JPH0830011B2 - 緑膿菌感染症ワクチンおよびその製造方法 - Google Patents
緑膿菌感染症ワクチンおよびその製造方法Info
- Publication number
- JPH0830011B2 JPH0830011B2 JP62157475A JP15747587A JPH0830011B2 JP H0830011 B2 JPH0830011 B2 JP H0830011B2 JP 62157475 A JP62157475 A JP 62157475A JP 15747587 A JP15747587 A JP 15747587A JP H0830011 B2 JPH0830011 B2 JP H0830011B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- flagella
- antigen
- threonine
- alanine
- isoleucine
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/12—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from bacteria
- C07K16/1203—Gram-negative bacteria
- C07K16/1214—Pseudomonadaceae (F)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/195—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria
- C07K14/21—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria from Pseudomonadaceae (F)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
- Y10S530/806—Antigenic peptides or proteins
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
- Y10S530/82—Proteins from microorganisms
- Y10S530/825—Bacteria
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Immunology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Public Health (AREA)
- Oncology (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Ultra Sonic Daignosis Equipment (AREA)
- Vessels, Lead-In Wires, Accessory Apparatuses For Cathode-Ray Tubes (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】 産業上の利用分野 本発明は緑膿菌（シユードモナス・アエルギノサ、ps
udomonas aeruginosa）感染症に有効なワクチンに関す
るものである。さらに詳しくは、本発明は、緑膿菌感染
症に有効な、能動免疫のための防御的緑膿菌鞭毛（Ｈ）
抗原を含有するワクチン、並びに、受動免疫のための免
疫グロブリンＧ含有製剤を提供するものである。
udomonas aeruginosa）感染症に有効なワクチンに関す
るものである。さらに詳しくは、本発明は、緑膿菌感染
症に有効な、能動免疫のための防御的緑膿菌鞭毛（Ｈ）
抗原を含有するワクチン、並びに、受動免疫のための免
疫グロブリンＧ含有製剤を提供するものである。
従来技術 緑膿菌は、主として火傷を負つた人々、嚢胞性線維症
患者または器質機能欠損患者、並びに腫瘍患者等の免疫
防御を損傷されている患者の院内感染に伴つてしばしば
見出される日和見感染性病原体である。シユードモナス
属による感染に対する抗生物質の効果は、耐性菌が出現
することによつて制限されており、緑膿菌感染症に対し
て有効な免疫学的手段の開発が試みられていた。
患者または器質機能欠損患者、並びに腫瘍患者等の免疫
防御を損傷されている患者の院内感染に伴つてしばしば
見出される日和見感染性病原体である。シユードモナス
属による感染に対する抗生物質の効果は、耐性菌が出現
することによつて制限されており、緑膿菌感染症に対し
て有効な免疫学的手段の開発が試みられていた。
感染の引き金となるのは種々の、Ｏ群抗原を産生する
菌株またはＨ−抗原を産生する菌株である。アンソーグ
（Ansorg,（Zbl.Bakt.Hyg.I.Aby.orig.）A242,228-238
（1978））によると、緑膿菌は、免疫螢光法によつて、
部分抗原類a0，a1，a2，a3，a4からなる複合体鞭毛
（Ｈ）抗原aと、単一の鞭毛（Ｈ）抗原bに分類すること
ができる。部分因子a0〜a4は独立の決定基であるので、
数個のＨ型を有する抗原パターンが得られる。Ｏ群とＨ
群とは自由な組み合わせを示す。
菌株またはＨ−抗原を産生する菌株である。アンソーグ
（Ansorg,（Zbl.Bakt.Hyg.I.Aby.orig.）A242,228-238
（1978））によると、緑膿菌は、免疫螢光法によつて、
部分抗原類a0，a1，a2，a3，a4からなる複合体鞭毛
（Ｈ）抗原aと、単一の鞭毛（Ｈ）抗原bに分類すること
ができる。部分因子a0〜a4は独立の決定基であるので、
数個のＨ型を有する抗原パターンが得られる。Ｏ群とＨ
群とは自由な組み合わせを示す。
緑膿菌培養物の調製に用いられた菌株、および生産さ
れた抗原類を下記の表１に示す。表１ 菌株 Ｈ−型 １ 170001 − ｂ Ｍ−２ − ｂ ２ 5142 − a0 ３ 5940 − a0，a2 ４ 5939 − a0，a3 ５ 5933 − a0，a1，a2 1210 − a0，a1，a2 16990 − a0，a1，a2 ６ 170018 − a0，a3，a4 振盪、ホモジネーシヨンおよび遠心分離によつて単離
された鞭毛抗原のフイラメント〔アイソーグ（R.Ansor
g）、シユミツト（W.Schmitt）メド・マイクロバイオロ
・イムノロ（Med.Microbiol.Immunol.）〕は鞭毛と鞭毛
フラクシヨンからなると共に、リポ多糖類（LPS）と栄
養培地由来の不純物とを伴つている。そのような製剤は
本来発熱性であり、ヒトに投与するには不適当である。
れた抗原類を下記の表１に示す。表１ 菌株 Ｈ−型 １ 170001 − ｂ Ｍ−２ − ｂ ２ 5142 − a0 ３ 5940 − a0，a2 ４ 5939 − a0，a3 ５ 5933 − a0，a1，a2 1210 − a0，a1，a2 16990 − a0，a1，a2 ６ 170018 − a0，a3，a4 振盪、ホモジネーシヨンおよび遠心分離によつて単離
された鞭毛抗原のフイラメント〔アイソーグ（R.Ansor
g）、シユミツト（W.Schmitt）メド・マイクロバイオロ
・イムノロ（Med.Microbiol.Immunol.）〕は鞭毛と鞭毛
フラクシヨンからなると共に、リポ多糖類（LPS）と栄
養培地由来の不純物とを伴つている。そのような製剤は
本来発熱性であり、ヒトに投与するには不適当である。
PCT特許出願公開WO86/03974には１つの精製工程によ
つて得られた、発熱物質不含の多分散形の未然の緑膿菌
鞭毛（Ｈ）抗原（FAG）の構造が記載されている。それ
らの抗原は、それぞれ、以下の単量体成分： ａ） アミノ酸類：アスパラギン酸またはアスパラギン
（Asp/Asn）、スレオニン（Thr）、セリン（Ser）、グ
リタミン酸またはグルタミン（Glu/Gln）、グリシン（G
ly）、アラニン（Ala）、バリン（Val）、イソロイシン
（Ile）、ロイシン（Leu）、チロシン（Tyr）、フェニ
ルアラニン（Phe）、リジン（Lys）、アルギニン（Ar
g）、および、場合によりトリプトファン（Trp）を含有
しており、 ｂ） Ｎ末端アミノ酸配列：アラニン−ロイシン−スレ
オニン−バリン−アスパラギン−スレオニン−アスパラ
ギン−イソロイシン−アラニン−を含有しており、 ｃ） 分子量が43,500〜53,050であって、 ｄ） プロリン（Pro）、メチオニン（Met）セミシステ
イン（1/2Cys）およびヒスチジンを含んでいない単量体
成分を含有している。
つて得られた、発熱物質不含の多分散形の未然の緑膿菌
鞭毛（Ｈ）抗原（FAG）の構造が記載されている。それ
らの抗原は、それぞれ、以下の単量体成分： ａ） アミノ酸類：アスパラギン酸またはアスパラギン
（Asp/Asn）、スレオニン（Thr）、セリン（Ser）、グ
リタミン酸またはグルタミン（Glu/Gln）、グリシン（G
ly）、アラニン（Ala）、バリン（Val）、イソロイシン
（Ile）、ロイシン（Leu）、チロシン（Tyr）、フェニ
ルアラニン（Phe）、リジン（Lys）、アルギニン（Ar
g）、および、場合によりトリプトファン（Trp）を含有
しており、 ｂ） Ｎ末端アミノ酸配列：アラニン−ロイシン−スレ
オニン−バリン−アスパラギン−スレオニン−アスパラ
ギン−イソロイシン−アラニン−を含有しており、 ｃ） 分子量が43,500〜53,050であって、 ｄ） プロリン（Pro）、メチオニン（Met）セミシステ
イン（1/2Cys）およびヒスチジンを含んでいない単量体
成分を含有している。
また、個々の型の鞭毛（Ｈ）抗原は、アミノ酸：アス
パラギン酸またはアスパラギン、スレオニン、セリン、
グルタミン酸またはグルタミン、グリシン、アラニン、
バリン、イソロイシン、ロイシン、チロシン、フエニル
