JPH07508006A - 皮膚中の酸素輸送を促進する皮膚用剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 皮膚中の酸素輸送を促進する皮膚用剤 本発明は、皮膚の真皮領域および隣接組織中に浸透して、この領域中の酸素の供 給を改善する皮膚用剤に関する。

米国特許第４３６６１６９号明細書（ｌＶｈｉｔｅ）は、皮膚損傷（ｉｎｊｕｒ ｉｅｓ、　ｗｏｕｎｄｓ）、特に熱傷の治療にフッ化炭素を使用することを請求 している。この場合、酸素含有フッ化炭素を、直接またはエマルションとして、 皮膚にまたは適当な包帯もしくは同様の手段にのせる。米国特許第４５６９７８ ４号明細書（Ｍｏｏｒｅ）は、皮膚上で使用するためのガス輸送性を存するゲル の製造を記載している。この複雑な方法は、水と混和しない有機液体、例えばフ ッ化炭素を乳化剤の存在下に乳化方法によって乳化させることからなる。次に濃 縮して（例えば超遠心分離、限外ろ過）、ゲル相を形成させる。続く第三工程で 、デカンテーション、ろ過または蒸発によって、のりのような固体（ゲル相）か ら透明液を分離する。このゲルを適当な配合物中で皮膚に適用すると、それはそ こで角質層に浸透することなく作用する。

ヨーロッパ特許出願公開第２９６６６１号明細書（Ｂｏｒｇａｒｅｌ　ｌｏ）は 、等方性または異方性配合物として化粧品分野において、また皮膚用剤として、 酸素輸送体として作用し得るフッ化炭素含有単相系を開示している。この場合、 ５０％の最大濃度を有するフッ化炭素を、水中でアルカンスルホナミド型の過フ ッ素化乳化剤で補助乳化剤としての脂肪族アルコールの存在下に乳化させる。

開示された既知の方法の場合、フッ化炭素を含む記載された組成物は、系に関連 した方式で皮膚上でその適用部位で作用する。

本発明の目的は、真皮領域およびその隣接組織中の酸素濃度を高め、新陳代謝過 程を活性化するために、皮膚の角質層および表皮を浸透方法により通過させるこ とである。

本発明によれば、皮膚中の酸素輸送を促進するための皮膚用剤は、コア中に、周 知の水性リポソームとは対照的に、フッ化炭素またはその混合物を含むリン脂質 から構成されている非対称性層状凝集体からなる。本発明による皮膚用剤は従っ て、皮膚に使用するのに適当なキャリヤー中の、リン脂質および酸素が負荷され たフッ化炭素またはフッ化炭素の混合物からなり、フッ化炭素の量が１−＋００ ％ｗ／　ｖ　（ｗ／　ｖ　＝１ｉｆ！／容ｆｆｆ＞である非対称性層状凝集体か らなる。

層状凝東体は、それらのリン脂質構造−それは構造的および化学的に細胞膜に非 常に類似しているかまたはと部分的に同一である−のために、また、凝集体の大 きさ−それは製造の際に制御され得る−と組み合わせて、より深い゛ところにあ る皮膚層に浸透し、そこを活性化することができる。このことは、先行技術にお いて言及された発明記載−それは皮膚のより深いところにある領域ヘフッ化炭素 を輸送しない−と対照的に起こる。既知の方法は、主張された効果に関して有効 でない。

多数のフッ化炭素、例えば脂肪族直鎖および分岐フルオロアルカン、単環式また は二環式の場合によりフルオロアルキル置換されたフルオロシクロアルカン、過 フッ素化された脂肪族または二環式アミン、ビス（ペルフルオロアルキル）エテ ノまたはそれらの混合物が使用できる。特に好ましいフッ化炭素は、ペルフルオ ロデカリン、Ｆ−ブチルテトラヒドロフラン、ペルフルオロトリブチルアミン、 ペルフルオロオクチルプロミド、ビス−フルオロ（ブチル）エテノまたはビス− フルオロ（ヘキシル）エテノまたはＣ，−Ｃ，−ペルフルオロアルカンのような ものである。

