JPH07509459A - 金属タンパク質加水分解酵素阻害剤である天然アミノ酸誘導体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 金属タンパク質加水分解酵素阻害剤である天然アミノ酸誘導体この発明は、治療 上活性なヒドロキサム酸誘導体、それらの製剤方法、それらを含む医薬組成物及 び医薬におけるこのような化合物の用途に関する。特に、その化合物は、組織破 壊に関与する金属タンパク質加水分解酵素の阻害剤であり、細胞からの腫瘍壊死 因子の放出の阻害剤である。 コレゲナーゼ、ストロンリシン（ｓｔｒｏｍｅｌｙｓｉｎ）及びゲラゲナーゼ（ マトリックス・金属タンパク質加水分解酵素として知られ、ここでＭＭＰｓと記 す）のような結合組織破壊に関与する金属タンパク質加水分解酵素の作用を阻害 する特性を有する化合物は、組織破壊、例えばリュウマチ様関節炎、変形性関節 症、骨粗しよう症のようなオステオベニア、歯周炎、歯肉炎、角膜表皮又は胃の 潰瘍及び腫瘍の転移、侵入並びに成長に関与する症状の治療又は予防のために有 用な可能性を有していると考えられている。 腫瘍壊死因子（ここでＴＮＦと記す）は、初期に、細胞関連２８ｋＤ前駆体とし て形成されるサイトカインである。それは、活動分子である１７ｋＤ型として放 出され、生体内で多数の有害な作用の媒介となり得る。動物又はヒトに投与され ると、それは、セ、性感染及びショック状態の間に見られるものと同じ、炎症、 発熱、心血管作用、出血、凝固及び急性反応を引き起こす。慢性投与も悪液質及 び食欲不振を引き起こす。過度のＴＮＦの蓄積は、致命的になる。 特定の抗体を持つＴＮＦの作用を阻害することは、急性感染、ショック状態、移 植片対宿主反応及び自己免疫疾患において有益となり得ることが動物モデルの研 究でかなりの証拠がある。 ＴＮＦもまた、いくつかの骨髄腫及びリンパ種の自己分泌成長因子であり、これ らの腫瘍を持つ患者における、正常な造血を阻害するために作用しつる。 ＴＮＦの産生又は作用を阻害する化合物は、よって、多くの炎症、感染、免疫欠 乏又は悪性疾患の治療又は予防に有用な可能性を育していると考えられている。 これらには、敗血症性ショック、ヘモダイナミックショック、及びセブシス症候 群、後虚血性再潅流外傷、マラリア、限局性回腸炎、ミコバクテリア感染、骨髄 炎、乾麻、うっ血性心不全、線維性疾患、悪液質、移植片拒絶、癌、自己免疫疾 患、リュウマチ様関節炎、多発硬化症、放射線障害、０ＫＴ３又はＣＨ＋１１Ｐ ＡＴ）ｌ−１のような免疫抑制モノクロナール抗体の投与に引き続いて起こる毒 性及び酸素過剰性肺胞外傷が含まれるが、これらに限定されない。 過度のＴＮＦ産生は、ＭＭＰ媒介の組織破壊によっても特徴づけられる種々の疾 患又は症状において認めるので、ＭＭＰｓ及びＴＮＦの両者の産生を阻害する化 合物が、両者のメカニズムが関係する治療又は疾患あるいは症状の予防において 特に利点を有する。 ヒドロキサム酸の誘導体を含むＭＭＰ阻害剤のいくつかの群か提案された。以下 の特許公報は、ヒドロキサム酸ベースのＭＭＰ阻害剤を開示している。 ＵＳ４５ＱＯ３６１（ナール） ＥＰ−Ａ−０２３６８７２（ロシュ） ＥＰ−Ａ−０２７４４５３（ベロン） Ｗ０９０１０５７１６（ブリティッシュ　バイオテクノロジー　）Ｗ○　９０１ ０５７１９（ブリティフノユ　バイオテクノロジー　）ＷＯ９０１０２７１６（ ブリディフノユ　バイオテクノロジー　）ＥＰ−Ａ−０４８９５７７（セルチッ ク）ＥＰ−Ａ−０４８９５７９（セルチック）ＥＰ−Ａ−０４９７１９２（ロシ ュ） Ｗ０９２／１３８３１（ブリティッシュ　バイオテクノロジー　）ＷＯ９２／２ ２５２３　（リサーチ　コーポレーノラン　チクノロシーズ　）ＷＯ９３１０９ ０９０（山の内） 特定のＭＭＰｓに対する上記公報に開示されたヒドロキサム酸誘導体の広い構造 群の化合物の内因性の効力を高めることができる。例えば、多くは、コーストン 及びパレット（Ｃａｗｓｔｏｎ及びＢａｒｒｅｔｔ）　（アナル　バイオケム（ Ａｎａｌ、Ｂｉｏｃｈｅｍ、　９９．３４０〜３４５　（＋９７９））のインビ トロにおける試験方法によって、５０ｎＭより低いコラゲナーゼＩＣ１゜を育す る。しかしながら、これら公報において開示された特定の化合物の物理化学及び ／又は薬物動態特性は、一般に期待に反するものである。化合物が、投与のため に容易に製剤され、投与後の許容できる期間良好な生態利用性を存し、かつ標的 疾患又は症状に高い生体内活性を有するように、標的ＭＭＰｓに対する高い内因 性活性と良好な物理化学及び／又は薬物動態特性のよいバランスを育するヒドロ キサム酸ベースのＭＭＰ阻害剤が当該分野の目標としてなおめられている。 上記の特許公報は、ＴＮＦ放出の阻害に関しては何ら開示していない。実際に、 全体として技術水準は、いずれのＭＭＰ阻害性ヒドロキサム酸誘導体において抗 ＴＮＦ性質の認識がされていないと認められる。 上記公報に開示されたヒドロキサム酸誘導体は、以下の基本構造（ＩＡ）を持つ と考えられる。 （式中、５個の置換基Ｒ１−Ｒ５は、各々の公報の詳細な開示内容に従い変化で きる。活性の内因性レベル、特別のカテゴリーのＭＭＰ阻害についての特異性の 程度、物理化学及び薬物動態学特性のバランスは、置換基Ｒ８〜Ｒ６が変化する ので予測できないように変化する。） 上記公報のうち、ＥＰ−Ａ−０２３６８７２号公報のみが、基本構造（ＩＡ）の コラゲナーゼ阻害剤の特定の群において置換基Ｒ１がＯＨとなりうる可能性につ いて言及している。その可能性は、置換基Ｒ５か、いくつかの官能基か保護され ていてもよ（、いくつかのアミノ基がアシル化されていてもよく、及びいくつか のカルボキシル基がエステル化されていてもよい天然のアミノ酸の独特な側鎖で ある化合物に関連して、多くの他の可能なＲ１置換基の中で言及されている。Ｅ Ｐ−Ａ−０２３６８７２号公報は、好ましい又は特に有利なコラゲナーゼ阻害タ ンパク質を有するようなそのような化合物を開示しておらず、事実、Ｒ１がヒド ロキシル基であるどのような特定の化合物の開示も含まれていない。 それは、良好な内因性の活性プロファイルと良好な物理化学及び薬物動態学特性 の分かりにくいバランスを持つヒドロキサム酸誘導ＭＭＰ阻害剤を提供すること に関して上記の引用された技術での問題を示していない。 この発明は、ＥＰ−Ａ−０２３６８７２号公報において一般的に開示された群に おける化合物の特定のサブグループが、一般にめられているが、良好な水溶性を 含む好ましい製剤特性、ならびに、コラゲナーゼ及びストロンリシン阻害活性の 両方を含むＭＭＰの阻害剤としての好ましい活性プロファイルの予測できない組 み合わせを育することを見い出したことに基づくものである。そのサブグループ は、主に、Ｒ，置換基がヒドロキシル基であり、置換基Ｒ５が、極性基を含有し ていないか、いずれかの極性基が保護されている天然アミノ酸の側鎖であること に特徴つけられる。本発明の選択されたサブグループには、経口投与による高血 清レベルを達成し、ＭＭＰによって媒介される疾患及び症状の動物モデルに関連 した経口投与によるインビボにおいて活性である化合物か含まれる。さらに、上 述したように本発明の化合物は、ＴＮＦ産生を阻害する意外で好ましい特性を持 つことが見出された。 本発明の１つの観点から、式（１） 〔式中、Ｒ２は基Ｒ，−Ａ−（式中、Ａは、０又はＳ原子を介していてもよい６ までの炭素原子の２価の直鎖又は分岐、飽和又は不飽和の炭化水素鎖、Ｒ６は水 素又は任意に置換されていてもよいフェニル、シクロアルキル又はシクロアルケ ニル基である）であり、 Ｒｘは、いくつかの極性置換基は任意に保護された、プロリン以外の天然アルフ ァーアミノ酸の特徴的な側鎖であり、Ｒ４は水素又はメチルであり、 Ｒ１は水素、Ｃ，−Ｃ，アルキル、又は基Ｄ−（Ｃ，−Ｃ。 アルキル）（ここで、Ｄは水素、（Ｃ，−Ｃ，）アルコキシ、（Ｃ，−Ｃ，’） アルキルチす、アシルアミノ、任意に置換されているフェニル、又は複素環基、 ＮＨ２、又はモノ−又はジー（Ｃ，−Ｃ，アルキル）アミン又は複素環基）であ り、又は、Ｒ１及びＲ３は、いっしょになって、０、Ｓ又はＮの異原子を介して いてもよい２価の８〜１６の炭素原子の飽和又は不飽和の炭化水素鎖で表される 〕の化合物、又はそれらの塩、溶媒化合物又は水和物が提供される。 ここで、用語’Ｃ＋　’Ｃ＊アルキル」又は「６までの炭素原子の飽和炭化水素 鎖」は、１〜６の炭素原子を持っ直鎖又は分岐のアルキル基で、例えば、メチル 、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｔ−ブチル、ペンチル及びヘキシ ルが含まれる。 用語’Ｃ＊−＊のアルケニル」又は「６までの炭素原子の不飽和炭化水素鎖」は 、２〜６の炭素原子を持ち、さらに、Ｅ又はＺのいずれかに立体化学上適当な１ つの二重結合を持つ直鎖又は分岐のアルケニル基である。この用語は、例えば、 ビニル、■−プロペニル、■−及び２−ブテニル及び２−メチル−２−プロペニ ルを含む。 用語「シクロアルキル」は、３〜８の炭素原子を持つ飽和脂環基であり、例えば 、シクロヘキシル、シクロオクチル、シクロへブチル、シクロペンチル、シクロ ブチル及びシクロプロピルを含む。 用語「シクロアルケニル」は、３〜８の炭素原子を持つ不飽和指環基であり、例 えば、シクロへキセニル、シクロオクテニル、シクロへブテニル、シクロペンテ ニル、シクロブテニル及びシクロプロペニルを含む。５〜８の炭素原子からなる シクロアルケニル環の場合、環は二重結合を１以上含んでもよい。 用語［複素環（ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｙｌ又はｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ）Ｊは Ｓ、Ｎ及び０から選択される１以上の異原子を含み、任意にベンゼン環に縮合さ れた５〜７員の複素環であり、例えばピロリル、フラニル、チェニル、イミダゾ リル、オキザゾリル、チアゾリル、ピラゾリル、ピリジニル、ピロリジニル、ピ リミジニル、モルホリニル、ピペリジニル、インドリル及びベンズイミダゾール を含む。 それの発明に関連して特別な方法で明記しなければ、ここで何れかの分子に適用 された用語「置換された」は、４つまでの置換基で置換されることを意味し、そ れぞれは、互いに独立したＣ、−Ｃ，アルコキシ、ヒドロキシ、チオ、Ｃ，−Ｃ ，アルキルチす、アミノ、ハロ（フルオロ、クロロ、ブロモ及びイオドを含む） 、トリフルオロメチル、ニトロ、−ＣＯＧＨ，Ｃ０ＮＩ（を又は−ＣＯＮＨＲＡ （式中ＲＡはＣ，−Ｃ，アルキル基又は天然アルファーアミノ酸の残基である） である。 用語「天然アルファーアミノ酸の特徴的な側鎖」は、以下のアミノ酸、グリシジ 、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイノン、フェニルアラニン、チロシン、 トリプトファン、セリン、トレオニン、システィン、メチオニン、アスパラギン 、グルタミン、リジン、ヒスチジン、アルギニン、グルタミン酸及びアスパラギ ン酸におけるーＣＨ（ＮＨ２ＸＣＯＯＨ）分子に付与された特徴的な側鎖を意味 する。 それら特徴的な側鎖に極性置換基（アミノ、カルボキシ、ヒドロキシ、メルカプ ト、グアニジル、イミダゾリル又はインドリルを意味する）を含む天然アルファ ーアミノ酸は、アラニン、リジン、グルタミン酸、アスパラギン酸、トリプトフ ァン、ヒスチジン、セリン、スレオニン、チロシン及びシスティンである。本発 明の化合物においてＲ２がそれらの側鎖の１つである場合、極性置換基は任意に 保護されていてもよい。 天然アルファーアミノ酸の側鎖において、アミノ、カルボキン又は極性置換基に 関して使用される場合には、用語「保護されている」は、実質的に非極性の置換 基の誘導体を意味する。 この文脈においては、保護されたアミノ基は、アミド及びアシルアミドを含み、 保護されたヒドロキシ又はメルカプト基はエーテル及びチオエーテルを含む、保 護されたカルボキシル基はエステルを含み、イミダゾリル、インドリル又はグア ニジル基は、ｔ−ブトキシカルボニル誘導体として保護されていてもよい。これ らは、当該分野で公知の多くの保護誘導体の例であるのみであり、池のものも当 業者に公知である。 この発明の化合物の塩は、生理的に受容な酸付加塩、例えば、塩酸塩、臭化水素 酸塩、硫酸塩、メタンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、リン酸塩、酢 酸塩、クエン酸塩、コハク酸塩、乳酸塩、酒石酸塩、フマル酸塩及びマレイン酸 塩を含む。 塩は、塩基、例えばナトリウム、カリウム、マグネシウム及びカルシウム塩で形 成されてもよい。 この発明による化合物には、不斉炭素原子の存在のために、いくつかのキラル中 心がある。いくつかの不斉炭素原子の存在は、各々のキラル中心でＲ又はＳの立 体化学を有するい（つかのジアステレオマーの数を高める。この明細書における 一般式（１）及び（池の方法で明記しない限り）すべての他の式は、このような 立体異性体及び混合物（例えばラセミ混合物）の全てを含むものと理解される。 この発明の化合物において、好ましい立体化学は、一般的に以下のようである・ ヒドロキシ及びヒドロキサム酸分子を伴う炭素原子−８、Ｒ１基を伴う炭素原子 −Ｒ１ Ｒ２基を伴う炭素原子−３１ しかし、上記の立体配置を有する混合物も意図するものである。 本発明の化合物において、 Ｒ３は、例えば、Ｃ，−Ｃ，アルキル、シクロアルキル（Ｃ３−〇、アルキル） 、フェニル（Ｃ，−Ｃ，アルキル）、Ｃ２−Ｃ４７／ｌ／コキ’ｉ　（Ｃ＋−Ｃ ＊ｙルキル）　、又１ｔ　Ｃｔ　−Ｃａフルキルスルファニル（Ｃ１−Ｃ２アル キル）、基（ここで、０又はりである。特定のＲ１基の例は、イソブチル、ｎ− ペンチル、シクロへキシルプロピル、シクロへキシルブチル、シクロヘキシルペ ンチル、フェニルエチル、フェニルプロピル、フェニルブチル、フェニルペンチ ル、プロピルオキシメチル及びプロピルスルファニルを含む。好ましくは、Ｒ２ がイソブチルの化合物であり、 Ｒ２は、例えば、フェニルアラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、メチオ ニン、グリシン、アスパラギン、グルタミン又はアラニンの特徴的な側鎖、又は それらの極性基が任意に保護されたシスティン、チロシン、トリプトファン、ヒ スチジン、セリン、スレオニン、アルギニン、グルタミン酸、リジン又はアスパ ラギン酸の特徴的な側鎖である。好ましくは、Ｒ２か、フェニルメチル、フェニ ルアラニンの特徴的な側鎖である化合物である。 Ｒ４は、例えば、水素、メチル又はエチルである。好ましくはＲ４か水素の化合 物であり、 Ｒｓは、例えば、水素又は０１〜ｃ４アルキル、又は基Ｄ−（Ｃ，−ｃ、アルキ ル）（ここで、Ｄはヒドロキシ、（ｃｌ−Ｃ，）アルコキシ、（Ｃ，−Ｃ，）ア ルキルチす、アシルアミ八任意に置換されたフェニル、又は複素環基である）で ある。 特定のＲｓ基の例は、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ヒドロキシエチル、 ２−エチルチオエチル、２−アセトキシエチル、Ｎ−アセチル−２−アミノエチ ル、３−１０　（２−ピロン）プロピル、任意に置換されたフェニルエチル、フ ェニルプロピル、フェニルブチル及びフェニルペンチルである。好ましくはＲ６ がメチル又はエチルの化合物である。 この発明の興味深い化合物は、 Ｎ’　−（３Ｓ−ヒドロキシ−４−（Ｎ−ヒドロキシアミノ）−２Ｒ−イソブチ ルスクシニル）−Ｌ−ロイシン−Ｎ＋　−メチルアミド、及び Ｎ”−（３Ｓ−ヒドロキシ−４−（Ｎ−ヒドロキシアミノ）−２Ｒ−イソブチル スクシニル〕−５−メチル−し−グルタミン酸−Ｎ１−メチルアミド、 及びそれらの塩、溶媒化合物又は水和物である。 水溶性、コラゲナーゼ及びスロトメリシンの阻害における高い内因性の活性、Ｔ ＮＦ放出阻害における活性及び良好な薬物動態特性のような良好な製剤特性のそ れらのバランスについて現在特に好ましく、例えば標準ラットのアジュバント関 節炎のモデルにおける経口投与による高い生体内活性により証明されたこの発明 の化合物は、 Ｎ’　−（３Ｓ−ヒドロキシ−４−（Ｎ−ヒドロキシアミノ）−２Ｒ−イソブチ ルスクシニル）−Ｌ−フェニルアラニン−Ｎ１−メチルアミド及びその塩、溶媒 化合物又は水和物である。 本発明の化合物は、従来技術において本質的に公知の方法によって及び本発明の 別の観点を形成する以下の方法、つまり、式（Ｉ）の化合物の製造方法によって 製造することができる。 （ａ）一般式（ｎ）の酸 〔式中Ｒ２、Ｒ３、Ｒ１及びＲ３はヒドロキシアミン、〇−保護ヒドロキシアミ ン又はそれらの塩と反応する可能性のあるＲ２、Ｒ１、Ｒ４及びＲ６のいずれか の置換基が保護されていることを除いて一般式（Ｉ）で定義されたと同一である 〕又はその活性誘導体と、ヒドロキシルアミン、〇−保護ヒドロキシルアミン又 はそれらの塩とをカップリングし、次いて、得られたヒドロキサム酸分子から及 びＲ１、Ｒ１、Ｒ４及びＲ１の中のいずれかの保護された置換基から保護基を除 去し、及び （ｂ）任意に一般式（１）の化合物を一般式（Ｉ）の別の化合物に変換する。 （ｎ）のペンタフルオロフェニル、ヒドロキシスクシニル、又はヒドロキシベン ゾトリアゾリルエステルのような活性中間体への変換は、ジシクロヘキシルジ力 ルポジイミド（Ｄ　Ｄ　Ｃ）、Ｎ、Ｎ−ジメチルアミノプロピル−Ｎ′−エチル カルボジイミド（ＷＳＣＤＩ）、又は２−メトキシ−１−エトキシカルボニル− １，２−ジヒドロキノリン（ＥＥＤＱ）のような脱水化剤の存在下で適当なアル コールとの反応により有効である。 上記で引用された保護基は、それ自体、例えば、ペプチド化学の技術から公知で ある。アミノ基は、しばしばベンジルオキシカルボニル、ｔ−ブトキシカルボニ ル又はアセチル基、又はフタルイミド基の形で保護され得る。ヒドロキシ基は、 しばしばｔ−ブチル又はベンジルエーテルのような容易に開裂し得るエーテル、 又はアセテートのような容易に開裂し得るエステルのように保護され得る。カル ボキシ基は、しばしばｔ−ブチル又はベンジルエステルのような容易に開裂し得 るエステルのように保護され得る。 一般式（Ｉ［）の化合物は、式（Ｉ［［）の酸又はそれらの活性誘導体と、式（ ＩＶ）のアミンとのカップリング、（式中、Ｒ２、Ｒ２、Ｒ４及びＲ３は一般式 （Ｉ）に示され、Ｒ１゜及びＲ１＋は、各々ヒドロキシ保護基を示し、又は共に 両方のヒドロキシ基を同時に保護する２価の分子で表される）、次いで、保護基 又は保護分子の除去により製造することができる。酸（ＩＩ［）の活性誘導体は 、ペンタフルオロフェニルエステル、酸無水物及び例えば塩化物のような酸ハロ ゲン化物のような活性エステルを含む。Ｒ１゜及びＲ１，は当該分野で知られて いる漂準のヒドロキシ保護基のいずれでもよく、特に有用な技術は式（Ｖ）のジ オキサロンのような２つのヒドロキシ基の同時の保護である。 （式中、基Ｒ１１及びＲ１，は、ジオキサロン形成試薬から誘導され、例えば、 水素、アルキル、フェニル、又は置換されたフェニルである。） 上述したように、式（１）の化合物は、ＭＭＰｓの阻害剤として活性であるため 、人間又は家畜の医薬として有用であり、さらに、利点は、細胞から腫瘍壊死因 子（ＴＮＦ）の放出を阻害することである。 さらに別の観点によれば、この発明は、（ｉ）哺乳類、特にヒトにおいて、ＭＭ Ｐｓ及び／又はＴＮＦによって媒介される疾患又は症状の管理（治療又は予防を 意味する）の方法であり、その方法は、上記の式（１）で定義された化合物又は それらの薬学的に受容な塩の有効量を哺乳類に投与することからなり、及び （ｉｉ）人間又は家畜の薬剤において、特にＭＭＰｓ及び／又はＴＮＦにより媒 介される疾患又は症状の管理（治療又は予防を意味する）における使用のための 式（ｒ）に定義される化合物、及び、 （ｉｉ）ＭＭＰｓ及び／又はＴＮＦにより媒介される疾患又は症状の管理（治療 又は予防を意味する）のための製剤における式＜Ｘ＞に定義される化合物の用途 に関与する。 ＭＭＰｓによって媒介される疾患又は症状は、骨吸収、炎症疾患、皮膚病症状及 び二次転移による腫瘍浸入のような、特にリュウマチ様の関節炎、変形性関節炎 、歯周炎、歯肉炎、角膜潰瘍、二次転移による腫瘍侵襲のような組織破壊に含ま れるものを包含する。ＴＮＦによって媒介される疾患又は症状は、炎症、発熱、 心血管作用、出血、凝固及び急性位相応答、悪液質及び食欲不振、急性感染、シ ョック状態、移植片対宿主反応及び自己免疫疾患を含む。 この発明のさらなる観点によれば、薬学的又は獣医学的に受容な賦形剤又は担体 と共に式（ｒ）の化合物からなる薬学的又は獣医学的組成物が提供される。本発 明の化合物の水溶性及び経口生物学的利用能を考慮して、本発明のさらなる観点 は、薬学的又は獣医学的に受容な賦形剤又は担体と共に式（Ｉ）の化合物を含み 、経口投与用として適応されることで特徴ずけられる薬学的又は獣医学的組成物 を包含する。 一般式（１）の−以上の化合物は、−以上の賦形剤又は担体とともに組成物にお いて存在しえる。 この発明に関係する化合物は、それらの薬物動態特性と調和した何れかの経路に よる投与のために製造することができる。 経口投与可能な組成物は、錠剤、カプセル剤、散剤、顆粒剤、ロゼンジ、経口的 、局所的、又は無菌の非経口的な溶液又は懸濁液のような液状又はゲル製剤の形 態であってよい。経口投与用の錠剤及びカプセル剤は、単位投薬量提供形態であ ってもよく、さらに、例えばシロップ、アラビアゴム、ゼラチン、ソルビトール 、トラガント又はポリビニルピロリドンのような結合剤、例えばラクトース、糖 、トウモロコシデンプン、リン酸カルシウム、ソルビトール又はグリシンのよう な充填剤、例えばステアリン酸マグネシウム、タルク、ポリエチレングリコール 又はシリカのような錠剤化用滑剤、例えばじゃがいもデンプンのような崩壊剤、 又はラウリル硫酸ナトリウムのような受容な湿潤剤等の従来の賦形剤を含有して もよい。錠剤は、通常の製剤業務における周知の方法によって被覆されてもよい 。経口用の液状製剤は、例えば水性もしくは油性懸濁液、溶液、乳濁液、ンロソ ブ剤又はエリキシル剤のような形態であってもよく、又は、水又は他の適切な溶 剤で用時再調製するための乾燥製品として与えられてもよい。このような液状製 剤は、例えばソルビトール、ソロツブ、メチルセルロース、グルコースシロップ 、ゼラチン、水素添加された食用脂肪のような懸濁剤、例えばレシチン、ソルビ タンモノオレエート又はアラビアゴムのような乳化剤、例えば扁桃油、分別され たやし油、グリセリン、プロピレングリコールのような油性のエステル、又はエ チルアルコールのような非水性賦形剤（食用油を含む）、例えばメチル又はプロ ピルｐ−ヒドロキシベンゾエート又はソルビン酸のような防腐剤、及び所望によ り従来の着香剤又は着色剤等の従来の添加物を含有していてもよい。 経口投与において必要とされる投与量単位は、この発明の化合物の約１〜２５０ ｍｇ、好ましくは約２５〜２５０ｍｇを含有するであろう。哺乳動物のための適 切な１日量は、患者の症状に依存して広く変化する。しかしながら、一般式Ｉの 化合物の約０．１〜３００ｍｇ／ｋｇ体重、特に約１−１００ｍｇ／ｋｇ体重の 投薬量が適当であろう。 皮膚に対する局所適用のためには、薬は、乳剤、ローション剤又は軟膏剤に調製 されるであろう。薬のために用いられる乳剤又は軟膏剤の製剤形態は、当該分野 で公知の、例えばイギリス薬局方のような薬学の標準書に記載されているような 従来の製剤形態である。 眼に対する局所適用のためには、薬は、適切な無菌の水性もしくは非水性溶剤の 溶液あるいは懸濁液に調製されるであろう。 添加物、例えばメタ重亜硫酸ナトリウム又はＥＤＴＡ２ナトリイウム（ｄｉｓｏ ｄｉｕｍ　ｅｄｅａｔｅ）のような緩衝液、フェニル水銀アセテートもしくはニ トレート、塩化ベンザルコニウム又はクロロへキシジンのような殺菌及び抗真菌 剤を含む保存剤、及びヒブロンロースのような増粘剤が含まれていてもよい。 当然、局所投与のため投薬量は、治療する面積の大きさに依存するであろう。眼 のためには、各々の投薬量は、典型的に薬か１０〜１００ｍｇの範囲内であろう 。 また、活性成分は、無菌媒体中で非経口的に投与されてもよい。使用する溶剤及 び濃度に依存して、医薬は溶剤中に懸濁させるか又は溶解させることができる。 局所麻酔剤のような補助薬、保存剤及び緩衝化剤を溶剤中に溶解させるのが有利 である。 リウマチ様関節炎の治療に用いるために、この薬は、経口的な経路によって、又 は冒された関節のなかに関節内注射することによって投与することができる。７ ０ｋｇの哺乳動物の１日量は、１０ｍｇ−１ｇの範囲内であろう。 以下の実施例は、この発明の実施例を示す。 実施例で用いるアミノ酸は、商業的に入手できた、又は文献手順に従って製造さ れたものである。すべての場合において、標準法によって必要とするＮ−メチル アミドに変換した。 実施例Ｉ Ｎ”−（３Ｓ−ヒドロキシ−４−（Ｎ−ヒドロキシアミノ）−２Ｒ−イソブチル スクシニル）−Ｌ−フェニルアラニン−Ｎｌ−メチルアミド イソプロピル３Ｒ−カルボキシイソプロピル−２３−ヒドロキシ−５−メチルベ キシ−５−エノアート−７０°Ｃに保持しながら、ジイソプロピル−２８−ヒド ロキシブタンジオアート（５０ｇ、　２３０ミリモル）を、乾燥テトラハイドロ フラン（５００ｍｌ）中のリチウムＮ、Ｎ−ジイソプロピルアミド（Ｎ、Ｎ−ジ イソプロピルアミン（８０ｍｌ、　５７０ミリモル）及びＩＯＭ　ｎ−ブチルリ チウム（４８，１ｍｌ、　４８１ミリモル）から〕溶液に加えた。添加を完了し た時、反応は一１５°Ｃに加温され、８時間撹拌された。反応混合物を一７０″ Ｃに冷却し、メタアリルイオジド（４６ｇ、　２５２ミリモル）を温度が一６５ °Ｃを越えないようにして、ゆくつり加えた。その混合物を一４０″Ｃに加温し 、クエン酸と共に１８時間撹拌し、−１５°Ｃに急冷した。有機相を分離し、１ ０％重曹溶液（５００ｍｌ）と食塩水（３００ｍｌ）　で洗浄し、次いて、硫酸 マグネシウムで乾燥した。溶液をろ過し、真空下で濃縮し、カラムクロマトグラ フィー（シリカゲル１　ｋｇ１ヘキサン中の２０〜３５％のジエチルエーテルの 溶出匂配）によって精製した褐色の油状物を得た。所望の生成物を、ＮＭＲによ ってジアステレオマー１７：１の混合物で検出される無色油状物（３０，９ｇ。 ４９％）として分離した。 ’Ｈ−ＮＭＲ：δ（クロロホルム−ｄ、メジャージアステレオ７−）、５．０６ （ｌ）１．５ｅｐｒｅｔ、　Ｊ＝６．３Ｈｚ）、　４．９７（ＩＨ５ｅｐｒｅｔ 、Ｊ＝６．３Ｈｚ）。 イソプロピル３Ｒ−カルボキシイソプロピル−２３−ヒドロキソ−５−メチルヘ キサノアート イソプロピル　３Ｒ−カルボキシイソプロピル−２８−ヒドロキソ−５−メチル ベキシ−５−エノアート（７，１４ｇ、　２６．２ミリモル）をエタノール（８ ０ｍｌ）に溶解し、水素雰囲気下で木炭上の１０％パラジウム触媒（１，０ｇ） と共に一晩撹拌した。触媒をろ過により除去し、ろ液を乾燥状態まで蒸発させ、 透明油状物（７，０３ｇ、　９８％）の生成物を得た。 ’Ｈ−ＮＭＲ；　δ　（りｏロネルムーｄ）　、５．０６（ＩＨ，５ｅｐｒｅｔ 、Ｊ＝６．３Ｈｚ）。 ４．９７　（＋Ｈ，５ｅｐ１２＋、Ｊ＝６．３　′ｚｌ、４．１７　（ＴＨ，ｂ ｒ　ｓ、）、３．２４　（ｌ　Ｈ，’５ｒ　ｓｌ、２．８３@（ｊＨ，ｍ）、＋ 、６Ｂ　（２ｇ９ ｍ１．１．４４　（ｉＨ，ｍｌ、！、２４　（６Ｈ，ｄ、Ｊ＝６．２　Ｈｚｌ、 ｉ、＋８　（６Ｈ，（１，Ｊ＊６．２　Ｈｚｌ　ａｌ’ｌｄn，Ｂり（６Ｈ，ｍ ｌ。 実施例１ｃ ３Ｒ−カルボキシ−２８−ヒドロキシ−５−メチルベキサン酸 イソプロピル　３Ｒ−カルボキシイソプロピル−２Ｒ−ヒドロキシ−５−メチル ヘキサノアート（７，０ｇ、　２５．６ミリモル）をジオキサン（１５ｍ１）及 び水（１５ｍｌ）に溶解し、水（２２ｍｌ）中の水酸化カリウム（４，２９ｇ） 溶液を加え、混合物を一晩、９０’Ｃに加熱した。溶液を冷却し、次いでイオン 交換樹脂（Ｄｏｗｅｘ　５０ｘ　４−４００．２００ｍ１）に通し、連記化合物 （４，８２ｇ、　９９％）を得た。 ’Ｈ−ＮＭＲ、δ　（りＧ（ｌネルムーｄ）、　８．７０（２Ｈ，ｂｒ　ｓ）、 ４．３２（ＩＨ，ｂｒｓ）、　３．１０（ＬＨ，ｍ）、　１．８５−１．５５（ ３）１．　ｍ）、　０．９６（６Ｈ，ｍ）。 実施例１ｄ ２Ｒ−（２，２−ジメチル−４−オキソ−１，３−ジオキサラン−５３−イル） −４−メチル吉草酸３Ｒ−カルボキシ−２３−ヒドロキシ−５−メチルベキサン 酸（５，１９ｇ、　２７．３ミリモル）を、２．２−ジメトキシプロパン（１５ ０ｍ１）及びＮ、　Ｎ−ジメチルホルムアミド（４０ｍｌ）に溶解し、ｐ−ｈル エンスルホン酸の触媒量の存在下、３０″Ｃで一晩撹拌した。溶媒を除去し、溶 媒（６，８７ｇ、＞１００％）が混入した連記化合物を得た。 ’Ｈ−ＮＭＲ；　δ　（りｏｎネルムーｄ）、４．４１（ＩＨ，ｄ、Ｊ＝４．８ Ｈｚ）、２．９１（ＩＨ，ｍ）、　１．６９（３Ｈ，ｍ）、　１．５４（３Ｈ， ｓ）、　ｌ、４８（３Ｈ，ｓ）、　０．８８（６Ｈ，ｍ）。 実施例１ｅ ペンタフルオロフェニル　Ｒ−（２，２−ジメチル−４−才キソー１．　３−ジ オキサラン−５８−イル）−４−メチルペンタノアート ２Ｒ−（２，２−ジメチル−４−オキソ−１，３−ジオキサラン−５３−イル） −４−メチル吉草酸（５５８ｍｇ、　２．４ミリモル）をジクロロメタン（１０ ｍｌ）中で取り出し、ペンタフルオロフェノール（６７０ｍｇ、　３．６ミリモ ル）及びＮ−ｘチル−Ｎ’　−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド （５６０ｍｇ、　２゜９ミリモル）を加える前にｏ′ｃに冷却した。反応は２時 間、０°Ｃで撹拌し、次いで、溶液を１Ｍ炭酸ナトリウム（５０ｍｌ）及び食塩 水で洗浄した。有機相を乾燥しく硫酸マグネシウム）、ろ過し、乾燥状態まで蒸 発させ、カラムクロマトグラフィー（シリカゲル、ジクロロメタン）によって精 製し、活性化エステル（５５２ｍｇ、　５８％）を得た。 ’Ｈ−ＮＭＲ；　δ　（クロロホルムーｄ）、４．５７（ＬＨ，ｄ、Ｊ＝６．５ Ｈｚ）、３．３２（ＩＨ，ｍ）、　１．８６（３Ｈ，ｍ）、　１．６７（３Ｈ， ｓ）、　１．５８（３Ｈ，ｓ）、　１．０３（６Ｈ，ｍ）。 実施例Ｉｆ Ｎ”−（２Ｒ−（２，２−ジメチル−４−オキソーｌ、３−ジオキサラン−５８ −イル）−４−メチルペンタノイル）−Ｌ−フェニルアラニン−Ｎｌ−メチルア ミドペンタフルオロフェニル２Ｒ−（２，２−ジメチル−４−才キソー１．３− ジオキサン−５８−イル）−４−メチルペンタン酸（２４ｇ、６０．６ミリモル ）及びＬ−フェニルアラニン−Ｎ−メチルアミド（１１，８７ｇ、６６．７ミリ モル）をＮ。 Ｎ−ジメチルホルムアミド（２５０ｍ　ｌ）中に溶解し、混合物を３０°Ｃで４ ０時間攪拌した。溶媒を減圧下で除去し、残留物をジクロロメタン（２５０ｍｌ ）中に溶解し、ＩＭの炭酸ナトリウム（２Ｘ２５０ｍｌ）及び塩水（２５０ｍｌ ）で洗浄し、乾燥させた（硫酸マグネシウム）。溶液を濾過し、蒸発させて、酢 酸エチル−へキサンから再結晶させることにより白色固体を得た　（１１，９１ ｇ、　５１　％）　。　’Ｈ−ＮＭＲ：　δ　（り０σネルム（り、　７．２７ 　（５Ｈ，ｍｌ、　ｓ、ｓｔ　（＋　Ｈ，りｒ　ｄ、　Ｊ　ｓ　７．９　Ｈｚｌ 、　６．４３（＋ｌ−１，ｂｔ　ｍｌ、　S．６５　（Ｉｔ−１，ｍｌ、　４． ５２　（１Ｈ０ｄ、　Ｊ−５，４＋ｚ１３．ＩＯ（２ｈ　ｄ、　Ｊ　＊７ｊ　＋ ｚ）、　２．７＋　（ａＨ，ｍ　ａｎｄｄ、　Ｊ　−４，１３Ｈｚｌ、　１D５ ４　（３１−１，ｓｌ。 １．５２　（Ｓｉ”１．Ｓ　ａｌ’ｌｄ　ｍｌ　Ｌ３９　（＋Ｈ，ｍｌ　ａｎｄ 　Ｏ巳５　（６Ｈ，２ｄｌ実施例１ｇ Ｎ２−　［３Ｓ−ヒドロキシ−４−ヒドロキシ−２Ｒ−イソブチルスクシニル’ ）］　−］Ｌ−フェニルアラニンーＮｌ−メチルアミド Ｎ’　−［２Ｒ−（２，２−ジメチル−４−オキソ−１，３−ジオキサン−５３ −イル）−４−メチルペンタノイル］　−Ｌ−フェニルアラニン−Ｎ１−メチル アミド（１１，９０ｇ、３０゜５ミリモル）をテトラヒドロフラン（１７５ｍｌ ）に溶解し、２Ｍの塩酸（１７５ｍｌ）の添加の間４°Ｃに冷却した。溶液を室 温に温め、次いで１８時間攪拌した。溶媒の塊を減圧下で除去し、高真空上乾燥 させ、オフホワイトの泡状物が得られた（１０．７９ｇ、はぼ定量）。　’Ｈ− ＮＭＲ：δ（クロロホルム−ｄ　）　＝　７ｊ９　（５Ｈ，ｍｌ、　４．５３　 （ＩＩ−１，ｍ）、　４．＋３　（ＩＨ，ｄ、Ｊ　＝　５．０　Ｈｚｌ、　：１ ．１W゜ ２．９０　（２Ｈ，ＡＢＸ、　Ｊ　＝　５．５．９．ｉ　、　＋　３．９　Ｈｚ ｉ、２．６６　（４）（、Ｓ　ａｎｄ　ｍ）、　Ｉ　、４９@（Ｉ　Ｈ，ｍｌ、 　＋　、２］　（２Ｈ，ｍｌ。 ０．７Ｅｌ　（３Ｈ，ｄ、　Ｊ　＝　６．０　Ｈｚｌ　ａｎｄ　Ｏ，７５（３） −１，ｄ、　Ｊ　＝　６．０　）−ｔｚｌ実施例１ｈ Ｎ”　−［４−（ベンジルオキシアミノ）−３３−ヒドロキシ−２Ｒ−イソブチ ルスクシニル）］　−］Ｌ−フェニルアラニンーＮ１−メチルアミ ド’−［３Ｓ−ヒドロキシ−４−ヒドロキシ−２Ｒ−イソブチルスクシニル）］ −］Ｌ−フェニルアラニンーＮ１−メチルアミド１０．７９ｇ、３０．８ミリモ ル）のテトラヒドロフラン（２００ｍｌ）溶液に、水（１５０ｍｌ）中の０−ベ ンジルヒドロキシルアミンヒドロクロリド（７，３８ｇ、４６．２ミリモル＝１ ．５当量）を添加した。溶液を０°Ｃに冷却し、水（５０ｍｌ）中のＮ−エチル −Ｎ’　−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミドヒドロクロリド（１ １，８２ｇ、６１゜７ミリモル、２当量）を添加し、約１０分後に生成物が溶液 から結晶化し始めた。反応混合物を室温に温め、次いで一晩攪拌した。生成物を 濾過により集め、水、次にジエチルエーテルで洗浄し、高真空下で定量になるま で乾燥させた（１１．４３ｇ。 ８１９４）。 ’Ｈ−ＮＭＲ：　δ　（メタノール−ｄ４）、７．　３　１　（５Ｈ，ｍ、　Ｐ 　ｈ）　。 ７、　ｌ　９　（５Ｈ，ｍ）　、　４．　８０　（２Ｈ，ｓ　；　水ビーク　下 ）４５２［Ｈ：　ご：、　Ｊ　ｌｌｏ、　Ｉ　、　３．５　Ｈｚ）、　３．９４ １　（ＩＫ　ｄ、　Ｊ　＝　５．４８ｚ１．３．１２．２．９P　（２Ｈ，ＡＢ Ｘ、Ｊ＊６．Ｉ Ｂ、７１３．８ヒｚ１．２．６’ｌ　１３Ｈ，Ｓｔ、　２．Ｅ９　（＋Ｈ，ｗ、 ）、　１．４２　（＋　Ｈ，ｍｌ、　１．２３　（ＩＨ，ｍ戟A　Ｌ１２　（Ｉ Ｈ，ｍｌ。 ａｒｌα０７ａ　コア５　ｉ６Ｈ，２；、ｊ　ｘｒ　６．４　Ｈ二１実鴇例１１ Ｎ’　−［３Ｓ−ヒドロキシ−４−（Ｎ−ヒドロキシキシアミノ）−２Ｒ−イソ ブチルスクシニル）］　−］Ｌ−フェニルアラニンーＮ１−メチルアミ ド２−［４−（ベンジルオキシアミノ”）　−３３−ヒドロキシ−２Ｒ−イソブ チルスクシニル’）］　−］Ｌ−フェニルアラニンーＮ１−メチルアミド１１． ４３ｇ、２５．１ミリモル）をエタノール（１２５ｍｌ）及びメタノール（３７ ５ｍｌ）に溶解し、ジベンジル化が終了したことをＴＬＣが示すまで（４，５時 間）水素雰囲気下で木炭（１，５ｇ）に付した１０％パラジウムと共に攪拌した 。触媒を濾過により除去し、溶媒を蒸発させて白色固体を取り出し、高真空下で 一定の量になるまで乾燥させた（７．５１ｇ、８５％）。　’Ｈ−ＮＭＲ：δ（ メタノール−ｄ　ａ　）　、　７．＋９（５Ｈ，ｍ、Ｐｆｉｌ、４．５０（＋Ｈ ，ｄｄ、Ｊ＝６．２．８．５Ｈｚ）、コ、ｇｇ　（ＩＨ，ｄ−Ｊ　−５，７＋ｚ １．３．＋４．２．９２　（２ＨＡａＸ、Ｊ−６，３，８，７，４３，９Ｈｚｌ 、２．５５　（コＨ，ｓｌ、　２．５１３@（Ｉｔ−１，ｍ、ｌ。 ＋、ａｓ（＋Ｈ，ｍｌ、１．１２（２＋、ｍ）、ａｎａＯ，７７，０，７ａ（６ Ｈ，２ｄ、Ｊ鱈６．２．６．３Ｈｚ１．Ｉコ（、ＮＭＦｔ：■ （メタノール−ｄ　４）　、　＋７５．５．１７２．９．１７１．５．　＋３８ ．６．１コ０．２．　＋２９．５．　＋２７．８．７２．乙５６．２．４９．１ ！、　３９．３２Ｂ乙２６．６．２５．３．２２．７　ａｎａ　２２．１計測値 Ｃ５７，９３，Ｈ，７，４Ｂ、Ｎ、＋：、５Ｂ！’ａ：　ＣＩ＠Ｈ２−Ｎ１０５ ．０．６Ｈ２０理論値Ｃ，５ａ、０２．　Ｈ，７，Ｅ２．　Ｎ、　Ｉ　＋、２９ ％実施例２ Ｎ２−（３Ｓ−ヒドロキシ−４−（Ｎ−ヒドロキシアミノ）−２Ｒ−イソブチル スクシニル）−Ｌ−ロイシン−Ｎｌ−メＬ−ロイシン−Ｎ−メチルアミドから実 施例１と同様の工程により製造した。　’Ｈ−ＮＭＲ：δ（メタノール−ｄ４） 。 ４コＡ　（ＩＨ，（ｊｄ、Ｊ　ｓ　５．５．９．３　Ｈｚｌ、３．９８　（ｉｆ −１，ｄ。 」コ６コＨｚｌ　２．６ａ　（４８，ｓ　、ｉｎｄ　ｍｌ、　Ｃ６６（εＨ，ｍ ｌ、　１．２１　（ｉＨ，ｒｎｌ、　Ｏ，Ｃ９（＋２１−１D　ｍｌ。 ”Ｃ−ＮＭＲ：δ（メタノール−ｄ４）。 ＋７５．７．＋７５．２．１７＋、５．７：］、０．５！、＋、４１．９．３９ ．２．２６．９．２５．３．２５．８゜２３．７．２３．５．２２．２　ａｎａ 　２１．ａ。 実施例３ Ｎ２−　［３Ｓ−ヒドロキシ−４−（Ｎ−ヒドロキシキシ了ミノ）−２Ｒ−イソ ブチルスクシニル）］−］５−メチルし一グルタミン酸−Ｎ１−メチルアミド Ｌ−ロイシン−Ｎ−メチルアミドから実施例１と同様の工程により製造した。　 ’Ｈ−ＮＭＲ：δ（メタノール−ｄ４）。 ｚ、３２　（ＩＨ，ｑ、　Ｊ虐４．９．９．３Ｈ１Ｉ、　３．９７　（＋　Ｈ， ｃｌ、　Ｊ　、　６．８　）（Ｚｌ、　３．６２４３１−１．　Ｓｌ、　２．７ ２　（ｉ　Ｈ，ｍｌ、　２D５９　（３Ｈ，５１，２，３８（２１−１，ｍｌ。 ２．０！！　（ＩＩ−１，ｒｎｌ、　＋　、５９　（Ｉｌ’、、　ｍｌ、　１． ５４　（２）（、ｂｒ　ｍｌ、　１．＋　７　（ＩＨ，ｍｌ@ａｎｄ　Ｏ，９０ ，０，８７（６Ｋ　２ｄ、　Ｊ　ｍ計測値：Ｃ，４８，９１，Ｈ，７，２９，Ｎ 、Ｉｌ、３９％；Ｃ＋５ＨｔｔＮｓ　０？　、　０．　４Ｈ＊　○　理論イ直　 ：Ｃ，４ｇ、８８゜Ｈ，７，６０，Ｎ、１１．４０％ 生物学的実施例Ａ コラゲナーゼの阻害剤としての本発明の化合物の力価を、コーストン（Ｃａｗｓ ｔｏｎ）及びベレット（Ｂａｒｒｅｔｔ）　（Ａｎａｌ、Ｂｉｏｃｈｅｍ、。 ９９、３４０〜３４５　（１９７９））の方法で参考文献と組合せることにより 、試験する化合物の１ｍＭ溶液又は希釈溶液を３７°Ｃで１６時間、コラーゲン 及びコラゲナーゼ（５ｍＭ塩化カルシウム、０．０５％ＢｒＩＪ３５及び０．０ ２％窒化ナトリウムを含むｐＨ７，５の２５＋ｎＭ　Ｈｅｐｅｓで緩衝した）と 共にインキュベートし、測定した。コラーゲンは、コーストン（Ｃａｗｓｔｏｎ ）及びマーフ４　（ＭｕｒｐｈＹ）　ＣＭｅｔｈｏｄｓ　ｉｎ日ｎｚｙｍｏｌｏ ｇｙ、　８０．７１１　（１９８１）　）の方法で参考文献を組合せることによ り製造した”Ｃコラーゲンにアセチル化した。 サンプルを、遠心分離し、未消化のコラーゲンを沈降させ、加水分解の測定とし てシンチレーションカウンターで測定するために放射性の上演の一部を除去した 。試験化合物の１ｍＭ又は希釈溶液の存在下でのコラゲナーゼの活性を阻害剤を 欠いたコントロールにおける活性と比較し、その結果を、コラゲナーゼ活性の５ ０％阻害効果（ＩＣ，。）を阻害剤の濃度として以下に報告した。 ストロンリシンの阻害剤としての本発明の化合物の力価は、コーストン（Ｃａｗ ｓｔｏｎ）らＣＢｉｏｃｈｅｍ、ｊ、、１９５．　１５９−１６５　（１９８１ ）〕の方法で、参考文献と組合わせることにより、試験する化合物の１ｍＭ溶液 又は希釈溶媒を３７°Ｃで１６時間、ストロンリシン及び１４ｃアセチル化カゼ イン（５ｍＭ塩化カルシウム、０．０５％Ｂ「１ｊ３５及び０．０２％窒化ナト リウムを含むｐＨ７，５の２５＋ｎＭ　）Ｉｅｐｅｓで緩衝した）と共にインキ ュベートすることにより測定した。カゼインを、コーストンら（同上）の方法で 製造した１４Ｃカゼインにアセチル化した。試験化合物１ｍＭ又は希釈溶液の存 在下でストロンリシンの活性を阻害剤を欠いたコントロールの力価と比較し、ス トロンリシンの活性の５０％阻害効果（ＩＣｓ。）を阻害剤の濃度として以下に 報告した。 次の結果において、上記試験における実施例１．２及び３の化合物の力価を、Ｅ Ｐ−Ａ−２３６８７２号公報（ロシュ）の実施例１３及び２７の生成物、つまり 、 （４−（Ｎ−ヒドロキシアミノ）　２　（Ｒ）−イソブチルサクシニル））−Ｌ −ロイシル−Ｌ−アラニンエチルエステル及び（４−（Ｎ−ヒドロキシアミノ） ３　（Ｓ）−フタロイルアミノブチル−２（Ｒ）−イソブチルサクシニル）〕− 〕Ｌ−ロイシルグリシルエチルエステと同様の試験で比較した。 前者の化合物（以下に０１として表わす）は、ＥＰ−Ａ−２３６８７２号公報で 報告され、その活性か最も強いコラゲナーゼ阻害剤であるため、比較例として選 択された。後者の化合物（以下にＣ２と表わす）は、ＥＰ−Ａ−２３６８７２号 公報で報告され、本発明の化合物の水酸基の置換基と同じ位置に置換基を有する 唯一のものであるコラゲナーゼ阻害剤であるため、比較例として選択され結果 化合物　コラゲナーゼＩＣ，。　ストロンリシンＩＣｓ。 実施例１　９　１５０ 実施例２　８　９０ 実施例３　３０　４００ 試験化合物の投与による実験動物の血液中における本発明の化合物の時間に関す る濃度を測定した。 試験化合物を処理グループにつき６匹の雄性ラット（３００ｇ）に摂食により投 与した。血液試料を投与後０．５．１．０．２．０゜６．０及び２４時間に尾静 脈の穿刺で採取した。血液の０．４ｍｌを抗凝血物質であるＯ、　１ｍｌ酸−ク エン酸−グルコース（ＡＣＤ）を含む４．５ｍｌ試験管に入れた。抽出のため、 ３＋ｎｌメタノールを加え、沈殿した血液を遠心分離（３０００ｒ　ｐ　ｍで３ ０分）でベレット状にした。上澄みの２ｍ１分割量を取り出し、凍結乾燥で濃縮 した。抽出物を２００μＩ　ＤＭＳＯ及びコラゲナーゼの阻害活性を測定する１ ０μｍ分割量に再溶解した。抽出物における阻害活性を上記の生物字体実施例Ａ に記載したコラゲナーゼの測定を用いて測定し、阻害剤の濃度（つまり、薬物＋ 活性な代謝生成物）を漂準曲線との比較により得た。結果をｎｇ／ｍｌのピーク 濃度、０〜６時間でのｎｇ／ｍｌｘ時間の曲線下の面積（ＡＵＧ）　、及びＩＣ ３゜Ｘ時間の数のＡＵＧとして表示した。 上記実施例１の化合物を比較化合物ＣＩ及びＣ２と比較した。 結果 化合物　ピーク濃度　ＡＵＣ（０−６ｈ）　ＡＵＣ（０−６ｈ）ｎｇ／ｍｌ　ｎ ｇ／ｍｌ　Ｘ　ｈ　ｎ［ｃｉｏ　Ｘ　ｈ実施例１”　７５．５＠０．５ｈ　２５ ３．８　４２．６Ｃｌ　２５＠０．５ｈ　９１．７　７．４Ｃ２’　ｌ＠ｌｈ　 ５．３　２．１２ °２つの結果の平均 生物学的実施例Ｃ 上記実施例１の化合物及び比較化合物ＣＩ（上記生物学的実施例Ａ参照）の活性 をアジュバント誘発関節炎のモデルで評価した。 アジュバント関節炎を、軽パラフィン油におけるエム、ブチリカム（Ｍ、　ｂｕ ｔｙｒｉｃｕｍ）　０．　７５ｍｇ　（フロイント完全アジュバント−ＦＣＡ） を尾の基部中へ１回皮内注入することによって雄性のルイスラットに誘発させた 。「二次ノ障害が１０日の停ｉ後に発生し、後足の炎症により特徴付けられた。 後足の水腫体積を水置換により車量（体積）記録で測定した。試験化合物を１３ 〜１７日から１日２回投与した。２０日口の後足の体積を測定し、１３日口のそ れと比較した。実験は２３日で終えた。 ２０日口のおいて、実施例１の化合物（１０ｍｇ／ｋｇ投与）は、コントロール に比例して、腫脹において統計的に育意な減少が見られ、一方、化合物ＣＩは効 果が認められなかった。 ＴＮＦの放出阻害に対する本発明の化合物の能力を調査した。 測定は、分析評価はヒトの単球細胞系、Ｕ９３７からＴＮＦαの放出を刺激する ホルボールミリステートアセテート（ＰＭＡ）の能力に基づいた。 ５％ウシ胎児血清を添加したＲＰＭ［１６４０培地で培養したＵ９３７細胞を、 ５分、ｔｏｏｏｘ　ｇで遠心分離し、次いで２　Ｘ　１０’／ｍｌの培地に再懸 濁した。細胞懸濁液の１ａ＋１を２４ウエルのプレートの個々のウェルに分割し た。試験化合物を、１００−のストック濃度でジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ ）に溶解し、次いで、ＲＰＭ１１６４０培地で最終的に必要とされる濃度の５０ 倍に希釈した。希釈した化合物の２０μｌを対のウェルにおいて、Ｕ９３７細胞 に加えた。 ＴＮＦα放出は５０ｎＭの最終濃度で細胞にＰＭＡを添加することによって刺激 される。 国際調査報告　ＰＣＴ／ＧＢ　９３１０１５５６フロントページの続き （５１）　Ｉｎｔ、　Ｃ１，６識別記号　庁内整理番号Ａ６１Ｋ　３１／４２５ 　ＡＣＡ　９４５４−４Ｃ３１１５０５ＡＢＬ　９４５４−４Ｃ ３１１５３５ＡＢＣ９４５４−４Ｃ ＣＯ７Ｄ　２３９／４２　Ｚ　８６１５−４Ｃ２６３／３２　９２８３−４Ｃ ２７７／３０　９２８３−４Ｃ ２９５／１４　Ｚ　９２８３−４Ｃ ３３３／３６　９４５５−４Ｃ ５２１１００９３６０−４Ｃ （８１）指定国　ＥＰ（ＡＴ、ＢＥ、ＣＨ，ＤＥ。 ＤＫ、ＥＳ、ＦＲ，ＧＢ、ＧＲ，ＩＥ、ＩＴ、ＬＵ、ＭＣ，ＮＬ、ＰＴ、ＳＥ） 、０Ａ（ＢＰ、ＢＪ、ＣＦ、ＣＧ、ＣＩ、ＣＭ、ＧＡ、ＧＮ、ＭＬ、ＭＲ，ＮＥ 、ＳＮ。 ＴＤ、ＴＧ）、ＡＵ、ＢＲ，ＣＡ、ＣＺ、ＤＥ、ＦＩ。 ＨＵ、ＪＰ、ＫＲ，ＮＯ，ＮＺ、　ＰＬ、ＰＴ、　ＲＵ、ＳＫ、　ＵＡ、　ＵＳ ＦＩ （７２）発明者　クリミン、マイケル、ジョンイギリス国、オックスフォード　 オーエックス４５エルワイ、カウリー、ウオトリントン　ロード（番地なし）ブ リティッシュバイオチック　ファーマシューテイカルズリミテッド （７２）発明者　ベケット、レイモンド、ボウルイギリス国、オックスフォード 　オーエックス４５エルワイ、カウリー、ウオトリントン　ロード（番地なし） ブリティッシュバイオチック　ファーマシューテイカルズリミテッド

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．式（Ｉ）： ▲数式、化学式、表等があります▼（Ｉ）〔式中、Ｒ２は基Ｒ６−Ａ−（式中、 Ａは、０又はＳ原子を介していてもよい６までの炭素原子の２価の直鎖又は分枝 、飽和又は不飽和の炭化水素鎖、及びＲ６は水素又は任意に置換されたフェニル 、シクロアルキル又はシクロアルケニル基）、Ｒ３はいくつかの極性置換基が任 意に保護された、プロリン以外の天然α−アミノ酸の特徴的な側鎖であり、Ｒ４ は水素又はメチルであり、 Ｒ５は水素、Ｃ１−Ｃ４アルキル、又は基Ｄ−（Ｃ１−Ｃ４アルキル）（ここで 、Ｄは水素、（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ４）アルキルチオ、アシル アミノ、任意に置換されたフェニル、又は複素原基、ＮＨ２、又はモノ−又はジ −（Ｃ１−Ｃ４アルキル）アミン又は複素環基）、又は、Ｒ３及びＲ５は、いっ しょになって、Ｏ、Ｓ又はＮの異原子を介していてもよい２価の８〜１４の炭素 原子の飽和又は不飽和の炭化水素鎖で表される〕の化合物、又はそれらの塩、溶 媒化合物又は水和物。 ２．立体化学が、 ヒドロキシ及びヒドロキサム酸分子を伴う炭素原子−Ｓ、Ｒ２基を伴う炭素原子 −Ｒ、 Ｒ３基を伴う炭素原子−Ｓ、 である請求の範囲１にクレームされた化合物。 ３．Ｒ２が、Ｃ３−Ｃ６アルキル、シクロアルキル（Ｃ３−Ｃ４アルキル）、フ ェニル（Ｃ２−Ｃ４アルキル）、Ｃ２−Ｃ４アルコキシ（Ｃ１−Ｃ３アルキル） ｍ又はＣ２−Ｃ４アルキルスルファニル（Ｃ１−Ｃ３アルキル）ｍ基（ここで、 ｍは０又は１である）請求の範囲１又は２にクレームされた化合物。 ４．Ｒ２が、ｎ−ペンチル、シクロヘキシルプロピル、シクロヘキシルブチル、 シクロヘキシルペンチル、フェニルエチル、フェニルプロピル、フェニルブチル 、フェニルペンチル、プロピルオキシメチル又はプロピルスルファニルである請 求の範囲３にクレームされた化合物。 ５．Ｒ２が、イソブチルである請求の範囲３にクレームされた化合物。 ６．Ｒ３が、フェニルアラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、メチオニン 、グリシン、アスパラギン、グルタミン又はアラニンの特徴的な側鎖、又はそれ らの極性基が任意に保護されたシステイン、チロシン、トリプトファン、ヒスチ ジン、セリン、スレオニン、アルギニン、グルタミン酸、リジン又はアスパラギ ン酸の特徴的な側鎖である先行するいずれか１つの請求の範囲にクレームされた 化合物。 ７．Ｒ３が、フェニルアラニンの特徴的な側鎖、つまりフェニルメチルである請 求の範囲１〜５のいずれか１つにクレームされた化合物。 ８．Ｒ４が、メチル又はエチルである先行するいずれか１つの請求の範囲にクレ ームされた化合物。 ９．Ｒ４が、水素である請求の範囲１〜７のいずれか１つの請求の範囲にクレー ムされた化合物。 １０．Ｒ５が、水素又はＣ１〜Ｃ４アルキル、又は基Ｄ−（Ｃ１−Ｃ４アルキル ）（ここで、Ｄはヒドロキシ、（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ４）アル キルチオ、アシルアミノ、任意に置換されたフェニル、又は複素環基）である先 行するいずれか１つの請求の範囲にクレームされた化合物。 １１．Ｒ５が、プロピル、ブチル、ヒドロキシエチル、２−エチルチオエチル、 ２−アセトキシエチル、Ｎ−アセチル−２−アミノエチル、３−（２−ピロリド ン）プロピル、任意に置換されたフェニルエチル、フェニルプロピル、フェニル ブチル及びフェニルペンチルである請求の範囲１０にクレームされた化合物。 １２．Ｒ５が、メチル又はエチルである請求の範囲１０にクレームされた化合物 。 １３．Ｎ２−〔３Ｓ−ヒドロキシ−４−（Ｎ−ヒドロキシアミノ）−２Ｒ−イソ ブチルスクシニル〕−Ｌ−ロイシン−Ｎ１−メチルアミド、又は Ｎ２−〔３Ｓ−ヒドロキシ−４−（Ｎ−ヒドロキシアミノ）−２Ｒ−イソブチル スクシニル〕−５−メチル−Ｌ−グルタミン酸−Ｎ１−メチルアミド 及びそれらの塩、溶媒化合物又は水和物。 １４．Ｎ２−〔３Ｓ−ヒドロキシ−４−（Ｎ−ヒドロキシアミノ）−２Ｒ−イソ ブチルスクシニル〕−Ｌ−フェニルアラニン−Ｎ１−メチルアミド又はその塩、 溶媒化合物又は水和物。 １５．（ａ）一般式（ＩＩ）の酸 ▲数式、化学式、表等があります▼（ＩＩ）〔式中Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５は ヒドロキシアミン、Ｏ−保護ヒドロキシアミン又はそれらの塩と反応する可能性 のあるＲ２、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５のいずれかの置換基が保護されていることを除 いて一般式（Ｉ）で定義されたと同一である〕又はその活性誘導体と、ヒドロキ シルアミン、Ｏ−保護ヒドロキシルアミン又はそれらの塩とをカップリングし、 次いで、得られたヒドロキサム酸分子から及びＲ２、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５の中の いずれかの保護された置換基から保護基を除去し、及び （ｂ）任意に一般式（Ｉ）の化合物を一般式（Ｉ）の別にクレームされた化合物 に変換する ことからなる請求の範囲１にクレームされた化合物の製造方法。 １６．式（ＩＩ）の化合物の活性誘導体を用い、その活性誘導体がべンタフルオ ロフェニル、ヒドロキシスクシニル又はヒドロキシべンズトリアジルエステルで ある請求の範囲１５にクレームされた方法。 １７．式（ＩＩ）にクレームされた化合物が、式（ＩＩＩ）の酸又はそれらの活 性誘導体と、式（ＩＶ）のアミンとのカップリング、▲数式、化学式、表等があ ります▼（ＩＶ）（式中、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５は一般式（Ｉ）と同義であ り、Ｒ１０及びＲ１１は、各々ヒドロキシ保護基、又は共に両方のヒドロキシ基 を同時に保護する２価の分子で表される）、続いて、保護基又は保護分子を除去 することにより製造される請求の範囲１５又は１６にクレームされた方法。 １８．式（ＩＩＩ）にクレームされた化合物の活性誘導体を用い、その活性誘導 体がペンタフルオロフエニルエステル、酸無水物又は酸ハライド（例えば塩化物 ）である請求の範囲１７にクレームされた０法。 １９．化合物（ＩＩＩ）が式（Ｖ） ▲数式、化学式、表等があります▼（Ｖ）（式中、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５は 一般式（Ｉ）と同義であり、基Ｒ１２及びＲ１３は、ジオキサロン形成試薬から 誘導される）である請求の範囲１１７又は１８にクレームされた方法。 ２０．基Ｒ１２及びＲ１３が、水素、アルキル、フェニル又は置換されたフェニ ルである請求の範囲１９にクレームされた方法。 ２１．ヒトを含む哺乳類において、ＭＭＰｓ及び／又はＴＮＦによって媒介され る疾患又は症状の管理（治療又は予防を意味する）の方法であり、その方法は、 請求の範囲１〜１４のいずれか１つにクレームされた化合物の有効量を哺乳類に 投与するからなる管理方法。 ２２．人間又は家畜の薬剤において、特にＭＭＰｓ及び／又はＴＮＦにより媒介 される疾患又は症状の管理（治療又は予防を意味する）における使用のための請 求の範囲１〜１４のいずれか１つにクレームされた化合物。 ２３．ＭＭＰｓ及び／又はＴＮＦにより媒介される疾患又は症状の管理（治療又 は予防を意味する）における人間又は家畜の薬剤での使用のための請求の範囲１ 〜１４のいずれか１つにクレームされた化合物。 ２４．ＭＭＰｓ及び／又はＴＮＦにより媒介される疾患又は症状の管理（治療又 は予防を意味する）のための薬剤の製造における請求の範囲１〜１４のいずれか １つにクレームされた化合物の用途。 ２５．関連する疾患又は症状が、ＭＭＰにより煤介されるものである請求の範囲 ２１の方法、請求の範囲２２又は２３にクレームされた化合物又は請求の範囲２ ４の用途。 ２６．関連する疾患又は症状が、リュウマチ様関節炎、変形性関節炎、歯周炎、 歯肉炎、角膜潰瘍、二次転移による腫瘍浸襲である請求の範囲２１の方法、請求 の範囲２２又は２３にクレームされた化合物、又は請求の範囲２４の用途。 ２７．関連する疾患又は症状が、ＴＮＦにより媒介されるものである請求の範囲 ２１の方法、請求の範囲２２又は２３にクレームされた化合物又は請求の範囲２ ４の用途。 ２８、関連する疾患又は症状が、炎症、発熱、心血管作用、出血、凝固及び急性 位相応答、悪液質及び食欲不振、急性感染、ショック状態、移植片対宿主反応及 び自己免疫疾患である請求の範囲２１の方法、請求の範囲２２又は２３にクレー ムされた化合物、又は請求の範囲２４の用途。 ２９．請求の範囲１〜１４のいずれかにクレームされた化合物と医薬的又獣医学 的に許容な賦形剤又は担体からなる医薬的又医学的組成物。 ３０．経口投与のたの適用である請求の範囲２９の医薬的又は獣医学的組成物。