アラニン、リジンおよびアルギニンをそれぞれある比率
で含有している単量体からなることを特徴とする。単量
体形鞭毛（Ｈ）抗原の上記の比率および分子量を表２に
示す。
パラギン酸またはアスパラギン、スレオニン、セリン、
グルタミン酸またはグルタミン、グリシン、アラニン、
バリン、イソロイシン、ロイシン、チロシン、フエニル
アラニン、リジンおよびアルギニンをそれぞれある比率
で含有している単量体からなることを特徴とする。単量
体形鞭毛（Ｈ）抗原の上記の比率および分子量を表２に
示す。
発明の構成および目的 多分散形の天然の緑膿菌鞭毛（Ｈ）抗原を得るため
に、PCT特許出願効果WO86/03974に従って最小培地中で
細胞培養を開始して増殖させた後、界面活性剤で処理し
て鞭毛（Ｈ）抗原を培養から分離した。この場合、界面
活性剤処理の前に細胞培養を壊し、剪断処理に付すか、
あるいは界面活性剤の存在下で剪断力を課してもよい。
界面活性剤を加えることにより細胞塊から抗原を分離し
易くなる。ついで、溶液中の抗原を分離する。
に、PCT特許出願効果WO86/03974に従って最小培地中で
細胞培養を開始して増殖させた後、界面活性剤で処理し
て鞭毛（Ｈ）抗原を培養から分離した。この場合、界面
活性剤処理の前に細胞培養を壊し、剪断処理に付すか、
あるいは界面活性剤の存在下で剪断力を課してもよい。
界面活性剤を加えることにより細胞塊から抗原を分離し
易くなる。ついで、溶液中の抗原を分離する。
次に、クロマトグラフイー精製法により、上記の如く
にして細胞塊から分離した抗原を、それに付着している
リポ多糖類、核酸、塩類、多糖類等の不純物から分離す
ることができる。さらに、残つている界面活性剤をカラ
ムクロマトグラフイーによる精製工程を経て除去する。
にして細胞塊から分離した抗原を、それに付着している
リポ多糖類、核酸、塩類、多糖類等の不純物から分離す
ることができる。さらに、残つている界面活性剤をカラ
ムクロマトグラフイーによる精製工程を経て除去する。
これまでは、これらの抗原が防御作用を有しているか
否かは知られていなかつた。しかし、本発明者らは、PC
T特許出願公開WO86/03974に記載されている全ての型の
鞭毛（Ｈ）抗原に、防御作用のあることを見い出した。
従つて、これを用いて一価または多価ワクチンを製造
し、利用することができる。これが本発明の目的であ
る。
否かは知られていなかつた。しかし、本発明者らは、PC
T特許出願公開WO86/03974に記載されている全ての型の
鞭毛（Ｈ）抗原に、防御作用のあることを見い出した。
従つて、これを用いて一価または多価ワクチンを製造
し、利用することができる。これが本発明の目的であ
る。
特に本発明は緑膿菌感染症、とりわけ火傷の危険性の
高い人々、例えば消防隊員や軍人等、並びに免疫抑制治
療を受けている人々において有効な緑膿菌感染症の免疫
予防法を得ることを目的とするものである。
高い人々、例えば消防隊員や軍人等、並びに免疫抑制治
療を受けている人々において有効な緑膿菌感染症の免疫
予防法を得ることを目的とするものである。
また本発明は、免疫グロブリンＧ含有製剤であつて、
緑膿菌感染症に対する受動免疫に適した製剤を提供する
ことを目的とするものである。
緑膿菌感染症に対する受動免疫に適した製剤を提供する
ことを目的とするものである。
本発明のワクチンは、血清型aおよびbの防御的鞭毛
（Ｈ）抗原であつて、それぞれ、以下の単量体成分： ａ） アミノ酸類：アスパラギン酸（Asp）、スレオニ
ン（Thr）、セリン（Ser）、グルタミン酸（Glu）、グ
リシン（Gly）、アラニン（Ala）、バリン（Val）、イ
ソロイシン（Ile）、ロイシン（Leu）、チロシン（Ty
r）、フエニルアラニン（Phe）、リジン（Lys）、アル
ギニン（Arg）、およびおそらくトリプトフアン（Trp）
およびメチオニン（Met）を含有しており、 ｂ） Ｎ末端アミノ酸配列：アラニン（Ala）−ロイシ
ン（Leu）−スレオニン（Thr）−バリン（Val）−アス
パラギン（Asn）−スレオニン（Thr）−アスパラギン
（Asn）−イソロイシン（lle）−アラニン（Ala）を含
有しており、 ｃ） 分子量が43,500〜53,050であって、 ｄ） プロリン、セミシステインおよびヒスチジンを含
んでいない単量体成分からなる鞭毛（Ｈ）抗原を含有し
ており、発熱成分を含有していないことを特徴としてい
る。
（Ｈ）抗原であつて、それぞれ、以下の単量体成分： ａ） アミノ酸類：アスパラギン酸（Asp）、スレオニ
ン（Thr）、セリン（Ser）、グルタミン酸（Glu）、グ
リシン（Gly）、アラニン（Ala）、バリン（Val）、イ
ソロイシン（Ile）、ロイシン（Leu）、チロシン（Ty
r）、フエニルアラニン（Phe）、リジン（Lys）、アル
ギニン（Arg）、およびおそらくトリプトフアン（Trp）
およびメチオニン（Met）を含有しており、 ｂ） Ｎ末端アミノ酸配列：アラニン（Ala）−ロイシ
ン（Leu）−スレオニン（Thr）−バリン（Val）−アス
パラギン（Asn）−スレオニン（Thr）−アスパラギン
（Asn）−イソロイシン（lle）−アラニン（Ala）を含
有しており、 ｃ） 分子量が43,500〜53,050であって、 ｄ） プロリン、セミシステインおよびヒスチジンを含
んでいない単量体成分からなる鞭毛（Ｈ）抗原を含有し
ており、発熱成分を含有していないことを特徴としてい
る。
さらに詳しくは、本発明のワクチンの構成成分である
６種類の特異的なＨ−血清型は下記の特徴を有する。
６種類の特異的なＨ−血清型は下記の特徴を有する。
Ｈ−血清型a0、a3、a4の鞭毛（Ｈ）抗原であって、そ
の単量体型はアミノ酸：アスパラギン酸、スレオニン、
セリン、グルタミン酸、グリシン、アラニン、バリン、
イソロイシン、ロイシン、チロシン、フエニルアラニ
ン、リジンおよびアルギニンを64:33:35:42:44:68:29:2
9:37:3:10:19:15の比率で含有しておりその分子量は43,
500である。
の単量体型はアミノ酸：アスパラギン酸、スレオニン、
セリン、グルタミン酸、グリシン、アラニン、バリン、
イソロイシン、ロイシン、チロシン、フエニルアラニ
ン、リジンおよびアルギニンを64:33:35:42:44:68:29:2
9:37:3:10:19:15の比率で含有しておりその分子量は43,
500である。
Ｈ−血清型a0、a3の鞭毛（Ｈ）抗原であつて、その単
量体型はアミノ酸：アスパラギン酸、スレオニン、セリ
ン、グルタミン酸、グリシン、アラニン、バリン、イソ
ロイシン、ロイシン、チロシン、フエニルアラニン、リ
ジンおよびアルギニンを69:35:38:44:47:73:30:30:60:
3:12:21:16の比率で含有しておりその分子量は46,700で
ある。
量体型はアミノ酸：アスパラギン酸、スレオニン、セリ
ン、グルタミン酸、グリシン、アラニン、バリン、イソ
ロイシン、ロイシン、チロシン、フエニルアラニン、リ
ジンおよびアルギニンを69:35:38:44:47:73:30:30:60:
3:12:21:16の比率で含有しておりその分子量は46,700で
ある。
Ｈ−血清型a0の鞭毛（Ｈ）抗原であつてその単量体型
はアミノ酸：アスパラギン酸、スレオニン、セリン、グ
ルタミン酸、グリシン、アラニン、バリン、イソロイシ
ン、ロイシン、チロシン、フエニルアラニン、リジンお
よびアルギニンを74:50:49:49:49:89:37:29:44:5:14:1
7:16の比率で含有しており、分子量は52,720である。
はアミノ酸：アスパラギン酸、スレオニン、セリン、グ
ルタミン酸、グリシン、アラニン、バリン、イソロイシ
ン、ロイシン、チロシン、フエニルアラニン、リジンお
よびアルギニンを74:50:49:49:49:89:37:29:44:5:14:1
7:16の比率で含有しており、分子量は52,720である。
Ｈ−血清型bの鞭毛（Ｈ）抗原であつて、その単量体
型はアミノ酸：アスパラギン酸、スレオニン、セリン、
グルタミン酸、グリシン、アラニン、バリン、イソロイ
シン、ロイシン、チロシン、フエニルアラニン、リジン
およびアルギニンを74:48:48:49:51:91:38:30:43:4:13:
18:18の比率で含有しておりその分子量は53,050であ
る。
型はアミノ酸：アスパラギン酸、スレオニン、セリン、
グルタミン酸、グリシン、アラニン、バリン、イソロイ
シン、ロイシン、チロシン、フエニルアラニン、リジン
およびアルギニンを74:48:48:49:51:91:38:30:43:4:13:
18:18の比率で含有しておりその分子量は53,050であ
る。
Ｈ−血清型a0、a1、a2の鞭毛（Ｈ）抗原であつて、そ
の単量体型はアミノ酸：アスパラギン酸、スレオニン、
セリン、グルタミン酸、グリシン、アラニン、バリン、
イソロイシン、ロイシン、チロシン、フエニルアラニ
ン、リジンおよびアルギニンを76:44:40:52:50:81:32:3
2:41:4:12:20:18の比率で含有しておりその分子量は51,
250である。
の単量体型はアミノ酸：アスパラギン酸、スレオニン、
セリン、グルタミン酸、グリシン、アラニン、バリン、
イソロイシン、ロイシン、チロシン、フエニルアラニ
ン、リジンおよびアルギニンを76:44:40:52:50:81:32:3
2:41:4:12:20:18の比率で含有しておりその分子量は51,
250である。
血清型a0、a2の鞭毛（Ｈ）抗原であつて、その単量体
型はアミノ酸：アスパラギン酸、スレオニン、セリン、
グルタミン酸、グリシン、アラニン、バリン、イソロイ
シン、ロイシン、チロシン、フエニルアラニン、リジン
およびアルギニンを68:41:37:46:44:73:29:29:37:3:10:
16:16の比率で含有しておりその分子量は45,900であ
る。
型はアミノ酸：アスパラギン酸、スレオニン、セリン、
