JPH0819399A - 尿素の定量方法および定量用組成物 - Google Patents
尿素の定量方法および定量用組成物Info
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- JPH0819399A JPH0819399A JP15715194A JP15715194A JPH0819399A JP H0819399 A JPH0819399 A JP H0819399A JP 15715194 A JP15715194 A JP 15715194A JP 15715194 A JP15715194 A JP 15715194A JP H0819399 A JPH0819399 A JP H0819399A
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Abstract
(57)【要約】
【目的】臨床検査分野における尿素の定量方法におい
て、試料中のアンモニアの影響を受けず、しかも現在の
汎用自動分析装置のほとんどに適用可能な測定波長をも
つ方法およびそれに用いられる組成物を提供すること。 【構成】下記の反応式にしたがって反応を行い、ＡＰＡ
ＤＨの変化量を４００〜４７０ｎｍの測定波長で測定す
ることにより、試料中の尿素の定量測定をする。 【化１】 ＡＰＡＤＨの代りに、還元型ピリジンアルデヒドアデニ
ンジヌクレオチド、還元型ピリジンアルデヒドヒポキサ
ンチンジヌクレオチドまたは還元型チオニコチンアミド
アデニンジヌクレオチドも使用可能である。また、上記
定量方法に使用する各薬剤から構成される尿素定量用組
成物に関する。
て、試料中のアンモニアの影響を受けず、しかも現在の
汎用自動分析装置のほとんどに適用可能な測定波長をも
つ方法およびそれに用いられる組成物を提供すること。 【構成】下記の反応式にしたがって反応を行い、ＡＰＡ
ＤＨの変化量を４００〜４７０ｎｍの測定波長で測定す
ることにより、試料中の尿素の定量測定をする。 【化１】 ＡＰＡＤＨの代りに、還元型ピリジンアルデヒドアデニ
ンジヌクレオチド、還元型ピリジンアルデヒドヒポキサ
ンチンジヌクレオチドまたは還元型チオニコチンアミド
アデニンジヌクレオチドも使用可能である。また、上記
定量方法に使用する各薬剤から構成される尿素定量用組
成物に関する。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は臨床検査分野における尿
素の定量方法および尿素定量用組成物に関する。
素の定量方法および尿素定量用組成物に関する。
【０００２】
【従来の技術】尿素は主として肝臓でオルニチン回路に
より合成され、血流中に入って腎糸球体から尿中に排泄
される。したがって、血清等の生体試料中の尿素を測定
することは、腎臓や肝臓の機能検査として重要である。
より合成され、血流中に入って腎糸球体から尿中に排泄
される。したがって、血清等の生体試料中の尿素を測定
することは、腎臓や肝臓の機能検査として重要である。
【０００３】従来尿素の測定法としては、尿素との化学
反応を利用するジアセチルモノオキシム法が広く利用さ
れてきた。しかし、この方法はアンモニアの影響を受け
ないという利点がある反面、タンパク質、アラントイ
ン、シトルリン等による妨害があることや、発色反応に
長時間を要すること、Ｓ字状検量線のために正確性に難
点があること等の問題があり、また、自動分析装置への
導入も困難であった。
反応を利用するジアセチルモノオキシム法が広く利用さ
