JPH08239322A

JPH08239322A - ピロリジノン誘導体を含有する医薬組成物

Info

Publication number: JPH08239322A
Application number: JP33637995A
Authority: JP
Inventors: Koichi Katsuyama; 浩一勝山; Masato Ariga; 正人有賀; Yukio Saito; 幸男斉藤; Shigeo Hatanaka; 繁男畑中; Kenichi Momose; 研一百瀬
Original assignee: Nisshin Seifun Group Inc
Current assignee: Nisshin Seifun Group Inc
Priority date: 1994-12-26
Filing date: 1995-12-25
Publication date: 1996-09-17
Anticipated expiration: 2015-12-25
Also published as: JP3828603B2

Abstract

(57)【要約】【課題】インターロイキン−１β産生抑制剤および腫
瘍壊死因子α遊離抑制剤である医薬組成物の提供。【解決手段】本医薬組成物は、次の一般式（Ｉ）【化１】〔式中、Ｒは非置換または低級アルコシキ基もしくはニ
トロ基で置換されたフェニル基、またはピリジル基を表
す〕で表されるピロリジノン誘導体またはその薬理学的
に許容される塩を含有してなる。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明はピロリジノン誘導体
を有効成分として含有するインターロイキン−１β（以
下、「ＩＬ−１β」という）産生抑制剤、および腫瘍壊
死因子α（以下、「ＴＮＦα」という）遊離抑制剤に関
する。

【０００２】

【従来の技術】ＩＬ−１βは主にマクロファージ、好中
球などの免疫担当細胞から産生される蛋白質で、免疫応
答の重要な因子である。さらには、炎症時においても中
心的な役割を果たす因子として、または造血、内分泌、
神経など多くの生体反応に関係する因子として知られて
いる。例えば近年、慢性関節リウマチなどの炎症性疾患
との関係が明確化されており、慢性関節リウマチ患者の
滑膜中にＩＬ−１βが検出され、また、関節液中のＩＬ
−１β濃度が局所の炎症所見と相関することも報告され
ている。

【０００３】また、下記の一般式（Ｉ）

【化２】〔式中、Ｒは非置換または低級アルコシキ基もしくはニ
トロ基で置換されたフェニル基、またはピリジル基を表
す〕で示されるピロリジノン誘導体は植物成長調節剤、
メタン醗酵促進剤および脳循環代謝改善剤等として知ら
れている（特開昭６１−２２９８０１号、特開昭６１−
２３０７９８号、特開平２−２２５４５８号等参照）
が、そのＩＬ−１β産生抑制作用、およびＴＮＦ遊離抑
制作用についてはこれまでに知られていない。

【０００４】

【発明が解決しようとする課題】現在、慢性関節リウマ
チなどの炎症性疾患の治療には、ステロイド剤および非
ステロイド系抗炎症剤が用いられている。ステロイド剤
は各種の炎症性疾患における諸症状を顕著に改善する
が、投与が長期化すると耐性化がおきること、消化器障
害、皮膚障害、腎炎などの、ときには重篤である副作用
が存在することが問題となっている。一方、非ステロイ
ド系抗炎症剤は炎症症状を一時的に抑制するが、炎症性
疾患を根本から治療するものではない。このような状況
においていくつかのＩＬ−１β産生抑制作用を有する化
合物が炎症性疾患の治療薬として提案されているが、充
分に満足できる化合物は得られていない。そこでＩＬ−
１βの産生を強力に抑制し、かつ安全性の高い化合物が
求められていた。

【０００５】

【課題を解決するための手段】本発明者らは鋭意研究の
結果、前述のピロリジノン誘導体が優れたＩＬ−１β産
生阻害作用、およびＴＮＦα遊離抑制作用を有してお
り、慢性関節リウマチ治療薬、敗血症治療薬として有用
なものであることを見出して本発明を完成させたのであ
る。