グルタミン酸、グリシン、アラニン、バリン、イソロイ
シン、ロイシン、チロシン、フエニルアラニン、リジン
およびアルギニンを68:41:37:46:44:73:29:29:37:3:10:
16:16の比率で含有しておりその分子量は45,900であ
る。
本発明のワクチンの製造方法は、緑膿菌の培養物から
得、精製した鞭毛（Ｈ）抗原を滅菌過し、随意、Al
（OH）3等のアジユバント、並びに所望により、マーチ
オレート（merthiolate）等の保存剤等を加えることか
らなる。
得、精製した鞭毛（Ｈ）抗原を滅菌過し、随意、Al
（OH）3等のアジユバント、並びに所望により、マーチ
オレート（merthiolate）等の保存剤等を加えることか
らなる。
さらに本発明は、緑膿菌感染症の予防および治療に有
効な免疫グロブリン−Ｇ−含有製剤であつて、防御的鞭
毛（Ｈ）抗原によつて免疫されたヒト供与体または哺乳
類の血漿から得た鞭毛（Ｈ）抗体を含有することを特徴
とする製剤を提供するものである。
効な免疫グロブリン−Ｇ−含有製剤であつて、防御的鞭
毛（Ｈ）抗原によつて免疫されたヒト供与体または哺乳
類の血漿から得た鞭毛（Ｈ）抗体を含有することを特徴
とする製剤を提供するものである。
これらの鞭毛（Ｈ）抗体は、緑膿菌の能動運動を阻害
するとともに、該菌に対する食細胞作用および細胞内殺
菌作用を促進し得る。
するとともに、該菌に対する食細胞作用および細胞内殺
菌作用を促進し得る。
本発明の好ましい実施態様においては、防御的な鞭毛
（Ｈ）抗原によつて免疫されたヒト供与体または哺乳類
の血漿を硫酸アンモニウム等のタンパク沈降剤で処理
し、析出した免疫グロブリン−Ｇ−含有画分を溶解させ
た後、精製し（精製は、該溶液を単量体または重合体の
形の精製鞭毛抗原を共有結合させた担体媒質に通し、pH
を変化させるか、またはNH4SCNのようなカオトロピツク
試薬を用いることによつてゲルから鞭毛特異的抗体を溶
離することによつて都合よく行なえる）、これを生薬製
剤に製剤化することにより、緑膿菌感染症の予防および
治療に有効な免疫グロブリン−Ｇ−含有製剤を製造す
る。
（Ｈ）抗原によつて免疫されたヒト供与体または哺乳類
の血漿を硫酸アンモニウム等のタンパク沈降剤で処理
し、析出した免疫グロブリン−Ｇ−含有画分を溶解させ
た後、精製し（精製は、該溶液を単量体または重合体の
形の精製鞭毛抗原を共有結合させた担体媒質に通し、pH
を変化させるか、またはNH4SCNのようなカオトロピツク
試薬を用いることによつてゲルから鞭毛特異的抗体を溶
離することによつて都合よく行なえる）、これを生薬製
剤に製剤化することにより、緑膿菌感染症の予防および
治療に有効な免疫グロブリン−Ｇ−含有製剤を製造す
る。
以下、実施例を挙げ本発明をさらに詳しく説明する。
実施例１〜３はワクチンの製造法に関し、実施例４は免
疫グロブリン−Ｇ−含有製剤の製造に関する。
実施例１〜３はワクチンの製造法に関し、実施例４は免
疫グロブリン−Ｇ−含有製剤の製造に関する。
実施例１ 緑膿菌Ｍ−２鞭毛ワクチンの製造 緑膿菌Ｍ−２培養から得、上記の如く界面活性剤処
理、せん断処理、並びにクロマト処理によつて精製した
鞭毛溶液を発熱物質不含の蒸留水でタンパク質濃度が10
0μg/mlになるように希釈し、固形塩化ナトリウムとマ
ーチオレートとを加えて（終濃度、NaCl 0.9％，マーチ
オレート0.01％）等張性にした。次いでこの溶液をサル
トリウス（Sartoriusu）の使い捨てフイルター（0.2μ
ｍ）によつて滅菌過した。
理、せん断処理、並びにクロマト処理によつて精製した
鞭毛溶液を発熱物質不含の蒸留水でタンパク質濃度が10
0μg/mlになるように希釈し、固形塩化ナトリウムとマ
ーチオレートとを加えて（終濃度、NaCl 0.9％，マーチ
オレート0.01％）等張性にした。次いでこの溶液をサル
トリウス（Sartoriusu）の使い捨てフイルター（0.2μ
ｍ）によつて滅菌過した。
滅菌過した試料のタンパク質を測定した後、鞭毛浮
遊液を、滅菌NaCl−マーチオレート溶液（0.9％/0.01
％）でタンパク質濃度25μm/mlに調節し、さらに滅菌Na
Cl−／マーチオレート溶液１中％水酸化アルミニウム懸
濁液を加えてタンパク質濃度20μg/mlに調節した。
遊液を、滅菌NaCl−マーチオレート溶液（0.9％/0.01
％）でタンパク質濃度25μm/mlに調節し、さらに滅菌Na
Cl−／マーチオレート溶液１中％水酸化アルミニウム懸
濁液を加えてタンパク質濃度20μg/mlに調節した。
補助薬を加えて得られた完全なワクチンは、1ml中
に、 鞭毛タンパク質 20μｇ Al（OH）3 2mg NaCl 9mg マーチオレート 0.1mg を含有していた。
に、 鞭毛タンパク質 20μｇ Al（OH）3 2mg NaCl 9mg マーチオレート 0.1mg を含有していた。
実施例２ 緑膿菌1210鞭毛ワクチンの製造 緑膿菌1210培養から得、上記の如く界面活性剤処理、
せん断処理、並びにクロマト処理によつて精製した鞭毛
溶液を発熱物質不含の蒸留水でタンパク質濃度が100μg
/mlになるように希釈し、固形塩化ナトリウムとマーチ
オレートとを加えて（終濃度、NaCl 0.9％，マーチオレ
ート0.01％）等張性にした。次いでこの溶液をサルトリ
ウス（Sartoriusu）の使い捨てフイルター（0.2μｍ）
によつて滅菌過した。
せん断処理、並びにクロマト処理によつて精製した鞭毛
溶液を発熱物質不含の蒸留水でタンパク質濃度が100μg
/mlになるように希釈し、固形塩化ナトリウムとマーチ
オレートとを加えて（終濃度、NaCl 0.9％，マーチオレ
ート0.01％）等張性にした。次いでこの溶液をサルトリ
ウス（Sartoriusu）の使い捨てフイルター（0.2μｍ）
によつて滅菌過した。
滅菌過した試料のタンパク質を測定した後、鞭毛浮
遊液を、滅菌NaCl−マーチオレート溶液（0.9％/0.01
％）でタンパク質濃度25μg/mlに調節し、さらに滅菌Na
Cl−マーチオレート溶液中１％水酸化アルミニウム懸濁
液を加えてタンパク質濃度20μg/mlに調節した。
遊液を、滅菌NaCl−マーチオレート溶液（0.9％/0.01
％）でタンパク質濃度25μg/mlに調節し、さらに滅菌Na
Cl−マーチオレート溶液中１％水酸化アルミニウム懸濁
液を加えてタンパク質濃度20μg/mlに調節した。
補助薬を加えて得られた完全なワクチンは、1ml中
に、 鞭毛タンパク質 20μｇ Al（OH）3 2mg NaCl 9mg マーチオレート 0.1mg を含有していた。
に、 鞭毛タンパク質 20μｇ Al（OH）3 2mg NaCl 9mg マーチオレート 0.1mg を含有していた。
実施例３ 緑膿菌鞭毛多価ワクチンの製造 緑膿菌Ｍ−２、1210、5142、5939、5940および170018
各型の緑膿菌培養から得、上記の如く界面活性剤処理、
剪断処理、並びにクロマト処理によつて精製した鞭毛溶
液を、それぞれ発熱物質不含の蒸留水でタンパク質濃度
が100μg/mlになるように希釈し、同じ割合で混合し、
固形塩化ナトリウムとマーチオレートとを加えて（終濃
度、NaCl 0.9％，マーチオレート0.01％）等張性にし
た。次いでこの溶液をサルトリウス（Sartoriusu）の使
い捨てフイルター（0.2μｍ）によつて滅菌過した。
各型の緑膿菌培養から得、上記の如く界面活性剤処理、
剪断処理、並びにクロマト処理によつて精製した鞭毛溶
液を、それぞれ発熱物質不含の蒸留水でタンパク質濃度
が100μg/mlになるように希釈し、同じ割合で混合し、
固形塩化ナトリウムとマーチオレートとを加えて（終濃
度、NaCl 0.9％，マーチオレート0.01％）等張性にし
た。次いでこの溶液をサルトリウス（Sartoriusu）の使
い捨てフイルター（0.2μｍ）によつて滅菌過した。
滅菌過した試料のタンパク質を測定した後、鞭毛浮
遊液を、滅菌NaCl−マーチオレート溶液（0.9％/0.01
％）でタンパク質濃度25μg/mlに調節し、さらに滅菌Na
Cl−／マーチオレート溶液中１％水酸化アルミニウム懸
濁液を加えてタンパク質濃度20mg/mlに調節した。
遊液を、滅菌NaCl−マーチオレート溶液（0.9％/0.01
％）でタンパク質濃度25μg/mlに調節し、さらに滅菌Na
Cl−／マーチオレート溶液中１％水酸化アルミニウム懸
濁液を加えてタンパク質濃度20mg/mlに調節した。
補助薬を加えて得られた完全なワクチンは、1ml中
に、 鞭毛タンパク質 20μg Al（OH）3 2mg NaCl 9mg マーチオレート 0.1mg を含有していた。
に、 鞭毛タンパク質 20μg Al（OH）3 2mg NaCl 9mg マーチオレート 0.1mg を含有していた。
実施例４ 発熱性テスト 上記の方法で得られたワクチンが発熱物質を含有して
いないことを下記の如くにしてテストした。このテスト
は、基本的に、３またはそれ以上の成体家兎に生産物を
静注投与した後、各兎の体温を３時間測定し（Eur.Ph.,
第２版、1980、パート１、V.2.1.4）、それぞれの体温
の最大上昇を記録してその値を生産物の発熱性の目安と
するものである。
いないことを下記の如くにしてテストした。このテスト
は、基本的に、３またはそれ以上の成体家兎に生産物を
静注投与した後、各兎の体温を３時間測定し（Eur.Ph.,
第２版、1980、パート１、V.2.1.4）、それぞれの体温
の最大上昇を記録してその値を生産物の発熱性の目安と
するものである。
このテストの実施に際して使用したものを次に示す：
サーモデス（thermodes）（Cu−コンスタンタン、兎用
熱電対、Phシエンク（Schenk））；温度記録計（６カラ
ーポイントプリンターSTD62A型、測定範囲36〜42℃、測
定精度±0.08℃）；合成樹脂製の滅菌した発熱物質不含
注射用シリンダ；滅菌した発熱物質不含注射針；首固定
器の付いたスチール製の発熱試験用の箱;6個の発熱試験