れてきた。しかし、この方法はアンモニアの影響を受け
ないという利点がある反面、タンパク質、アラントイ
ン、シトルリン等による妨害があることや、発色反応に
長時間を要すること、Ｓ字状検量線のために正確性に難
点があること等の問題があり、また、自動分析装置への
導入も困難であった。
【０００４】他の方法としては、尿素を特異的に加水分
解するウレアーゼを用いてアンモニアを生成・定量する
方法があるが（インドフェノール法およびグルタミン酸
脱水素酵素法）、いずれも前処理でアンモニアを除去す
るか検体ブランクを必要とするという欠点があり、特に
アンモニア濃度の高い生体試料の場合には正確な結果が
得られないという問題がある。
解するウレアーゼを用いてアンモニアを生成・定量する
方法があるが（インドフェノール法およびグルタミン酸
脱水素酵素法）、いずれも前処理でアンモニアを除去す
るか検体ブランクを必要とするという欠点があり、特に
アンモニア濃度の高い生体試料の場合には正確な結果が
得られないという問題がある。
【０００５】その後、尿素アミドリアーゼを作用させる
方法がアンモニアの影響のない酵素法として開発された
（特公平３−３２３６０号）。これは尿素アミドリアー
ゼ、ピルビン酸キナーゼ、ピルビン酸オキシダーゼを作
用させて、生成する過酸化水素を定量する方法である
が、ピルビン酸オキシダーゼの基質である反応液中の溶
存酸素の不足から、尿素の定量範囲が狭められるという
問題が生じた。さらにこの系列の定量方法として、ピル
ビン酸オキシダーゼを用いずに乳酸デヒドロゲナーゼを
用いる方法が提示された（特開平３−１２７９９８
号）。これは、尿素アミドリアーゼおよびピルビン酸キ
ナーゼの作用により生成するピルビン酸に、還元型ニコ
チンアミドアデニンジヌクレオチド（ＮＡＤＨ）を加え
て乳酸デヒドロゲナーゼを作用させ、ＮＡＤＨの変化量
を測定して尿素の定量をするというものであるが、測定
波長が３５０〜３９０ｎｍという限られた範囲であっ
て、現在使用されいる自動分析装置ではごく限られた機
種でしか適用できないという問題がある。
方法がアンモニアの影響のない酵素法として開発された
（特公平３−３２３６０号）。これは尿素アミドリアー
ゼ、ピルビン酸キナーゼ、ピルビン酸オキシダーゼを作
用させて、生成する過酸化水素を定量する方法である
が、ピルビン酸オキシダーゼの基質である反応液中の溶
存酸素の不足から、尿素の定量範囲が狭められるという
問題が生じた。さらにこの系列の定量方法として、ピル
ビン酸オキシダーゼを用いずに乳酸デヒドロゲナーゼを
用いる方法が提示された（特開平３−１２７９９８
号）。これは、尿素アミドリアーゼおよびピルビン酸キ
ナーゼの作用により生成するピルビン酸に、還元型ニコ
チンアミドアデニンジヌクレオチド（ＮＡＤＨ）を加え
て乳酸デヒドロゲナーゼを作用させ、ＮＡＤＨの変化量
を測定して尿素の定量をするというものであるが、測定
波長が３５０〜３９０ｎｍという限られた範囲であっ
て、現在使用されいる自動分析装置ではごく限られた機
種でしか適用できないという問題がある。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】本発明は上記状況に対
処してなされたもので、臨床検査分野における尿素の定
量方法において、試料中のアンモニアの影響を受けず、
しかも現在の汎用自動分析装置のほとんどに適用可能な
測定波長をもつ方法を提供することおよびそれに用いら
れる組成物を提供することを目的とする。
処してなされたもので、臨床検査分野における尿素の定
