JPH08500335A

JPH08500335A - 手術，血管内手技または内視鏡手技における腫瘍および病変の検出と治療

Info

Publication number: JPH08500335A
Application number: JP5519551A
Authority: JP
Inventors: ゴールデンバーグ，デイヴィッド・ミルトン
Original assignee: イムノメディクス，インコーポレイテッド
Priority date: 1992-05-06
Filing date: 1993-05-06
Publication date: 1996-01-16
Also published as: DE69329112T2; CA2133580A1; EP0643583A1; EP0643583A4; DE69329112D1; US5716595A; ATE194916T1; EP0643583B1; WO1993021940A1

Abstract

(57)【要約】腫瘍病変および非悪性病変等の、術中、内視鏡および血管内近接検出および治療法に使用する薬剤が提供される。薬剤は同位体および非同位体により標識された薬剤から成る。光力学的薬剤による病変の検出および治療法に使用する薬剤、並びに活性化されて、オージェ電子またはその他の電離放射線を放射する薬剤に結合させたタンパク質による病変の治療法も提供される。上記の方法に有用な組成物およびキットも提供される。

Description

【発明の詳細な説明】発明の名称手術、血管内手技または内視鏡手技における腫瘍および病変の検出と治療発明の背景１−発明の範囲本発明は、小型検出プローブを用いる手術、血管内検査または内視鏡検査の過程において、腫瘍および病変を検出する方法の改善法に使用する薬剤に係わるものである。２−従来の技術の説明癌治療において、外科的切除は今なお第一義的治療法である。腫瘍の位置を特定し、明らかにし、また術後患者を監視するために、放射線免疫検出法（RAID）が使用されている。これは、放射性同位元素標識抗体を注入後、体外画像化を行うことにより実施される。RAIDにおける放射能標識としては、腫瘍によって生じ、または腫瘍に関連する抗原に特異的に結合する抗体および／または抗体フラグメント（”抗癌抗体”）が担体として使用される。血清中に検出可能量の抗原が存在しない場合でも、腫瘍抗原が、抗体担体の標的として作用し得ることは理解できるであろう。分解能は、幾つかの要因の影響を受ける。それによってRAIDにより画像化できる腫瘍の大きさ、特に転移の大きさが制限される可能性がある。非侵襲的RAIDは、本質的に放射線検出器と腫瘍間の距離により制限を受ける。深部に位置する小さな転移性腫瘍の場合、これは病変の検出を制限する要因となる。癌胎児性抗原（CEA）のような腫瘍マーカー濃度の上昇により、過去に切除された原発性腫瘍の再発が示された場合に、２回目の外科的手術が行われている。最近、近距離でガンマ線放出を検出できる小型ガンマ線検出プローブが開発された。エイトケンら(Aitken et al.，Dis．Colon & Rectum，27，279-282（1984） )により、２回目の手術における小型ガンマ線検出プローブの術中使用が報告されており、これによって外科医は切除の安全閾を決定し、小さな転移を検出するための重要な情報を得ている。それにもかかわらず、バックグラウンド放射線量が高いため、この方法の近距離測定の利点が妨害され、損なわれる可能性がある。更に、腫瘍組織による非特異的免疫グロブリンの取り込みにより診断が複雑となることもある。米国特許第4,782,840号は、手術中のバックグラウンド放射線量の上昇による影響を減少させる方法を明らかにしている。この方法では、新生物組織に特異的で、適度に長い半減期を有する放射性同位元素、例えばヨウ素−125等で標識された抗体を患者に注入する。放射性同位元素標識抗体を注入後、血液プールのバックグラウンド量が低くなるまで非結合放射性同位元素標識抗体が消失するように、手術を少なくとも７〜10日、望ましくは14〜21日後に遅らせて実施する。米国特許第4,932,412号は、術中検出において非特異的なバックグラウンドの放射線を減少させる方法を明らかにしている。この方法は、放射性同位元素標識一次抗体を投与された患者に対し、コントラスト増強剤、サブトラクション剤（ subtraction agent）、または一次抗体に結合する二次抗体を投与するものである。種々の構造に光線を照射し、次に光線を捕捉することによって、直接または間接的に構造を観察し、体腔内の腫瘍を検出することができる。非電離放射線をこれらの構造に照射し、次にこれらの構造から非電離放射線を再捕捉できる限り、どのような身体部位の病変でも観察することができる。従来の技術は、ある種の色素を使用するこのような画像化法の改善を開示している。ある種の色素は、腫瘍等の病変に付着後、特定の周波数の光線によって活性化される。これらの改善は、「Dougherty et al.．Cancer Res．38:2628， 1978」、「Dougherty，T.J.，Photochem．Photobiol．45:879，1987」、「Jori andPerria編.，Photodynamic Therapy of Tumors and Other Diseases（腫瘍およびその他の疾患の光力学的治療法）; Padua: Libreria Progetto,1985 」、「Profio，Proc．Soc．Photoopt．Instr．Eng．907:150，1988」、「Doiron and Gomer編、Porphyrin Localization and Treatment of Tumors（腫瘍のポルフィリンによる位置決定と治療）； New York：Alan Liss，1984」、「Hayata a nd Dougherty，Lasers and hematoporphyrin derivative in cancer（癌におけるレーザーとヘマトポルフィリン誘導体；東京：医学書院，1984」および「van den Bergh，Chem．Britaln 22：430，1986」に報告されている。これらは全て引用することにより本明細書の一部とするものである。これらの色素を、例えば全身に注入し、レーザーによって誘発される蛍光を利用して、光によって活性化される色素を付着している癌の部位を内視鏡で検出することができる。例えば、これは、蛍光気管支鏡による初期肺腫瘍の発見に応用されている（引用することにより本明細書に含める「Doiron et al．，Chest 76 ：32，1979」および上記引用文献）。問題の抗体の識別力により左右されるが、悪性および正常細胞を含む特定の組織および細胞により特異的に結合させるために、色素を抗体に付着させることができることは公知である。癌において、このような標識抗体をフローサイトメトリ（flowcytometry）と免疫組織学に使用して、多くの異なる種類の抗癌抗体を有する悪性細胞が染色されている。これらは以下の参考文献、すなわち「Goding ，Monoclonal Antibodies： Principles and Practice（モノクローナル抗体：原理と実際）； London/New York，Academic Press，1983」、「Ferrone and Di erich 編、Handbook of Monoclonal Antibodies（モノクローナル抗体の手引き）； Park Ridge，NJ，Noyes Publications，1985」、「Wick and Siegal編，Mo noclonal Antib odies in Diagnostic Immunohistochemistry（診断のための免疫組織学におけるモノクローナル抗体）； New York/Basel，Marcel Dekkeｒ，1988」に報告されている。これらの全部は、引用することにより本明細書の一部をなすものである。可視光線に敏感なポルフィリン等の、蛍光およびその他の色素原、あるいは色素が、適切な光線を腫瘍または病変に照射することにより、病変を検出し、更に治療するために使用されている（上記に引用）。治療の場合、これは光放射線、光線療法、または光力学療法と呼ばれている（「Jori and Perria編，Photodyna mic Therapy of Tumors and Other Diseases，Padua： Libreria Progetto，198 5」、「van den Bergh，Chem．Britain 22:430，1986」）。光線検出または光線療法を行うために、モノクローナル抗体が光線によって活性化される色素と結合されている（「Mew et al.，J．Immunol．130:1473，1983 」、「Mew et al．，Cancer Res．45:4380，1985」、「Oseroff et al.，Proc． Natl．Acad．Sci．USA 83:8744，1986」、「Oseroff et al.，Photochem．Photo biol．46:83，1987」、「Hasan et al.，Prog．Clin．Biol．Res．288:471，198 9」、「Tatsuta et al．，Lasers Surg．Med．9:422，1989」、「Pelegrin et a l.，Cancer 67:2529，1991」−引用することによりこれらの全体を本明細書の一部とするものである。）。しかし、これら初期の研究には、内視鏡による画像化および／または治療への応用は含まれておらず、特に抗体フラグメントまたはサブフラグメントの使用に関して言及されていない。手術中の、血管内の、および内視鏡による病変の近接検出および治療を行うために、分解能を強化できる単純な方法に使用する薬剤は今なお必要とされている。腫瘍の検出と治療のための改善法に使用する薬剤も必要とされている。非悪性病変の手術中の、血管内の、あるいは内視鏡による検出と治療に使用する薬剤も必要とされている。発明の目的本発明の主な目的は、手術中、血管内手技、および内視鏡手技における腫瘍の近接検出法に使用する薬剤を提供することである。これによって、腫瘍組織と非腫瘍組織の識別能は強化され、手技中および標識タンパク質注入後数時間以内に、切除、放射線治療および／または腫瘍摘除が実施できるように、より小さな腫瘍を検出し、その境界をより正確に決定することができる。これによって、手術中の、血管内の、あるいは内視鏡による判断は、遅滞なくなされる。本発明の別の目的は、注入後数時間以内に手技を選択的に実施することができるような、手術中の、血管内の、あるいは内視鏡による腫瘍の検出および治療に使用する薬剤を提供することである。本発明の別の目的は、手術中の、血管内の、あるいは内視鏡による非悪性病変の近接検出および治療に使用する薬剤を提供することである。本発明の別の目的は、レーザー治療、放射線免疫療法および／または免疫化学療法の改善法において病変の治療に使用する薬剤を提供することである。明細書と添付の請求の範囲を更に検討すれば、本技術に精通する者は、本発明の更なる目的と長所を理解するであろう。発明の要約これらの目的は、手術、血管内あるいは内視鏡手技における腫瘍の近接検出および治療法に使用する薬剤によって達成することができる。薬剤の使用にあたり、このような手技を受ける患者に、標的となる腫瘍によって生産される、あるいはそれに関連する物質と特異的に結合する標識タンパク質から成る有効量の薬剤を非経口的に注入する。タンパク質は、例えばペプチド、ポリペプチド、増殖因子、リンホカイン（lymphokine）、酵素、免疫モジュレーター、レセプタータンパク質、サイトカイン（cytokine）、またはホルモン等である。手技を実施している間、標識タンパク質を検出する検出手段により、到達した患者の体内を近接スキャンする。検出手段を用いて標識濃度が高い部位を検出することによって、標識タンパク質付着部位が特定される。これらの目的は、手術中の、血管内の、あるいは内視鏡による腫瘍の近接検出法において使用する薬剤により達成される。