用の箱のためのハカリ；サーモスタツト付きの水浴；温
度計；ハカリ；サウター（Sauter）ES120。
サーモデス（thermodes）（Cu−コンスタンタン、兎用
熱電対、Phシエンク（Schenk））；温度記録計（６カラ
ーポイントプリンターSTD62A型、測定範囲36〜42℃、測
定精度±0.08℃）；合成樹脂製の滅菌した発熱物質不含
注射用シリンダ；滅菌した発熱物質不含注射針；首固定
器の付いたスチール製の発熱試験用の箱;6個の発熱試験
用の箱のためのハカリ；サーモスタツト付きの水浴；温
度計；ハカリ；サウター（Sauter）ES120。
用いた被検動物は、体重1,500g以上の健康な雌雄両性
の成体家兎であって、これらは、抗生物質不含の栄養価
の高い標準食を与えられており、試験前数週間、体重減
少を示していなかつた。
の成体家兎であって、これらは、抗生物質不含の栄養価
の高い標準食を与えられており、試験前数週間、体重減
少を示していなかつた。
使用した試料は、補助薬不含のＭ−２鞭毛ワクチンで
あつて、これを注射に先立つて約38℃に加温しておい
た。テストは３羽の兎を一群として行ない、これらを少
なくとも試験開始90分前に発熱試験用の箱に入れておい
た。
あつて、これを注射に先立つて約38℃に加温しておい
た。テストは３羽の兎を一群として行ない、これらを少
なくとも試験開始90分前に発熱試験用の箱に入れておい
た。
被検溶液の投与前40分以内に、30分の間隔をおいて各
兎の体温を２回測定して得た温度の平均値に基づいて初
期値を定めた。この初期値測定時に、２回の連続した温
度測定値の開きが0.2℃以上あつた兎は、以後のテスト
から外した。初期値の変化が0.1℃を越えなかつた兎の
みをテストに用いた。主要なテストには、初期体温が3
9.8℃以上、または38℃以下の兎を用いなかつた。各兎
の周縁耳静脈に試料を1ml/kg体重の割合で徐々に注射し
た。注射時間は多くとも４分間であつた。注射後３時間
目に記録した最高体温に基づき各兎の最大体温を決定し
た。各兎の体温測定は被検物質投与の少なくとも90分前
に開始し、注射後３時間目に終了し、その間、大抵の場
合、30分おきに行なつた。各兎の最大体温と初期値との
差を結果とした。負の変化をゼロと評価した。
兎の体温を２回測定して得た温度の平均値に基づいて初
期値を定めた。この初期値測定時に、２回の連続した温
度測定値の開きが0.2℃以上あつた兎は、以後のテスト
から外した。初期値の変化が0.1℃を越えなかつた兎の
みをテストに用いた。主要なテストには、初期体温が3
9.8℃以上、または38℃以下の兎を用いなかつた。各兎
の周縁耳静脈に試料を1ml/kg体重の割合で徐々に注射し
た。注射時間は多くとも４分間であつた。注射後３時間
目に記録した最高体温に基づき各兎の最大体温を決定し
た。各兎の体温測定は被検物質投与の少なくとも90分前
に開始し、注射後３時間目に終了し、その間、大抵の場
合、30分おきに行なつた。各兎の最大体温と初期値との
差を結果とした。負の変化をゼロと評価した。
評価： 評価に際しては、温度変化を合計した。３羽
の兎からなる群の場合は、個々の値の合計が1.15℃以下
であれば、その試料は要求を満たすものとする。また、
合計が2.65℃以上であれば、その試料は要求を満たさな
いものとする。
の兎からなる群の場合は、個々の値の合計が1.15℃以下
であれば、その試料は要求を満たすものとする。また、
合計が2.65℃以上であれば、その試料は要求を満たさな
いものとする。
結果が上記の値の中間にある時は、既述の方法によつ
て再試験する必要がある。最大限３回繰り返して行なつ
た。
て再試験する必要がある。最大限３回繰り返して行なつ
た。
繰り返し試験後の評価には全被検動物（3,6,9,または
最高12羽）を用いた。試験基準を下記の表に示す。
最高12羽）を用いた。試験基準を下記の表に示す。
三羽の個々の合計が1.15℃以下であるか、または繰り
返し実験の場合には、上記の表の条件を満たしておれ
ば、試料は試験に合格したものとする。
返し実験の場合には、上記の表の条件を満たしておれ
ば、試料は試験に合格したものとする。
Ｍ−２型鞭毛ワクチン1ml/kg（兎）を注射した後、得
られた三羽の兎それぞれのΔｔを以下に示す。
られた三羽の兎それぞれのΔｔを以下に示す。
ワクチン濃度 このように、テストに用いた製剤は発熱物質を含有し
ていないと考えられる。
ていないと考えられる。
実施例５ 受動免疫に用いるためのIgGの、マウス超免
疫血漿からの単離 防御的Ｍ−２型鞭毛（Ｈ）抗原で免疫された、マウス
血漿を採取し、振盪下、56℃で30分間加温し、フイブリ
ンを沈澱させた。10,000xgで30分間遠心した後、固形硫
酸アンモニウムを濃度25（w/v）％まで加えて沈澱を析
出させた。得られた懸濁液を20分間攪拌した後、室温で
１時間放置した。次いで、この懸濁液を、10,000xgで30
分間遠心した後、飽和硫酸アンモニウム溶液で１回洗浄
した。沈澱を10mMりん酸ナトリウム緩衝液（pH7.5）、5
0mM NaClに溶かし、次いで、該緩衝液に対して一夜透析
した。
疫血漿からの単離 防御的Ｍ−２型鞭毛（Ｈ）抗原で免疫された、マウス
血漿を採取し、振盪下、56℃で30分間加温し、フイブリ
ンを沈澱させた。10,000xgで30分間遠心した後、固形硫
酸アンモニウムを濃度25（w/v）％まで加えて沈澱を析
出させた。得られた懸濁液を20分間攪拌した後、室温で
１時間放置した。次いで、この懸濁液を、10,000xgで30
分間遠心した後、飽和硫酸アンモニウム溶液で１回洗浄
した。沈澱を10mMりん酸ナトリウム緩衝液（pH7.5）、5
0mM NaClに溶かし、次いで、該緩衝液に対して一夜透析
した。
遠心後、イオン交換クロマトグラフイー（DE-52セル
ロース（Whatman））にかけた。通過した容積中には免
疫グロブリンＧ（IgG）が含有されている。IgG試験の
後、アミコンセル（amicon cell）を用いて溶液をもと
の容量まで濃縮し、0.9％NaClに対して一夜透析した。
次いで、セフアデツクス（Sephadex）Ｇ−200を用いて
ゲルクロマトグラフイーを行なつた。アミコンセルを用
い、IgG陽性画分を初期容量まで濃縮した。
ロース（Whatman））にかけた。通過した容積中には免
疫グロブリンＧ（IgG）が含有されている。IgG試験の
後、アミコンセル（amicon cell）を用いて溶液をもと
の容量まで濃縮し、0.9％NaClに対して一夜透析した。
次いで、セフアデツクス（Sephadex）Ｇ−200を用いて
ゲルクロマトグラフイーを行なつた。アミコンセルを用
い、IgG陽性画分を初期容量まで濃縮した。
この方法はウエアー（D.M.Weir）の実験免疫学便覧
（Edition Handbook of Experimental Immunology）第
３版、1978、第VII、VIII章記載の方法に改良を加えた
ものである。
（Edition Handbook of Experimental Immunology）第
３版、1978、第VII、VIII章記載の方法に改良を加えた
ものである。
緑膿菌の鞭毛抗原に単一特異的に活性な免疫グロブリ
ン類を生産するためには、硫酸アンモニウム沈降法以外
の既知の方法、DEAEクロマトグラフイー、プロテインＡ
アフイニテイークロマトグラフイー、あるいは当業者に
とつて既知の組み合わせを用いることができる。さら
に、免疫グロブリンＧ製品をイムノアフイニテイークロ
マトグラフイーにかけて精製し、単一特異的免疫グロブ
リンを得ることができる。
ン類を生産するためには、硫酸アンモニウム沈降法以外
の既知の方法、DEAEクロマトグラフイー、プロテインＡ
アフイニテイークロマトグラフイー、あるいは当業者に
とつて既知の組み合わせを用いることができる。さら
に、免疫グロブリンＧ製品をイムノアフイニテイークロ
マトグラフイーにかけて精製し、単一特異的免疫グロブ
リンを得ることができる。
単一特異的免疫グロブリンの調製は免疫吸着剤として
担体媒質（好ましくはセフアロース4B）を用いて好都合
に行なうことができ、単量体または重合体形の純化鞭毛
抗原をこの吸着剤に共有結合的に結合させる。次いで、
好ましくは流速１〜２カラム容量／時間でアフイニテイ
ー樹脂上にIgG含有溶液をポンプで通過させる。高イオ
ン強度の緩衝液（例、0.5M NaCl）で樹脂を洗浄した
後、pH変化またはカオトロピツク試薬（例、3M NH4SC
N）によりゲルから鞭毛特異抗体を溶離することができ
る。
担体媒質（好ましくはセフアロース4B）を用いて好都合
に行なうことができ、単量体または重合体形の純化鞭毛
抗原をこの吸着剤に共有結合的に結合させる。次いで、
好ましくは流速１〜２カラム容量／時間でアフイニテイ
ー樹脂上にIgG含有溶液をポンプで通過させる。高イオ
ン強度の緩衝液（例、0.5M NaCl）で樹脂を洗浄した
後、pH変化またはカオトロピツク試薬（例、3M NH4SC
N）によりゲルから鞭毛特異抗体を溶離することができ
る。
本発明の防御的な抗原および抗体の有効性を以下に示
す。
す。
本発明のワクチンに用いる抗原の防御効果を緑膿菌感
染症患者の血清中鞭毛（Ｈ）抗原を解明することによつ
て行なつた。
染症患者の血清中鞭毛（Ｈ）抗原を解明することによつ
て行なつた。
抗鞭毛抗体の測定には免疫吸収分析（イムノアブソー
ベントアツセイ、immunoabsorbent assay）即ち酵素結
合吸収分析（ELISA）またはラジオイムノアツセイ（RI
A）を採用した。本明細書に記載の方法で得た高純度の
鞭毛（Ｈ）抗原を強い界面活性剤で解重合した後、合成
表面に非特異的な相互作用に基いて結合させ、ヒト血清
試料と接触させる。ヒト血清中に鞭毛（Ｈ）抗原が存在
していれば、それら固相に固定化された抗原と特異的に
結合する。標識した抗ヒトIgG抗体を用い合成表面上に