量方法において、試料中のアンモニアの影響を受けず、
しかも現在の汎用自動分析装置のほとんどに適用可能な
測定波長をもつ方法を提供することおよびそれに用いら
れる組成物を提供することを目的とする。
【０００７】
【課題を解決するための手段】すなわち本発明は尿素の
定量方法に関するもので、被検検体に、尿素アミドリア
ーゼ（ＵＲＬ）、アデノシン三リン酸（ＡＴＰ）、炭酸
水素イオン、金属イオン、フォスフォエノールピルビン
酸（ＰＥＰ）、ピルビン酸キナーゼ（ＰＫ）、乳酸デヒ
ドロゲナーゼ（ＬＤＨ）および以下の補酵素群から選ば
れた１種 (1) 還元型アセチルピリジンアデニンジヌクレオチド
（ＡＰＡＤＨ） (2) 還元型ピリジンアルデヒドアデニンジヌクレオチド (3) 還元型ピリジンアルデヒドヒポキサンチンジヌクレ
オチド (4) 還元型チオニコチンアミドアデニンジヌクレオチド を含有する試薬を作用させ、反応によって変化する上記
補酵素群から選ばれた１種の量を４００〜４７０ｎｍの
測定波長で測定することを特徴とする。
定量方法に関するもので、被検検体に、尿素アミドリア
ーゼ（ＵＲＬ）、アデノシン三リン酸（ＡＴＰ）、炭酸
水素イオン、金属イオン、フォスフォエノールピルビン
酸（ＰＥＰ）、ピルビン酸キナーゼ（ＰＫ）、乳酸デヒ
ドロゲナーゼ（ＬＤＨ）および以下の補酵素群から選ば
れた１種 (1) 還元型アセチルピリジンアデニンジヌクレオチド
（ＡＰＡＤＨ） (2) 還元型ピリジンアルデヒドアデニンジヌクレオチド (3) 還元型ピリジンアルデヒドヒポキサンチンジヌクレ
オチド (4) 還元型チオニコチンアミドアデニンジヌクレオチド を含有する試薬を作用させ、反応によって変化する上記
補酵素群から選ばれた１種の量を４００〜４７０ｎｍの
測定波長で測定することを特徴とする。
【０００８】さらに本発明は、尿素定量用組成物に関す
るものであって、尿素アミドリアーゼ（ＵＲＬ）、炭酸
水素イオン、金属イオン、ピルビン酸キナーゼ（Ｐ
Ｋ）、フォスフォエノールピルビン酸（ＰＥＰ）、ＡＴ
Ｐ、乳酸デヒドロゲナーゼ（ＬＤＨ）および以下の補酵
素群から選ばれた１種 (1) 還元型アセチルピリジンアデニンジヌクレオチド
（ＡＰＡＤＨ） (2) 還元型ピリジンアルデヒドアデニンジヌクレオチド (3) 還元型ピリジンアルデヒドヒポキサンチンジヌクレ
オチド (4) 還元型チオニコチンアミドアデニンジヌクレオチド から構成されることを特徴とする。
るものであって、尿素アミドリアーゼ（ＵＲＬ）、炭酸
水素イオン、金属イオン、ピルビン酸キナーゼ（Ｐ
Ｋ）、フォスフォエノールピルビン酸（ＰＥＰ）、ＡＴ
Ｐ、乳酸デヒドロゲナーゼ（ＬＤＨ）および以下の補酵
素群から選ばれた１種 (1) 還元型アセチルピリジンアデニンジヌクレオチド
（ＡＰＡＤＨ） (2) 還元型ピリジンアルデヒドアデニンジヌクレオチド (3) 還元型ピリジンアルデヒドヒポキサンチンジヌクレ
オチド (4) 還元型チオニコチンアミドアデニンジヌクレオチド から構成されることを特徴とする。
【０００９】試薬中に含まれる酵素の使用量について
は、ＵＲＬは終濃度０．１〜１０Ｕ／ｍｌ、ＰＫは０．
５〜２０Ｕ／ｍｌ、ＬＤＨは０．５〜２０Ｕ／ｍｌが好
ましい。ＡＴＰやＰＥＰは終濃度０．２〜５ｍＭが好ま
しく、ＡＰＡＤＨ等の補酵素類は終濃度０．５〜５ｍＭ
が好ましい。また、金属イオンの終濃度は１〜５０ｍＭ
が好ましい。
は、ＵＲＬは終濃度０．１〜１０Ｕ／ｍｌ、ＰＫは０．
５〜２０Ｕ／ｍｌ、ＬＤＨは０．５〜２０Ｕ／ｍｌが好
ましい。ＡＴＰやＰＥＰは終濃度０．２〜５ｍＭが好ま
しく、ＡＰＡＤＨ等の補酵素類は終濃度０．５〜５ｍＭ
が好ましい。また、金属イオンの終濃度は１〜５０ｍＭ
が好ましい。
【００１０】本発明に用いられる緩衝剤は特に限定され
ないが、トリス緩衝剤やグッド緩衝剤が好ましく、ｐＨ
は６．５〜８．５が好ましい。自動分析装置によって例
えば終末法により測定を行うときは、ＵＲＬによる酵素
反応開始前と反応５分後の補酵素類の吸光度変化量を測
定することが好ましい。
ないが、トリス緩衝剤やグッド緩衝剤が好ましく、ｐＨ
は６．５〜８．５が好ましい。自動分析装置によって例
えば終末法により測定を行うときは、ＵＲＬによる酵素
反応開始前と反応５分後の補酵素類の吸光度変化量を測
定することが好ましい。
【００１１】本発明の定量用組成物は試薬全部を１個の
ユニットとして含有してもよいし、試薬成分を分割して
２個以上のユニットとしてもよい。いずれにしても使用
に際して反応試薬中に含まれる各成分の終濃度が上記の
範囲内になるように、組成物を構成することが好まし
い。
ユニットとして含有してもよいし、試薬成分を分割して
２個以上のユニットとしてもよい。いずれにしても使用
に際して反応試薬中に含まれる各成分の終濃度が上記の
範囲内になるように、組成物を構成することが好まし
い。
【００１２】本発明の定量方法で使用可能な自動分析装
置は、測定波長として４００〜４７０ｎｍの範囲のいず
れかが設定されているものであり、現在わが国で使用さ
れている機種のほとんどがこれに該当する。
置は、測定波長として４００〜４７０ｎｍの範囲のいず
れかが設定されているものであり、現在わが国で使用さ
れている機種のほとんどがこれに該当する。
【００１３】
【作用】本発明の尿素の定量方法は、次の反応式に基づ
く。
く。
【００１４】
【化１】
【００１５】すなわち、被検検体中の尿素に、炭酸水素
イオンおよび金属イオンの存在下、アデノシン三リン酸
（ＡＴＰ）と共に尿素アミドリアーゼ（ＵＲＬ）を作用
させると、アデノシン二リン酸（ＡＤＰ）が生成する。
この生成したＡＤＰに金属イオンの存在下フォスフォエ
ノールピルビン酸（ＰＥＰ）とピルビン酸キナーゼを作
用させると、ピルビン酸が生成する。次に生成したピル
ビン酸に乳酸デヒドロゲナーゼ（ＬＤＨ）と還元型アセ
チルピリジンアデニンジヌクレオチド（ＡＰＡＤＨ）等
の補酵素類を作用させると、反応が右側に進行して上記
補酵素類が消費される。この補酵素類の変化量を測定す
ることによって尿素の定量が行われる。
イオンおよび金属イオンの存在下、アデノシン三リン酸
（ＡＴＰ）と共に尿素アミドリアーゼ（ＵＲＬ）を作用
させると、アデノシン二リン酸（ＡＤＰ）が生成する。
この生成したＡＤＰに金属イオンの存在下フォスフォエ
ノールピルビン酸（ＰＥＰ）とピルビン酸キナーゼを作
用させると、ピルビン酸が生成する。次に生成したピル
ビン酸に乳酸デヒドロゲナーゼ（ＬＤＨ）と還元型アセ
チルピリジンアデニンジヌクレオチド（ＡＰＡＤＨ）等
の補酵素類を作用させると、反応が右側に進行して上記
補酵素類が消費される。この補酵素類の変化量を測定す
ることによって尿素の定量が行われる。
【００１６】ＡＰＡＤＨ等の補酵素類の変化量の測定は
４００〜４７０ｎｍの測定波長で吸光度測定することに
より行われる。この波長域は現在わが国で使用されてい
る殆どの自動分析装置に設定されている固定波長を含む
ため、殆どの機種で適用できるという利点がある。本発
明の尿素の定量方法は、血液や尿中の尿素を測定するこ
とが可能であり、その他にも種々の試料中の尿素の定量
が可能である。
４００〜４７０ｎｍの測定波長で吸光度測定することに
より行われる。この波長域は現在わが国で使用されてい
る殆どの自動分析装置に設定されている固定波長を含む
ため、殆どの機種で適用できるという利点がある。本発
明の尿素の定量方法は、血液や尿中の尿素を測定するこ
とが可能であり、その他にも種々の試料中の尿素の定量
が可能である。
【００１７】
実施例１ 下記の処方にしたがって第１試薬および第２試薬を調製
した。
した。
【００１８】第１試薬 グッド緩衝剤（ＢＥＳ） pH7.5 ５０ｍＭ ピルビン酸キナーゼ ５Ｕ／ｍｌ 乳酸デヒドロゲナーゼ ２０Ｕ／ｍｌ ＡＴＰ １．５ｍＭ フォスフォエノールピルビン酸 １．５ｍＭ ＡＰＡＤＨ １．７ｍＭ ＫＣｌ ５０ｍＭ ＭｇＳＯ4 １０ｍＭ
【００１９】第２試薬 グッド緩衝剤（ＢＥＳ） pH7.5 ５０ｍＭ 尿素アミドリアーゼ ２Ｕ／ｍｌ ＫＨＣＯ3 ５０ｍＭ
【００２０】第１試薬および第２試薬を日立製作所製自
動分析装置Ｈ７１５０形に組み込み、２点終末法によっ
て尿素の定量を行った。すなわち、第１試薬３２０μｌ
に尿素を含む試料３μｌを添加し、３７℃で５分間加温
した後、第２試薬８０μｌを加え、３７℃で５分間加温
し、次に試料盲検を対照として上記自動装置の固定波長
の一つである４０５ｎｍでの吸光度の変化量を測定し
た。測定ポイントは第２試薬添加直前と添加５分後の２
点である。
動分析装置Ｈ７１５０形に組み込み、２点終末法によっ
て尿素の定量を行った。すなわち、第１試薬３２０μｌ
に尿素を含む試料３μｌを添加し、３７℃で５分間加温
した後、第２試薬８０μｌを加え、３７℃で５分間加温
し、次に試料盲検を対照として上記自動装置の固定波長
の一つである４０５ｎｍでの吸光度の変化量を測定し
た。測定ポイントは第２試薬添加直前と添加５分後の２
点である。
【００２１】尿素試料には２８０ｍｇ／ｄｌに相当する
尿素（１００ｍＭ）を含有する生理食塩水を調製し、こ
れを生理食塩水で１０段階希釈したものを用いた。ま
た、試料盲検には尿素を含まない生理食塩水を用いて同
様の操作を行った。２点間の吸光度の変化量と試料中の
尿素濃度との関係から得られた検量線を図１に示す（図
中１の線）。
尿素（１００ｍＭ）を含有する生理食塩水を調製し、こ
れを生理食塩水で１０段階希釈したものを用いた。ま
た、試料盲検には尿素を含まない生理食塩水を用いて同
様の操作を行った。２点間の吸光度の変化量と試料中の
尿素濃度との関係から得られた検量線を図１に示す（図
中１の線）。
【００２２】また、同時再現性を確認するために、上記
測定操作にしたがって３０ｍｇ／ｍｌの尿素窒素に相当
する標準溶液および４８ｍｇ／ｍｌの尿素窒素を含む管
理血清を１０回測定した場合に得られた吸光度変化量の
最小値、最大値、平均値、ＣＶ値（％，標準偏差／平均
値×１００）を表１に示す。
測定操作にしたがって３０ｍｇ／ｍｌの尿素窒素に相当
する標準溶液および４８ｍｇ／ｍｌの尿素窒素を含む管
理血清を１０回測定した場合に得られた吸光度変化量の
最小値、最大値、平均値、ＣＶ値（％，標準偏差／平均
値×１００）を表１に示す。
【００２３】比較例１ 次に、乳酸デヒドロゲナーゼを用いずにピルビン酸オキ
シダーゼを用いる従来の方法にしたがって尿素の定量を
行った。下記の処方にしたがって第１試薬および第２試
薬を調製した。
シダーゼを用いる従来の方法にしたがって尿素の定量を
行った。下記の処方にしたがって第１試薬および第２試
薬を調製した。
【００２４】 第１試薬 グッド緩衝剤（ＢＥＳ） pH7.1 ５０ｍＭ ピルビン酸キナーゼ ５Ｕ／ｍｌ ピルビン酸オキシダーゼ ４Ｕ／ｍｌ Ｎ−エチル−Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−スルホプロピル）−ｍ−アニシジン （ＡＤＯＳ） １ｍＭ ＡＴＰ １．５ｍＭ フォスフォエノールピルビン酸 １．５ｍＭ チアミンピロリン酸（ＴＰＰ） ２ｍＭ ＫＨ2 ＰＯ4 ２ｍＭ ＭｇＣｌ2 ８ｍＭ
【００２５】第２試薬 グッド緩衝剤（ＢＥＳ） pH7.1 ５０ｍＭ 尿素アミドリアーゼ ２Ｕ／ｍｌ ペルオキシダーゼ ８Ｕ／ｍｌ ４−アミノアンチピリン（４−ＡＡＰ） ３ｍＭ ＫＨＣＯ3
【００２６】試料量と総試薬液量との割合を実施例１と
ほぼ同じにするために、試料３μｌに対し第１試薬液量
を２６６μｌ、第２試薬液量を１３３μｌとした。それ
以外は実施例１と同様の方法で尿素溶液の測定を行っ
た。２点間の吸光度の変化量と試料中の尿素濃度との関
係から得られた検量線を図１に示す（図中２の線）。
ほぼ同じにするために、試料３μｌに対し第１試薬液量
を２６６μｌ、第２試薬液量を１３３μｌとした。それ
以外は実施例１と同様の方法で尿素溶液の測定を行っ
た。２点間の吸光度の変化量と試料中の尿素濃度との関
係から得られた検量線を図１に示す（図中２の線）。
【００２７】また、同時再現性を確認するために、上記
測定操作にしたがって３０ｍｇ／ｍｌの尿素窒素に相当
する標準溶液および４８ｍｇ／ｍｌの尿素窒素を含む管
理血清を１０回測定した場合に得られた吸光度変化量の
最小値、最大値、平均値、ＣＶ値（％，標準偏差／平均
値×１００）を表１に示す。
測定操作にしたがって３０ｍｇ／ｍｌの尿素窒素に相当
する標準溶液および４８ｍｇ／ｍｌの尿素窒素を含む管
理血清を１０回測定した場合に得られた吸光度変化量の
最小値、最大値、平均値、ＣＶ値（％，標準偏差／平均
値×１００）を表１に示す。
【００２８】図１のデータから明らかなように、本発明
の方法により得られた検量線は広い範囲にわたって吸光
度の変化量と尿素濃度とが直線性を示していたのに対
し、比較例１においてはピルビン酸オキシダーゼの基質
である溶存酸素の不足から吸光度変化が頭打ちになり、
結果として定量範囲が狭くなる。一方、表１のデータか
ら同時再現性はいずれも良好であった。
の方法により得られた検量線は広い範囲にわたって吸光
度の変化量と尿素濃度とが直線性を示していたのに対
し、比較例１においてはピルビン酸オキシダーゼの基質
である溶存酸素の不足から吸光度変化が頭打ちになり、
結果として定量範囲が狭くなる。一方、表１のデータか
ら同時再現性はいずれも良好であった。
【００２９】
【表１】
【００３０】なお、上記実施例では、ＡＰＡＤＨを用い
たが、他の３種の補酵素についても同様に４００〜４７
０ｎｍの範囲の波長で測定することが可能であり、汎用
されているほとんどの自動測定装置に適用可能であっ
た。
たが、他の３種の補酵素についても同様に４００〜４７
０ｎｍの範囲の波長で測定することが可能であり、汎用
されているほとんどの自動測定装置に適用可能であっ
た。
【００３１】
【発明の効果】本発明の尿素の定量法は、アンモニアを
生成せしめるものではないので、試料中のアンモニアの
影響を被るという問題点がなく、また測定波長範囲が４
００〜４７０ｎｍであることから、汎用の自動測定装置
のほとんどに適用可能であるという利点をもっている。
さらに、本定量法は終末法による測定が可能であるの
で、測定精度が優れている。
生成せしめるものではないので、試料中のアンモニアの
影響を被るという問題点がなく、また測定波長範囲が４
００〜４７０ｎｍであることから、汎用の自動測定装置
のほとんどに適用可能であるという利点をもっている。
さらに、本定量法は終末法による測定が可能であるの
で、測定精度が優れている。
【図面の簡単な説明】
【図１】本発明の実施例で得た検量線と従来の尿素定量
法による比較例で得た検量線を示す図。
法による比較例で得た検量線を示す図。
１…本発明の実施例の検量線、２…比較例の検量線。
Claims (2)
- 【請求項１】 被検検体に、尿素アミドリアーゼ（ＵＲ
Ｌ）、アデノシン三リン酸（ＡＴＰ）、炭酸水素イオ
ン、金属イオン、フォスフォエノールピルビン酸（ＰＥ
Ｐ）、ピルビン酸キナーゼ（ＰＫ）、乳酸デヒドロゲナ
ーゼ（ＬＤＨ）および以下の補酵素群から選ばれた１種 (1) 還元型アセチルピリジンアデニンジヌクレオチド
（ＡＰＡＤＨ） (2) 還元型ピリジンアルデヒドアデニンジヌクレオチド (3) 還元型ピリジンアルデヒドヒポキサンチンジヌクレ
オチド (4) 還元型チオニコチンアミドアデニンジヌクレオチド を含有する試薬を作用させ、反応によって変化する上記
補酵素群から選ばれた１種の量を４００〜４７０ｎｍの
測定波長で測定することを特徴とする尿素の定量方法。 - 【請求項２】 尿素アミドリアーゼ（ＵＲＬ）、炭酸水
素イオン、金属イオン、ピルビン酸キナーゼ（ＰＫ）、
フォスフォエノールピルビン酸（ＰＥＰ）、ＡＴＰ、乳
酸デヒドロゲナーゼ（ＬＤＨ）および以下の補酵素群か
ら選ばれた１種 (1) 還元型アセチルピリジンアデニンジヌクレオチド
（ＡＰＡＤＨ） (2) 還元型ピリジンアルデヒドアデニンジヌクレオチド (3) 還元型ピリジンアルデヒドヒポキサンチンジヌクレ
オチド (4) 還元型チオニコチンアミドアデニンジヌクレオチド から構成されることを特徴とする尿素定量用組成物。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP15715194A JPH0819399A (ja) | 1994-07-08 | 1994-07-08 | 尿素の定量方法および定量用組成物 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP15715194A JPH0819399A (ja) | 1994-07-08 | 1994-07-08 | 尿素の定量方法および定量用組成物 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0819399A true JPH0819399A (ja) | 1996-01-23 |
Family
ID=15643297
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP15715194A Pending JPH0819399A (ja) | 1994-07-08 | 1994-07-08 | 尿素の定量方法および定量用組成物 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0819399A (ja) |
-
1994
- 1994-07-08 JP JP15715194A patent/JPH0819399A/ja active Pending
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