この場合のフッ化炭素の量は、１−１００％Ｗ／Ｖ、好ましくは４０〜１００％ である。特に好ましい範囲は、７０−１００％Ｗ／Ｖである。

本発明により使用されるリン脂質は、天然リン脂質、例えば大豆レシチンおよび 卵レシチン、合成リン脂質および水素化レシチン、例えばホスホリボンＨである 。これらのリン脂質の中で、ホスファチジルコリンの含有率は、１０〜９９重量 ％、好ましくは３０〜９９重量％、特に７０〜９９重量％である、すなわち、高 いホスファチジル含有率を有するリン脂質が好ましい。

ホスファチジルコリンに加えて、リゾレシチンが０．１−１０重量％の濃度範囲 で、および／または、荷電リン脂質、例えばホスファチジルエタノールアミン、 ｎ−了セチルホスファチジルエタノールアミンまたはホスファチジン酸が０゜゛ 　１〜３０重量％の１１１度範囲で存在することもできる。

既知の水性リポソーム（ベシクル）と比べて、本発明によるリン脂質安定化凝集 体は、それらのコア中に、酸素を輸送できる疎水性フッ化炭素を持っている。

それらの界面化学安定化は、主として逆配列を有する単層によってそして副次的 にそれに付着した二層フィルムの構造によって達成される。従って、既知の二層 ベシクルとは対照的に、本発明によれば、非対称性層状凝集体は、常に少なくと も１つの三層構造を存する。これらの構造上の配列の特徴のため、これらの新規 凝集体は、非対称性層状酸素キャリヤーと称される。それらの著しいコロイド化 学安定性は、おそらく、層状構造におよび凝集体の表面電荷に帰することができ る。後者は、天然のみならず合成起源の適当なリン脂質またはそれらの混合物の 選択に帰することができる。まず第一に、リン脂質、特に、０．１−１０％の濃 度のリゾレシチンおよび／またはＯ，１〜３０重量％の濃度範囲の荷電リン脂質 と場合により組み合わせた１０〜９９％の濃度範囲のホスファチジルコリンが、 この意味で、有利な作用の原因である。リン脂質の主張した作用は、対応する負 のセータポテンシャルによって、また電荷密度の測定（カチオン性高分子電解質 での滴定による）によって確かめられる。

浸透速度および浸透深さが凝集体の粒度に依存していることは、動物実験におい て標識化されたカプセル化フッ化炭素を用いて別個の研究によって実験的に測定 することができた。これらの実験によれば、比較的小さい粒子は、比較的大きい 粒子よりも、より速（、より深（皮膚組織に移動する。それらの脂質溶解性（そ れらの、ｎ−ヘキサン中の臨界溶解温度ＣＳＴによって表される）によるフッ化 炭素またはその混合物の選択は、さらに別の重要な基準として、組織中の滞留時 間の調節を可能にする。例えば、高いＣ３Ｔ値と低い脂質溶解性を有するペルフ ルオロトリブチルアミン（Ｆ−ＴＢＡ、Ｃ３Ｔ５９°Ｃ）は、ペルフルオロデカ リン（ＰＦＤ、Ｃ７３２２℃）に比べて、比較的大きい滞留時間を有するが、Ｆ −ブチルテトラヒドロフラン、Ｆ−ヘキサンなとも、対応して、組織からより素 早く放出される。フッ化炭素混合物を用いて、所望のＣＳＴ値、すなわち意図さ れた用途に関する脂質および、膜溶解性をもつ系が特に製造できる。

層状凝集体中の酸素キャリヤーとしてのフン化炭素の含有率は、意図された適用 に応じて１〜１００％Ｗ／Ｖの間で変化し得る。適当なフッ化炭素は特に二次素 原子数６〜１２の脂肪族直鎖または分岐アルカン、例えばペルフルオロへキサン 、ペルフルオロノナン： 単環式または二環式の場合によりＦ−アルキル置換されたノクロアルヵン、例え ばペルフルオロメチルシクロヘキサン、ペルフルオロ≠カール；脂肪族第三アミ ン、Ｎ−含有多環、例えばペルフルオロトリプロピルアミン、ベルフルオプトリ ブチルアミン；゛ ペルフルオロエーテル、例えば脂肪族エーテルおよびポリエーテル、Ｆ−アルキ ルフラン、分子中に２または３個の酸素原子を有する二環式および置換された二 環式エーテル、例えばベルフルオロジヘキシルエーテル、ペルフルオロブチルテ トラヒドロフラン。