形成された鞭毛（Ｈ）抗原−抗体コンプレツクスを検出
することができる。
ベントアツセイ、immunoabsorbent assay）即ち酵素結
合吸収分析（ELISA）またはラジオイムノアツセイ（RI
A）を採用した。本明細書に記載の方法で得た高純度の
鞭毛（Ｈ）抗原を強い界面活性剤で解重合した後、合成
表面に非特異的な相互作用に基いて結合させ、ヒト血清
試料と接触させる。ヒト血清中に鞭毛（Ｈ）抗原が存在
していれば、それら固相に固定化された抗原と特異的に
結合する。標識した抗ヒトIgG抗体を用い合成表面上に
形成された鞭毛（Ｈ）抗原−抗体コンプレツクスを検出
することができる。
この方法はそのまま定量にも容易に利用できる。種々
の型の鞭毛抗原に対する抗体を用いて血清試料をスクリ
ーニングした結果を表３に示す。
の型の鞭毛抗原に対する抗体を用いて血清試料をスクリ
ーニングした結果を表３に示す。
天然の緑膿菌鞭毛（Ｈ）抗原の免疫原性は、無作為に
選出した供与体の血清中鞭毛（Ｈ）抗体の検出結果を示
した表３により証明されている。
選出した供与体の血清中鞭毛（Ｈ）抗体の検出結果を示
した表３により証明されている。
体内に侵入してきた外来の細菌に対する戦いは、抗体
によつて様々な方法で開始される。体液性防御システム
（補体系）によると、抗体によつて認識された外来生物
は一連の溶菌作用を受けて死滅する。さらに、外来生物
と結合した抗体は、補体系の構成成分と協力して、外来
生物の、免疫系の防御細胞（例、顆粒細胞）への取り込
み（食細胞作用）を誘導し得る。通常、顆粒球に取り込
まれた外来細胞は死滅する。
によつて様々な方法で開始される。体液性防御システム
（補体系）によると、抗体によつて認識された外来生物
は一連の溶菌作用を受けて死滅する。さらに、外来生物
と結合した抗体は、補体系の構成成分と協力して、外来
生物の、免疫系の防御細胞（例、顆粒細胞）への取り込
み（食細胞作用）を誘導し得る。通常、顆粒球に取り込
まれた外来細胞は死滅する。
有鞭毛細菌の場合には、抗体の防御作用は運動性の阻
害、即ち感染中心の拡散の阻止を目的として、細菌の運
動系に向けられる。
害、即ち感染中心の拡散の阻止を目的として、細菌の運
動系に向けられる。
鞭毛（Ｈ）抗原の運動性阻害作用は、表１に記載した
血清型の鞭毛（Ｈ）抗原で免疫したマウスから得た抗鞭
毛（Ｈ）血清を用いて証明することができる。抗血清に
浸漬したリング状紙を運動性寒天プレート上におき、
該リング内部の寒天にホモローガス（同質）なシユード
モナス株の浮遊液を接種する。24時間インキユベーシヨ
ンした後、紙のリング外側に認められる細胞の量によ
つて運動性阻害作用を分析する。鞭毛（Ｈ）抗原によつ
て得られたマウスの抗血清がホモローガスなシユードモ
ナス菌株の運動性を阻害することが分かった。結果を表
４に示す。
血清型の鞭毛（Ｈ）抗原で免疫したマウスから得た抗鞭
毛（Ｈ）血清を用いて証明することができる。抗血清に
浸漬したリング状紙を運動性寒天プレート上におき、
該リング内部の寒天にホモローガス（同質）なシユード
モナス株の浮遊液を接種する。24時間インキユベーシヨ
ンした後、紙のリング外側に認められる細胞の量によ
つて運動性阻害作用を分析する。鞭毛（Ｈ）抗原によつ
て得られたマウスの抗血清がホモローガスなシユードモ
ナス菌株の運動性を阻害することが分かった。結果を表
４に示す。
正常なマウスの血清は常に細胞増殖（＋＋）を示し
た。
た。
感染中心に存在する細菌の運動性を阻害することによ
つて、患者の体内でコロニーを形成した後の伝播を防止
することはできるが、該中心に存在している細菌は毒素
やプロテアーゼ類を遊離することによつて尚も患者の器
官に影響を及ぼし得る位置にある。従つて、感染に対す
る真の防御は、能動免疫によつて形成された抗体が迅速
に侵入細菌を死滅させることによつて、始めて保障され
る。
つて、患者の体内でコロニーを形成した後の伝播を防止
することはできるが、該中心に存在している細菌は毒素
やプロテアーゼ類を遊離することによつて尚も患者の器
官に影響を及ぼし得る位置にある。従つて、感染に対す
る真の防御は、能動免疫によつて形成された抗体が迅速
に侵入細菌を死滅させることによつて、始めて保障され
る。
本発明の鞭毛（Ｈ）抗体のホモローガスなシユードモ
ナス菌株に対する食細胞作用の誘導作用、並びに細胞内
殺菌の促進作用を以下に示す。
ナス菌株に対する食細胞作用の誘導作用、並びに細胞内
殺菌の促進作用を以下に示す。
食細胞作用を試験するために、表３の血清＃３および
＃５、並びに表３に記載されていない血清＃16を緑膿菌
株Ｍ−２非鞭毛性突然変異体f1a-）〔モンチエ（Monti
e,T.C.）、ドイルハンチンガー（D.Doyle-Huntzinge
r）、クラヴエン（R.C.Craven）、ホルダー（I.A.Holde
r）（1982）インフエクトイミユーン（Infewct.Immu
n.）〕と一緒にインキユベートし、血清から全ての非鞭
毛−特異的抗体を除去した。単離したヒト顆粒球を用
い、未処理の、並びに予め吸収処理（プレアブソーブ
ド）した血清中での緑膿菌株Ｍ−２およびアイソジエニ
ツクな非鞭毛性突然変異体に対する細胞内殺菌作用を調
べた。その結果、表５に示すように、鞭毛（Ｈ）抗原は
緑膿菌の鞭毛性株の食細胞作用を誘発し次いで、細胞内
殺菌作用を誘導することが示され、該抗体は本発明にか
かる病原体による感染症の予防効果を有することが分か
つた。
＃５、並びに表３に記載されていない血清＃16を緑膿菌
株Ｍ−２非鞭毛性突然変異体f1a-）〔モンチエ（Monti
e,T.C.）、ドイルハンチンガー（D.Doyle-Huntzinge
r）、クラヴエン（R.C.Craven）、ホルダー（I.A.Holde
r）（1982）インフエクトイミユーン（Infewct.Immu
n.）〕と一緒にインキユベートし、血清から全ての非鞭
毛−特異的抗体を除去した。単離したヒト顆粒球を用
い、未処理の、並びに予め吸収処理（プレアブソーブ
ド）した血清中での緑膿菌株Ｍ−２およびアイソジエニ
ツクな非鞭毛性突然変異体に対する細胞内殺菌作用を調
べた。その結果、表５に示すように、鞭毛（Ｈ）抗原は
緑膿菌の鞭毛性株の食細胞作用を誘発し次いで、細胞内
殺菌作用を誘導することが示され、該抗体は本発明にか
かる病原体による感染症の予防効果を有することが分か
つた。
能動免疫に用いる抗原の防御作用を直接証明する唯一
の方法は、動物をモデルとする実験である。緑膿菌感染
症にかかり易い患者、という状況を設定するために文献
記載の２種類の動物モデルを採用した：火傷マウス〔ス
チーリツツ（Stieritz,D.D.）およびホルダー（I.A.Hol
der）（1975）インフエクト・デイス）（J.Infect.Di
s.）131、688-691〕およびエンドキサン（Endxan）マウ
スモデル：〔クライツ（Cryz.S.J.Jr.）、フユーレル
（Furer,E.）、ゲルマニエル（Germanier,R.）（1983）
インフエクト・イムニテイー（Infect.Immunity）40、6
59-664）。両モデルの非免疫動物における緑膿菌のLD50
用量を求めた。エンドキサンモデルの場合には動物は免
疫抑制下にあり、火傷マウスモデルの場合には、火傷の
大きさを一定にした。表６記載の鞭毛（Ｈ）抗原で免疫
した後、火傷または免疫抑制動物それぞれを、ホモロー
ガスな緑膿菌株の予め定めたLD50病原体数で多重感染さ
せた。表６に、各濃度の抗原で免疫されたエンドキサン
モデルおよび火傷マウスモデルにおいて、100％の動物
が耐溶性を示した、多重感染のLD50病原体数を示す。
の方法は、動物をモデルとする実験である。緑膿菌感染
症にかかり易い患者、という状況を設定するために文献
記載の２種類の動物モデルを採用した：火傷マウス〔ス
チーリツツ（Stieritz,D.D.）およびホルダー（I.A.Hol
der）（1975）インフエクト・デイス）（J.Infect.Di
s.）131、688-691〕およびエンドキサン（Endxan）マウ
スモデル：〔クライツ（Cryz.S.J.Jr.）、フユーレル
（Furer,E.）、ゲルマニエル（Germanier,R.）（1983）
インフエクト・イムニテイー（Infect.Immunity）40、6
59-664）。両モデルの非免疫動物における緑膿菌のLD50
用量を求めた。エンドキサンモデルの場合には動物は免
疫抑制下にあり、火傷マウスモデルの場合には、火傷の
大きさを一定にした。表６記載の鞭毛（Ｈ）抗原で免疫
した後、火傷または免疫抑制動物それぞれを、ホモロー
ガスな緑膿菌株の予め定めたLD50病原体数で多重感染さ
せた。表６に、各濃度の抗原で免疫されたエンドキサン
モデルおよび火傷マウスモデルにおいて、100％の動物
が耐溶性を示した、多重感染のLD50病原体数を示す。
表７は、Ｍ−２鞭毛抗原の防御作用の用量依存性に関
するものである。この場合には２種類のモデルの動物を
用い、漸増量の鞭毛抗原で免疫し、テストを行なつた。
いずれの場合にも、免疫に用いた鞭毛抗原の用量に依存
した防御作用を明確に認めることができる。
するものである。この場合には２種類のモデルの動物を
用い、漸増量の鞭毛抗原で免疫し、テストを行なつた。
いずれの場合にも、免疫に用いた鞭毛抗原の用量に依存
した防御作用を明確に認めることができる。
受動免疫に用いる抗体の防御作用を直接証明する唯一
の方法は、動物をモデルとする実験である。緑膿菌感染
症にかかり易い患者、という状況を設定するために文献
記載のエンドキサンマウスモデル：〔クライツ（Cryz,
S.J.Jr.），フユーレル：（Furer,E.）、ゲルマニエル
（Germanier,R.）（1983）：実験的白血球減少症マウス
における、緑膿菌感染症に対する受動的な防御作用（Pa
ssive Protection Against Pseudo monas aeruginosa I
