JPH08504822A - スルフヒドリル反応性化合物を用いた毛成長の減少 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 スルフヒドリル反応性化合物を含有した組成物を皮膚に局所適用することを含む、哺乳動物毛成長の速度を減少させる方法。

Description

【発明の詳細な説明】 スルフヒドリル反応性化合物を用いた毛成長の減少 毛成長の減少 本発明は哺乳動物で毛成長を減少させることに関する。 毛タンパク質は、チオール（-ＳＨ）基を有するアミノ酸システインをかなり 多量に含んでいる。毛にその強度及び特徴を与えているのは、シスチンを形成す る、毛タンパク質中のシステイン残基間のジスルフィド結合の形成である。 例えば足から毛を除くために脱毛組成物を用いることは当業界で公知である。 このような組成物は、皮膚に適用されたとき、一部は毛でジスルフィド結合を破 壊することにより毛を消化している。このような組成物は、典型的には消化プロ セスを助けるチオグリコール酸カルシウムのような化学剤を含有している。 我々は哺乳動物（ヒトを含む）毛成長の速度がスルフヒドリル活性化合物含有 の非脱毛組成物を皮膚に適用することにより減少させうることを発見した。本明 細書で用いられるスルフヒドリル活性化合物とは、遊離-ＳＨ基を有する化合物 、遊離-ＳＨ基を有しないチオール類と、細胞で遊離-ＳＨ基のある分子に変換さ れうるチオール類又はジスルフィド類である。本明細書で用いられ る非脱毛組成物とは、１回の局所適用後に毛除去及び／又は分解を起こさない組 成物である。 いかなる理論にも拘束されないならば、スルフヒドリル活性化合物は少くとも 一部は１以上の下記メカニズムで毛成長を減少させると考えられる。毛成長時に 、システインがタンパク質鎖中に組み込まれる。タンパク質鎖中のシステイン残 基の-ＳＨ基はジスルフィド結合（及びシスチン）を形成し、正常毛成長の一部 としてタンパク質鎖を一緒に結合させる。スルフヒドリル活性化合物は局所適用 されると毛包に浸透し、（１）遊離システインと反応して混合システイン-スル フヒドリル活性化合物ジスルフィド結合を形成し、毛タンパク質に存在するジス ルフィド結合中への組込みに利用できるシステインが少くなる；（２）毛タンパ ク質中のシスチンでジスルフィド結合を減少させ、同時に混合システイン-スル フヒドリル活性化合物ジスルフィド結合を形成し；（３）混合ジスルフィド結合 の同時形成なしにシスチンでジスルフィド結合を減少させることにより、毛成長 を妨げる。 遊離-ＳＨ基を有する好ましいスルフヒドリル活性化合物にはチオサリチル酸 、Ｄ-システイン、２-メルカプトエチルアミン（システアミン）、カプトプリル 、Ｎ-アセチル-Ｌ-システイン、システイニルグリシン、２，３-ジメルカプト- １-プロパンスルホン酸、メソ-２，３-ジメルカプトコハク酸、ジメチルシステ アミ ン、ジエチルジチオカルバミン酸、Ｄ-ペニシラミン、Ｌ-システインメチルエス テル及びＬ-システインエチルエステルがある。 遊離-ＳＨ基を有しない好ましいスルフヒドリル活性化合物には３，３′-チオ ジプロピオン酸、イセチオン酸、３-カルボキシプロピルジスルフィド、３，３ ′-チオジプロピオン酸ジラウリルエステル、スルフアサラジン、３-（メチルチ オ）プロピルアミン、５′-デオキシ-５′-メチルチオアデノシン、アリルスル フィド、ＤＬ-α-リポ酸（還元型）及びＤＬ-メチオニン-Ｓ-メチルスルホニウ ムクロリドがある。 細胞で遊離チオール類に変換される好ましいスルフヒドリル活性化合物には、 細胞でシステアミンに脱リン酸化されるホスホシステアミン；細胞で遊離ペニシ ラミンに還元されるペニシラミンジスルフィド；細胞でシステアミン及びセリン （不活性）に加水分解されるＳ-２-アミノエチル-Ｌ-システインがある。 スルフヒドリル活性化合物は高すぎる分子量（約１０００ドルトン以上）でな いか、又は高荷電リン酸基を有しないか、あるいは皮膚に適切に浸透しない化合 物ではない。 組成物は、スルフヒドリル活性化合物に加えて、皮膚上に広げられるように適 合される無毒性の皮膚科学上許容されるビヒクル又はキャリアを含有している。 化合物 の濃度は飽和溶液まで広範囲に変えることができ、好ましくは１〜２０重量％で ある。毛成長の減少は、適用されるスルフヒドリル活性化合物の量が皮膚の単位 面積当たりで増加するに従い増す；有効に適用できる最大量は、化合物が皮膚に 浸透する速度だけで主に制限される。通常、有効量は皮膚cm²当たり１００〜２ ０００μｇ又はそれ以上の範囲である。 下記具体例は本発明の性質をもっと明確に説明するためであり、その範囲の制 限として作用するものではない。 スルフヒドリル活性化合物を含有した組成物により示される毛成長の阻害は、 Shanderらの米国特許第５，１３２，２９３号、Ahluwaliaの米国特許第５，０９ ５，００７号及びAhluwaliaらの米国特許第５，０９６，９１１号明細書で記載 されたゴールデン・シリアン（Golden Syrian）ハムスタープロトコールに従い 調べた。