ペルフルオロアルキルハロゲン化物、例えばペルフルオロオクチルプロミド、ペ ルフルオロヘキシルプロミド、ペルフルオロオクチルクロリド：ビス−Ｆ（アル キル）エテノ、例えばビス−Ｆ（ブチル）エテノ、ビス−Ｆ（ヘキノノリエテン である。

ここで使用される術語「フッ化炭素」は、過フッ素化または高度に過フッ素化さ れた炭素化合物または混合物−それらは気体、例えば０．およびｃｏ、を輸送で きる−を意味する。本発明の意味の中での高度にフッ素化された炭化水素化合物 は、検出され得る限り化学的、生物学的に不活性、従って非毒性である、水素原 子の大部分がフッ素原子と置換されているもの、例えばビス−Ｆ（アルキル）エ テノである。このことは、はぼ９０％までの水素原子がフッ素原子によって置換 されている場合に通常達成される。本発明の意味における好ましいフッ化炭素は 、少なくとも９５％、より好ましくは９８％、最も好ましくは１００％の水素原 子が置換されているものである。

個々のフッ素原子は、別のハロゲン原子、例えば臭素または塩素によって置換さ れることもできる。

適当なリン脂質は、天然に発生するリン脂質、例えば大豆レシチンおよび卵レシ チン、ならびに、合成で製造できるレシチン（リン脂質）であり、それらは全て 皮膚適合性であると知られている。非対称性層状凝集体の安定性に及ぼす有利な 作用のため、別の天然に発生する付随生成物に加えて、１０〜９９％のホスファ チジルコリンを含有するリン脂質混合物を使用するのが好ましい。皮膚用配合物 中のリン脂質含有率は、０．５〜２０％、好ましくは１０〜２０％の間で変動す る。

本発明はまた、リン脂質を、酸素を負荷したフッ化炭素またはフッ化炭素混合物 で乳化し、その際フッ化炭素の量は０，２〜１００％Ｗ／Ｖであり、そしてこう して得られる粒度５０〜ｌｏｏｏｎｍの非対称性層状凝集体を皮膚に使用するの に適当なキャリヤー中に混和することからなる、リン脂質含有皮膚用剤の製造方 法に関する。乳化は、水の存在下に場合により一価または多価脂肪族アルコール を添加して行なわれる。乳化はまた、フッ化炭素をリン脂質水溶液に、使用した 出発物質に対応する温度で添加することによる粗分散体の予備乳化によって行な うこともできる。予備乳化は、比較的高い回転速度、例えば１２，０００〜１５ ．００Ｏｒｐｍで行なわれるのが適当である。次いで実際の均質化を、高圧ホモ ジナイザー中で行なう。均質化は、別の既知の方法、例えば超音波によっても行 なうことができる。分散系へのエネルギー人力の程度は、粒度に間接的に比例す る。

オートクレーブ中での熱滅菌は、粒度に及ぼす作用なしに可能である。天然脂質 の不飽和脂肪酸基中の自己酸化過程を避けるために、酸化防止剤、例えばα−ト コフェロールが添加され得る。

高いホスファチジルコリン含有率を有するリン脂質の使用は特に有利である。

これらは、一般に、１０〜９９重量％、好ましくは３０〜９９重量％、特に７０ 〜９９重量％である。

使用されるフッ化炭素は、これらについて示された制限内の上述のフッ化炭素ま たはフッ化炭素混合物である。それらの既知の０．溶解性、蒸気圧および臨界溶 解温度を用いて、酸素での負荷および浸透深さは、当業者によって制御して調整 され得る。

フッ化炭素含存非対称性層状凝集体の作用方法は、局所適用を介する供給不足の 組織への酸素の放出に基やいている。酸素供給不足の脂肪組織、および動脈硬化 のために不足した供給に、同様に有効に使用され得る。

活性物質としての非対称性層状凝集体を、軟膏、クリーム、ローションおよび別 の水性またはアルコール性皮膚用配合物に混和することは、意図された用途に応 して行なわれ、その際、フッ化炭素含有率、従ってＯ１有効性を、広い範囲で変 えることができる。全ての皮膚用の系、例えばゲル、ペースト、粉末、軟膏、ク リームおよびローションに混和する前に、凝集体に気体酸素を部分的に負荷する かまたは凝集体を気体酸素で飽和させることができる。ヘンリーの法則に従って 通常起こる平衡の確立による大気中の酸素での飽和さえ、全ての類似の既知の系 より高い酸素容積を提供する。

本発明による皮膚用剤は、包帯、硬膏、損傷被覆、および他の、皮膚に接触する 剤にも適用され得る。例えばスプレーとしても適用され得る。

以下、実施例を用いて本発明をさらに詳細に説明する。関連図面中、図１は、出 発点としてペルフルオロデカリンを用いたｎ−ヘキサン中の過フッ化炭素混合物 の臨界溶解温度（ＣＳＴ）のグラフである。

図２は、出発点としてＦ−オクチルプロミドを用いたｎ−へキサン中の過フッ化 炭素混合物の臨界溶解温度のグラフである。

いくつかの選択されたフッ化炭素およびそれらの０２溶解性、それらの蒸気圧な らびにそれらの臨界溶解温度を表１に示す。これらの値から出発して、フッ化炭 素の混合物のために、皮膚用組成物を用いた皮膚への浸透の際の所望の特性が選 択できる。

表１ フッ化炭素　Ｆｃ１００ｍ＋　蒸気圧　ＣＳＴあたりの０．溶解性　Ｐｓｖ℃　 じＣ］０、の［ｍ　Ｉ　］　［ｍｍ　Ｈｇｌ ペルフルオロオクチル プロミド　５０　１４　−２４．５ ペルフルオロデカリン　４０　１２．５　２２ビス−Ｆ（ブチル）エテノ　５０ 　１２．６　２２．５Ｃ−シクロヘキシルメチル− モルホリン　４２　４　３８．５ Ｆ−トリプロピルアミン　４５　１８．５　４３Ｆ−ジヘキシルエーテル　４５ 　２　５ｇＦ４リブチルアミン　４０　１　５９ ペルフルオロデカリン−Ｆ− トリブチルアミン　Ｉｌｌ　４０　７　４２ペルフルオロブチル− テトラヒドロフラン　５２　５１　２９Ｆ−メチルシクロヘキサン　５７　１８ ０　８．２Ｆ−ヘキサン　５８　４１４　２０ 例１ ５０ｍｌのｌθ％濃度リン脂質水溶液（大豆レシチン、４０％ホスファチジルコ リン（ＰＣ）”）をＨ原子を含まない非常に純粋なフッ化炭素混合物（９０％ペ ルフルオロデカリン、ｌＯ％Ｆ−ジブチルメチルアミン、臨界溶解温度２６℃） ８０ｇと共に、超音波崩壊機を用いて氷冷しながら粒子の粒度が平均直径２４４ ｎｍになるまでホモジナイズする。フッ化炭素およびリン脂質の凝集体の多層状 構造は、典型的なシグナル幅による”Ｐ−ＮＭＲ測定および電子顕微鏡写真から 検出できる。

この凝集分散体は、滅菌のために、適当なアルコール（エタノール、プロピレン グリコール、グリセロール）と問題なくかつその安定性に影響を及ぼすことなく 、混合できる。３０ｍｌのエタノールの添加は無菌状態を生じさせ、得られる分 散体は次の組成を存している： ６２　％ｗ／ｖ　フッ化炭素： ９、７％　リン脂質： １９　％　エタノール 一６１ｍＶのゼータポテンシャルは、分散体の静電安定化と共にリン脂質によっ て生じる負の表面電荷を証明する。気体酸素での飽和後、分散体を、非対称性層 状凝集体と適合性の、相互に作用しない軟膏基剤に混和する。