nfection in an Experimental Leukopenic Mouse Mode
l）インフエクト・イムニテイー（Infect.Immunity）4
0、659-664）を用いた。この場合には、免疫抑制動物に
おける緑膿菌病原体のLD50用量を求めた。
の方法は、動物をモデルとする実験である。緑膿菌感染
症にかかり易い患者、という状況を設定するために文献
記載のエンドキサンマウスモデル：〔クライツ（Cryz,
S.J.Jr.），フユーレル：（Furer,E.）、ゲルマニエル
（Germanier,R.）（1983）：実験的白血球減少症マウス
における、緑膿菌感染症に対する受動的な防御作用（Pa
ssive Protection Against Pseudo monas aeruginosa I
nfection in an Experimental Leukopenic Mouse Mode
l）インフエクト・イムニテイー（Infect.Immunity）4
0、659-664）を用いた。この場合には、免疫抑制動物に
おける緑膿菌病原体のLD50用量を求めた。
この実験においてはその値は9.5×102病原体である。
免疫抑制動物を、マウスの抗緑膿菌Ｍ−２超免疫血漿
（該血漿のELISAにおける抗体力価は1:1,600の希釈段階
である）で受動免疫処理した後、ホモローガスな緑膿菌
株の予め定めたLD50病原体数で多重感染させた。
免疫抑制動物を、マウスの抗緑膿菌Ｍ−２超免疫血漿
（該血漿のELISAにおける抗体力価は1:1,600の希釈段階
である）で受動免疫処理した後、ホモローガスな緑膿菌
株の予め定めたLD50病原体数で多重感染させた。
表８は、受動免疫処理を受けた動物が、LD50用量の30
倍の量の病原体に対するチヤレンジにおいて保護されて
いることを示すものである。
倍の量の病原体に対するチヤレンジにおいて保護されて
いることを示すものである。
フロントページの続き (56)参考文献 Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｉｍｍｕ ｎｉｔｙ，ｖｏｌ．35，ｎｏ．１ （1982），ｐｐ．281−288 Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｉｍｍｕ ｎｉｔｙ，ｖｏｌ．49，ｎｏ．３ （1985），ｐｐ．770−774
Claims (14)
- 【請求項１】血清型aおよびbの防御的鞭毛（Ｈ）抗原を
含む緑膿菌感染症に有効なワクチンであって、該抗原は
それぞれ、以下の単量体成分： ａ） アミノ酸類：アスパラギン酸（Asp）、スレオニ
ン（Thr）、セリン（Ser）、グルタミン酸（Glu）、グ
リシン（Gly）、アラニン（Ala）、バリン（Val）、イ
ソロイシン（Ile）、ロイシン（Leu）、チロシン（Ty
r）、フェニルアラニン（Phe）、リジン（Lys）、アル
ギニン（Arg）、および、場合によりトリプトファン（T
rp）およびメチオニン（Met）を含有しており、 ｂ） Ｎ末端アミノ酸配列：アラニン（Ala）−ロイシ
ン（Leu）−スレオニン（Thr）−バリン（Val）−アス
パラギン（Asn）−スレオニン（Thr）−アスパラギン
（Asn）−イソロイシン（Ile）−アラニン（Ala）を含
有しており、 ｃ） 分子量が43,500〜53,050であって、 ｄ） プロリン、セミシステインおよびヒスチジンを含
んでいないことを特徴とするものであり、リポ多糖を含
有していないことを特徴とするワクチン。 - 【請求項２】Ｈ−血清型a0、a3、a4の鞭毛（Ｈ）抗原で
あって、その単量体成分はアミノ酸：アスパラギン酸、
スレオニン、セリン、グルタミン酸、グリシン、アラニ
ン、バリン、イソロイシン、ロイシン、チロシン、フェ
ニルアラニン、リジンおよびアルギニンを64:33:35:42:
44:68:29:29:37:3:10:19:15の比率で含有しており、分
子量が43,500である抗原を含有している第１項記載のワ
クチン。 - 【請求項３】Ｈ−血清型a0、a3の鞭毛（Ｈ）抗原であっ
て、その単量体成分はアミノ酸：アスパラギン酸、スレ
オニン、セリン、グルタミン酸、グリシン、アラニン、
バリン、イソロイシン、ロイシン、チロシン、フェニル
アラニン、リジンおよびアルギニンを69:35:38:44:47:7
8:30:30:60:3:12:21:16の比率で含有しており、分子量
が46,700である抗原を含有している第１項記載のワクチ
ン。 - 【請求項４】Ｈ−血清型a0の鞭毛（Ｈ）抗原であって、
その単量体成分はアミノ酸：アスパラギン酸、スレオニ
ン、セリン、グルタミン酸、グリシン、アラニン、バリ
ン、イソロイシン、ロイシン、チロシン、フェニルアラ
ニン、リジンおよびアルギニンを74:50:49:49:49:89:3
7:29:44:5:14:17:16の比率で含有しており、分子量が5
2,720である抗原を含有している第１項記載のワクチ
ン。 - 【請求項５】Ｈ−血清型ｂの鞭毛（Ｈ）抗原であって、
その単量体成分はアミノ酸：アスパラギン酸、スレオニ
ン、セリン、グルタミン酸、グリシン、アラニン、バリ
ン、イソロイシン、ロイシン、チロシン、フェニルアラ
ニン、リジンおよびアルギニンを74:48:48:49:51:91:3
8:30:43:4:13:18:18の比率で含有しており、分子量が5
3,050である抗原を含有している第１項記載のワクチ
ン。 - 【請求項６】Ｈ−血清型a0、a1、a2の鞭毛（Ｈ）抗原で
あって、その単量体成分はアミノ酸：アスパラギン酸、
スレオニン、セリン、グルタミン酸、グリシン、アラニ
ン、バリン、イソロイシン、ロイシン、チロシン、フェ
ニルアラニン、リジンおよびアルギニンを76:44:40:52:
50:81:32:32:41:4:12:20:18の比率で含有しており、分
子量が51,250である抗原を含有している第１項記載のワ
クチン。 - 【請求項７】Ｈ−血清型a0、a2の鞭毛（Ｈ）抗原であっ
て、その単量体成分はアミノ酸：アスパラギン酸、スレ
オニン、セリン、グルタミン酸、グリシン、アラニン、
バリン、イソロイシン、ロイシン、チロシン、フェニル
アラニン、リジンおよびアルギニンを68:41:37:46:44:7
8:29:29:37:3:10:16:16の比率で含有しており、分子量
が45,900である抗原を含有している第１項記載のワクチ
ン。 - 【請求項８】血清型ａおよびｂの防御的鞭毛（Ｈ）抗原
であって、それぞれ、以下の単量体成分： ａ） アミノ酸類：アスパラギン酸（Asp）、スレオニ
ン（Thr）、セリン（Ser）、グルタミン酸（Glu）、グ
リシン（Gly）、アラニン（Ala）、バリン（Val）、イ
ソロイシン（Ile）、ロイシン（Leu）、チロシン（Ty
r）、フェニルアラニン（Phe）、リジン（Lys）、アル
ギニン（Arg）、および、場合によりトリプトファン（T
rp）およびメチオニン（Met）を含有しており、 ｂ） Ｎ末端アミノ酸配列：アラニン（Ala）−ロイシ
ン（Leu）−スレオニン（Thr）−バリン（Val）−アス
パラギン（Asn）−スレオニン（Thr）−アスパラギン
（Asn）−イソロイシン（Ile）−アラニン（Ala）を含
有しており、 ｃ） 分子量が43,500〜53,050であって、 ｄ） プロリン、セミシステインおよびヒスチジンを含
まない単量体成分からなる抗原を含有しており、リポ多
糖を含有していない緑膿菌感染症に有効なワクチンの製
造方法であって、緑膿菌の培養物から鞭毛（Ｈ）抗原を
得、該鞭毛（Ｈ）抗原を精製し、得られた純化鞭毛
（Ｈ）抗原を滅菌濾過してガレヌス製剤に製剤化する工
程からなる方法。 - 【請求項９】滅菌濾過後、アジュバントを加えることを
含む第８項記載の方法。 - 【請求項１０】アジュバントがAl（OH）3である第９項
記載の方法。 - 【請求項１１】ガレヌス製剤に製剤化する前に保存剤を
加える第８項記載の方法。 - 【請求項１２】保存剤がマーチオレートである第11項記
載の方法。 - 【請求項１３】ガレヌス製剤に製剤化する前にアジュバ
ントを混合し、保存剤を加える第８項記載の方法。 - 【請求項１４】アジュバントがAl（OH）3であり、保存
剤がマーチオレートである第13項記載の方法。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| AT1716/86A AT391080B (de) | 1986-06-24 | 1986-06-24 | Verfahren zur herstellung von gegen pseudomonas aeruginosa infektionen wirksamen praeparationen |
| AT1716/86 | 1986-06-24 |
Related Child Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP7211624A Division JP2534470B2 (ja) | 1986-06-24 | 1995-08-21 | 免疫グロブリンｇ含有製剤及びその製造方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS635029A JPS635029A (ja) | 1988-01-11 |
| JPH0830011B2 true JPH0830011B2 (ja) | 1996-03-27 |
Family
ID=3519452
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP62157475A Expired - Fee Related JPH0830011B2 (ja) | 1986-06-24 | 1987-06-24 | 緑膿菌感染症ワクチンおよびその製造方法 |