この場合、このような手技を受ける患者に、腫瘍によって生産される、あるいはそれに関連する抗原と特異的に結合する標識抗体フラグメントから成る有効量の薬剤を非経口的に注入する。手技は、患者の循環血液中の非結合放射性同位元素標識抗体フラグメントが少なくとも 50％減少する、注入後48時間以内に実施するのが望ましい。外科的手術によって露出した、あるいは血管内を経由して到達した、あるいは内視鏡によって到達した患者の体内を、放射性同位元素標識検出手段により近接スキャンする。検出手段を用いて標識濃度が高い部位を検出することによって、標識抗体フラグメント付着部位が特定される。別の関連面において、本発明は、非悪性病理学的病変の血管内の、手術中の、あるいは内視鏡手技中の近接検出法に使用する薬剤を提供する。この場合、このような手技を受ける患者に、病変によって生産される、あるいはそれに関連する抗原と特異的に結合する標識タンパク質、望ましくは抗体フラグメントまたは完全な抗体から成る有効量の薬剤を非経口的に注入する。標識物質の存在を検出するための検出手段を用いて、到達した患者の体内を近接スキャンする。検出手段により標識濃度が高い部位を検出することによって、標識抗体フラグメントまたは標識抗体全体の付着部位が特定される。本発明は、手術、血管内手技または内視鏡手技に使用するのに適したキットも提供する。キットは、標識物質と結合できる抗体フラグメントから成るヒト用滅菌済注入可能製剤を含む第一のバイアル（vial）と、第一のバイアルの標識物質と異なる標識物質と結合できる抗体全体から成るヒト用滅菌済注入可能製剤を含む第二のバイアルから構成される。関連面において、本発明は、手術、血管内手技または内視鏡手技に使用するのに適したキットを提供する。キットは、標識抗体フラグメントと薬剤学的に許容できる担体から成るヒト用滅菌済注入可能製剤を含む第一のバイアルと、標識物質で標識された抗体全体と薬剤学的に許容できる担体から成るヒト用滅菌済注入可能製剤を含む第二のバイアルから構成される。この場合、第二のバイアルの標識物質は、第一のバイアルの標識物質とは異なる。別の関連面において、本発明は、内視鏡、血管内カテーテルまたは手術を用いて病変を検出する改善された方法に使用する薬剤を提供する。このような薬剤の使用にあたり、このような手技を受ける患者に、蛍光薬剤または色素で標識したタンパク質から成る薬剤を注入する。この場合タンパク質は病変に付着する。標識タンパク質を病変に付着させ、内視鏡または血管内カテーテルを経由して、あるいは手術中に供給される光源を用いて、標識を検出する。別の関連面において、本発明は、内視鏡または血管内カテーテルを用いて病変を検出または治療する改善された方法に使用する薬剤を提供する。このような薬剤の使用にあたり、このような手技を受ける患者に、病変に優先的に付着する検出可能な物質から成る薬剤を注入する。この薬剤は病変に付着することができる。内視鏡または血管内カテーテルを経由して供給される検出手段を用いて標識を検出する。内視鏡またはカテーテルを通して近接照射療法により病変を治療する。別の関連面において、本発明は、内視鏡、血管内カテーテルまたは手術を用いる病変の方法の改善法に使用する薬剤を提供する。このような薬剤の使用にあたり、このような手技を受ける患者に、光活性物質で標識した抗体または抗体フラグメントから成る薬剤を注入する。この場合、抗体またはフラグメントは標的病変に優先的に付着し、標識抗体またはフラグメントは病変に付着することができる。光活性物質は、内視鏡または血管内カテーテルを経由して、あるいは手術中に供給される光源によって活性化される。別の面において、本発明は、光活性物質と結合させた抗体フラグメントから成る薬剤を提供する。別の面において、本発明は、内視鏡、血管内カテーテル、あるいは手術手技を用いる病変の検出および治療法の改善法に使用する薬剤を提供する。このような薬剤の使用にあたり、このような手技を受ける患者に、ストレプトアビジン（st reptavidin）結合抗体またはアビジン結合抗体、アビジンおよびビオチン（biot in）と共に使用されるビオチニル化抗体、二価抗体、抗体−ハプテン複合体または酵素−結合抗体のいずれかから構成される第一の組成物から成る第一の薬剤を注入する。この場合、抗体は、病変によって生産される、あるいはそれに関連するマーカーと特異的に結合する抗体または抗体フラグメントである。第一の組成物が標的病変に付着した後、検出可能な標識物質を付け、第一の組成物と結合する第二の組成物から成る第二の薬剤を患者に注入する。内視鏡または血管内カテーテルを通して、あるいは手術中に、検出手段により標識が検出される。上記の実施例の変法の１つでは、第一の組成物はビオチニル化抗体またはフラグメントから構成され、第二の組成物は蛍光物質または色素と結合させたビオチンから構成される。第一の薬剤の標的病変付着後、第二の組成物の注入前に、患者に循環血液中のビオチニル化抗体またはフラグメントを消失させる薬剤から構成される消失用組成物を注入する。別の面において、本発明は、内視鏡、血管内カテーテル、あるいは手術手技を受ける患者における病変検出法の改善法に使用する薬剤を提供する。このような薬剤の使用にあたり、このような手技を受ける患者に、病変に優先的に付着し、またフォトスキャニングまたは磁気共鳴画像化装置により検出可能な薬剤で標識された抗体またはフラグメントから成る第一の組成物を注入する。標識抗体またはフラグメントが病変に付着後、病変はフォトスキャニングまたは磁気共鳴画像化装置により画像化される。患者に、内視鏡、血管内カテーテルまたは手持ち式検出手段により検出可能で、病変に優先的に付着する第二の組成物から成る第二の薬剤を注入する。この場合、第二の組成物の薬剤は、第一の組成物の薬剤と同じか、あるいは異なっており、薬剤は病変に付着する。内視鏡または血管内カテーテルを通して、あるいは手術手技中に提供される近接検出手段により薬剤を検出する部位の決定に、病変の画像を利用する。別の面において、本発明は、内視鏡、血管内カテーテル、あるいは手術手技を受ける患者において、病変検出法の改善法に使用する薬剤を提供する。このような薬剤の使用にあたり、病変に特異的なタンパク質から成り、検出装置を使用して検出可能な第一の標識物質で標識された薬剤を患者に非経口投与し、特異的なタンパク質と同じ種、または異なる種由来の特異的でないタンパク質を非経口的に注入する。特異的でないタンパク質は、検出装置により別に検出できる第二の標識物質で標識されており、患者の体内の標識された特異的なタンパク質と標識された特異的でないタンパク質の動態と分布は、検出所要時間内で実質的に同じとなるように前記標識化が行われる。この場合、標識物質の少なくとも１種類は、光活性色素で、手技の過程において、患者体内の標識物質は検出装置で検出され、標識された特異的でないタンパク質の濃度を使用して、標的とならなかった特異的なタンパク質によるバックグラウンド活性の分布を測定する。これによって、殆ど標的となった病変に局在する特異的なタンパク質だけが測定され、これによって前記病変が検出され、その部位が特定される。別の面において、本発明は、注入可能な組成物を提供する。この組成物は、病変によって生産される、あるいは病変に関連するマーカーに対する少なくとも70 ％の特異的な免疫反応性を有し、病変と無関係な抗原に対する交差反応性が25％未満の実質的な単一特異性抗体から構成される。タンパク質は、検出装置により検出可能な標識物質で標識されており、前記標識化は、抗体の特異的免疫反応性を５％から33％低下できる程度に行われる。特異的でないタンパク質は、前記特異的な抗体を調製するために使用したタンパク質と同じ種、または異なる種由来であり、検出装置により別個に検出できる標識物質で標識され、薬剤学的に許容可能な注入用賦形剤を使用し、この場合標識物質の少なくとも１種類は光活性色素である。別の面において、本発明は病変の検出および治療法の改善法に使用する薬剤を提供する。このような薬剤の使用にあたり、光活性化され、オージェ電子またはその他の電離放射線を放射できる薬剤、および最適なものとしては検出可能な薬剤に結合されたタンパク質から成る薬剤を患者に注入する。この場合タンパク質結合体は、標的病変に優先的に付着し、光活性化可能な薬剤は活性化され、検出可能な選択された薬剤は検出される。詳細な説明本発明の実施例は、腫瘍の再発、転移または不完全な切除が疑われる部位に到達できる標識物質および検出手段によって、手術、血管内手技または内視鏡による組織および／または臓器の病変の検査に係わるものであることを認識しなくてはならない。本発明の実施例は、病変、特に非悪性病理学的病変が疑われる部位に到達できる標識物質および検出手段によって、手術、血管内手技または内視鏡による組織および／または臓器の病変の検査にも係わるものである。病変には、癌、感染性または炎症性病変、クロット（clots）、肥厚（hyperplasia）、じゅく状動脈硬化性プラーク等が含まれる。本発明の方法における薬剤の使用には、標的に特異的であろうと、標的に非特異的であろうと、画像処理は不要である。寧ろ、一実施例により、外科医または医師は、例えば術中、または血管内プローブもしくは内視鏡を使用することによって、腫瘍増殖が疑われる部位を比較的迅速にスキャンすることができ、放射線量を利用して、腫瘍組織を非腫瘍組織からより正確に識別することができる。これによって、外科的切除または診断評価を行うために、あるいは近接照射療法および体外光線療法等のレーザーまたは放射線治療を行うために、腫瘍の境界線をより正確に規定することができる。他の実施例によって、血管内の、手術中の、あるいは内視鏡による検出手段を同様に利用して、病変、特に非悪性病理学的病変を規定し、治療することができる。この一般的方法は、腹腔鏡を含む内視鏡によって到達できる体内病変または組織、更に血管内を通して到達できる病変または組織の全てに応用することができる。本発明の薬剤に有用なタンパク質は、タンパク質、ペプチド、ポリペプチド、糖タンパク質、リポタンパク質等で、例えば、増殖因子、リンホカイン、酵素、レセプタータンパク質、免疫モジュレータ、サイトカイン、ソマトスタチンのようなホルモン、抗体および抗体フラグメント等がある。抗体と抗体フラグメントが望ましい。光線に感受性を有する色素のタンパク−結合体、特に画像化のための抗体フラグメントおよびフラグメントまたは完全な抗体の使用か望ましく、特に内視鏡または種々の血管内または血管外カテーテルによって到達可能な身体の種々の構造において、腫瘍およびその他の病変の早期および高感度の検出または光治療を至適化するために、ヒトまたはヒト化された形態を使用するのがより望ましい。更に、本発明の実施例の一部においてしばしば経験することであるが、免疫グロブリンのような高分子による非特異的標的化を軽減するために、非特異抗体の標的化を抑制する方法において使用する薬剤が現在開発されている。これは、特異抗体と非特異抗体またはそのフラグメントの組み合わせから構成されており、それぞれが光検出法によりもう一方の試薬の色素と識別可能な別の色素で標識されている。更に、観察者の希望により、同時、または別々に検出できるように、より望ましい位置特定用特異抗体またはフラグメントを、放射性同位元素と色素で二重に標識できることが明らかにされている。抗体は、少なくとも１種類の色素を付着させて全身的に注入することができる。これによって、光活性化により異なる色を発色させることができ、照射され、回収される光線の性質を変えることによって同じ内視鏡で観察することができる。このような多目的観察用内視鏡は、例えば「Hirano et al.，Lasers in the Life Sciences 3(2):99，1989」において、また上記に引用されている「van den Bergh」において既に報告されている。両者は参考のためにここに完全に記載するものであるが、抗体結合体とは無関係である。第７回癌モノクローナル抗体免疫国際会議（San Diego，CA，Mar ch4-7，1992）においてフォリら（Foli et al.