【０００６】すなわち本発明は、下記一般式（I）

【化３】〔式中、Ｒは非置換または低級アルコキシ基もしくはニ
トロ基で置換されたフェニル基、またはピリジル基を表
す〕で表されるピロリジノン誘導体またはその薬理学的
に許容される塩を有効成分として含有する、ＩＬ−１β
産生抑制剤、およびＴＮＦα遊離抑制剤に関するもので
あり、慢性関節リウマチ治療薬、敗血症治療薬として有
用である。

【０００７】前記一般式においてＲで示される低級アル
コシキ基で置換されたフェニル基において、低級アルコ
シキ基とは炭素数１〜４の直鎖または分枝鎖のアルキル
から誘導されるもの、例えばメトキシ基、エトキシ基、
ｎ−プロポキシ基、ｉ−プロポキシ基、ｎ−ブトキシ
基、ｉ−ブトキシ基、tert−ブトキシ基などが包含され
る。

【０００８】一般式（Ｉ）で示されるピロリジノン誘導
体として、例えば、以下に示される化合物が挙げられ
る。１−シンナモイル−２−ピロリジノン（以下、「化
合物１」という）、１−（ｏ−メトキシ−シンナモイ
ル）−２−ピロリジノン（以下、「化合物２」とい
う）、１−（ｍ−メトキシ−シンナモイル）−２−ピロ
リジノン（以下、「化合物３」という）、１−（ｐ−メ
トキシ−シンナモイル）−２−ピロリジノン（以下、
「化合物４」という）、１−（３,４−ジメトキシ−シ
ンナモイル）−２−ピロリジノン（以下、「化合物５」
という）、１−（３,４,５−トリシンナモイル）−２−
ピロリジノン（以下、「化合物６」という）、１−（ｏ
−ニトロ−シンナモイル）−２−ピロリジノン（以下、
「化合物７」という）、１−（ｍ−ニトロ−シンナモイ
ル）−２−ピロリジノン（以下、「化合物８」とい
う）、１−（ｐ−ニトロ−シンナモイル）−２−ピロリ
ジノン（以下、「化合物９」という）、１−（２,４−
ジニトロ−シンナモイル）−２−ピロリジノン「以下、
「化合物１０」という）、１−（２,４,６−トリニトロ
−シンナモイル）−２−ピロリジノン（以下、「化合物
１１」という）、１−（３−（２−ピリジル）−アクリ
ロイル）−２−ピロリジノン（以下、「化合物１２」と
いう）、１−（３−（３−ピリジル）−アクリロイル）
−２−ピロリジノン（以下、「化合物１３」という）、
１−（３−（４−ピリジル）−アクリロイル）−２−ピ
ロリジノン（以下、「化合物１４」という）。これらの
ピロリジノン誘導体の構造を以下に示す。

【０００９】

【表１】

【００１０】上記一般式（Ｉ）で示されるピロリジノン
誘導体は所望によって薬理学的に許容され得る酸との塩
に変換されたものとして用いることができ、これらの塩
を含有するＩＬ−１β産生抑制剤、およびＴＮＦα遊離
抑制剤も本発明に包含される。薬理学的に許容され得る
酸としては、例えば塩酸、硫酸、臭化水素酸、リン酸な
どの鉱酸との塩；メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン
酸、ｐ−トルエンスルホン酸などの有機スルホン酸；酢
酸、プロピオン酸、シュウ酸、コハク酸、マレイン酸、
フマール酸、乳酸、酒石酸、リンゴ酸、クエン酸などの
有機カルボン酸との塩などを挙げることができる。

【００１１】本発明のＩＬ−１β産生抑制作用、および
ＴＮＦα遊離抑制作用を有する一般式(Ｉ)で表されるピ
ロリジノン誘導体は、その種類に応じて各種方法により
製造できる。また、一般式(Ｉ)で表されるピロリジノン
誘導体の塩は通常の塩形成反応により製造することがで
きる。このピロリジノン誘導体は、優れたＩＬ−１β産
生抑制作用を有していること、しかも、低毒性であるこ
とから、慢性関節リウマチ、リウマチ様多発性関節炎、
敗血症、全身性エリテマトーデス、全身性強皮症、ベー
チェット病、結節性動脈周囲炎、潰瘍性大腸炎、活動性
慢性肝炎、糸球体腎炎、変形性関節炎、痛風、アテロー
ム硬化症、乾癬、アトピー性皮膚炎、骨粗鬆症などのＩ
Ｌ−１βが関与する疾患の予防または治療に有用であ
る。

