JPH08332032A - 動物経口物用酵素剤及びその用途 - Google Patents
動物経口物用酵素剤及びその用途Info
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Classifications
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
- Y02P60/00—Technologies relating to agriculture, livestock or agroalimentary industries
- Y02P60/80—Food processing, e.g. use of renewable energies or variable speed drives in handling, conveying or stacking
- Y02P60/87—Re-use of by-products of food processing for fodder production
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- Fodder In General (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【目的】 機能性、栄養価の強化された植物繊維含有動
物経口物の提供。 【構成】 植物繊維物質中のリグニンを遊離または分解
する活性を有する酵素を含有する動物経口物用酵素剤。
該酵素剤による動物経口物の製造方法。該酵素剤を含有
する動物経口物。
物経口物の提供。 【構成】 植物繊維物質中のリグニンを遊離または分解
する活性を有する酵素を含有する動物経口物用酵素剤。
該酵素剤による動物経口物の製造方法。該酵素剤を含有
する動物経口物。
Description
【0001】
【産業上の利用分野】本発明は、植物繊維物質を原料と
して用いる食料品、飼料、薬剤等の分野に関わり、リグ
ニンを効率的に遊離または分解する酵素を含有する酵素
剤及び該酵素を利用した動物経口物の提供に関する。
して用いる食料品、飼料、薬剤等の分野に関わり、リグ
ニンを効率的に遊離または分解する酵素を含有する酵素
剤及び該酵素を利用した動物経口物の提供に関する。
【0002】
【従来技術】植物を原料として農業用資材や食料あるい
は食料加工品を製造することは古代より幅広く行われ、
その中でも植物中の植物繊維物質を様々な技術を用いて
加工する試みが多くなされてきた。例えば飼料分野にお
いては、植物繊維物質として牧草(ライグラスなど)、
穀物(とうもろこし、小麦など)、まめ類(アルファル
ファなど)等を貯蔵用飼料作物として用い、自然及び人
工的な加工技術、例えばサイレージ調整のような形でこ
れらを加工、保存して利用してきた。
は食料加工品を製造することは古代より幅広く行われ、
その中でも植物中の植物繊維物質を様々な技術を用いて
加工する試みが多くなされてきた。例えば飼料分野にお
いては、植物繊維物質として牧草(ライグラスなど)、
穀物(とうもろこし、小麦など)、まめ類(アルファル
ファなど)等を貯蔵用飼料作物として用い、自然及び人
工的な加工技術、例えばサイレージ調整のような形でこ
れらを加工、保存して利用してきた。
【0003】また一方で、近年の地球環境保護意識の高
まりと共に、稲藁、籾殻、麦藁、野菜くず、竹など農産
廃棄物や、廃糖蜜、酵母粕、発酵粕、大豆粕、おから、
果実皮、果実粕など食品廃棄物の有効利用が求められ、
その一つに飼料分野への利用が検討されている。これは
貯蔵用あるいは配合用飼料として従来より使用されてき
た牧草、穀物、まめ類に加え、この農産廃棄物や食品廃
棄物を単独、あるいは牧草類と混合して使用するもので
ある。この飼料の調製方法としては農家でサイレージ等
を用い自製することや飼料会社で予め混合等調製するこ
となど様々な方法がある。例えばサイレージ調整ではサ
イレージ内で牧草類を乳酸発酵させる。一般にpHは
4.5、時には4まで下がり、また発酵により内部が高
温になり乳酸菌以外の好ましくない酵母やバクテリア類
の生育が抑えられる。これがサイレージ調整した牧草類
の保存や嗜好性、栄養価の向上に結びついている。しか
し材料、気候、貯蔵条件により酸化による劣化や発酵不
良による栄養価の低下などを引き起こすことがある。
まりと共に、稲藁、籾殻、麦藁、野菜くず、竹など農産
廃棄物や、廃糖蜜、酵母粕、発酵粕、大豆粕、おから、
果実皮、果実粕など食品廃棄物の有効利用が求められ、
その一つに飼料分野への利用が検討されている。これは
貯蔵用あるいは配合用飼料として従来より使用されてき
た牧草、穀物、まめ類に加え、この農産廃棄物や食品廃
棄物を単独、あるいは牧草類と混合して使用するもので
ある。この飼料の調製方法としては農家でサイレージ等
を用い自製することや飼料会社で予め混合等調製するこ
となど様々な方法がある。例えばサイレージ調整ではサ
イレージ内で牧草類を乳酸発酵させる。一般にpHは
4.5、時には4まで下がり、また発酵により内部が高
温になり乳酸菌以外の好ましくない酵母やバクテリア類
の生育が抑えられる。これがサイレージ調整した牧草類
の保存や嗜好性、栄養価の向上に結びついている。しか
し材料、気候、貯蔵条件により酸化による劣化や発酵不
良による栄養価の低下などを引き起こすことがある。
【0004】また飼料価値改善の方法の一つとして酵
素、特にセルラーゼやヘミセルラーゼなど細胞壁消化酵
素を牧草類に添加して植物細胞壁の分解を促進して利用
する方法がある(特公平3−34909)。牧草の植物
細胞壁にこれらの酵素を作用させると細胞壁は分解され
細胞質中の水溶性炭水化物が外部に放出される。サイレ
ージ等の飼料調製時にはこれらの細胞質や分解された細
胞壁分は牧草中に存在、あるいは外部より添加した微生
物の生育の栄養素となり貯蔵中の牧草類の良質な乳酸発
酵に貢献すると共にその他の貯蔵牧草の更なる分解を促
進する効果がある。ただしサイレージ調整では内部は酸
性になるため添加する酵素は酸性条件下で強い活性を有
し乳酸菌との相乗作用で効果を発揮する特徴を有するも
のが使用される。このように現在の酵素処理は乳酸発酵
時の酸性条件下や温度的にも常温に近い条件など限定さ
れた一部環境条件に適応できる酵素を用いることで行わ
れているに過ぎない。
素、特にセルラーゼやヘミセルラーゼなど細胞壁消化酵
素を牧草類に添加して植物細胞壁の分解を促進して利用
する方法がある(特公平3−34909)。牧草の植物
細胞壁にこれらの酵素を作用させると細胞壁は分解され
細胞質中の水溶性炭水化物が外部に放出される。サイレ
ージ等の飼料調製時にはこれらの細胞質や分解された細
胞壁分は牧草中に存在、あるいは外部より添加した微生
物の生育の栄養素となり貯蔵中の牧草類の良質な乳酸発
酵に貢献すると共にその他の貯蔵牧草の更なる分解を促
進する効果がある。ただしサイレージ調整では内部は酸
性になるため添加する酵素は酸性条件下で強い活性を有
し乳酸菌との相乗作用で効果を発揮する特徴を有するも
のが使用される。このように現在の酵素処理は乳酸発酵
時の酸性条件下や温度的にも常温に近い条件など限定さ
れた一部環境条件に適応できる酵素を用いることで行わ
れているに過ぎない。
【0005】これらの酵素を酵素処理条件として過酷な
条件、例えばエクストルーダー、ペレッターなどのよう
な加熱型造粒機を用いた工程に使用する場合その高温条
件はこれらの酵素にとり不安定化要因となり酵素は失活
する。このような条件を克服し十分な効果を得るために
は大量の酵素を添加しなければならずコスト的な面から
も実現が難しい。特開昭63−157938では酵素を
熱に対して安定化させるために酵素とキャリアーより成
る酵素プレミックスを作製し飼料に配合することを提示
しているが、これはプレミックス作製のための新たな製
造工程を必要としコスト的に不利である。またこのプレ
ミックスにしても使用条件は65℃以下、好ましくは4
5℃以下である。
条件、例えばエクストルーダー、ペレッターなどのよう
な加熱型造粒機を用いた工程に使用する場合その高温条
件はこれらの酵素にとり不安定化要因となり酵素は失活
する。このような条件を克服し十分な効果を得るために
は大量の酵素を添加しなければならずコスト的な面から
も実現が難しい。特開昭63−157938では酵素を
熱に対して安定化させるために酵素とキャリアーより成
る酵素プレミックスを作製し飼料に配合することを提示
しているが、これはプレミックス作製のための新たな製
造工程を必要としコスト的に不利である。またこのプレ
ミックスにしても使用条件は65℃以下、好ましくは4
5℃以下である。
【0006】その他にも酵素の飼料への利用法として
は、一種または数種の酵素を飼料へ添加し給餌する方法
が知られている。例えば特公昭58−32575ではフ
ォミトプシス属またはイルペックス属に属する担子菌を
培養することにより植物組織崩壊活性をもつ複数からな
る酵素組成物を製造する方法が記載されている。特に酵
素組成物の市販品としてドリセラーゼ(協和発酵
(株))があるがこれはセルラーゼ、ラミナリナーゼ、
キシラナーゼ、ペクチナーゼ、アミラーゼ、プロテアー
ゼ等を含む複数酵素で構成されることが特徴でありこれ
ら複数酵素の相互作用により効果が発揮される。しか
し、個々の酵素につき単独でどのような効果があるかは
不明である。また入来ら(Bull.Azabu Un
iv.,Vet.Med.11,45−49(199
0))によれば複数酵素からなるドリセラーゼはリグニ
ン含量の多い植物繊維物質、例えば稲藁では酵素添加効
果が得られない。
は、一種または数種の酵素を飼料へ添加し給餌する方法
が知られている。例えば特公昭58−32575ではフ
ォミトプシス属またはイルペックス属に属する担子菌を
培養することにより植物組織崩壊活性をもつ複数からな
る酵素組成物を製造する方法が記載されている。特に酵
素組成物の市販品としてドリセラーゼ(協和発酵
(株))があるがこれはセルラーゼ、ラミナリナーゼ、
キシラナーゼ、ペクチナーゼ、アミラーゼ、プロテアー
ゼ等を含む複数酵素で構成されることが特徴でありこれ
ら複数酵素の相互作用により効果が発揮される。しか
し、個々の酵素につき単独でどのような効果があるかは
不明である。また入来ら(Bull.Azabu Un
iv.,Vet.Med.11,45−49(199
0))によれば複数酵素からなるドリセラーゼはリグニ
ン含量の多い植物繊維物質、例えば稲藁では酵素添加効
果が得られない。
【0007】また複数酵素製剤の場合、例えばセルラー
ゼを含む場合には繊維物質中のセルロースを強く分解す
るために飼料価値が低下する。つまりセルラーゼで分解
されるセルロースは家畜にとり飼料の主要な栄養要素で
ありそのエネルギー源としての価値が減少する。また特
に牛の第1胃のようなルーメン組織において反すうの良
好な維持にはある程度まとまった量の繊維物質が必要だ
がその主要構成成分であるセルロースを給餌前に分解し
てしまうことは飼料の機能性を損ない、高品質飼料とは
相反する。またプロテアーゼを含むことは他の有用な酵
素の分解につながるので酵素組成物としての価値が低減
し、リパーゼを含むことは高エネルギー源である脂質を
分解するので飼料の栄養価値を損なう。また、酵素を単
独で用いた例としては特表平5−501657がある