，）により最近発表されたポスターは、フルオレセインＲに結合させたCEAモノクローナル抗体を注入された患者に、蛍光直腸Ｓ状結腸鏡により直腸腫瘍の緑色の蛍光が観察されたと主張しており、これは、光免疫診断法の可能性を証明するものであると主張している。このような組織が自己蛍光を持つことは公知であり（例えば、「van den Bergh，198 6」のような上記引用文献に報告されている）、この蛍光が蛍光を発する結合体によるものであることは立証されておらず、免疫グロブリン全体を使用したため、バックグラウンドの活性が消失するまで、画像化は延期された。本発明の一実施例においては、適切な光によって活性化される色素と結合させた抗体フラグメントまたはサブフラグメントから成る薬剤を使用したため、より迅速な内視鏡による画像化と検出が可能であった。これは、悪性または非悪性の血管内および血管周囲病変の検出と治療の両者の場合に、血管内カテーテルにより伝達される光線の場合でも同様である。免疫グロブリン全体を使用する場合、より小さなIgGの形態でも、バックグラウンドの非特異的な臓器に対する標的化を消失させるのに十分な時間が必要である。これによって、色素形成抗体の注入から局所に限定される色素の画像化までに、かなりの時間的な遅れが生じる（通常２日間または３日間余分にかかる）。これは、体外シンチグラフィ（放射線免疫検出法）による抗体画像化において経験する問題と同じである。病変の検出のために、タンパク質、特に抗体に結合させるために使用する色素と放射性同位元素は、フラグメントまたはサブフラグメントの形態で抗体が提供されると、より有効、迅速、かつ安全に作用を発揮できることが現在明らかにされている。このように迅速な標的化により、新しい標識物質投与後数時間以内に検出を実施できるため、半減期が短い放射性同位元素でも長い放射性同位元素でも、あるいは、結合後の安定性が低い色素も高い色素も使用することができる。このような電離放射線および非電離放射線により検出物質に対し迅速かつ選択的に標的を定める方法に使用するための別の薬剤は、抗体プレターゲッティング（pretargeting）法を使用している。例えば、ストレプトアビジン−またはアビジン−結合抗体、アビジンおよびビオチンと共に使用するビオチニル化抗体、二価抗体、抗体−ハプテン複合体、または酵素一結合抗体等である。これらは、参考のためにここに記載するものであるが、「Paganelli，Nucl．Med．Commun．12 :211，1991」に概説されている。このような２段階および３段階の方法により腫瘍に対し放射線を照射する手順の他に、腫瘍またはその他の病変の手術中、血管内手技または内視鏡における検出および治療における標的／非標的率を高くするためにこれらの薬剤を利用することができる。これには、内視鏡およびカテーテル内で内視鏡および血管内プローブにより腫瘍および病変を検出し、治療する場合の光放射線の使用等がある。癌治療における光線とポルフィリンの使用は、既に上記に引用されている参考文献に概説されている。色素を含む腫瘍の治療に、あるいは蛍光内視鏡による腫瘍の検出に、内視鏡を使用して非電離放射線を照射する場合、手技は活性化するための光線が到達し易く、放射される蛍光を検出し易い病変に限定される。例えば、口腔、気管、気管支、食道、結腸、直腸、膀胱、膣、子宮内と、腹腔鏡の使用によるその他の体腔内等である。光線を発するカテーテルを静脈または動脈を通して使用することによって、より広範な応用が可能となる。特に現在動脈内放射線医学手技によって検査が行われている臓器内に応用できる。特に、じゅく状動脈硬化性プラークまたは血管内血栓または栓塞等の病的な閉塞を有する症例においても、光線により活性化される色素と結合させた抗体の治療応用は、このような血管内カテーテルを通じて非電離放射線を照射することによっても達成される。本発明は、光活性化されてオージェ電子または他の電離放射線を放射できる薬剤と、最適には、検出可能な薬剤に結合されたタンパク質、特に二価抗体または抗体フラグメントから成る薬剤の治療のための利用法も含む。結合体が標的とされた部位に付着後、活性化手段と選択された検出手段が提供される。光活性化が可能な薬剤には、ハロゲン化ピリミジン等のハロゲン化化合物と、ヨウ素またはインジウム等のある種の安定な元素が含まれる。活性化手段には、単色Ｘ線、特にエネルギー範囲20〜70keVで放射されるものが望ましく、30〜40keVで放射されるものがより望ましい。上記に明らかにされた２段階および３段階の手順を、光活性化され得る薬剤を標的部位に運ぶために使用することができる。これらの実施例は、より一般的な使用法と共に、術中および内視鏡による方法に使用される薬剤に応用することができる。本発明の一実施例の別の目標は、結合体の不安定性または周囲の正常組織内の自己蛍光が高いために、腫瘍中の色素が消失する前に光放射線手技を開始することができるように、できるだけ早期に色素の標的／非標的率を高くすることである。現在、血管内カテーテルを使用することによって、血管内カテーテルが到達できる体内の殆どの構造に非電離放射線を照射することが可能である。腫瘍または病変に標的を定め色素を付着させる迅速法に使用するための薬剤の観点から、望ましい薬剤は（色素原としての）色素の輸送担体として抗体フラグメントまたはサブフラグメントを使用するもの、あるいは３段階のビオチン−アビジン法等のプレターゲッティングシステムから成るものであることが現在明らかにされている。後者において、例えばビオチニル化抗腫瘍抗体からなる薬剤を非経口的に注入する。試薬が腫瘍の位置を最適に特定するのに十分な時間経過してから、例えば24時間後から約７日後に、より望ましくは約48時間後から96時間後までの間に、コールド（cold）（放射性同位元素標識されていない）のアビジンを非経口的に１回注入し、続いて24〜96時間後に検出または治療のための放射性同位元素または適切な光照射色素で標識したビオチン誘導体を投与する。手術中のまたは内視鏡による病変の検出に放射性ビオチンを投与でき、または、腹腔鏡、内視鏡または血管内カテーテルによる腫瘍／病変の検出および／または治療のための発色団を結合させたビオチンを投与できる。In-111で標識されたビオチンを用いる腫瘍内の癌胎児性抗原に標的を定める３段階システムの説明は、参考のためにここに記載する「Paganelli et al.，Cancer Res．51:5960，1991」によって報告されている。癌およびその他の病理学的病変の内視鏡および／または血管内検出および／または治療法の改善法に関しては、このようなプレターゲッティング法に使用する薬剤は報告されていない。抗体結合体、放射線免疫療法および／または化学免疫療法を併用して、あるいは併用せずに、光力学的検出と治療に関与する薬剤と手順の組み合わせにより、検出と治療をより効果的に実施できることも明らかにされている。癌患者において、光力学的療法は、放射線療法および化学療法と併用されているが（Hayata a nd Dougherty，1984，上記に引用）、腫瘍を標的とする抗体に結合させた放射性同位元素または薬物は、体外からの光線照射または遊離薬物による化学療法よりも、特異的効果を発揮するため、光力学療法と放射線免疫療法および／または化学免疫療法の併用は更に有効である。放射線免疫療法および化学免疫療法のための方法と薬剤は、以下の特許と特許出願に記載されている。米国特許第4,331,64 7号，米国特許第4,818,709号，米国特許第4,348,376号，米国特許第4,361,544号，米国特許第4,444,744号，米国特許出願第07/182623号。これらは、”Goldenberg ”の特許ど”Hansen”の特許出願と呼ばれ、引用することにより本明細書の一部とするものである。癌治療の改善法に使用する薬剤は、放射線免疫療法および／または化学免疫療法と併用して、光力学的療法に使用する腫瘍を標的とする抗体を結合させた光に敏感な物質から構成して得られる。なぜならば、これらは全て、より特異的な癌治療法であり、従来の治療法と比べ治療効果が高いからである。蛍光色素で抗体を標識する一般的方法は本技術において公知であり、引用することにより本明細書の一部とする「Weir編、Handbook of Experimental Immunol ogy（実験免疫学の手引き）、Vol．１，Chapter 28，pp．28．ｌ-28．21，Oxfor d，Blackwell Scientific，1986」に報告されている。治療目的としては、光により活性化される物質を（悪性および非悪性）病変に多数輸送することが重要である。免疫ブロブリンに付着させる光により活性化される分子の数を増やすと、抗体の免疫反応性に影響し、更に標的を定める特性に影響する可能性があり、免疫グロブリンに結合させるそのような分子数は通常は10個未満にする必要がある。もう１つの必要条件は、抗体の抗体結合領域と、抗体結合と、標的を定める特性を妨げないように、抗体の抗原−結合領域を避けて光によって活性化される分子を付着させるということである。これらの必要条件はいずれも、参考のためにここに記載する米国特許第5,057,313号においてシーら（Shih et al.，）により報告されているアミノデキストラン結合体法を利用することによって満たされる。この方法により、多数の蛍光色素とその他の光によって活性化される物質を、抗原−結合部位を避けて、通常IgG分子当たり20個以上、時にそれ以上の分子を、抗体の炭水化物領域に結合させることができる。過去において、「0seroff et al．（Proc．Natl．Acad．Sci．USA 83: 8744， l 986）」は、デキストラン結合により抗体に多数結合させた光増感剤、塩素６を使用し、in vitroにおけるヒトＴ細胞白血病の光破壊を明らかにした。この場合、光線は培養中の白血病細胞に照射することができた。しかし、体内の通常の白血病細胞貯蔵庫においては、このような光療法はできないため、これらの白血病細胞培養実験から人体における状況を簡単に推定することはできない。事実、動物におけるin vivoの実験によって、光力学療法が、血流量を減少させることにより腫瘍の血管新生に影響を与えることが明らかにされている（Doiron and Gom er編、Prog．Clin．Biol．Res．，P．170; New York，A．R．Liss，1984）。事実、ファンデンベルク（van den Bergh）（上記に引用）は、“in vitroの実験からin vivoの状況を光力学療法に関して推定する可能性”に警告を発している。同様に、謳歯類モデルの血液および組織中の標的腫瘍−関連抗原の分布が、ヒトとは異なり、また、腫瘍の抗体結合体取り込み量はヒトの数百倍から数千倍以上であることは公知であるため、動物実験から臨床状況を推定するのは困難である。ここに明らかにされている方法と薬剤を用いる術中検出法を、放射線免疫検出法（RAID）による体外画像化法と適切に組み合わせることができる。この場合、望ましくは^99mTc−、¹¹⁰In−、または¹²³I−標識抗体フラグメントまたはサブフラグメントを使用し、術前、望ましくは術前24時間以内に患者のスキャニングを実施する。RAID検査により外科医は病変と見られる放射能量が異常な部位に関する情報を得ることができ、それによって外科医は手術中または腹腔鏡手技中に術中プローブによりそのような部位に集中することができる。同様に、RAID検査は、病変の領域をより良好に規定するために、蛍光内視鏡または血管内カテーテル検査の前に、有効に実施することができる。より多目的の薬剤も利用でき、これによって、抗癌抗体フラグメントは画像化と検出の両方のための放射性同位元素（例えば^99mＴｃ）と蛍光色素で標識され、あるいは二価抗体が使用される場合には、片方のアームは病変を標的とし、適切な放射性核種で標識され、もう片方のアームは蛍光色素と結合させたハプテン、あるいは非経口注入後蛍光色素が結合できるハプテンを標的とする。病理学的病変の術中、内視鏡、および血管内検出に、非電離放射線および電離放射線プローブを同時に使用するために、２段階および３段階ターゲッティング法（上記に引用されている）から明らかなように、放射性同位元素プローブと蛍光（または発色団）プローブの他の組み合わせを使用することができる。