４群（各群動物８匹）の雄性無処置ゴールデン・シリアンハムスターを 用意した。これらの動物はそれらが各側に１つずつ各々長径約８mmの卵形側腹器 官を示し、ヒトあごひげに似た濃い黒色で粗い毛を生やすという点でヒトあごひ げ成長に関して許容されるモデルと考えられた。これらの器官はハムスターにお いてアンドロゲンに応答して毛を生やす。各ハムスターの側腹器官はチオグリコ ール酸ベース化学脱毛剤〔サージェックス（Surgex）〕を適用することにより脱 毛し、各動物の一方の器官には１ 日１回ビヒクル単独１０〜２５mgを適用し、各動物の他方の器官には等量の阻害 剤含有ビヒクルを適用した。このような適用（１週間に５日）の３週間後に側腹 器官を剃毛し、各々から再生した毛の量（毛質量）を秤量した。毛成長の減少度 は、ビヒクル単独で処理された器官と比較して、阻害剤で処理された器官におけ る毛質量の減少率として表示した。コントロールとして、１群の動物８匹では各 動物の側腹器官を双方ともビヒクル単独で処理した。結果は下記表１で示された とおりであった。 好ましい組成物は、上記操作に従い試験されたとき、少くとも３０％、更に好 ましくは少くとも５０％の毛成長の減少を示した組成物である。 一部のスルフヒドリル反応性化合物の下記生化学的性質：（１）化合物による 毛幹システインの減少率；（２）インビトロでシステイン-混合ジスルフィドを 形成する化合物の能力；（３）毛幹でシステイン-混合ジスルフィドを形成する 化合物の能力；（４）シスチンを減少させる化合物の能力について試験した。 スルフヒドリル反応性化合物による毛幹システインの減少率は、下記操作に従 い測定した。ハムスター側腹器官毛のアミノ酸分析は、市販アミノ酸分析システ ム〔ピコ-タッグ（Pico-Tag）システム；ＭＡ、ミルフォードのウォーターズ・ アソシエーツ社（Waters Associates,Inc.）から市販〕を用いて行った。毛を十 分に洗浄し、その後１１５℃で一夜ＨＣｌ蒸気により加水分解した。加水分解さ れた毛（遊離アミノ酸）をフェニルイソチオシアネートで誘導して、各アミノ酸 のフェニルチオヒダントイン誘導体を得、次いでこれをＣ-１８逆相クロマトグ ラフィー（ＨＰＬＣ）により分離し、インラインＵＶスペクトロフォトメーター で定量した。スルフヒドリル活性化合物の一部による毛幹中システインレベルの 減少は、少くとも一部においてこれらの化合物による毛成長の減少に関与してい ると考えられる。 毛幹でシステイン-混合ジスルフィドを形成するスルフヒドリル反応性化合物 の能力は、下記操作に従い調べた。ゴールデン・シリアンハムスター８匹の群を 、一方の側腹器官（処置部位）ではスルフヒドリル活性化合物、他方の側腹器官 （コントロール部位）ではスルフヒドリル活性化合物なしにキャリアビヒクルで 局所処置した。キャリアビヒクルは表１で得られた結果と同様であった。１３日 間の処置（月〜金曜、１８日間にわたる）後、処置側腹器官から毛幹を集め、シ ステイン-混合ジスルフィドの存在について分析した。毛幹でシステイン-混合ジ スルフィドを形成する一部のスルフヒドリル反応性化合物の能力は、毛幹タンパ ク質が最終翻訳後成熟（ジスルフィド形成）をうけないことから、少くとも一部 においてこれらの化合物による毛成長の減少に関与していると考えられる。 インビトロでシステイン-混合ジスルフィドを形成するスルフヒドリル反応性 化合物の能力は、生理学的条件下（即ち、ｐＨ７．４及び３７℃の温度）で試験 管中スルフヒドリル反応性化合物をシスチン又はシステインと共にインキュベー トすることにより調べた。これら化合物とシステイン又はシスチンとの反応はＨ ＰＬＣ分析により評価した。インビトロでシステイン-混合ジスルフィドを形成 するスルフヒドリル反応性化合物の能力は、その化合物が皮膚に局所適用された とき毛幹のタンパク 質中へのシステイン組込み前に毛包球中に存在する遊離システインとシステイン -混合ジスルフィドを形成できることを示していると考えられる。 シスチンを減少させるスルフヒドリル反応性化合物の能力は、温度及びｐＨの 生理学的条件下（３７℃、ｐＨ７．４）で各スルフヒドリル化合物をシスチンと 共にインキュベートすることにより調べた。インキュベート後、サンプルを誘導 し、前記のようにＨＰＬＣで分析した。システアミン、ホスホシステアミン及び ジメチルシステアミンについて、サンプルを、アミノ酸分析で用いられたＵＶ検 出器の代わりに電気化学検出器を用いて、誘導せずに分析した。化合物によるシ スチン減少の測定は、インキュベート混合物中システイン（遊離チオール）の生 成に基づいていた。毛タンパク質中シスチンでジスルフィド結合を減少させて、 毛成長を減少させていると考えられる。 これら性質の試験の結果は表２で記録されている。 他の態様も請求の範囲内にある。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ Ａ６１Ｋ 31/44 9454−4Ｃ 31/60 9454−4Ｃ 31/655 9454−4Ｃ 31/66 9454−4Ｃ 31/70 9454−4Ｃ // Ｃ０７Ｄ 207/16 339/04 9455−4Ｃ (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ， ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，Ｍ Ｃ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ， ＴＤ，ＴＧ)，ＡＴ，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ， ＣＡ，ＣＨ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，Ｈ Ｕ，ＪＰ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＧ ，ＭＮ，ＭＷ，ＮＬ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ， ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＫ，ＵＡ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ (72)発明者 マークス‐デル グロッソ，ダイアナ アメリカ合衆国メリーランド州、ケンジン トン、ウェスト、ブルック、レーン、4513

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １． 有効量のスルフヒドリル活性化合物を含有した非脱毛組成物を皮膚に適 用することからなる哺乳動物毛成長の速度の減少方法であって、 上記化合物が上記皮膚からの毛成長の速度を減少させる方法。 ２． 適用後に化合物が皮膚の毛包中に浸透し、毛包細胞で遊離システインと 反応してシステイン-混合ジスルフィドを形成する、請求項１に記載の方法。 ３． スルフヒドリル活性化合物が適用後に皮膚でプレケタナイズされた毛幹 中に浸透して、毛タンパク質中シスチンでジスルフィド結合を減少させる、請求 項１に記載の方法。 ４． スルフヒドリル活性化合物が毛幹タンパク質でシステイン部分の１つと 混合ジスルフィド結合も形成する、請求項３に記載の方法。 ５． スルフヒドリル活性化合物がシステアミンである、請求項１に記載の方 法。 ６． スルフヒドリル活性化合物がＤ-ペニシラミンである、請求項１に記載 の方法。 ７． スルフヒドリル活性化合物がジメチルシステアミンである、請求項１に 記載の方法。 ８． スルフヒドリル活性化合物がホスホシステアミ ンである、請求項１に記載の方法。 ９． スルフヒドリル活性化合物がカプトプリルである、請求項１に記載の方 法。 １０． スルフヒドリル活性化合物がメソ-ジメルカプトコハク酸である、請 求項１に記載の方法。 １１． スルフヒドリル活性化合物がジエチルジチオカルバミン酸である、請 求項１に記載の方法。 １２． スルフヒドリル活性化合物がシステイニル-グリシンである、請求項 １に記載の方法。 １３． スルフヒドリル活性化合物がＤ-システインである、請求項１に記載 の方法。 １４． スルフヒドリル活性化合物がＮ-アセチルシステインである、請求項 １に記載の方法。 １５． スルフヒドリル活性化合物がチオサリチル酸である、請求項１に記載 の方法。 １６． スルフヒドリル活性化合物がリポ酸である、請求項１に記載の方法。 １７． スルフヒドリル活性化合物が５′-デオキシ-５′-メチルチオアデノ シンである、請求項１に記載の方法。 １８． スルフヒドリル活性化合物がＬ-システインメチルエステルである、 請求項１に記載の方法。 １９． スルフヒドリル活性化合物がスルファサラジンである、請求項１に記 載の方法。 ２０． スルフヒドリル活性化合物がＬ-システインエチルエステルである、 請求項１に記載の方法。 ２１． スルフヒドリル活性化合物が３-カルボキシプロピルジスルフィドで ある、請求項１に記載の方法。 ２２． スルフヒドリル活性化合物が顔に適用される、請求項１に記載の方法 。 ２３． スルフヒドリル活性化合物が遊離-ＳＨ基を有している、請求項１に 記載の方法。 ２４． スルフヒドリル活性化合物が遊離-ＳＨ基を有しないチオールである 、請求項１に記載の方法。 ２５． スルフヒドリル活性化合物が細胞で遊離-ＳＨ基のある分子に変換 されうるチオール又はジスルフィドである、請求項１に記載の方法。 ２６． 組成物がゴールデン・シリアンハムスタープロトコールに従い試験し たとき少くとも３０％毛成長を減少させる、請求項１に記載の方法。 ２７． 組成物がゴールデン・シリアンハムスタープロトコールに従い試験し たとき少くとも５０％毛成長を減少させる、請求項１に記載の方法。