が、これは十分な効果を得るために50000U/kg
(飼料重量)以上という大量のキシラナーゼを加える必
要があった。
ゼを含む場合には繊維物質中のセルロースを強く分解す
るために飼料価値が低下する。つまりセルラーゼで分解
されるセルロースは家畜にとり飼料の主要な栄養要素で
ありそのエネルギー源としての価値が減少する。また特
に牛の第1胃のようなルーメン組織において反すうの良
好な維持にはある程度まとまった量の繊維物質が必要だ
がその主要構成成分であるセルロースを給餌前に分解し
てしまうことは飼料の機能性を損ない、高品質飼料とは
相反する。またプロテアーゼを含むことは他の有用な酵
素の分解につながるので酵素組成物としての価値が低減
し、リパーゼを含むことは高エネルギー源である脂質を
分解するので飼料の栄養価値を損なう。また、酵素を単
独で用いた例としては特表平5−501657がある
が、これは十分な効果を得るために50000U/kg
(飼料重量)以上という大量のキシラナーゼを加える必
要があった。
【0008】各種のイネ科作物やマメ科作物など植物中
の難分解性植物繊維を加水分解して飼料や糖化発酵物に
利用する試みは先に述べたように飼料分野ではサイレー
ジ調整、その他食品分野では発酵など従来から種々行わ
れてきた。しかしこれらの植物繊維は一般に頑強な構造
をしておりその中には結晶性のセルロースやリグニン、
灰分が混在しているために特にリグニン周辺の構造は一
般に分解されにくかった。これらの点を改善するために
特開昭49−117255、特開昭53−69178、
特公昭60−13659、特公平−29329のような
物理的あるいは化学的手法がある。植物繊維物質の構造
を破壊し含有セルロースを膨潤させてその非結晶部を露
出させたり、植物繊維内部に包埋されているリグニン等
を可溶化させるために物理的処理や化学的処理などがそ
の対象植物や利用法に応じ施されてきた。しかしこれら
の方法は高温高圧、酸アルカリ、有機溶媒等の条件を必
要とし、また処理に際して高いエネルギー消費、潜在的
危険性や複雑な工程を伴う欠点を有している。これに対
し酵素は比較的温和な条件下でエネルギー消費を低く抑
えることができるが、リグニンを効率的に遊離あるいは
分解できる酵素が見いだされていなかった。
の難分解性植物繊維を加水分解して飼料や糖化発酵物に
利用する試みは先に述べたように飼料分野ではサイレー
ジ調整、その他食品分野では発酵など従来から種々行わ
れてきた。しかしこれらの植物繊維は一般に頑強な構造
をしておりその中には結晶性のセルロースやリグニン、
灰分が混在しているために特にリグニン周辺の構造は一
般に分解されにくかった。これらの点を改善するために
特開昭49−117255、特開昭53−69178、
特公昭60−13659、特公平−29329のような
物理的あるいは化学的手法がある。植物繊維物質の構造
を破壊し含有セルロースを膨潤させてその非結晶部を露
出させたり、植物繊維内部に包埋されているリグニン等
を可溶化させるために物理的処理や化学的処理などがそ
の対象植物や利用法に応じ施されてきた。しかしこれら
の方法は高温高圧、酸アルカリ、有機溶媒等の条件を必
要とし、また処理に際して高いエネルギー消費、潜在的
危険性や複雑な工程を伴う欠点を有している。これに対
し酵素は比較的温和な条件下でエネルギー消費を低く抑
えることができるが、リグニンを効率的に遊離あるいは
分解できる酵素が見いだされていなかった。
【0009】植物繊維物質中のリグニンを分解する方法
の一つには白色腐朽菌などの微生物を利用する方法もあ
るが、微生物によるリグニンの分解は比較的長期間を要
するため、迅速にかつ効果的にリグニンを遊離したり、
分解することはできない。また、従来リグニンを多く含
むような植物体は消化効率が劣ることからその多くが飼
料として利用されない傾向にあった。しかし最近の畜産
分野を取り巻く状況を見ると、家畜の生産性が限界に近
づきつつあり、また環境対応の観点から特定の地域や国
では家畜用飼料の種類や量を制限したり、家畜の排泄物
あるいはその中の成分(窒素や燐など)に対し規制が設
けられるなどその環境は年々厳しさを増している。その
ためコスト面、栄養面より動物飼料生産のより高い効率
が求められる傾向にあり、従来品を凌ぐ高品質飼料組成
物の登場が世界中で強く望まれている。
の一つには白色腐朽菌などの微生物を利用する方法もあ
るが、微生物によるリグニンの分解は比較的長期間を要
するため、迅速にかつ効果的にリグニンを遊離したり、
分解することはできない。また、従来リグニンを多く含
むような植物体は消化効率が劣ることからその多くが飼
料として利用されない傾向にあった。しかし最近の畜産
分野を取り巻く状況を見ると、家畜の生産性が限界に近
づきつつあり、また環境対応の観点から特定の地域や国
では家畜用飼料の種類や量を制限したり、家畜の排泄物
あるいはその中の成分(窒素や燐など)に対し規制が設
けられるなどその環境は年々厳しさを増している。その
ためコスト面、栄養面より動物飼料生産のより高い効率
が求められる傾向にあり、従来品を凌ぐ高品質飼料組成
物の登場が世界中で強く望まれている。
【0010】例えば、乳牛では高泌乳化が進みその分高
栄養価の飼料給与を必要とするために濃厚飼料多給の飼
養が増えている。その結果泌乳量は増大したが濃厚飼料
多給に起因する飼育上のトラブルが多発し粗飼料給餌法
への転換の機運が高まっている。しかし粗飼料は従来の
給与方法によっていただけでは濃厚飼料と同等の効果を
あげることが困難でもある。そこで飼料効率の改善、消
化効率の向上、乳質改善などのために様々な酵素を飼料
に添加し給餌することが一部行われている。しかしその
方法においてもまだ飼料中に多量の非消化画分が存在し
飼料消化率あるいは飼料効率として改善の余地が多大に
存在している。
栄養価の飼料給与を必要とするために濃厚飼料多給の飼
養が増えている。その結果泌乳量は増大したが濃厚飼料
多給に起因する飼育上のトラブルが多発し粗飼料給餌法
への転換の機運が高まっている。しかし粗飼料は従来の
給与方法によっていただけでは濃厚飼料と同等の効果を
あげることが困難でもある。そこで飼料効率の改善、消
化効率の向上、乳質改善などのために様々な酵素を飼料
に添加し給餌することが一部行われている。しかしその
方法においてもまだ飼料中に多量の非消化画分が存在し
飼料消化率あるいは飼料効率として改善の余地が多大に
存在している。
【0011】一方食品、薬剤分野においては、近年植物
繊維物質中の食物繊維(ダイエタリーファイバー)が生
体機能維持の面で非常に有効であることが認められるよ
うになりこれを機能性を有する物質として捉え積極的に
使用する試みが多くなされるようになってきた。特に飲
料、菓子などに食物繊維を加えた製品の開発は目ざまし
いものがある。また特開平3−227933にあるよう
に従来は飼料用途が主であった例えば米糠、小麦フスマ
等の有用成分を抽出しこれを一薬剤成分として利用する
ことも行われるようになったが、これを加工工程を経る
ことなく直接利用する方法の開発が望まれている。
繊維物質中の食物繊維(ダイエタリーファイバー)が生
体機能維持の面で非常に有効であることが認められるよ
うになりこれを機能性を有する物質として捉え積極的に
使用する試みが多くなされるようになってきた。特に飲
料、菓子などに食物繊維を加えた製品の開発は目ざまし
いものがある。また特開平3−227933にあるよう
に従来は飼料用途が主であった例えば米糠、小麦フスマ
等の有用成分を抽出しこれを一薬剤成分として利用する
ことも行われるようになったが、これを加工工程を経る
ことなく直接利用する方法の開発が望まれている。
【0012】
【発明が解決しようとする課題】本発明は天然物、農産
・食品加工業における加工物、または農産廃棄物や食品
廃棄物のうちリグニンを含む植物繊維物質からなる物質
を食料品、飼料、薬剤等及びその原料として有効に用い
られるような形状に導く方法の提供を目的とするもので
ある。植物繊維物質中のリグニンは一般にヘミセルロー
スと強固な結合をなしているため、その遊離は従来技術
では非常に困難である。また物理的あるいは化学的手法
は高いエネルギー消費、潜在的危険性や複雑な工程を伴
う。これらを比較的温和な条件下で処理してエネルギー
消費を低く抑え、且つ効果は従来以上にして処理コスト
を低減させることが求められている。従来の植物繊維物
質の効率的処理に用いられる酵素剤は複数酵素の組成物
であるものが多く、複数酵素の相互作用による相乗効果
の果たす役割が大きい。しかし一方で望ましくない酵素
成分を含むことでその価値を低減させることも知られて
いる。また加工する際、使用機器によっては熱負荷がか
かり一般の酵素は失活する。現在多くの酵素はその使用
温度が60℃程度以下に制限され高温工程に使用できな
い。適用pHも現在はサイレージに使用されている酵素
のように酸性側で強い活性を有しているものが多いが、
酵素の適用は中性あるいはアルカリ性条件下で行うこと
が望ましい場合もある。
・食品加工業における加工物、または農産廃棄物や食品
廃棄物のうちリグニンを含む植物繊維物質からなる物質
を食料品、飼料、薬剤等及びその原料として有効に用い
られるような形状に導く方法の提供を目的とするもので
ある。植物繊維物質中のリグニンは一般にヘミセルロー
スと強固な結合をなしているため、その遊離は従来技術
では非常に困難である。また物理的あるいは化学的手法
は高いエネルギー消費、潜在的危険性や複雑な工程を伴
う。これらを比較的温和な条件下で処理してエネルギー
消費を低く抑え、且つ効果は従来以上にして処理コスト
を低減させることが求められている。従来の植物繊維物
質の効率的処理に用いられる酵素剤は複数酵素の組成物
であるものが多く、複数酵素の相互作用による相乗効果
の果たす役割が大きい。しかし一方で望ましくない酵素
成分を含むことでその価値を低減させることも知られて
いる。また加工する際、使用機器によっては熱負荷がか
かり一般の酵素は失活する。現在多くの酵素はその使用
温度が60℃程度以下に制限され高温工程に使用できな
い。適用pHも現在はサイレージに使用されている酵素
のように酸性側で強い活性を有しているものが多いが、
酵素の適用は中性あるいはアルカリ性条件下で行うこと
が望ましい場合もある。
【0013】
【課題を解決するための手段】本発明では上記の課題を
解決すべく鋭意検討を重ねた結果、植物繊維を含有する
動物経口物を製造するにあたりリグニンを遊離または分
解する活性を有する酵素を含む酵素剤が有効であり、さ
らにその酵素の耐性、特に耐熱性が優れ、且つ作用pH
範囲を広域に有する場合に驚くべきほどの効果を発揮す
ることを見いだし発明を完成するに至った。すなわち本
発明は以下のものを提供するものである。
解決すべく鋭意検討を重ねた結果、植物繊維を含有する
動物経口物を製造するにあたりリグニンを遊離または分
解する活性を有する酵素を含む酵素剤が有効であり、さ
らにその酵素の耐性、特に耐熱性が優れ、且つ作用pH
範囲を広域に有する場合に驚くべきほどの効果を発揮す
ることを見いだし発明を完成するに至った。すなわち本
発明は以下のものを提供するものである。
【0014】1) 植物繊維物質中のリグニンを遊離ま
たは分解する活性を有する酵素を含有する動物経口物用
酵素剤。 2) 少なくとも1種のヘミセルラーゼを含む前記1)