この原理も治療に応用できる。この場合、１つの方法を単独で使用するよりも、幾つかの方法を組み合わせた方が有効である。例えば、光活性療法（従来の注入または抗体結合体による発色団の沈着後、内視鏡または血管内カテーテルを通して行う）の前後に、全身放射線免疫療法または化学免疫療法を有利に行うことができ、これによって放射線免疫療法または化学免疫療法は、光療法と組み合わせて、あるいは相乗的に作用している。発色団の供給または腫瘍または病理学的病変への照射に関してより高い標的／非標的率を達成するために、これらの変法にもやはり２段階および３段階のプレターゲッティング法を含めることができる。癌治療における更に別の改善は、内視鏡またはカテーテルによる放射性ペレットの植え込みを伴う近接照射療法と組み合わせて、腹腔鏡等の内視鏡およびカテーテルにより、放射性同位元素または光増感剤を結合させた抗癌抗体を利用するというものである。放射性同位元素または光増感剤を結合させた抗体は、近接照射療法の適用の方向付けのための検出方法において、あるいは近接照射療法と組み合わせた治療法において使用する薬剤として作用し得る。このような近接照射療法は、光力学的療法を使用する状況と殆ど同じ状況で実施されるので、光増感剤を腫瘍を標的とする抗体と結合させた場合でも、させない場合でも（しかし抗体結合体であるのが望ましい）、光力学療法を、ラドン−222、ヨウ素−125、セシウム−137、コバルト−60、イリジウム−192等の近接照射療法と共に使用することは１つの改善法である。抗腫瘍線量を高くし、宿主に対する副作用を低くすることができるので、近接照射療法を、レーザー療法、体外光線照射、化学免疫療法および／または放射線免疫療法と併用するのが望ましい。肺癌における近接照射療法とNd-YAGレーザー療法の併用は既に報告されており（Allen et al.，Am．J．Surg．150:71，1985 ；Schray et al.，Int．J．Radiat．Oncol．Biol．Phys．11:403，1985−全体として引用することにより本明細書の一部とするものである）、また肺癌における管内近接照射療法の一般的使用法も、引用することにより本明細書の一部とする「Nori et al.，Surg．Clin．N．Amer．67:1093，1987」により報告されている。特に治療薬と結合させた腫瘍を標的とする抗体からなる薬剤を適用した場合、近接照射療法、レーザー療法、光力学的療法、放射線免疫療法、化学免疫療法の様々な方法を組み合わせることにより、より有効な治療法が現在達成されている。本発明に準ずる薬剤を使用する近接検出法は、薬剤のタンパク質に結合させた標識から放射される放射線、またはそれによって供給される発色を検出できる検出器を使用できる。タンパク質、望ましくは抗体または抗体フラグメントに付着できる手頃な標識により生産されるアルファ、ガンマ、ベータ、陽電子、蛍光またはその他の検出可能な電離放射線または非電離放射線を標識に使用できる。例えば、このような機能に適したガンマ線検出器が「Aitken et al.，Dis Colon & Rectum，27，279-282（1984）」により報告されている。これらの著者等は、カドミウムテルライドシンチレーションクリスタル、放射能カウント数を表示するデジタル読み取りが付いたプレアンプとアンプを使用する手持ち式ガンマ線プローブについて報告している（放射線モニタリング装置、Watertown，Mass．）。シンチレーションクリスタルは、開口部径４mm、直径16mmの鉛製コリメーター内に格納されている。この装置は、腹腔内注入による放射性同位元素標識抗体を用いて腫瘍を検出し、腫瘍組織を近接する非腫瘍組織から識別することが明らかにされている。しかし、明らかにされた方法は、注入からプローブ操作までに長時間の遅れが必要で、患者毎に得られる結果が予測できない。他の検出手段を利用することが可能で、検出器がガンマ放射線に限らないことは、本技術に精通する者にとって明白である。また、例えば、ガンマシンチレーションカウンタに使用される20〜1,000keVの広い範囲内の異なる範囲のガンマ放射線および／または異なる放射性同位元素標識タンパク質によって放射されるアルファ、ガンマ、ベータ放射線のように、入射放射線のエネルギーが異なる放射性同位元素標識用物質を識別するために検出器を作製することができることも明らかである。従って、本発明は、使用される検出器の種類によって限定されない。シンチレーションクリスタルは、光ファイバーケーブルの末端に設置でき、入射ガンマ放射線に対するその光学的反応は、光ファイバーを通じて光電子増倍装置と、関連回路に伝達することができる。これによって、検出器のサイズを縮小することができ、内視鏡または血管内カテーテルと組み合わせて検出器を利用することができる。内視鏡またはカテーテルを、コリメーターとして作用するように遮蔽することができ、必要な場合には、その末端から公知の距離にウィンドウを取り付け、その中にシンチレーションクリスタルを格納する。状況による特定の必要性を考慮すれば、前記に対する他の種々の修正および改変は、通常の熟練した技術者には明白である。しかし、本発明の方法における薬剤の使用は、特定の種類の放射性同位元素標識用物質検出器の種類がどのようなものであれ、それによって限定されない。寧ろ、標的病変、組織または臓器に局在する標識を検出できる検出器ならばどれでも使用できる。検出手段は、内視鏡の形態で使用でき、口、鼻、耳、肛門、膣または切開部等の開口部から体腔に挿入することができる。”内視鏡”という言葉はここでは、肛門から導入される内視鏡、口腔から導入される気管支鏡、尿道から導入される膀胱鏡、腹部から導入される腹腔鏡等の体腔内に導入されるスコープの一般的名称として使用されている。これらの一部は、部品の小型化が更に進むことによって、大きな利点が得られ、またこの種の機器に適切に小型化された部品が開発されるに伴い、本発明の方法を実施する有用性は強化されるであろう。カテーテルまたはその同等物等を経由して血管内に導入された高度に小型化されたプローブは、腫瘍の部位を特定し、治療する本発明の実施例および心筋梗塞を含む梗塞、じゅく状動脈硬化性プラーク、血栓を含む凝固塊、肺塞栓、感染性または炎症性病変、または過形成等の非悪性病理学的病変の部位を特定し、治療する本発明の実施例において使用するのに適している。本発明の方法に使用する薬剤において、画像化応用に有用な技術は、提示された改善法に合わせて改変される。腫瘍、病変、正常臓器または組織によって生産される、あるいはそれらに関連するマーカーに特異的に結合する放射性同位元素標識抗体および抗体フラグメントを用いる腫瘍と病変の位置を特定し、治療するための方法と臓器画像化方法は、1991年５月６日に提出された米国特許出願第07 /694,977号、および米国特許第4,331,647号、第4,348,376号、第4,361,544号、第4,444,744号、第4,460,561号、第4,624,846号に特に明らかにされており、これらは全て参考のためにここに完全に記載するものである（以下、「ゴールデンベルク（Goldenberg）特許」という。）。これらの参考文献は、また前記の方法に使用する抗体と抗体フラグメントも、それらの入手方法と適切な放射性核種で放射性同位元素標識を行う方法と併せて明らかにしている。本発明の薬剤に有用な抗体フラグメントはF(ab')2、F(ab)2、Fab'、Fab、Fvおよびその同等物であり、ハイブリッドフラグメントを含む。免疫グロブリンの高変異性抗原−結合領域を保持し、Fab'フラグメントと大きさが同じか、あるいはそれより小さいサブフラグメントも有用である。これには、単鎖、多重鎖に係わりなく、抗原結合部位を組み入れているか、あるいは天然の免疫グロブリンフラグメントと殆ど同じ方法で標的化の媒体としてin vivoで作用する、遺伝子工学により作製されたおよび／または組み換えられたタンパク質が含まれる。このような単鎖結合分子は、参考のためにここに記載する米国特許第4,946,778号に明らかにされている。Fab'抗体フラグメントは、F(ab')2フラグメントの還元切断によって簡単に作製できる。F(ab')2そのものは、完全な免疫グロブリンのペプシン消化により作製できる。Fab抗体フラグメントは、還元条件下に完全な免疫グロブリンのパパイン消化によって、あるいは完全なＩｇを注意深くパパイン消化することによって得られるF(ab)2フラグメントの切断によって作製できる。フラグメントは遺伝子工学によっても作製できる。抗体は、IgG、IgM、IgA、IgD、IgE、２つまたは複数の抗原またはエピトープ（epitope）に対する特異性を持つキメラまたはハイブリッド抗体等のいずれの種類の完全な免疫グロブリンでも使用できる。ポリクローナル抗体も使用でき、ヒトまたは、霊長類、ヤギ、ウサギ、マウス、またはその同等物等の適切な動物から得られるアフィニティー精製された抗体が望ましい。モノクローナル抗体も本発明において使用するのに適しており、特異性が高いため望ましい。これらは、免疫原性を有する抗原の調製、免疫リンパ細胞または牌臓細胞と不死の骨髄腫細胞系の融合、および特異的ハイブリドーマクローンの分離等による現在では定型的とみなされる咄乳類の免疫化手順によって、簡単に調製される。本発明における抗体の有用性に影響を与えるのは主に抗体の抗原に対する特異性なので、種間融合および高頻度可変領域の遺伝子工学操作等のそれ程定型的ではないモノクローナル抗体調製法も除外されない。ヒトモノクローナル抗体、種間モノクローナル抗体、キメラ（例えばヒト／マウス）モノクローナル抗体、遺伝子工学により調製される抗体等のより新しいモノクローナル抗体生産技術も使用できることが理解できるであろう。ハイブリッド抗体が使用できるように、抗体、放射性同位元素、免疫グロブリン等の混合物も使用できることも言及すべきである。ハイブリッドは、２つの異なる抗原特異性を持つことができる。例えば、１つのアームは癌胎児性抗原のような腫瘍抗原に結合し、もう１つのアームはCSAp等の別の抗原に結合する。あるいは１つのアームは、例えば癌胎児性抗原上の１つのエピトープに結合し、別のアームは別の癌胎児性抗原のエピトープに結合することも可能である。前記は単なる例に過ぎず、本発明の範囲内に入る別の特異性の組み合わせも考えられる。２つの特異性を有するハイブリッド抗体フラグメントは、米国特許第4,361,54 ４号に明らかにされている抗−腫瘍マーカーハイブリッドと同様に調製することができる。ハイブリッド抗体を調製する他の方法は、例えば米国特許第4,474,89 3号および第4,479,895号、およびMilstein et al.，Immunol．Today，5,299(198 4)に明らかにされている。結合しない標識抗体フラグメントは、患者の循環血液中から速やかに消失し、それによって注入後48時間以内に、望ましくは24時間以内に、更に望ましくは12 時間以内に、更に望ましくは６時間以内に少なくとも50％は減少する。減少が少なくとも75％であることが望ましく、85％であればより望ましい。結合しない完全な抗体は、患者の循環血液中から消失し、結合しない完全な抗体の量は、48時間以内に50%未満に低下する。本発明の薬剤において有用な標識物質は、放射性同位元素標識または蛍光物質およびその他の色素等の非放射性同位元素標識である。このような標識は、本技術に精通する者にとって公知である。本技術に精通する者によって選択された、フラグメントを標識するための放射性同位元素は、フラグメントを抗原に結合させる時間を補う半減期を有する。抗体フラグメントの標識物質は、ガンマ放射線放出ピークが20〜500keVの範囲内にある放射性同位元素が望ましい。その主な理由は、放射線検出器の技術が現在そのような放射性同位元素標識に適しているからである。抗体フラグメントに適したこのような放射性同位元素は、ヨウ素−123、インジウム−113m、ガリウム−68、レニウム−188、テクネチウム−99m、フッ素−18 等である。