１−、ンＭ（０，５ｍｇ ）の（ｒ在下て２２”Ｃて１．　５時間撹拌した。少量の１−リエチレンアミン で中和ｉＬ混合物を蒸発させて、残渣をクロロホルムとメタノールの１６１ｌ昆 合物を用いてシリカゲルのクロマトグラフィーにより遣ニス（０，０４９ｇ、８ Ｂ？６）をｉすだ。 ２１混合物中で５０°Ｃて５時間保持してアセチル化した。通常どおり処理した 後、残渣を酢酸エチルを溶出液として用いてシリカゲルのクロマトグラフィーに よりアセチル化生成物（（１，０９１ｇ、９２９６）を得た；　’Ｈ−ｎ、　ｍ 、ｒ。 ５．４２０　（ｄｄ、ＩＨ，Ｊｚ、７　１．５．Ｊｔ、ｓ　３．５Ｈｚ、Ｈ７） 、５゜１９６　（ｄ、ＩＨ，Ｊｓ、Ｎ１．９．　０Ｈｚ、ＮＨ）　、５．　００ ９　（ｄｄｄ、ＩＨ。 Ｊｚ、＋、、　Ｉ　３．　０．　Ｊｚ、＊−９５，０，Ｊ、、ｓ　１０．　ｏｔ −ｔｚ、　Ｈ−４）、４゜７９７および４．　４９８　（ＡＢ、２Ｈ，Ｊ、、− １１，５Ｈｚ、ベンジリック）、３．７７６　（ｓ、３Ｈ，ＣＯ２ＣＨ３）、２ ．　７２４　（ｄｄ、Ｈ（、Ｊｓ−、ｓ−１３、０ｆ（ｚ、Ｉ（−３ｅｑ）　、 ２．　ｌ　５１．２，０３２．１．　８９５　（３ｓ、９■七　２　０Ａｃ、ｌ 　’ＮＡｃ）、２．　０３２　ｃｔ、ＩＨ，Ｈ−３ａｘ）、　１．３６３および １．　３５０　（２ｓ、６Ｈ，メチル）。 上記生成物（０，０９１ｇ、Ｏ，ｌ　６９ｍｍｏｌ）を７０％酢酸水溶液中で４ ０°Ｃて４時間加熱した。混合物を真空下で１−ルエンと」（蒸発させた。乾燥 残渣を無水メタノールに溶解して、メタ過ヨー素酸すトリウム（０，（１５９ｇ 、０．　２７５ｍｍｏｌ）の（７在下て、２２°Ｃて２時間撹拌した。混合物を セライｔ−（Ｃｅｌｉｔｅ）のバットで濾過してメタノールで洗浄した。混合し た濾液を、ホウ化水素す］・リウム（０，０３６ｇ、０．　９５ｍｗｎｏｌ）の 存在下て０°Ｃて２５分間撹拌した。次に混合物を少量の酢酸（０，２ｍＬ）と Ｏ″Ｃて撹拌した後、溶媒を蒸発すると残渣か残り、これを真空下で１５分間乾 燥させて、次にピリジンと無水酢酸の５．１混合物（６ｍｌ、）中で、２２°Ｃ て２０時間アセチル化した。残渣を通常とおり処理した後回収して、酢酸エチル を溶出液として用いてシリカゲルのクロマ］・グラフィーにより、また少量の分 離できない不純物を３存する生成物を得た。乾燥物質（０゜０７４ｇ、また少量 の不純物を３存する）を、無水メタノール（５ｍｌ、）に溶解して、ナトリウム （３ｍｇ）の存在下て室温で３時間撹拌した。Ｄｏｗｅｘ　５０ｘ８（Ｈ゛型ン 脱イオン化および濾過後、溶媒を真空下で蒸発させて、残渣をクロロホルムとメ タノールのＩｓ　ｌ混合物を用いてシリカゲルのクロマ１−グラフｒ、：　（Ｃ Ｄｈ　ＯＤ）：　４．７２４および４．４１６　（ＡＢ、２Ｈ，Ｊ、、−１１゜ ５Ｈ２，ヘンシリツク）、３．　６７１　（ｓ、３Ｈ，Ｃｏ２ＣＨ，）、３．４ ｊ６（ｄｄ、ＩＨ，Ｊｌ、＠　９．５．、Ｌ、ｑ　１．０ｒ（ｚ、Ｈ−６）、２ ．６４２（ｄｄ、ＩＨ，Ｊｌ、１．、４．５．Ｊｌ、、、、、、　１２．５Ｈｚ 、Ｈ−３ｅｑ）、１、！Ｊ３８　（ｓ、３Ｈ，ＮＡｃ）、１．　６９９　（ｔ、 ＩＨ，Ｊｓ、、、、　１２．　５＋（ｚ、　Ｈ−３ａｘ）　。 上記物質（０，０２２ｇ、０．　０５７ｍｍｏｌ）を、０．２５Ｎの水酸化すト リウノ、水溶液（２ｍＬ）中で２２℃で５時冊撹Ｈ゛シて、溶液をＤｏｗｅｘ　 ５０ｘ８（１−１”型）て中和して、濾液を凍結乾燥して白色固体（０，０１９ ｇ、９０９６）を得た。この生成物を水（２ｍＬ）に溶解して、活性炭（４ｍｇ ）上の５９６パラジウム（４ｍｇ）の（ｒ注下て２２°Ｃて３時間水素化した。 混合物を最初にセライト（Ｃｅｌｉｔｅ）で、次にミリボア（Ｍｉｌｌｉｐｏｒ ｅ）フィルターで濾過した。濾液を凍結乾燥して目的の生成物２０１　ｉ　（１ ３，３ｍｇ、９４９６）を得た；　’Ｈ−ｎ、　ｍ、ｒ。 ３、　４６２　４．０９３　（ｍ、６Ｈ）　、２．２８７　（ｄｄ、ＩＨ，Ｊｉ −，４’１．　５．　Ｊ３．。ｌａ＋　Ｉ　２．５Ｈｚ、Ｈ−３ｅｑ）、２．　 ０５２　（ｓ、３Ｈ。 ＮＡｃ）、　１．　８５３　（Ｌ　ＩＩ−ｒ、Ｊｔ、＠、、　１２．　５Ｈｚ、 Ｈ−３ａｘ）。 実施例３４５−アセトアミＩ’−３，５，７−ドリデオキシ＝β−Ｄ−がラクト −２−ノヌロピラノシロン酸（７−ｄ−Ｎｅｕ５Ａｃ）２０１ｄ２０１ｄの合成 は本質的にズヒラル（Ｚｂｉｒａｌ）ら３７の文献の方法に従うか、異なる出発 物質を用いる。詳細には、イミダゾール（０，１３ｇ、ｌ、９３ｓ＋ｏｌ）およ び塩化ｔｅｒｔ−ブチルジメチルノリル（０，＋３５ｇ、０．　８９ｎｗｎｏｌ ）を、ツメチルホルムアミド（２ｍＬ）中の２４２（０，Ｉｌｇ、Ｏ，１９ｎｗ ｎｏｌ）の溶液に添ｈＩ比だ。室温で４時間後、溶媒を真空１で除去して残渣を クロロホルムに溶解して通常とおり処理した。生成物を、酢酸エチルとヘキサン の１・１混合物を用いてシリカゲルのクロマトグラフィーにかけてモノソリル化 誘導体（０，１０１ｇ、９２９６）を得た。［α］。＝−２，６６（ｃ、０．　 ６．　クロロポルム）。 ’Ｈ−ｎ、　ｍ、ｒ、：５．　１９５　（ｄ、ＩＨ，Ｊｓ、、、７Ｈｚ、　ＮＨ ）、　４．　８５３および４．　６０３　（ＡＢ、２Ｈ，Ｊ、＠−１１，５Ｈｚ 、ベンジリック）、３、　７３Ｇ　（Ｓ、　ＣＯ，ＣＩ（３）、　２．　６９２ 　（ｄｄ、ＩＨ，Ｊ３ｅ、、、４．　５゜Ｊｌ−＠、１．．　＋　３．０Ｈｚ、 Ｈ３ｅｑ）、２．０２２　（ｓ、３Ｈ，ＮＡｃ）、１．８８４　（ｄｄ、ｌ、Ｊ ｌ、。１　１１．０Ｈｚ、Ｈ−３ａｘ）、１．４０５．１、　３７５　（２ｓ、 ６Ｈ，メチル）、０．　８６８　（ｓ、９Ｈ，ｔ−ブチル）、０゜０９３および ０．　０８４　（２ｓ、６Ｈ，メチル）。 ５ｅｃ−ブチルリチウム（ノクロへキサン（０，（ｉ５ｍＬ、　０．　８５ｎｗ ｎｏＯ中に１．３Ｍ）続いて二硫化炭素（１，２５ｍＬ、２０．　８ｍｍｏｌ） を、−３０°Ｃて無水テトラヒドロフラン（２０ｍＬ）中の上記化合物（０，４ ３７ｇ、０．　７７ｎｗｘｌ）の溶液に滴下して添加した。−２５”Ｃで０．　 ５時間撹拌後、ヨウ化メチル（１゜６ｍＬ、２５．　６ｍｍｏｌ）をゆっくり室 温に加温した。蒸発後、残渣をヘキサンと酢酸エチルの４１混合物を溶出液とし て用いてシリカゲルのクロマトグラフィーによりキサントゲン酸塩（０，３２７ ｇ、６５９（）を得た。［α］。　９３．９（ｃ、０．　６５５．　クロロポル ム）　；　’Ｈ−ｎ、　ｍ、ｒ、：　６．　３８８　（ｄｄ。 ＩＨＪｓ＋ｔ　ｔ、ｏ、ＪＴ、、２．５Ｈ２，Ｈ−７）、５．６１０　（ｄ、Ｉ Ｈ。 Ｊ６．□、７．０Ｈｚ、ＮＨ）、４，７７８．４．４６６　（ＡＢ、２Ｈ，Ｊ、 、−１１，５Ｈｚ、ベンジリック）、３．７７８　（ｓ、Ｃｏｔ　Ｃｔｌｓ　） 、２．６６２（ｄｄ、　ＩＨ，Ｊ、、、、＋　４．　５．　Ｊｌ、、、２．、　 １２．　５Ｈｚ、　Ｈ−３ｅｑ）　、２、　５８４　（ｓ、３１（、ＯＣＨ，） 、１．　８８３　（ｓ、３Ｈ，ＮＡｃ）、１．　６９３　（ｄｄ、ＩＨ，Ｊｉ、 、、＜　Ｉ　１．５Ｈｚ、Ｈ３ａｘ）、１．３１５（ｓ。 ６Ｈ，メチル）、０．８２５　（９Ｈ，ｔ−ブチル）、０．０２５．０．０９２ （２ｓ、６Ｈ，メチル）。 アゾヒスイソブチロニトリル（０，００４ｇ）と水素化トリーｎ−ブチルスズ（ ０，５ｍＬ、１．　８６ｎｗｎｏｌ）を、無水トルエン（３ｍＬ）中の上記キサ ントゲン酸塩（０，３２ｇ、０．　４８ｓ＋ｏｌ）の溶液に添１１１ｔ、た。１ ００°Ｃて７時間１ｊｔ＋熱後、溶媒を無水トルエンと共蒸発させて、残渣を溶 出液としてヘキサンと酢酸エチルの３８２続いて１．１混合物を用いてシリカゲ ルのクロマトグラフィーにかけて７−デオキシ生成物（Ｑ、２６（Ｉｇ、７０９ ６）を得た；　’Ｈ−ｎ、　ｍ、ｒ、：５゜３３４　（ｄ、ＩＨ，Ｊｓ、ＮＩ＋ 　７．０Ｈｚ、ＮＨ）、４．７４０．４．４５５（ＡＢ、２Ｈ，Ｊ、、、　ｌ　 １．　６Ｈｚ、ベンジリック）、３．　６９０　（ｓ。 ９Ｈｚ、Ｈ−３ｅｑ）、＋、　９１４　（ｓ、　３１−１．　ＮＡｃ）、１．８ ０５　（ｄｄ。 １１Ｔ、　Ｊｈ、−４１０，！Ｊｌｌｚ、　Ｈ３ａｘ）、１．７１８および１． ５９７（ｍ、２Ｈ，）−［−７およびＩ］−７°）、１．　３２５　（ｓ、６Ｈ ，メチノリ、０８０４　（！］）Ｌ　ｔ−フ゛チル）（）　旧０，０．００９　 （２ｓ、６Ｈ，メチル）。 １−記化合物（０，２６（１ｇ、！１．　４７ｎｍｏ１）を７＋１！＋６酢酸中 て７５°Ｃて７５”間ＩＪＩＩ熱した。１〜ルエンと共蒸発後、残渣をクロロホ ルムとメタノ−／Ｌの１０１混合物を用いてシリカゲルのクロマトグラフィーに より２４３（０，１５７ｇ、８４’６）を得た；　’Ｈ−ｎ、　ｍ、ｒ、：　４ ．　８６０および４．　６５５　（ＡＢ、２Ｈ，Ｊ、、、　Ｉ　１．５Ｈｚ、　 ヘンシリツク）、３．　８３４　（Ｓ、ＣＯ２Ｃ且、）、２、　８０６　（ｄｄ 、ＩＨ，Ｊｈ、、、＜　４．　５．　Ｊｌ、、、３．、　＋２．　５Ｈ２，Ｈ− ３ｅｑ）　、２．０６９　（ｓ、３Ｈ，ＮＡｃ）、１．　ＥＩ８１　（ｄｄ、Ｉ ｔ−１゜Ｊｌ、、、ｌ　Ｉ　２．　５Ｈｚ、　Ｈ−３ａｘ）、１．　６９８　（ ｍ、２Ｈ，Ｈ−７およびリウム水溶液（６ｍＬ）中て室温で５時間保持した。Ｄ ｏｗｅＸ　５０Ｗｘ８（Ｉ（゛へ２）で中和および濾過１組生成物（０，１４９ ｇ、９７９６）の溶液の凍結乾ｔ？１ｌＮＩＩｖ！　シタ。コノ生成物（０，１ ４６ｇ、０．　３８ｎｗｎｏｌ）を、活性炭上の５０６バラノウｌ−、（０，０ Ｉ　Ｏｇ）　ノ（７在下て水（５ｍＬ）中て、室温て５　Ｂ？ｌ？ＴＩ水素化し た。この混合物をセライト（Ｃｅｌｉｔｅ）およびミリ・ソクス（Ｍｉｌｌｅｘ ）　−ＧＶ　（０２２μｍ）フィルターで濾過した。濾液を凍結乾燥して２０１ ｄ　（０，１０５ｇ、９４°６）を（’Ｊた；　’Ｈ−ｎ、　ｍ、ｒ、：クリス チャン（Ｃｈｒｉｓｔｉａｎ）”の報告したとおりである。 以下の＆１は調製したＮｅｕ５Ａｃ誘導体を要約する。 ｎア 表１（続き） ノアリル化オリゴ糖の化学修飾により得られたシアリル部分ｉｋ　ｌ、、！　Ｃ ！！、Ｍ！ＥＡｃ Ｂ、Ｎｅｕ５ＡｃのＣＭＰ誘導体およびその類似体の合成実施例３５　Ｎｅｕ５ ＡｃのＣＭＰ−誘導体の合成ＣＭ　Ｐ　−シアル酸合成酵素（ＣＭＰ−ｓｉａｌ ｉｃ　５ｙｎｔｈａｓｅ）を子牛脳から抽出して、ヒガ（山ｇａ）ら５２の原法 をわずかに修飾して４°Ｃて部分的に精製した。常法に従って〜２００ｇの脳組 織を、キシナール（ＣｕｉｓｉｎａｒＤブレンダー（１分間隔で３０秒間バース トを３回）中で、４００ｍＬの２５ｍＭ＋−リス／ＭＣＩ　（ｐＨ７，５）、１ ０ｍＭの塩化マグネシウム、ｌｏｍＭの塩化すトリウム、２．５酬のジチオエク ス１月ヘール、０．　５＋ｎＭのフッ化フェニルメチルスルホニルでホモゲナイ ズした。このポモゲ不−トを１時間撹拌して、次に２３．０００Ｘｇで１５分間 遠心分離した。上澄液を移して、ペレットを、前述の緩衝液と同じ２００ｍＬの 緩衝液で、再度抽出した。上澄液を一緒にして、２８，０００Ｘｇで１５分間遠 心分離した。 上澄液をガラスウールて濾過して、粗抽出物（５１５ｍＬ、４．７ｍｇタンパク ／ｍＬ、〜９０Ｕの酵素）をｊ；Ｉた。 固体塩化カリウムで塩濃度を０．４Ｍに調整したｉ＆、粗抽出物を撹拌して、固 体硫酸アンモニウムを１５分間にわたり３５０６飽和（２０８ｇ／Ｌ）まで添加 した。溶液をさらに１５分間撹拌して、氷上に１時間保持して２８．０００Ｘｇ で３０分間遠心分離した。