記載の動物経口物用酵素剤。 3) ヘミセルラーゼがキシラナーゼ、マンナナーゼま
たはペクチナーゼである前記2)記載の動物経口物用酵
素剤。
たは分解する活性を有する酵素を含有する動物経口物用
酵素剤。 2) 少なくとも1種のヘミセルラーゼを含む前記1)
記載の動物経口物用酵素剤。 3) ヘミセルラーゼがキシラナーゼ、マンナナーゼま
たはペクチナーゼである前記2)記載の動物経口物用酵
素剤。
【0015】4) 少なくとも1種のリグニン分解酵素
を含む前記1)記載の動物経口物用酵素剤。 5) リグニン分解酵素がリグニナーゼ、マンガン要求
ペルオキシダーゼまたはラッカーゼである前記4)記載
の動物経口物用酵素剤。 6) 植物繊維物質中のリグニンを遊離または分解する
活性を有する酵素が耐熱性を有する酵素である前記1)
ないし5)記載の動物経口物用酵素剤。
を含む前記1)記載の動物経口物用酵素剤。 5) リグニン分解酵素がリグニナーゼ、マンガン要求
ペルオキシダーゼまたはラッカーゼである前記4)記載
の動物経口物用酵素剤。 6) 植物繊維物質中のリグニンを遊離または分解する
活性を有する酵素が耐熱性を有する酵素である前記1)
ないし5)記載の動物経口物用酵素剤。
【0016】7) 植物繊維物質中のリグニンを遊離ま
たは分解する活性を有する酵素がバチルス属細菌由来の
酵素である前記1)ないし6)記載の動物経口物用酵素
剤。 8) 植物繊維物質中のリグニンを遊離または分解する
活性を有する酵素がバチルスsp.SD902(FER
M BP−4508)、バチルスsp.SD401(F
ERM P−10527)、バチルスsp.SD402
(FERM BP−3431)、バチルスsp.SD4
03(FERM P−11647)、バチルスsp.S
D516(FERM P−10427)、バチルスs
p.SD771(FERM P−11455)、または
バチルスsp.SD772(FERMP−11456)
から得ることの出来る酵素である前記1)ないし前記
6)記載の動物経口物用酵素剤。
たは分解する活性を有する酵素がバチルス属細菌由来の
酵素である前記1)ないし6)記載の動物経口物用酵素
剤。 8) 植物繊維物質中のリグニンを遊離または分解する
活性を有する酵素がバチルスsp.SD902(FER
M BP−4508)、バチルスsp.SD401(F
ERM P−10527)、バチルスsp.SD402
(FERM BP−3431)、バチルスsp.SD4
03(FERM P−11647)、バチルスsp.S
D516(FERM P−10427)、バチルスs
p.SD771(FERM P−11455)、または
バチルスsp.SD772(FERMP−11456)
から得ることの出来る酵素である前記1)ないし前記
6)記載の動物経口物用酵素剤。
【0017】9) 前記1)ないし前記8)記載の動物
経口物用酵素剤及び植物繊維を含むことを特徴とする動
物経口物。 10) 動物経口物用酵素剤のセルロース分解活性が植
物繊維1kgあたり1U以下である前記9)記載の動物
経口物。 11) 前記1)ないし前記8)記載の動物経口物用酵
素剤及び植物繊維を含むことを特徴とする飼料用組成
物。 12) 動物経口物用酵素剤のセルロース分解活性が植
物繊維1kgあたり1U以下である前記11)記載の飼
料用組成物。
経口物用酵素剤及び植物繊維を含むことを特徴とする動
物経口物。 10) 動物経口物用酵素剤のセルロース分解活性が植
物繊維1kgあたり1U以下である前記9)記載の動物
経口物。 11) 前記1)ないし前記8)記載の動物経口物用酵
素剤及び植物繊維を含むことを特徴とする飼料用組成
物。 12) 動物経口物用酵素剤のセルロース分解活性が植
物繊維1kgあたり1U以下である前記11)記載の飼
料用組成物。
【0018】13) 前記1)ないし前記8)記載の動
物経口物用酵素剤で植物繊維物質の少なくとも1%に相
当するリグニンを遊離または分解する工程を含むことを
特徴とする動物経口物の製造方法。 14) 前記1)ないし前記8)記載の動物経口物用酵
素剤で植物繊維物質の少なくとも1%に相当するリグニ
ンを遊離または分解する工程を含むことを特徴とする飼
料用組成物の製造方法。 15) 前記1)ないし前記8)記載の動物経口物用酵
素剤と植物繊維を混合した後、加熱型機器で70℃以上
に加熱する工程を含むことを特徴とする飼料用組成物の
製造方法。
物経口物用酵素剤で植物繊維物質の少なくとも1%に相
当するリグニンを遊離または分解する工程を含むことを
特徴とする動物経口物の製造方法。 14) 前記1)ないし前記8)記載の動物経口物用酵
素剤で植物繊維物質の少なくとも1%に相当するリグニ
ンを遊離または分解する工程を含むことを特徴とする飼
料用組成物の製造方法。 15) 前記1)ないし前記8)記載の動物経口物用酵
素剤と植物繊維を混合した後、加熱型機器で70℃以上
に加熱する工程を含むことを特徴とする飼料用組成物の
製造方法。
【0019】以下本発明を詳細に説明する。なお本明細
書において、動物経口物とは、食料品、飼料、薬剤な
ど、人、魚類、鳥類等を含めた動物の口を経て摂取され
るもの及びその前駆体を表す。動物経口物の1つである
飼料の栄養的価値はその構成要素の栄養価と消化吸収率
より定められる。構成要素は植物体の細胞内容物質(C
C)と細胞壁物質(CW)に分類され、細胞壁物質の有
機物はさらに消化性の高い分画(Oa)と低い分画(O
b)に分類される。例えば反すう動物はCC、Oaをほ
ぼ90〜100%近く消化するが、Obの消化率は低
い。これはそのルーメン内微生物により植物繊維中のセ
ルロース画分についてはその消化性が良いが、難消化物
であるリグニン及びそれに付随するヘミセルロースにつ
いては消化能力が低いことと関連している。このように
消化率はリグニン含量と負の相関にあるとされ、近藤
(東北農試研報85,103−144(1992))に
よれば、リグニン含量が約1%増加するに従い消化率は
約5%低下する。
書において、動物経口物とは、食料品、飼料、薬剤な
ど、人、魚類、鳥類等を含めた動物の口を経て摂取され
るもの及びその前駆体を表す。動物経口物の1つである
飼料の栄養的価値はその構成要素の栄養価と消化吸収率
より定められる。構成要素は植物体の細胞内容物質(C
C)と細胞壁物質(CW)に分類され、細胞壁物質の有
機物はさらに消化性の高い分画(Oa)と低い分画(O
b)に分類される。例えば反すう動物はCC、Oaをほ
ぼ90〜100%近く消化するが、Obの消化率は低
い。これはそのルーメン内微生物により植物繊維中のセ
ルロース画分についてはその消化性が良いが、難消化物
であるリグニン及びそれに付随するヘミセルロースにつ
いては消化能力が低いことと関連している。このように
消化率はリグニン含量と負の相関にあるとされ、近藤
(東北農試研報85,103−144(1992))に
よれば、リグニン含量が約1%増加するに従い消化率は
約5%低下する。
【0020】植物体の組成は多岐にわたるが、主に、セ
ルロース、ヘミセルロース、リグニンの3大成分から成
り立っている。その他、油脂分や少量のタンパク質、シ
リカなどの灰分が含まれる。これら構成成分がお互いに
どのような状態で結合しているかは必ずしもその全容が
明らかなわけではないが一般には主としてヘミセルロー
スがリグニンと強固な結合をなしその遊離は従来技術で
は非常に困難とされてきた。例として、ある麦藁のリグ
ニンについては、その麦藁から抽出したアルカリ抽出リ
グニン、微粉砕抽出リグニン、酵素抽出リグニンの3種
類のリグニンを比較検討した結果、麦藁中のリグニンは
ヘミセルロースであるアラビノグルクロキシランと強固
な結合をしていてその結合もフェルラ酸を介した強固な
架橋結合であると推定されている。
ルロース、ヘミセルロース、リグニンの3大成分から成
り立っている。その他、油脂分や少量のタンパク質、シ
リカなどの灰分が含まれる。これら構成成分がお互いに
どのような状態で結合しているかは必ずしもその全容が
明らかなわけではないが一般には主としてヘミセルロー
スがリグニンと強固な結合をなしその遊離は従来技術で
は非常に困難とされてきた。例として、ある麦藁のリグ
ニンについては、その麦藁から抽出したアルカリ抽出リ
グニン、微粉砕抽出リグニン、酵素抽出リグニンの3種
類のリグニンを比較検討した結果、麦藁中のリグニンは
ヘミセルロースであるアラビノグルクロキシランと強固
な結合をしていてその結合もフェルラ酸を介した強固な
架橋結合であると推定されている。
【0021】(酵素)本発明に使用する酵素はリグニン
を上記の強固な構造から遊離またはリグニン自体を分解
するものである。前者は一般に原料の植物繊維組織中の
ヘミセルロースを十分に分解できれば抱埋された形態を
取るリグニンが容易に遊離されるようになる。これには
キシラナーゼ、マンナナーゼ、ペクチナーゼ等のヘミセ
ルラーゼを用いることが出来る。またこの場合主たるヘ
ミセルロースはキシロースであることが多いのでその分
解酵素としてキシラナーゼを用いることがより好まし
い。キシラナーゼは主としてβ−1,4結合キシロース
から成る多糖キシランを加水分解してその構成成分であ
るキシロースや低分子のキシロオリゴ糖を生成する作用
を有する酵素で、動植物中に広く存在している。微生物
にもキシラナーゼを産生するものがありこれまでに酵
母、カビ、細菌、放線菌などの酵素が知られている。
を上記の強固な構造から遊離またはリグニン自体を分解
するものである。前者は一般に原料の植物繊維組織中の
ヘミセルロースを十分に分解できれば抱埋された形態を
取るリグニンが容易に遊離されるようになる。これには
キシラナーゼ、マンナナーゼ、ペクチナーゼ等のヘミセ
ルラーゼを用いることが出来る。またこの場合主たるヘ
ミセルロースはキシロースであることが多いのでその分
解酵素としてキシラナーゼを用いることがより好まし
い。キシラナーゼは主としてβ−1,4結合キシロース
から成る多糖キシランを加水分解してその構成成分であ
るキシロースや低分子のキシロオリゴ糖を生成する作用
を有する酵素で、動植物中に広く存在している。微生物
にもキシラナーゼを産生するものがありこれまでに酵
母、カビ、細菌、放線菌などの酵素が知られている。
【0022】また後者はリグニンを直接分解し、複合体
構造の解体を目的とし、リグニナーゼ、マンガン要求ペ
ルオキシダーゼ、ラッカーゼ等のリグニン分解酵素を用
いることが出来る。また植物体は生育時期によりその構
成成分が変化することが知られており、場合によっては
それに応じ他の分解酵素を添加することが望ましい。
構造の解体を目的とし、リグニナーゼ、マンガン要求ペ
ルオキシダーゼ、ラッカーゼ等のリグニン分解酵素を用
いることが出来る。また植物体は生育時期によりその構
成成分が変化することが知られており、場合によっては
それに応じ他の分解酵素を添加することが望ましい。
【0023】本発明で用いる酵素は高温、長時間といっ
た過酷な条件を経ても酵素活性が十分残存する特性を有
することが望ましい。このことにより、加熱型機器での
使用、処理が可能となる。例えば、成型のためにペレッ
トマシーンやエクストルーダー、あるいは乾燥機等の機
器を用いることもできる。このような機器を使用する場
合、処理温度は0〜120℃、一般には60℃以上であ
る。このような耐熱性酵素は動植物、微生物由来の酵素