好ましくは、テクネチウム−９９ｍおよびヨウ素−１２３である。しかし、より長い半減期を有する放射性同位元素も使用できる。本発明の薬剤に使用される完全な抗体を標識するための物質は、放射性同位元素または蛍光等の非放射性同位元素が含まれる。このような標識は、本技術に精通する者にとって公知であり、上記に明らかにされている。本技術に精通する者によって選択された、完全な抗体を標識するための放射性同位元素は、使用される抗体を補う半減期を有する。完全な抗体に適した放射性同位元素の例は、インジウム−111、ヨウ素−125、ヨウ素−131、ガリウム−67等である。１種類以上の放射性同位元素を使用する本発明の薬剤を使用する場合には、検出手段により別々に検出できるように、２種類の放射性同位元素標識のエネルギーに十分差があるか、半減期に十分差がなくてはならない。このような放射性同位元素の適切な組み合わせは、例えばヨウ素−131／ヨウ素−123、ヨウ素−125 ／テクネチウム−99m等である。米国特許第4,782,840号は、新生物組織に特異的な抗体と手術手技に有用な放射性同位元素を明らかにしている。この場合、新生物組織を有する疑いがある動物に外科的手術を行い、そこで組織に新生物組織の所見があるかどうかを、視覚により、また触診により検査する。術中、プローブを使用して新生物組織に結合した放射性同位元素標識抗体の存在を明らかにできるように、明らかにされた放射性同位元素により標識された明らかにされた抗体を、手術前少なくとも７日前に、望ましくは７〜21日前に動物に注入する。参考のためにここに記載する参考文献の抗体と放射性同位元素は、放射性同位元素標識抗体を注入して投与される本発明の薬剤において有用である。病変の検出と治療に血管内手技、手術、または内視鏡手技を使用し、１種類の標識タンパク質だけを注入する本発明の方法において薬剤を使用する場合、フラグメントまたは完全な抗体のいずれかを標識するのに有用であることがここに明らかにされた標識であれば、どれでも使用できる。適切な放射性同位元素の例としては、コバルト−57、ヨウ素−131、ヨウ素− １23、ヨウ素−125、ヨウ素−126、ヨウ素−133、臭素−77、インジウム−111、インジウム−113m、銅−67、ガリウム−67、ガリウム−68、ルテニウム−95、ルテニウム−97、ルテニウム−103、ルテニウム−105、水銀−197、水銀−203、ロジウム−99m、ロジウム−101、ロジウム−105、セレン−75、テルル−121m、テルル−122m、テルル−125m、ツリウム−165、ツリウム−167、ツリウム−168、レニウム−186、レニウム−188、テクネチウム−99m、フッ素−18等がある。テクネチウム−99m、ヨウ素−123、ヨウ素−125、ヨウ素−131、インジウム−111 、ガリウム−67が望ましい。検出された腫瘍または病変、細胞または組織の外科的切除にプローブを組み合わせることができ、これは２回目の手術においては定型的な手術様式である。このような手術に可能なもう１つの方法、特に内視鏡手技に可能な方法は、プローブをレーザー装置に組み合わせることで、これによって腫瘍組織を選択的に破壊するためにレーザー照射をどこに向けるべきかを指示するプローブからの信号を利用することができる。光ファイバーによる伝達と組み合わせて使用する適切なレーザー装置は公知である。その代表的な例が特に、「Dixon，Lasers in Surgery，in”Current Prob lems in Surgery（現在の外科的手術における問題点の中の外科的手術におけるレーザー）、１〜65ページ（Year Book Medical Pubs.，Inc．1984）」、「Flei sher，Arch．Intern．Med.，144，1225-1230（1984）」、「Wood et al.，Am．J ．Gatroent.，80，715-718（1985）」、「Hunter et al.，Am．J．Surg.，148， 736-7 41（1984）」に報告されている。３種類のレーザー、すなわちアルゴン、二酸化炭素、ネオジミウム−YAG（イットリウムアルミニウムガーネット）レーザーが現在医学的治療用に非常に広く使用されている。フライシャー（Fleischer）によって報告されているように、Nd-YAGおよびアルゴンレーザーは、光ファイバーウェーブガイドと共に使用されているが、CO₂レーザ一技術が更に進歩することによって、近い将来光ファイバーと共に利用できる可能性が高い。前記参考文献は、腫瘍治療への利用を含め、凝固および剥離モードの両者において、内視鏡と組み合わせて、レーザーが治療に利用されていることを明らかにしている。レーザーと内視鏡の使用は、外科的手術が禁忌の場合に有利である。本発明に準じて内視鏡手技と組み合わせて使用すれば、精度を高め、正常組織の損傷を軽減することができる。プローブは、その部位への近接照射療法および体外光線照射等の放射線療法を行う場合にも使用できる。しかし、体外からの画像化と同じ方法で、手術中、血管内検査あるいは内視鏡検査のスキャニングを最適に行うことはできない。寧ろ、手技のタイミングを最適にしたい場合には、クリアランス効果と循環血液中の標識濃度を観察できるように、タンパク質注入後一定間隔で血液試料を採取し、血中標識活性レベルを測定する。これによって、外科的手術、血管内手技、または内視鏡手技に最も適した時間が示される。例えば、検出される循環血液中の標識濃度が少なくとも約50％低下した時、望ましくは約75％、更に望ましくは少なくとも約85％またはそれ以上低下した時、近接検出法におけるバックグラウンドの放射線による干渉は最小限となり検出力は強化される。本発明は、手術中、血管内あるいは内視鏡において使用するのに適したキットを提供する。キットは、同位体または非同位体で標識できる抗体フラグメントから成るヒト用滅菌済製剤を含むバイアルと、異なる標識物質により標識できる抗体から成るヒト用滅菌済製剤を含むバイアルから構成できる。キットは、標識抗体フラグメントと薬剤学的に許容できる担体から成るヒト用滅菌済注入可能製剤を含むバイアルと、異なる標識物質により標識された抗体と薬剤学的に許容できる担体から成るヒト用滅菌済注入可能製剤を含むバイアルからも構成できる。標識抗体フラグメントと標識抗体はいずれも咄乳動物用注入可能製剤として、望ましくはヒト用滅菌済注入可能製剤として便利な状態で提供され、望ましくは次のものからなる。すなわち、薬剤学的に許容できる滅菌済注入用賦形剤、望ましくは生理的pHと濃度の燐酸緩衝食塩水注入用賦形剤（PBS）中に有効量の標識抗体フラグメントまたは標識抗体を含む滅菌済注入可能溶液から成る。非経口投与部位により必要な場合には、非経口投与用の薬剤学的に許容できるその他の従来の賦形剤も使用できる。本発明に準じて非経口投与される代表的製剤は、通常約0.01〜20mg、望ましくは0.05〜5mgの標識抗体フラグメントまたは標識抗体を滅菌済溶液中に含む。滅菌済溶液も、塩化ナトリウム0.9％を含む0.04M燐酸緩衝液（pH7.4 Bioware）１m l当たりヒト血清アルブミン（１％米国薬局方、Parke-Davis）約l0mgを含むものが有利である。更に詳細に述べなくても、本技術に精通する者は、前述の説明を利用して、本発明を完全に利用することができる。従って、以下に示す望ましい特定の具体例は、単なる例に過ぎず、本明細書の残りの部分をどのような方法によっても制限するものではないと解釈すべきである。以下の具体例において、特に表示されていない限り、温度は全てセ氏温度で補正されずに提示されており、全ての部とパーセントは重量で表示されている。実施例実施例１−術中の腫瘍の検出盲腸癌再発の女性患者に、癌胎児性抗原（CEA）に対するTc-99m標識編歯類モノクローナル抗体NP-4 Fab’フラグメント（15 mCi Tc-99m； 1mg Fab’）を静注した。３〜５時間後にガンマカメラで患者をスキャンし、平面およびシングルフォトンエミッションコンピュータ断層撮影像を入手し、盲腸病変を規定した。予定に遅れることなく、抗体投与８時間後に患者は手術室に運ばれ、盲腸腫瘍とその領域内の他の罹患部位の切除手術を受けた。これは、内蔵上に滅菌放射線プローブを通過させ、腫瘍が広がる部位を同定することによって達成された。Aitk en et al.，により前掲参考文献に報告されているように、プローブはタルルカドミウムシンチレーションクリスタル、コリメーター、プレアンプおよびアンプを装備しているが、100〜160keVの範囲内のエネルギーを選択するように調節されている。記録されたカウント数は、デジタル記録に置き換えられ、バックグラウンドのカウント数よりも有意に増加した場合に信号音に置き換えられた。非腫瘍部分よりも、カウント比と信号が少なくとも100％増加した場合に盲腸腫瘍部位と認め、これは肉眼による腫瘍の境界より約３cm広かった。外科医は、腫瘍と肉眼による腫瘍の境界から約3.5cm離れた正常に見える結腸領域まで全方向にわたって切除した。この距離では、カウント比が、正常基準比と比較して25％以上上回ることはなかった。バックグラウンドよりも少なくとも150％信号の上昇を示す腸間膜リンパ節も切除した。切除された組織はホルマリン中に固定され、組織病理学的に癌細胞を含むことが明らかにされた。結腸腫瘍の境界は、癌の侵襲がなかったことが明らかにされた。７カ月間の患者のフォローアップに基づき、局所あるいは遠隔転移の癌再発の所見は認められず、術前に上昇する血中CEA力価は、正常範囲に止まり、2.5ng/mlを超えなかった。実施例２−内視鏡による腫瘍の検出 (A)結腸ポリープが疑われた男性患者（結腸にポリープの再発歴あり）に関して、最近糞便中のヘモグロビンを検査するためのグアヤクテスト（guaiac test ）が陽性を示し、血中CEA力価が12.5ng/mlに上昇したため、結腸鏡を計画した。クロラミン−Ｔ法によりＩ-125で標識されたCEAモノクローナル抗体NP-4 F(ab')₂ （2mgF(ab')₂を1.0mCiのＩ-125で標識）を静注し、Ｉ-125から放射される放射線を測定できる放射線検出器を取り付けた結腸鏡を用いて、予定に遅れることなく、２４時間後に患者に内視鏡手技を行った。検出器は、光ファイバーウェーブガイドの先端に設置されたテルルカドミウムシンチレーションクリスタルから成る。光ファイバーは、遮蔽されたチューブの中に入っており、チューブそのものは結腸鏡の中に挿入され、結腸鏡の先端開口部から約４mm以内の長さまで伸びており、結腸鏡の管の残りの部分はコリメーターとして作用している。光ファイバーのもう一方の先端は、電子増倍管、プレアンプ、アンプ、および得られた信号を対応する信号音に変換する装置に繋がっている。結腸鏡で結腸を検査した消化器科医が、肛門縁から20cmと25cm以内の所に、直径それぞれ約1.5cmと0.8cmの２つの小さな有茎性ポリープを認めた。放射線検出器は、大きなポリープ上にのみ増強された信号を表示し、この信号はバックグラウンドの放射能またはもう一方の小さなポリーブの放射能と比べ２倍高値を示した。両ポリープは、結腸鏡の中に挿入されたループによって切除され、組織病理学的処理が行われた。放射能信号が高い１つのポリープだけが、癌細胞を含んでいることが明らかにされた。このポリープは腺癌領域を有していた。 (B)上記と同じ内視鏡の別の症例において、患者はMew et al.，J．Immunol．1 30:1473，1983のカルボジイミド−結合法の変法により、1.5mg DHE/kg体重の静注量で、ジヘマトポルフィリンエーテル、DHE（フォトフリンII）に結合させた癌胎児性抗原（CEA）に対するモノクローナル抗体を投与された。悪性ポリープに標的を定める薬物の蛍光を検出するために使用した光ファイバー結腸鏡は、Pr ofio et al.，Adv．Exp．Med．Biol．193:43，1985により報告された410nmで放射するバイオレットクリプトンイオンレーザーを用いる光ファイバー気管支鏡と類似している。蛍光強度は信号音に変換され、信号音の高さは、電子増倍管内の蛍光を分析することにより、信号強度と関係している。