| JP7211624A Expired - Fee Related JP2534470B2 (ja) | 1986-06-24 | 1995-08-21 | 免疫グロブリンｇ含有製剤及びその製造方法 |
Family Applications After (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP7211624A Expired - Fee Related JP2534470B2 (ja) | 1986-06-24 | 1995-08-21 | 免疫グロブリンｇ含有製剤及びその製造方法 |
Country Status (9)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4946677A (ja) |
| EP (1) | EP0252064B1 (ja) |
| JP (2) | JPH0830011B2 (ja) |
| AT (2) | AT391080B (ja) |
| CA (1) | CA1306690C (ja) |
| DE (1) | DE3782771D1 (ja) |
| DK (1) | DK173123B1 (ja) |
| ES (1) | ES2044976T3 (ja) |
| FI (1) | FI86508C (ja) |
Families Citing this family (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5237053A (en) * | 1986-06-24 | 1993-08-17 | Immuno Aktiengesellschaft | Preparation active against Pseudomonas aeruginosa infections and methods of producing them |
| AT390192B (de) * | 1988-08-29 | 1990-03-26 | Immuno Ag | Gegen pseudomonas aeruginosa-infektionen wirksame praeparationen sowie immunglobuling-h|ltige, gegen bakterium pseudomonas aeruginosa wirksame praeparationen |
| WO1994008617A1 (en) * | 1992-10-16 | 1994-04-28 | Brigham And Women's Hospital, Inc. | O-derivatized alginic acid antigens |
| GB9701489D0 (en) | 1997-01-24 | 1997-03-12 | Auspharm Int Ltd | Antigen |
| US6749831B1 (en) | 1997-05-16 | 2004-06-15 | Medical Defense Technology, Llc | Vaccine against lipopolysaccharide core |
| US7405039B2 (en) | 2002-02-07 | 2008-07-29 | Austin Health | Viral variants with altered susceptibility to nucleoside analogs and uses thereof |
| EP2455390A1 (en) * | 2002-04-12 | 2012-05-23 | Melbourne Health | Hepatitis B viral variants with reduced susceptibility to nucleoside analogs and uses thereof |
| EP1753464A2 (en) * | 2004-03-26 | 2007-02-21 | Quark Biotech, Inc. | Annexin ii and uses thereof |
| EP1874923A4 (en) | 2005-04-08 | 2010-08-04 | Melbourne Health | VARIANTS OF THE HEPATITIS B VIRUS WITH RESISTANCE TO ANTIVIRAL NUCLEOSIDAGENTS AND APPLICATIONS THEREOF |
| AU2006230802A1 (en) | 2005-04-08 | 2006-10-12 | Austin Health | Variants of hepatitis B virus with resistance to anti-viral nucleoside agents and applications thereof |
| US8173130B2 (en) * | 2007-09-05 | 2012-05-08 | Inotek Pharmaceuticals Corporation | Antibodies against flagellin and uses thereof |
| US20100239583A1 (en) * | 2009-03-04 | 2010-09-23 | Inotek Pharmaceuticals Corporation | Antibodies against flagellin and uses thereof |
| WO2011046504A1 (en) * | 2009-10-18 | 2011-04-21 | Glycorex Ab | Method and product for blood treatment and purification |
Family Cites Families (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3674863A (en) * | 1969-12-08 | 1972-07-04 | Parke Davis & Co | Polyvalent immunizing agents and methods for their production |
| US3928565A (en) * | 1971-10-19 | 1975-12-23 | Yuzuru Homma | Pharmaceutical preparation of pseudomonas aeruginosa bacterial component possessing anti-tumor and anti-infection properties |
| US3987164A (en) * | 1970-10-20 | 1976-10-19 | Yuzuru Homma | Method for prevention of pseudomonas aeruginosa infections |
| FR2227861B1 (ja) * | 1973-05-04 | 1976-07-02 | Anvar | |
| US4075321A (en) * | 1973-05-04 | 1978-02-21 | Agence Nationale De Valorisation De La Recherche (Anvar) | Vaccines, the process for preparing the same and the applications thereof |
| JPS51133489A (en) * | 1975-05-14 | 1976-11-19 | Tokyo Daigaku | Process for producing microbial components of pseudomonas aeruginosa h aving antimicrobial and antitumor activities |
| US4298597A (en) * | 1979-09-04 | 1981-11-03 | University Of Saskatchewan | Vaccine for diarrhea caused by E. coli |
| JPS60248625A (ja) * | 1984-05-25 | 1985-12-09 | Mitsui Toatsu Chem Inc | 抗緑膿菌モノクロ−ナル抗体、その製法ならびに用途 |
| AT384032B (de) * | 1985-01-14 | 1987-09-25 | Immuno Ag | Verfahren zur herstellung von polydispersen nativen pseudomonas-flagella(h)-antigenen (fag) |
| US4693891A (en) * | 1985-09-09 | 1987-09-15 | Miles Laboratories, Inc. | Vaccine for Pseudomonas aeruginosa |
| FR2597344B1 (fr) * | 1986-04-16 | 1989-06-23 | Merieux Inst | Perfectionnement au procede de purification d'antigenes proteiques de bacteries appartenant au genre bordetella, en vue de l'obtention d'un vaccin acellulaire. |
-
1986
- 1986-06-24 AT AT1716/86A patent/AT391080B/de active
-
1987
- 1987-06-09 CA CA000539163A patent/CA1306690C/en not_active Expired - Lifetime