沈殿物を廃棄して、上澄液を撹拌して、固体硫酸アン モニウム（１６３ｇ／Ｌ＞を１５分間添加することにより６０９６飽和に調整し た。 さらに１５分間の撹拌の後、懸濁液を一晩氷上に放置して。次に上記のとおり遠 心分離した。生じたペレットを１５０ｍＬの６０９６硫化アンモニウム溶液で洗 浄して共沈殿物を除去した。洗浄したペレ月・は、比活性か０．０８Ｕ／ｍｇタ ンパクの７Ｏ−８０Ｕの酵素を含有する。この酵素の酵素活性１単位を、３７° Ｃで１分間に形成される生成物１μｍｏｌ　として定義して、キーン（にｅａｎ ）ら＠６が記載したように測定した。 ペレット中に存在する酵素は冷室内で数週間保存できた。酵素を合成に使用する 前に、ペレットは最少量の５０ｍＭのトリス／ＭＣＩ　（ｐＨ９，０）、３−の 塩化マグネシウム、３−の２−メルカプトエタノール（活性化緩衝液）中に懸濁 して、１００倍量の同一緩衝液に対して一晩透析した。透析した酵素は９，００ ０×ｇて１０分間遠心分離した。９０％以上の酵素活性を含有する上澄液を直接 合成に使用した。 シアル酸類似体のＣＭＰ−誘導体は、上記のように合成して、ヒガ（Ｈｉｇａ） ら５２およびクロス（Ｇｒｏｓｓ）ら■が報告した方法の修飾法により精製した 。例えば、？−ｄ−Ｎｅｕ５Ａｃ２０１ｄ　（表１．２０ｍｇ、６９　μｍｏｌ ）は上記の透析した酵素＋５Ｕを使用して、４倍過剰のシチジン三リン酸の存在 下で１２ｍＬの活性化緩衝液中で、３７°Ｃて５−６時間かけて活性化した。適 宜シアル酸類似体の変換は、キーン（Ｋｅａ口）らｓｓのホウ化水素す１−リウ ムての還元後、シアル酸の通常のチオハルし゛ノール酸測定により評価した。生 成物はグロス（（：ｒｏｓｓ）らＩの方法により冷アセトンて抽出した。真空下 （〜１５°Ｃて）てアセトンの蒸発後、平衡化したハイオーゲル（Ｂｉｏ−Ｇｅ ｌ）Ｐ−２（２，５Ｘ９１ｃｍ）のカラムに濃縮した溶液を適用して、１０酬の 水酸化アンモニウムて４°Ｃて流速（ｉｏｍＬ／時て溶出した。分画（ｌ　ｍＬ ）は２７３ｎｍての吸収によってノチジンを測定して、ｎ？ＪＪのピークに対応 する分画をプールし、Ｉ’Ｅ？Ｍ’Ｆて濃縮して、残渣を凍結乾燥してＣＭＰ− ７−ｄ−Ｎｅｕ５Δｃ（２０２ｄ、３（１ｍ（Ｈ１〜９４０６）か残った。この 物質は、　’Ｈ−ｎｍ　「　て極く少量のイ・鈍物を示しく表２）、ノアリルト ランスフエラーゼとの反１．こ、に直（＆使用した。ある場合（２０２ｅ、２０ ２ｑ、２０２ｈ）には、　１）ｌ−ｎ、　ｍ、ｒ　スペクトルはＣＭＰ−誘導体 か少量の未反応シアル酸を含有することを示していた。 上記の表２Ａは、上記表１に記載したＮｅｕ５Ａｃ類似体から調製したＮｅｕ５ Ａｃ類似体のＣＭＰ−誘導体を例示し、そしてこれら化合物に関する部分的’Ｈ −ｎ、ｍ、ｒ　データを表２Ｂに記載する。 表２Ｂ Ｒ１ Ｃオリゴ糖配糖体の合成 （Ｌｅｍｉｅｕｘ）ら１、ボールセン（Ｐａｕｌｓｅｎ）ら１、サベサン（Ｓａ ｂｅｓａｎ）らＩｏ、およびレミｘ−（Ｌｃｍｉｅｕｘ）らＩ１の方法に従って 合成した。 オリゴ糖配糖体２０４ｄおよび２０５ｄは、オリゴ糖配糖体２０４ｂおよび且０ ５ｂの合成について報告した方法に従うか、８−メトキシカルボニルオクチルの 代わりにメタノールを使用した。 オリゴ糖配糖体２０５ｅおよび２０５ｇは、ボールセン（Ｐａｕｌｓｅｎ）ら■ およびアライス（Ａｌａｉｓ）らＩ２の方法に従うが、メタノールの代わりに８ −メトキシカルボニルオクチルを使用した。全ての場合てオリゴ糖配糖体は、適 切な溶媒混合物てイヤトロビーズ（［ａｊｒｏｂｃａｄｓ）のクロマトグラフィ ーにより精製して、回収した物質はバイオゲル（ＢｉｏＧｅｌ）　Ｐ２またはセ ファデックス（Ｓｅｐｈａｄｅｘ）　Ｌ　Ｈ２０のクロマトグラフィーを行い水 で溶出した。この回収した物質は水から凍結乾燥して、生成物はさらに五酸化リ ン上で真空下で乾燥した。 実施例３６９−ヒドロキシノニル２−アセトアミド−２−デオキシ−［β−Ｄｂ （０，１００ｇ、０．１８９ｍ）の溶液に、酢酸ナトリウム（０，２００ｇ）と ホウ化水素すトリウム（０，０６０ｇ）を添加した。２４時間１組さらに＋４° Ｃに維持した反応混合物に、ホウ化水素ナトリウム（０，０２０ｇ）を添加した 。 ４８時間後同一温度で、酢酸の添加によりｐＨを５−６にした。次に溶液を過剰 のメタノールで共蒸発させた。残渣を水（ｌｏｍいに溶解して、Ｃ１１シリカゲ ルのカラムに流して、さらに水で洗浄した。メタノールで溶出後、溶媒を真空下 で蒸発させた。残渣を水とメタノールのｌｏ　１混合物に溶解して、ＩＮ水酸化 すトリウム水溶液の添加によりｐＨを１３−１４にした。ｔ、１．　ｃ、（６５ ：３５．５、クロロホルム、メタノールおよび水）が、未反応出発物質２０４ｂ の消失を示すまで、混合物を室温に放置した。次にＤｏｗｅｘ　５０ｘ８　（Ｈ ＋型）の添加により混合物を中和して、樹脂を濾過した。生した溶液はＡＧ　ｌ Ｘ８（蟻酸塩型）のカラムに流した。溶出物を凍結乾燥して、水およびエタノー ルの１．１混合物を用いて、残渣をセファデックス（Ｓｅｔｌｈａｄｅｘ）　Ｌ 　Ｈ２０に流した。 ’Ｈ−ｎ、　ｍ、ｒ、（Ｄｔ　０）　：４．　５４５　（ｄ、ＩＨ，Ｊｌｌ　８ ．　ＯＨ２゜Ｈ−り　、４．　４３０　（ｄ、　ＩＨ，Ｊ＋　、２　７．　５Ｈ ｚ、　Ｈ−１’　）　、２．　０２５　（ｓ、３Ｈ，ＮＡｃ）、１．５４３　（ ｍ、４Ｈ）および１．　３０４　（ｍ、１０１−１）：メチレン；１３Ｃ−ｎ、 ｍ、ｒ、（Ｄｔ　Ｏ）：Ｉ７５．３　（Ａｃ）、１０４、　３６　（Ｃ−１’　 ）、Ｉ　０１．　７２　（Ｃ−１）、Ｇ７．７２．６１．８５．６１．６０　（ ３ＣＨ２０Ｈ）。 実施例３７９−ヒトロギノノニル２−アセトアミド−２−デオキシ−［β−Ｄ− がラクＩ〜ピラノシル−（１−４）−０−］−β−Ｄ−グルコピラノシド　並０ ６）　；　’Ｈｎ、　ｍ、ｒ、（ＤｔＯ）　：４．　５２０　（ｄ、ＩＨ，Ｊ＋ 、ｔ　７．　５Ｆ１ｚ、Ｈ−Ｉ）　、４．　４７３　（ｄ、　ＩＨ，Ｊ、、、、 　７．　６Ｈｚ、Ｈ−１°　）　、２゜０３３　（ｓ、３Ｈ，ＮＡｃ）、１．　 ５４３　（ｍ、４Ｈ）および１．３０２（ｍ。 １ｏｔ−（）　メチレン；”Ｃ−ｎ、　ｍ、ｒ、（Ｄｔ　０）　：１７５．　２ ３　（Ａｃ）、１０３．７１および＋０１．８８　（Ｃ−１，Ｃ−１’　）、（ ｉｏ、９３．６１．８５および６２．　７１　（３ＣＨ，ＯＨ）。 実施例３８５−アリルオキシペンｆル２−アセ１−アミド−２−デオキシ−［β −Ｄ−がラフＩ・ピラノツルー（１−３）−□−］　−β−Ｄ−グルコビラノソ ド２０４Ｃの合成 本実施例および実施例３９の合成概略図は図３５に記載する。 Ａ　アリルオキシ−５−ペンタノール　２２９の合成臭化アリル（２，５ｍＬ、 ０．　０２９ｍｏｌ）を、無水ジメチルホルムアミド中の１゜５−ペンタンノオ ール（３ｇ、０．　０２９ｍｏｌ）と水素化す１〜リウム（１，２ｇ。 油中８００６分散液）の混合物に滴下して添加した。室温で一晩撹拌を続けた。 Ｔ１、ｃ、（２：ｌ、トルエンと酢酸エチノりはまだ少量の未反応ベンタンジオ ールの（ｒ−在を示した。未反りこ：の水素化すｌ・リウムは、メタノールの添 ＩＪＩＩにより分解した。混合物は真空下で蒸発させて５０ｍしまて濃縮した。 塩化メチレン（１５０ｍＬ）ての界釈ｔ＆、溶媒は水で洗浄しく３回）、硫酸マ グネシウム上で乾燥させて真空Ｉ・て蒸発させた。残渣を、トルエンと酢酸エチ ルの２．１混合物を溶出液として用いたノリ力ゲルのクロマトグラフィーにかけ た。適切な分画より化合物（ｄｄ、ＩＨ，Ｊ＝５．５および１．　ＯＨｚ、アリ リック）、３．６６および３゜４６（２ｔ、各２８．Ｊ＝６．　５Ｈｚ、ＯＣＨ ２）、　１．　６４　（ｍ、４Ｈ）および１．　４４　（ｍ、２Ｈ）　：メチレ ン；”Ｃ−ｎ、　ｍ、ｒ、（ＣＤＣＩｓ　）　：Ｂ　５−アリルオキシペンチル ２−デオキシ−２−フタルイミド−β−Ｄ−グルコピラノシト　２３２の合１戊 ジクロロメタン（５ｍＬ）中の臭化３．　４．　６−トリー〇−アセチルー２− デ第１０ｍｍｏｌ）、トリフルオロメタンスルホン酸銀（２，５７ｇ、１０．０ 止圓ｌ）およびコリノン（１，２３ｍＬ、９．　０ｎｗｎｏｌ）の混合物に一７ ０°Ｃて滴下して添加した。−７０°Ｃて３時間撹拌後、ｔ、１．　ｃ、（２： Ｉ、トルエンと酢酸エチル）は、出発物質の臭化物と反応生成物か同一のＲｆを 有することを示した。少量のトリエチルアミンの添加後、反応混合物をジクロロ メタンで希釈して通常とおり処理した。ンロノブ状の残渣を、トルエンと酢酸エ チルの５：ｌ混合物を用いたノリ力ゲルのクロマトグラフィーを行い化合物２３ １　（４，ＯＯｇ、７１９６）を得た。　’Ｈ−ｎ、ｍ、ｒ、（ＣＤＣＩｚ）： ５．８０　（ｍ、２Ｈ，−Ｃ旦＝およびＨ−３）、５．　３６　（ｄ、ＩＨ，Ｊ ｌ、ｚ　８．　５Ｈｚ、　ＨＩ）、５．１８（ｍ、３Ｈ，＝ＣＨ２およびＨ−４ ）、２．１３．２．０６．１．　８７　（３ｓ。 各３Ｈ，３Ａｃ）、ｌ、４０　（２Ｈ）および１．　ｌ　５　（ｍ、４Ｈ）　： メチレン。 メタノール（０，５００ｍＬ）中の０．２Ｍのナトリウムメトキント溶液を、０ °Ｃて冷却した無水メタノール（３０ｍＬ）中の化合物２３１　（４，００ｇ、 　７．　１ｍｍｏｌ）の溶液に滴下して添加した。混合物を、ｔ、１．　Ｃ，（ １０：Ｉ、クロロホルムとメタノール）か出発物質の消失を示すまて０°Ｃて２ 時間撹拌した。反応混合物を０℃てＤｏｗｅｘ　５０（Ｈ“Ｍ、トライ）で脱イ オン化した。濾過および溶媒の蒸発により残渣か残り、これをクロロポルムとメ タノールの１００：５混合物を溶出液として用いたシリカゲルのクロマトグラフ ィーを行い化合物２３２　（２，３６ｇ、７６９６）を得た。　’Ｈ−ｎ、ｍ、 ｒ、（ＣＤＣＩｚ　）＋　７゜７０および７．　８０　（ｍ、４Ｈ，芳香族）、 ５．　８２　（ｍ、ＩＨ，−ＣＨ＝）、５、　１７　（ｍ、３Ｈ，＝ＣＨｔおよ びＨ−１）、１．３８および１．１０（ｍ。 ６Ｈ，エチレン）；”Ｃ−ｎ、ｍ、ｒ、（ＣＤＣＩｓ　）：＋３４．９およびＩ Ｈ６，６（−Ｕｆレニツク）、９８．３　（Ｃ−１）、５６．６　（Ｃ−２）。 ０５−アリルオキソペンチル４，６−０−ベンジリデン−２−デオキシ−２−フ タルイミド−β−Ｄ−グルコビラノンＩ”２３３の合成パラトルエンスルホン酸 ｌ水和物（０，０２５ｇ）を、無水ジメチルホルムアミド中のλ３２　（１，０ ｇ、２．　３％ｗｎｏｌ）およびα、α−ジ−メトキシトルエン（０，６９０ｍ Ｌ、４．　６％ｗｎｏｌ）の溶液に添加した。４０″Ｃて２時間撹拌後、ｔ。 ｌ、ｃ、（ｌｏｆｔ、クロロポルムとメタノール）は反応の終了を示した。少量 の１〜リエチルアミンの添加後、大部分の溶媒はＦ【上下て蒸発して残渣はジク ロロメタンで希釈し通常とおり処理した。溶媒の蒸発後、残渣をトルエンと酢酸 エチルの９１混合物を用いたシリカゲルのクロマトグラフィーを行い、化合物２ ３３　（１，３６ｇ、９０．１％）を得た。［ｆｆ］　ｏ　”＋２４．　ｌ　（ ＣＯ，５クロロホルム）　；　’Ｈ−ｎ、　ｍ、ｒ、（ＣＤＣＬ）　ニア、１５ −７．　９０　（ｍ。 ｄ、Ｊ、、２８．５Ｈｚ）］、＋１　４０　（ｍ、２Ｈ）および１．１７（ｍ、 ４Ｈ）　・メチレン。 Ｄ。５−アリルオキシペンチル４．６−０−ペンノリデンー２−デオキソ−［２ ゜３、　４．　６−テトラ−０−アセチルーβ−Ｄ−ガラクトピラノシル−（１ −３）−Ｏ−］−］２−フタルイミ１−−β−Ｄ−グルコピラノシｌ’２３の合 成スルホン酸トリメチルンリルトリフルオロメタン（０，１ｍＬの溶液：１．Ｏ ｍＬのジクロロメタン中の０．０５０ｍＬの試薬から製造する）を、化合物２３ ３（１゜２０ｇ、２．　２９ｍｍｏｌ）、２．　３．　４．　６−テトラ−０− アセチルーａ−Ｄ−ガラ’）　ｌ・ヒラ／シル７セｌ−イミデー１−２３４　（ １，７０ｇ、　３．５０ｍｍｏｌ）およびモレギュラーンーブ（０，５００ｇ、 −２０″Ｃに冷却したトルエンとジクロロメタンのｌ＝１混合物（３０ｍＬ）中 で粉砕した）の混合物中に注入した。混合物を一２０°Ｃて０．５時間撹拌して 、ゆっくり１時間でｏ’ｃにした。ｔ、１．　Ｃ。 （１１、ヘキサンと酢酸エチル）は反応の終了を示した。少量のトリエチルアミ ンを添加して、塩化メチレンで希釈および濾過後、溶媒を通常の方法て処理した 。蒸発後、残渣をトルエンを用いたシリカゲルのカラムに適用して、溶出はヘキ サンと酢酸エチルの２１混合物で続けた。適切な分画は三糖２３５　（１，６３ ｇ、７４９６＞を与えた。［α］　ｏ　”＋４．　ｌ　（ｃ、０．　５．　ＣＨ ＣＩｓ　）　；’ｆ−１−ｎ、　ｍ、＋、（ＣＤＣ１３）　：　７．　４０−８ ．　００　（ｍ、９Ｈ，芳香族）、０　（ｄｄ、　ＩＨ，Ｊｒ＝ｒ　８．　０． 　Ｊｔ　、ｚ　ｌ　Ｏ，ＯＨ２，Ｈ２°　）　、２゜Ｉｔ、１．９０、ｌ、８５ ．１．５８　（４ｓ、１２Ｈ，４０Ａｃ）、１．３７および１．　ｌ　２　（ｍ 、６Ｈ，メチレン）　；”Ｃ−ｎ、　ｍ、ｒ、（ＣＤＣＩｓ　）　：１３４．６ および１１７．０（エチルニック）、１０２．１，１０１．２．９９゜４（ベン ジリデン、Ｃ−１およびＣ−１’）。 Ｅ　５−アリルオキシベンチル２−デオキシ−［２，３，４，６−テトラー〇− アセチル−β−Ｄ−がラフ１−ピラノシル−（１−３）−０−］−］２−フタル イミ７０°で１時間加熱した後、ｔ、１．　Ｃ，（ｔｏｏ：５、クロロホルムと メタノール）は反応の終了を示した。過剰量のトルエンと共蒸発させると残清か 残り、これをクロロホルムとメタノールの１００：２混合物を溶出液として用い たシリカゲルのクロマトグラフィーを行い化合物２３６　（１，１２ｇ、７６％ ）を得た。 ［α］　、　”。＋９．　３　（Ｃ，０，５５ＣＨＣｌ５　）　；　’Ｈ−ｎ、 　ｍ、ｒ。 （ＣＤＣＬ　）：　７．７０　７．９５　（ｍ、４Ｈ，芳香族）、５．　８２　 （ｍ、１５、　０７　（ｄ、ＩＨ，Ｊｌ、−８，５Ｈｚ、ＨＩ）、４．　８４　 （ｄｄ、ＩＨ。 Ｊｚ、ｓ−１０，ＯＨ２，Ｈ３’　）、２．１０．２．Ｃ８，１，９０（３ｓ。 ９）−Ｌ　３　０△Ｃ）、！、０５−１．　４７　（ｍ、９Ｈ，ｌ　ＯＡｃを含 む）。 ”Ｃ−ｎ、ｍ、ｒ、（ＣＤＣＩｚ　）：　１００．３および９’７．　５　Ｃ− １およびＣＩ’、１ｌｆ）分析（ＩＩ′ｌ：ｃ、５６．　８８．Ｈ，６，１７： Ｎ、１．　８３゜実測値　Ｃ，５５，５９；Ｉｔ　６．　２０：Ｎ、１．　８４ ゜Ｆ　５−アリルオキソベンチル２−アセトアミド−２−デオキソ−［β−Ｄ− がラクトピラノシル−（＋　−３）　−〇−］−β−Ｄ−グルコピラノシｌ”２ ０４ｃの合１戊 イソプロパツールと水の５１混合物（２０ｍＬ）中の三糖２３６　（０，７００ ｇ、０．　９１１ＴＩＴｌｏｌ）に、ホウ化水素ナトリウム（０，６９０ｇ、１ ８ｍｍｏｌ）を添ＩＪＩＩＩ、た。混合物を室温で２４時間撹拌した後、ｔ、１ ．Ｃ，（６５：３５：５、クロロホルｌ４、メタノールと水）は出光物質の消失 を示した。酢酸（８，２ｍＬ）の添１＋ｎｉ組混合物を１００°Ｃて３時間＋Ｊ Ｉ＋熱した。混合物を過剰量のトルエンと共蒸発させて、乾燥した残ｉ１を、ピ リジノと無水酢酸の３・２混合物（５ｍＬ）中でジメチルアミ／−ピリジンのｒ ｒ存在下、２２°Ｃて２４時間アセチル化した。少量のメタノールの添加ｉＬ混 合物をジクロロメタンで希釈して通常とおり処理して、残った践ｔＮは少量のト ルエンと共蒸発させた。最終のシロップを、クロロポルムとメタノールの１００ ２混合物を用いたシリカゲルのクロマトグラフィーを行い、過アセチル化三糖（ ０，５００ｇ、７１９６）を得た。　’Ｈ−ｎ、ｍ、ｒ。 （ＣＤＣ１，）：５．　９０　（ｍ、ＩＨ，−ＣＨ＝）、５．７７　（ｄ、ＩＨ 。 Ｊ、、Ｎ、　７．　５Ｈｚ、　ＮＨ）、　５．　３７　（ｄｄ、　ＩＨ，Ｊ、、 ｒ　３．　５゜、Ｌ、１．　０）１ｚ、　Ｈ４’　）、５．　１５　５．　２３ 　（ｍ、２Ｈ１＝ＣＨ２）、１、９５−２．　１８　（７ｓ、　２１　Ｆｌ、　 ６　０Ａｃ、　ｌ　ＮＡｃ）　、１．５８（ｍ。 ４［Ｉ）および１．　４１　（ｍ、２＋−Ｔ）　メチレン。 ナトリウムメトギノ）・の０．５Ｎ溶液（０，３００ｍＬ）を、無水メタノール （２０ｍｌ）中の上記化合物（０，５００ｇ、０．　６２３ｍｍｏｌ）の溶液中 へ注入した。室温て＝−晩撹拌ｉｔ混合物をＤｏｗｅｘ　５０　（）（’型、ト ライ）で脱イオン化してｎ上下で蒸発した。＋ｊａｉ＆をメタノールに溶解して 溶媒の蒸発によってセライト（Ｃｅｌｉｔｅ）　（３ｇ）上にコートした。次に セライト（Ｃｅｌｉｔｅ）をイヤトロヒーズ（Ｉａｔｒｏｂｃａｄｓ）　（３０ ｇ）のカラｌいの上に適用して、生成物をクロロホルム、メタノールと水の６５ 　：　２５・ｌ混合物て溶出して三糖２０４ｃ　（０，２６６ｇ、８０９ｇ）を 得た。［αコＤ　”−０，＋　６４　（Ｃ，１，水）：’Ｈ−ｎ、ｍ。 ｒ、（Ｄ２０）　：　５．　９５　（ｍ、ｌ　Ｈ，ＣＨ＝）　、５．　３０　（ ｍ、２Ｈ２＝ＣＨ２）、４．５４８　（ｄ、Ｈ（、Ｊ３，２　７．７Ｈ２，Ｈｌ ）、４．　４２６　（ｄ。 ＩＨ，Ｊ、、、　７．７Ｈｚ、Ｈ−１’）、４．　０３１　（ｄｄ、ＩＨ，Ｊ　 Ｉ。 ０、ｌ　１．　５Ｈｚ、アリリック）、２．０２３　（ｓ、３Ｈ，ＮＡｃ）、１ ．５８（ｍ、４Ｈ）および１．　３８　（ｍ、２Ｈ）　：メチレン；”Ｃ−ｎ、 　ｍ、ｒ、（Ｄ２０）：１７５．２４　（カルボニル）、１３４．７０および１ １９．０５（エチレニノク）、１０４．３３　（Ｃｌｏ　）、１０１．６８　（ Ｃ−１）、５５．４２（Ｃ−２）。 実施例３９５−アリルオキシペンチル２−アセトアミド−２−デオキシ−β−に 示したように脱保護した。過アセチル化後回収した粗物質を、ヘキサンと酢酸エ チレンのｌ　ｌ混合物を用いたシリカゲルのクロマトグラフィーを行い過アセチ ル化誘導体（０，１８０ｇ、５５９６）を得た。［（Ｚ］　ｏ　”＋　Ｉ　１． 　５　（Ｃ，０゜７、りｏロホルム）；　’Ｈ−ｎ、ｍ、ｒ、（ＣＤＣＩｚ）： ５．９０　（ｍ、ＩＨ。 −ＣＨ＝）、５．　６４　（ｄ、ＩＨ，Ｊｚ、Ｎ、８．　５Ｈｚ、　ＮＨ）、４ ．　６８　（ｄ。 ＩＨ，Ｊ、、２７．５Ｈｚ、Ｈ−１）、１９５．２．　０３　（２）、２．　０ ５（３ｓ、１２Ｈ，３０Ａｃ、Ｉ　ＮＡｃ）、１．　５８　（ｍ、４Ｈ）および １゜４１　（ｍ、２Ｈ）　メチレン。　計算分析値　Ｃ，５５，８；Ｈ，７，５ ：Ｎ。 ２０５゜実測値　Ｃ，５５，８２：Ｈ，７，５３；Ｎ、２．９８゜この物質をメ タノール（５ｍＬ）中で脱−〇−アセチル化して、ここにメタノール中のすｌ− リウムメトキソトの０，５Ｎ溶液（０，１００ｍＬ）を添加した。室温で一晩後 、混合物をＩＲ−Ｃ５０樹脂（１１゛型、ドライ）で脱イオン化して、溶媒を蒸 発させた。残渣をクロロホルムとメタノールの７．１混合物を用いたイヤ得ｆＬ 。　［（Ｆｌ　、、”。−０，Ｉ　７　（ｃ、　Ｉ、水）　：　’Ｈ−ｎ、ｍ、 　ｒ、　（Ｄｔ　Ｏ）　：５．８５　（ｍ、ＩＨ，−Ｃ旦＝）　、５．２９　（ ｍ、　２Ｈ，−Ｃ旦＝）、４．５０Ｃｄ＝　ＩＨ１Ｊ＋、２　８．５Ｈｚ、ＨＩ ）、４．０３　（ｄ、２Ｈ，Ｊ　６．０ｆ（ｚ、アリリック）、２．０３３　（ ｓ、３Ｈ，ＮＡｃ）、１．５８　（ｍ、４Ｈ）および！、３６　（ｍ、２Ｈ）　 メチレン：１″Ｃ−ｎ、　ｍ、ｒ、（Ｄｓ　Ｏ）　：　１７５２（カルボニル） 、１３４７および１１９．１（エチレン）、１０１９（Ｃ−１）、６１．６　（ Ｃ−６）、５６．４　（Ｃ−２）、２９．　ｌ、２３．０および２２６（メチレ ン）。 Ｄ、シアル酸および他の糖のオリゴ糖構造への転移実施例４０　グリコノルトラ ンスフェラーゼを介するシアル酸および他の糖のオリコ糖構造への転移 本実施例はＮ’ｅｕ５Ａｃ、その類似体（集合的に［シアル酸Ｊ）、および他の 糖の、グリコノルトランスフェラーゼを介するオリゴ糖配糖体構造への酵素的転 移を示す。図３６．３７．３８．３９、および４０はこれらの転移を例示し、下 線（Ｉアラヒア数字で同定される調製した化合物の構造を与える。実施例４０ａ −４０ｅては、以Ｆのとおり調製シアリル化およびフコツル化を実施した：１、 調製ノアリル化 ＣＭＰ−誘導体（上記実施例３１−３５に記載したように）として活性化された シアル酸を、３つの哺乳動物のシアリルトランスフェラーゼ（実施例４０ａ−ｅ ）を使用して、βＧａｌ　（１−３）βＧＩｃＮＡｃ−１βＧａｌ　（１−４） βＧＩｃＮＡｃ−１βＧａ　Ｉ　（１−３）　ａＧａ　ｌＮＡｃ−１およびβＧ ａ１（１−４）βＧｌｃ−末端配列を含有する合成オリゴ糖構造に転移した。ラ ット肝からのβＧａｌ　（１−３／４）βＧｌ　ｃＮＡｃ　−ａ　（２−３）シ アリルトランスフェラーゼ（ＥＣ２，４，９９，５）およびβＧａｌ　（１−４ ）βＧＩＣＮＡＣ−α（２−６）シアリルトランスフェラーゼ（ＥＣ２，４，９ ９，１）を、マノｌ”　（Ｍａｚｉｄ）ら７７の方法に従って、アフィニティー ・クロマトグラフィーによって精製して均質にした。この方法は本明細書中て、 当該分野で公知の方法によって、ハブテンβＧａｌ　（１−３）βにＩ　ｃＮＡ ｃｏ　（ＣＨ２）Ｉ　Ｃｏｔ　Ｈ”を活性化セファロースに共有結合させて得ら れる７トリックスに関する参考文献とじて引用されている。βＧａ　Ｉ　（１− ３）（ＺＧＩＣＮＡＣ−ａ　（２−３）シアリルトランスフェラーゼ（ＥＣ２， ４，９９，４）は、ノエンザイム社（ＧｅｎｚｙｍｅＣｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ） 、ノルウオーク、コネチカッ１−より購入した。 全ての調製シアリル化反応において、受容体オリゴ糖（５−２０ｍｇ）は、ウン ヘルザグト（Ｕｎｖｅｒｚａｇｌ）ら１３の方法のように、５０−のカコジル酸 ナトリウムｐＨ６，５，０，５９６トリトンＣＦ−５４、Ｉ　ｍｇ／ｍＬのＢＳ Ａ　（ｒシアリル転移緩衝液」）中て、３７°Ｃて２４−４８時間、適切なシア リルトランスフェラーゼ（１０−５０ｍＵ）および子牛小腸アルカリ性ボスファ ターゼ（ベーリンガー・マンハイム社、マンハイム、ドイツ）の存在下で、選択 したＣＭＰ−シアル酸（５−２０ｍｇ）と−緒にインキュベートした。例えば、 シアリルオリゴ糖７−ｄ−αＮｅｕ５Ａｃ　（２−４）βＧａｌ　（１−４）β Ｃ１ｃＮＡｃ−Ｑ−（ＣＨ，）、Ｃ００ＣＨ，（２１３ｄ、４．　４ｍｇ）は、 βＧａｌ　（１−４）βＣ１ｃＮＡｃ−α（１６）シアリルトランスフェラーゼ （５１ｒｎＵ）と子牛小腸アルカリ性ホスファターゼ（２，４Ｕ）の（ｒ扛下て 、βＣａｌ　（＋−４）βＧｌｃＮＡｃ　−０−（ＣＨ２）、Ｃ００ＣＨ，（２ ０５ｂ、４．　６ｍｇ）およびＣＭＰ−７−ｄ−Ｎｅｕ５Ａｃ　（２０２ｄ、１ ５．６ｍｇ）を、２．　５ｍＬのシアリル転移緩衝液（実施例１−５参照）中で 、３７°Ｃて２８時間インキュベートすることによって合成した。反応終了後、 反応混合物をｌＯｍＬに希釈して、製造者の指示どおり調整した、３つのセソブ ーバノク（Ｓｅｐ　Ｐａｋ）　Ｃ＋　ｓカートリッジに通した。各カートリッジ を水（４ｘ５ｍいで、次にメタノール（３Ｘ５ｍいて洗浄した。メタノール溶出 物を真空下で蒸発乾固させて、残渣をクロロホルム、メタノールおよび水の６５ ：３５：３混合物（０，５ｍＬ、溶媒Ｉ）に溶解して、同一の溶媒で平衡化した イヤトロビーズ（ｌａｔｒｏｂｅａｄｓ）の小カラムに適用した。カラムを溶媒 Ｉで溶出し、次にクロロホルム、メタノールおよび水の６５・３５・５混合物（ 溶媒１］）、そしてクロロホルム、メタノールおよび水の６５：３５：８混合物 （溶媒］１１）で逐次溶出した。シリカゲルプレートのｔ、１．　Ｃ，によって 同定される（クロロホルム、メタノールおよびｏ、２ｑ６塩化カルシウム溶液の ６５　：　３５　：８混合物を溶出液として）、生成物を含有する適切な分画（ ３０滴）を、−緒にプールして、真空下て乾燥するまて濃縮した。残渣をＡＧ　 ５０Ｗ−Ｘ８（Ｎａ″型）の小ツノラムに通し、溶出物を凍結乾燥して、回収し た生成物を１Ｈ−ｎ、　ｍ、ｒ、て性状解析した。全ての場合で良好な純度を示 した。 １１　調製フコノル化 ＋！（’！およびＩＫオリゴ糖のシアリル化類似体は、ヒト乳βＧ１　ｃＮＡｃ ａ（ｌ−３／４）フコシルトランスフェラーゼによりさらにフコシル化すること かできる。この酵素は、パルソック（Ｐａｌｃｉｃ）ら２ｓか記載したＧＤＰ− ヘキサノールアミン・セファロースのアフィニティー・クロマトグラフィーを用 いる方法に従って、ヒト乳から精製した。フコモル化オリゴ糖の合成とｒｉｌＩ 製は、パルノック（Ｐａｌｃｉｃ）ら２′の方法の修飾法により実施した。例え ば、フコシル化構造である９−Ｎｚ　−ｃｒＮｅｕ５Ａｃ　（２−３）βＧａ　 ｌ　（１−３）　−［ａ−Ｌ−Ｆｕｃ（１−４）］−βＧＩ　ｃＮＡｃ−０−（ ＣＨ２）、−ＣＨｚ　ＯＨ（２Ｉ　７ｂ）は、ＧＤＰ−フコース（２，５ｍｇ） と９−Ｎｓ　−αＮｅｕ５Ａｃ　（２−３）βＧａ１（１−３）βＧｌｃＮＡｃ 　Ｏ（ＣＨ２）ｓ　ＣＨｔＯＨ（２０８ｂ）（１７ｍｇ）を、１．３ｍＬの１０ ０−カコジル酸すトリウム（ｐＨ６，５）、＋ｏｄｘ化マンガン、１．６ｄＡＴ Ｐ−１，６ｄｌ了ノ化す１−リウム中の、アフィニティー精製したβＧｌｃＮΔ Ｃα（＋−３／４）フコシルトランスフェラーゼ（４６ｍＵ）と−緒に、インキ ュベートして合成した。３７°Ｃて２７時間後、２．　５ｍｇのＧＤＰ−フコー スと２．３ｍＵのフコシルトランスフェラーゼを反応混合物に添加して、さらに ２１時間３７°Ｃて保持した。上述のシアリル化反応で記載したように、生成物 を単離した。粗物質（上記）のｔ、１．　ｃ、は、フコシル化かほぼ終了したこ とを示した。精製およびＡＧ　５０Ｗｘ８　（Ｎａ”型）のクロマトグラフィー の後、生成物２１７ｂ　（１，０ｍｇ）の’Ｈ−ｎ、ｍ、ｒ、は、非常に良い純 度を示した（表５）。フコノルトランスフェラーゼか高度に精製されなかった少 数例では、結合手のメチルエステルの部分的加水分解か生じた。 実施例４０　ａ　−４０ｅは以下のとおりである実施例４０ａ　本実施例は、シ アリルトランスフェラーゼ（例えば前述した実験方法に従って、ラット肝から得 たβＧａ　ｌ　（１−３／４）βＧＩＣＮＡＣ（Ｚ（２−３）シアリルトランス フェラーゼ）による、末端βＧａｌの３−ＯＨへの、修−（ルイス０またはＩ型 ）末端構造を有する受容体（例えば２０±ａと２０４データを報告する（表３と ４）。 実施例４０ｂ０本実施例は、ノアリルトランスフエラーゼ（例えば４０ａに使用 したもの）による、βＧａｌ　（１−４）βＧｌ　ｃＮＡｃ−（ＬａｃＮＡｃま たはる。場合によっては、受容体を可溶化するためにジメチルスルホキシド（５ ９６容ｉｔ）を添加してもよい。前述したように精製した、反応生成物の’Ｈ− ｎ、ｍ。 ｒ　データを報告する（表６と８）。反応混合物は前述した方法で処理した。 実施例４０ｃ　本実施例は、同一の実験方法に従い、シアリルトランスフェラー ゼ（例えば４０ａに使用したもの）による、βＧａｌ　（１−４）βＧｌｃ−（ ううに精製した、反応生成物の’Ｈ−ｎ、ｍ、ｒ　データを報告する（表６）。 実施例４０ｄ　本実施例は、ノアリノ叶ランスフェラーゼ（例えば前述したβｃ ａｌ（１−４）βＧｌ　ｃＮＡｃａ　（２−６）　ンアリ／Ｌ）ランスフェラー ゼ）による、βＧａ１（１−４）βＣ１ｃＮＡｃ−（ＬａｃＮＡｃまたはＩＨ型 ）末端単位だ、反応生成物の’Ｈ−ｎ、ｍ、ｒ、データを報告する（表７と８） 。 実施例４０ｅ９本実施例は、前述した実験方法に従い、シアリルＩ−ランスフェ ラーゼ（例えばβＧａ　Ｉ　（１−３）ａＧａ　ＩＮＡｃ（Ｚ　（２−３）シア リルトランスフェラーゼ（ジエンザイム（Ｇｅｎｚｙｍｅ））　）による、βＧ ａｌ　（１−３）ａＧａ’Ｉたように精製した反応生成物の’Ｈ−ｎ、ｍ、ｒ、 データを報告する（表９）。 β−Ｄ−グルコビラノソｌ’２１７にの合成水（０、５ｍｌ）中の２０Ｆｌｂ（ Ｉｍｇ）の溶液を、２２°Ｃで大気圧でリンドラ−（ｌｉｎｄｌａｒ）触媒（１ ，０ｍｇ、アルドリッチ・ケミカル社（Ａｌｄｒｉｃｈ　ＣｈｅｍｉｃａｌＣｏ ｍｒｌａｎｙ）、ミルウ十−ギー、ウィスコンソン）の（ｒ扛下で１５分間水素 化した。 ｔ、］、Ｃ，（６５：３５：８、りａロホルｌ４、メタノールおよび０．２９６ 塩化カルシウム）は、変換の完了を示した。混合物をセライト（Ｃｅｌｉｊｅ） で濾過して、固体を水で長時間洗浄した。濾液を濃縮してミリボア（Ｍｉｌｌｉ ｐｏｒｅ）フィルターを通して、溶出物を凍結乾燥して三糖２０８ｊか残った； ’Ｈ−ｎ、ｍ、ｒ　上記表３参１も メタノール（１０μＬ）中の無水酢酸（約０．　２ｍｇ）を、ｏ’ｃて０．０２ Ｎ＋、り水酸化ナトリウムとメタノール（０，３００ｍ１）のｌ　ｌ溶液（０， ３００ｍＬ）中の２０８４　（約１ｍｇ）の溶液に添加した。ｔ、１．　Ｃ，（ 上記の溶媒）は反応終了を示し、次に溶媒を蒸発させた。残渣を水（２ｍＬ）に 溶解して、セップーパック（Ｓｅｐ−Ｐａｋ）ノＪ−ｔ−リッジに適用した。カ ーＩ・リッジを水で洗浄して、生成物をメタノールで溶出して三糖２０８ｋ　（ 約１　ｍｇ）を得た：　’Ｈ−ｎ、　ｍ、ｒ、上記表３参興。 換はほとんど終了したことを示した。精製により２１７ｋ（約０．　５ｍｇ）が 得られた：　’Ｈ−ｎ、　ｍ、ｒ、：上記表５参照。 実邊例４３　８−Ｎ−メチルアミ１へオクチル（５−アセトアミド−３，５−ジ デオギノーα−Ｄ−グリセローガラク）・−２−ノヌロービラノシロン酸　Ｎ− メチルアミｌ”）−（２−３）−０−β−Ｄ−ガラクトピラノツルー（１−３） −０−［α−Ｌ−フコピラノンルー（＋−４）−０−］−］２−アセトアミドー ２−デオギノーβＤ−グルコピラノンｌ’２１８１の合成四糖２１８ａ　（０， ００３ｇ）をＤｏｗｅｘ　５０Ｘ８　（Ｎａ＋型）樹脂に適用して水で溶出した 。適切な分画を凍結乾燥し、続いて五酸化リン上てさらに乾燥した。ツメチルス ルホキノ［・に溶解した残渣にヨウ化メチル（０，０５０ｍＬ）を添１川した。 暗所で２０時間撹拌後、溶液を真空下て蒸発させて、水（１１ｍＬ）て希釈して 、訃ノブーバック（Ｓｅｐ−Ｐａｈ）Ｃ＋＋カートリッジに適用した。水（１０ ｍ（、）で洗浄後、生成物をメタノールで溶出した。適切な分画の蒸発により残 渣が残り、これをクロロポルム、メタノール　水の６５：３５：５混合物を用い るヤトロヒーズ（Ｉａｔｒｏｂｅａｄｓ）　（０，５ｇ）のクロマトグラフィー を行い、化合物２１８ａ　（０，０２５ｇ）のメチルエステルか得られた：　’ Ｈ−ｎ、　ｍ、ｒ、：５、　０９９　（ｄ、　ＩＨ，Ｊｌ、２　３．　７５Ｈｚ 、Ｈｌ　αＦＵＣ）、４．５１７　（ｄ、２Ｈ，Ｊｌ、２　７．５Ｈ２，Ｈ−１ βＧａｌおよびβＧ］ｃＮＡｃ）、３８６６および３．　６８３　（２ｓ、　Ｃ Ｏ２ＣＨ−）、２．　７８１　（ｄｄ、ＩＨ。 Ｊｚ−−、ｓ−−１２，５Ｈｚ、　Ｊｚ。４　４．５Ｈｚ、Ｈ−３ｅｑ　Ｎｅｕ ５Ａｃ）、２．０３２および２．　０１８　（２ｓ、６Ｈ，２ＮＡＣ）、１９１ ３（ｄｄ、ＩＨ，Ｊ２ａ１１．１　１２．５Ｈ２，Ｈ−３ａｘ　Ｎｅｕ５Ａｃ） 、１．　１６０　（ｄ、３Ｈ，Ｊ、、、６．５Ｈｚ、Ｈ−６ｃｒＦｕｃ）。 この物質をＮ−メチルアミン（！ｍＬ）の４０９６溶液中で５０°Ｃで３．５時 間加熱した。真空下で蒸発後、残渣を水（ＩｍＬ）に溶解して、セップーパック （Ｓｅｐ　−Ｐａｋ）カートリッジに適用してさらに水で洗浄した。メタノール て生成物を溶出後、溶媒を蒸発させて残渣を水から凍結乾燥して２１８＋　（０ ，００２５ｇ）を得た；　’Ｈ−ｎ、　ｍ、ｒ、：　（表５）。 ジ−Ｎ−アセチルラクトサミニル構造て終了するモノフコモル化オリゴ糖の合成 ＩＩ型鎮咳構造存する血液量決定基に関連するオリゴ糖配糖体、すなわちシアリ ルルイス８の還元糖に結合しているβＧａ１（１→４）βＧＩｃＮＡｃ−ＯＲ二 糖配糖体を有する三糖リルルイス１誘導体であるＣＤ６５を、合成する異なる方 法を説明する目的で、以下の実施例４４−５１を示す。さらに詳しくはカシエム （Ｋａｓｈｅｍ）ら１ｏ、および「ジ−Ｎ−アセチルラクトサミニル構造て終了 するモノフコシル化オリゴ糖の合成方法」という名称の、１９９１年１０月２日 出願の合衆国特許出願第０７／７７１，２５９号（両者とも本明細書中に参考文 献として引用されている）を参照せよ。 下記の実施例は、化合物３０５ａと３０５ｂの調製を説明する（調製法は図４４ に例示する）。実施例４４−５１の合成経路は、下記の一般的方法を利用しｔこ 一般的方法　使用した全ての（ｉ機溶媒は肖蒸留試薬グレードであった。ブレツ ー１−シた）’Ｉカゲルプレー１−（ＧＯ−Ｆ２５４、イー・メルり（Ｅ、　Ｍ ｅｒｃｋ）、ダームノユタノト）を、ＣＨＣ］、　、ＣＨ，ＯＨ１および０．２ ９６ＣａＣ］２溶液の６５：３５：５．６５：３５：８および／または６０：４ ’Ｏ：ｔｏ混合物で流して、エタノール中の５０６硫酸（Ｈ２Ｓｏ、）溶液の噴 霧後の黒化（ｃｈａｒｒｉｎｇ）により検出した。セノブーパノク（Ｓｅｐ　Ｐ ａｋ）　Ｃ＋　ｌノＪ−トリソジ（ウォーターズ・アノノエー１−　（Ｗａｔｅ ｒｓ　Ａｓ５ｏｃｉａｔｅｓ）、ミルフォート、ＭＡ）は供給者の指示とおり調 整した。イアＩ・ロヒーズ（Ｉａけｏｂｅａｄｓ）　（６Ｒ３−８０６０）は、 ヤトロン・ラボラトリーズ（Ｉａｔｒｏｎ　１．ａｔ］ｏｒａｌｏｒｉｅｓ）　 （東５：テ、１１本）製てあり、ＡＧ　５０Ｗ−Ｘ８イオン交換樹脂はハイオラ ソト（ＢｉｏＲａｄ）　（リッチモンド、カリフォルニア）から購入した。ＣＭ Ｐ−Ｎｅｕ５Ａｃはシグマ・ケミカル社（ＳｉｇｍａＣｈｅｍｉｃａｌ　Ｃｏｍ ｐａｎｙ）　（ｔ！ン（・ルイス、ミズーリ）から購入し、そしてＧＤＰ−フコ コース１！化学合成４２により人手した。βＧａ　ｌ　（１−４）βＧ１ｃＮＡ ｃ　（＋−３）βＧａ１（１−４）βＧｌｃＮＡｃ−ＯＲは、アライス（Ａｌａ ｉｓ）ら９２の方法（二従って？；ｔられな。（１機溶媒の蒸発は、水アスピレ ータに接続したロータリー・エバポレータを用いて２（１−２５°Ｃて実施した 。　’Ｈ−ｎ、ｍ、ｒ、　スペクトルは、内部標準にアセトン（δ＝２．２２５ ）を用いて、検体はＤ２０から２回凍結乾燥して９９．　９９０６Ｄ、　Ｏに溶 解して、３００および５００ＭＨｚで測定した。８−メトキノカルボニルオクチ ル配糖体として得られた化合物のスペクトル８−メトキノカルボニルオクチル配 糖体とは異なる。 ｖ、Ｆの実施例・口から５１において、調製ノアリル化は下記のように行ったラ ット肝βＧａｌ　（１−３／４）βＧｌ　ｃＮＡｃα（２−３）シアリルトラン スフエラーセ（ＥＣ２，４，９９，５）は、マント（Ｍａｚｉｄ）ら７７の方法 に従い、エビクロロヒドリン活性化セファ【Ｊ−スフ１１：Ｎ−スクシニミジル エステルとして活性化したハブテンβＧａｌ　（１−３）βＧ　ｌ　ｃ　ＮＡ　 ｃ　Ｏ（ＣＨ２）　−ＣＯ２）（”を共在結合させて得られるマトリックスを用 いる、アフイニアイー・クロマドプラフィーにより精製した。 上記アフィニティーｈラムの流出物に含（ｒするβＧａ１（１→４）βＧｌｃＮ Ａｃα（２−６）シアリルトランスフエラーゼを、報告のとおり７４さらにＣＤ Ｐ−ヘキザノールアミンセファロースのクロマ）・グラフィーにかけた。 酵素的シアリル化は、トリトンＣＦ−５４（０，５９６）　、ＢＳＡ　（Ｉｍｇ ／ｍＬ）およびｉ”Ｉ小腸アルカリ性ホスファターゼ′６１３を含有するカコジ ル酸すトリウム緩衝液（５０閘、ｐｉ−Ｉ６．５）を用いて、プラスチック管中 で３７°Ｃて行った。 最終反応混合物をＨ，Ｏて希釈して、報告２ｓされたようにＣ１１（？ツブーパ ック（Ｓｅｐ−Ｐａｋ）カー１〜リツツに適用した。Ｈ，Ｏて洗浄後、生成物を ＣＨ２０Ｈで溶出して溶媒を蒸発させた。残渣をＣＨＣｌ２　、ＣＨ，ＯＨおよ びＨ，Ｏの６５：３５５混合物に溶解して、イア）−ロビーズ（Ｉａｔｒｏｂｅ ａｄｓ）　（０，２００から０．５　（１０ｇ）の小カラムに適■しこ。同一の 溶媒混合物で洗浄後、生成物を同一溶媒の６５：３５：８および／または６５： ４０：ＩＱ混合物で溶出した。適切な分画（ｔ、１．　ｃ、　）をプールして、 溶媒を真空ドて蒸発させて、残渣をＨ，０てＡＧ　５０Ｗｘ８　（Ｎａ’へりの 小カラムに通して、生成物を真空下で凍結乾燥後回収した。全ての場合で８−メ Ｉ−キノカルボニルオクチル配糖体を、対応する８−カルボキシオクナル配糖体 から分離した。 以下の実施例４４から５１では、調製フコシル化は下記のとおり行われた：βＧ ］ｃＮΔＣα（ｌ→３／４）フコシルトランスフェラーゼ（ＥＣ２，４゜１６５ ）を、報告２６のとおりヒト乳から精製しｔ島酵素的反応は、カコジル酸すＩ− リウム緩衝液（ｌＯＯｄ、ｐＨ６，５）　、ＭｎＣＩｔ　（Ｉ　ＯｍＭ）　、Ａ ＴＰ（１，６＋ｔＮｌ　、ＮａＮ５（１，６ｍＭ）を用いて、プラスチック管中 て３７°Ｃて実施した。反り、生成物を上記に記載したように単離して精製した 。 実施例４４８−メ１−キノカルボニル才りチル（５−アセトアミＩ”３．５−ジ デオギノーα−Ｄ−グリセロ−Ｄ−がラクト−２−ノヌロビラノンロン酸）＝（ ２−６）−０−β−Ｄ−ガラクトピラノシルー（＋−４）−□−２−アセトアミ ドー ラノツルー　（＋−４）−０−２−アセトアミド−２−デ才キシーグルコピラノ ソＦ（３０２ａ）の調製 化合物３０　ｌ　ａ　（６，５ｍｇ）　、ＣＭＰ−Ｎｅｕ５Ａｃ　（１７ｍｇ） 　、βＧａ１（＋−４）βＧＩｃＮ八ｃａ（へ−６）シアリルトランスフエラー ゼ（５０ｍＵ）およびアルカリ性ホスファターゼ（＋５Ｕ）を、２．　５ｍＬの 上記緩衝液中実施例４５８−メＩ・ギノカルポニルオクチル（５−アセトアミド −３，５−ジデオギノーα−Ｄ−グリセロ−Ｄ−がラクト−２−ノヌロピラノノ ロン酸）−（２−６）−Ｏ−Ｂ−Ｄ−ガラクト−ピラノツルー（１’−４）−ｏ −２−７セｌ−アミド−２−デオギンーグルコピラノノル−（１−３）−０−β −Ｄ−ガラクトピラ）ツルー　（１−４）−０−Ｅａ−Ｌ−７：］ピピラノツル ー（１−３）−０−］化合物３０２ａ　（３，Ｏｍｇ）　、ＧＤＰ−フコース（ ５ｍｇ）、βＧＩｃＮＡｃα（Ｉ−３／４）　ノアリルトランスフエラーゼ（１ ０ｍＵ）を、緩衝液（１，３ｍ１）実施例４６８−メトキンカルボニルオクチル β−Ｄ−ガラクトピラノシル−（＋−４）−０−２−アセトアミ１〜−２−デオ キシ−β−Ｄ−グルコピラノシル−（１−３）−０−ｆＪ−Ｄ−ガラク１〜ピラ ）ツルー（１−４）−０−［（２−Ｌ−フコ−ピラノツルー（１−３）−Ｃ１− ］　］２−アセトアミドー２−デオキシーβ化合物３０３ａと３０３ｂ　（１， ７ｍｇ）を、カコジル酸ナトリウムの緩衝液（５０蘭、ｐＨ５，２，２ｍシ）中 の、アガロースに固定したクロストリジウム・パーフリンゲンス（Ｃｌｏｓｔｒ ｉｄｉｕｍ　Ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ）ノイラミニダーゼ（シグマ・ケミカルン 上（Ｓｉｇｍａ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｃｏｍｐａｎｙ）、ＩＵ）と−緒（こ、３ ７℃でインキュベ−１−した。２４時間後、混合物を水（ｌｏｍＬ）で希釈して 、アミコン（Ａｍｉｃｏｎ）　ＰＭ＝１０膜で濾過した。流出物および洗浄液を 凍結乾燥して、残渣を水（３ｍＬ）に溶解して、２つのＣ１１カートリツジに適 用した。各カー１−リッジをメタノール（２０ｍＬ）で溶出する曲に水（１０ｍ Ｌ）で洗浄した。溶媒の蒸発後、残渣を上述のとおりイアトロビーズ（Ｉａけｏ ｂｅａｄｓ）　（２１０ｍｇ）のクロマトグラフィーを行タンで処理した。 実施例４７８−メトキンカルボニルオクチル（５−アセトアミド−３，５−ジデ オギソーα−Ｄ−グリセロ−Ｄ−がラクト−２−ノヌロピラノシロン酸）−（２ −３）−０−β−Ｄ−ガラクトピラノシルー（１−４）−０−２−アセトアミド −２−デオキシーβ−Ｄ−グルコビラノンルー（１３）−０−β−Ｄ−ガラクト ピラノンルー（１−４）−０−［α−Ｌ−フコピラノシル−（＋−３）−−３／ ４）βＧＩｃＮＡｃα（２−３）シアリルトランスフエラーゼ（１７ｍＵ）　、 アルカリ性ホスファターゼ（５Ｕ）を、シアリル化緩衝液（１，５ｍＬ）実施例 ４８８−メトキンカルボニルオクチル（５−アセトアミド−３，５−ジデオキシ ーα−Ｄ−グリセロ−Ｄ−ガラクト−２−ノヌロビラノシロン酸）−（２−３） −０−β−Ｄ−ガラクトピラノンルー（＋−４）−０−２−アセトアミド−２− デオキシーβ−Ｄ−グルコピラノノル＝（＋−３）−〇−β−Ｄ−ガラクトピラ ノシルー（１−４）−０−２−アセ１ヘアミド−２−デオキシ−グルコ３／４） βＧＩ　ＣＮＡＣ（Ｚ　（２−３）シアリルトランスフエラーゼ（４６ｍＵ）、 およびアルカリ性ホスファターゼ（１５Ｕ）を、シアリル化緩衝液（２，５ｏ＋ Ｌ）中て４８時間インキュへ一トシた。単離および生成物の精製後、３０６ａ（ ２゜５ｍｇ）か得られた。 実施例４９８−７トキノカノロ；ニルオクチル（５−アセトアミド−デオキシー α−Ｄ−グリセロ−Ｄ−ガラクト−２−ノヌロピラノノロン酸）−（２−３）− ０−βーＤーガラクトピラノシルー（１−４）−０−［α−Ｌ−フコピラノツル ー（＋−３）−０−１　２−アセ１−アミ１−−２−デオキシーグルコピラノノ ル−（＋−３）−０−β−Ｄ−ガラクトピラノンルー（１−４）−０−［α−Ｌ −フコピラノツルー（＋−３）−０−］　］２ーアセトアミドー２−デオキＣα （１→３／４）フコノル１−ランスフェラーゼ（１　９ｍＵ）を、酵素緩衝液（ ２．　０ｍｌ）中で４８時間インキュへ−１・した。単離および生成物の精製後 、３０７ｂ　（１．７ｍｇ）か得られた。 」二足実施例４４から４９て調製した化合物の’Ｈ−ｎ．ｍ．ｒ　データを以下 に記載する 下記の実施例５０と５１は、式１の化合物の調製の代替法を説明する。 これらの実施例では、他に特別の記載がなければ、化学合成の間の処理は一般に 、ジクロロメタンによる抽出、続いて有機相の水、炭酸ナトリウム希釈溶液およ び水による前通の逐次洗浄を含む。記載したように、次に有機溶媒を硫酸マグネ シウム」二で乾燥して、固体を濾過し、溶媒を真空下で蒸発させた。 水アスピレータに接続したロータリー・エバポレータを用いて２０−２５°Ｃて イｆ機溶媒を蒸発させた。　’Ｈ−ｎ、ｍ、ｒ　スペクトルは、内部標準にアセ トン（δ＝２．２２５）を用イア、試料をり、ｏがら２回凍結乾燥しテ９９．９ ９９６Ｄ２０に溶解して、３００ＭＩＩｚで測定した。８−メ１ギン力ルポニル オクチルー力ルホキノオクチル配糖体として得られた化合物のスペクトルは、Ｃ Ｏ，ＣＨ，による−重項の欠如、δ＝２．３１４　（ｔ、７．５Ｈｚ）にＣＨ， ＣＯ２Ｈの三重項のｒｔ在という点て、各８−メトキシカルボニルオクチル配糖 体とは異なる。 調製酵素的ガラクトツル化 ウノ乳βＧｌｃＮＡｃβ（Ｉ→４）ガラクトシルトランスフェラーゼ（ＥＣ２、 ４，１，２２、比活性［５ｉ１位／ｍｇタンパク）およびＵＤＰ−Ｇａ　Ｉはシ グマ社（Ｓｉｇｍａ）から人手した。酵素反応は、２０＋ｙ６１の二塩化マンガ ンを含有するカコジル酸ナトリウム緩衝液（１００ｍｌＪ、ｐＨ７，５）を用い て、プラスチック管中で３７°Ｃて実施した。反応生成物は、調製ノアリル化に ついて前述したように精製した。 ある場合には酵素的調製に依存して、アグリコンの末端メチルエステルの加水分 解か起きることかある。その結果、最終生成物は、メチルエステルまたは遊離酸 基で終了するアグリコンを有する糖として単離し得る。これら２つの糖は、ｍｆ 述のイアトロヒーズ（ｌａｔｒｏｂｅａｄｓ）のクロマトグラフィーの工程で分 離する。糖のアグリコンの２つの３２は’Ｈ−ｎ、ｍ、ｒ、て同定される。 実施例５Ｉ　化合物３１９の合成 八　８−メトギンカルボニルオクチル（２，３，４，６−テトラ−０−アセチル ーβ−Ｄ−ガラクトピラノツル）−（１−４）−０１，６−′）−０−アセチジ クロロメタン（４ｍＬ）中のスルホン酸トリメチルシリル１−リフルオロメタン （０，５０４ｍ１．２．　６ｍｍｏｌ）の溶液を、４°Ｃてジクロロメタン（３ ０ｍＬ）中の三糖供（１体３　ｌ　Ｉ′２（２，０ｇ、２．　６ｍｍｏｌ）、ト ライアライｌ−（ｄｒｉｅｒｉｔｅ）（４，０ｇ、粉砕物）および８−メトギシ カルポニルオクタノール（１，９ｇ。 １０、Ｏｎｗｎｏｌ）の混合物に添加した。４℃で０．　５時間撹拌後、混合物 をゆっくり１時間室温まで加温した。４°Ｃに冷却後、ジクロロエタン（２ｍｌ ）中の第２部分の触媒（０，２５０ｍＬ、１．　３ｎｗｎｏｌ）を添加した。ゆ っくり加温して室温で１時間撹拌（Ｌ　ｌ−リエチルアミンを添加して反応を停 止させた。濾過後、通常の処理により回収した粗生成物を、真空下で乾燥して、 ピリジンと無水酢酸の２＝１混合物中てアセチル化した。メタノールの添加後、 混合物を通常とおり処理して、溶媒を過剰のトルエンと共蒸発させた。残渣をト ルエンと酢酸エチルの２・１混合物を用いたシリカゲルのクロマトグラフィーを 行い、化合物３１２（１，４０ｇ、６０９６）　をｍｆこ。　’Ｈ−ｎ、ｍ、　 ｒ、　（ＣＤＣＩｓ　）　：　δ　７．　９０−７．　７０　（ｍ、４Ｈ，芳香 族）、５．　７５　（ｄｄ、ＩＨ，Ｊ２．、Ｉ　Ｏ，５，Ｊ、、。 ３．５Ｈｚ、Ｈ−３）、５．　３４　（ｍ、２Ｈ，Ｈ−１およびＨ−４°を含む ）、５、　１５　（ｄｄ、ＩＨ，Ｊｒ、ｒ　８．　０．　、Ｌ、＋−１０，５Ｈ ｚ、　Ｈ２°）、４、　９７　（ｄｄ、ＩＨ，Ｈ−３’　）、３．６７　（Ｓ、 ３Ｈ，Ｃｏ、ＣＨｓ　）、２゜２５　（ｔ、２Ｈ，Ｊ　７．　５Ｈｚ、ＣＨ＝　 Ｃ０２）、２．　１９　１．　９４　（６ｓ。 １８Ｈ，６０Ａｃ）、１．　４５　（ｍ、４Ｈ）および１．　０８　（ｍ、８Ｈ ）　：メチレン。 Ｂ、　化合物３１５の合成二８−メトギシ力ルポニルオクチル（２，６−ジー〇 −アセチル−３，４−０−イソプロピリデン−β−Ｄ−ガラクトピラノシツリー （＋−４）−０−（３，６−ジー０−アセチル−２−デオキシ−２−フタルイミ ド−β−Ｄ−グルコピラノシＦ’（３１５）メタノール中のナトリウムメトキシ ドの１Ｍ溶液（０，２００ｍＬ）を、４°Ｃで冷却したメタノール（４０ｍＬ） 中の化合物３１２（１，４０ｇ、１．　６５ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。４° Ｃて１．５時間１組　ＩＲ−Ｃ５０樹脂（ｌ］４型）を用いて溶液を脱イオン化 した。樹脂を濾過し、溶媒を蒸発させて生成物（１，０ｇ、９４０６）を真空下 で乾燥させた。 無水アセトン（６０ｍＬ）中の上記物質（０，７７６ｇ、１．　２ｎｗｎｏｌ） およびパラ１−ルエンスルホン酸−水和物（６０ｍｇ）の溶液を３時間還流した 。トリエチルアミンで中和後、溶媒を蒸発し、残渣を酢酸エチルとメタノールの １００：ｌ混合物を用いたシリカゲルのクロマトグラフィーを行い、化合物３１ ４（０，５７５ｇ、７０”６）を得た；　’Ｈ−ｎ、　ｍ、ｒ、（ＣＤＩ　ＯＤ 、４．　８０のＤＯＨ）ニア、８０−７．　６０　（ｍ、４Ｈ，芳香族）、５． 　Ｉ　Ｏ（ｄ、ＩＨ，Ｊ＋＋ｔ　ｓ。 ０ｉ（ｚ、Ｈ−］）、４．　３８　（ｍ、２Ｆ（、［（−１およびＨ−３）、３ ．７０（Ｓ、３Ｈ，ＣＯ２ＣＨ２）、２．３１　（ｔ、Ｊ　７．５Ｈｚ、ＣＨ， Ｃｏ□）、１゜６５−１．　００　［ｍ、１．　５７および１．　４５　（２ｓ 、Ｃ（ＣＨ３）　２を含むコ。 さらに溶出すると４．６−イソプロピリデン誘導体（０，２００ｇ、２４％）か １１１らオ１．ｆこ。 化合物３１４　（０，５１５ｇ、０　、　８−１　ｎｒｎｏｌ）を、ビリノンと １１に水耐酸の２゜１混合物中で２２°Ｃて２４時間アセチル化した。メタノー ルを添加し、通常に処理した後、溶媒を過剰のトルエンと」（蒸発させて、残渣 をクロロホルムとメタノールの１００３混合物を用いたシリカゲルのクロマトグ ラフィーを行い、化合物３１５　（０，６４６ｇ、９０９６）をｉ！）た、［α ］。＋１３．８°　（ｃ、Ｉクロロホルム）：　’Ｈｎ、ｍ、ｒ、（ＣＤＣｌ２ 　）：６７．　９０−７．　７０　（ｍ。 ・Ｈ（、ｙＪ香族）、５．　７４　（Ｊｌ、２　８．　５．　Ｊ２、ｔ　１０． ５Ｈｚ、Ｈ３）、５．３４（ｄ、１Ｆ（、Ｊｌ、＋８．’、）Ｈ２，Ｈｌ）、４ ．８８（ｄｄ、ＩＨ。 、Ｌ　、２　〜Ｊｌ　、ｓ　６．　５Ｈｚ、　Ｈ−２’　）、３．　６７　（ｓ 、３Ｈ。 ＣＯ２Ｃ）（ｌ　１）、２．２３　（ｔ、Ｊ　７．５Ｈ２，ＣＨ２Ｃ０２）、２ ．１４．２１３．２．１０−　１．９１　（４ｓ、１２Ｈ，４０Ａｃ）、１．　 ３０−１５４　［ｍ、１．　５３および１．　３２　（２Ｓ、Ｃ（ＣＨ３）　２ を含む］。 Ｃ化合物３１６の合成　８−メトギンカルボニルオクチル（２，６−ジー０−了 セチル−β−Ｄ−がラクトピラノノル）−（１−４）　−〇−３．６−ノー〇− 下セチルー２−チオキシ−２−フタルイミド−β−Ｄ−グルコビラノット９００ ６の酢酸（１２ｍＬ）中の化合物３１５　（０，５７５ｇ、０．　６８ｎｗｎｏ ｌ）を、８０″Ｃて２時間加熱した。ジクロロメタンで希釈ｉ＆、溶媒を水、重 炭酸−）−トリウム溶液および水で洗浄した。硫酸マグネシウム上で乾燥ｉＬ溶 媒を真空下で蒸発させ、残渣をシリカゲルのクロマ１−グラフィーを行い、化合 物３１６（０，４５２ｇ、８２９６）を得た；　［αＬ＋１２．　１　（Ｃ，１ ，０３クロロホルム）。 Ｄ　化合物３１８の合成、８−メトキノカルボニルオクチル（３，４，６−トリ ー０−アセチル−２−チオキシ−２−フタルイミド−β−Ｄ−グルコピラノシル ）−（１−３）−０−（２，６−ジー〇−アセチル−β−Ｄ−ガラクトピラノノ ル）−（＋−４）−０−３，６−ジー〇−アセチル−２−デオキシ−２−フタル イミド゛−β−Ｄ−グルコビラノンＦ（３１８）塩化メチレン（０，５ｍ１）中 のスルホン酸トリメチルノリルトリフルオロメタン（０，０３６ｍ１、Ｏ’、０ ６０ｍｍｏｌ）を、塩化メチレン（５ｍＬ）中の化合物３１６　（０，ｌ　００ ｇ１０．　ｌ　２３ｎｍｏｌ）の溶液に添加した。塩化メチレン（４ｍＬ）中の ゴミデー１叫７（０，ｌ０２ｇ、Ｏｌｌ　８５ｎｗｎｏｌ）の溶液を、−７０° で冷却した上記溶液にゆっくり添加した。混合物をさらにこの温度で０．５時間 撹拌した。塩化メチレン（０，５ｍＬ）中の追加部の触媒（０，０１８ｍＬ、０ ．０３０ｎｖｎｏｌ）をさらに添ＩＪＩＩ　した。−７０°て０．５時間ｆＬ　 １−リエチルアミンを添加して反応を停止させた。回収した残渣は、クロロホル ムとメタノールの１００：２混合物を用いたシリカゲルのクロマトグラフィーを 行い、化合物３１８（０，１２０ｇ、８０９６）を得た；　’Ｈ−ｎ、ｍ、ｒ、 （ＣＤＣＩｓ　）　δ　７９５−７、　６０　（ｍ、８Ｈ，芳香族）、５．　７ ４　（ｄｄ、ＩＨ，Ｊ、、、、−１０，５Ｊ、−、、−９，０）−１ｚ、Ｈ−３ ”）、５．　６１　（ｄｄ、ＩＨ，Ｊ２．＋　１０．　５゜Ｊ、、、８．５Ｈｚ 、Ｈ−３）、５．４８（ｄ、ＩＨ，Ｊ、・、ｔ−８，５Ｈｚ。 Ｉ」−１“）、５．２７　（ｄ、ＩＨ，Ｊ、、８．５Ｈｚ、Ｈ−１）、５．１４ （ｄｄ、ＩＨ，Ｊ４’＋１−　１０．０Ｈｚ、Ｈ−４”）、４．　９０　（ｄｄ 、ＩＨ。 Ｊ２１．　８．ＯＪ３，４　１０．０Ｈｚ、Ｈ２’　）、３．　６８　（ｓ。 Ｃｏ□ＣＨ，）、２．　２２　（ｔ、Ｊ　７．　５Ｈ２，ＣＨ２Ｃ０２）、２． 　１２Ｃ２）、２．１０．２０４．１．８６．１．８５．１．　５（ｉ　（６ｓ 、２１Ｈ。 ７　０Ａｃ）、１．　４０　（ｍ、４Ｈ）　、および１．　２０　（ｍ、８Ｈ） 　メチレン。 Ｅ、　化合物３１９の合成・８−メトキンカルボニル−オクチル（２−アセトア ミド− ーガラクＩ・ピラノシル）−　（＋−４）−０−２−アセトアミド−２−デオキ シ−βーＤーグルコビラノット 酢酸ヒドラジン（１．　２７ｇ．１３．　８ｍｍｏｌ）を、無水エタノール（１ ５ｍＬ）中の化合物３１８　（０．１２０ｇ．０．０９８（２）和１）に添１１ １１　した。混合物を１８時間還流した。次に溶媒を過剰のトルエンと共蒸発さ せた。真空下で乾燥後、残渣はピリジンと無水酢酸の２・ｌ混合物中で４８時間 アセチル化した。少量のメタノールで過剰の無水酢酸を分解させた後、反応物を 通常とおり処理した。回収した溶媒を真空下で蒸発させて、残渣を過剰のトルエ ンと共蒸発させた。残渣を、クロロホルムとメタノールの１００：９混合物を溶 出液として用いたシリカゲルのクロマトグラフィーを行い、過アセチル化三糖中 間体をｉ醪た。この物質を、メタノール（０．　２００ｍｌ、）中の０．２Ｍナ トリウムメ１ーキットの存在下で、無水メタノール（５ｍＬ）中で脱−〇ーアセ チル化した。２２°Ｃて一晩ｉｌ，Ｄｏｗｅｘ５０×８て脱イオン化し、そして 濾過した後、溶媒を真空下で蒸発させた。回収した生成物を、バイオゲル（［ｌ ｉｏＧｅしＰ２のクロマトグラフィーにかけて、水とエタノールのｌ　ｌ混合物 で溶出して、純粋な三糖３１９　（０．０４４ｇ、６０”６）を１４た：　［α Ｌ　−４．８°　（ｃ，　０．　４８．水）　；　’Ｈ−ｎ．　ｍ．　ｒ。 （Ｄ２　０）：データは以下に示した。 実施例５１　８−メトキシカルボニルオクチル（５−アセトアミド−３，５−ジ デオギノーα−Ｄ−グリセロ−Ｄ−ガラクト−２−ノヌロビラノシロン酸）−（ ２ｉ）−０−　（β−Ｄ−がラクトピラノノル）−　（１−４）　−〇−　（２ −アセトアミド−２−デオキシーβ−Ｄ−グルコピラノノル）−　（＋−３）− ０−（β−Ｄ−がラクトピラノノル）−（１−４）−０−　［α−Ｌ−フコピラ ノツルー　（Ｉｉ）−０］−２−アセ１へアミド−２−デオキシ−βーＤーグル コビラノンｌ”　（３　２　２）　０）合成（化合物３２２　：ＣＤ−６５／Ｖ Ｍ−２糖）Ａ　化合物３２０の合成　８−メトキシカルボニルオクチル（２−ア セトアミド−２−デオキシーβ−Ｄ−グルコピラノシル）−　（＋−３）−０− 　（βーＤーガラクトピラノシルシル　（１−４）−０−　［αーＬーフコピラ ノシルシル１−３）−Ｏ］−２−アセトアミ１−−２−デオキシ−βーＤーグル コピラノシド化合物３　１　９　（１　５ｍｇ）　、ＧＤＰ−フコース（３３ｍ ｇ）およびβＧＩｃＮＡｃα（１−３／４）フコシルトランスフエラーゼ（５６ ｍＵ）を、上述のとおり緩衝液（４　ｍＬ）中で７２時間インキュベートした。 単離および精製後、化合物３２０　（１　４，　ｏｍｇ）か得られた。’Ｈ−ｎ ．ｍ．ｒ．データは以下に記載する。 Ｂ　化合物３２１の合成＝８ーメトキシカルボニルオクチル（β−Ｄ−ガラクト ピラノノル）−（１−４）−０−　（２−アセトアミド−２−デオキシ−β−Ｄ −グルコピラノノル）−　（１−３）−０−　（β−Ｄ−がラフ１−ピラノシル ）−（ｌ−４）−０−　［α−Ｌ−フコピラノツルー（１−３）　−０１−２− アセト了ミドー２ーデオキシーβ−Ｄ−グルコピラノシト化合物３２０　（１４ ．　０ｍｇ）　、ＵＤＰ−Ｇａ　ｌ　（２５ｍｇ）　、βＧＩ　ｃＮＡｃβ（１ −４）がラクトシルトランスフエラーゼ（＋４．５Ｕ，シグマ（Ｓｉｇｍａ）） を、上述の緩衝液（３．　２ｍＬ）中で４８時間インキュベートシた。単離およ び精製後、化合物３２　１　（Ｉ　３．　２ｍｇ）が得られた。’Ｈ−ｎ．ｍ． ｒ．データは以下に記載する。 Ｃ．化合物３２２の合成二８−メトキシカルボニルオクチル（５−アセトアミド −３．５−ジデオキシ−αーＤーグリセローＤーガラクトー２−ノヌロピラノシ ロン酸）−　（２−３）−０−　（β−Ｄ−がラフ）・ピラノシル）−　（１− ４）−０−（２−アセトアミド−２−デオキシーβ−Ｄ−グルコピラノシル）− 　（１−３）−０−　（β−Ｄ−がラクト−ピラノシル）−　（＋−４）−０− 　［α−Ｌ−フコピラノツルー（１−３）−０］−２−アセトアミド−２−デオ キシ−β−Ｄ−グルコピラノシト 化合物３２２は化合物３２１から上記１ｅのとおり合成した。 化合物３１９、３２０、３２１、および３２２の’Ｈ−ｎ．ｍ．ｒ．データは以 下に記載する。 上記方法に追加して、図１５、４６および４８は、いくつかの上記化合物を調製 する方法、代替構造を調製する方法および延長鎖を調製する方法の代替方法を例 示する。 ’＋１ーｎ．亀ｒ．構造パラメーター 轟　９，１０．１１および１２は１．４９−１．６．ｌｆ４１１１および１．３ ０（８１ｉ１　：　、（チレノの周囲に多重「１を示す以上−の実施例５２−５ ３は、２−＠酸Ｉ−化および３−硫酸塩化ｌしイスα−ＯＲ誘導体の合成、およ び３−硫酸塩化ＬａｃＮＡｃ　−ＯＲの合成を説明するｔこめ（二与えられる。 このような化合物およびそのさらに広範な誘導体は、代理人登録番号第０００４ ７５−０５０号として本明細書と同時に出願した、発明の名称（よ「免疫抑制お よび寛容原性修飾ルイス０およびＬａｃＮＡｃ化合物」である、合衆国特許出願 第０７／９８８．２５４号に、詳細に記載され、この出願は本明細δ中にその全 体か参考文献として引用されている。 下記の実施例では、他に記載のないかぎり、Ｒ＝　（ＣＨｔ）＊　ＣＯ２　ＣＨ ２である。 実施例５２　８−メトギンカルボニルオクチル−３−０−　（４．６−０−ベン ジリデン−３−〇ースルホーβーＤーガラクトビラノシル）−２−アセトアミド −４、６−０−ヘンノリアン−２−デオキシーβ−Ｄ−グルコピラノシドの合成 標題の化合物は、最υノに８−メトキシカルボニルオクチル３−０−（２．３− ジー０−ヘンシイルー４．６−０−ヘンジリデンーβーＤーガラクトピラノノル ）−２−アセ］ーアミドー４．６ー０ーベンジリデン−２−デオキソ−β−り一 グルコピラノノトを作成して調製し、一方この化合物は８−メトキンカルボニル オクチル２−アセドアＥ　Ｉ”−４．　６−０−ベンジリデン−２−デオキシ− β−Ｄ−グルコピラツノ）パと化合物３２（この化合物の合成は上記実施例２に 記載されている）を結合することにより作成した。８−メトキシカルボニルオク チル２−アセトアミド− ツノ１−は、酸性（ｐ−ｈルエンスルホン酸）アセト二Ｉ・リルあるいはツメチ ルホルムアミド（　Ｄ　Ｍ　Ｆ　）媒体中で、Ｎ−アセチルグルコサミン−ＯＲ （例えば、図１の化合物４）を約１　５当量のＣ＝　Ｈ−　ＣＨ　（ＯＣＲ，） ｔと、約０８から約５０°Ｃて６−４８時間反応させて、４．６−０−保護化ヘ ンジリデン化合物を得ることによって調製する。 化合物３２と、８−メトキソ力ルポニルオクチル２ーアセトアミド−４，６−０ −ペンノリチン−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシド（［化合物Δ））と の結合は、最初に、モレキュラーンーブ（存在する水を除去する）を含有する塩 化メチレン中で、約１当量のＮ−ヨートサクンニミドを約１当量のトリフルオロ メタンスルホン酸と組合せることにより達成する。反応混合物を一５０°Ｃに冷 却し、次に化合物Ａを添ＩＪＯし、続いて約１から１　１当量の化合物３２（化 合物Ａに基づく）を添加する。大量のトリフルオロメタンスルホン酸を使用する 場合、好ましくはトリフルオロメタンスルホン酸の添加の前に反応物を一５０° Ｃに冷却する。 反応を約１−３時間で約−２０°から０°Ｃに平衡化させる。次に反Ｌζ溶液を 一５０゛Ｃに冷却して、続いてｐＨ力仲性に達するまでトリエチルアミンを添加 する。 溶液をセライト（Ｃｅｌ　ｉ　ｔｅ）て濾過して、次に飽和重炭酸すトリウム溶 液および水で洗浄する。１１機層を乾煙させて真空−トて除去して、８−メトギ ンカルボニルオクチル３−０−　（２，３−）−〇−ベンゾイルー４．６−０− ベンジリデン−β−Ｄ−がラクトピラノノル）−２−アセトアミド−４，６−０ −ベンジリデン−２−デオギノーβ−Ｄ−グルコピラノノド（「化合物ＢＪ）を 得た。 化合物Ｂのベンゾイル基をゼンブレン（Ｚｅｍｐｌｅｎ）条件（ＮａＯＭｅ／Ｍ ｅＯＨ）下で除去して、８−メＩ・キソ力ルポニルオクチル３−０−　（４，６ −０−ヘンノリデンーβ−Ｄ−ガラクトピラノシル）−２−アセトアミｌ’−４ ．６−０−ヘンノリデンー２−デオギソーβ−Ｄ−グルコビラノット（「化合物 Ｃ」）を得ることかできる。 化合物Ｃ（ｌグラ１２．１．　３７ｍｍｏｌ）を無水ツメチルホルムアミド頁５ ．　ＯｍＬ）に溶解して、三酸化イオウービリノンＮ合体（２６７、１ｍｇ、１ ．　６４ｍｍｏｌ）を−３０″Ｃて添加した。牛した溶液を一３０°Ｃて５時間 、次に０°Ｃて１５時間撹拌した。メタノール（２ｍＬ）の添加により過剰の試 藁を分解した。反応混合物を、メタノール中のＤｏｗｅｘ　５Ｏ−Ｘ８　（Ｎａ ｈ型）樹脂に通してすトリウム塩に変換した。蒸発およびトルエンと共蒸発によ り白色固体か残り、これはジクロロメタン−メタノール−ピリジン（９：Ｉ：０ ．１）を溶出液として用いたシリカゲルのクロマｌ−グラフィーによって精製し て、標題の化合物を白色固体として得た。この物質をメタノール中てＤｏｗｅｘ 　５Ｏ−Ｘ８　（Ｎａ’型）樹脂に通してすトリー７ム塩に変換して標題の化合 物（８５０ｍｇ、７４．６９６）を得た。 実施例５３８−メトギンカルボニルオクチル３−０−　（３−０−スルホ−β− Ｄ−がラクトピラノノル）−２−アセトアミド−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコ ピラノンＩ・の合成 実施例５２の生成物（８００ｍｇ、０．　９６ｍｍｏｌ）を、炭素上の５９６パ ランウム（８００ｍｇ）を１打するメタノール（ＩＯｍＬ）に溶解して、水素（ １気圧）下で室温で５時間撹拌した。触媒は濾過により除去して、メタノール（ ５００ｍＬ）で洗浄して溶媒を蒸発乾固した。次に残渣を、ノクロロメタンーメ タノールー水−ヒリノン（８０２０・２：０．２）を溶出液として用いたシリカ ゲルのクロマｌ−グラフィーニより精製した。バイオゲル（ＢｉｏＧｅｔ）　Ｐ −２（２００−４００メソツユ）濾過およびすｌ−リウム塩への変換後、標題の 化合物（４８８ｍｇ、７７５９６）か白色固体として得られた。　’）（−ｎ、 ｍ、ｒ。　（Ｄ、Ｏ）　６４．５２０−４．５７０　［ｍ、２ｈ、Ｈ−１（ｄ、 ４．５５０．Ｊ、、、８．ＯＨ２およびＨ−１’　（ｄ、４，５４２．Ｊ、、、 、　７．７Ｈｚ）］、］４．２７７−４３４３　［ｍ、２Ｈ，Ｈ−３°　（ｄｄ 、４゜３１０．　Ｊｘ、ｓ　Ｉ　Ｏ，ＯＨ２゜Ｊ＝、４　３．５Ｈ２）およびＨ −４’　（４，２９６）を含む］、３．　６８７　（ｓ。 ３Ｈ，ＯＣ［−Ｌ　）、２．　３８８　（ｔ、２Ｈ，Ｊ７．５Ｈ２，ＣＨ２Ｃｏ ｏ）、２゜０２５　（ｓ、３Ｈ，ＮＨ八へ）、１．５７０　（ｍ、４Ｈ）および １．３０（ｍ。 ８Ｈ）。 実施例５３の２．３−二値酸塩は、６当爪の二酸化イオウ／ピリジン複合体を用 いて硫酸塩化したこと、および室温て２４時間反応を行ったことを除いて、同様 な方法で調製した。生した生成物は２−１３−硫酸塩の混合物であり、大部分は ２．３−二値酸塩であった。混合物を記載したクロマトグラフィーにより精製し て、生じた生成物のイオン交換によりルイスｃ−ＯＲの２，３−二値酸塩を二ナ トリウム塩として得た。 ルイス’−ＯＲの２−硫酸塩を、上述の条件下のベンゾイル化により化合物Ｃか ら調製した。生した生成物は、大部分はガラクトース単位上に３−ベンゾイル基 を、そして少量の２−ベンゾイルおよび２．３−ジベンゾイル誘導体を含有して いた。生成物をシリカゲルのクロマトグラフィーにより分離して、２−ベンゾイ ルおよび３−ベンゾイル誘導体の両者を純粋な生成物として得た。 ３−ベンゾイル誘導体を」二連の方法で硫酸塩化して脱保護して、２°　−スル ホールイスｃ−ＯＲを得て、これを上記のようにイオン交換してこの生成物のナ トリウム塩を得た。 化合物４２（実施例７て調製）から３′−スルホ−ＬａｃＮＡｃ誘導体を調製し くここでジベンゾイル基は、ゼンブレン（Ｚｅｍｐｌｅｎ）条件（ナトリウムメ トギシト／メタノール）下で除去される）、上述の条件下で硫酸塩化すると３° 　−スルホールイス’　−ＯＲかｉ陣られる。 以丁の実施例ては、酵素的フコノル化は下記のとおり実施した酵素的フコツル化 βＧａｌ　（１→３／４）βＧＩｃＮＡｃ　（１→３／４）フコシルトランスフ エーラーセは、パルノック（Ｐａｌｃｉｃ）ら２２か記載したＧＤＰ−ヘキサノ ールアミンセファロースのアフィニティー・クロマトグラフィーを利用した方法 に従−って、ヒト乳から精製した。ウサギＩｇＧ−セファロース（ソグマ（Ｓｉ ｇｍａ））に固定化し／こクローン化７コソルトランスフエラーゼ、ＦｕｃＴＩ ＩＩおよびＦｕｃＴＩＶは、ダリコメト（Ｇｌｙｃｏｍｅｄ）　（アラメダ、カ リホルニア）により提供された。酵素反１、Ｌ、はカコシル酸す］・リウム緩衝 液（１００ｍＮ１．ｐＨ６，５）、ＭｎＣＬ　（ｔ。 ｍＬＩ）　、ＡＴＰ　（１，６ｎｉｌ）　、　ＮａＮ５　（１，６蘭）を用いて 、プラスチック管中で室温または３７°Ｃて実行した。最終反Ｌコニ混合物をＨ ２０（５ｍいて希釈して、ｒＩｌｌ告２２のとおりＣＩＩセノブーバノク（Ｓｅ ｐ−Ｐａｋ）カートリソシートに適用した。 Ｈ２０（３ＯｍＬ）て洗浄後、生成物をＣＨ，ＯＨて溶出して溶媒を蒸発させた 。 残渣をＣＨＣＩｌ　、ＣＨ３０ＨおよびＨ２Ｏの６５：３５：５混合物に溶解し て、イア１〜ロヒーズ（Ｉａｔｒｏｔ＋ｅａｄｓ）　（０，２００からｏ、５０ ０ｇ）の小カラムに適用した。同一の溶媒混合物で洗浄ｉＬ生成物を同一・の溶 媒の６５：３５：８および／′または６０：４０：１ＯｉＩＬ合物で溶出した。 適切な分画（ｔ、１．　ｃ、　）をブーツ【シて、溶媒を真空下で蒸発させ、残 渣を水中のＡＧ　５０ＷＸ　８　（Ｎａ型）（バイオ→ｙ　ｌ’　（ＢｉｏＲａ ｄ）　）に通して、生成物を真空下で凍結乾燥後回収し／こ。 １１１１コノル化反応 Ａ　３−スルホールイスｃ−ＯＲのすトリウム塩のフコツル化誘導体（３−スル ｌ−−βＧａ　Ｉ　（１−３）　−［（Ｚ−Ｌ　−Ｆｕｃ　（１−４）　コ　− βＧｌｃＮＡｃ−ＯＲ）の調製 ト記実施例５３て調製した生成物（１９，２ｍｇ’）　、ＧＤＰ−フコース（１ ７２ｍｇ　）、乳６Ｇａｌ　（１−３／４）βＧｌ　ｃＮＡｃ　（１−３／４） フコソルトランスフエラーセ（２５ｍＬ）および子牛小腸アルカリ性ホスファタ ーゼ（２００）を、緩衝液（３，５ｍＬ）中て３７°Ｃて６８時間インキュへ− １・し７た。単離およびＦＡ製ｉ組標題の化合物（ｌ　０．　８ｍｇ）か得られ た。 Ｂ　２−スルホールイスｃ−ＯＲのすトリウム塩のフコツル化誘導体（２−スル ホ−βＧａ　ｌ　（１−３）　−［α−Ｌ−Ｆｕｃ　（１−４）　］−βＧ］ｃ ＮＡｃ−ＯＲ）の調製 上述の２−スルホールイス’−ＯＲ化合物（９，５ｍｇ）　、ＧＤＰ−フコース （９，５ｍｇ）、クローン化フコノルトランスフェラーゼ　ＦｕｃＴ−ＩＩＩ　 （７５μＬのヒーズ）および子１１小腸アルカリ性ホスファターゼ（２０Ｕ）を 、緩衝液（２，ＯｍＤ中で室温で７２時間インキュベー１−シた。単離および精 製後、標題の化合物（５，８ｍｇ）か得られた。 Ｃ３−スルホ−ＬａｃＮＡｃ−ＯＲのナトリウム塩のフコツル化誘導体（３−ス ルホ−βＧａ　］　（１−４）　−［ａ−Ｌ−Ｆｕｃ　（１−３）　］−βＧｌ ｃＮＡｃ−ＯＲ）の調製 上述の３−スルホ−ＬａｃＮＡｃ−ＯＲ化合物（６，８ｍｇ）　、ＧＤＰ−フコ ース（６，８ｍｇ）　、クローン化フコノルトランスフェラーゼ　ＦｕｃＴ−Ｉ Ｖ（５０ｍＬヒーズ）および子牛小腸アルカリ性ホスファターゼ（２０Ｕ）を、 緩衝液（２，（］ｍＬ）中て室温て７２＋１．’、間インキュベー１・した。中 離および精製後、標題の化合物か得られた。 Ｆｉｇ、１ ０　１．０　２，０　３．０ ０　１．０　２．０　３．０　４．０ フツドパツド膨張の増加（ｍｍ−１） Ｆｉｇ、３ ０　１．０　２．０　３・０４・Ｏ Ｆｉｇ、　５　フ−，ド・９．ド膨張の増加（ｍｍ−１）ＬＬＬ］　ΔＳＨ０Ｓ −工 期￥ｊｌＪ昼舅 ＩｔｓへのＤＴＩ！応答への！’＝ＬｃＸ処理の影響フッドバッドＷ３張の増加 （ｍｍ−１）１−Ｉ　Ｓ　Ｖへの抗体応答に１するノアリルｌ−ｅ　Ｘの影響Ｆ ｉｇ、１１ ＳＬｃｘ免疫抑制の誘専へのＣＰの影響Ｆｉｇ、１２ ＯＶＡはＤ’ｒｌ＋を銹導した７０目に化合物処理Ｆｉｇ、１３ Ｆｉｇ、１４ ＯＶＡ誘導ＤＴＨ応答での５ＬｅＸの経時変化の影響フッドパッド膨張の増加（ ｍｍ−１） 投与時間（時間）） ＯＶＡ誘導ＤＴ）Ｉ応答での５ＬｅＸの経時変化の影響（４８時間測定）フッド バッド膨張の増加（ｍｍ−１） Ｆｉｇ、１ｇ Ｆｉｇ、１９ Ｆｉｇ、２０ Ｆｉｇ、２１ Ｆｉｇ、２２ Ｆｉｇ、２２　（ｃｏｎｔｉｎｕｅｄ）Ｆｉｇ、２３ Ｆｉｇ、２３　（ｃｏｎｔｉｎｕｅｄ）Ｆｉｇ、２４ Ｆｉｇ、２５ ω へ Ｆｉｇ、３０ 〇１ へ Ｆｉｇ・　３４ Ｆｉｇ、３６ Ｆｉｇ、３７ Ｆｉｇ、３９ Ｆｉｇ、４０ Ｆｉｇ、４１ Ｆｉｇ、４２ Ｆｉｇ、４３ フロントページの続き （５１）　Ｉｎｔ、　Ｃ１，６識別記号庁内整理番号Ｃ０７Ｈ１５／１２　８６ １５−４Ｃ １５／１４　８６１５−４Ｃ （３１）優先権主張番号　９８８，５１８（３２）優先臼　１９９２年１２月１ ０日（３３）優先権主張国　米国（ＵＳ） （８１）指定国　ＥＰ（ＡＴ、ＢＥ、ＣＨ，ＤＥ。 ＤＫ、ＥＳ、ＦＲ，ＧＢ、ＧＲ，ＩＥ、ＩＴ、ＬＵ、ＭＣ，ＮＬ、ＰＴ、　ＳＥ ）、　ＣＡ、ＪＰ、　ＵＳ（７２）発明者　ジアング、コング アメリカ合衆国９２１２８　カリフォルニア州サン　ディエゴ、ストニー　ピー ク　ドライブ　１１７２９．ナンバー　８１ （７２）発明者　ハンナ、エッチ、リズクカナダ国ティー６エル　３ゼツト９　 アルバータ、エドモントン、シックステイーファースト　ストリート　１１０４ （７２）発明者　ベノット、アントレ　ビー。 アメリカ合衆国９１３６２　カリフォルニア州すウザンド　オークス、アッシュ モアサーＩ （７２）発明者　二りラド、パンデュラング　ブイ。 カナダ国ティー６ジエイ　２ケイ４　アルバータ、エドモントン、ワンハンドレ ッドアンド　フィフス　ストリート３６１９（７２）発明者　カシエム、モハメ ッド　エイ。 アメリカ合衆国９１３６２　カリフォルニア州すウザンド　オークス、アッシュ モアサークル　２５１８．アパートメント　１４（７２）発明者　スミス、リチ ャード　エッチ。 カナダ国ティー６アール　２エイ６　アルバータ、エドモントン、ブキャナン　 ブレイス　１０１０ （７２）発明者　スリバスタバ、オム　ピー。 カナダ国ティー６エル　６エル９　アルバータ、エドモントン、ジャクソン　ハ イツ、フォーティースリー　アベニュー

Claims (8)

【特許請求の範囲】
1. １．Ｉ型またはＩＩ型核構造を有する血液型決定基に関連するオリゴ糖配糖体の 、炎症を低下させるのに有効な量を哺乳動物に投与することを含む、抗原暴露に よる哺乳動物の二次免疫応答の開始により発生する哺乳動物の炎症の程度を低下 させる方法であって、この投与は抗原暴露に対する哺乳動物の二次免疫応答の開 始後てあるが、抗原暴露に対する炎症応答か最大に達するのに要する時間の半分 経過時またはそれ以前に行われる、上記方法。
2. ２．抗原暴露による哺乳動物の二次免疫応答の開始により発化する哺乳動物の炎 症の程度を低下させる方法であって、式Ｉ：▲数式、化学式、表等があります▼ および式ＩＩ： ▲数式、化学式、表等があります▼（ＩＩ）（式中、Ｒは水素、糖−ＯＲ１９、 ２から７の糖単位を有するオリゴ糖−ＯＲ１９、および少なくとも１つの炭素原 子を有するアグリコン（Ｒ１９は水素または少なくとも１つの炭素原子を有する アグリコンである）よりなる群から選択され；Ｙは酸素、イオウ、および−ＮＨ −よりなる群から選択され；Ｒ１は水素、−ＮＨ２、−Ｎ３、−ＮＨＳＯ３Ｈ、 −ＮＲｓＣ（Ｏ）Ｒ４、−Ｎ＝Ｃ（Ｒ５）２、−ＮＨＣＨ（Ｒ６）２、−ＮＨＲ ８、−Ｎ（Ｒ８）２、−ＯＨ、−ＯＲ６、−Ｓ（Ｏ）Ｒ６、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ６お よび硫酸塩（式中、Ｒ４は、水素、炭素原子数１から４のアルキル、−ＯＲ７（ Ｒ７は炭素原子数１から４のアルキル、または水酸基で置換された炭素原子数２ から４のアルキルである）、および−ＮＲ８Ｒ９（Ｒ８およびＲ９は、独立に水 素および炭素原子数１から４のアルキルよりなる群から選択される）よりなる群 から選択され、 各Ｒ５は水素および炭素原子数１から４のアルキルよりなる群から選択され、各 Ｒ６は炭素原子数１から４のアルキルてある）よりなる群から選択され；Ｒ２は 水素、−Ｎ３、−ＮＨ２、−ＮＨＳＯ３Ｈ、−ＮＲ１１Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｎ＝ Ｃ（Ｒ１１）２、−ＮＨＣＨ（Ｒ１１）２、−ＮＨＲ１２、−Ｎ（Ｒ１２）２、 −ＯＨおよび−ＯＲ１２ （式中、Ｒ１０は、水素、炭素原子数１から４のアルキル、−ＯＲ１２（Ｒ１３ は炭素原子数１から４のアルキル、または水酸基で置換された炭素原子数２から ４のアルキルである）、および−ＮＲ１４Ｒ１５（Ｒ１４およびＲ１５は、独立 に水素および炭素原子数１から４のアルキルよりなる群から選択される）よりな る群から選択され、 各Ｒ１１は水素および炭素原子数１から４のアルキルよりなる群から選択され、 各Ｒ１２は炭素原子数１から４のアルキルである）よりなる群から選択され；Ｒ ３は水素、フルオロ、硫酸塩およびヒドロキシよりなる群から選択され；Ｘは水 素、Ｌ−フコシル、４−スルホ−Ｌ−フコシル、および４−ホスホ−Ｌ−フコシ ルよりなる群から選択され； Ｘ１は水素、シアリル、硫酸塩、リン酸塩、および−ＣＨＲ１８ＣＯＯＨ（Ｒ１ ９は水素、炭素原子数１から７のアルキルおよび−ＣＯＯＨよりなる群から選択 される）よりなる群から選択され； Ｘ２は水素、シアリル、硫酸塩、リン酸塩、および−ＣＨＲ１８ＣＯＯＨ（Ｒ１ ９は水素、炭素原子数１から７のアルキルおよび−ＣＯＯＨよりなる群から選択 される）よりなる群から選択される） のオリゴ糖配糖体よりなる群から選択されるオリゴ糖配糖体、および薬剤として 許容されるその塩（但し、Ｘが水素ならばＸ１またはＸ２の少なくとも一方は水 素でないか、またはＲ２は硫酸塩である。さらに、Ｘ１およびＸ２の一方のみが シアリルてある）の、約０．５から約５０ｍｇ／ｋｇを哺乳動物に投与すること を含み、この投与は抗原暴露に対する哺乳動物の二次免疫応答の開始後であるが 、抗原暴露に対する炎症応答が最大に達するのに要する時間の半分経過時以前に 行われる、前記方法。
3. ３．抗原暴露による哺乳動物の二次免疫応答の開始により発生する哺乳動物の炎 症の程度を低下させ、抗原への後の暴露に対する哺乳動物の寛容原性を誘導する 方法てあって、式Ｉ： ▲数式、化学式、表等があります▼（Ｉ）および式ＩＩ： ▲数式、化学式、表等があります▼（ＩＩ）（式中、Ｒは水素、糖−ＯＲ１９、 ２から７の糖単位を有するオリゴ糖−ＯＲ１９、および少なくとも１つの炭素原 子を有するアグリコン（Ｒ１９は水素または少なくとも１つの炭素原子を存する アグリコンである）よりなる群から選択され；Ｙは酵素、イオウ、および−ＮＨ −よりなる群から選択され；Ｒ１は水素、−ＮＨ２、−Ｎ３、−ＮＨＳＯ３Ｈ、 −ＮＲｓＣ（Ｏ）Ｒ４、−Ｎ＝Ｃ（Ｒ６）２、−ＮＨＣＨ（Ｒ５）２、−ＮＨＲ ６、−Ｎ（Ｒ６）２、−ＯＨ、−ＯＲ６、−Ｓ（Ｏ）Ｒ６、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ６お よび硫酸塩（式中、Ｒ４は、水素、炭素原子数１から４のアルキル、−ＯＲ７（ Ｒ７は炭素原子数１から４のアルキル、または水酸基て置換された炭素原子数２ から４のアルキルてある）、および−ＮＲ８Ｒ９（Ｒ８およびＲ９は、独立に水 素および炭素原子数１から４のアルキルよりなる群から選択される）よりなる群 から選択され、 各Ｒ５は水素および炭素原子数１から４のアルキルよりなる群から選択され、各 Ｒ６は炭素原子数１から４のアルキルである）よりなる群から選択され；Ｒ２は 水素、−Ｎ３、−ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＲ１１Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｎ＝ Ｃ（Ｒ１１）２、−ＮＨＣＨ（Ｒ１１）２、−ＮＨＲ１２、−Ｎ（Ｒ１２）２、 −ＯＨおよび−ＯＲ１２ （式中、Ｒ１０は、水素、炭素原子数１から４のアルキル、−ＯＲ１２（Ｒ１３ は炭素原子数１から４のアルキル、または水酸基て置換された炭素原子数２から ４のアルキルである）、および−ＮＲ１４Ｒ１５（Ｒ１４およびＲ１５は、独立 に水素および炭素原子数１から４のアルキルよりなる群から選択される）よりな る群から選択され、 各Ｒ１１は水素および炭素原子数１から４のアルキルよりなる群から選択され、 各Ｒ１２は炭素原子数１から４のアルキルである）よりなる群から選択され；Ｒ ３は水素、フルオロ、硫酸塩およびヒドロキシよりなる群から選択され；Ｘは水 素、Ｌ−フコシル、４−スルホ−Ｌ−フコシル、および４−ホスホ−Ｌ−フコシ ルよりなる群から選択され； Ｘ１は水素、シアリル、硫酸塩、リン酸塩、および−ＣＨＲ１■ＣＯＯＨ（Ｒ１ ■は水素、炭素原子数１から７のアルキルおよび−ＣＯＯＨよりなる群から選択 される）よりなる群から選択され； Ｘ２は水素、シアリル、硫酸塩、リン酸塩、および−ＣＨＲ１０ＣＯＯＨ（Ｒ■ は水素、炭素原子数１から７のアルキルおよび−ＣＯＯＨよりなる群から選択さ れる）よりなる群から選択される） のオリゴ糖配糖体よりなる群から選択されるオリゴ糖配糖体、および薬剤として 許容されるその塩（但し、Ｘが水素ならばＸ１またはＸ２の少なくとも一方は水 素でないか、またはＲ３は硫酸塩である。さらに、Ｘ１およびＸ２の一方のみが シアリルてある）の、約０．５から約５ｍｇ／ｋｇを哺乳動物に投与することを 含み、この投与は抗原暴露に対する哺乳動物の二次免疫応答の開始後であるが、 抗原暴露に対する炎症応答が最大に達するのに要する時間の半分経過時以前に行 われる、上記方法。
4. ４．抗原暴露による哺乳動物の二次免疫応答の開始により発生する炎症は、乾■ 、喘息、皮膚炎、リウマチ様関節炎、遅延型過敏症、腸炎（ｉｎｆｌａｍｍａｔ ｏｒｙｂｏｗｅｌ　ｄｉｓｅａｓｅ）、多発性硬化症、ウィルス性肺炎、または 細菌性肺炎による炎症てある、請求項第１、２または３に記載の方法。
5. ５．オリゴ糖配糖体は、哺乳動物の免疫応答の開始から少なくとも０．５時間後 に投与される、請求項第４に記載の方法。
6. ６．オリゴ糖配糖体は非経口投与される、請求項第１から３項までのいずれかに １項に記載の方法。
7. ７．オリゴ糖配糖体は、Ｒが−（Ａ）−Ｚ′である実施例Ａのオリゴ糖Ａ−Ｎよ りなる群から選択される、請求項第１から３まてのいずれかに１項に記載の方法 （式中、Ａは結合、炭素原子数２から１０のアルキレン基、および式−（ＣＨ２ −ＣＲ２０Ｇ）ｎ−の部分（式中、ｎは１から５に等しい整数であり；Ｒ２０は 水素、メチル、またはエチルよりなる群から選択され；そしてＧは水素、ハロゲ ン、酸素、イオウ、窒素、フェニル、および１から３の置換基（アミン、ヒドロ キシル、ハロ、炭素原子数１から４のアルキルおよび炭素原子数１から４のアル コキシよりなる群から選択される）て置換されたフェニルよりなる群から選択さ れる）であり；Ｚ′は水素、メチル、フェニル、アミノフェノール、ニトロフェ ノールよりなる群から選択され、そしてＧが酸素、イオウまたは窒素でなく、Ａ が結合でなし時、Ｚ′はさらに−ＯＨ、−ＳＨ、−ＮＨ２、−ＮＨＲ２１、−Ｎ （Ｒ２１）２、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ２１、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−ＮＨ２ 、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ２１、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ２１）２、およ び−ＯＲ２２（式中、各Ｒ２１は独立に炭素原子数１から４のアルキルであり、 Ｒ２２は炭素原子数３から１０のアルケニル基である）よりなる群から選択され る）。
8. ８．Ｒは−（ＣＨ２）■ＣＯ２ＣＨ２である、請求項７に記載の方法。