この症例においては、肛門縁から15cmの距離にある悪性ポリープのバックグラウンドに対する蛍光比は６：１であった。直径0.5cmのポリープを結腸鏡を通して切除し、ホルマリン中に固定し、組織病理学的処置を施した。ポリープの茎部に腺癌の存在が認められた。実施例３−術中腫瘍治療広範な腹部転移を伴う卵巣癌の女性に、術前にRS7-3G11モノクローナル抗体のビオチニル化製剤（3mg）を静注した。３日後、アビジン（10mg）を60分間隔で２回に分けて追加静注した。24時間後、DTPA−インジウム（安定）と結合させたビオチニル化RS7-3G11を1.5mg静注した。翌日、患者は腹腔内の観察可能な腫瘍と触診可能な腫瘍全ての切除術を受け、続いて40keVの単色エックス腺で露出した腹腔内を術中照射し、広範な微小転移癌を破壊した。６〜９カ月後、病変の所見は認められず、患者の血中CA-125力価は正常範囲内にあり、治療前の顕著な上昇と対照的であった。実施例４−心筋動脈血栓症の血管検出および治療１例の男性が、重度の狭心痛を呈し、冠状動脈疾患が疑われた。冠状動脈を検査することに決定し、経皮大腿動脈穿刺によりカテーテルを挿入した。カテーテルには、上記結腸鏡に使用されたものと類似の光ファイバー装置が付いているが、組織を視覚により観察する必要がなく、放射される蛍光を測定するだけなので、蛍光とレーザー光を伝達する機能のみとして小型化されている。じゅく状動脈硬化性プラークに標的を定めるモノクローナル抗体EPB-1（LL1）に結合させた具体例２(B)と同様のDHE製剤を1.0mg/kg体重の投与量で静注した。診断のために40 5nmのレーザー光線を放射するエキサイマー色素レーザーを使用して、カテーテルにより患者の左前下行枝において、（電子増倍管を使用して、蛍光強度を反映する高さの信号音に置き換えられた）蛍光信号の上昇を認めた。その後、ファイバー入力エネルギーを4mJ/パルス以下に保ちながら、じゅく状動脈硬化性プラークを破壊するためにカテーテル内の光ファイバーを通してレーザーは630nmのレーザー光線を放射した。フォローアップによって、閉塞された血管の血流が少なくとも 70％改善され、患者に対する副作用は無いことが明らかにされた。患者の症状と心臓の状態は、その後８週間改善されている。前記具体例は、その中で利用された反応物および／または操作条件を、本発明の包括的あるいは具体的に解説された反応物および／または操作条件に置き換えても同様な成功を再現することができる。前記解説から、本技術に精通する者は、本発明の本質的な特徴を容易に確認することができ、その本質と範囲を逸脱することなく、種々の利用法と条件に合わせて本発明の種々の変更と修正を行うことができる。

【手続補正書】特許法第１８４条の８【提出日】１９９４年５月２日【補正内容】請求の範囲（補正）１．手技を受ける患者に有効量の薬剤を非経口的に注入し、手技を４８時間以内に実施し、到達した患者の体内を検出手段により標識タンパク質の存在を検出するために近接してスキャンし、消失手段、コントラスト剤またはサブトラクション剤を用いることなく、検出手段によりそのような部位の標識濃度の上昇を検出することによって、該標識タンパク質の付着部位を特定することから成る、手術中、血管内あるいは内視鏡手技中の腫瘍の近接検出および治療方法において使用する薬剤の調製における、タンパク質がペプチド、ポリペプチド、増殖因子、酵素、免疫モジュレーター、レセプタータンパク質、リンホカイン、サイトカインまたはホルモンである、標的腫瘍によって生産される、またはそれに関連する物質に特異的に結合する標識タンパク質の使用。２．注入48時間以内に、循環血液中の標識タンパク質の50％以上が患者から消失するような請求項１に記載の使用。３．注入24時間以内に、循環血液中の標識タンパク質の50％以上が患者から消失するような請求項１に記載の使用。４．注入12時間以内に、循環血液中の標識タンパク質の50％以上が患者から消失するような請求項１に記載の使用。５．手技を受ける患者に有効量の上記薬剤を非経口的に注人し、注入後48時間以内に手技を実施し、到達した患者の体内を検出手段により標識抗体フラグメントの存在を検出するために近接してスキャンし、該標識抗体フラグメントの付着部位を、消失剤、コントラスト剤またはサブトラクション剤を用いることなく、検出手段によりそのような部位の標識抗体フラグメント濃度の上昇を検出することによって特定することから成る、手術中、血管内あるいは内視鏡手技中の腫瘍の近接検出および治療方法において使用する薬剤の調製における、腫瘍によって生産される、あるいはそれに関連する抗原に特異的に結合する標識抗体フラグメントの使用。６．注人24時間以内に手技を実施する請求項５に記載の使用。７．注入12時間以内に手技を実施する請求項５に記載の使用。８．注入６時間以内に手技を実施する請求項５に記載の使用。９．腫瘍によって生産される、あるいはそれに関連する抗原に特異的に結合する標識タンパク質を含む第一の組成物と、腫瘍によって生産される、あるいはそれに関連する抗原に特異的に結合する異なる標識物質により標識されたタンパク質を含む第二の組成物の使用であって、手技を受ける患者に、患者の循環血液中の第一組成物の非結合標識タンパク質が注入後48時間以内に少なくとも50％減少するような有効量の第一薬剤を非経口的に注入し、殆ど同時に前記患者に、患者の循環血液中の第二組成物の非結合標識タンパク質が注入後少なくとも48時間までは少なくとも50％は減少しないような有効量の第二薬剤を非経口的に注入し、異なる標識の存在を選択的に検出する近接検出手段を入手し、注入後の時間に基づき、第一組成物あるいは第二組成物のいずれの標識を検出するか選択し、到達した患者の休内を検出手段により近接でスキャンし、選択した標識の付着部位を、検出手段によりそのような部位の標識濃度の上昇を検出することによって特定することから成る、手術中、血管内あるいは内視鏡手技中の腫瘍の近接検出方法において使用する該第一および該第二の薬剤の調製における上記第一組成物および上記第二組成物の使用。１０．手技を受ける患者に有効量の薬剤を非経口的に注入し、到達した患者の体内を検出手段により標識タンパク質の存在を検出するためにスキャンし、検出手段によりそのような部位の標識物質濃度の上昇を検出することによって、放射性同位元素標識タンパク質の付着部位を特定することから成る、手術中、血管内あるいは内視鏡手技中の非悪性病理学的病変の近接検出方法において使用する薬剤の調製における、標識物質によって標識され、かつ、病変によって生産される、あるいはそれに関連する抗原に特異的に結合する標識タンパク質の使用。１１．手技を受ける患者に有効量の薬剤を非経口的に注入し、到達した患者の休内を検出手段により標識抗休フラグメントまたは抗休の存在を検出するために近接してスキャンし、検出手段によりそのような部位の標識物質濃度の上昇を検出することによって、放射性同位元素標識抗体フラグメントまたは放射性同位元素標識抗体の付着部位を特定することから成る、手術中、血管内あるいは内視鏡手技中の非悪性病理学的病変の近接検出方法において使用する薬剤の調製における、標識物質によって標識化され、かつ、病変によって生産される、あるいはそれに関連する抗原に特異的に結合する抗体フラグメントまたは抗体の使用。１２．上記手技が血管内手技である請求項１０または１１に記載の方法。１３．病変が梗塞、じゅく状動脈硬化性プラーク、血管内クロット、肺塞栓、または感染性／炎症性病変である請求項１０または１１に記載の方法。１４．手技を受ける患者に有効量の薬剤を非経口的に注入し、標識タンパク質を付着させ、血管内カテーテルによって供給される光源により標識を検出することから成る、血管内手技を用いる病変の検出方法の改善法において使用する薬剤の調製における、蛍光物質または色素によって標識された、病変に付着するタンパク質の使用。１５．レーザーまたは外科的手術により標識付着量が上昇した部位において病変を切除することを更に含む請求項１４に記載の使用。１６．電離放射線により標識付着量が上昇した部位において病変を治療することを更に含む請求項１４に記載の使用。１７．手技に内視鏡または血管内カテーテルを使用し、標識付着量が上昇した部位において内視鏡またはカテーテルを通して病変に近接照射療法を施すことを含む請求項１４に記載の使用。１８． (a) 手技を受ける患者に薬剤を注入し、 (b) 該薬剤を病変に付着させ、 (c) 血管内カテーテルによって供給される検出手段により該薬剤を検出し、 (d) 血管内カテーテルを通して施される近接照射療法により病変を治療することから成る、血管内カテーテルを用いる病変の検出および治療方法の改善法において使用する薬剤の調製における、検出および治療される病変に優先的に付着する検出可能な薬剤の使用。１９．近接照射療法をレーザー治療、光力学療法、放射線免疫療法または化学免疫療法と組み合わせた請求項１８に記載の使用。２０．上記薬剤を、ぺプチド、ポリペプチド、増殖因子、ホルモン、リンホカイン、サイトカイン、酵素、免疫モデュレーター、レセプタータンパク質、抗体または抗体フラグメントと結合させた請求項１８に記載の使用。２１． (a) 患者に薬剤を注入し、 (b) 該薬剤を病変に付着させ、 (c) 光源を用いて該薬剤を検出し、および活性化し (d) 同時に、放射線免疫療法または化学免疫療法により病変を治療することから成る、検出および治療方法の改善法において使用する薬剤の調製における、検出および治療される病変に優先的に付着する検出可能な光力学的薬剤の使用。２２．光力学薬剤を病変に優先的に付着するタンパク質に結合させた請求項２１に記載の使用。２３．手技を受ける患者に、抗体またはフラグメントが標的病変に優先的に付着する薬剤を非経口的に注入し、標識抗体またはフラグメントを付着させ、内視鏡または血管内カテーテルによって、または手術手技中に供給される光源により光活性物質を活性化することから成る、内視鏡、血管内カテーテル、あるいは外科的手術手技を用いる病変の治療方法の改善法において使用する薬剤の調製における、光活性物質によって標識された抗体または抗体フラグメントの使用。２４．検出される病変に優先的に付着し、フォトスキャニングまたは磁気共鳴画像装置によって検出可能な第一の薬剤により標識された抗体またはフラグメントを含む第一の組成物と、内視鏡、血管内カテーテル、または手持ち式検出手段により検出可能で、前記病変に優先的に付着する第二の薬剤を含み、該第二の薬剤が該第一の薬剤と同じか、あるいは異なる第二の組成物の使用であって、 (a) 手技を受ける患者に、第一の薬剤を注入し、 (b) 標識抗体またはフラグメントが病変に付着後、フォトスキャニングまたは磁気共鳴画像装置により該病変を画像化し、 (c) 第二の薬剤を注入し、該第二の薬剤を該病変に付着させ、 (d) 該病変の画像を利用し、内視鏡または血管内カテーテルを通して、あるいは外科的手術手技中に供給される近接検出手段により薬剤の検出を行う部位を決定することから成る、内視鏡、血管内カテーテルまたは外科的手術手技を受ける患者における病変の検出方法の改善法において使用する第一および第二の薬剤の調製における、上記第一組成物および上記第二組成物の使用。２５． (i) 第一および第二の薬剤を患者に非経口的に注入し、 (ii)手技中、検出装置により患者の体内に標識物質の存在を検出し、標的とならない特異タンパク質によるバックグラウンドの放射能の分布を測定するために使用される標識された特異的でないタンパク質の放射能濃度を使用し、これによって、実質的に標的となる病変に局在する特異タンパク質の活性だけを測定し、これによって病変の検出と、部位の特定を行うことから成る、内視鏡、血管内カテーテルまたは外科的手術手技を受ける患者における病変の検出方法の改善法において使用する第一および第二の薬剤の各々の調製における、検出装置によって検出可能な第一の標識物質により標識され、検出される病変に特異的なタンパク質を含む第一の組成物と、特異タンパク質を調製するのに使用されたタンパク質と同じ種または異なる種から得られた特異的でないタンパク質からなり、該特異でないタンパク質が、検出装置を使用して別に検出可能な第二の標識物質で標識されている、第二の組成物の使用であって、該標識された特異的なタンパク質と該標識された特異的でないタンパク質の患者の体内動態と分布が、検出所要時間中に実質的に同じであるように標識化が行われ、少なくとも１つの該標識物質が光活性色素であるような使用。２６． (a) 薬剤を患者に注入し、 (b) 活性化可能な薬剤を活性化し、検出可能な選択された薬剤を検出することから成る、病変の治療方法の改善法において使用する薬剤の調製における、活性化されてオージェ電子またはその他の電離放射線を放射することが可能な薬剤に結合させたタンパク質を含む組成物であって、場合によっては検出可能な薬剤を該タンパク質に結合させることも選択でき、かつタンパク質結合体が標的病変に優先的に付着するような組成物の使用。２７．活性化と選択された検出が、内視鏡、血管内カテーテルまたは外科的手技中に行われる請求項２６に記載の使用。２８．上記組成物が、ストレプトアビジン結合抗体またはアビジン結合抗体、アビジンおよびビオチンと組み合わせて使用するビオチニル化抗体、二価抗体、抗体−ハプテン複合体、または酵素結合抗体を含み、しかも抗体が標的病変に特異的に付着する抗体または抗体フラグメントであるような第一の組成物と、検出可能な薬剤と活性化されてオージェ電子またはその他の電離放射線を放射できる薬剤を有する結合体から成る第二の組成物とを含み、該第一の組成物は、該第一の組成物の前に投与され、該第二の組成物は、その場で該第一の組成物と結合する、請求項２６に記載の使用。２９．上記第一の組成物がビオチニル化抗体またはフラグメントから成り、上記第二の組成物が、活性化により電離放射線を放射できる安定した元素と結合させたビオチンを含み、上記第一の組成物が標的病変に付着後、かつ上記第二の組成物の注入前に、循環血液中のビオチニル化抗体またはフラグメントを消失させるための薬剤を含む消失用組成物を患者に注入する請求項２８に記載の使用。３０．上記活性化可能な薬剤が、活性化されてオージェ電子を放射できる安定した物質である請求項２６に記載の使用。３１．上記活性化可能な薬剤がハロゲン化化合物である請求項３０に記載の使用。３２．上記活性化可能な薬剤がハロゲン化ピリミジンである請求項３１に記載の使用。３３．上記活性化可能な薬剤が、活性化されて電離放射線を放射できる安定した物質である請求項２６に記載の使用。３４．上記安定した物質が、ヨウ素またはインジウムである請求項３３に記載の使用。３５．上記活性化エネルギーが単色Ｘ線である請求項２６、３０、または３３のいずれかに記載の使用。３６． 20〜70keVのエネルギーで単色Ｘ線が放射する請求項３５に記載の使用。３７． 30〜40keVのエネルギーで単色Ｘ線が放射する請求項３６に記載の使用。３８．上記標識が放射性同位元素である請求項１、５、１０または１１のいずれかに記載の使用。３９．上記放射性同位元素が、20〜1,000keVのエネルギーで放射する請求項３８に記載の使用。４０．上記放射性同位元素が、テクネチウム−99m、ヨウ素−125、ヨウ素− 131、ヨウ素−123、インジウム−111、およびガリウム−67からなる群から選択される請求項３８に記載の使用。４１．上記標識が非同位体である請求項１、５、１０または１１のいずれかに記載の使用。４２．上記非同位体が光活性物質である請求項４１に記載の使用。４３．上記光活性物質が蛍光物質である請求項４２に記載の使用。４４．上記方法が更に手技中の検出部位の治療を含む請求項１、５、９、１０、１１または２４のいずれかに記載の使用。４５．上記治療が、近接照射療法、体外光線照射、レーザー治療または外科的切除により実行される請求項４４に記載の使用。４６．ストレプトアビジン結合タンパク質またはアビジン結合タンパク質、アビジンおよびビオチンと組み合わせて使用するビオチニル化タンパク質、二価タンパク質、タンパク質−ハプテン複合体、または酵素結合タンパク質を含み、しかもタンパク質が標的病変に特異的に付着する第一の組成物を患者に注入し、前記第一の組成物が標的病変に付着後、検出可能な標識物質を含み、第一の組成物と結合する第二の組成物を患者に注入する請求項１、１０、１８または２２のいずれかに記載の使用。４７．上記第一の組成物がビオチニル化タンパク質を含み、上記第二の組成物が標識物質と結合させたビオチンを含み、上記第一の薬剤が標的病変に付着後、かつ上記第二の組成物の注入前に、循環血液中のビオチニル化タンパク質を消失させるための薬剤を含む消失用組成物を患者に注入する請求項４６に記載の使用。４８．上記タンパク質がペプチド、ポリペプチド、増殖因子、ホルモン、リンホカイン、酵素、免疫モジュレーター、レセプタタンパク質、サイトカイン、抗体または抗体フラグメントである請求項１、１０、１４、２２または２６のいずれかに記載の使用。４９．上記抗体フラグメントがモノクローナル抗体フラグメントである請求項２０または４５のいずれかに記載の使用。５０．上記抗体フラグメントが、Fv、単鎖抗体、Fab、Fab'、F(ab)₂またはF (ab')₂フラグメントである請求項４９に記載の使用。５１．上記抗体フラグメントが、Fv、単鎖抗体、Fab、Fab'、F(ab)₂またはF (ab')₂フラグメントあるいは非ヒト抗体の抗体結合領域を含むヒト化された抗体である請求項２４に記載の使用。５２．ストレプトアビジン結合抗体フラグメントまたはアビジン結合抗体フラグメント、アビジンおよびビオチンと組み合わせて使用するビオチニル化抗体フラグメント、二価抗体フラグメント、抗体フラグメントーハプテン複合体、または酵素−結合抗体フラグメントを含み、しかも抗体フラグメントが標的病変に特異的に付着する抗体フラグメントを含む第一の組成物を患者に注入し、上記第一の組成物が標的病変に付着後、検出可能な標識物質を含み、第一の組成物と結合する第二の組成物を患者に注入する請求項５、１１または２３のいずれかに記載の使用。５３．上記第一の組成物がビオチニル化抗体フラグメントを含み、上記第二の組成物が標識物質と結合させたビオチンから成り、上記第一の薬剤が標的病変に付着後、かつ上記第二の組成物の注人前に、循環血液中のビオチニル化抗体フラグメントを消失させるための薬剤を含む消失用組成物を患者に注入する請求項５２に記載の使用。５４．病変が癌、感染性または炎症性病変、クロット、肥厚またはじゅく状動脈硬化性プラークである請求項１５、１８、２１、２３、または２６のいずれかに記載の方法。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号庁内整理番号ＦＩＡ６１Ｋ 38/00 ＡＤＵ 38/22 ＡＢＲＡＤＺ 38/43 ＡＢＥＡＢＸ 39/395 Ｃ 9284−4ＣＬ 9284−4Ｃ 45/00 8415−4Ｃ 9455−4ＣＡ６１Ｋ 37/24 ＡＢＲ 9455−4Ｃ 37/48 ＡＢＸ 37/02 ＡＣＢ 37/24 ＡＤＺ 37/48 ＡＢＥ

Claims

【特許請求の範囲】１．手技を受ける患者に有効量の薬剤を非経口的に注入し、手技を実施し、到達した患者の体内を検出手段により標識タンパク質の存在を検出するために近接してスキャンし、検出手段によりそのような部位の標識濃度の上昇を検出することによって、該標識タンパク質の付着部位を特定することから成る、手術中、血管内あるいは内視鏡手技中の腫瘍の近接検出および治療方法において使用する薬剤の調製における、ペプチド、ポリペプチド、増殖因子、酵素、免疫モジュレーター、レセプタータンパク質、リンホカイン、サイトカインまたはホルモンである、標的腫瘍によって生産される、またはそれに関連する物質に特異的に結合する標識タンパク質の使用。２．注入48時間以内に、循環血液中の標識タンパク質の50％以上が患者から消失するような請求項１に記載の使用。３．注入24時間以内に、循環血液中の標識タンパク質の50％以上が患者から消失するような請求項１に記載の使用。４．注入12時間以内に、循環血液中の標識タンパク質の50％以上が患者から消失するような請求項１に記載の使用。５．手技を受ける患者に有効量の上記薬剤を非経口的に注入し、注入後48時間以内に手技を実施し、到達した患者の体内を検出手段により標識抗体フラグメントの存在を検出するために近接してスキャンし、該標識抗体フラグメントの付着部位を、検出手段によりそのような部位の標識抗体フラグメント濃度の上昇を検出することによって特定することから成る、手術中、血管内あるいは内視鏡手技中の腫瘍の近接検出および治療方法において使用する薬剤の調製における、腫瘍によって生産される、あるいはそれに関連する抗原に特異的に結合する標識抗体フラグメントの使用。６．注入24時間以内に手技を実施する請求項５に記載の使用。７．注入12時間以内に手技を実施する請求項５に記載の使用。８．注入６時間以内に手技を実施する請求項５に記載の使用。９．手技を受ける患者に、患者の循環血液中の第一組成物の非結合標識タンパク質が注入後48時間以内に少なくとも50％減少するような有効量の第一薬剤を非経口的に注入し、殆ど同時に前記患者に、患者の循環血液中の第二組成物の非結合標識タンパク質が注入後少なくとも48時間までは少なくとも50％は減少しないような有効量の第二薬剤を非経口的に注入し、異なる標識の存在を選択的に検出する近接検出手段を入手し、注入後の時間に基づき、第一組成物あるいは第二組成物のいずれの標識を検出するか選択し、到達した患者の体内を検出手段により近接でスキャンし、選択した標識の付着部位を、検出手段によりそのような部位の標識濃度の上昇を検出することによって特定することから成る、手術中、血管内あるいは内視鏡手技中の腫瘍の近接検出方法において使用する該第一および該第二の薬剤の調製における、上記腫瘍によって生産される、あるいはそれに関連する抗原に特異的に結合する標識タンパク質から成る上記第一の組成物と前記腫瘍によって生産される、あるいはそれに関連する抗原に特異的に結合する異なる標識物質により標識されたタンパク質から成る上記第二の組成物の使用。１０．手技を受ける患者に有効量の薬剤を非経口的に注入し、到達した患者の体内を検出手段により標識タンパク質の存在を検出するためにスキャンし、検出手段によりそのような部位の標識物質濃度の上昇を検出することによって、放射性同位元素標識タンパク質の付着部位を特定することから成る、手術中、血管内あるいは内視鏡手技中の非悪性病理学的病変の近接検出方法において使用する薬剤の調製における、標識物質によって標識され、かつ、病変によって生産される、あるいはそれに関連する抗原に特異的に結合する標識タンパク質の使用。１１．手技を受ける患者に有効量の薬剤を非経口的に注入し、到達した患者の体内を検出手段により標識抗体フラグメントまたは抗体の存在を検出するために近接してスキャンし、検出手段によりそのような部位の標識物質濃度の上昇を検出することによって、放射性同位元素標識抗体フラグメントまたは放射性同位元素標識抗体の付着部位を特定することから成る、手術中、血管内あるいは内視鏡手技中の非悪性病理学的病変の近接検出方法において使用する薬剤の調製における、標識物質によって標識化され、かつ、病変によって生産される、あるいはそれに関連する抗原に特異的に結合する抗体フラグメントまたは抗体の使用。１２．上記手技が血管内手技である請求項１０または１１に記載の方法。１３．病変が梗塞、じゅく状動脈硬化性プラーク、血管内クロット、肺塞栓、または感染性／炎症性病変である請求項１０または１１に記載の方法。１４．手技を受ける患者に有効量の薬剤を非経口的に注入し、標識タンパク質を付着させ、内視鏡または血管内カテーテルによって、または手術手技中に供給される光源により標識を検出することから成る、内視鏡、血管内カテーテル、あるいは外科的手術手技を用いる病変の検出方法の改善法において使用する薬剤の調製における、蛍光物質または色素によって標識された、病変に付着するタンパク質の使用。１５．レーザーまたは外科的手術により標識付着量が上昇した部位において病変を切除することを更に含む請求項１４に記載の使用。１６．電離放射線により標識付着量が上昇した部位において病変を治療することを更に含む請求項１４に記載の使用。１７．手技に内視鏡または血管内カテーテルを使用し、標識付着量が上昇した部位において内視鏡またはカテーテルを通して病変に近接照射療法を施すことを含む請求項１４に記載の使用。１８． (a)手技を受ける患者に薬剤を注入し、 (b)該薬剤を病変に付着させ、 (c)内視鏡または血管内カテーテルによって供給される検出手段により該薬剤を検出し、 (d)内視鏡またはカテーテルを通して施される近接照射療法により病変を治療することから成る、内視鏡または血管内カテーテルを用いる病変の検出および治療方法の改善法において使用する薬剤の調製における、検出および治療される病変に優先的に付着する検出可能な薬剤の使用。１９．近接照射療法をレーザー治療、光力学療法、放射線免疫療法または化学免疫療法と組み合わせた請求項１８に記載の使用。２０．上記薬剤を、ペプチド、ポリペプチド、増殖因子、ホルモン、リンホカイン、サイトカイン、酵素、免疫モデュレーター、レセプタータンパク質、抗体または抗体フラグメントと結合させた請求項１８に記載の使用。２１． (a)患者に薬剤を注入し、 (b)該薬剤を病変に付着させ、 (c)光源を用いて該薬剤を検出し、および活性化し (d)同時に、放射線免疫療法または化学免疫療法により病変を治療することから成る、検出および治療方法の改善法において使用する薬剤の調製における、検出および治療される病変に優先的に付着する検出可能な光力学的薬剤の使用。２２．光力学薬剤を病変に優先的に付着するタンパク質に結合させた請求項２１に記載の使用。２３．手技を受ける患者に、抗体またはフラグメントが標的病変に優先的に付着する薬剤を非経口的に注入し、標識抗体またはフラグメントを付着させ、内視鏡または血管内カテーテルによって、または手術手技中に供給される光源により光活性物質を活性化することから成る、内視鏡、血管内カテーテル、あるいは外科的手術手技を用いる病変の治療方法の改善法において使用する薬剤の調製における、光活性物質によって標識された抗体または抗体フラグメントの使用。２４． (a)手技を受ける患者に、第一薬剤を注入し、 (b)標識抗体またはフラグメントが病変に付着後、フォトスキャニングまたは磁気共鳴画像装置により該病変を画像化し、 (c)第二薬剤を注入し、該第二薬剤を該病変に付着させ、 (d)該病変の画像を利用し、内視鏡または血管内カテーテルを通して、あるいは外科的手術手技中に供給される近接検出手段により薬剤の検出を行う部位を決定することから成る、内視鏡、血管内カテーテルまたは外科的手術手技を受ける患者における病変の検出方法の改善法において使用する第一および第二の薬剤の調製における、検出される病変に優先的に付着し、フォトスキャニングまたは磁気共鳴画像装置によって検出可能な薬剤により標識された抗体またはフラグメントから成る第一の組成物と内視鏡、血管内カテーテル、または手持ち式検出手段により検出可能で、前記病変に優先的に付着する薬剤から成り、前記第二の組成物の薬剤が前記第一組成物の薬剤と同じか、あるいは異なる第二の組成物の使用。２５． (i)標識された特異的なタンパク質と標識された特異的でないタンパク質の患者の体内動態と分布が、検出所要時間中に実質的に同じであるように標識化が行われ、少なくとも１つの標識物質が光活性色素であるような条件で、薬剤と、検出装置を使用して別に検出可能な第二の標識物質で標識されており、かつ特異タンパク質を調製するのに使用されたタンパク質と同じ種または異なる種から得られた特異的でないタンパク質を、患者に非経口的に注入し、 (ii)手技中、検出装置により患者の体内に標識物質の存在を検出し、標的とならない特異タンパク質によるバックグラウンドの放射能の分布を測定するために使用される標識された特異的でないタンパク質の放射能濃度を使用し、これによって、実質的に標的となる病変に局在する特異タンパク質の活性だけを測定し、これによって病変の検出と、部位の特定を行うことから成る、内視鏡、血管内カテーテルまたは外科的手術手技を受ける患者における病変の検出方法の改善法において使用する薬剤の調製における、検出装置によって検出可能な第一の標識物質により標識され、検出される病変に特異的なタンパク質の使用。２６． (a)薬剤を患者に注入し、 (b)活性化可能な薬剤を活性化し、検出可能な選択された薬剤を検出することから成る、病変の治療方法の改善法において使用する薬剤の調製における、活性化されてオージェ電子またはその他の電離放射線を放射することが可能な薬剤に結合させたタンパク質から成る組成物であって、場合によっては検出可能な薬剤を該タンパク質に結合させることも選択でき、かつタンパク質結合体が標的病変に優先的に付着するような組成物の使用。２７．活性化と選択された検出が、内視鏡、血管内カテーテルまたは外科的手技中に行われる請求項２６に記載の使用。２８． (a)ストレプトアビジン−またはアビジン−結合抗体、アビジンおよびビオチンと組み合わせて使用するビオチニル化抗体、二価抗体、抗体−ハプテン複合体、または酵素−結合抗体から成り、しかも抗体が標的病変に特異的に付着する抗体または抗体フラグメントであるような第一の組成物を患者に注入し、 (b)該第一の組成物が標的病変に付着後、検出可能な薬剤と活性化されてオージェ電子またはその他の電離放射線を放射できる薬剤から成り、該２つの薬剤が、上記第一の組成物と結合する、第二の組成物を注入する請求項２６に記載の使用。２９．上記第一の組成物がビオチニル化抗体またはフラグメントから成り、上記第二の組成物が、活性化により電離放射線を放射できる安定した元素と結合させたビオチンから成り、上記第一の薬剤が標的病変に付着後、かつ上記第二の組成物の注入前に、循環血液中ビオチニル化抗体またはフラグメントを消失させるための薬剤から成る消失用組成物を患者に注入する請求項２８に記載の使用。３０．上記活性化可能な薬剤が、活性化されてオージェ電子を放射できる安定した物質である請求項２６に記載の使用。３１．上記活性化可能な薬剤がハロゲン化化合物である請求項３０に記載の使用。３２．上記活性化可能な薬剤がハロゲン化ピリミジンである請求項３１に記載の使用。３３．上記活性化可能な薬剤が、活性化されて電離放射線を放射できる安定した物質である請求項２６に記載の使用。３４．上記安定した物質が、ヨウ素またはインジウムである請求項３３に記載の使用。３５．上記活性化エネルギーが単色Ｘ線である請求項２６、３０、または３３のいずれかに記載の使用。３６． 20〜70keVのエネルギーで単色Ｘ線が放射する請求項３５に記載の使用。３７． 30〜40keVのエネルギーで単色Ｘ線が放射する請求項３６に記載の使用。３８．上記標識が放射性同位元素である請求項１、５、１０または１１のいずれかに記載の使用。３９．上記放射性同位元素が、20〜l,000keVのエネルギーで放射する請求項３８に記載の使用。４０．上記放射性同位元素が、テクネチウム−99m、ヨウ素−125、ヨウ素− 13l、ヨウ素−123、インジウム−111、およびガリウム−67からなる群から選択される請求項３８に記載の使用。４１．上記標識が非同位体である請求項１、５、１０または１１のいずれかに記載の使用。４２．上記非同位体が光活性物質である請求項４１に記載の使用。４３．上記光活性物質が蛍光物質である請求項４２に記載の使用。４４．上記方法が更に手技中の検出部位の治療を含む請求項１、５、９、１０、１１または２４のいずれかに記載の使用。４５．上記治療が、近接照射療法、体外光線照射、レーザー治療または外科的切除により実行される請求項４４に記載の使用。４６．ストレプトアビジンーまたはアビジン−結合タンパク質、アビジンおよびビオチンと組み合わせて使用するビオチニル化タンパク質、二価タンパク質、タンパク質−ハプテン複合体、または酵素−結合タンパク質から成り、しかもタンパク質が標的病変に特異的に付着する第一の組成物を患者に注入し、前記第一の組成物が標的病変に付着後、検出可能な標識物質を含み、第一の組成物と結合する第二の組成物を患者に注入する請求項１、１０、１８または２２のいずれかに記載の使用。４７．上記第一の組成物がビオチニル化タンパク質から成り、上記第二の組成物が標識物質と結合させたビオチンから成り、上記第一の薬剤が標的病変に付着後、かつ上記第二の組成物の注入前に、循環血液中ビオチニル化タンパク質を消失させるための薬剤から成る消失用組成物を患者に注入する請求項４６に記載の使用。４８．上記タンパク質がペプチド、ポリペプチド、増殖因子、ホルモン、リンホカイン、酵素、免疫モジュレーター、レセプタタンパク質、サイトカイン、抗体または抗体フラグメントである請求項１、１０、１４、２２または２６のいずれかに記載の使用。４９．上記抗体フラグメントがモノクローナル抗体フラグメントである請求項２０または４５のいずれかに記載の使用。５０．上記抗体フラグメントが、Fv、単鎖抗体、Fab、 Fab'、F(ab)₂またはF (ab')2フラグメントである請求項４９に記載の使用。５１．上記抗体フラグメントが、Fv、単鎖抗体、Fab、 Fab'、F(ab)₂またはF(a b')₂フラグメントあるいは非ヒト抗体の結合領域を含むヒト化された抗体である請求項２４に記載の使用。５２．ストレプトアビジン−またはアビジン−結合抗体フラグメント、アビジンおよびビオチンと組み合わせて使用するビオチニル化抗体フラグメント、二価抗体フラグメント、抗体フラグメント−ハプテン複合体、または酵素−結合抗体フラグメントから成り、しかも抗体フラグメントが標的病変に特異的に付着する抗体フラグメントから成る第一の組成物を患者に注入し、上記第一の組成物が標的病変に付着後、検出可能な標識物質を含み、第一の組成物と結合する第二の組成物を患者に注入する請求項５、１１または２３のいずれかに記載の使用。５３．上記第一の組成物がビオチニル化抗体フラグメントから成り、上記第二の組成物が標識物質と結合させたビオチンから成り、上記第一の薬剤が標的病変に付着後、かつ上記第二の組成物の注入前に、循環血液中ビオチニル化抗体フラグメントを消失させるための薬剤から成る消失用組成物を患者に注入する請求項５２に記載の使用。５４．病変が癌、感染性または炎症性病変、クロット、肥厚またはじゅく状動脈硬化性プラークである請求項１５、１８、２１、２３、または２６のいずれかに記載の方法。５５．術中、血管内または内視鏡手技において使用するのに適したキットであって、標識物質と結合させることが可能な抗体フラグメントから成るヒト用滅菌済注入可能製剤を含む第一のバイアルと第一のバイアルの標識物質と異なる標識物質と結合させることが可能な完全な抗体から成るヒト用滅菌済注入可能製剤を含む第二のバイアルから成るキット。５６．術中、血管内または内視鏡手技において使用するのに適したキットであって、標識抗体フラグメントと薬剤学的に許容できる担体から成るヒト用滅菌済注入可能製剤を含む第一のバイアルと第一のバイアルの標識物質と異なる標識物質により標識された完全な抗体と薬剤学的に許容できる担体から成るヒト用滅菌済注入可能製剤を含む第二のバイアルから成るキット。５７．光活性物質と結合させた抗体フラグメント。５８．フラグメントがFv、単鎖抗体、Fab、Fab'、F(ab)₂またはF(ab')₂フラグメントである請求項５７に記載のフラグメント。５９．(a)光活性物質と結合させた抗体フラグメントと (b)薬剤学的に許容できる注入用賦形剤から成る注入可能な組成物。６０．(a)病変によって生産された、あるいは病変に関連するマーカーに対する特異的免疫反応性が少なくとも70％であり、かつ、非病変関連抗原に対する交差反応性が２５％未満である単一特異抗体であり、タンパク質が検出装置により検出可能な標識物質で標識されており、該標識化が、抗体の特異的免疫反応性を５〜33％低下させることができるように実施された単一特異抗体、 (b)前記特異抗体を調製するために使用されたものと同じ、あるいは異なる種由来の特異的でないタンパク質であり、検出装置により別に検出可能な標識物質により標識されている特異的でないタンパク質、および (c)薬剤学的に許容可能な注入用賦形剤であり、標識物質の少なくとも１つが光活性色素である注入用賦形剤から成る注入可能な組成物。