- 1987-06-15 DE DE8787890135T patent/DE3782771D1/de not_active Expired - Fee Related
- 1987-06-15 EP EP87890135A patent/EP0252064B1/de not_active Expired - Lifetime
- 1987-06-15 ES ES87890135T patent/ES2044976T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1987-06-15 AT AT87890135T patent/ATE82687T1/de not_active IP Right Cessation
- 1987-06-17 US US07/063,094 patent/US4946677A/en not_active Expired - Lifetime
- 1987-06-22 FI FI872750A patent/FI86508C/fi not_active IP Right Cessation
- 1987-06-24 DK DK198703222A patent/DK173123B1/da not_active IP Right Cessation
- 1987-06-24 JP JP62157475A patent/JPH0830011B2/ja not_active Expired - Fee Related
-
1995
- 1995-08-21 JP JP7211624A patent/JP2534470B2/ja not_active Expired - Fee Related
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| ＩｎｆｅｃｔｉｏｎａｎｄＩｍｍｕｎｉｔｙ，ｖｏｌ．３５，ｎｏ．１（１９８２），ｐｐ．２８１−２８８ |
| ＩｎｆｅｃｔｉｏｎａｎｄＩｍｍｕｎｉｔｙ，ｖｏｌ．４９，ｎｏ．３（１９８５），ｐｐ．７７０−７７４ |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| FI872750A0 (fi) | 1987-06-22 |
| EP0252064B1 (de) | 1992-11-25 |
| ES2044976T3 (es) | 1994-01-16 |
| JP2534470B2 (ja) | 1996-09-18 |
| FI86508C (fi) | 1992-09-10 |
| CA1306690C (en) | 1992-08-25 |
| DK322287A (da) | 1987-12-25 |
| ATE82687T1 (de) | 1992-12-15 |
| AT391080B (de) | 1990-08-10 |
| FI86508B (fi) | 1992-05-29 |
| JPH0853367A (ja) | 1996-02-27 |
| US4946677A (en) | 1990-08-07 |
| EP0252064A3 (en) | 1989-03-15 |
| DE3782771D1 (de) | 1993-01-07 |
| DK322287D0 (da) | 1987-06-24 |
| FI872750L (fi) | 1987-12-25 |
| EP0252064A2 (de) | 1988-01-07 |
| DK173123B1 (da) | 2000-01-31 |
| ATA171686A (de) | 1990-02-15 |
| JPS635029A (ja) | 1988-01-11 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Beachey et al. | Purification and properties of M protein extracted from group A streptococci with pepsin: covalent structure of the amino terminal region of type 24 M antigen | |
| CA1341505C (en) | Intravenously administered polyclonal immunoglobulin preparation containing igm and method of manufacture | |
| CA1337333C (en) | Legionellosis vaccines and methods for their production | |
| JP2534470B2 (ja) | 免疫グロブリンｇ含有製剤及びその製造方法 | |
| JP2690215B2 (ja) | 無細胞抗百日咳菌ワクチン | |
| Boulter | Humoral and cellular aspects of the response to infection: Protection against poxviruses | |
| Baumgartner | Immunotherapy with antibodies to core lipopolysaccharide: a critical appraisal | |
| HU181957B (en) | Process for producing protein-type antygene compositions /preparates/ against caries | |
| Sjöstedt et al. | The T-cell-stimulating 17-kilodalton protein of Francisella tularensis LVS is a lipoprotein | |
| JPH09501826A (ja) | 新規な弱毒化シュードモナス・エルギノーザ株 | |
| CA1060797A (en) | Isolation of original protein endotoxin from pseudomonas aeruginosa | |
| Tizard | Macrophage-cytophilic antibodies and the functions of macrophage-bound immunoglobulins | |
| JPH09509164A (ja) | 免疫グロブリンａを用いた炎症を予防及び治療するための組成物並びに方法 | |
| US5237053A (en) | Preparation active against Pseudomonas aeruginosa infections and methods of producing them | |
| Baumgartner et al. | Immunotherapy of endotoxemia and septicemia | |
| Millican et al. | Efficacy of rabbit pseudomonas antiserum in experimental Pseudomonas aeruginosa infection | |
| Blanco et al. | The antigenic interrelationship between the endoflagella of Treponema phagedenis biotype Reiter and Treponema pallidum Nichols strain. I. Treponemicidal activity of cross-reactive endoflagellar antibodies against T. pallidum. | |
| JP2001523088A (ja) | 毒性ショック症候群の兆候を減じるのに有用なペプチド類 | |
| McCABE et al. | Common enterobacterial antigen II. Effect of immunization on challenge with heterologous Bacilli | |
| Seed | Trypanosoma gambiense and T. equiperdum: Characterization of variant specific antigens | |
| HELTING et al. | SEROTYPE DETERMINANT PROTEIN OF NEISSERIA MENINGITIDIS: Large Scale Preparation by Direct Detergent Treatment of the Bacterial Cells | |
| Meister et al. | Role of Candida albicans in granulomatous tissue reactions. I. In vitro degradation of C. albicans and immunospecificity of split products | |
| Dolby et al. | The antibody activities of 19S and 7S fractions from rabbit antisera to Bordetella pertussis | |
| CA1128860A (en) | Peptide complexes of dna-containing organisms | |
| CA1302882C (en) | Vaccines and immunoglobulin g-containing preparations active against pseudomonas aeruginosa |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |