JPH08149954A - 新規蛋白質及び栄養組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【構成】 本発明は、大豆蛋白質をプロテアーゼにより
加水分解し、分子量６，０００以上の蛋白質を分子量分
画することによって得られる、下痢の発生を予防及び／
又は抑制する蛋白質及びそれを配合した栄養組成物に関
する。 【効果】 本発明蛋白質を配合した栄養組成物、特に経
腸栄養剤は、外科手術後に対し下痢の発生を予防及び抑
制する効果を有する栄養剤として有用である。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、大豆蛋白質加水分解物
に含まれ、分子量分画によって得られる下痢の発生を予
防及び／又は抑制する蛋白質、その製造方法、及びそれ
を配合した栄養組成物に関する。詳しくは、大豆蛋白質
をプロテアーゼ処理し、分子量６，０００以上の蛋白質
を分子量分画することによって得られる下痢の発生を予
防及び／又は抑制する蛋白質、その製造方法、及びそれ
を配合した栄養組成物、特に経腸栄養剤に関する。

【０００２】

【従来の技術】従来、栄養補給を目的として種々の栄養
組成物が外科的領域及び内科的領域で使用されており、
栄養状態の改善や疾病の治癒に一定の効果が上がってい
る。経口又は経管栄養において最も頻度の高い副作用は
下痢であり、特に手術施行後の経口又は経管栄養施行例
において２０％前後発生することが知られている（佐藤
博監修、経腸栄養、２２６頁、１９８４年、朝倉書店発
行）。又、癌等の放射線療法においては、有効十分量の
線量を消化管や近接臓器に照射すると、腹痛若しくは下
痢が発生することが知られている。このように、種々の
原因により下痢が頻発することに対する対策として、臨
床では栄養組成物の注入速度を落とす処置がとられる
が、最悪の場合には投与を中止せざるを得なくなる。こ
のような場合、栄養状態の悪化を招くことになり、さら
にこの栄養状態の悪化のために、放射線療法においては
十分な線量の照射ができなくなり治療効果を上げること
ができなくなる。経口又は経腸栄養組成物の開発目標
は、常に下痢発生の防止にあったと言っても過言ではな
かった。

【０００３】栄養法施行中における下痢を抑制するため
に、多くの研究が行われている。一つの方法として、栄
養組成物を原因とする下痢、即ち栄養組成物の成分であ
る蛋白質の吸収不良により発生する下痢を予防若しくは
抑制するために、従来より吸収を良くする目的で蛋白質
を低分子ペプチド又はアミノ酸単位まで分解、即ち低分
子化して下痢の発生を予防若しくは抑制する方法、例え
ば乳加水分解ペプチドを用いた栄養剤（特開平４−３２
０６５０号）、植物性蛋白質の加水分解物を用いた栄養
組成物（特開平５−４３８７２号）等が開示されてい
る。又、栄養組成物の蛋白源として大豆蛋白質を用いる
ことにより、メトトレキセート（ＭＴＸ）投与ラットで
発生する下痢が抑制されることが知られている（Funk
M.A. and Baker D.H., Journal of Nutrition, vol.12
1, pp1673-1683, 1991 ; 中田忍ら、第４７回日本栄養
・食糧学会総会講演要旨集、１２頁、１９９３年）。

【０００４】しかし、経腸栄養剤が適応となる外科及び
内科領域の患者や老人では臓器の機能の低下、特に腎臓
の機能低下が見られることがあり、このときに投与する
栄養組成物は腎臓に対する負担を増大させない為に、窒
素源を著しく増加させることは避けるべきであるといわ
れている。このような患者において、経腸栄養施行時の
栄養補給の目的以外に下痢抑制効果を期待して加水分解
前の大豆蛋白原料のみを補足添加した栄養剤を投与する
と栄養組成物の窒素量が非常に上がり、前述の腎臓に対
する悪影響が懸念される。又、市販の経腸栄養剤におけ
る三大栄養素である窒素源、脂質、糖質は各製剤でバラ
ンス良く設計されており、ここに下痢抑制効果を期待し
て大豆蛋白質を多量に添加すると窒素源の配合量のみ突
出することになり、窒素代謝が大きく乱れ治療上大きな
問題となってしまう。