で、少なくとも60℃、24時間処理した後に酵素活性
が50%以上残存するような酵素、好ましくは同条件で
70%以上の酵素、あるいは70℃、10分間処理後に
酵素活性が60%以上残存するような酵素、好ましくは
同条件で80%以上残存するような酵素、例えば、バチ
ルスsp.SD771(受託番号FERM P−114
55)、SD772(受託番号FERM P−1145
6)、SD902(受託番号FERMBP−4508)
などの培養産物中に見いだされるような酵素(特開平6
−261750)である。またこれら酵素の中には至適
温度が65℃以上のものがあり、60℃より高い温度で
の処理において顕著な効果を発揮できる。
た過酷な条件を経ても酵素活性が十分残存する特性を有
することが望ましい。このことにより、加熱型機器での
使用、処理が可能となる。例えば、成型のためにペレッ
トマシーンやエクストルーダー、あるいは乾燥機等の機
器を用いることもできる。このような機器を使用する場
合、処理温度は0〜120℃、一般には60℃以上であ
る。このような耐熱性酵素は動植物、微生物由来の酵素
で、少なくとも60℃、24時間処理した後に酵素活性
が50%以上残存するような酵素、好ましくは同条件で
70%以上の酵素、あるいは70℃、10分間処理後に
酵素活性が60%以上残存するような酵素、好ましくは
同条件で80%以上残存するような酵素、例えば、バチ
ルスsp.SD771(受託番号FERM P−114
55)、SD772(受託番号FERM P−1145
6)、SD902(受託番号FERMBP−4508)
などの培養産物中に見いだされるような酵素(特開平6
−261750)である。またこれら酵素の中には至適
温度が65℃以上のものがあり、60℃より高い温度で
の処理において顕著な効果を発揮できる。
【0024】酵素の製造方法としては、微生物を用いる
場合、培養方法としては液体培養、固体培養等の通常の
細菌培養方法を用いることが出来る。経済性の見地から
すれば好気的に液体培養する方法が好ましく、その例と
しては好気条件下での通気撹拌培養法や振とう培養法が
挙げられる。その培地としては、用いる菌株が増殖し得
るものなら任意の培地成分が使えるが、例えば、炭素源
としては同化できる炭素化合物またはこれを含有するも
のであればよく、例えばキシラナーゼの製造であれば、
各種キシラン、小麦ふすま、パルプ廃液、穀物糖化粕あ
るいは稲藁等のキシランあるいはキシラン系多糖を含む
各種原料あるいはグルコース、澱粉もしくは液化澱粉等
の澱粉水解物、糖蜜等の糖類を単独あるいは組み合わせ
て用いることが出来る。
場合、培養方法としては液体培養、固体培養等の通常の
細菌培養方法を用いることが出来る。経済性の見地から
すれば好気的に液体培養する方法が好ましく、その例と
しては好気条件下での通気撹拌培養法や振とう培養法が
挙げられる。その培地としては、用いる菌株が増殖し得
るものなら任意の培地成分が使えるが、例えば、炭素源
としては同化できる炭素化合物またはこれを含有するも
のであればよく、例えばキシラナーゼの製造であれば、
各種キシラン、小麦ふすま、パルプ廃液、穀物糖化粕あ
るいは稲藁等のキシランあるいはキシラン系多糖を含む
各種原料あるいはグルコース、澱粉もしくは液化澱粉等
の澱粉水解物、糖蜜等の糖類を単独あるいは組み合わせ
て用いることが出来る。
【0025】また例えば、窒素源としては同化できる窒
素化合物またはこれを含有するものであればよく、有機
窒素含有物としては各種アミノ酸、コーンスティープリ
カー、麦芽エキス、ペプトン、大豆粉、脱脂大豆粉等
が、また無機窒素化合物としては、塩化アンモニウム、
硫酸アンモニウム等のアンモニウム塩等を単独あるいは
組み合わせて用いることが出来る。その他、菌の生育及
び酵素生産に必要な各種の有機物や無機物またはこれを
含有するもの、例えばリン酸塩、マグネシウム塩、カル
シウム塩、マンガン塩等の塩類、ビタミン類、酵母エキ
ス等を適宜添加することもできる。
素化合物またはこれを含有するものであればよく、有機
窒素含有物としては各種アミノ酸、コーンスティープリ
カー、麦芽エキス、ペプトン、大豆粉、脱脂大豆粉等
が、また無機窒素化合物としては、塩化アンモニウム、
硫酸アンモニウム等のアンモニウム塩等を単独あるいは
組み合わせて用いることが出来る。その他、菌の生育及
び酵素生産に必要な各種の有機物や無機物またはこれを
含有するもの、例えばリン酸塩、マグネシウム塩、カル
シウム塩、マンガン塩等の塩類、ビタミン類、酵母エキ
ス等を適宜添加することもできる。
【0026】培養温度、培養pHは菌株が生育できる温
度範囲であれば良いが一般には10〜90℃、pH3〜
11の範囲が用いられる。培養時間は各々の酵素が蓄積
される時間であれば良いが、好ましくはその蓄積量が最
高に達したときに培養を終了する。酵素としてはこの培
養ブロスを用いても良いが、精製工程を経た粗精製品あ
るいは精製品を用いても良い。精製工程としては遠心分
離、濾過、沈澱、濃縮、乾燥等の操作があり、適宜選択
して用いることが出来る。
度範囲であれば良いが一般には10〜90℃、pH3〜
11の範囲が用いられる。培養時間は各々の酵素が蓄積
される時間であれば良いが、好ましくはその蓄積量が最
高に達したときに培養を終了する。酵素としてはこの培
養ブロスを用いても良いが、精製工程を経た粗精製品あ
るいは精製品を用いても良い。精製工程としては遠心分
離、濾過、沈澱、濃縮、乾燥等の操作があり、適宜選択
して用いることが出来る。
【0027】また、植物を用いる場合は、植物体全体あ
るいはその一部器官からの抽出や、液体培養・固体培養
等の植物培養方法により得た培養液または培養細胞から
の抽出で酵素を得ることが出来る。動物であれば、その
一部臓器・器官からの抽出や動物細胞培養の培養液より
目的の酵素を得ることが出来る。培養に用いる培地はそ
の培養細胞が増殖し目的の酵素を生産するようなものな
ら任意の培地を用いることが出来る。またこれらの抽出
に関しては、一般には氷冷のような低温下で緩衝液を添
加して組織をホモジナイズし、遠心分離した上澄または
フィルター濾過した濾過液を粗精製酵素溶液として使用
する。さらにこれに遠心分離、濾過、沈澱、濃縮、乾燥
などの操作を適宜選択して精製し、その精製酵素溶液を
使用することもできる。
るいはその一部器官からの抽出や、液体培養・固体培養
等の植物培養方法により得た培養液または培養細胞から
の抽出で酵素を得ることが出来る。動物であれば、その
一部臓器・器官からの抽出や動物細胞培養の培養液より
目的の酵素を得ることが出来る。培養に用いる培地はそ
の培養細胞が増殖し目的の酵素を生産するようなものな
ら任意の培地を用いることが出来る。またこれらの抽出
に関しては、一般には氷冷のような低温下で緩衝液を添
加して組織をホモジナイズし、遠心分離した上澄または
フィルター濾過した濾過液を粗精製酵素溶液として使用
する。さらにこれに遠心分離、濾過、沈澱、濃縮、乾燥
などの操作を適宜選択して精製し、その精製酵素溶液を
使用することもできる。
【0028】(酵素活性の測定方法)キシラナーゼの場
合、その酵素溶液のキシラン分解活性の有無について
は、簡便法として以下に示すような方法で調べることが
できる。即ち、任意のpHに調整した水溶液に市販のオ
ート麦由来のキシラン(SIGMA社製)が1重量%の
濃度になるように懸濁し、寒天を2重量%になるように
加えた後、90〜100℃まで加熱して寒天プレートを
作製する。酵素溶液を適当に希釈して、あるいは濃縮し
て寒天プレートにスポットした後、任意の温度で保温す
る。24時間経過後に寒天プレートを観察し、スポット
周辺にクリアゾーンが認められるならばキシラン分解活
性が有すると判定することが可能である。他の酵素につ
いても適当な基質を加えた寒天プレートを作製すれば同
様にスポット周辺のクリアゾーンの有無でその分解活性
を判定することができる。
合、その酵素溶液のキシラン分解活性の有無について
は、簡便法として以下に示すような方法で調べることが
できる。即ち、任意のpHに調整した水溶液に市販のオ
ート麦由来のキシラン(SIGMA社製)が1重量%の
濃度になるように懸濁し、寒天を2重量%になるように
加えた後、90〜100℃まで加熱して寒天プレートを
作製する。酵素溶液を適当に希釈して、あるいは濃縮し
て寒天プレートにスポットした後、任意の温度で保温す
る。24時間経過後に寒天プレートを観察し、スポット
周辺にクリアゾーンが認められるならばキシラン分解活
性が有すると判定することが可能である。他の酵素につ
いても適当な基質を加えた寒天プレートを作製すれば同
様にスポット周辺のクリアゾーンの有無でその分解活性
を判定することができる。
【0029】キシラナーゼ活性測定方法は、基質として
50mM酢酸ナトリウム(pH5.0)中のオートスペ
ルトキシラン(シグマ社)を用い、39℃、pH3.5
で1分間に1μmolのキシロースを生成する酵素量を
1単位(U)としたが、本発明で用いる酵素の中には高
温領域での性質にその特徴を有するものが多く、酵素に
よっては特開平6−261750に準じ、基質として
0.1Mリン酸緩衝液(pH7.0)中のバーチキシラ
ン(カバ由来キシラン)を用い、50℃、pH7.0で
反応させた後、生成した還元糖を公知の方法である3,
5−ジニトロサリチル酸(DNS)で測定し、1分間に
1μmolのキシロースを生成する酵素量を1単位(S
U)とした。
50mM酢酸ナトリウム(pH5.0)中のオートスペ
ルトキシラン(シグマ社)を用い、39℃、pH3.5
で1分間に1μmolのキシロースを生成する酵素量を
1単位(U)としたが、本発明で用いる酵素の中には高
温領域での性質にその特徴を有するものが多く、酵素に
よっては特開平6−261750に準じ、基質として
0.1Mリン酸緩衝液(pH7.0)中のバーチキシラ
ン(カバ由来キシラン)を用い、50℃、pH7.0で
反応させた後、生成した還元糖を公知の方法である3,
5−ジニトロサリチル酸(DNS)で測定し、1分間に
1μmolのキシロースを生成する酵素量を1単位(S
U)とした。
【0030】セルロース分解活性の測定方法は次のよう
に行う。カルボキシメチルセルラーゼ(CMC)活性
は、基質として0.05M炭酸ナトリウム−0.05M
ホウ酸−塩化カリウム緩衝液(pH9.0)中のCMC
を用い、30℃、pH9で反応させた後、生成した還元
糖をDNSで測定し、1分間に1μmolのグルコース
に相当する還元糖を生成する酵素量を1Uとした。ま
た、アビセラーゼ活性は基質として0.05M炭酸ナト
リウム−0.05Mホウ酸−塩化カリウム緩衝液(pH
9.0)中のアビセル(メルク社)を用い、30℃、p
H9で反応させた後、生成した還元糖をDNSで測定
し、1分間に1μmolのグルコースに相当する還元糖
を生成する酵素量を1Uとした。
に行う。カルボキシメチルセルラーゼ(CMC)活性
は、基質として0.05M炭酸ナトリウム−0.05M
ホウ酸−塩化カリウム緩衝液(pH9.0)中のCMC
を用い、30℃、pH9で反応させた後、生成した還元
糖をDNSで測定し、1分間に1μmolのグルコース
に相当する還元糖を生成する酵素量を1Uとした。ま
た、アビセラーゼ活性は基質として0.05M炭酸ナト
リウム−0.05Mホウ酸−塩化カリウム緩衝液(pH
9.0)中のアビセル(メルク社)を用い、30℃、p
H9で反応させた後、生成した還元糖をDNSで測定
し、1分間に1μmolのグルコースに相当する還元糖
を生成する酵素量を1Uとした。
【0031】(動物経口物用酵素剤)本発明の動物経口
物改質用酵素剤は前記酵素の少なくとも1種を含むもの
であり、その酵素の純度は状況に応じて選択すれば良
い。また、他の酵素を混合することも出来、それらを同
時に作用させる形態あるいは徐放性のような形で順次作
用させる形態にしても良い。例えば、植物繊維物質に含
まれる油脂分やタンパク質を分解するために、油脂分解
酵素やタンパク質分解酵素を混合することができる。し
かし逆に効果を減少させることもあるのでその条件は十
分検討する必要がある。例えばセルロース分解酵素の場
合は植物体の繊維自体を分解し栄養素を損なうこともあ
るので好ましくはないが、使用時に植物繊維物質1kg
当り1U以下の範囲になるように混合して部分的あるい
は極微小に作用させて効果を高めさせることは可能であ
る。また、その他の成分、例えば安定化剤等を必要に応
じて混合することが出来る。
物改質用酵素剤は前記酵素の少なくとも1種を含むもの
であり、その酵素の純度は状況に応じて選択すれば良
い。また、他の酵素を混合することも出来、それらを同
時に作用させる形態あるいは徐放性のような形で順次作
用させる形態にしても良い。例えば、植物繊維物質に含
まれる油脂分やタンパク質を分解するために、油脂分解
酵素やタンパク質分解酵素を混合することができる。し
かし逆に効果を減少させることもあるのでその条件は十
分検討する必要がある。例えばセルロース分解酵素の場
合は植物体の繊維自体を分解し栄養素を損なうこともあ
るので好ましくはないが、使用時に植物繊維物質1kg
当り1U以下の範囲になるように混合して部分的あるい
は極微小に作用させて効果を高めさせることは可能であ
る。また、その他の成分、例えば安定化剤等を必要に応
じて混合することが出来る。
【0032】本発明の動物経口物用酵素剤におけるリグ
ニンを遊離または分解する活性を有する酵素の含量は特
に制限がなく、使用時に効果が得られる量であれば良
い。したがって、使用時に酵素剤の添加量が多ければ酵
素剤中の酵素含量は少なくても良く、また、酵素の比活
性によっても変わってくる。また、酵素剤の物理的形状
によっても異なり、液体の場合は通常0.1SU/ml
以上、好ましくは1SU/ml以上、より好ましくは1
0SU/ml、さらにより好ましくは100SU/ml
以上であるが、0.1SU/ml以下であっても構わな
い。固体の場合は、通常0.01SU/mg以上、好ま
しくは0.1SU/mg以上、より好ましくは1SU/
mg以上、さらに好ましくは10SU/mg以上である
が、0.01SU/mg以下であっても構わない。
ニンを遊離または分解する活性を有する酵素の含量は特
に制限がなく、使用時に効果が得られる量であれば良
い。したがって、使用時に酵素剤の添加量が多ければ酵
素剤中の酵素含量は少なくても良く、また、酵素の比活
性によっても変わってくる。また、酵素剤の物理的形状
によっても異なり、液体の場合は通常0.1SU/ml
以上、好ましくは1SU/ml以上、より好ましくは1
0SU/ml、さらにより好ましくは100SU/ml
以上であるが、0.1SU/ml以下であっても構わな
い。固体の場合は、通常0.01SU/mg以上、好ま
しくは0.1SU/mg以上、より好ましくは1SU/
mg以上、さらに好ましくは10SU/mg以上である
が、0.01SU/mg以下であっても構わない。
【0033】本発明の酵素剤の物理的形態に制限はな
く、例えば粉状、粒状、液状等の形態をとることが出来
る。本発明の酵素剤は高温において十分なリグニン遊離
活性または分解活性を有し、好ましくは50℃において
十分な活性を有する。本発明の酵素剤の製造方法は、そ
の成分、形態及び用途に応じて適宜選択することが出来
る。例えば多成分で粉状の場合は、成分ごとに粉状に調
製した後に混合しても良く、また溶液状態で混合した後
に乾燥して粉状にしても良い。液状の場合は、液体状態
で得られた酵素溶液をそのまま用いても良く、粉末化さ
れたものを溶解して用いることも可能である。粒状の場
合、それに用いる造粒方法も制限がなく、従来知られて
いる方法も使用可能である。
く、例えば粉状、粒状、液状等の形態をとることが出来
る。本発明の酵素剤は高温において十分なリグニン遊離
活性または分解活性を有し、好ましくは50℃において
十分な活性を有する。本発明の酵素剤の製造方法は、そ
の成分、形態及び用途に応じて適宜選択することが出来
る。例えば多成分で粉状の場合は、成分ごとに粉状に調
製した後に混合しても良く、また溶液状態で混合した後
に乾燥して粉状にしても良い。液状の場合は、液体状態
で得られた酵素溶液をそのまま用いても良く、粉末化さ
れたものを溶解して用いることも可能である。粒状の場
合、それに用いる造粒方法も制限がなく、従来知られて
いる方法も使用可能である。
【0034】(植物繊維物質)本発明における植物繊維
物質としては、例えば飼料用の場合は従来の飼料用作物
はもとより現在収穫後に利用されることなく廃棄されて
いる農産廃棄物や食品工業において加工後に廃棄される
ような食品廃棄物等をその材料として用いることができ
る。飼料以外で使用する植物繊維物質については、最近
植物繊維はその機能性が注目されるようになり、小麦フ
スマ、コーンファイバー、ビートファイバー、おから等
や、木材より製造したパルプをアルカリ処理、エーテル
化したカルボキシメチルセルロース(CMC)がシリア
ル、菓子、飲料など食料品や薬剤の分野で多く利用され
ている。これらの機能は整腸作用をはじめ、コレステロ
ール低下、血糖値上昇、脂肪肝形成抑制など様々な効果
が期待できる。
物質としては、例えば飼料用の場合は従来の飼料用作物
はもとより現在収穫後に利用されることなく廃棄されて
いる農産廃棄物や食品工業において加工後に廃棄される
ような食品廃棄物等をその材料として用いることができ
る。飼料以外で使用する植物繊維物質については、最近
植物繊維はその機能性が注目されるようになり、小麦フ
スマ、コーンファイバー、ビートファイバー、おから等
や、木材より製造したパルプをアルカリ処理、エーテル
化したカルボキシメチルセルロース(CMC)がシリア
ル、菓子、飲料など食料品や薬剤の分野で多く利用され
ている。これらの機能は整腸作用をはじめ、コレステロ
ール低下、血糖値上昇、脂肪肝形成抑制など様々な効果
が期待できる。
【0035】植物繊維物質は何等前処理を施さないもの
でも良いが、酵素作用をより効果的にするためには、特
開昭49−117255、特開昭53−69178、特
公昭60−13659、特公平4−29329にも記載
があるように、原料自体を酵素処理する前段に切断、細
断、粉砕、湿潤、膨潤等の物理的な手法を施したり、酸
・アルカリ剤、界面活性剤などの化学薬品を浸透、浸漬
させるなどの化学的手法を施すことができる。例えば植
物体の繊維組織を柔軟にするために水分を多く含むよう
な湿潤状態でアルカリ剤のアンモニア水などを添加し、
外部からの繊維組織への接触部位を広げるような試みに
よって効果を高めることができる。この場合も事前に予
備実験を行い最適な条件を設定すると共に酵素を添加す
ることを考慮しその阻害要因の検討や生成品からの薬品
の除去なども検討することが好ましい。
でも良いが、酵素作用をより効果的にするためには、特
開昭49−117255、特開昭53−69178、特
公昭60−13659、特公平4−29329にも記載
があるように、原料自体を酵素処理する前段に切断、細
断、粉砕、湿潤、膨潤等の物理的な手法を施したり、酸
・アルカリ剤、界面活性剤などの化学薬品を浸透、浸漬
させるなどの化学的手法を施すことができる。例えば植
物体の繊維組織を柔軟にするために水分を多く含むよう
な湿潤状態でアルカリ剤のアンモニア水などを添加し、
外部からの繊維組織への接触部位を広げるような試みに
よって効果を高めることができる。この場合も事前に予
備実験を行い最適な条件を設定すると共に酵素を添加す
ることを考慮しその阻害要因の検討や生成品からの薬品
の除去なども検討することが好ましい。
【0036】(植物繊維物質の処理)本発明の酵素剤に
よる植物繊維物質の処理においては、pH、温度条件は
酵素の分解活性の最適条件に近いほど効果が高くなる傾
向にあるが、そのことにこだわる必要はなく、酵素が作
用する範囲であれば十分効果が生じることもある。pH
は通常2〜12、好ましくは3〜11。温度は0〜12
0℃、一般には20℃以上、好ましくは50℃以上、よ
り好ましくは60℃以上である。処理時間は、pH、温
度、酵素量により影響されるが、通常0.5時間〜1週
間、好ましくは1〜48時間、より好ましくは2〜24
時間である。処理は、静置または適当な撹拌を伴い処理
することができる。いずれにしても酵素処理条件は、実
用上の制約を十分考慮し決めればよく、事前に予備実験
を行い最適な条件を設定することが好ましい。また複数
の酵素剤を同時にまたは順次用いることもできる。
よる植物繊維物質の処理においては、pH、温度条件は
酵素の分解活性の最適条件に近いほど効果が高くなる傾
向にあるが、そのことにこだわる必要はなく、酵素が作
用する範囲であれば十分効果が生じることもある。pH
は通常2〜12、好ましくは3〜11。温度は0〜12
0℃、一般には20℃以上、好ましくは50℃以上、よ
り好ましくは60℃以上である。処理時間は、pH、温
度、酵素量により影響されるが、通常0.5時間〜1週
間、好ましくは1〜48時間、より好ましくは2〜24
時間である。処理は、静置または適当な撹拌を伴い処理
することができる。いずれにしても酵素処理条件は、実
用上の制約を十分考慮し決めればよく、事前に予備実験
を行い最適な条件を設定することが好ましい。また複数
の酵素剤を同時にまたは順次用いることもできる。
【0037】以上の酵素剤による植物繊維の処理によ
り、改質された植物繊維すなわちリグニン含量の低減し
た植物繊維が得られ、動物経口物及びその材料となる。
消化率を考慮するとリグニン含量の低減量としては植物
繊維物質の1%相当以上が好ましい。なお、この処理を
含む方法によって製造された動物経口物には、酵素剤の
酵素活性は残っている必要はないが、酵素活性が残存す
ることにより、特に飼料に用いる場合は、これを摂食す
る家畜の体内で消化を補助する効果が期待できるため
(一般にヘミセルロースを消化分解する能力は低い)、
プラスの効果として消化性向上の結果が得られる可能性
が高い。食料品に用いた場合には酵素活性が残存する必
要はない。それは現在植物繊維物質を食品として摂取し
ている理由が食物繊維(いわゆるダイエットファイバー
と呼ばれるもの)の機能性(主に整腸作用)にあり、飼
料用途のように消化分解・吸収効率の向上を目的としな
いからである。
り、改質された植物繊維すなわちリグニン含量の低減し
た植物繊維が得られ、動物経口物及びその材料となる。
消化率を考慮するとリグニン含量の低減量としては植物
繊維物質の1%相当以上が好ましい。なお、この処理を
含む方法によって製造された動物経口物には、酵素剤の
酵素活性は残っている必要はないが、酵素活性が残存す
ることにより、特に飼料に用いる場合は、これを摂食す
る家畜の体内で消化を補助する効果が期待できるため
(一般にヘミセルロースを消化分解する能力は低い)、
プラスの効果として消化性向上の結果が得られる可能性
が高い。食料品に用いた場合には酵素活性が残存する必
要はない。それは現在植物繊維物質を食品として摂取し
ている理由が食物繊維(いわゆるダイエットファイバー
と呼ばれるもの)の機能性(主に整腸作用)にあり、飼
料用途のように消化分解・吸収効率の向上を目的としな
いからである。
【0038】(酵素剤含有動物経口物)本発明の酵素剤
含有動物経口物は、本発明の酵素剤及び植物繊維を含
む。その製造方法においては、酵素剤を直接対象植物繊
維物質と混合しても良好な結果が得られるが、事前に前
記のようなアルカリ、酸、湿潤、膨潤等の処理を行った
植物繊維物質に混合しても良い。本発明の動物経口物に
おける酵素剤の量は、効果が得られる量であれば特に制
限はない。通常酵素活性の点からは、動物経口物1kg
あたり、好ましくは10SU以上、より好ましくは10
0SU以上、さらにより好ましくは1000SU以上に
相当する酵素剤を混合することが適当である。本発明の
動物経口物における植物繊維の量は特に制限はない。例
えば、トリ、ブタ等の配合飼料であれば通常は2〜10
%の範囲で配合され、その範囲になるように牧草類、穀
類、まめ類が配合されることが多い。また、例えばウシ
の場合にも通常牧草類、穀類、まめ類が植物繊維含有物
質として用いられているが、そこに含まれる植物繊維は
その生育状態、収穫時期に左右されるが概ね10〜50
%であり、例えば牧草類約100%の飼料だとすると植
物繊維は10〜50%となり、半分だとすると5〜25
%となる。
含有動物経口物は、本発明の酵素剤及び植物繊維を含
む。その製造方法においては、酵素剤を直接対象植物繊
維物質と混合しても良好な結果が得られるが、事前に前
記のようなアルカリ、酸、湿潤、膨潤等の処理を行った
植物繊維物質に混合しても良い。本発明の動物経口物に
おける酵素剤の量は、効果が得られる量であれば特に制
限はない。通常酵素活性の点からは、動物経口物1kg
あたり、好ましくは10SU以上、より好ましくは10
0SU以上、さらにより好ましくは1000SU以上に
相当する酵素剤を混合することが適当である。本発明の
動物経口物における植物繊維の量は特に制限はない。例
えば、トリ、ブタ等の配合飼料であれば通常は2〜10
%の範囲で配合され、その範囲になるように牧草類、穀
類、まめ類が配合されることが多い。また、例えばウシ
の場合にも通常牧草類、穀類、まめ類が植物繊維含有物
質として用いられているが、そこに含まれる植物繊維は
その生育状態、収穫時期に左右されるが概ね10〜50
%であり、例えば牧草類約100%の飼料だとすると植
物繊維は10〜50%となり、半分だとすると5〜25
%となる。
【0039】また、成形については混合・混和するのみ
でも効果は十分に得られるが、飼料・食料品・薬剤とし
ての摂取性を考慮すると、粉体の形状より粒状(顆粒あ
るいはペレット状)のような固形品、寒天状(ゼリー
状)や練り状の半固形品、または植物繊維物質に対し酵
素を浸漬・付着・コーティングさせたような形態をとる
こともできる。
でも効果は十分に得られるが、飼料・食料品・薬剤とし
ての摂取性を考慮すると、粉体の形状より粒状(顆粒あ
るいはペレット状)のような固形品、寒天状(ゼリー
状)や練り状の半固形品、または植物繊維物質に対し酵
素を浸漬・付着・コーティングさせたような形態をとる
こともできる。
【0040】本発明の酵素剤はそれを含有する動物経口
物の製造において加熱型機器を用いる場合にも優れた効
果を示すが、その機器としては、ペレットミル、ペレッ
ターマシーン、エクストルーダー、押し出し成型機等、
一般に飼料をペレット化するために使用される加熱の可
能な成型装置、および成型品の乾燥機などがあり、流動
層造粒コーティング装置、遠心流動型コーティング造粒
装置、遠心流動型造粒機、スプレードライ式造粒機、回
転円板式流動層造粒装置、遠心転動式造粒装置、浮遊流
動式造粒機、旋回流動式造粒機等も適時その用途に合わ
せ使用することができる。
物の製造において加熱型機器を用いる場合にも優れた効
果を示すが、その機器としては、ペレットミル、ペレッ
ターマシーン、エクストルーダー、押し出し成型機等、
一般に飼料をペレット化するために使用される加熱の可
能な成型装置、および成型品の乾燥機などがあり、流動
層造粒コーティング装置、遠心流動型コーティング造粒
装置、遠心流動型造粒機、スプレードライ式造粒機、回
転円板式流動層造粒装置、遠心転動式造粒装置、浮遊流
動式造粒機、旋回流動式造粒機等も適時その用途に合わ
せ使用することができる。
【0041】以上の方法にしたがって製造された動物経
口物中の酵素には、リグニンを遊離または分解する活性
が十分残っており、保存時及び使用時に作用して植物繊
維中のリグニンを遊離または分解する。なお本発明にお
ける植物繊維物質中のリグニンの遊離あるいは分解の測
定に関しては、モリソンら(J.Sci.FoodAg
ric.23,455−463,(1972))の方法
に従った。
口物中の酵素には、リグニンを遊離または分解する活性
が十分残っており、保存時及び使用時に作用して植物繊
維中のリグニンを遊離または分解する。なお本発明にお
ける植物繊維物質中のリグニンの遊離あるいは分解の測
定に関しては、モリソンら(J.Sci.FoodAg
ric.23,455−463,(1972))の方法
に従った。
【0042】
【実施例】次に本発明について実施例で更に詳しく説明
するが、これらは単なる例示であり、本発明を限定する
ものではない。 [実施例1]1.0%バーチキシラン、0.1%酵母エ
キス、1.0%ポリペプトン、0.5%リン酸水素二カ
リウム、0.05%硫酸マグネシウム、0.002%硫
酸鉄、0.05%塩化ナトリウムからなる液体培地(p
H7.0)2Lを5L容のジャーファメンターに入れ、
121℃で20分間滅菌した。これに同じ培地で培養し
たバチルスsp.SD902(FERM BP−450
8)の菌体を接種し、55℃で48時間好気的に通気撹
拌培養を行った。培養後、培養液を6000rpm遠心
分離して菌体を除去した。次に、上記の方法で得た上澄
み液を限外ろ過により濃縮し、キシラナーゼ活性200
SU/mlが認められる溶液Aを得た。
するが、これらは単なる例示であり、本発明を限定する
ものではない。 [実施例1]1.0%バーチキシラン、0.1%酵母エ
キス、1.0%ポリペプトン、0.5%リン酸水素二カ
リウム、0.05%硫酸マグネシウム、0.002%硫
酸鉄、0.05%塩化ナトリウムからなる液体培地(p
H7.0)2Lを5L容のジャーファメンターに入れ、
121℃で20分間滅菌した。これに同じ培地で培養し
たバチルスsp.SD902(FERM BP−450
8)の菌体を接種し、55℃で48時間好気的に通気撹
拌培養を行った。培養後、培養液を6000rpm遠心
分離して菌体を除去した。次に、上記の方法で得た上澄
み液を限外ろ過により濃縮し、キシラナーゼ活性200
SU/mlが認められる溶液Aを得た。
【0043】[実施例2]1.0%バーチキシラン、
0.1%酵母エキス、1.0%ポリペプトン、0.5%
リン酸水素二カリウム、0.05%硫酸マグネシウム、
0.002%硫酸鉄、0.05%塩化ナトリウムからな
る液体培地(pH7.0)2Lを5L容のジャーファメ
ンターに入れ、121℃で20分間滅菌した。これに同
じ培地で培養したバチルスsp.SD902(FERM
BP−4508)の菌体を接種し、55℃で48時間
好気的に通気撹拌培養を行った。培養後、培養液を60
00rpm遠心分離して菌体を除去した。次に、上記の
方法で得た上澄み液のうち700mlに硫酸アンモニウ
ムを60%飽和となるように添加し、塩析を行った。塩
析により得た酵素沈澱物を50mMのリン酸緩衝液(p
H7.0)に溶解して一夜透析した。透析後の酵素溶液
を陰イオン交換クロマトグラフィー(DEAE−セルロ
ファイン、生化学工業製)にかけ、素通り画分を陽イオ
ン交換クロマトグラフィー(CM−セルロファイン、生
化学工業製)にかけ、0〜0.6Mの塩化ナトリウム1
000mlの直線濃度勾配で溶出を行い分画した。この
中でキシラナーゼ活性500SU/mlが認められる画
分Bを得た。
0.1%酵母エキス、1.0%ポリペプトン、0.5%
リン酸水素二カリウム、0.05%硫酸マグネシウム、
0.002%硫酸鉄、0.05%塩化ナトリウムからな
る液体培地(pH7.0)2Lを5L容のジャーファメ
ンターに入れ、121℃で20分間滅菌した。これに同
じ培地で培養したバチルスsp.SD902(FERM
BP−4508)の菌体を接種し、55℃で48時間
好気的に通気撹拌培養を行った。培養後、培養液を60
00rpm遠心分離して菌体を除去した。次に、上記の
方法で得た上澄み液のうち700mlに硫酸アンモニウ
ムを60%飽和となるように添加し、塩析を行った。塩
析により得た酵素沈澱物を50mMのリン酸緩衝液(p
H7.0)に溶解して一夜透析した。透析後の酵素溶液
を陰イオン交換クロマトグラフィー(DEAE−セルロ
ファイン、生化学工業製)にかけ、素通り画分を陽イオ
ン交換クロマトグラフィー(CM−セルロファイン、生
化学工業製)にかけ、0〜0.6Mの塩化ナトリウム1
000mlの直線濃度勾配で溶出を行い分画した。この
中でキシラナーゼ活性500SU/mlが認められる画
分Bを得た。
【0044】[実施例3]2.0%大豆粉、0.5%酵
母エキス、0.5%塩化ナトリウム、0.1%リン酸水
素二カリウム、0.02%硫酸マグネシウム、0.5%
マルトース、0.1%CMC、0.3%炭酸ナトリウム
からなる液体培地2Lを5L容のジャーファメンターに
入れ、121℃で20分間滅菌した。これに同じ培地で
培養したバチルスsp.SD401(FERM P−1
0527)、SD402(FERMBP−3431)、
SD403(FERM P−11647)、バチルス
リケニフォルミスSD516(FERM P−1042
7)の菌体を各々接種し、35℃で35時間好気的に通
気撹拌培養を行った。培養後、各々の培養液を6000
rpm遠心分離して菌体を除去した。次に、上記の方法
で得た上澄み液を各々限外ろ過により濃縮し、各々溶液
C、D、E、Fを得た。濃縮率はC,D,Eが約10
倍、Fが約8倍だった。
母エキス、0.5%塩化ナトリウム、0.1%リン酸水
素二カリウム、0.02%硫酸マグネシウム、0.5%
マルトース、0.1%CMC、0.3%炭酸ナトリウム
からなる液体培地2Lを5L容のジャーファメンターに
入れ、121℃で20分間滅菌した。これに同じ培地で
培養したバチルスsp.SD401(FERM P−1
0527)、SD402(FERMBP−3431)、
SD403(FERM P−11647)、バチルス
リケニフォルミスSD516(FERM P−1042
7)の菌体を各々接種し、35℃で35時間好気的に通
気撹拌培養を行った。培養後、各々の培養液を6000
rpm遠心分離して菌体を除去した。次に、上記の方法
で得た上澄み液を各々限外ろ過により濃縮し、各々溶液
C、D、E、Fを得た。濃縮率はC,D,Eが約10
倍、Fが約8倍だった。
【0045】[実施例4]3.0%ペプトン、1.0%
水溶性デンプン、1.0%DE−50、1.0%酵母エ
キス、1.0%小麦ふすま、0.5%リン酸水素二カリ
ウム、0.05%硫酸マグネシウム、0.5%炭酸ナト
リウムからなる液体培地2Lを5L容のジャーファメン
ターに入れ、121℃で20分間滅菌した。これに同じ
培地で培養したバチルスsp.SD771(FERM
P−11455)、SD772(FERM P−114
56)の菌体を各々接種し、55℃で48時間好気的に
通気撹拌培養を行った。培養後、各々の培養液を600
0rpm遠心分離して菌体を除去した。次に、上記の方
法で得た上澄み液を各々限外ろ過により約10倍に濃縮
し、これに終濃度2mMになるように塩化カルシウムを
加え各々溶液G、Hを得た。
水溶性デンプン、1.0%DE−50、1.0%酵母エ
キス、1.0%小麦ふすま、0.5%リン酸水素二カリ
ウム、0.05%硫酸マグネシウム、0.5%炭酸ナト
リウムからなる液体培地2Lを5L容のジャーファメン
ターに入れ、121℃で20分間滅菌した。これに同じ
培地で培養したバチルスsp.SD771(FERM
P−11455)、SD772(FERM P−114
56)の菌体を各々接種し、55℃で48時間好気的に
通気撹拌培養を行った。培養後、各々の培養液を600
0rpm遠心分離して菌体を除去した。次に、上記の方
法で得た上澄み液を各々限外ろ過により約10倍に濃縮
し、これに終濃度2mMになるように塩化カルシウムを
加え各々溶液G、Hを得た。
【0046】[実施例5]乾燥重量100gの稲藁を5
cm長に裁断した後、水16.5Lに浸漬し、一昼夜室
温で放置した。その後、稲藁を取り出し、よく水洗して
泥などの付着物を除去した。更にこれを遠心脱水し、次
に5Lの水を加え、pH6.0に調整した原料液を得
た。これに実施例1で調製した酵素溶液Aを50ml添
加、及び無添加区を作り、50℃で24時間撹拌した。
反応後、稲藁を取り出しミキサーで粉砕後、水洗した。
これをMorrisonらの方法に従い、アセチルブロ
マイドに可溶化し、280nmの吸光度を測定して無添
加区に対するリグニン含有率の変化を測定したところ、
リグニン含有率が2.3%減少していた。
cm長に裁断した後、水16.5Lに浸漬し、一昼夜室
温で放置した。その後、稲藁を取り出し、よく水洗して
泥などの付着物を除去した。更にこれを遠心脱水し、次
に5Lの水を加え、pH6.0に調整した原料液を得
た。これに実施例1で調製した酵素溶液Aを50ml添
加、及び無添加区を作り、50℃で24時間撹拌した。
反応後、稲藁を取り出しミキサーで粉砕後、水洗した。
これをMorrisonらの方法に従い、アセチルブロ
マイドに可溶化し、280nmの吸光度を測定して無添
加区に対するリグニン含有率の変化を測定したところ、
リグニン含有率が2.3%減少していた。
【0047】[実施例6]乾燥重量100gの稲藁を5
cm長に裁断した後、水16.5Lに浸漬し、一昼夜室
温で放置した。その後、稲藁を取り出し、よく水洗して
泥などの付着物を除去した。更にこれを遠心脱水し、次
に5Lの水を加え、pH6.0に調整した原料液を得
た。これに実施例1で調製した酵素溶液Aを0.5〜5
0ml添加、及び無添加区を作り、40℃で7日間保持
した。反応後、稲藁を取り出しミキサーで粉砕後、水洗
した。これをMorrisonらの方法に従い、アセチ
ルブロマイドに可溶化し、280nmの吸光度を測定し
て無添加区に対するリグニン含有率の変化を測定した。
結果を表1に示す。
cm長に裁断した後、水16.5Lに浸漬し、一昼夜室
温で放置した。その後、稲藁を取り出し、よく水洗して
泥などの付着物を除去した。更にこれを遠心脱水し、次
に5Lの水を加え、pH6.0に調整した原料液を得
た。これに実施例1で調製した酵素溶液Aを0.5〜5
0ml添加、及び無添加区を作り、40℃で7日間保持
した。反応後、稲藁を取り出しミキサーで粉砕後、水洗
した。これをMorrisonらの方法に従い、アセチ
ルブロマイドに可溶化し、280nmの吸光度を測定し
て無添加区に対するリグニン含有率の変化を測定した。
結果を表1に示す。
【表1】
【0048】[実施例7]乾燥重量100gの稲藁を5
cm長に裁断した後、水16.5Lに浸漬し、一昼夜室
温で放置した。その後、稲藁を取り出し、よく水洗して
泥などの付着物を除去した。更にこれを遠心脱水し、次
に2Lの水を加え、pH7.0に調整した原料液を得
た。これに実施例1で調製した酵素溶液Aを0.2〜2
0ml添加、及び無添加区を作り、60℃で3日間保持
した。反応後、稲藁を取り出しミキサーで粉砕後、水洗
した。これを同様に無添加区に対するリグニン含有率の
変化を測定した。結果を表2に示す。
cm長に裁断した後、水16.5Lに浸漬し、一昼夜室
温で放置した。その後、稲藁を取り出し、よく水洗して
泥などの付着物を除去した。更にこれを遠心脱水し、次
に2Lの水を加え、pH7.0に調整した原料液を得
た。これに実施例1で調製した酵素溶液Aを0.2〜2
0ml添加、及び無添加区を作り、60℃で3日間保持
した。反応後、稲藁を取り出しミキサーで粉砕後、水洗
した。これを同様に無添加区に対するリグニン含有率の
変化を測定した。結果を表2に示す。
【表2】
【0049】[実施例8]乾燥重量100gの稲藁を5
cm長に裁断した後、10%水酸化ナトリウム水溶液1
6.5Lに浸漬し、一昼夜室温で放置した。その後、稲
藁を取り出し、よく水洗して水酸化ナトリウムや溶出
物、泥などの付着物を除去した。更にこれを遠心脱水
し、次に2Lの水を加え、pH7.0に調整した。これ
に実施例1、2で調製した酵素溶液A、Bを各々20m
l添加し、60℃で3日保持した。反応後、稲藁を取り
出しミキサーで粉砕後、水洗した。これを同様に無処理
稲藁に対するリグニン含有率の変化を測定した。結果を
表3に示す。
cm長に裁断した後、10%水酸化ナトリウム水溶液1
6.5Lに浸漬し、一昼夜室温で放置した。その後、稲
藁を取り出し、よく水洗して水酸化ナトリウムや溶出
物、泥などの付着物を除去した。更にこれを遠心脱水
し、次に2Lの水を加え、pH7.0に調整した。これ
に実施例1、2で調製した酵素溶液A、Bを各々20m
l添加し、60℃で3日保持した。反応後、稲藁を取り
出しミキサーで粉砕後、水洗した。これを同様に無処理
稲藁に対するリグニン含有率の変化を測定した。結果を
表3に示す。
【表3】
【0050】[実施例9]乾燥重量500gの麦藁を3
cm長に裁断した後、5%水酸化ナトリウム水溶液33
Lに浸漬し、一昼夜室温で放置した。その後、麦藁を取
り出し、よく水洗して水酸化ナトリウムや溶出物、泥な
どの付着物を除去した後、これを遠心脱水し、次に5L
の水を加え、pH7.0、50℃に調整した。これに実
施例1〜4で調製した各酵素溶液及びその混合物を50
ml静かに添加し24時間撹拌した。反応後、麦藁を取
り出しミキサーで粉砕後水洗した。これを同様に無添加
区に対するリグニン含有率の変化を測定した。結果を表
4に示す。
cm長に裁断した後、5%水酸化ナトリウム水溶液33
Lに浸漬し、一昼夜室温で放置した。その後、麦藁を取
り出し、よく水洗して水酸化ナトリウムや溶出物、泥な
どの付着物を除去した後、これを遠心脱水し、次に5L
の水を加え、pH7.0、50℃に調整した。これに実
施例1〜4で調製した各酵素溶液及びその混合物を50
ml静かに添加し24時間撹拌した。反応後、麦藁を取
り出しミキサーで粉砕後水洗した。これを同様に無添加
区に対するリグニン含有率の変化を測定した。結果を表
4に示す。
【表4】
【0051】[実施例10]乾燥重量500gの麦藁を
3cm長に裁断した後、5%水酸化ナトリウム水溶液3
3Lに浸漬し、一昼夜室温で放置した。その後、麦藁を
取り出し、よく水洗して水酸化ナトリウムや溶出物、泥
などの付着物を除去した後、これを遠心脱水し、次に5
Lの水を加え、pH7.0、65℃に調整した。これに
実施例1〜4で調製した各酵素溶液及びその混合物を5
0ml静かに添加し24時間撹拌した。反応後、麦藁を
取り出しミキサーで粉砕後水洗した。これを同様に無添
加区に対するリグニン含有率の変化を測定した。結果を
表5に示す。
3cm長に裁断した後、5%水酸化ナトリウム水溶液3
3Lに浸漬し、一昼夜室温で放置した。その後、麦藁を
取り出し、よく水洗して水酸化ナトリウムや溶出物、泥
などの付着物を除去した後、これを遠心脱水し、次に5
Lの水を加え、pH7.0、65℃に調整した。これに
実施例1〜4で調製した各酵素溶液及びその混合物を5
0ml静かに添加し24時間撹拌した。反応後、麦藁を
取り出しミキサーで粉砕後水洗した。これを同様に無添
加区に対するリグニン含有率の変化を測定した。結果を
表5に示す。
【表5】
【0052】[実施例11]乾燥重量500gの麦藁を
3cm長に裁断した後、5%水酸化ナトリウム水溶液3
3Lに浸漬し、一昼夜室温で放置した。その後、麦藁を
取り出し、よく水洗して水酸化ナトリウムや溶出物、泥
などの付着物を除去した後、これを遠心脱水し、次に5
Lの水を加え、pH5.8〜8.0、65℃に調整し
た。これに実施例1で調製した酵素溶液Aのキシラナー
ゼ活性が1000U/kg乾燥麦藁になるように静かに
添加し24時間撹拌した。反応後、麦藁を取り出しミキ
サーで粉砕後水洗した。これを同様に無添加区に対する
リグニン含有率の変化を測定した。結果を表6に示す。
3cm長に裁断した後、5%水酸化ナトリウム水溶液3
3Lに浸漬し、一昼夜室温で放置した。その後、麦藁を
取り出し、よく水洗して水酸化ナトリウムや溶出物、泥
などの付着物を除去した後、これを遠心脱水し、次に5
Lの水を加え、pH5.8〜8.0、65℃に調整し
た。これに実施例1で調製した酵素溶液Aのキシラナー
ゼ活性が1000U/kg乾燥麦藁になるように静かに
添加し24時間撹拌した。反応後、麦藁を取り出しミキ
サーで粉砕後水洗した。これを同様に無添加区に対する
リグニン含有率の変化を測定した。結果を表6に示す。
【表6】
【0053】[実施例12]乾燥重量500gの稲藁を
3cm長に裁断した後、水33Lに浸漬し、一昼夜室温
で放置した。その後、稲藁を取り出し、よく水洗して泥
などの付着物を除去した後、これを遠心脱水し、次に5
Lの水を加え、pH6.0、70℃に調整した。これに
実施例2で調製した酵素溶液Bをキシラナーゼ活性が1
000〜10000U/kg乾燥稲藁になるように静か
に添加し4時間撹拌した。反応後、稲藁を取り出しミキ
サーで粉砕後水洗した。そして無処理稲藁対するリグニ
ン含有率の変化を測定した。結果を表7に示す。
3cm長に裁断した後、水33Lに浸漬し、一昼夜室温
で放置した。その後、稲藁を取り出し、よく水洗して泥
などの付着物を除去した後、これを遠心脱水し、次に5
Lの水を加え、pH6.0、70℃に調整した。これに
実施例2で調製した酵素溶液Bをキシラナーゼ活性が1
000〜10000U/kg乾燥稲藁になるように静か
に添加し4時間撹拌した。反応後、稲藁を取り出しミキ
サーで粉砕後水洗した。そして無処理稲藁対するリグニ
ン含有率の変化を測定した。結果を表7に示す。
【表7】
【0054】[実施例13]トウモロコシ22%、大麦
19%、ビートパルプ18%、大豆14%、大豆粕6
%、綿実粕6%、コーングルテン3%、ヘイキューブ8
%、アミノ酸ミックス0.05%、ビタミンミックス
0.04%をベース(1)に、これに実施例1で調製し
た酵素溶液Aの1%添加区(2)、0.1%添加区
(3)及び無添加区(4)を調合した。(2)から
(4)を粉砕しミキサーで十分混合した後ペレッターに
よりペレットを成型した。この(2)から(4)の成型
物をドライヤーにより温度80℃で乾燥させペレット飼
料を製造した。(1)〜(4)を粉砕し、10%水溶液
に調整して50℃の温水中で24時間撹拌した。これを
水洗した後、リグニン含量を測定した。(1)に対し
(2)〜(4)のリグニン含量は各々20.3%、1
4.1%、3.5%減少していた。藁等ではリグニンは
10〜20%含まれていることから目的とする植物繊維
物質中のリグニンは酵素により少なくとも1.0%以上
遊離あるいは分解され除去されていた。
19%、ビートパルプ18%、大豆14%、大豆粕6
%、綿実粕6%、コーングルテン3%、ヘイキューブ8
%、アミノ酸ミックス0.05%、ビタミンミックス
0.04%をベース(1)に、これに実施例1で調製し
た酵素溶液Aの1%添加区(2)、0.1%添加区
(3)及び無添加区(4)を調合した。(2)から
(4)を粉砕しミキサーで十分混合した後ペレッターに
よりペレットを成型した。この(2)から(4)の成型
物をドライヤーにより温度80℃で乾燥させペレット飼
料を製造した。(1)〜(4)を粉砕し、10%水溶液
に調整して50℃の温水中で24時間撹拌した。これを
水洗した後、リグニン含量を測定した。(1)に対し
(2)〜(4)のリグニン含量は各々20.3%、1
4.1%、3.5%減少していた。藁等ではリグニンは
10〜20%含まれていることから目的とする植物繊維
物質中のリグニンは酵素により少なくとも1.0%以上
遊離あるいは分解され除去されていた。
【0055】[実施例14]トウモロコシ35%、小麦
10%、グレインソルガム15%、魚粉8%、大豆粕8
%、ふすま15%、アルファルファミール3%、カルシ
ウム5%、食塩0.3%、ビタミンプレミックス0.3
%をベース(1)に、これに実施例1〜4で調製した各
酵素溶液の1%添加区(2)及び無添加区(3)を調合
した。(2)、(3)を粉砕しミキサーで十分混合した
後ペレッターによりペレットを成型した。この成型物を
ドライヤーにより温度80℃で乾燥させペレット飼料を
製造した。(1)〜(3)を粉砕し、10%水溶液に調
整して50℃の温水中で24時間撹拌した。これを水洗
した後、リグニン含量を測定した。(1)に対し(2)
のリグニン含量の減少率を表8に示す。なお(1)に対
し(3)のリグニン含量の減少率は3.3%であった。
10%、グレインソルガム15%、魚粉8%、大豆粕8
%、ふすま15%、アルファルファミール3%、カルシ
ウム5%、食塩0.3%、ビタミンプレミックス0.3
%をベース(1)に、これに実施例1〜4で調製した各
酵素溶液の1%添加区(2)及び無添加区(3)を調合
した。(2)、(3)を粉砕しミキサーで十分混合した
後ペレッターによりペレットを成型した。この成型物を
ドライヤーにより温度80℃で乾燥させペレット飼料を
製造した。(1)〜(3)を粉砕し、10%水溶液に調
整して50℃の温水中で24時間撹拌した。これを水洗
した後、リグニン含量を測定した。(1)に対し(2)
のリグニン含量の減少率を表8に示す。なお(1)に対
し(3)のリグニン含量の減少率は3.3%であった。
【表8】 いずれも目的とする植物繊維物質中のリグニンは1%以
上遊離あるいは分解され除去されていた。
上遊離あるいは分解され除去されていた。
【0056】
【発明の効果】本発明の酵素剤を用いることにより、従
来のリグニンを遊離または分解する活性の低い酵素によ
る植物繊維の処理に比べ、少量の酵素剤で効果を上げる
ことができる。また、従来は処理中に酵素活性が減少す
ることからも処理開始時に多量の酵素を添加する必要が
あったが、耐性酵素を用いることでより少量の酵素添加
量で従来品と同等の効果を得ることができる。また耐性
酵素を用いることで高温処理の可能な時間が飛躍的に伸
びこの条件下での長時間処理が可能となった。
来のリグニンを遊離または分解する活性の低い酵素によ
る植物繊維の処理に比べ、少量の酵素剤で効果を上げる
ことができる。また、従来は処理中に酵素活性が減少す
ることからも処理開始時に多量の酵素を添加する必要が
あったが、耐性酵素を用いることでより少量の酵素添加
量で従来品と同等の効果を得ることができる。また耐性
酵素を用いることで高温処理の可能な時間が飛躍的に伸
びこの条件下での長時間処理が可能となった。
【0057】本発明の方法で製造された動物経口物及び
本発明の酵素含有動物経口物は食品、飼料、薬剤分野に
おいて大きな効果を得ることが出来る。特に飼料分野で
は、豚、鶏、牛、馬、犬、猫、蚕等の陸上動物を対象と
した給餌物質として用いられ、乳牛の飼育においては乳
量の増大、乳質の改善が、肉牛や豚の飼育においては飼
料摂食量の増大に伴う飼育効率の改善、肉質の改善が期
待できる。また家禽の飼育においても飼料の消化効率が
改善されることから、飼料供給効率の改善が見込まれ
る。また、本発明の方法により、上記動物経口物を効率
良く製造することが出来る。
本発明の酵素含有動物経口物は食品、飼料、薬剤分野に
おいて大きな効果を得ることが出来る。特に飼料分野で
は、豚、鶏、牛、馬、犬、猫、蚕等の陸上動物を対象と
した給餌物質として用いられ、乳牛の飼育においては乳
量の増大、乳質の改善が、肉牛や豚の飼育においては飼
料摂食量の増大に伴う飼育効率の改善、肉質の改善が期
待できる。また家禽の飼育においても飼料の消化効率が
改善されることから、飼料供給効率の改善が見込まれ
る。また、本発明の方法により、上記動物経口物を効率
良く製造することが出来る。
フロントページの続き (72)発明者 伊東 忍 東京都港区芝大門1丁目13番9号 昭和電 工株式会社内
Claims (15)
- 【請求項1】 植物繊維物質中のリグニンを遊離または
分解する活性を有する酵素を含有する動物経口物用酵素
剤。 - 【請求項2】 少なくとも1種のヘミセルラーゼを含む
請求項1記載の動物経口物用酵素剤。 - 【請求項3】 ヘミセルラーゼがキシラナーゼ、マンナ
ナーゼまたはペクチナーゼである請求項2記載の動物経
口物用酵素剤。 - 【請求項4】 少なくとも1種のリグニン分解酵素を含
む請求項1記載の動物経口物用酵素剤。 - 【請求項5】 リグニン分解酵素がリグニナーゼ、マン
ガン要求ペルオキシダーゼまたはラッカーゼである請求
項4記載の動物経口物用酵素剤。 - 【請求項6】 植物繊維物質中のリグニンを遊離または
分解する活性を有する酵素が耐熱性を有する酵素である
請求項1ないし5記載の動物経口物用酵素剤。 - 【請求項7】 植物繊維物質中のリグニンを遊離または
分解する活性を有する酵素がバチルス属細菌由来の酵素
である請求項1ないし6記載の動物経口物用酵素剤。 - 【請求項8】 植物繊維物質中のリグニンを遊離または
分解する活性を有する酵素がバチルスsp.SD902
(FERM BP−4508)、バチルスsp.SD4
01(FERM P−10527)、バチルスsp.S
D402(FERM BP−3431)、バチルスs
p.SD403(FERM P−11647)、バチル
スsp.SD516(FERM P−10427)、バ
チルスsp.SD771(FERM P−1145
5)、またはバチルスsp.SD772(FERM P
−11456)から得ることの出来る酵素である請求項
1ないし請求項6記載の動物経口物用酵素剤。 - 【請求項9】 請求項1ないし請求項8記載の動物経口
物用酵素剤及び植物繊維を含むことを特徴とする動物経
口物。 - 【請求項10】 動物経口物用酵素剤のセルロース分解
活性が植物繊維1kgあたり1U以下である請求項9記
載の動物経口物。 - 【請求項11】 請求項1ないし請求項8記載の動物経
口物用酵素剤及び植物繊維を含むことを特徴とする飼料
用組成物。 - 【請求項12】 動物経口物用酵素剤のセルロース分解
活性が植物繊維1kgあたり1U以下である請求項11
記載の飼料用組成物。 - 【請求項13】 請求項1ないし請求項8記載の動物経
口物用酵素剤で植物繊維物質の少なくとも1%に相当す
るリグニンを遊離または分解する工程を含むことを特徴
とする動物経口物の製造方法。 - 【請求項14】 請求項1ないし請求項8記載の動物経
口物用酵素剤で植物繊維物質の少なくとも1%に相当す
るリグニンを遊離または分解する工程を含むことを特徴
とする飼料用組成物の製造方法。 - 【請求項15】 請求項1ないし請求項8記載の動物経
口物用酵素剤と植物繊維を混合した後、加熱型機器で7
0℃以上に加熱する工程を含むことを特徴とする飼料用
組成物の製造方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP7144826A JPH08332032A (ja) | 1995-06-12 | 1995-06-12 | 動物経口物用酵素剤及びその用途 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP7144826A JPH08332032A (ja) | 1995-06-12 | 1995-06-12 | 動物経口物用酵素剤及びその用途 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH08332032A true JPH08332032A (ja) | 1996-12-17 |
Family
ID=15371359
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP7144826A Pending JPH08332032A (ja) | 1995-06-12 | 1995-06-12 | 動物経口物用酵素剤及びその用途 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH08332032A (ja) |
Cited By (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
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| WO1999057993A1 (en) * | 1998-05-14 | 1999-11-18 | Dsm N.V. | Use of protein cross-linking enzymes in ruminant feed |
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-
1995
- 1995-06-12 JP JP7144826A patent/JPH08332032A/ja active Pending
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| WO2022004796A1 (ja) * | 2020-06-30 | 2022-01-06 | 国立研究開発法人産業技術総合研究所 | 流動成形用木質材料及びそれを含む流動成形用材料並びに木質成形体 |
| CN117617369A (zh) * | 2023-12-01 | 2024-03-01 | 广东溢多利生物科技股份有限公司 | 一种用于宠物食品添加的复合酶制剂及应用 |
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