【００１２】さらにこのピロリジノン誘導体はＴＮＦα
遊離抑制作用を有することにより、ＴＮＦαが病態の進
展に関与する疾患の予防または治療に有用である。これ
らの疾患には、例えば慢性関節リウマチ、リウマチ様多
発性関節炎、敗血症、アトピー性皮膚炎等の前記のＩＬ
−１βも関与する疾患、さらには後天性免疫不全症候群
（ＡＩＤＳ）等が挙げられる。

【００１３】このピロリジノン誘導体の有効な活性発現
のための投与量は、通常、成人一人当たり１日５mgから
６ｇであり、好ましくは、１０mgから３００mgである。
この化合物の投与方法としては、例えば、経口投与、静
脈内投与、皮下投与、筋肉内投与、直腸内投与、関節内
投与などが挙げられるが、経口投与、関節内投与および
静脈内投与が好ましい。このピロリジノン誘導体は、任
意慣用の製剤方法を用いて投与用に調製することができ
る。経口投与剤としては、例えば、錠剤、顆粒剤、粉末
剤、硬カプセル剤、軟カプセル剤、経口用液体製剤など
である。

【００１４】経口投与用のために用いる錠剤およびカプ
セル剤等は、結合剤、例えば、デキストリン、ヒドロキ
シプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセル
ロース、ポリビニルピロリドン、マクロゴールなど；賦
形剤、例えば、乳糖、トウモロコシ澱粉、リン酸カルシ
ウム、メタケイ酸アルミン酸マグネシウムなど；潤沢
剤、例えば、ステアリン酸カルシウム、タルクなど；崩
壊剤、例えば、カルボキシメチルセルロース、結晶セル
ロースなどのような慣用の成分を含有していてもよい。
また、これらの製剤はこの技術分野において周知の方法
でコーテイングしてもよい。

【００１５】経口用液体製剤は、水性または油性の懸濁
剤、乳剤、溶液、シロップ、エリキシル剤、その他であ
ってもよく、または、使用する前に水もしくは他の適当
なビヒクルで再溶解させる乾燥生成物であってもよい。
このような液体製剤は普通に用いられる添加剤、例え
ば、懸濁化剤、例えば、ソルビットシロップ、カルボキ
シメチルセルロース、ゼラチン、ヒドロキシエチルセル
ロース、ステアリン酸アルミニウムゲル、水素添加食用
油脂など；乳化剤、例えば、レシチン、モノオレイン酸
グリセリド、アラビアゴムなど；非水溶性ビヒクル、例
えば、パーム油、プロピレングリコール、エチルアルコ
ールなど；防腐剤、例えば、p-ヒドロキシ安息香エチ
ル、ソルビン酸などを含有していてもよい。非経口投与
用の剤型としては注射剤、坐剤などが考えられる。注射
剤は、必要によりｐＨ調製剤、緩衝剤、安定化剤、保存
剤、可溶化剤などを添加し常法により調製される。

【００１６】以下、実施例により本発明を具体的に説明
する。なお、本発明はこれらの実施例により限定される
ものではない。

【００１７】

【実施例】

実施例１（ＩＬ−１β産生抑制作用の測定）本発明のピロリジノン誘導体のＩＬ−１β産生抑制作用
を以下の方法に従い測定した。ＲＰＭＩ１６４０培地
（バイオウィッターカー社製）に、１０v/v％の胎児牛
血清、２ｍＭのグルタミン、５０μＭの２−メルカプト
エタノール、６０μｇ／mlのペニシリンおよび１００μ
ｇ／mlのストレプトマイシンを加えて混合し、これに、
ヒト末梢血由来のＴＨＰ−１細胞（ＡＴＣＣＴＩＢ２
０２）を加えて、懸濁させる。このＴＨＰ−１細胞の懸
濁液を３７℃にて、酸素９５％および二酸化炭素５％の
混合ガスの雰囲気下に維持し、継代培養する。この継代
培養した懸濁液の一部を、室温で１２００rpmで３分間
遠心分離し、継代したＴＨＰ−１細胞を回収する。

【００１８】次にＲＰＭＩ１６４０培地に２v/v％の胎
児牛血清、２ｍＭのグルタミン、５０μＭの２−メルカ
プトエタノール、６０μｇ／mlのペニシリンおよび１０
０μｇ／mlのストレプトマイシンを加えて混合し、これ
に、前記の継代培養し回収したＴＨＰ−１細胞を最終濃
度が３×１０⁶個／mlとなるように再懸濁させる。この
細胞再懸濁液を、０.５mlの容量ずつ２４ウェルの細胞
培養用プレートに分注する。次いで、本発明のピロリジ
ノン誘導体を特定の各濃度に溶解させたＤＭＳＯ溶液を
各ウェルに２.５μlずつ添加する。該プレートを酸素９
５％および二酸化炭素５％の混合ガスの雰囲気下で、３
７℃にて１時間培養する。次いで、１２−ｏ−テトラデ
カノイルホルボール−１３−アセテート（以下、「ＰＭ
Ａ」という）を最終濃度が２μｇ／mlとなるように、お
よびポリイノシン酸を最終濃度が２００μｇ／mlとなる
ように、それぞれ各ウェルに添加する。さらにこのプレ
ートを酸素９５％および二酸化炭素５％の混合ガスの雰
囲気下で、３７℃にて２４時間培養する。培養後、各ウ
ェルからギルソン社のピペットマンにて上澄み液を回収
し、上澄み液中のＩＬ−１β産生量をカイマン・ケミカ
ル社のエンザイムイムノアッセイキットで測定する。

【００１９】ピロリジノン誘導体の無添加時のＩＬ−１
β産生量を１００とし、ＩＬ−１β産生量を５０％抑制
する本発明の化合物の濃度をＩＣ₅₀とし、その結果を以
下にμＭ単位で示す。

【表２】

【００２０】実施例２（ＴＮＦα遊離抑制作用の測定）本発明のピロリジノン誘導体のＴＮＦα遊離抑制作用を
以下の方法に従い測定した。ＲＰＭＩ１６４０培地
（バイオウィッターカー社製）に、１０v/v％の胎児牛
血清、２ｍＭのグルタミン、５０μＭの２−メルカプト
エタノール、６０μｇ／mlのペニシリンおよび１００μ
ｇ／mlのストレプトマイシンを加えて混合し、これにヒ
ト末梢血由来のＴＨＰ−１細胞（ＡＴＣＣＴＩＢ２０
２）を加えて、懸濁させる。このＴＨＰ−１細胞の懸濁
液を３７℃にて、酸素９５％および二酸化炭素５％の混
合ガスの雰囲気下に維持し、継代培養する。この継代培
養した懸濁液の一部を、室温で１２００rpmで３分間遠
心分離し、継代培養したＴＨＰ−１細胞を回収する。

【００２１】次にＲＰＭＩ１６４０培地に２v/v％の胎
児牛血清、２ｍＭのグルタミン、５０μＭの２−メルカ
プトエタノール、６０μｇ／mlのペニシリンおよび１０
０μｇ／mlのストレプトマイシンを加えて混合し、これ
に、前記の継代培養し回収したＴＨＰ−１細胞を最終濃
度が３×１０⁶個／mlとなるように再懸濁させる。この
細胞再懸濁液を、０.５mlの容量ずつ２４ウェルの細胞
培養用プレートに分注し、３７℃にて１時間培養する。
次いで、本発明のピロリジノン誘導体を特定の各濃度に
溶解させたＤＭＳＯ溶液を各ウェルに２.５μlずつ添加
する。該プレートを酸素９５％および二酸化炭素５％の
混合ガスの雰囲気下で、３７℃にて１時間培養する。次
いで、ＰＭＡを最終濃度が２μｇ／mlとなるように、お
よび、ポリイノシン酸を最終濃度が２００μｇ／mlとな
るように、それぞれ各ウェルに添加する。さらにこのプ
レートを酸素９５％および二酸化炭素５％の混合ガスの
雰囲気下で、３７℃にて２４時間培養する。培養後、各
ウェルからギルソン社のピペットマンにて上澄み液を回
収し、上澄み液中のＴＮＦα遊離量をゼンザイム社のヒ
トＴＮＦαエライザキットを用いて測定する。

【００２２】ピロリジノン誘導体の無添加時のＴＮＦα
遊離量を１００とし、ＴＮＦα遊離量を５０％抑制する
本発明の化合物の濃度をＩＣ₅₀とし、その結果を以下に
μＭ単位で示す。

【表３】

【００２３】実施例３（細胞毒性の有無の検討）ピロリジノン誘導体の細胞毒性の有無を以下の方法に従
い検討した。ＲＰＭＩ１６４０培地（バイオウィッタ
ーカー社製）に、１０v/v％の胎児牛血清、２ｍＭのグ
ルタミン、５０μＭの２−メルカプトエタノール、６０
μｇ／mlのペニシリンおよび１００μｇ／mlのストレプ
トマイシンを加えて混合し、これにヒト末梢血由来のＴ
ＨＰ−１細胞（ＡＴＣＣＴＩＢ２０２）を加えて、懸
濁させる。このＴＨＰ−１細胞の懸濁液を３７℃にて、
酸素９５％および二酸化炭素５％の混合ガスの雰囲気下
に維持し、継代培養する。この継代培養した懸濁液の一
部を、室温で１２００rpmで３分間遠心分離し、継代培
養したＴＨＰ−１細胞を回収する。

【００２４】次にＲＰＭＩ１６４０培地に２v/v％の胎
児牛血清、２ｍＭのグルタミン、５０μＭの２−メルカ
プトエタノール、６０μｇ／mlのペニシリンおよび１０
０μｇ／mlのストレプトマイシンを加えて混合し、これ
に、前記の継代培養し回収したＴＨＰ−１細胞を最終濃
度が１×１０⁶個／mlとなるように再懸濁させる。この
細胞再懸濁液を、１mlの容量ずつ２４ウェルの細胞培養
用プレートに分注する。次いで本発明のピロリジノン誘
導体を特定の各濃度に溶解させたＤＭＳＯ溶液を各ウェ
ルに５μlずつ添加する。該プレートを酸素９５％およ
び二酸化炭素５％の混合ガスの雰囲気下、３７℃にて２
４時間培養する。培養後、各ウェルに１００μｌのアラ
マー・ブルー(Alamar Blue; バイオソース社製）を添加
し、さらに酸素９５％および二酸化炭素５％の混合ガス
の雰囲気下、３７℃にて３時間培養する。培養後、各ウ
ェルからギルソン社のピペットマンにて上澄み液を回収
し、上澄み液の５７０nmと６００nmの吸光度差を測定す
る。試験するピロリジノン誘導体を含まないときの５７
０nmと６００nmの吸光度差を基準とし、本発明のピロリ
ジノン誘導体を添加した際の該吸光度差が、有意に減少
したものを細胞毒性があるものとする。本試験によれば
５０μＭまでの濃度では本発明のピロリジノン誘導体に
細胞毒性は認められなかった。

【００２５】製剤例１（錠剤）錠剤１錠あたり下記の配合になるように製剤化を行なっ
た。化合物９２０mg けい酸マグネシウム２０mg 乳糖９８.５mg ヒドロキシプロピルセルロース７.５mg ステアリン酸マグネシウム１mg 水素添加植物硬化油３mg すなわち、化合物９、けい酸マグネシウム及び乳糖を混
合し、これをヒドロキシプロピルセルロースを溶解した
アルコール液で練合し、次いで適当な粒度に造粒し、乾
燥、整粒後さらにステアリン酸マグネシウム及び水素添
加植物硬化油を添加混合し均一な顆粒とした。次いでロ
ータリー式打錠機により直径７.０mm、重量１５０mgお
よび硬度６kgの錠剤を調製した。

【００２６】製剤例２（顆粒剤）化合物９１０mg 酸化マグネシウム４０mg りん酸水素カルシウム３８mg 乳糖１０mg ヒドロキシプロピルセルロース２０mg 上記処方例中ヒドロキシプロピルセルロースを除いた各
原料を混合した後、これにヒドロキシプロピルセルロー
スを含有するアルコール溶液を加えて練合し、押出造粒
機により造粒し、乾燥して顆粒を得た。この顆粒を整粒
して１２メッシュの篩を通過し、４８メッシュの篩上に
残留するものを顆粒剤とした。

【００２７】製剤例３（シロップ剤）化合物９ 1.000ｇ白糖 30.000ｇ７０w／v％Ｄ−ソルビトール 25.000ｇパラオキシ安息香酸エチル 0.030ｇパラオキシ安息香酸プロピル 0.015ｇ香味料 0.200ｇグリセリン 0.150ｇ９６％エタノール 0.500ｇ精製水適量全量 100ml 白糖、Ｄ−ソルビトール、パラオキシ安息香酸エチル、
パラオキシ安息香酸プロピル及び化合物９を精製水（温
水）６０ｇに溶解する。冷却後香味料を溶解したグリセ
リンおよび９６％エタノールの溶液を加える。次にこの
混合物に精製水を加えて１００mlにする。

【００２８】製剤例４（注射液）化合物１２の塩酸塩 10.0 mg 塩化ナトリウム 81.0 mg 炭酸水素ナトリウム 8.40mg 注射用水適量全量 10.0ml 炭酸水素ナトリウム、塩化ナトリウム及び化合物１２の
塩酸塩を注射用水に加えて溶解し、全量を１０.０mlと
し、注射液とした。

【００２９】製剤例５（坐剤）化合物９２ｇマクロゴール４０００２０ｇグリセリン７８ｇ化合物９をグリセリンに加えて溶解する。これに、マク
ロゴール４０００を加えて加温し溶解後、坐剤型に注入
して冷却固化し１個あたり１.５ｇの坐剤を製造する。

【００３０】

【効果】本発明のピロリジノン誘導体は、ＩＬ−１β産
生抑制作用およびＴＮＦα遊離抑制作用を有しており、
慢性関節リウマチ、敗血症などのＩＬ−１βおよび／ま
たはＴＮＦαが関与する疾患の治療薬として有用であ
る。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号庁内整理番号ＦＩ技術表示箇所Ａ６１Ｋ 31/44 ＡＣＶＡ６１Ｋ 31/44 ＡＣＶＡＤＺＡＤＺ // Ｃ０７Ｄ 207/27 Ｃ０７Ｄ 207/27 Ｚ 401/06 ２０７ 401/06 ２０７ (72)発明者畑中繁男埼玉県入間郡大井町鶴ヶ岡５丁目３番１号日清製粉株式会社医薬研究所内 (72)発明者百瀬研一東京都中央区日本橋小網町19番12号日清製粉株式会社内

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】一般式（Ｉ）【化１】〔式中、Ｒは非置換または低級アルコシキ基もしくはニ
トロ基で置換されたフェニル基、またはピリジル基を表
す〕で表されるピロリジノン誘導体またはその薬理学的
に許容される塩を有効成分として含有するインターロイ
キン−１β産生抑制剤および腫瘍壊死因子α遊離抑制剤
である医薬組成物。
【請求項２】慢性関節リウマチ治療薬である請求項１
記載の医薬組成物。
【請求項３】敗血症治療薬である請求項１記載の医薬
組成物。