【０００５】

【発明が解決しようとする課題】上述のように、従来の
蛋白質のみを窒素源として配合した経口経腸栄養組成物
では窒素源の吸収不良にもとづく下痢の発生を抑制する
どころか逆に助長してしまうものや、下痢を予防若しく
は抑制できても窒素源のバランスが崩れる等栄養学的及
び治療上での問題を抱えたものが少なくなかった。医療
現場では栄養学的に優れ、しかも下痢発生の予防及び／
又は抑制効果が高い栄養組成物が望まれている。本発明
は、栄養学的に優れ、且つ下痢の発生を予防及び／又は
抑制する蛋白質及び栄養組成物を提供することを課題と
する。

【０００６】

【課題を解決するための手段】本発明者らは上述した状
況に鑑み、栄養学的に優れ且つ下痢の発生を予防或いは
抑制する物質及び栄養組成物について鋭意探索を進めた
結果、大豆蛋白質をプロテアーゼ処理し、その分解物を
分子量分画することによって得られた蛋白質及びこれを
配合した栄養組成物が栄養学的に優れ、且つ下痢を強く
予防及び／又は抑制することをを見出した。

【０００７】近年、栄養剤の蛋白質源は循環器系疾患、
慢性疾患等の立場から、動物性蛋白質と植物性蛋白質の
配合比率に注意がはらわれ、バランス良く使用されてい
る（特開平４−１５２８６１号）。このような栄養剤に
大豆蛋白質配合により下痢防止の効果を期待するために
は、栄養剤の蛋白質とほぼ同量の大豆蛋白質を添加しな
ければならず、従っておのずと栄養組成物の蛋白質源は
大豆蛋白のみを使用せざるを得なくなる。しかし、本発
明の蛋白質は実施例のように栄養剤の蛋白質の１／５〜
１／８で効果を示す。従って、本発明蛋白質は下痢抑制
を目的として栄養剤に添加する場合、添加量を大豆蛋白
質に比較して大幅に軽減することができ、他の動物性蛋
白質、例えばカゼイン等の配合が可能となり、又、通常
の栄養剤に下痢発生の抑制を目的として大豆蛋白質を添
加した時の著しい高窒素化を防止できる。さらに、この
蛋白質のアミノ酸組成は原料である大豆蛋白質とほぼ同
様であり、窒素源として他の蛋白質やアミノ酸混合物に
配合しても大豆蛋白質の栄養効果を損なわず添加でき、
添加による栄養学的不利益もない。又、単独で窒素源と
して使用することもでき、さらに、風味上も何の問題も
生じない。さらに従来の蛋白質の低分子化により下痢の
発生を抑制する栄養組成物とは全く違う、新しいタイプ
の下痢の発生を予防及び／又は抑制する蛋白質、及びそ
れを含む栄養組成物である。

【０００８】本発明蛋白質は、良質な蛋白源である分離
大豆蛋白、粉末豆乳、豆乳及びそのホエー等を用い、常
法に従い例えば酸による加水分解あるいは蛋白質分解酵
素による分解等により得ることができるが、蛋白質分解
酵素による分解が処理上から好ましい。蛋白質分解酵素
としては、例えばパンクレアチン、キモシン、トリプシ
ン、キモトリプシン、カテプシン、パパイン、ブロメラ
イン等を挙げることができるが、パンクレアチンが特に
好ましい。得られた加水分解物を膜或いは濾過等の常法
を用いて分子量６，０００以上の画分を分画することに
より、本発明蛋白質を得ることができる。得られた本発
明蛋白質に含まれる必須アミノ酸の組成を表２に示す。

【０００９】

【表２】

【００１０】本発明蛋白質を配合した栄養組成物は、本
発明蛋白質以外の窒素源と併用できる。例えば栄養効果
に優れた乳蛋白質、大豆蛋白質、卵蛋白質等又はこれら
の分解物、及び脂肪族アミノ酸、オキシアミノ酸、含硫
アミノ酸、芳香族アミノ酸などの中性、酸性、及び塩基
性アミノ酸が挙げられ、好ましくは消化・吸収がよく良
質である乳蛋白質及び分離大豆蛋白質を用いる。又、本
発明の栄養剤を構成する脂質としては大豆油、サフラワ
ー油等通常の食用油脂が挙げられ、糖質としては浸透圧
を上げない特徴を有するデキストリン等が挙げられる。
その他ミネラルとしてナトリウム、カリウム、カルシウ
ム、マグネシウム、リン、塩素、鉄分、亜鉛、銅、マン
ガン、ヨウ素等が、ビタミンとしてＡ、Ｄ、Ｅ、Ｋ等の
脂溶性ビタミンやＢ₁ 、Ｂ₂ 、Ｂ₆ 、Ｂ₁₂、Ｃ、パント
テン酸、ナイアシン、ビオチン、葉酸等の水溶性ビタミ
ンが配合される。本発明における栄養組成物とは上述し
た成分を栄養学的にバランス良く配合したものであり、
用時溶解できる粉末状或いは液状で状況に応じて経口又
は経管で処方することができる。本発明蛋白質は、栄養
組成物中の全窒素に対し５〜５０％の割合で配合するこ
とが好ましい。５％以下だと下痢抑制効果が得られな
く、５０％を越えると吸収性が低下する。特に好ましく
は１０〜２０％が良い。

【００１１】以下に、本発明の実施例を示す。しかし、
これは単に例示するのみであり、これにより本発明は何
ら限定されるものではない。

【００１２】

【実施例１】本発明蛋白質の調製 市販大豆蛋白質（ＳＵＰＲＯ １５００、フジピュリナ
プロテイン社製）を用いて以下の方法により分子量約
６，０００以上であり、且つ下痢の発生を予防及び／又
は抑制する効果を有する蛋白質を調製した。即ち、分離
大豆蛋白質１００ｇを７．５リットルの０．２Ｍリン酸
緩衝液、ｐＨ８．０中に分散させた後、腐敗防止のため
アジ化ナトリウム（和光純薬社製）１．５ｇを加えて３
７℃で１時間攪拌保持した。つづいてこれにパンクレア
チン（Ｐ−７５４５、シグマ社製)５００ｍｇを加え３
７℃で７時間酵素加水分解した。この加水分解液を３０
分間沸騰水浴中に置き酵素を失活させたのち冷却した。
冷却液は分画分子量能力６，０００の限外濾過膜（ラボ
モジュール ＡＩＰ−１０１０、旭化成社製）を通し濃
縮した。この濃縮液を凍結乾燥し、分子量約６，０００
以上の高分子画分１８．５ｇを得た。本画分のゲル濾過
チャートを図１に示す。尚、このゲル濾過は以下の条件
で行った。 −ゲル濾過条件− ＨＰＬＣ装置：ＳＣＬ−６Ｂ（島津製作所製） カラム：ＴＳＫ−Ｇｅｌ Ｇ３０００ＰＷ ０．７５×
６０ｃｍ (トーソー社製) 移動層：１Ｍ リン酸緩衝液 ＋ ０．２Ｍ ＮａＣｌ
（ｐＨ７．０） 流 量：０．４ｍｌ／ｍｉｎ 検出器：ＵＶ ２８０ｎｍ

【００１３】この蛋白質を０．１％ β−メルカプトエ
タノール・濃塩酸混液で１１０℃、約２０時間で加水分
解し、日立高速アミノ酸分析計Ｌ８５００型を用いてア
ミノ酸組成を分析した。分析結果は表３に示す結果であ
った。このアミノ酸組成は、原料とした大豆蛋白質のア
ミノ酸組成とほぼ同一であった。又この蛋白質は、水に
容易に分散し、異味、異臭を全く感じさせないものであ
った。

【００１４】

【表３】

【００１５】

【実施例２】本発明蛋白質を含む液状経腸栄養剤の調製 実施例１で調製した蛋白質を用いて、下記の表４の配合
組成の液状経腸栄養剤５０リットルを常法に従い調製し
た。尚、栄養剤中の全窒素源に対する本発明蛋白質の比
率は１２．０％であった。

【００１６】

【表４】

【００１７】

【実施例３】本発明蛋白質を含む粉末状経腸栄養剤の調製 実施例１で調製した本発明組成物を用いて、下記の表５
に示す粉末状経腸栄養剤３０ｋｇを常法に従い調製し
た。尚、栄養剤中の全窒素源に対する本発明蛋白質の比
率は１８．５％であった。

【００１８】

【表５】

【００１９】

【発明の効果】以下に本発明蛋白質を用いた試験例を示
し、本発明の効果を説明する。

【００２０】試験例１：小腸切除ラットに対する本発明
栄養組成物の効果 本発明蛋白質を配合した栄養組成物の効果を試験した。
消化管術後の一般的なモデルとして、Ｗｉｓｔａｒ系雄
ラット（体重２００ｇ程度) を一晩絶食させ、全身麻酔
下で開腹し、小腸の約６０％を切除してさらに十二指腸
内にカテーテルを留置した小腸切除ラットを作製した。
このラットに対して、１ｋｃａｌ／ｍｌの濃度の試験栄
養組成物を、あらかじめ予備実験から設定した下痢誘発
条件、即ち投与初日のみ１．０ｋｃａｌ／時、２日目以
降は３．０ｋｃａｌ／時の投与速度で一日当たり１１時
間ずつ連続投与で５日間投与して便性に及ぼす効果を試
験した。便性は、便なし、正常便、軟便、泥状便及び水
様便の５段階で評価し、泥状便及び水様便を下痢便とし
た。試験に用いた経腸投与用栄養組成物の１００ｋｃａ
ｌ／１００ｍｌにおける組成を表６に示す。栄養組成物
（Ａ）は本発明の実施例２の組成物であり、本発明蛋白
質以外の窒素源として乳蛋白質のみを用いた。栄養組成
物（Ｂ）は対照として調製したもので、窒素源は乳蛋白
質のみであり、大豆蛋白質加水分解物由来の本発明蛋白
質は添加されていない。又、栄養組成物（Ｃ）は大豆蛋
白質加水分解物由来で分子量６，０００以下の画分を配
合した。尚、各試験栄養組成物投与のラット匹数は各々
１８匹とした。

【００２１】

【表６】

【００２２】各試験の経腸栄養組成物投与時における便
性状の経日的変化を図２に示した。大豆蛋白質加水分解
物由来の本発明蛋白質を配合した栄養組成物（Ａ）は、
本発明蛋白質を配合していない栄養組成物（Ｂ）に比較
して投与期間中の下痢の発生を有意に抑制し、本発明蛋
白質及びこれを配合した栄養組成物の有効性が確認され
た。又、大豆蛋白質加水分解物の分子量６，０００以下
の画分を配合した栄養組成物（Ｃ）と比較して、投与期
間中の下痢の発生を有意に抑制した。即ちこれは、単に
大豆蛋白質加水分解物を配合すれば良いということでは
なく、分子量６，０００以上の蛋白質に下痢を抑制する
効果があることを意味している。尚、実施例３の粉末状
栄養組成物も同様な効果を有することが確認された。

【００２３】以上の結果より、本発明の大豆蛋白質加水
分解物由来の蛋白質を配合した栄養組成物を投与するこ
とにより、下痢の発生を予防或いは抑制することが可能
となる。本発明蛋白質を配合した栄養組成物は、通常の
患者に対する栄養法施行として下痢の発生を予防及び抑
制する栄養剤として有用である。又、大豆蛋白質を下痢
抑制の目的で使用する場合に比べて投与量が少なくて済
むため、腎機能等の低下している患者にも安全に投与で
きる栄養組成物である。

【図面の簡単な説明】

【図１】本発明蛋白質のゲル濾過チャートを示す。

【図２】試験例１における各栄養組成物投与時の毎日の
各便性性状の発生比率を示す。

【符号の説明】

＊＊は危険率１％以下で有意差（ｐ＜０．０１）有り ＊ は危険率５％以下で有意差（ｐ＜０．０５）有り

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｃ１２Ｐ 21/06 9282−4Ｂ // Ｃ０７Ｋ 14/415 8318−4Ｈ

Claims (6)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 大豆蛋白質をプロテアーゼにより加水分
   解し、分子量６，０００以上の蛋白質を分子量分画する
   ことによって得られる、下痢の発生を予防及び／又は抑
   制する蛋白質。
2. 【請求項２】 蛋白質に含まれる必須アミノ酸の組成が
   下記の比率である、請求項１記載の下痢の発生を予防及
   び／又は抑制する蛋白質。 【表１】
3. 【請求項３】 大豆蛋白質をプロテアーゼにより加水分
   解し、分子量６，０００以上の蛋白質を分子量分画する
   ことを特徴とする、下痢の発生を予防及び／又は抑制す
   る請求項１記載の蛋白質の製造方法。
4. 【請求項４】 プロテアーゼがパンクレアチンである、
   下痢の発生を予防及び／又は抑制する請求項３記載の蛋
   白質の製造方法。
5. 【請求項５】 請求項１記載の蛋白質を配合した栄養組
   成物。
6. 【請求項６】 請求項１記載の蛋白質を全窒素源に対し
   ５〜５０％配合することを特徴とする、請求項５記載の
   栄養組成物。