例２ 組成物［３０％ＰＣ，３０％ＰＥ（ホスファチジルエタノールアミン）、３１％ ＰＩ（ホスファチジルイノシトール）〕の凍結乾燥したリン脂質１８ｇを滅菌水 ９０ｍｌに溶解させ、未変性エタノール１６ｍｌで処理する。機械的な高速攪拌 機（Ｕｌｔｒａ−Ｔｕｒｒａｘ．　＋　５．　０　０　Ｏ　ｒ　ｐｍ）を用いて 、この分散体を攪拌し、同時に、２０’ＣＩ：温度制御された攪拌容器にペルフ ルオロデカリン（Ｃ３７２２℃２を連続的に添加する。粗分散体を５００ａｔｍ で不活性ガス流中でｕａｎｔｏｎ　Ｇａｕｆｉｎ型の高圧ホモジナイザー中でホ モジナイズする。最後から２番目の通過の始めに、分散体に酢酸α−トコフェロ ールを、自己酸化過程を避けるために、皮膚組織中のフリーラジカルのためのス カベンジャーとして０．１％まで添加する。

光子相関分光計Ｎ　−　４　ＭＤ　（Ｃｏｕｌｔｒｏｎｉｃｓ）を用いて行なわ れる測定により、単峰形の粒間分布の存在および１２８ｎｍの平均粒子直径が確 認される。「ネガティブ染色１法を用いる電子顕微鏡検査は、これと一致する。

”Ｐ−ＮＭＲ検査によると、非対称性層状凝集体は、−７６ｍＶのゼータポテン シャルで単層状の状態で存在する。この分散体の組成は ４８％Ｗ／Ｖ　ペルフルオロデカリン １３％　リン脂質 ８０ｇのｎ−Ｆ−ヘキサン−これはその過フッ素化異性体（ＣＳ７２０℃）との 混合状態で存在するーを、４７ｍｌの脱イオン滅菌水中９．５ｇの卵黄３−ｓｎ −ホスファチジルコリンで不活性ガス状態下で０、２％のｄｌ−α−トコフェロ ールを添加して機械的に予備乳化し、粗分散体とした。この粗エマルションを、 圧力ホモジナイザー中で５００ａｔｍの圧力で適当な温度管理下で、粒度を調へ ながら、ホモジナイズした。得られる分散体は、中位の粘度および２９４ｎｍの 粒子直径を有する。８ｍｌのプロピレングリフールの添加後、長期の試験中、安 定性および無菌（Ｉｇあたり１００個より少ない微生物数）が、室温で観察され た。希釈、例えばローションの製造の際の希釈は、重要なコロイド化学パラメー タの変化なく、問題なく可能である。

光学！ｌ微鏡を用いて偏光中でのこの分散体の検査は、液晶構造が存在しない等 方性の単相系の存在を示す。

リポソーム浸透の生体内検出 単離されたはかりの生理学的に無傷の皮膚を、その内側でＯ，センサー（Ｃｌａ ｒｋ　ｔｆｆｉ）に固定し、表皮を、非対称性層状凝集体を含む０，輸送分散体 で濡らした。これらの条件下て、電極はＯ，分圧を示さない。５７分の浸透期間 後、４！集体は、電極の測定部分において真皮部分に到達した。０，分圧は、１ 　５　９ｍｍＨｇの値に上昇した。皮膚への浸透速度は、凝集体の型および大き さによって決まる。

補装置の写しく翻訳文）提出書 （特許法第１８４条の８） 平成６年１２月２２日

Claims (15)

【特許請求の範囲】
1. １．皮膚に使用するのに適当なキャリヤー中の、リン脂質および酸素を負荷した フッ化炭素またはフッ化炭素混合物からなり、フッ化炭素の量が０．２〜１００ ％Ｗ／Ｖである非対称性層状凝集体であることを特徴とする、皮膚中の酸素輸送 を促進するための皮膚用剤。
2. ２．層状凝集体が、非対称性の、好ましくは三層の、フッ化炭素コアから生じる 構造を有する、請求項１記載の皮膚用剤。
3. ３．フッ化炭素が、脂肪族直鎖または分枝フルオロアルカン、単環式または二環 式の、場合によりフルオルアルキル置換された、フルオロシクロアルカン、過フ ッ素化された脂肪族または二環式アミン、ビス（ペルフルオロアルキル）エテン およびそれらの混合物から選択される、請求項１または２記載の皮膚用剤。
4. ４．フッ化炭素が、ペルフルオロデカリン、Ｆ−ブチルテトラヒドロフラン、ペ ルフルオロトリブチルアミン、ペルフルオロオクチルブロミド、ビス−フルオロ （ブチル）エテンおよびＣ６〜Ｃ７−ペルフルオロアルカンからなる群から選択 される、請求項３記載の皮膚用剤。
5. ５．フッ化炭素の量が２０〜１００％重量／容積、好ましくは４０〜１００％で ある、請求項１〜４のいずれか１項に記載の皮膚用剤。
6. ６．フッ化炭素の量が、７０〜１００％重量／容積である、請求項１記載の皮膚 用剤。
7. ７．リン脂質が、天然リン脂質、例えば大豆レシチンまたは卵レシチン、合成リ ン脂質、水素化されたレシチンおよび／または部分的に水素化されたリン脂質か らなる群から選択され、その際リン脂質の濃度は０．５〜２０％である、請求項 １〜６のいずれか１項に記載の皮膚用剤。
8. ８．ホスファチジルコリンが、１０〜９９重量％、好ましくは３０〜９９重量％ 、特に６０〜９０％の量で存在する、請求項１〜７のいずれか１項に記載の皮膚 用剤。
9. ９．使用される脂質フラクションが、ホスファチジルコリンに加えて、リゾレシ チンを０．１〜５重量％の濃度範囲で含む、請求項１〜８のいずれか１項に記載 の皮膚用剤。
10. １０．リン脂質を、酸素を負荷したフッ化炭素またはフッ化炭素混合物で乳化し 、その際フッ化炭素の量は０．２〜１００％重量／容積の範囲にあり、そしてこ うして得られる粒度５０〜１０００ｎｍの非対称性層状凝集体を、皮膚に使用す るのに適したキャリヤー中に混和することを特徴とする、皮膚中の酸素輸送を促 進するための皮膚用剤の製造方法。
11. １１．フッ化炭素が、脂肪族直鎖および分枝フルオロアルカン、単環式または二 環式の、場合によりフルオロアルキル置換された、フルオロシクロアルカン、過 フッ素化された脂肪族または二環式アミン、ビス（ペルフルオロアルキル）エテ ンおよびそれらの混合物からなる群から選択される、好ましくはペルフルオロデ カリン、Ｆ−ブチルテトラヒドロフラン、ペルフルオロトリブチルアミン、ペル フルオロオクチルブロミド、ビス−フルオロ（ブチル）−エテンおよびＣ６〜Ｃ ９−ペルフルオロアルカンからなる群から選択される、請求項１０記載の方法。
12. １２．フッ化炭素の量が、２０〜１００％重量／容積、好ましくは４０〜１００ ％であって、使用される脂質フラクション中のホスファチジルコリンの量が１０ 〜９９重量％、好ましくは６０〜９０％である、請求項１０または１１記載の方 法。
13. １３．粒度が１２０〜８２０ｎｍ、好ましくは１４０〜４００ｎｍである、請求 項１０記載の方法。
14. １４．リン脂質およびフッ化炭素を含む非対称性層状酸素キャリヤーを含む系を 適用することにより皮膚への酸素供給を制御するために皮膚用剤を使用する方法 であって、その際、フッ化炭素は０．２〜１００％重量／容積の範囲にあり、皮 膚への浸透は、リン脂質凝集体のキャリヤー構造およびフッ化炭素の臨界溶解温 度（ｎ−ヘキサン中）により制御され、系は、皮膚に通常使用されているキャリ ヤー、例えば軟膏、クリーム、ローション、水、アルコール性抽出物、ペースト 、粉末、ゲルまたはチンキ中に分布されている上記方法。
15. １５．系が包帯または硬膏に適用されるかまたはスプレーを用いて適用される、 、請求項１４記載の使用方法。